專利名稱：淋巴管的穩(wěn)定劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供包含Tie2活化(磷酸化)劑的淋巴管的穩(wěn)定劑。
背景技術(shù)：
血液從心臟被送入經(jīng)過毛細血管和/或靜脈回到心臟。淋巴管與該血管系統(tǒng)分開 地形成組織液的排水途徑。淋巴管通過在末梢組織中使從血管滲漏出的間質(zhì)液、蛋白質(zhì)、 脂肪、細胞等向血管系統(tǒng)回流來保持一定的血液量，從而維持封閉循環(huán)系統(tǒng)。在存在于皮 膚的毛細血管中，內(nèi)皮細胞的外側(cè)被基底膜包圍、進而附著有周皮細胞。另一方面，在毛細 淋巴管中，內(nèi)皮細胞的外側(cè)幾乎沒有基底膜，也沒有附著周皮細胞。該結(jié)構(gòu)對于有效地從 間質(zhì)攝取體液和/或細胞是有用的(非專利文獻1)。迄今為止，已顯示出酪氨酸酶型受體 VEGi7R(血管內(nèi)皮細胞生長因子受體，vascularendothelial growth factor receptor)-3 在淋巴管內(nèi)皮細胞中特異性表達，并顯示出作為其配基的VEGF-C和VEGF-D誘導淋巴管新 生。此外明確了，VEGF-A是介由在淋巴管內(nèi)皮細胞中表達的VEGFR2來誘導淋巴管新生(非 專利文獻2)。此外，關(guān)于淋巴管的功能，有以下報導。在感染了表達VEGF-A的腺病毒的小 鼠耳部觀察到了顯著的淋巴管新生，但是結(jié)構(gòu)異常，并且由在耳部注入了膠態(tài)炭的實驗明 確了，淋巴管的回收功能也被顯著抑制(非專利文獻3)。即，認為對淋巴管的功能而言，淋 巴管內(nèi)皮細胞適當?shù)嘏渲貌⒈恢问潜匾?。我們將這定義為“淋巴管的穩(wěn)定化”。對皮膚的物理或化學刺激會誘導血管新生和/或VEGF-A等引起的血管滲透性，結(jié) 果發(fā)生組織液的蓄積和浮腫。另一方面，還已知這些刺激直接誘導淋巴管的新生和/或擴 張。迄今為止，可觀測到紫外線炎癥引起的淋巴管擴張，由注入了染料的實驗明確了淋巴管 的功能發(fā)生障礙。認為隨著血管擴張，水分向真皮內(nèi)滲漏出，從而淋巴管擴張而要回收間質(zhì) 液。然而，認為過量的淋巴管擴張反而會降低其回收功能并延遲浮腫(非專利文獻4)。艮口， 認為為了迅速回收組織間液，避免誘導淋巴管的過量擴張的“淋巴管的穩(wěn)定化”是必要的。迄今為止，作為與淋巴管的功能不全相關(guān)的病態(tài)，已知先天性淋巴浮腫，以及 伴隨絲蟲病、手術(shù)、惡性腫瘤、炎癥所產(chǎn)生的繼發(fā)性淋巴浮腫。作為先天性淋巴浮腫， 有米耳羅伊病(Mi Iroy病，原發(fā)性淋巴水腫)、梅杰病(Me i ge病)、淋巴水腫-重睫 (lymphedema-distichiasis)綜合征。報告了在米耳羅伊病中淋巴管不發(fā)育和/或發(fā)育不 全，另一方面，報告了在淋巴水腫-重睫綜合征中淋巴管增生。由此也可認為，保持回收功 能不僅需要通過淋巴管的新生，還要通過淋巴管的穩(wěn)定化(非專利文獻5)。非專利文獻1 実験醫(yī)學 Vol. 24，No. 18 (2006)，pp. 133-1382 Jussila L and Alitalo K, (2006) Vascular growth factorsand lymphangiogenesis (血管生長因子和淋巴管生成).Phisiol Rev82 :673-7003 :Nagy et al. , (2002) Vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor induces lymphangiogenesis as well asangiogenesis (血 管通透因子/血管內(nèi)皮生長因子誘導淋巴管生成以及血管生成).J Exp Med 196 1497-1506
非專利文獻4 =Kajiya K. , Hirakawa S.，and Detmar Μ.，(2006) VEGF-A mediates UVB-induced impairment of lymphatic vessel function (VEGF-A ^^ UVB-管功能的損傷).Am J Pathol 169:1496-1503非專利文獻5 実験醫(yī)學 Vol. 24，No. 18 (2006)，pp. 139-143非專利文獻 6 :Kajiya K. , et al. , (2005)Hepatocyte growth factorpromotes lymphatic vessel formation and function (肝細胞生長因子促進淋巴管形成和功 能).EMBO J 24 :2885-95非專利文獻7 実験醫(yī)學 Vol. 20，No. 8 Q002)，pp. 52-57

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的課題是提供在實現(xiàn)淋巴管的穩(wěn)定化、維持和/或增強淋巴管的回收功能 方面有效的藥劑。以VEGF被分子克隆為開端，作為特異性地在血管形成中發(fā)揮作用的因子，已經(jīng)相 繼鑒定出VEGF家族和血管生成素(angiopoietin ;Ang)家族的分子。VEGF及其受體與從 被稱為脈管形成的血管早期發(fā)生至隨后的血管新生的非常寬范圍的血管形成相關(guān)。另一方 面，Ang在脈管形成后，在伴有血管內(nèi)皮細胞的芽生、分枝、嵌入、萎縮等細胞現(xiàn)象的管腔形 成中發(fā)揮作用?？梢岳斫?，Ang介由在血管內(nèi)皮細胞中表達的受體型酪氨酸激酶Tie (含Ig 禾口 EGF 同源結(jié)構(gòu)域的酷氛酸激醇，tyrosine kinase with Ig andEGF homology domain) -2 來控制血管內(nèi)皮細胞與周皮細胞(周細胞)和/或血管平滑肌細胞這樣的血管壁細胞的粘 著，在血管的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定化中發(fā)揮作用(非專利文獻7)，但是Tie2與淋巴管的關(guān)系還未充分 闡明。本發(fā)明者著眼于Ang-I與在淋巴管內(nèi)皮細胞中表達的Tie2的關(guān)系而進行了研究， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Ang-I介由Tie2的活化來促進淋巴管的回收功能，從而完成以下發(fā)明(1) 一種淋巴管的穩(wěn)定劑，包含Tie2活化劑。(2)根據(jù)⑴所述的淋巴管的穩(wěn)定劑，所述Tie2活化劑是選自血管生成素 1 (Ang-I)、樟(Cinnamomum)屬植物的提取物、刺五加(Siberian Ginseng)提取物和丁香樹 脂醇中的至少1種。(3)根據(jù)( 所述的淋巴管的穩(wěn)定劑，所述提取物來源于肉桂種植物(Cirmamomum cassia Blume)0(4)根據(jù)⑵所述的淋巴管的穩(wěn)定劑，所述提取物來源于桂枝或桂皮。(5)根據(jù)⑵ (4)的任一項所述的淋巴管的穩(wěn)定劑，所述提取物是水提取物。(6) 一種用于改善或預防水腫的美容學方法，其中，應用(1) (5)的任一項所述 的淋巴管的穩(wěn)定劑。通過使用本發(fā)明涉及的淋巴管的穩(wěn)定劑，能夠改善和/或預防水腫等。


圖1是將Ang-I引起的淋巴管的回收功能的變化通過視覺判定評分來數(shù)值化而得 的圖。圖2顯示桂皮提取物產(chǎn)生的Tie2磷酸化的結(jié)果。4
圖3顯示刺五加提取物產(chǎn)生的Tie2磷酸化的結(jié)果。
具體實施例方式對Tie2的活化劑沒有特別的限制，可列舉血管生成素1等眾所周知具有活化 Tie2的活性的活化劑，和/或來源于樟(Cirmamomum)屬植物的提取物、刺五加(Siberian Ginseng)提取物或丁香樹脂醇等本發(fā)明者新發(fā)現(xiàn)的具有該活性的活化劑。另外，此處所謂 的Tie2的活化是指可以通過將Tie2磷酸化而轉(zhuǎn)換成其活性體(磷酸化Tie2)的能力。樟屬是樟目(Lauraceae)、樟科(Lauraceae)的植物，存在300以上的種，已知例 如肉桂(Cinnamomum cassia Blume)、樟(C. camphora)、圓葉肉桂(C. daphnoides)、柴肉 桂(C. doederleinii)、天竺桂(C. japonicum)、圓葉藪肉桂(C. pseudo-pedunculatum)、日 本肉桂(C. sieboldii)、錫蘭肉桂(C. verum)、錫蘭肉桂(C. ζeyIanicum)。作為本發(fā)明中的 Tie2活化劑，優(yōu)選使用肉桂(Cinnamomum cassia Blume)、特別是來源于作為肉桂的嫩枝的 桂枝(肉桂枝)或桂皮(肉桂皮)的提取物。已知來源于作為肉桂的樹皮的桂皮的提取物 例如作為生發(fā)劑的有效成分是有用的(特開平10-265350號公報)，但是完全不知道其具有 淋巴管的穩(wěn)定化活性。刺五加(Siberian Ginseng)提取物在傳統(tǒng)上被認為對滋養(yǎng)強壯有效。在虛弱、極 度疲勞、注意力降低等精神和/或身體能力的降低、病后的恢復方面顯示優(yōu)異的效力。在美 國，作為膳食補充劑(diet supplement)被使用。上述提取物可以通過常規(guī)方法獲得，例如可以將作為其來源的植物與提取溶劑一 起在常溫或加熱下浸漬或加熱回流，然后過濾、濃縮而獲得。作為提取溶劑，只要是通常提 取所使用的溶劑就可以任意使用，可以單獨使用或組合使用下述溶劑例如，水性溶劑，例 如水、生理鹽水、磷酸緩沖液、硼酸緩沖液；或者有機溶劑，例如乙醇、丙二醇、1，3_ 丁二醇、 甘油等醇類，含水醇類，氯仿，二氯乙烷，四氯化碳，丙酮，乙酸乙酯，己烷等。優(yōu)選使用水作 為溶劑。用上述溶劑提取得到的提取物可以直接使用，或使用通過例如凍干等使其濃縮后 的提取物，還可以根據(jù)需要使用采用吸附法、例如離子交換樹脂除去雜質(zhì)后的提取物，和/ 或用多孔聚合物(例如7、"一’ ^卜XAD-2)的柱進行吸附、然后用所需溶劑溶出、再濃 縮后的提取物。丁香樹脂醇是植物所特有的抗氧化物質(zhì)木酚素類化合物，由于具有改善高血壓癥 的效果和/或抑制幽門螺旋桿菌(H. pylori)的效果，因此可用于食品、飲料和/或藥品(例 如，特開平8468887號公報、特開2004-352652號公報等)。丁香樹脂醇具有以下化學結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.一種淋巴管的穩(wěn)定劑，包含Tie2活化劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的淋巴管的穩(wěn)定劑，所述Tie2活化劑是選自血管生成素 1 (Ang-I)、樟(Cinnamomum)屬植物的提取物、刺五加(SiberianGinseng)提取物和丁香樹 脂醇中的至少1種。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的淋巴管的穩(wěn)定劑，所述提取物來源于肉桂種植物 (Cinnamomum cassia Blume)0
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的淋巴管的穩(wěn)定劑，所述提取物來源于桂枝或桂皮。
5.根據(jù)權(quán)利要求2 4的任一項所述的淋巴管的穩(wěn)定劑，所述提取物是水提取物。
6.一種用于改善或預防水腫的美容學方法，其中，應用權(quán)利要求1 5的任一項所述的 淋巴管的穩(wěn)定劑。
全文摘要
本發(fā)明提供包含Tie2活化劑的淋巴管的穩(wěn)定劑。Tie2活化劑優(yōu)選為選自血管生成素1(Ang-1)、樟(Cinnamomum)屬植物的提取物、刺五加(Siberian Ginseng)提取物和丁香樹脂醇中的至少1種。
文檔編號A61P17/16GK102056630SQ20098012165
公開日2011年5月11日 申請日期2009年6月17日 優(yōu)先權(quán)日2008年6月18日
發(fā)明者加治屋健太朗, 大田正弘 申請人:株式會社資生堂