專(zhuān)利名稱(chēng)：通過(guò)靜脈給藥的用于控制釋放活性成分的海藻酸的生物相容微粒的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種組合物，包括海藻酸或其藥學(xué)可接受的鹽類(lèi)的微粒，通過(guò)該微粒達(dá)到控制釋放，并且增加經(jīng)靜脈給藥的活性成分的半衰期，以及使應(yīng)用次數(shù)減少，并在血液中達(dá)到更穩(wěn)定的活性成分水平，由此潛在地減少一般由于定期輸注活性成分而出現(xiàn)的其濃度的峰谷。
本發(fā)明說(shuō)明了具有下列組合的海藻酸鹽的疏水微粒其尺寸適于靜脈輸注且其物理化學(xué)特性適于避免該微粒被迅速吞噬，從而能夠控制釋放復(fù)雜的活性成分。


發(fā)明內(nèi)容
由于其物理化學(xué)和生物化學(xué)特性，海藻酸及其鹽類(lèi)(海藻酸銨、海藻酸鈣、海藻酸鉀、海藻酸鈉和海藻酸丙二醇酯)是在活性成分的包封中最常用和研究最多的聚合物之一。它們是天然來(lái)源、從海藻或細(xì)菌商業(yè)化產(chǎn)生的多糖。
海藻酸鹽是海藻酸的鹽類(lèi)，是由兩種單體單元，β-(1-4)-D-甘露糖醛酸(M)和α-(1-4)-L-谷洛糖醛酸(G)組成的線性多糖。它們分為形成多種序列的嵌段，最常見(jiàn)的為G、M和MG。
在多價(jià)陽(yáng)離子如鈣(Ca++)的存在下，在形成海藻酸鹽的延伸網(wǎng)絡(luò)的連續(xù)G嵌段之間形成強(qiáng)鍵。鈣離子作為橋位于具有帶負(fù)電荷的谷洛糖醛酸的基團(tuán)之間。
在一些制劑中，它們經(jīng)常伴隨著其他多糖諸如殼聚糖。殼聚糖是一種由隨機(jī)分布的β-(1-4)D-氨基葡萄糖(脫乙酰單位)和N-乙?；?D-氨基葡萄糖(乙酰單位)組成的線性多糖。
在一些海藻酸鹽制劑中可使用白蛋白作為帶電荷物質(zhì)，優(yōu)選無(wú)菌和無(wú)熱原的人白蛋白，其還可用作制造過(guò)程中活性成分的保護(hù)劑或用作產(chǎn)品的長(zhǎng)期保存期間的穩(wěn)定劑。
其在血漿中的釋放要被改變的活性成分可以是復(fù)雜的和不穩(wěn)定的活性成分。更具體地，活性成分的特征是顯示生物活性。此生物活性可通過(guò)酶活性、轉(zhuǎn)運(yùn)、與配體的分子相互作用或結(jié)合來(lái)表現(xiàn)。在兩種情況下活性成分的問(wèn)題是對(duì)制造的能量條件不穩(wěn)定或敏感，其中尤其是溫度、壓力和/或非極性環(huán)境，因?yàn)樾〉慕Y(jié)構(gòu)變化可導(dǎo)致生物活性的不可逆喪失。
作為具有生物活性的活性成分，可列舉人肽類(lèi)激素諸如褪黑激素、5-羥色胺、甲狀腺素、腎上腺素、去甲腎上腺素、多巴胺、促腎上腺皮質(zhì)激素、血管緊張素原和血管緊張素、加壓素、心房肽、降鈣素、促紅細(xì)胞生成素、卵泡刺激素胰高血糖素、人絨毛膜促性腺激素、人胎盤(pán)催乳素、生長(zhǎng)激素、抑制素、胰島素、胰島素類(lèi)生長(zhǎng)因子(或生長(zhǎng)介素)、黃體生成素、黑色素細(xì)胞刺激素、催產(chǎn)素、催乳素、血小板生成素、神經(jīng)肽Y、組胺、以及其衍生物。
其他實(shí)例可以是生物活性蛋白，尤其是諸如白蛋白、α1-抗胰蛋白酶、α-酸性糖蛋白、α-2-巨球蛋白、抗凝血酶、結(jié)合珠蛋白、血漿銅藍(lán)蛋白、脂蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、纖溶酶原、纖維蛋白原、補(bǔ)體蛋白、凝血因子和免疫球蛋白。
這些活性成分是生物活性的事實(shí)使得由于微小結(jié)構(gòu)損害造成它們特別容易可能喪失功能性。此種結(jié)構(gòu)損害可與溫度、壓力、介質(zhì)的極性、滲透壓、氧的存在、攪拌等有關(guān)。
就此而言，在這些活性成分中凝血因子VIII非常突出，因?yàn)樗鼧O度不穩(wěn)定。由于其結(jié)構(gòu)復(fù)雜性，其非常難以充分地穩(wěn)定FVIII的生物活性，尤其是其純化形式。例如，Parti R等人(Haemophilia 2000；6513-522)說(shuō)明了在大于40℃的溫度下，甚至凍干形式的FVIII的生物活性都開(kāi)始受到損害。當(dāng)FVIII在溶液中時(shí)，這種不穩(wěn)定性最為突出，甚至在25℃下就觀察到不穩(wěn)定性的跡象。對(duì)于IX因子和VIIa因子，對(duì)于外界因素諸如溫度的敏感性也是公知的。
就此而言，必需注意，采用的制造工藝要獲得具有FVIII的生物活性的治療制劑。這意味著該方法可應(yīng)用于顯示難以穩(wěn)定的生物活性的活性成分，并且因此，本發(fā)明可應(yīng)用于與FVIII一樣不穩(wěn)定的成分。通過(guò)擴(kuò)展，本發(fā)明可應(yīng)用于比FVIII更穩(wěn)定的成分。因此，凝血因子是可從如本發(fā)明中所述的制劑的應(yīng)用中獲益的活性成分的明顯實(shí)施例。
在本發(fā)明中，包括在聚合物微球中的活性成分因此可以是顯示生物活性的肽、蛋白或激素。優(yōu)選地，活性成分是凝血因子，且更優(yōu)選地，活性成分是VIII因子、血管性血友病因子(von Willebrand factor)、由VIII因子和血管性血友病因子形成的復(fù)合體、IX因子或VIIa因子。
這些成分可以是人、動(dòng)物、重組或轉(zhuǎn)基因來(lái)源的。在后一種情況下，合成分子可以是天然分子的復(fù)制或可被有意地修飾。
獲得組合物 微囊化是一種用不同特性的材料包被分子、固體顆?；蛞后w球以產(chǎn)生微米尺寸的微粒的方法。由此技術(shù)方法獲得的產(chǎn)品被稱(chēng)為微粒、微膠囊或微球。
有幾種微囊化技術(shù) -通過(guò)化學(xué)方法的微囊化 ·界面聚合法 -通過(guò)物理化學(xué)法的微囊化 ·蒸發(fā)溶劑 ·凝聚法 ·凝膠化 ·螯合 ·形成囊泡 -通過(guò)機(jī)械方法的微囊化 ·擠出 ·共擠出 ·噴霧干燥 ·噴霧冷凍 選擇用于制造本發(fā)明中描述的微粒的技術(shù)是噴霧干燥，該方法記載在Erdinc B.I.[Erdinc B.I.(2007)Micro/nanoencapsulation of proteins withinalginate/chitosan matrix by spray drying，Degree Thesis，Queen′s University，Kingston，Canada]。此制造技術(shù)的特征是單階段，且微粒作為終產(chǎn)物獲得。
包括本發(fā)明的用于控制釋放活性成分的海藻酸或其鹽類(lèi)的微粒的用于靜脈給藥的生物相容組合物的制造工藝的特征在于以下的階段 -噴霧，其中含有活性成分和聚合物的溶液/混懸液/乳液通過(guò)噴嘴被泵出，并且以液滴的形式分散， -在干燥室中干燥，在此處熱空氣促進(jìn)溶劑從液滴蒸發(fā)，以及 -收集被包封的產(chǎn)物。
此方法在140～180℃的溫度下進(jìn)行，供應(yīng)流速為35～40m3/h，注射流速為3.5～5ml/min且壓力為4～6psi。
在這些條件下能夠獲得尺寸小于或等于5μm，優(yōu)選1-4.5μm并保持活性成分的活性的顆粒。另外，可在噴霧階段前任選的乳液勻化工藝中改進(jìn)顆粒的平均尺寸。此附加的勻化工藝借助于壓力，例如1500～2000psi來(lái)進(jìn)行。
通過(guò)噴霧干燥包封活性成分是一個(gè)連續(xù)工藝，其中溶液或乳液被脫水，在工藝結(jié)束時(shí)回收由微粒形成的固體。
為此，含有活性成分的液體以預(yù)定的注射流速被機(jī)械驅(qū)動(dòng)至噴嘴或旋轉(zhuǎn)盤(pán)，從中其以數(shù)百萬(wàn)個(gè)非常小的液滴進(jìn)行噴霧。液滴的大小在很大程度上由使液體形成噴霧的氣體的壓力來(lái)決定。此工藝在密閉室中進(jìn)行，在該密閉室中控制的氣，通常為空氣的氣流以預(yù)定的吸入速率并在可控溫度下連續(xù)循環(huán)。
作為噴霧的結(jié)果，液體極大地增加了其與空氣的接觸表面積，使得當(dāng)面對(duì)干燥空氣流時(shí)，液體溶劑，通常為水迅速蒸發(fā)。由于改變狀態(tài)需要熱量，因此此迅速蒸發(fā)使每個(gè)小液滴內(nèi)部冷卻。以此方式能夠進(jìn)行快速干燥，同時(shí)盡量減小對(duì)活性成分的熱休克。完成該工藝后，產(chǎn)物以固體形式被收集。
組合物的說(shuō)明 獲得的微粒通過(guò)測(cè)定其顆粒平均粒徑、其Z電位和生物活性來(lái)區(qū)分。顆粒的尺寸使用Beckman Coulter LS13320裝置通過(guò)激光衍射來(lái)測(cè)定。
由于有靜脈給藥的問(wèn)題，需要顆粒尺寸小于或等于5μm，優(yōu)選1～4.5μm，因?yàn)檩^大的顆粒尺寸會(huì)導(dǎo)致血栓形成。
Z電位使用Malvern Zetasizer裝置測(cè)定，Z電位是控制混懸液中顆粒的相互作用的重要參數(shù)之一。其通過(guò)顆粒表面和分散介質(zhì)的特性來(lái)確定。在此情況下，最佳值為-30mV以上，因?yàn)榇酥荡_保顆粒之間的斥力并確保沒(méi)有凝聚物。已經(jīng)顯示具有接近0，優(yōu)選-30mV～0的Z電位的微粒具有很低的肝臟攝取和細(xì)胞清除水平。(Szycher，Michael，High PerformanceBiomaterialsA Comprehensive Guide to Medical and PharmaceuticalApplications，CRC Press出版，1991ISB 0877627754，9780877627753，812頁(yè))。
組合物的應(yīng)用 修飾釋放或控制釋放的藥物形式以下列方式設(shè)計(jì)相對(duì)于以相同方式給藥的常規(guī)釋放的藥物形式，改變活性物質(zhì)釋放的速率和/或位置。
在本發(fā)明中，已經(jīng)觀察到顯示生物活性的活性成分諸如蛋白(更具體地，凝血因子)的包封如何在體內(nèi)和體外釋放模型中實(shí)現(xiàn)控制釋放。由于VIII因子的結(jié)構(gòu)復(fù)雜性，其對(duì)于外界因素極度敏感而著名。實(shí)際上，甚至將FVIII冷凍在其天然基質(zhì)-人血漿中，仍會(huì)導(dǎo)致生物活性的部分損失(Bravo，M.I.等人，Pharmeuropa Scientific Notes，2006-1，1-5頁(yè))。
因此當(dāng)本發(fā)明中所述的含有人FVIII的微粒置于環(huán)境非常類(lèi)似于人血漿的連續(xù)流動(dòng)室中時(shí)，與未包封產(chǎn)品相比，已經(jīng)觀察到介質(zhì)中FVIII的釋放有延遲。
類(lèi)似地，在兔中靜脈給予本發(fā)明的含F(xiàn)VIII微粒，與常規(guī)產(chǎn)品相比，使FVIII在血漿中的半衰期始終顯著地延長(zhǎng)。此外，在可能指示有與所述制劑相關(guān)的毒性作用的動(dòng)物中沒(méi)有觀察到不良反應(yīng)。
體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)非常明顯，因?yàn)楹翢o(wú)疑問(wèn)地證實(shí)MPS的調(diào)理作用和加速攝取已經(jīng)被本發(fā)明的制劑適當(dāng)?shù)亟鉀Q了。
本發(fā)明可用于治療需要靜脈給予復(fù)雜成分的各種病理狀況，這些病理狀況可包括，例如，出血障礙和凝血障礙、激素紊亂等。在這些情況下，將實(shí)現(xiàn)半衰期的顯著延長(zhǎng)，例如對(duì)于FVIII，可包括減少用于維持一線預(yù)防治療方案的給藥次數(shù)，例如，每周一次給藥。
可能存在的與使用親水聚合物有關(guān)的缺點(diǎn)可以是，在產(chǎn)品懸浮在給藥水性載體，例如，無(wú)熱原和無(wú)菌注射用水中的時(shí)間和靜脈輸注時(shí)刻之間的時(shí)段期間微粒的部分溶出。此類(lèi)缺點(diǎn)可使用，例如，部分無(wú)極性的生物聚合物溶液，諸如，尤其是乙醇、丙二醇、聚乙二醇、二甲亞砜、N-甲基-2-吡咯烷酮、四氫呋喃聚乙二醇醚、異丙叉甘油、甘油縮甲醛或丙酮(Mottu F等人，Journal of Pharmaceutical Science&Technology 2000Vol.54，No.6，456-469)作為本發(fā)明中所述的微粒的重懸浮和給藥載體來(lái)克服。
例如，本發(fā)明可以包裝在真空或惰性氣氛中的脫水或凍干產(chǎn)品的形式來(lái)產(chǎn)生，使得能夠在不同的溫度條件下，例如，在2℃～40℃之間，具有長(zhǎng)期穩(wěn)定性。由此保存的產(chǎn)品可在用溶劑配制后經(jīng)靜脈給藥，溶劑可以是注射用水，或鹽水溶液，或具有下列可變含量的混合物或鹽水溶液，例如0.5％～50％的生物相容溶劑諸如，例如，尤其是乙醇、丙二醇、聚乙二醇、二甲亞砜、N-甲基-2-吡咯烷酮、四氫呋喃聚乙二醇醚、異丙叉甘油、甘油縮甲醛或丙酮。
本發(fā)明的有益效果 本發(fā)明說(shuō)明了具有下列組合的海藻酸鹽的親水微粒的產(chǎn)生該微粒具有適于靜脈輸注的尺寸以及適于防止其迅速吞噬的物理化學(xué)特性，使得復(fù)雜活性成分的半衰期延長(zhǎng)。
海藻酸鹽是生物相容的，并經(jīng)尿清除，并且與任意已知的毒性作用無(wú)關(guān)。由于具有此特性，本發(fā)明與蛋白和復(fù)雜活性成分的給藥是可配伍的。
本發(fā)明可克服造成可控靜脈給藥系統(tǒng)不實(shí)用的所有缺陷，由此減少了治療所需的給藥次數(shù)，而靜脈使用的活性成分沒(méi)有變化。就此而言，需注意，本發(fā)明不需要在氨基酸序列、糖基化作用或?qū)牒铣裳苌镞@些方面對(duì)活性成分作任何的修飾。



圖1顯示了BATCH 9和BATCH 1的體外釋放試驗(yàn)的結(jié)果的比較圖。
圖2顯示了在給予未包封的FVIII后和在應(yīng)用本發(fā)明的組合物后在兔血漿中人FVIII:C的藥代動(dòng)力學(xué)。
圖3顯示了在給予未包封的FVIII后和在應(yīng)用本發(fā)明的組合物后在兔血漿中人VWF:Ag的藥代動(dòng)力學(xué)。

具體實(shí)施例方式 實(shí)施例1 微粒的制備 如Erdinc B.I.[Erdinc B.I.(2007)Micro/nanoencapsulation of proteinswithin alginate/chitosan matrix by spray drying，Degree Thesis，Queen′sUniversity，Kingston，Canada]中的記載使用噴霧干燥工藝生產(chǎn)海藻酸鹽微粒。基本上，通過(guò)產(chǎn)生具有所選擇的聚合物和活性成分的乳液來(lái)制備微粒。
使用Büchi小型噴霧干燥儀B-290裝置在下列條件下對(duì)樣品進(jìn)行噴霧噴霧溫度140℃-180℃，吸入速率35-40m3/h，注射流速3.5-5ml/min，且壓力為4-6psi。
實(shí)施例2 微粒的說(shuō)明 表1、2和3說(shuō)明了在制造微粒中使用的原料和其特性，包括尺寸、Z電位和收率。使用的制造工藝和條件如實(shí)施例1中所述。
表1FVIII微粒(血漿FVIII)的說(shuō)明 FVIII活性/FVIII抗原比給出了指定樣品中活性蛋白的比例的概念。以此方式，如果我們將初始樣品中的活性/抗原比與包封樣品的活性/抗原比進(jìn)行比較，則我們可計(jì)算微囊化后仍然具有功能的活性成分的比例。在實(shí)施例中，我們發(fā)現(xiàn)在包封工藝期間的活性收率，以與初始活性收率相比的百分比表示，對(duì)于第1批次、第2批次和第3批次分別為57.6％、33.9％和35.7％。
表2FIX微粒(血漿FIX)的說(shuō)明 在此例子中，我們發(fā)現(xiàn)在所有所述批次中，在第4批次、第5批次和第6批次中包封工藝期間的活性收率為100％。
表3rFVIII微粒(重組rFVIII)和rFVIIa(重組rFVIIa)的說(shuō)明 在重組來(lái)源的蛋白的情況下，對(duì)于第7批次和第8批次，包封工藝期間測(cè)定的活性收率分別為25％和71％。
在所有批次中，使用Beckman Coulter LS 13320裝置通過(guò)衍射激光測(cè)定顆粒尺寸，并且使用Malvern Zetasizer裝置測(cè)定Z電位。
FVIII的生物活性通過(guò)缺陷性血漿凝血試驗(yàn)或通過(guò)生色作用評(píng)價(jià)FXa的生成來(lái)測(cè)定。對(duì)于FVIIa和FIX，分別通過(guò)評(píng)價(jià)無(wú)FVII和FIX的血漿的凝血時(shí)間(部分活化凝血活酶時(shí)間)來(lái)測(cè)定生物活性。通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)的免疫檢測(cè)方法分別使用針對(duì)FVIII:Ag、FIX:Ag或FVII:Ag的特異性抗體測(cè)定蛋白濃度。
指示指定樣品中活性蛋白的比例的活性/抗原比通過(guò)獲得樣品中具體活性成分的活性和抗原單位之間的商來(lái)計(jì)算。通過(guò)估計(jì)起始樣品和最終的包封產(chǎn)品的活性/抗原比之間的變化百分比來(lái)計(jì)算活性/抗原收率。
如在所有例子中所見(jiàn)，平均粒徑小于或等于5μm，且Z電位為負(fù)?；钚?抗原收率的結(jié)果還表明工藝期間生物活性得到保持。
各表顯示控制釋放系統(tǒng)適用于不同的活性成分。
實(shí)施例3 體外釋放試驗(yàn) 在Sotax CE1裝置中在閉合回路中采用連續(xù)流動(dòng)室進(jìn)行控制釋放試驗(yàn)以評(píng)價(jià)活性成分的釋放。
在37℃的溫度下使用含有1％人白蛋白的咪唑緩沖液(pH 7.3)作為溶解介質(zhì)進(jìn)行試驗(yàn)，流速為7-25ml/min。在不同的時(shí)刻(5分鐘、10分鐘、15分鐘、30分鐘、60分鐘、120分鐘、180分鐘和240分鐘)提取代表性樣品用于分析。用相同體積的新鮮介質(zhì)替換提取的樣品的體積以便糾正體積的損失。
FVIII的生物活性通過(guò)缺陷性血漿凝血試驗(yàn)或通過(guò)生色作用評(píng)價(jià)FXa的生成來(lái)測(cè)定。對(duì)于FVIIa和FIX，分別通過(guò)評(píng)價(jià)無(wú)FVII和FIX的血漿的凝血時(shí)間(部分活化凝血活酶時(shí)間)來(lái)測(cè)定生物活性。通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)的免疫檢測(cè)方法分別使用針對(duì)FVIII:Ag、FIX:Ag或FVII:Ag的特異性抗體測(cè)定蛋白濃度。
測(cè)試完成后獲得下列的結(jié)果 表4.未包封的凍干FVIII(第9批次)的體外釋放試驗(yàn)
表5.FVIII納米顆粒(第1批次)的體外釋放試驗(yàn)
我們可看到與未包封產(chǎn)品相比，應(yīng)用于活性成分的微粒的組合物改變了產(chǎn)品的釋放動(dòng)力學(xué)。
實(shí)施例4 VIII因子在動(dòng)物中的藥代動(dòng)力學(xué) 為了評(píng)價(jià)在體內(nèi)組合物對(duì)活性成分的釋放的作用，對(duì)兔進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)。為此，50IU/kg劑量的來(lái)自第9批次的人FVIII(未包封)經(jīng)靜脈給予三只雌性新西蘭白兔。類(lèi)似地，50IU/kg劑量的來(lái)自如實(shí)施例1所述和根據(jù)實(shí)施例2所述制造的第1批次的包封FVIII經(jīng)靜脈給予另外三只雌性新西蘭白兔。在不同的時(shí)間，獲取血漿樣品進(jìn)行分析以檢測(cè)人FVIII:C的存在，如表6中所述。在選擇性免疫俘獲人FVIII分子后通過(guò)生色作用檢測(cè)人FVIII。這樣可使融合的人FVIII的活性與兔FVIII的活性區(qū)分開(kāi)。
表6.在給予未包封FVIII后和應(yīng)用本發(fā)明的組合物后兔血漿中人FVIII:C的藥代動(dòng)力學(xué)
從結(jié)果我們可以看出組合物延遲了活性成分在血漿中的釋放。另外，這些結(jié)果證明不管其大小如何，都不存在將微粒從循環(huán)中迅速清除的細(xì)胞機(jī)制(肝臟、脾臟或巨噬細(xì)胞)。
使用用于此目的的適當(dāng)軟件(WinNonlin 5.2)分析此數(shù)據(jù)，使我們能夠計(jì)算表7中詳述的藥代動(dòng)力學(xué)常數(shù)。
表7.在給予未包封FVIII后和應(yīng)用本發(fā)明的組合物后兔血漿中人FVIII:C的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)
實(shí)施例5 動(dòng)物中血管性血友病因子的藥代動(dòng)力學(xué) 在第9批次制劑(未包封FVIII)和第1批次制劑(包封FVIII)兩種情況下，F(xiàn)VIII的血漿來(lái)源具有顯著含量的血管性血友病因子(VWF)。這意味著VWF的包封與FVIII的包封同時(shí)發(fā)生。對(duì)此，可獨(dú)立地研究它們的行為。為此，我們繼續(xù)通過(guò)評(píng)價(jià)兔血漿中人VWF抗原(VWF:Ag)的存在來(lái)單獨(dú)地分析VWF藥代動(dòng)力學(xué)。結(jié)果顯示在表8中。
表8.在給予未包封VWF后和應(yīng)用本發(fā)明的組合物后兔血漿中人VWF:Ag的藥代動(dòng)力學(xué)
從結(jié)果我們可以看出組合物延遲了活性成分在血漿中的釋放。另外，這些結(jié)果證明不管其大小如何，都不存在將微粒從循環(huán)中迅速清除的細(xì)胞機(jī)制(肝臟、脾臟或巨噬細(xì)胞)。
使用用于此目的的適當(dāng)軟件(WinNonlin 5.2)分析此數(shù)據(jù)，使我們能夠計(jì)算表9中詳述的藥代動(dòng)力學(xué)常數(shù)。
表9.在給予未包封FVIII/VWF后和應(yīng)用本發(fā)明的組合物后兔血漿中人VWF:Ag的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)
可觀察到，活性成分(在此例子中為VWF)的包封明顯地延長(zhǎng)了其半衰期。
盡管本發(fā)明已經(jīng)對(duì)于優(yōu)選實(shí)施方式的實(shí)施例進(jìn)行了說(shuō)明，但這些實(shí)施例不應(yīng)被認(rèn)為是對(duì)本發(fā)明的限制，本發(fā)明由下列權(quán)利要求的較寬釋義來(lái)限定。
權(quán)利要求
1.一種用于靜脈給藥的生物相容組合物，包括用于控制釋放活性成分的海藻酸或其鹽的微粒，其特征在于這些微粒的尺寸小于或等于5μm，并且具有負(fù)Z電位。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于所述微粒的尺寸為1-4.5μm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于所述Z電位為-70～0，不包括0。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于所述活性成分為肽、蛋白質(zhì)或激素。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于所述活性成分為人、動(dòng)物、重組或轉(zhuǎn)基因來(lái)源。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于所述活性成分顯示不穩(wěn)定的生物活性。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于所述活性成分是凝血因子。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于所述活性成分是VIII因子。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于所述活性成分是VWF。
10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于所述活性成分是由FVIII和VWF形成的復(fù)合體。
11.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于所述活性成分是IX因子。
12.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于所述活性成分是VIIa因子。
13.一種制造根據(jù)權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)所述的用于靜脈給藥的生物相容組合物的方法，所述生物相容組合物包括用于控制釋放活性成分的海藻酸或其鹽的微粒，其特征在于所述方法包括以下的步驟
-噴霧，其中含有活性成分和聚合物的溶液/混懸液/乳液通過(guò)噴嘴被泵出，并且以液滴的形式分散，
-在干燥室中干燥，在此處熱空氣促進(jìn)溶劑從液滴蒸發(fā)，以及
-收集被包封的產(chǎn)物；
此方法在140～180℃的溫度下進(jìn)行，供應(yīng)流速為35～40m3/h，注射流速為3.5～5ml/min且壓力為4～6psi。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于在噴霧階段之前另外進(jìn)行將所述乳液勻化的任選步驟。
15.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于所述附加的勻化步驟通過(guò)施加1500-2000psi的壓力進(jìn)行。
16.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于獲得的所述微粒的尺寸為1-4.5μm。
17.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于獲得的所述微粒的Z電位為-70～0，不包括0。
18.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于所述活性成分為肽、蛋白質(zhì)或激素。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于所述活性成分可以為人、動(dòng)物、重組或轉(zhuǎn)基因來(lái)源。
20.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于所述活性成分顯示不穩(wěn)定的生物活性。
21.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于所述活性成分是凝血因子。
22.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于所述活性成分是VIII因子。
23.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于所述活性成分是VWF。
24.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于所述活性成分是由FVIII和VWF形成的復(fù)合體。
25.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于所述活性成分是IX因子。
26.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于所述活性成分是VIIa因子。
27.根據(jù)權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)所述的生物相容組合物在治療出血障礙、凝血變化和激素疾病中的應(yīng)用。
全文摘要
通過(guò)靜脈給藥的用于控制釋放活性成分的海藻酸的生物相容微粒的組合物。本發(fā)明涉及一種生物相容組合物，其包括海藻酸或其鹽的微粒和活性成分。更具體地，本發(fā)明涉及用于包封要靜脈給予需要其的患者的活性成分的微粒。當(dāng)靜脈給藥時(shí)，這些微粒是具有如下的組合其足以增加血液中活性成分的半衰期或存留時(shí)間尺寸，在肝臟中的攝取少，并且細(xì)胞清除快速。
文檔編號(hào)A61K38/00GK101757631SQ200910249539
公開(kāi)日2010年6月30日 申請(qǐng)日期2009年12月23日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月23日
發(fā)明者薩爾瓦多·格蘭切·加蒙, 安娜·娜蒂·瑞卡特, 約瑟·瑪利亞·蘇內(nèi)·尼格, 約瑟·拉蒙·蒂科·格勞, 蒙特塞拉特·米尼亞羅·卡莫納 申請(qǐng)人:基立福有限公司