專利名稱：一種腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別方法，屬 于藥物鑒別領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
腦心清片是柿葉經(jīng)水提醇沉后，水提液再由乙酸乙酯萃取，得到 柿葉提取物，再由柿葉提取物加輔料制成的中藥制劑，是廣州白云山 和記黃埔中藥有限公司獨(dú)家中藥保護(hù)品種，收載于《中華人民共和國(guó)
衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第二十冊(cè)第294頁(yè)。腦心清片共兩種 規(guī)格，其中規(guī)格(l)[每片重0. 41g (克)]的批準(zhǔn)文號(hào)為國(guó)藥準(zhǔn)字 Z44021765，才丸行標(biāo)準(zhǔn)為WS廠B-3974-98，規(guī)格(2 )[每片重O. 41g(每 片含柿葉乙酸乙酯浸出物72毫克)]的批準(zhǔn)文號(hào)為國(guó)藥準(zhǔn)字Z20053259， 4丸4亍標(biāo)準(zhǔn)為YBZ02432005。
現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中的腦心清片的色譜鑒別方法為
取5片[規(guī)格(1)]或3片[規(guī)格(2)],研細(xì)，加乙酸乙酯25ml (毫升)，加熱回流l小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至約2. 5ml作為供試品溶 液。另取糠酸、原兒茶酸、琥珀酸對(duì)照品分別加乙酸乙酯制成每lml (毫升)含lmg (毫克)溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó) 藥典2005版一部附錄VI B，簡(jiǎn)稱附錄VIB)試—險(xiǎn)，吸取上述四種溶液 各3ial (微升)，分別點(diǎn)于以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板 上，以曱苯-乙酸乙酯-曱酸(5 :4:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾 干，在105。C加熱半小時(shí)，放冷，噴以0. 05%溴曱酚綠乙醇溶液。供試 品色譜中，分別在與各對(duì)照品色語(yǔ)相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。 發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，在原標(biāo)準(zhǔn)的鑒別方法中，利用三個(gè)有機(jī)酸 "糠酸、原兒茶酸和琥珀酸，，鑒別時(shí)，錯(cuò)誤地將腦心清片中含量較高 的一種未知化合物(可能為蘋果酸)誤認(rèn)為是琥珀酸，且糠酸和原兒茶酸鑒別的重現(xiàn)性較差。同時(shí)，由于腦心清片是柿葉提取物加輔料制成的制劑，腦心清片 和柿葉提取物兩者的有效成分一致，薄層色譜鑒別方法應(yīng)該基本一致。 考慮到目前未有柿葉提取物的薄層色譜鑒別方法，本發(fā)明將兩者的薄 層色譜鑒別方法放在一起申請(qǐng)專利。發(fā)明內(nèi)容針對(duì)上述缺陷，本發(fā)明解決的技術(shù)問(wèn)題在于，提供一種腦心清片 和柿葉提取物的薄層色譜鑒別方法，能夠更加準(zhǔn)確地鑒別腦心清片或 柿葉提取物。一種腦心清片和柿葉^是取物的薄層色語(yǔ)鑒別方法，包括如下步驟a) 將供試樣品磨碎研細(xì)，加入甲醇并用超聲波處理，過(guò)濾，將濾 液蒸干，殘?jiān)铀浞謹(jǐn)嚢枞芙?，濾過(guò)，濾液加鹽酸，用無(wú)水乙醚 振搖提取，分取乙醚層，揮干，殘?jiān)訒醮既芙?，作為第一供試品?液；b) 將柿葉對(duì)照藥材磨石f研細(xì)，加入曱醇并用超聲波處理，過(guò)濾， 將濾液蒸干，殘?jiān)铀浞謹(jǐn)嚢枞芙?，濾過(guò)，濾液加鹽酸，用無(wú)水 乙醚振搖提取，分取乙醚層，揮干，殘?jiān)訒醮既芙?，作為第一?duì)照 藥材溶液；c) 取原兒茶酸對(duì)照品，加甲醇溶解，作為第一對(duì)照品溶液；d) 將第一供試品溶液、第一對(duì)照藥材溶液和第一對(duì)照品溶液進(jìn) 行薄層色鐠分析；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相 應(yīng)的位置上，如果不能顯相同顏色的斑點(diǎn)，則供試品不為腦心清 片或柿葉提取物。對(duì)照藥材是通過(guò)權(quán)威機(jī)構(gòu)鑒定后，能達(dá)到某種標(biāo)準(zhǔn)的，并且能用 以鑒別其他藥材真?zhèn)蔚乃幉?。薄層色譜是天然藥物化學(xué)及其他相關(guān)專業(yè)常用的一種定性鑒別、 分析手段，其基本步驟是將待分析的樣品點(diǎn)樣于鋪有載有吸附劑的 玻璃板上，將該薄層板置于裝有按一定比例配置好溶劑的容器中，展開(kāi)，觀察熒光，顯色，根據(jù)熒光和顯色情況對(duì)樣品進(jìn)行分析。 優(yōu)選地，所述超聲波處理的時(shí)間為20分鐘以上。 優(yōu)選地，所述超聲波處理的時(shí)間為30分鐘。
優(yōu)選地，步驟d)的具體操作為
分別吸取第 一供試品溶液、第一對(duì)照藥材溶液和第 一對(duì)照品溶 液，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干， 置紫外燈(254nm (納米))下觀察。供試品色譜中，在與對(duì)照藥 材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，如果不能顯相同顏色的斑點(diǎn)，則 供試品不為腦心清片或柿葉提取物。
優(yōu)選地，所述展開(kāi)劑為二氯甲烷、曱醇和曱酸的混合物。 優(yōu)選地，所述二氯甲烷、甲醇和甲酸的體積比為9 ~ 11: 0. 2 ~ 0. 4: 0. 2 ~ 0. 4。
優(yōu)選地，所述二氯曱烷、曱醇和曱酸的體積比為10: 0.3: 0.3。 在完成上述的鑒別方法之后，如果確定其不是腦心清片或柿葉提 取物，那么鑒別即可結(jié)束。如果在完成上述的鑒別之后，供試品色譜 中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，如果能顯相同顏 色的斑點(diǎn)，那么則可以進(jìn)行如下的步驟
d) 將供試樣品磨碎研細(xì)，加入曱醇并用超聲波處理，過(guò)濾，將濾 液蒸干，殘?jiān)訒醮?，充分?jǐn)嚢枞芙?，作為第二供試品溶液?br> e) 將柿葉對(duì)照藥材磨石卒研細(xì)，加入曱醇并用超聲波處理，過(guò)濾，
將濾液蒸干，殘?jiān)訒醮?，充分?jǐn)嚢枞芙?，作為第二?duì)照藥材溶液； f )再取齊墩果酸對(duì)照品，加曱醇溶解，作為第二對(duì)照品溶液。 g)將第二供試品溶液、第二對(duì)照藥材溶液和第二對(duì)照品溶液進(jìn)行
薄層色語(yǔ)分析。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的
位置上，如果不能顯相同顏色的斑點(diǎn)，則供試品不為腦心清片或柿
葉提取物。
優(yōu)選地，步驟g)的具體操:作為
分別吸取第二供試品溶液、第二對(duì)照藥材溶液和第二對(duì)照品溶 液，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照 藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
優(yōu)選地，所述展開(kāi)劑為曱苯、乙酸乙酯和甲酸的混合物。 優(yōu)選地，所述曱苯、乙酸乙酯和甲酸的體積比為6 ~ 8: 1 ~ 3: 0. 2 ~
0. 4。
優(yōu)選地，所述曱苯、乙酸乙酯和甲酸的體積比為7: 2: 0.3。 本發(fā)明中所述的柿葉提取物是指由柿葉藥材經(jīng)水提，醇沉，萃取等 多種工藝得到的 一種棕黃色至褐色干浸膏，用來(lái)生產(chǎn)腦心清片及其它 制劑的中間體。具體工藝(見(jiàn)腦心清片的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)WS廠B-3974-98中腦 心清片的制法)如下取干柿葉，加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第 二次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度1.12-1.15(60 °C),加乙醇至含醇量達(dá)85%，靜置過(guò)夜，濾取上清液，備用；沉淀物 用65°/。乙醇洗滌兩次，合并洗滌液，靜置過(guò)夜，濾耳又上清液，合并兩次 上清液，回收乙醇，加入適量的水，混勻，濾過(guò)，濾液用乙酸乙酯提 取四次，合并乙酸乙酯液，回收乙酸乙酯并濃縮成稠膏，低溫干燥， 即得。
本發(fā)明所提供的腦心清片和柿葉提取物的薄層色i普鑒別方法與現(xiàn) 有技術(shù)相比，本方法選用原兒茶酸和齊墩果酸作為鑒別成分，對(duì)供試 品溶液的制備方法進(jìn)行了改進(jìn)，增加了柿葉對(duì)照藥材鑒別，該色譜鑒 別方法準(zhǔn)確，可靠，重現(xiàn)性好。


圖1是實(shí)施例1 ~ 5的薄層色譜比較圖。 圖2是實(shí)施例7中的薄層色語(yǔ)比較圖。 圖3是實(shí)施例8中的薄層色譜比較圖。 圖4是實(shí)施例9中的薄層色語(yǔ)比較圖。
以上薄層色譜圖均是在溫度為25。C和相對(duì)濕度為60%的條件下完 成；薄層板為自制板；圖2和3是在紫外光燈254nm下觀察到的色譜 情況；圖1和4是在顯色后，肉眼即可觀察到的色譜情況。
具體實(shí)施例方式
為了本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠更好地理解本發(fā)明所提供的技術(shù)方 案，下面結(jié)合具體的實(shí)施方式進(jìn)行闡述。 實(shí)施例1
取5片[規(guī)格(1 )]或3片[規(guī)格(2 )]待測(cè)片，研細(xì)，加乙酸乙 酯25ml,加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至約2. 5ml作為供試品;容 液，簡(jiǎn)稱為供試品1。
實(shí)施例2 ~ 3
重復(fù)實(shí)施例1的步驟，分別得到供試品2和供試品3。 實(shí)施例4
取蘋果酸對(duì)照品，加入乙酸乙酯制成每lml (毫升)含lmg (毫克) 的蘋果酸對(duì)照品溶液。 實(shí)施例5
取琥珀酸對(duì)照品，加入乙酸乙酯制成每lml (毫升)含lmg (毫克) 的蘋果酸對(duì)照品溶液。 實(shí)施例6
將實(shí)施例1 ~ 3得到的供試品溶液1 ~ 3、實(shí)施例4得到的蘋果酸對(duì) 照品溶液和實(shí)施例5得到的蘋果酸對(duì)照品溶液，照薄層色譜法(附錄 VI B)試驗(yàn)。吸取上述三種溶液各1(V1 (其中供試品溶液為一式三份， 以下同)，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-曱醇-甲酸(25: 1: l)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距12cm(厘米)，取出，晾午，放冷，噴以0.05% 溴曱酚綠乙醇溶液，得到薄層色譜圖，如圖1所示。
從圖1可以看出，腦心清片中含量較高的一種未知化合物(可能 為蘋果酸)在現(xiàn)有技術(shù)中被誤認(rèn)為是琥珀酸，而在與琥珀酸標(biāo)準(zhǔn)品對(duì) 應(yīng)位置，樣品色譜中基本無(wú)琥珀酸斑點(diǎn)出現(xiàn)，證明腦心清片中琥珀酸 的含量很低，不適合用于薄層色譜鑒別。
實(shí)施例7
由實(shí)施例1 ~ 3得到供試品1 ~ 3。另取糠酸、原兒茶酸、琥珀酸對(duì)照品分別加乙酸乙酯制成每lml含lmg溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄 層色譜法(附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各3^1，分別點(diǎn)于以羧 甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以曱苯-乙酸乙酯-甲酸(5 : 4 : 1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在紫外燈光(254nm (納米)) 下觀察薄層色譜情況，如圖2所示。
從圖2可以看出，在原兒茶酸熒光斑點(diǎn)附近，有大量的其他熒光 物質(zhì)存在，能對(duì)原兒茶酸熒光斑點(diǎn)判斷產(chǎn)生干擾。
實(shí)施例8
本實(shí)施例利用的原兒茶酸鑒別原理為原兒茶酸易溶于極性較大 的溶劑，所以先用曱醇進(jìn)行提?。凰玫奶崛∥镉盟幚?，去掉一部 分雜質(zhì)；利用酸性條件下，原兒茶酸易溶于乙醚的性質(zhì)，用乙醚萃取 出水溶液中的原兒茶酸；將原兒茶酸點(diǎn)于硅膠GF254板上，展開(kāi)，取出， 晾干，置紫外光燈下(254nm (納米))下檢視，在原兒茶酸色譜相應(yīng) 的位置上，顯一定顏色的熒光斑點(diǎn)。
具體操作如下取供試樣品5片[腦心清片規(guī)格(1)]或3片[腦 心清片規(guī)格(2)]或0. 2g(柿葉提取物)，研細(xì)，加甲醇"ml,超聲 處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml，充分?jǐn)嚢枋谷芙猓瑸V 過(guò)，濾液加鹽酸O. 5ml，用無(wú)水乙醚30ml振搖提取，分取乙醚層，揮 干，殘?jiān)訒醮糽ml使溶解，作為供試品溶液(本實(shí)施例中，腦心清 片供試品溶液平行制備三次，得供試品4 6;柿葉提取物供試品溶液 一份，簡(jiǎn)稱柿葉提取物供試品)。另取柿葉對(duì)照藥材8g,同法制成對(duì)照 藥材溶液(簡(jiǎn)'稱柿葉對(duì)照藥材)。再取原兒茶酸對(duì)照品，加甲醇制成每 lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液(原兒茶酸對(duì)照品)。照薄層色譜 法(附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種l(Vl,分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄 層板上，以二氯甲烷-曱醇-曱酸(10 : 0.3: 0.3)(或者為10: 0.2: 0. 4或者為10: 0.4: 0. 2等都是可以接受的)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出， 晾干，置紫外光燈(254nm)下抬3見(jiàn)。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及 對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
具體如圖3所示。從圖3可以看出，本發(fā)明所提供的方法可以清晰鑒別腦心清片和柿葉才是取物。
實(shí)施例9
本實(shí)施例選擇齊墩果酸進(jìn)行鑒別的依據(jù)齊墩果酸在柿葉、柿葉 提取物和腦心清片中的含量較高，顯色穩(wěn)定，且有一定的抗心腦血管 疾病的活性，因此，將齊墩果酸作為薄層的鑒別指標(biāo)成分之一，薄層 鑒別的主要原理是齊墩果酸易溶于甲醇；10%硫酸乙醇溶液是該類物 質(zhì)的常用顯色劑；105。C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰也是該類物質(zhì)通用的顯色 方法。
具體操作如下取供試樣品5片[腦心清片規(guī)格(1 )]或3片[腦 心清片規(guī)格(2)]或0. 2g(柿葉提取物)，研細(xì)，加曱醇25ml,超聲 處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)訒醮糽ml使溶解，作為供試品 溶液(本實(shí)施例中，腦心清片供試品溶液平行制備三次，得供試品7~ 9;制備柿葉提取物供試品溶液一次)。另取柿葉對(duì)照藥材2g，同法制 成對(duì)照藥材溶液。再取齊墩果酸對(duì)照品，加甲醇制成每lml含lmg的 溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述 三種溶液各10pl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以曱苯-乙酸乙酯-曱酸(7: 2: 0. 3)(或者為7: 1: 0. 4或者為7: 3: 0. 2等都是可 以接受的)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距12cm,取出，晾干，噴以10%硫酸 乙醇溶液，在105。C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照 藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
具體如圖4所示。從圖4可以看出，本發(fā)明所提供的方法可以清 晰鑒別腦心清片和柿葉提取物。
本發(fā)明的實(shí)施例中薄層板自制過(guò)程為
1. 配置好0. 8°/ 的羧曱基纖維素鈉水溶液。
2. 取薄層硅膠(硅膠G或者硅膠GF254)約100g,加入0. 8°/。的羧甲 基纖維素鈉水溶液約300ml,用玻璃棒充分?jǐn)嚢枋蛊浠旌暇鶆?，得到?乳濁液。
3. 用鋪板器將乳濁液平鋪于數(shù)塊備好的玻璃板上，晾干，將晾干 的硅膠板放入烘箱，ll(TC溫度下烘約30min (分鐘)，拿出，放冷，備
ii用。
本發(fā)明對(duì)選擇原兒茶酸和齊墩果酸兩種成分對(duì)腦心清片進(jìn)行鑒 別，與原標(biāo)準(zhǔn)中利用三種有機(jī)酸(糠酸、原兒茶酸、琥珀酸)對(duì)腦心 清片進(jìn)行鑒別的方法相比，選擇的鑒別成分更加合理；本發(fā)明還對(duì)供 試品溶液的制備過(guò)程進(jìn)行了優(yōu)化，優(yōu)化后的供試品色譜中，；險(xiǎn)測(cè)成分 的斑點(diǎn)清晰可見(jiàn)，未見(jiàn)其它成分的干擾，使色譜鑒別更加明顯且重復(fù)
性好；增加利用柿葉對(duì)照藥材進(jìn)行鑒別，^f吏鑒別方法更加合理和完整。 綜上所述，本發(fā)明所提供的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒 別方法與現(xiàn)有技術(shù)相比，可以更加準(zhǔn)確地對(duì)腦心清片和柿葉才是取物進(jìn) 行鑒別。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng) 域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出 若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1、一種腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別方法，包括如下步驟a)將供試樣品磨碎研細(xì)，加入甲醇并用超聲波處理，過(guò)濾，將濾液蒸干，殘?jiān)铀?，充分?jǐn)嚢枞芙?，濾過(guò)，濾液加鹽酸，用無(wú)水乙醚振搖提取，分取乙醚層，揮干，殘?jiān)蛹状既芙?，作為第一供試品溶液；b)將柿葉對(duì)照藥材磨碎研細(xì)，加入甲醇并用超聲波處理，過(guò)濾，將濾液蒸干，殘?jiān)铀?，充分?jǐn)嚢枞芙?，濾過(guò)，濾液加鹽酸，用無(wú)水乙醚振搖提取，分取乙醚層，揮干，殘?jiān)蛹状既芙?，作為第一?duì)照藥材溶液；c)取原兒茶酸對(duì)照品，加甲醇溶解，作為第一對(duì)照品溶液；d)對(duì)第一供試品溶液、第一對(duì)照藥材溶液和第一對(duì)照品溶液進(jìn)行薄層色譜分析，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，如果不能顯相同顏色的斑點(diǎn)，則供試品不為腦心清片或柿葉提取物。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別 方法，其特征在于，所述超聲波處理的時(shí)間為20分鐘以上。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別 方法，其特征在于，所述超聲波處理的時(shí)間為30分鐘。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別 方法，其特征在于，步驟d)的具體操作為'分別吸取第一供試品溶液、第一對(duì)照藥材溶液和第一對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干， 置紫外燈254納米下觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照 品色鐠相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
5、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別 方法，其特征在于，所述展開(kāi)劑為二氯曱烷、曱醇和曱酸的混合物。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別 方法，其特征在于，所述二氯甲烷、曱醇和甲酸的體積比為9 ~ 11: 0. 2 ~
7、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別 方法，其特征在于，所述二氯曱烷、曱醇和曱酸的體積比為10: 0.3: 0. 3。
8、 根據(jù)權(quán)利要求1~7所述的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜 鑒別方法，其特征在于，步驟d)中，供試品色語(yǔ)中，在與對(duì)照藥材 及對(duì)照品色語(yǔ)相應(yīng)的位置上，如果顯相同顏色的斑點(diǎn)，則進(jìn)4亍如下 步驟e) 取供試樣品，磨碎研細(xì)，加入甲醇并用超聲波處理，過(guò)濾，將 濾液蒸干，殘?jiān)訒醮?，充分?jǐn)嚢枞芙猓鳛榈诙┰嚻啡芤?；f) 將柿葉對(duì)照藥材磨碎研細(xì)，加入曱醇并用超聲波處理，過(guò)濾， 將濾液蒸干，殘?jiān)訒醮?，充分?jǐn)嚢枞芙?，作為第二?duì)照藥材溶液；g) 再取齊墩果酸對(duì)照品，加甲醇溶解，作為第二對(duì)照品溶液；h) 將第二供試品溶液、第二對(duì)照藥材溶液和第二對(duì)照品溶液進(jìn) 行薄層色譜分析，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的 位置上，如果不能顯相同顏色的斑點(diǎn)，則供試品不為腦心清片。
9、 根據(jù)權(quán)利要求8所述的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別 方法，其特征在于，步驟h)的具體操作為分別吸取第二供試品溶液、第二對(duì)照藥材溶液和第二對(duì)照品溶 液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以展開(kāi)劑展開(kāi)，取出，晾干，噴 以10。/。碌u酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，在105。C加熱至斑點(diǎn)顯 色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上， 顯相同顏色的斑點(diǎn)。
10、 根據(jù)權(quán)利要求9所述的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒 別方法，其特征在于，所述展開(kāi)劑為曱苯、乙酸乙酯和甲酸的混合物。
11、 根據(jù)權(quán)利要求10所述的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒 別方法，其特征在于，所述曱苯、乙酸乙酯和曱酸的體積比為6~8: 1~ 3: 0.2-0.4。
12、 根據(jù)權(quán)利要求11所述的腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別方法，其特征在于，曱苯、乙酸乙酯和曱酸的體積比為7: 2: 0.3。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種腦心清片和柿葉提取物的薄層色譜鑒別方法，包括如下步驟a)將供試樣品磨碎研細(xì)，加入甲醇并用超聲波處理，過(guò)濾，將濾液蒸干，殘?jiān)铀?，充分?jǐn)嚢枞芙?，濾過(guò)，濾液加鹽酸，用無(wú)水乙醚振搖提取，分取乙醚層，揮干，殘?jiān)蛹状既芙?，作為第一供試品溶液；b)另將柿葉對(duì)照藥材進(jìn)行與步驟a)相同的操作，作為第一對(duì)照藥材溶液；c)再取原兒茶酸對(duì)照品，加甲醇溶解，作為第一對(duì)照品溶液；d)將第一供試品溶液、第一對(duì)照藥材溶液和第一對(duì)照品溶液進(jìn)行薄層色譜分析。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，如果不能顯相同顏色的斑點(diǎn)，則供試品不為腦心清片或柿葉提取物。
文檔編號(hào)A61K36/44GK101658546SQ200910171358
公開(kāi)日2010年3月3日 申請(qǐng)日期2009年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月27日
發(fā)明者幼 利, 尹仁杰, 張小雪, 李楚源, 挺 林, 梁敬儀, 王德勤, 杰 羅, 薇 陳 申請(qǐng)人:廣州白云山和記黃埔中藥有限公司