專利名稱：：包含旋復花的組合物的新用途的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種組方在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途，本發(fā)明還涉及包含所述組方的組合物制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途，本發(fā)明還涉及由所述組方獲得的提取物在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途，更具體地涉及所述組合物的總黃酮部位提取物在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途。
背景技術：
：旋復花，代赭石，竹葉和淡豆豉均為常用的無毒中藥材。到目前未見上述四種組分在一起的抗創(chuàng)傷后應激障礙、抗焦慮作用的報告。旋復花為菊科植物旋復花(Inulabrita皿icaLvar.chinensis(Rupr.)Reg.)、線口十方定復花(InulalinariaefoliaTurcz.)或大花旋或大花旋復花(I皿labrita皿icaL.)等的頭狀花序，性咸、溫，入肺、肝、胃經(jīng)，具有消痰、下氣、軟堅、行水的功效。代赭石為三方晶系氧化物類礦物赤鐵礦(Haematit咖)的礦石，性苦、寒，歸肝、心經(jīng)，具有平肝潛陽、重鎮(zhèn)降逆、涼血止血的功效。淡豆豉為豆科植物大豆(Glycinemax(L.)Merr.)的成熟種子(黑色者)經(jīng)發(fā)酵加工而成的制品，性辛、甘、微苦、涼，歸肺、胃經(jīng)，具有解表、除煩的功效。竹葉為禾本科植物淡竹Phyllostachysnigra(Xodd.)M皿rovar.henonis(Mitf.)St即fexRendle或苦竹(Pleioblastusamarus(Keng)Kengf.)的葉，性甘淡、寒，入心、肺、膽、胃經(jīng)，具有清熱除煩、生津利尿的功效。該組合物中除代赭石以外的其它三味藥均富含黃酮類成分，旋復花和竹葉主含黃酮、黃酮醇及其苷類，淡豆豉主含異黃酮及其苷類，且提取過程中與代赭石作用可能形成黃酮-金屬絡合物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明人現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)由旋復花、代赭石、竹葉和淡豆豉組成的組合物總黃酮部位提取物具有抗創(chuàng)傷后應激障礙、抗焦慮作用，本發(fā)明基于上述發(fā)現(xiàn)得以完成。因此，在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明涉及旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途，特別是在制備用于抗創(chuàng)傷后應激障礙和/或抗焦慮的藥物中的用途。在本發(fā)明第一方面的一個實施方案中，所述旋復花為100重量份、所述代赭石為50至200重量份、所述竹葉為25至75重量份、和所述淡豆豉為25至75重量份。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述旋復花為100重量份、所述代赭石為75至150重量份、所述竹葉為40至60重量份、和所述淡豆豉為40至60重量份。在一個更優(yōu)選的實施方案中，所述旋復花為100重量份、所述代赭石為100重量份、所述竹葉為50重量份、和所述淡豆豉為50重量份。在本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明涉及一種組合物特別是藥物組合物在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途，所述組合物包括由旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉組成的活性成分，以及任選的藥學可接受的載體。在本發(fā)明第二方面的一個實施方案中，所述組合物特別是藥物組合物中含有100重量份的旋復花、50至200重量份的代赭石、25至75重量份的竹葉、和25至75重量份的淡豆豉。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述組合物中含有100重量份的旋復花、75至150重量份的代赭石、40至60重量份的竹葉、和40至60重量份的淡豆豉。在一個更優(yōu)選的實施方案中，所述組合物中含有IOO重量份的旋復花、100重量份的代赭石、50重量份的竹葉、和50重量份的淡豆豉。在本發(fā)明第二方面的一個實施方案中，所述組合物特別是藥物組合物可以是將四種藥材通過常規(guī)的方法制得，例如將四種藥材分別或共同粉碎后直接使用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥，或者加入適量的藥學可接受的載體例如蔗糖和/或蜂蜜等，制成例如蜜丸等制劑后使用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥。另外，在本發(fā)明第二方面的一個實施方案中，所述組合物特別是藥物組合物可以是將四種藥材通過常規(guī)的提取之后制得的，例如將四種藥材分別或共同提取之后獲得提取物；該提取物可以就此原樣使用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥，或者可以然后向該提取物中加入或不加入藥學可接受的載體例如蔗糖等，制成例如片劑或膠囊等制劑后使用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥。在本發(fā)明的第三方面，本發(fā)明涉及一種提取物(特別是包含中藥的提取物)在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途，所述提取物由旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉提取得到。在本發(fā)明第三方面的一個實施方案中，所述提取物由100重量份的旋復花、50至200重量份的代赭石、25至75重量份的竹葉、和25至75重量份的淡豆豉提取得到。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述提取物由100重量份的旋復花、75至150重量份的代赭石、40至60重量份的竹葉、和40至60重量份的淡豆豉提取得到。在一個更優(yōu)選的實施方案中，所述提取物由100重量份的旋復花、100重量份的代赭石、50重量份的竹葉、和50重量份的淡豆豉提取得到。在本發(fā)明第三方面的一個實施方案中，所述提取物為旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉混合物的水、C卜4烷基醇或其混合物的提取物。在本發(fā)明第三方面的一個實施方案中，所述提取物中還含有藥學可接受的載體。在本發(fā)明第三方面的一個實施方案中，所述提取物可以是將四種藥材通過常規(guī)的提取之后制得的，例如將四種藥材分別或共同提取之后獲得提取物；該提取物可以就此原樣使用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥，或者可以然后向該提取物中加入或不加入藥學可接受的載體例如蔗糖等，制成例如片劑或膠囊等制劑后使用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥。在本發(fā)明的第四方面，本發(fā)明涉及一種提取物(特別是包含中藥的提取物)在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途，所述提取物中含有20至80重量％的總黃酮，并且所述提取物由旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉提取得到。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述提取物中含有20至70重量％的總黃酮。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述提取物中含有30至60重量％的總黃酮，在一個優(yōu)選的實施方案中，所述提取物中含有30至50重量％的總黃酮。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述提取物中含有30至40重量％的總黃酮。在本發(fā)明第四方面的一個實施方案中，所述提取物由100重量份的旋復花、50至200重量份的代赭石、25至75重量份的竹葉、和25至75重量份的淡豆豉提取得到。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述提取物由100重量份的旋復花、75至150重量份的代赭石、40至60重量份的竹葉、和40至60重量份的淡豆豉提取得到。在一個更優(yōu)選的實施方案中，所述提取物由100重量份的旋復花、100重量份的代赭石、50重量份的竹葉、和50重量份的淡豆豉提取得到。在本發(fā)明第四方面的一個實施方案中，所述提取物為旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉混合物通過水、C卜4烷基醇或其混合物的提取物。在本發(fā)明第四方面的一個實施方案中，所述提取物中還含有藥學可接受的載體。在本發(fā)明第四方面的一個實施方案中，所述提取物可以是將四種藥材通過常規(guī)的提取之后制得的，例如將四種藥材分別或共同提取之后獲得提取物，所得的該提取物中含有20至80重量％的總黃酮；該提取物可以就此原樣使用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥，或者可以然后向該提取物中加入或不加入藥學可接受的載體例如蔗糖等，制成例如片劑或膠囊等制劑后使用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥。在本發(fā)明的各個方面以及各個方面的各個具體實施方案中，所述的提取物可以是各藥材經(jīng)分別提取之后組合而得的。在本發(fā)明各個方面以及各個方面的各個具體實施方案中，所述的提取物可以是各藥材經(jīng)混合然后共同提取而得的。在本發(fā)明各個方面以及各個方面的各個具體實施方案中，所述的提取物可以是任選的一部分藥材共同提取、任選的另一部分藥材單獨提取，然后將各提取物組合而得的。在優(yōu)選的實施方案中，所述的提取物是各藥材經(jīng)混合然后共同提取而得的。根據(jù)本發(fā)明，術語4烷基醇舉例講可是甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、異丁醇、或叔丁醇。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明組合物特別是藥物組合物是以其提取物形式使用的。所述提取物是通過用水，(V4烷基醇或它們的混合物提取旋復花，代赭石，竹葉和淡豆豉的混合物得到的。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明的組合物特別是藥物組合物或其提取物可通過口服或非腸道途徑給藥。適于口服給藥的劑型舉例講有片劑，膠囊，溶液，懸浮液，顆粒劑或丸劑等。適于非腸道途徑如靜脈，皮下或肌內(nèi)給藥的劑型舉例講有注射液。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明組合物特別是藥物組合物中所述的術語"載體"指的是制藥領域常用的藥用賦形劑或藥用輔料，如藥用添加劑，稀釋劑或崩解劑等。本發(fā)明還可以進一步涉及旋復花，代赭石，竹葉和淡豆鼓的提取物，其含有20至80重量％總黃酮，且旋復花代赭石竹葉淡豆豉的重量比為2:2:i:i，所述提取物是通過水、(V4烷基醇或它們的混合物提取法與大孔樹脂柱層析法組合技術提取旋復花，代赭石，竹葉和淡豆鼓的重量比2:2:i:i的混合物得到。本發(fā)明還可以涉及一種產(chǎn)品或組合物(特別是藥物組合物)，其包括由旋復花，代赭石，竹葉和淡豆豉得到的提取物及藥用載體，其中所述提取物含有20至80重量％總黃酮，且旋復花代赭石竹葉淡豆豉的重量比為2:2:i:i，所述提取物是通過水、(V4烷基醇或它們的混合物提取法與大孔樹脂柱層析法組合技術提取旋復花，代赭石，竹葉和淡豆鼓的重量比2:2:i:i的混合物得到。根據(jù)本發(fā)明的任一方面以及各方面的任一具體實施方案，所述的術語"藥物"、"提取物"、"組合物"、"藥物組合物"等，不但可以指代為一種具有藥理和/或生理功能藥品，還可以指代為一種具有藥理和/或生理功能產(chǎn)品，例如健康產(chǎn)品，例如功能性食品或保健食品。因此，根據(jù)本發(fā)明各個方面的主題提及到術語"藥物"、"提取物"、"組合物"、"藥物組合物"等，本領域技術人員可以理解，上述各術語均可以表示欲意用于治療和預防創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥品；也可以表示欲意用于針對已經(jīng)罹患或可能罹患創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥等病癥受試者提供預防、改善和/或好轉等提高健康的作用的產(chǎn)品。在本發(fā)明中，所述的受試者是脊椎動物，優(yōu)選是哺乳動物，更優(yōu)選是人。根據(jù)本發(fā)明的任一方面以及各方面的任一具體實施方案，所述的術語"藥材"、"中藥材"、"中藥"等，它們可以是一種天然來源(例如礦物或植物)材料，它們除了可以具有作為治療的藥理活性作用之外，還可以具有用于預防、調(diào)節(jié)生理功能的作用，當然還可以具有其它本文未列舉的生理作用。根據(jù)本發(fā)明的任一方面以及各方面的任一具體實施方案，所述的術語"治療"和"預防"通常分別是指針對已產(chǎn)生癥狀的疾病或尚未產(chǎn)生癥狀的狀況進行"治療"和"預防"。本發(fā)明所用的各個術語具有本領域技術人員所理解的一般含義。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明提取物中總黃酮可通過下面方法定性并定量測定定件采用鹽酸_鎂粉還原反應取少量樣品溶于熱甲醇中，加入少許鎂粉振搖滴加濃鹽酸后，升起的泡末呈紅色。顯示樣品中含有黃酮、黃酮醇或雙氫黃酮醇。含暈測定以蘆丁為標準品，具體方法如下:1.戸丁標準液的配制準確稱取干燥恒重的戸丁標準品0.0752g，用30%乙醇溶解并定容至250ml，搖勻得濃度為0.3008g/L的標準液。2.工作曲線的測定分別取上述蘆丁標準溶液0.4、0.8、1.6、2.4、3.2ml于5只10ml容量瓶中，用30%乙醇補充至5ml，向各容量瓶中分別加入O.28ml的5%亞硝酸鈉，搖勻，放置5min后，向各容量瓶中分別加入O.28ml的10%硝酸鋁，6min后向各容量瓶中分別加入2ml的lmol/L的NaOH溶液，混勻，用30%乙醇稀釋至刻度，10min后于510nm處比色測定，試劑為空白參比。3.黃酮含量測定稱取含總黃酮的提取物0.1000g，用30%乙醇溶液溶解并定容至100ml，搖勻得濃度為1.000g/L的溶液，移取lml溶液于10ml容量瓶中，按上面2方法操作，測定吸光度，以工作曲線所得標準方程計算黃酮含量。盡管以上所述定性和定量方法是以提取物作為示例，但是，本領域技術人員根據(jù)上述方法步驟可以容易地對本發(fā)明的組合物以及由本發(fā)明提取物或組合物進一步配制成的制劑中所含總黃酮進行定性和定量分析。下面的實施例用來進一步說明本發(fā)明，但其不意味著對本發(fā)明的任何限制。^MMl^旋復花、代赭石、竹葉和淡豆豉混合物的提取物制備取旋復花1200g、代赭石1200g、竹葉600g、淡豆豉600g，加入28.8L60%乙醇溶液回流提取2小時，提取2次，提取液用紗布粗過濾后，濾紙過濾，減壓濃縮或薄膜蒸發(fā)濃縮后，冷凍干燥得到提取物粉末230g。用本發(fā)明所述總黃酮測定方法和/或比色法測定本實施例制備的提取物中總黃酮含量為32.3重量％。6實施例2:旋復花,代赭石，竹葉和淡豆豉混合物的總黃酮提取物制備取旋復花2000g、代赭石2000g、竹葉1000g、淡豆豉1000g，加入60%乙醇回流提取2遍(V/W二8:1)，過濾、減壓濃縮，冷凍干燥得到提取物383g。用水分散(藥材水(1:1))，離心，棄去沉淀；水層采用HP-20大孔樹脂(每4L樹脂的上樣量相當于3kg藥材)水洗5個柱體積，棄去水洗脫液，40%乙醇洗脫至洗脫液呈淡黃色，40%乙醇洗脫液減壓濃縮，冷凍干燥得到含總黃酮的提取物粉末130.8g，產(chǎn)率為2.18%。用本發(fā)明所述總黃酮測定方法和/或比色法測定本實施例制備的提取物中總黃酮含量為70.6重量％。^ML^不同來源旋復花，代赭石，竹葉和淡豆豉藥材混合物的總黃酮提取物制備按實施例2的方法對另外5批不同來源的藥材混合物提取得到總黃酮提取物，用本發(fā)明所述總黃酮測定方法和/或比色法測定本實施例制備的提取物中總黃酮含量分別為68.2、42.5、78.3、57.5和60.8重量％。^MLi^旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉的組合取旋復花100g、代赭石50g、竹葉25g、淡豆豉75g，分別粉碎，混合，即得。參考本發(fā)明所述總黃酮測定方法和/或比色法測定本實施例所得樣品中的總黃酮含量；樣品處理時使用30%乙醇浸泡過夜，然后超聲處理10小時；總黃酮含量為45.2重量％。^MM^旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉的組合取旋復花100g、代赭石200g、竹葉75g、淡豆豉25g，分別粉碎，混合，再與適量蔗糖和蜂蜜混合，制成蜜蜂丸，即得。參考本發(fā)明所述總黃酮測定方法和/或比色法測定本實施例所得樣品中的總黃酮含量；樣品處理時使用30%乙醇浸泡過夜，然后超聲處理10小時；總黃酮含量為27.8重量％。^MM^旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉的組合取旋復花100g、代赭石50g、竹葉25g、淡豆豉25g，分別粉碎，混合，即得。參考本發(fā)明所述總黃酮測定方法和/或比色法測定本實施例所得樣品中的總黃酮含量；樣品處理時使用30%乙醇浸泡過夜，然后超聲處理10小時；總黃酮含量為49.8重量％。^MMX^旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉的組合取旋復花100g、代赭石200g、竹葉75g、淡豆豉75g，分別粉碎，混合，即得。參考本發(fā)明所述總黃酮測定方法和/或比色法測定本實施例所得樣品中的總黃酮含量；樣品處理時使用30%乙醇浸泡過夜，然后超聲處理10小時；總黃酮含量為20.6重量％。^MM^旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉的組合取旋復花100g、代赭石100g、竹葉75g、淡豆豉25g，分別粉碎，混合，即得。參考本發(fā)明所述總黃酮測定方法和/或比色法測定本實施例所得樣品中的總黃酮含量；樣品處理時使用30%乙醇浸泡過夜，然后超聲處理10小時；總黃酮含量為37.5重量％。藥理學實驗例1:總黃酮提取物抗創(chuàng)傷后應激障礙作用評價1、實驗材料:1)實驗動物SD大鼠，雄性，SPF級，初體重180-220g，購自維通利華實驗動物有限公司，許可i正:SCXK(京)2007-0001。2)受試樣品實施例2提取物。3)實驗儀器電擊裝置、開場箱、大鼠高架十字迷宮、秒表等。2、實驗方法:1)大鼠單程長時應激(SPS)模型的建立采用2005年日本文部省召開的國際PTSD科學會議確定的關于大鼠PTSD模型-SPS。具體步驟包括大鼠固定2h(置于圓錐形的聚乙烯固定盒中，僅尾巴可以活動)后進行強迫游泳(游泳缸為24厘米的半徑，50厘米的高度)，水深為缸高度的2/3，水溫(24°C)，時間為20min。恢復15分鐘后，暴露于麻醉乙醚中直至失去知覺。2)模型制備完后的第二天開始慢性藥物處理2周(實施例2提取物25mg/kg，i.g.，1次/天)。3)第14天開始進行行為學的檢測。3.1、開場活動的檢測方法采用傳統(tǒng)圓形開場，直徑80cm，高30cm，目測觀察大鼠5min的活動情況。觀察指標包括主要是跨格數(shù)。實驗在弱光照明的條件下進行。實施例2提取物(25mg/kg，1.g.，1次/天，連續(xù)14天)，末次給藥在實驗前l(fā)h。結果見表1。3.2、僵直行為(freezingbehavior)的觀察方法將大鼠置于電擊裝置中[通過有蓋的20X10X10cm3的籠子作為不可逃避的電擊箱，各箱均通過一主控器與微機相連，箱底部的不銹鋼柵(1.5cm間隔)傳送無法逃避的足部電擊]3min后，給予不可逃避的足底電擊l次(0.8mA，10s)。24h后將大鼠再次置于接受過電擊的裝置中，檢測5min內(nèi)僵直行為時間(指動物除了呼吸完全不動的時間)。實施例2提取物(25mg/kg，i.g.，1次/天，連續(xù)17天)，末次給藥在實驗前l(fā)h。結果見表2。3.3、大鼠高架十字迷宮實驗(elevatedplus-mazetest,EPM)實驗裝置十字迷宮兩個50X10cm的相對開臂(openarms)和兩個50X10X40cm的相對閉臂(closedarms)，閉臂上部是敞開的。迷宮中央有一10X10cm的開闊部，迷宮離地面50cm。方法為了提高大鼠入臂總次數(shù)，避免大鼠躲在閉臂，先將大鼠置于開場(openfield)中活動5min后再放入迷宮。將大鼠置于迷宮中央，頭朝開臂，觀察者距離迷宮中心至少lm。分別記錄實驗期(通常為5min)內(nèi)大鼠在閉臂滯留時間(進出臂標準應嚴格界定，以四肢全部入臂為準)。實施例2提取物(25mg/kg，i.g.，1次/天，連續(xù)21天)，末次給藥在實驗前l(fā)h。結果見表3。3、數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理和結果:實驗結果以均值±標準差表示，組間差異比較采用單因素方差分析后進行t檢驗。表1.實施例2提取物連續(xù)14天P.0.對SPS大鼠開場活動的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注結果以^土s表示。表2.實施例2提取物對SPS大鼠僵直行為的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注結果以^土s表示；"P<0.01與正常組比較；#P<0.05，與SPS模型組比較。表3.實施例2提取物SPS大鼠高架十字迷宮閉臂停留時間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注結果以^土s表示；'*P<0.05，與正常組比較；#P<0.05，與SPS模型組比較。4、實驗結論研究表明，在SPS大鼠模型上，本發(fā)明藥理學實驗例1表明，本發(fā)明提取物連續(xù)灌胃在大鼠僵直行為、高架十字迷宮上均顯示具有抗創(chuàng)傷后激障礙的活性。藥理學實驗例2:總昔酮提取物杭焦虎作用評價1、實驗材料1)實驗動物ICR小鼠，雄性，SPF級，初體重18-20g，購自維通利華實驗動物有限公司，許可i正:SCXK(京)2007-0001。Wistar大鼠，雄性，SPF級，初體重180-220g，軍事醫(yī)學科學院動物中心提供。2)受試樣品實施例2提取物、安定注射液(DZP，為天津金耀氨基酸有限公司)。3)實驗儀器Model-102型大鼠焦慮儀、小鼠明暗穿箱、小鼠攝食箱、秒表等。2、輔誠戰(zhàn)果:1)大鼠Vogel飲水焦慮模型大鼠禁水24h后單個放入Model-102型焦慮儀(美國Lafayette公司生產(chǎn))進行飲水訓練，儀器自動記錄3min內(nèi)大鼠舔水次數(shù)，淘汰舔水次數(shù)少于300的動物，其余動物繼續(xù)禁水24h。正式實驗時(共禁水48h)，再次將大鼠放入焦慮儀，大鼠每舔水20次給予l次電擊(0.25mA，持續(xù)2s)，記錄大鼠舔水次數(shù)。不同劑量的實施例2提取物連續(xù)4天每天1次灌胃給藥(P.0.)，末次給藥在正式實驗前l(fā)h;DZP2mg/kg在正式實驗前30min單次腹腔注射(ip)。結果見表4。2)小鼠明暗箱焦慮模型有機玻璃小鼠明暗穿箱(40X20X20cm)，由明箱和暗箱兩部分組成，暗箱占1/3，明箱占2/3。穿箱上方放置一日光燈(60W)，使明箱內(nèi)照度為8301x，暗箱內(nèi)照度為0。明箱與暗箱由一門洞(5X5cm)連通。實驗時，將小鼠背向暗箱門口放入明箱中央，記錄5min內(nèi)小鼠從暗箱返回明箱的次數(shù)(穿箱次數(shù))。不同劑量的實施例2提取物連續(xù)4天每天1次P.0.，末次給藥在實驗前l(fā)h;DZPlmg/kg在實驗前30min單次ip。結果見表5。3)小鼠新奇抑制攝食模型實驗在小鼠不熟悉的安靜環(huán)境下進行，小鼠攝食箱為白色有機玻璃箱(30X35X25cm)，箱底中央放入6塊大小相等的普通小鼠塊料。小鼠禁食24h后放入攝食箱，記錄動物從入箱到開始啃咬咀嚼食物的時間，觀察總時程為5min。不同劑量的實施例2提取物連續(xù)12天每天1次P.0.，末次給藥在實驗前l(fā)h;DZPlmg/kg在實驗前30min單次ip。結果見表6。3、數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理和結果:實驗結果以均值±標準差表示，組間差異比較采用單因素分析后進行T檢驗。表4.實施例2提取物連續(xù)4天P.0.對大鼠Vogel飲水次數(shù)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注結果以x士s表示rP<0.05，**P<0.01與溶劑組比較。表5.實施例2提取物連續(xù)4天P.0.對小鼠明暗箱行為的影響劑量例數(shù)穿箱次數(shù)(mg/kg)n(次)溶劑—106.3±2.25096.7±1.3實施例2提取物10099.1±2.9*200106.9±3.7DZP1109.4士3.8*注結果以;士s表示；*P<0.05，與溶劑組比較。表6.實施例2提取物連續(xù)12天P.0.對小鼠新奇抑制攝食行為的影響藥物劑量例數(shù)攝食潛伏期(mg/kg)n(s)溶劑—11106.0±46.5實施例2提取物501065.3±30.8*10010101.9±66.720010112.3±72.3DZP11142.2土21.9**注結果以x土s表示rP<0.05，**P<0.01與溶劑組比較。4、實驗結論:WO5]研究表明，本發(fā)明藥理學實驗例2表明，本發(fā)明提取物連續(xù)口服在大鼠Vogel飲水、小鼠明暗穿箱和小鼠新奇抑制攝食模型上均顯示具有抗焦慮活性。藥理學實驗例3:總昔酮提取物杭創(chuàng)傷后應激障礙作用評價1、實驗材料1)實驗動物SD大鼠，雄性，SPF級，初體重180-220g，購自維通利華實驗動物有限公司，許可證SCXK(京)2007-0001。2)受試樣品實施例7提取物。3)實驗儀器電擊裝置、開場箱、大鼠高架十字迷宮、秒表等。2、實驗方法:1)動物模型制備方法同藥理學實驗例1。2)模型制備完后的第二天開始慢性藥物處理2周(實施例7提取物50mg/kg，i.g.，l次/天)。3)第14天開始進行行為學的檢測。3.1、開場活動的檢測檢測方法同藥理學實驗例1。實施例7提取物50mg/kg，i.g.，1次/天，連續(xù)14天)，末次給藥在實驗前l(fā)h。結果見表7。3.2、僵直行為(freezingbehavior)的觀察檢測方法同藥理學實驗例3。實施例7提取物(50mg/kg，i.g.，1次/天，連續(xù)17天)，末次給藥在實驗前l(fā)h。結果見表8。3.3、大鼠高架十字迷宮實驗(elevatedplus-mazetest,EPM)實驗裝置及檢測方法同藥理學實驗例1。實施例7提取物(50mg/kg，i.g.，1次/天，連續(xù)21天)，末次給藥在實驗前l(fā)h。結果見表9。3、籠鄉(xiāng)充i備頃禾幅果:實驗結果以均值±標準差表示，組間差異比較采用單因素方差分析后進行t檢驗。表7.實施例7提取物連續(xù)14天P.0.對SPS大鼠開場活動的影響藥物劑量例數(shù)跨格數(shù)(mg/kg)n(次)正常組-10100.2±22.5SPS模型組1197.0±25.0SPS+實施例7提取物501098.4±26.3注結果以^土s表示。表8.實施例7提取物對SPS大鼠僵直行為的影響藥物劑量(mg/kg)例數(shù)11僵直時間(秒)正常組-10164.0±73.4SPS模型組11216.2土60.6"SPS+實施例7提取物5010161.3±63.6##注結果以^土s表示；"P<0.01與正常組比較？表9.實施例7提取物SPS大鼠高架十字迷宮閉臂f'P〈0.01，與SPS模型組比較。留時間的影響12<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注結果以x土s表示,P<0.05，與正常組比較；#P<0.05，與SPS模型組比較。4、實驗結論:研究表明，在SPS大鼠模型上，本發(fā)明藥理學實驗例3表明，本發(fā)明提取物連續(xù)灌胃在大鼠僵直行為、高架十字迷宮上均顯示具有抗創(chuàng)傷后應激障礙的活性。4:總、HB^是耳M勿杭焦虎作用評價1、實驗材料1)實驗動物ICR小鼠，雄性，SPF級，初體重18-20g，購自維通利華實驗動物有限公司，許可i正:SCXK(京)2007-0001。Wistar大鼠，雄性，SPF級，初體重180-220g，軍事醫(yī)學科學院動物中心提供。2)受試樣品實施例7提取物、安定注射液(DZP，為天津金耀氨基酸有限公司)。3)實驗儀器Model-102型大鼠焦慮儀、小鼠明暗穿箱、小鼠攝食箱、秒表等。2、實驗方法與結果:[OMO]1)大鼠Vogel飲水焦慮模型試驗方法同藥理學實施例2。不同劑量的實施例7提取物連續(xù)4天每天1次灌胃給藥(P.0.)，末次給藥在正式實驗前l(fā)h;DZP2mg/kg在正式實驗前30min單次腹腔注射(ip)。結果見表IO。2)小鼠明暗箱焦慮模型試驗方法同藥理學實施例2。不同劑量的實施例7提取物連續(xù)4天每天1次P.0.，末次給藥在實驗前l(fā)h;DZPlmg/kg在實驗前30min單次ip。結果見表11。3)小鼠新奇抑制攝食模型試驗方法同藥理學實施例2。不同劑量的實施例7提取物連續(xù)12天每天1次P.0.，末次給藥在實驗前l(fā)h;DZPlmg/kg在實驗前30min單次ip。結果見表12。3、數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理和結果:實驗結果以均值±標準差表示，組間差異比較采用單因素分析后進行T檢驗。表10.實施例7提取物連續(xù)4天P.0.對大鼠Vogel飲水次數(shù)的影響13<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表11.實施例7提取物連續(xù)4天P.0.對小鼠明暗箱行為的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表12.實施例7提取物連續(xù)12天P.0.對小鼠新奇抑制攝食行為的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注結果以x士s表示；*P<0.05，P<0.01與溶劑組比較。4、實驗結論:研究表明，本發(fā)明藥理學實驗例4表明，本發(fā)明提取物連續(xù)口服在大鼠Vogel飲水、小鼠明暗穿箱和小鼠新奇抑制攝食模型上均顯示具有抗焦慮活性。權利要求旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途。2.權利要求l的用途，其中所述旋復花為100重量份、所述代赭石為50至200重量份、所述竹葉為25至75重量份、和所述淡豆豉為25至75重量份。3.—種組合物在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途，所述組合物包括由旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉組成的活性成分，以及任選的藥學可接受的載體。4.權利要求3的用途，其中所述組合物中含有100重量份的旋復花、50至200重量份的代赭石、25至75重量份的竹葉、和25至75重量份的淡豆豉。5.—種提取物在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途，所述提取物由旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉提取得到。6.權利要求5的用途，其中所述提取物由100重量份的旋復花、50至200重量份的代赭石、25至75重量份的竹葉、和25至75重量份的淡豆豉提取得到。7.權利要求5或6的用途，其中所述提取物為旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉混合物的水、C卜4烷基醇或其混合物的提取物。8.—種提取物在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途，所述提取物中含有20至80重量％的總黃酮，并且所述提取物由旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉提取得到。9.權利要求8的用途，其中所述提取物由100重量份的旋復花、50至200重量份的代赭石、25至75重量份的竹葉、和25至75重量份的淡豆豉提取得到。10.權利要求8或9的用途，其中所述提取物為旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉混合物的水、C卜4烷基醇或其混合物的提取物。全文摘要本發(fā)明涉及旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉在制備用于預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥的藥物或產(chǎn)品中的用途。本發(fā)明還涉及包括由旋復花、代赭石、竹葉、和淡豆豉組成的活性成分的組合物，以及它們的提取物。根據(jù)本發(fā)明的用途以及所述組合物可以有效地用于臨床預防和/或治療創(chuàng)傷后應激障礙和/或焦慮癥。文檔編號A61P25/22GK101780224SQ20091000081公開日2010年7月21日申請日期2009年1月16日優(yōu)先權日2009年1月16日發(fā)明者于能江,姚佳志,張有志,張黎明,李云峰,袁莉,趙楠,趙毅民,陳紅霞申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院毒物藥物研究所