專利名稱：植物蛻皮激素在制備對(duì)代謝綜合征有效的組合物中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及使用純植物蛻皮激素或以提取物形式提供的植物蛻皮激素，以制備用于預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物身上的代謝綜合征的組合物。更具體地，根據(jù)本發(fā)明的用途允許尤在腰腹部減少脂肪塊和/或減少其堆積。本發(fā)明還涉及可用來制備這樣的組合物的、濃縮了植物蛻皮激素的植物提取物。本發(fā)明可以有利地被使用在農(nóng)產(chǎn)食品加工領(lǐng)域，從而使食用產(chǎn)品富含植物蛻皮激素，由此制成功能食品或康復(fù)食品。本發(fā)明還用于醫(yī)療領(lǐng)域，例如， 植物蛻皮激素被使用在藥用組合物中。
背景技術(shù)：
無論年齡段和文化如何，如今超重是十分普遍的生理狀態(tài)。這種生理失調(diào)可能引起多種健康并發(fā)癥。例如，代謝綜合征是個(gè)體上與超重相關(guān)的最常見的一種生理紊亂。當(dāng)人在與代謝綜合征相關(guān)的五項(xiàng)臨床指標(biāo)，即臟腑或腹部肥胖、高酯血癥 (hypertriglyceridemie)、動(dòng)脈粥樣硬化異常脂血癥(dyslipidemie atherogene)、高血壓和高血糖中至少具備三項(xiàng)時(shí)，可以判定他患了代謝綜合征(Isomaa等人，2001)。此外，肥胖本身還增加了 II型糖尿病或肥胖型糖尿病以及心血管疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(Rexrode等人， 1998)。已經(jīng)開發(fā)了多種藥物(諸如降壓藥和降血膽固醇藥等)來對(duì)抗心血管疾病在高危人群中的發(fā)病(Foster-khubert等人，2006)。類似地，當(dāng)?shù)陀偷吞堑娘嬍持贫忍幏讲辉僮阋赃M(jìn)行治療時(shí)，糖尿病人可以接受胰島素的攝入。然而，服用藥物雞尾酒結(jié)合嚴(yán)格的飲食制度處方以及必須進(jìn)行的定期的體育鍛煉，由于不會(huì)立即產(chǎn)生療效且必須堅(jiān)持強(qiáng)制性的生活保健，導(dǎo)致大多數(shù)患有代謝綜合征的人感到氣餒，甚至存在發(fā)現(xiàn)代謝綜合征相關(guān)的癥狀復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)(Wasan等人，2005)。因此，患有代謝綜合征的人必須能恢復(fù)生理平衡，從而允許他們不再處于危險(xiǎn)中， 尤其從心血管疾病發(fā)病角度看，而無需再承受太繁重和/或太強(qiáng)制的治療。還必須避免可以導(dǎo)致破壞非脂肪塊與導(dǎo)致代謝綜合征的診斷的全部或部分相關(guān)癥狀的發(fā)生(Unger， 2003)。以功能食品和食品補(bǔ)充劑進(jìn)行補(bǔ)充的平衡飲食允許對(duì)超重哺乳動(dòng)物的健康狀況起作用并避免患上代謝綜合征。已經(jīng)開發(fā)了多種食品補(bǔ)充劑或功能食品，以便有利于超重哺乳動(dòng)物的減重(Saper等人，2004)并預(yù)防心血管疾病和糖尿病的發(fā)病(McWorther， 2001)。目前市場(chǎng)上的大多數(shù)食用產(chǎn)品顯得對(duì)治療腹部肥胖功效不足，且在某些情況下，其還顯示出毒性(Pittle等人，200 。因此必須鑒定出已存在于哺乳動(dòng)物飲食中的新天然分子，從而開發(fā)出無毒并且對(duì)脂肪塊有效的成分和功能食品。植物蛻皮激素是天然存在的三萜烯類分子，在植物界中相對(duì)豐富，存在于5%的野生植物中(Bcithori和POngr(5cS，2005)。多個(gè)小組已經(jīng)對(duì)植物蛻皮激素的生理作用、特別是存在于哺乳動(dòng)物中的20-羥基蛻皮激素的生理作用進(jìn)行研究。尤其已經(jīng)證明，這些分子促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成(Otaka等人，1968 ；Khimiko等人，2000 ;Syrov，2000)以及動(dòng)物發(fā)育(Purser 和 Baker，1994)。還報(bào)告了其有降血糖(Uchiyama 等人，1970 ；Mironova 和 Kholodova, 1982 ；Takahashi 和 Nishimoto，1992 ；Yang 等人，2001 ；Chen 等人，2004，2006)、 降血脂(Mironova等人，1982 ；Syrov等人，1983)和利膽(Syrov等人，1986)的效果。此夕卜， 這些分子具有抗氧化性(Kuzmenko等人，2001)并且是無毒的。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，定期或不定期地?cái)z入植物蛻皮激素允許至少對(duì)主要在腰腹部處的脂肪塊積累有積極療效。植物蛻皮激素是源自植物的蛻化類固醇(ecdysteroide)。積極療效是指植物蛻皮激素的攝入允許在肥胖的哺乳動(dòng)物身上減少脂肪塊，然而即使遵循的飲食會(huì)有助于脂肪塊的增加，且無論哺乳動(dòng)物正在成長(zhǎng)還是已經(jīng)成年，同樣允許減少脂肪塊的形成。植物蛻皮激素的攝入允許減少脂肪塊，對(duì)高血糖和動(dòng)脈粥樣硬化異常脂血癥也同樣有效，并由此允許預(yù)防或治療超重或肥胖個(gè)體身上的代謝綜合征。一旦身體質(zhì)量指數(shù)(IMC)大于25，個(gè)體就被視為超重，IMC等于或大于30，個(gè)體就被視為肥胖。本發(fā)明因此提出把植物蛻皮激素注入哺乳動(dòng)物用的組合物或藥用組合物中，目的在于消除或避免代謝綜合征的發(fā)生。已經(jīng)獲取的脂肪塊的減少，可以允許某些個(gè)體不再患上代謝綜合征。事實(shí)上，脂肪塊的減少，對(duì)與代謝綜合征相關(guān)的多種癥狀間接有效，且尤其對(duì)腹部肥胖、血糖和動(dòng)脈粥樣硬化異常脂血癥有效。此外，通過允許減少已經(jīng)獲取的脂肪塊和/或避免額外的脂肪獲取，這還可以對(duì)超重者的代謝綜合征發(fā)病具有預(yù)防作用。更一般地，根據(jù)本發(fā)明的植物蛻皮激素的用途使得無論IMC為多少的任何人都能避免腹部脂肪塊的堆積并減少已經(jīng)獲取的腹部脂肪塊，在超重或肥胖個(gè)體的情況下，該用途允許預(yù)防和/或治療代謝綜合征。植物蛻皮激素可以以純的形式或者以或多或少濃縮的植物提取物形式提供。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的濃縮了植物蛻皮激素的植物提取物來自昆諾阿莧(quinoa)的提取物。事實(shí)上，昆諾阿莧是一種濃縮了植物蛻皮激素的天然可食用準(zhǔn)谷物(Zhu等人，2001 ；Dini等人，200 。因此可以通過以下方式補(bǔ)充食用攝入濃縮了植物蛻皮激素的昆諾阿莧提取物， 在食品(例如奶類或飲料)中添加該提取物，或作為例如膠囊劑型食品補(bǔ)足劑來食用該提取物。昆諾阿莧的好處之一在于這是一種以與小麥和蕎麥相同的方式進(jìn)入人類飲食的植物，且其不是藥用植物，可以忽略藥用植物的某些副作用。發(fā)明人對(duì)昆諾阿莧特別感興趣， 不僅因其營(yíng)養(yǎng)屬性，還因?yàn)槠涮烊痪哂写罅康闹参锿懫ぜに?。大多?shù)栽培植物品種似乎喪失了制造植物蛻皮激素的能力，因此，人“傳統(tǒng)”的飲食僅含少量植物蛻皮激素，也就是每天平均少于lmg。目前為止，昆諾阿莧是植物蛻皮激素含量最高的食用植物。昆諾阿莧的種子含有植物蛻皮激素的混合物(Zhu等人，2001)。這些植物蛻皮激素在昆諾阿莧種子的外殼中特別豐富。例如，一份60克(干重)的昆諾阿莧種子含有介于15和20毫克之間的20-羥基蛻皮激素。優(yōu)選地，菠菜和某些蘑菇也可以用來制造濃縮了植物蛻皮激素的植物提取物 (Findeisen E，2004)。本發(fā)明的目的因此在于純的或包含于尤其是濃縮了植物蛻皮激素的植物提取物中的植物蛻皮激素用于實(shí)現(xiàn)旨在減少哺乳動(dòng)物腹部脂肪塊的組合物的用途。特別地，其允許減少已經(jīng)獲得的腹部脂肪塊。尤其在高脂飲食制度的情況下，其也允許減少腹部脂肪塊的蓄積。根據(jù)本發(fā)明，含有植物蛻皮激素的組合物尤其被用在超重或肥胖的個(gè)體，且允許預(yù)防和/或治療代謝綜合征。如此制備的組合物可以被具有代謝綜合征或可能發(fā)展成代謝綜合征的超重的人食用。定期服用根據(jù)本發(fā)明的組合物有利于減少尤其在腰腹部處的脂肪塊。由于超重脂肪減少，并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)也降低了。組合物是指食用產(chǎn)品，例如飲料、奶制品或其它。當(dāng)然，組合物可以是例如以丸劑 (因此含有精確劑量的植物蛻皮激素)形式使用的藥用組合物。藥用組合物是指對(duì)脂肪塊的蓄積以及間接對(duì)代謝綜合征具有治療或預(yù)防性質(zhì)的組合物，因此需或多或少嚴(yán)格地遵醫(yī)囑服用。以丸劑形式食用的優(yōu)點(diǎn)在于，服用者能以某種方式估算出所服用的植物蛻皮激素的量而不論食欲如何。當(dāng)然，結(jié)合飲食攝入植物蛻皮激素，也就是以食用組合物形式食用植物蛻皮激素，允許超越治療的概念，由此不受與特定臨床狀況相關(guān)的約束。所使用的植物蛻皮激素可以例如通過基于含有植物蛻皮激素的植物進(jìn)行提取來獲得。所使用的植物蛻皮激素還可以是合成的植物蛻皮激素。在提取的情況下，所使用的植物提取物優(yōu)選地是食用植物(例如昆諾阿莧)的提取物。食用植物是指在較大的地理區(qū)域內(nèi)主要用作食物或調(diào)味品的植物。相反，藥用植物是指主要因?yàn)槠渲委煿πФ皇褂玫闹参?。本發(fā)明的目的還在于濃縮了植物蛻皮激素的食用植物提取物。優(yōu)選地，在重量上， 所述提取物至少包含1%、優(yōu)選地介于和7%之間、最好介于1. 5%和3%或更優(yōu)選地包含2%的植物蛻皮激素。用以實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的提取物的植物可有利地在昆諾阿莧、菠菜和蘑菇之中選擇。本發(fā)明的目的還在于哺乳動(dòng)物食用的組合物，該組合物包括濃縮了植物蛻皮激素的植物提取物。


圖1 表示隨小鼠經(jīng)受的食譜而變化的以克/天為單位的體重增加的圖；圖2 表示隨小鼠經(jīng)受的食譜而變化的附睪脂細(xì)胞百分比(％ TAE，單位為mg/g體重)的圖；圖3 表示隨小鼠經(jīng)受的食譜而變化的皮下脂肪蓄積(％TASC，單位為mg/g體重) 的圖；圖4:表示隨對(duì)經(jīng)受豬油食譜的小鼠進(jìn)行的治療而變化的以μ m為單位的脂肪細(xì)胞直徑的圖；圖5 示出隨著對(duì)經(jīng)受豬油食譜的小鼠進(jìn)行的治療而變化的脂肪細(xì)胞直徑分布的圖。
具體實(shí)施例方式在本發(fā)明中，提出提供濃縮劑量的純的植物蛻皮激素，或通過濃縮了植物蛻皮激素的植物提取物，以便改善超重人群的健康狀況，或避免因腹部或臟腑脂肪塊的堆積引起的超重。這是代謝綜合征的主要臨床標(biāo)記之一以及心血管疾病和2型糖尿病發(fā)病的危險(xiǎn)因
ο在根據(jù)本發(fā)明的組合物中包含的、允許獲得對(duì)脂肪塊的積極療效的植物蛻皮激素在人體中的極限劑量為0. 3至0. 5mg/kg,即平均每天20至30mg。該估算基于在5mg/kg劑量下對(duì)小鼠(C57B16系小鼠)生理反應(yīng)的檢測(cè)?？紤]到植物蛻皮激素的平均半衰期在人體中比小鼠中更長(zhǎng)，該劑量已經(jīng)根據(jù)藥理對(duì)應(yīng)性因素進(jìn)行了調(diào)整(Koolman，1989)。根據(jù)本發(fā)明，可以通過植物(例如在進(jìn)入個(gè)人日常飲食的食物中所含的昆諾阿莧)提取物的形式來提供植物蛻皮激素的每日劑量。事實(shí)上，在重量上濃縮0. 5%的植物蛻皮激素的4克昆諾阿莧提取物中，可以具有20毫克的植物蛻皮激素。為了從昆諾阿莧種子中獲得相同量的植物蛻皮激素，需要消耗50至100克未加工的昆諾阿莧種子(Dini等人， 2005)。根據(jù)本發(fā)明的昆諾阿莧提取物因此可以比作為提取物來源的昆諾阿莧種子包含多達(dá)50倍的植物蛻皮激素。因此完全可以考慮，通過根據(jù)本發(fā)明的用途來滿足個(gè)體對(duì)植物蛻皮激素的需求，而不受飲食限制，這是因?yàn)槿粘Ｉ钪袉我皇澄飻z入(例如酸奶)可以提供所需的劑量。根據(jù)本發(fā)明的提取物可以在食用組合物的制作時(shí)被添加，從而令最終食品中含有該提取物。因此，在大型或中型商場(chǎng)出售的某些食品或飲料可以含有給定劑量的植物蛻皮激素。還可以在燒煮之前或之后，在食用時(shí)把濃縮了植物蛻皮激素的提取物添加到谷物中。在該情況下，個(gè)人可以調(diào)整植物蛻皮激素的量以符合自身的需求。根據(jù)本發(fā)明的示例，濃縮了植物蛻皮激素的植物提取物被引入日常的食物中，也就是說首先為了營(yíng)養(yǎng)而食用，而不是為了治療或預(yù)防而食用。在量的方面，每個(gè)人每年可以食用幾百公斤同樣的食物。如果在該種日常食用的食物中加入濃縮了植物蛻皮激素的植物提取物，則食用者可以接受足夠劑量的植物蛻皮激素，用以預(yù)防與尤其在腰腹部上脂肪過多積累相關(guān)的超重的出現(xiàn)或其情況的加劇，而無需進(jìn)入治療階段。該濃縮提取物可以被視為一種“適應(yīng)原(adaptogSne)”物質(zhì)(BcSthori M.， PongracsZ.，2005)。適應(yīng)原物質(zhì)是指以下物質(zhì)其不是藥物，但是能改善總體平衡從而使個(gè)體更有抵抗力或在超重情況下更能夠不患上與代謝綜合征相關(guān)的疾病。昆諾阿莧的優(yōu)點(diǎn)在于這是一種易于栽培的植物，它無需特別的養(yǎng)護(hù)，只需要很少的水并能承受極端的栽培條件。而且，來自昆諾阿莧的植物蛻皮激素不會(huì)受熱降解。因此可以用根據(jù)本發(fā)明的昆諾阿莧濃縮提取物來制備用于被加熱或燒煮的食用組合物。當(dāng)然，根據(jù)本發(fā)明另一示例，可以通過攝入包含處方劑量的植物蛻皮激素的藥用組合物向病人提供相同量的植物蛻皮激素，組合物可以例如以膠囊劑或片劑形式交付。I)濃縮了植物蛻皮激素的昆諾阿莧提取物的制備方法的示例I-示例方法A用水進(jìn)行順序提取，在2L的沸水中添加500g昆諾阿莧種子，并使整體在80°C下保持5分鐘。除去水后，在80°C下使用2L乙醇-水(1 1)混合物攪拌20分鐘來實(shí)現(xiàn)第二提取。這樣的順序提取允許消除大量存在于昆諾阿莧種子中使提取物口味變苦的皂草甙提取物(Muir等人，2002)。
將乙醇提取物在miracloth 上過濾、蒸發(fā)干并通過400ml無水乙醇回收，留下大量的不溶性殘余物。將乙醇餾分過濾或離心分離，隨后干燥。色譜分析(HPLC)表明，該提取物在重量上包含2 士 0. 2%的20-羥基蛻皮激素。2-示例方法B將50g的昆諾阿莧種子混合入400ml的蒸餾水中?；旌衔锉灰胛⒉t中在中等功率(800W)下放置5分鐘。隨后依然在中等功率(800W)下在微波爐中，在2. 5分鐘期間使用乙醇GOOml乙
醇)進(jìn)行第二提取。這兩種提取方法允許從每千克被處理的昆諾阿莧種子中獲得在150和200毫克之間的植物蛻皮激素，其中85-90%對(duì)應(yīng)于20-羥基蛻皮激素，其余則對(duì)應(yīng)于結(jié)構(gòu)非常接近的蛻化類固醇。3-示例用于使提取物濃縮的方法C可以通過丁醇-水分離來使方法A (或B)的提取物濃縮，該分離允許除去極性最強(qiáng)的化合物，并在蒸發(fā)丁醇相后，得到濃縮了植物蛻皮激素(在重量上5-7%)的提取物。II)植物蛻皮激素對(duì)脂肪塊堆積的作用的試驗(yàn)研究試驗(yàn)記錄測(cè)試植物蛻皮激素對(duì)3周期間接受脂肪性食譜的小鼠的作用。脂肪性食譜或誘導(dǎo)食譜包括攝入大量呈豬油形式的脂肪性物質(zhì)。在該研究中選擇的小鼠是C57 BL/6雄性小鼠，當(dāng)它們開始接受該誘導(dǎo)食譜時(shí)，年齡為6周。這樣的小鼠對(duì)于分析根據(jù)本發(fā)明的濃縮了植物蛻皮激素的昆諾阿莧提取物對(duì)代謝綜合征的生理參數(shù)的影響而言構(gòu)成有利的研究模式。同時(shí)還測(cè)試這些相同的植物蛻皮激素對(duì)不接受脂肪性食譜(構(gòu)成正常參考食譜) 的小鼠的作用。根據(jù)小鼠接受的食譜和治療，以下表格1表示被研究的小鼠分布。表格1 被研究小鼠的分布
權(quán)利要求
1.植物蛻皮激素用于制備旨在減少哺乳動(dòng)物腹部脂肪塊的組合物的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，通過減少腹部脂肪塊來預(yù)防和/或治療超重或肥胖哺乳動(dòng)物身上的代謝綜合征。
3.根據(jù)權(quán)利要求1至2之一所述的用途，其特征在于，所述植物蛻皮激素被提供為濃縮了植物蛻皮激素的植物提取物的形式。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于，所述植物提取物來自昆諾阿莧。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4之一所述的用途，其特征在于，所述組合物是食品或食品補(bǔ)足劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至4之一所述的用途，其特征在于，所述組合物是藥用組合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6之一所述的用途，其特征在于，所述植物蛻皮激素是20-羥基蛻皮激素。
8.一種濃縮了植物蛻皮激素的植物提取物，其特征在于，植物是在富含植物蛻皮激素的昆諾阿莧或其它食用植物中選擇的。
9.一種供哺乳動(dòng)物食用的組合物，其特征在于，所述組合物包含根據(jù)權(quán)利要求8所述的植物提取物。
10.一種藥用組合物，其特征在于，所述藥用組合物包含根據(jù)權(quán)利要求9所述的植物提取物。
全文摘要
為了減小代謝綜合征對(duì)哺乳動(dòng)物機(jī)體的消極作用，本發(fā)明提出使用植物蛻皮激素，以便減少個(gè)體、尤其是超重個(gè)體身上的脂肪塊。植物蛻皮激素有利地包含在食用組合物中。根據(jù)本發(fā)明，植物蛻皮激素可源自食用植物，例如昆諾阿莧。
文檔編號(hào)A61K36/06GK102231986SQ200880118514
公開日2011年11月2日 申請(qǐng)日期2008年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月30日
發(fā)明者勒內(nèi)·拉豐, 斯坦尼斯拉斯·韋耶 申請(qǐng)人:國(guó)家科學(xué)研究中心, 比奧菲蒂斯研究所簡(jiǎn)單股份有限公司, 皮埃爾與瑪麗·居里大學(xué)