專利名稱：：葶藶子提取物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種葶藶子提取物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：肝癌是我國(guó)常見的惡性腫瘤之一，是我國(guó)位居第二的癌癥"殺手"，常見于中年男性。因其惡性度高、病情進(jìn)展快，病人早期一般沒有什么不適，但一旦出現(xiàn)癥狀就診，就已經(jīng)屬于中晚期。故肝癌的治療難度大，一般患者發(fā)病后生存時(shí)間僅為6個(gè)月，人稱"癌中之王"。根據(jù)調(diào)查結(jié)果表明，目前男性前三位的新發(fā)癌癥分別是肺癌、結(jié)腸癌和鼻咽癌，女性則是乳癌、結(jié)腸癌及肺癌，充分說明了肺癌和結(jié)腸癌在新發(fā)癌癥群中的危害性。從植物中尋找高效低毒的抗癌藥物，成為國(guó)內(nèi)外抗癌藥物研究的重點(diǎn)。有效的抗癌化合物和中草藥有效部位的抗癌復(fù)方制劑都具有重要的臨床價(jià)值。葶藶子為十字花科植物獨(dú)行菜LepidiumapetalumWilld.(習(xí)稱"北葶藶")或播娘蒿DescurainiaSophia(L.)WebbexPrantl.(習(xí)稱"南葶藶")的干燥成熟種子。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為下品。味辛苦，性大寒。歸肺膀胱經(jīng)。為瀉肺平喘，利水消腫藥。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供葶藶子提取物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的葶藶子提取物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用；其中，該提取物是按照如下方法進(jìn)行制備的用水和/或有機(jī)溶劑作為提取劑，從葶藶子中提取得到的。其中，所用有機(jī)溶劑具體可為甲醇、乙醇、石油醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、苯或甲苯中的任意一種或其任意比例的混合物，優(yōu)選體積百分含量為95%的乙醇水溶液。各種常用的提取方法均適用于該方法，優(yōu)選回流提?。惶崛〉臏囟葹?0-100'C;提取次數(shù)至少為l次，優(yōu)選2-3次，每次提取時(shí)間為l-4小時(shí)。葶藶子提取物對(duì)肝癌、結(jié)腸癌或肺癌，尤其是肝癌，均具有較強(qiáng)的抑制作用。以該提取物為活性成分的抗腫瘤藥物，可通過注射、噴射、滴鼻、滴眼、滲透、吸收、物理或化學(xué)介導(dǎo)的方法，導(dǎo)入機(jī)體如肌肉、皮內(nèi)、皮下、靜脈、粘膜組織；或是被其他物質(zhì)混合或包裹后導(dǎo)入機(jī)體。需要的時(shí)候，在上述藥物中還可加入一種或多種藥學(xué)上可接受的載體；載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑等。上述預(yù)防和/或治療抗腫瘤的藥物可制成注射液、片劑、粉劑、顆粒劑、膠囊、口服液、膏劑、霜?jiǎng)┑榷喾N形式。其制備方法均可按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。上述預(yù)防和/或治療抗腫瘤藥物的用量一般為200-800mg葶藶子提取物/kg體重/天，療程為10至15天。葶藶子提取物能夠有效抑制人腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，如人肝癌、結(jié)腸癌或肺癌細(xì)胞。因此，葶藶子提取物對(duì)制備抗腫瘤藥物，尤其是抗肝癌、肺癌、結(jié)腸癌藥物具有重要的意義。具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。實(shí)施例1、制備葶藶子提取物取葶藶子(寧波德康生物制品有限公司)200g，將其以1:3(葶藶子95%乙醇)的重量份數(shù)比與95%乙醇(乙醇水=95:5，體積比)混合，在60。C條件下回流提取3h，抽濾，收集第一次回流提取液1和濾渣1;將得到的所有濾渣1與95%乙醇混合，95%乙醇的量與第一次相同，在6(TC條件下提取3h，收集第二次回流提取液2和濾渣2，并將提取液2與提取液1合并；將得到的所有濾渣2與95%乙醇混合，95%乙醇的量與第一次相同，60。C回流提取3h，抽濾，收集第三次回流提取液3;將提取液1、提取液2和提取液3合并，將所得的提取液進(jìn)行真空減壓濃縮、真空干燥(去除乙醇和水)至恒重，得到0.56g葶藶子提取物。實(shí)施例2、葶藶子提取物在抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)中的應(yīng)用將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)的腫瘤細(xì)胞(人肝癌細(xì)胞BEL-7402、人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-8、人肺癌細(xì)胞A-549)用0.25%的胰蛋白酶消化，然后用含10%(體積百分含量)胎牛血清的DMEM完全培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，并分別將各腫瘤細(xì)胞稀釋至1.0xl()S個(gè)/mL，再將其接種至96孔培養(yǎng)板中，每孔200uL，各腫瘤細(xì)胞分別接種3個(gè)孔，于37X:，5。/。C02的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h;然后傾去各孔培養(yǎng)液。將實(shí)施例1制得的葶藶子提取物溶解于DMSO中，然后用DMEM完全培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋，得到葶藶子提取物溶液，使葶藶子提取物的終濃度為50ug/mL，使DMSO的濃度為10%(體積百分含量)。同時(shí)設(shè)實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)組將葶藶子提取物溶液依次分別加入上述腫瘤細(xì)胞BEL-7402、HCT-8、A-549的培養(yǎng)孔內(nèi)，各自接種3個(gè)孔，每孔加入200ul;對(duì)照組向上述各腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)孔內(nèi)加入含10%(體積百分含量)DMSO的DMEM完全培養(yǎng)基，各自接種3個(gè)孔，每孔加入200ul;將以上各組的培養(yǎng)板同時(shí)置于37°C、5%C02的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2天。2天后向每孔加入20ul新鮮配制的5mg/ml四甲基偶氮唑鹽(MTT)溶液，并在37。C、5。/。C02的條件下繼續(xù)培養(yǎng)4h;小心棄上清，每孔加入200uLDMSO，室溫放置15-20min，每5min振蕩一次；在酶標(biāo)儀上測(cè)定各孔在波長(zhǎng)490nm處的光密度值(OD值)，按公式計(jì)算腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率。抑制率(％)=1-(OD實(shí)驗(yàn))/(OD對(duì)照)x100%。實(shí)驗(yàn)設(shè)三次重復(fù)，結(jié)果取平均數(shù)。葶藶子提取物對(duì)人不同腫瘤細(xì)胞BEL-7402、HCT-8、A-549的抑制作用的結(jié)果如表l所示。表l、葶藶子提取物對(duì)人不同腫瘤細(xì)胞的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>葶藶子提取物的對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的抑制作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明(表l)，葶藶子提取物在濃度為50ug/mL時(shí)對(duì)人肝癌細(xì)胞BEL-7402、結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-8均有一定程度的抑制作用，對(duì)肺癌細(xì)胞A-549抑制作用更加明顯，達(dá)到42.85%。因此，葶藶子提取物可以用于制備抗肝癌、結(jié)腸癌尤其是抗肺癌的藥物。權(quán)利要求1、葶藶子提取物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用；其中，所述葶藶子提取物是按照如下方法進(jìn)行制備的用水和/或有機(jī)溶劑作為提取劑，從葶藶子中進(jìn)行提取，得到所述葶藶子提取物。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于所述有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、石油醚、氯仿、二氯甲垸、乙酸乙酯、正丁醇、苯或甲苯中的任意一種或其任意比例的混合物。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述提取劑為體積百分含量為95%的乙醇水溶液。4、根據(jù)權(quán)利要求l-3任一所述的應(yīng)用，其特征在于所述提取為回流提取。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述提取溫度為60-10(TC。6、根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述提取次數(shù)至少為l次，優(yōu)選2-3次；每次提取時(shí)間為1-4小時(shí)。7、根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的應(yīng)用，其特征在于所述腫瘤為肝癌、結(jié)腸癌或肺癌，優(yōu)選肺癌。8、根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述腫瘤為肝癌、結(jié)腸癌或肺癌，優(yōu)選肺癌。9、根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述腫瘤為肝癌、結(jié)腸癌或肺癌，優(yōu)選肺癌。10、根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于所述腫瘤為肝癌、結(jié)腸癌或肺癌，優(yōu)選肺癌。全文摘要本發(fā)明公開了一種葶藶子提取物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。該提取物是用水和/或有機(jī)溶劑作為提取劑，從葶藶子中提取得到的。葶藶子提取物能夠有效抑制人腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，如人肝癌、結(jié)腸癌或肺癌細(xì)胞。因此，葶藶子提取物對(duì)制備抗腫瘤藥物，尤其是抗肝癌、肺癌、結(jié)腸癌藥物具有重要的意義。文檔編號(hào)A61K131/00GK101390919SQ20081022606公開日2009年3月25日申請(qǐng)日期2008年11月5日優(yōu)先權(quán)日2008年11月5日發(fā)明者巖劉,唐亞林,瑋戴,莉譚申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所