專利名稱：：嬰兒健脾散的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種嬰兒健脾散的質(zhì)量控制方法，屬于中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：嬰兒健脾散(原名嬰兒素)具有健脾、消食、止瀉的功效，用于消化不良，乳食不進(jìn)，腹脹，大便次數(shù)增多等癥，是兒科臨床常用藥品。國家標(biāo)準(zhǔn)《中藥成方制劑》第6冊165頁，標(biāo)準(zhǔn)號為WS3-B-1230-92，收載了該制劑的處方、制法及質(zhì)量控制方法。該制劑的處方白扁豆(炒)400g山藥125g雞內(nèi)金(炒)120g白術(shù)(炒)120g川貝母8g木香(炒)120g碳酸氫鈉120g人工牛黃0.25g該制劑的制備方法為以上八味，除人工牛黃、碳酸氫鈉外，白扁豆等六味粉碎成細(xì)粉，將人工牛黃研細(xì)，與碳酸氫鈉及上述粉未配研，過篩，混勻，即得。該制劑的質(zhì)量控制方法為(1)取本品置顯微鏡下觀察種皮柵狀細(xì)胞成片，無色，，外壁極厚有較多縱溝紋，內(nèi)壁薄，光輝帶位于細(xì)胞近外緣。不規(guī)則的內(nèi)壁組織碎片淡黃人色。草酸鈣針晶束甚長大。(2)取本品粉末lg，加水5ml，攪拌，濾過，濾液調(diào)至中性，加醋酸氧鈾鋅試液2滴，發(fā)生黃色沉淀。(3)取本品lg，加水5ml，攪拌，濾過，濾液加硫酸鎂試液5滴，不發(fā)生沉淀，煮沸數(shù)分鐘即生成白色沉淀。(4)取本品5g，加石油醚20ml，加熱回流提取10分鐘，濾過，濾液濃縮至約lml作為供試品溶液。另取白術(shù)、木香對照藥材各2g，分別加石油醚10ml，振搖提取10分鐘濾過，濾液濃縮至約lml，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(附錄57頁)試驗吸取供試品溶液10p1，作為對藥材溶液lul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以石油醚—醋酸乙酯—苯(7:15:15)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以以5%香草醛硫酸溶液。供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(5)取鑒別(4)項下提取后的樣品，加無水乙醇20ml，置60。C水浴中振搖提取30分鐘，濾過，濾液濃縮至約lml，作為供試品溶液。另取膽酸、豬去氧膽酸對照品，加無水乙醇制成每lml各含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄57頁)試驗，吸取上述供試品溶液10ul，對照品溶液lul，分別點(diǎn)于同上硅膠G薄層板上以氯仿一乙ii一冰醋酸(2:2:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液105110'C烘約IO分鐘，在紫外光燈(365nm)下檢視。供式品色譜中，在于對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。該質(zhì)量控制方法只對該制劑的成份進(jìn)行了定性控制，沒有對其成分進(jìn)行定量控制，不能準(zhǔn)確反映該制劑的內(nèi)在質(zhì)量的變化，不能保證臨床應(yīng)用的安全有效，不利于藥品的標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，也不符合現(xiàn)代中藥發(fā)展的趨勢。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種對所述的嬰兒健脾散進(jìn)行質(zhì)量控制的方法，以保證藥品的安全性和有效性，提高產(chǎn)品質(zhì)量，便于藥品的標(biāo)準(zhǔn)化、現(xiàn)代化生產(chǎn)。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種嬰兒健脾散的質(zhì)量控制方法，該方法包括下列a、b、c、d四種檢測a.木香的定性檢測取嬰兒健脾散，加石油醚，振搖提取，靜置，取上清液作為供試品溶液；另取木香對照藥材，加石油醚，振搖提取，靜置，上清液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以石油醚一乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105"C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b.白術(shù)的定性檢測取嬰兒健脾散，加石油醚，振搖提取，靜置，取上清液作為供試品溶液；另取白術(shù)對照藥材，加石油醚，振搖提取，靜置，取上清液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以石油醚一乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液；105'C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.人工牛黃的定性檢測取嬰兒健脾散，加乙醇，超聲提取，取上清液作為供試品溶液；另取膽酸對照品適量，加無水乙醇制成對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己垸一乙酸乙酯一甲醇-醋酸混合液的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；d.木香烴內(nèi)酯的定量檢測照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定；色譜條^與系統(tǒng)適用性試驗用十八垸基硅垸鍵合硅膠為填^劑；以甲醇-水為流動相；檢測波長為225nm;理論板數(shù)按木香烴內(nèi)酯峰計應(yīng)不低于2000;對照品溶液的制備取木香烴內(nèi)酯對照品，精密稱定，加甲醇溶解，即得；供試品溶液的制備取嬰兒健脾散，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，稱定重量，浸泡過夜，超聲處理，放冷，稱重，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，微孔濾膜過濾，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每克含木香以木香烴內(nèi)酯(C15H2。02)計，不得少于0.4mg。該制劑的質(zhì)量控制方法還可以包含下述四種檢測a.木香的定性檢測取嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在3060。C范圍的石油醚5ml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液；另取木香對照藥材0.lg，加入沸點(diǎn)在306(TC范圍的石油醚lml，振搖提取10分鐘，靜置，上清液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液各2nl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以10:1比例的沸點(diǎn)在3060'C范圍的石油醚一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b.白術(shù)的定性檢測取嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在306(TC范圍的石油醚5ml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液；另取白術(shù)對照藥材O.lg，加入沸點(diǎn)在3060'C范圍的石油醚lml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液各1y1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以50:1比例的沸點(diǎn)在609(TC范圍的石油醚一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液；105'C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.人工牛黃的定性檢測取嬰兒健脾散5g，加乙醇35ml，超聲提取30分鐘，取上清液作為供試品溶液；另取膽酸對照品適量，加無水乙醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述供試品溶液10ul，對照品溶液2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以20:25:3:2比例的正己烷一乙酸乙酯一甲醇-醋酸上層液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；d.木香烴內(nèi)酯的定量檢測'照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以60:40比例的甲醇-水為流動相；檢測波長為225nm;柱溫為30。C;理論板數(shù)按木香烴內(nèi)酯峰計應(yīng)不低于2000;對照品溶液的制備取木香烴內(nèi)酯對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并制成每lml中約含木香烴內(nèi)酯70ug的溶液，即得；供試品溶液的制備取嬰兒健脾散約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，浸泡過夜，在功率250W，頻率33kHz的條件下超聲處理30分鐘，放冷，稱重，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，微孔濾膜過濾，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液5W與供試品溶液10W，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每克含木香以木香烴內(nèi)酯(C15H2。02)計，不得少于0.4mg。由于嬰兒健脾散處方中的木香含有的木香烴內(nèi)酯，具有松弛平滑肌、解痙、抗菌等作用，是嬰兒健脾散的有效成分。但該有效成分在加工或存儲過程中處理不當(dāng)易發(fā)生揮發(fā)、分解等物理化學(xué)變化，影響藥品的療效，單純的定性檢測往往不能反映這些變化，而定量檢測，特別是將木香烴內(nèi)酯這樣易揮發(fā)易分解成分作為指標(biāo)成份進(jìn)行定量檢測，能更加精確的反映藥品質(zhì)量的優(yōu)略，便于生產(chǎn)工藝的改進(jìn)和藥品質(zhì)量的監(jiān)測。本發(fā)明對木香、白術(shù)、膽酸的定性檢測，簡便易行，能全面地粗略反映藥品的質(zhì)量。該質(zhì)量控制方法將定性檢測與定量檢測結(jié)合應(yīng)用，可以從廣度和精度上更好的控制藥品質(zhì)量。本發(fā)明木香和白術(shù)的定性檢測中，用展開劑"石油醚一乙酸乙酯"代替了"石油醚一醋酸乙酯一苯"避開了對環(huán)境污染較大的化學(xué)試劑苯的使用；膽酸的定性檢測中，用展開劑"正己烷—乙酸乙酯一甲醇-醋酸"代替了"氯仿一乙醚一冰醋酸"避開了對環(huán)境污染較大的化學(xué)試劑氯仿的應(yīng)用。以上措施，減少了對周圍環(huán)境的化學(xué)污染，有利于環(huán)境的保護(hù)。具體實(shí)施例方式下述實(shí)驗例和實(shí)施例進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。實(shí)驗例1木香定性檢測實(shí)驗1.供試品溶液制備方法的確定方法a，取嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在306(TC范圍的石油醚5ml，振搖提取5分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液。方法b.取嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在306(TC范圍的石油醚5ml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液。方法c.取嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在306(TC范圍的石油醚10ml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清k作為供試品溶液。'方法d.取嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在3060'C范圍的石油醚10ml，振搖提取5分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液。另取木香對照藥材0.lg，加入沸點(diǎn)在306(TC范圍的石油醚lml，振搖提取10分鐘，靜置，上清液作為對照藥材溶液。吸取上述兩種溶液各2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以10:1比例的石油醚(306(TC)—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱，結(jié)果見下表。表l.供試品溶液制備方法的確定<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>由上述結(jié)果可以看出，可以選擇方法b、c作為該供試品溶液的制備方法，為了節(jié)省溶劑，優(yōu)選方法b即可。2.本檢測方法中展開劑用量配比的優(yōu)選取上述供試品溶液、對照藥材溶液各2nl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，分別以下述比例的展開劑展開石油醚(3060°C)—乙酸乙酯(6:1)、石油醚(3060°C)—乙酸乙酯(8:1)、石油醚(3060°C)—乙酸乙酯(10:1)、石油醚(3060°C)—乙酸乙酯(12:1)、石油醚(3060°C)—乙酸乙酯(14:1)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105。C加熱，觀察供試品色譜中，在與木香對照藥材色譜相應(yīng)的位置上斑點(diǎn)顯色情況。結(jié)果見表2表2展開劑優(yōu)選實(shí)驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>從表2可以看出展開劑為石油醚(3060°C)—乙酸乙酯(10:1)時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現(xiàn)拖尾、主斑點(diǎn)分離不好等現(xiàn)象。3.本檢測方法中樣品溶液點(diǎn)樣量的優(yōu)選分別取供試品溶液各0.5ul、l.Onl、1.5ul、2.0ul、2.5ul，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以10:1比例的石油醚(3060°C)—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105t;加熱，觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，斑點(diǎn)顯色情況。結(jié)果見表3:.，表3樣品溶液點(diǎn)樣量優(yōu)選實(shí)驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>從表3可以看出供試品點(diǎn)樣量在2.0"1時，在薄層板上顯色效果較好，適合試驗要求。綜上所述，本制劑中木香的定性檢測方法為取嬰兒健脾散lg,加入沸點(diǎn)在3060。C范圍的石油醚5m1,振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液。另取木香對照藥材0.lg，加入沸點(diǎn)在306(TC范圍的石油醚lml，振搖提取10分鐘，靜置，上清液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液各2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以10:1比例的石油醚(3060°C)—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。實(shí)驗例2.白術(shù)的定性檢測實(shí)驗1.供試品溶液制備方法的確定方法a.取嬰兒健脾散lg，用乙醚10ml，加熱回流20分鐘，放冷，濾過，濾液揮干溶劑，殘渣加乙酸乙醇0.5ml，作為供試品溶液。方法b.取嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在3060'C范圍的石油醚5ml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液。方法c.取嬰兒健脾散lg，加水10ml使溶解，加石油醚(30~60°C)lOml，振搖提取，棄去石油醚液，水層加乙醚提取二次，每次10ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加乙酸乙酯lml使溶解，作為供試品溶液。方法d.取嬰兒健脾散lg，加正己垸10ml。超聲處理15分鐘，濾過，濾液低溫蒸干，殘渣加正己垸lml使溶解，作為供試品溶液。另取白術(shù)對照藥材O.lg，加入沸點(diǎn)在3060'C范圍的石油醚lml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為對照藥材溶液。吸取上述兩種溶液各lwl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以50:1比例的石油醚(6090°C)—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液。105'C加熱，結(jié)果見下表。表4.供試品溶液制備方法的確定<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由上述結(jié)果可以看出，選擇方法b作為該供試品溶液的制備方法。4.本檢測方法中展開劑用量配比的優(yōu)選取上述供試品溶液、對照藥材溶液各1P1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，分別以下述比例的展開劑展開石油醚(6090°C)—乙酸乙酯(30:1)、石油醚(6090°C)—乙酸乙酯(40:1)、石油醚(6090°C)—乙酸乙酯(50:1)、石油醚(6090°C)—乙酸乙酯(60:1)、石油醚(609(TC)一乙酸乙酯(70:1)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105。C加熱，觀察供試品色譜中，在與白術(shù)對照藥材色譜相應(yīng)的位置上斑點(diǎn)顯色情況。結(jié)果見表5<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>從表2可以看出展開劑為石油醚(3060°C)—乙酸乙酯(50:1)時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現(xiàn)拖尾、主斑點(diǎn)分離不好等現(xiàn)象。5.本檢測方法中樣品溶液點(diǎn)樣量的優(yōu)選分別取供試品溶液各0.5ul、l.Oul、1.5ul、2.0nl、2.5ul，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以10:1比例的石油醚(6090°C)—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105'C加熱，觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，斑點(diǎn)顯色情況。結(jié)果見表6:.表6樣品溶液點(diǎn)樣量優(yōu)選實(shí)驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>從表3可以看出供試品點(diǎn)樣量在2.0ul時，在薄層板上顯色效果較好，適合試驗要求。綜上所述，本制劑中白術(shù)的定性檢測方法為取嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在3060'C范圍的石油醚5ml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液。另取白術(shù)對照藥材0.lg，加入沸點(diǎn)在306(TC范圍的石油醚lml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液各1U1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以50:1比例的石油醚(609(TC)一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液。105'C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。實(shí)驗例3.人工牛黃的定性檢測試驗1.供試品溶液制備方法的確定方法a.取嬰兒健脾散5g，加乙醇35ml，超聲提取10分鐘，取上清液作為供試品溶液。方法b.取嬰兒健脾散5g，加乙醇35ml，超聲提取20分鐘，取上清液作為供試品溶液。方法c.取嬰兒健脾散5g，加乙醇35ml，超聲提取30分鐘，取上清液作為供試品溶液。方法d.取嬰兒健脾散5g，加乙醇35ml，超聲提取40分鐘，取上清液作為供試品溶液。另取膽酸對照品適量，加無水乙醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述供試品溶液10"1，對照品溶液2!il，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以20:25:3:2比例的正己垸一乙酸乙酯一甲醇-醋酸上層液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，105°C加熱，結(jié)果見下表。表7.供試品溶液制備方法的確定<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由上述結(jié)果可以看出，選擇方法C作為該供試品溶液的制備方法。2.本檢測方法中展開劑用量配比的優(yōu)選吸取上述供試品溶液10ul，對照品溶液2iil，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，分別以下述比例的展開劑展開正己烷一乙酸乙酯一甲醇-醋酸(10:35:3:2)d的上層液，正己烷一乙酸乙酯一甲醇-醋酸(15:30:3:2)d的上層液，正己烷一乙酸乙酯一甲醇-醋酸(20:25:3:2)d的上層液，正己垸一乙酸乙酯一甲醇-醋酸(25:20:3:2)d的上層液，正己垸一乙酸乙酯一甲醇-醋酸(30:15:3:2)d的上層液，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，105°C加熱，觀察供試品色譜中，在與膽酸對照品色譜相應(yīng)的位置上斑點(diǎn)顯色情況。結(jié)果見表8<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>從表3可以看出供試品點(diǎn)樣量在10ul時，在薄層板上顯色效果較好，適合試驗要求。綜上所述，本制劑中膽酸的定性檢測方法為取嬰兒健脾散5g，加乙醇35ml，超聲提取30分鐘，取上清液作為供試品溶液。另取膽酸對照品適量，加無水乙醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述供試品溶液10ul，對照品溶液2ul,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以20:25:3:2比例的正己垸一乙酸乙酯一甲醇-醋酸上層液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。實(shí)驗例4.木香烴內(nèi)酯的定量檢測試驗1.儀器與藥品檢測儀器島津公司SPD-10Avp型高效液相色譜儀色譜柱迪瑪(C184.6X150mm，5|am)流動相甲醇-水(60:40)檢測波長225nm流速1.Oml/min柱溫30°C對照品木香烴內(nèi)酯購于中國藥品生物制品檢定所批號111524-200503色譜與系統(tǒng)條件用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(60:40)為流動相；檢測波長225nm。理論板數(shù)按木香烴內(nèi)酯峰計應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備精密稱取木香烴內(nèi)酯對照品適量，加甲醇溶解并制成每lml中約含木香烴內(nèi)酯70嗎的溶液，即得。供試品溶液的制備取嬰兒健脾散約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，放置過夜，超聲處理30分鐘，放冷，稱重，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，微孔濾膜過濾，即得。2.含量測定方法考察(1)穩(wěn)定性試驗取供試品溶液，分別于配制后0、2、4、6、12、24小時，依法測定，結(jié)果表明，其在24小時內(nèi)基本穩(wěn)定，結(jié)果見表10:<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>(2)線性關(guān)系考察取對照品溶液木香烴內(nèi)酯0.067rag/ml，分別精密吸取1、2、4、6、8和10nl注入高效液相色譜儀，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見附圖5和表12，木香經(jīng)內(nèi)酯在0.0670.67(Vg間呈線性關(guān)系，其回歸方程為F=2E+06Z-1500.7(r=0.9999)。表ll線性范圍數(shù)據(jù)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>(3)精密度試驗精密吸取供試品溶液lOnl，重復(fù)進(jìn)樣5次，求得相對標(biāo)準(zhǔn)偏差<2%，符合要求，結(jié)果見表12:表12精密度試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>(4)重現(xiàn)性試驗按供試品的制備方法，制備同一批號樣品5份，對每份進(jìn)行測定，求得相對標(biāo)準(zhǔn)偏差〈2%,結(jié)果見表13:表13重現(xiàn)性試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>(5)回收率試驗精密稱取已知含量的同一批號的樣品lg，再分別精密加入對照品溶液5ml(濃度為0.168mg/mL)，再精密加入甲醇45ml，按正文供試品溶液的制備方法操作，依法測定，計算其回收率，結(jié)果見表14:表14回收率試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>結(jié)論由試驗結(jié)果可以看出，本品的回收率符合規(guī)定。根據(jù)以上數(shù)據(jù),將含量限度定為本品每克含木香以木香烴內(nèi)酯(C15H2。02)計，不得少于0.4mg。從以上試驗結(jié)果可以看出，本發(fā)明所采用的含量測定方法其線性關(guān)系、穩(wěn)定性、精密度、重現(xiàn)性、回收率均良好，能夠有效控制嬰兒健脾散中木香烴內(nèi)酯的含量。下述實(shí)施例均能夠?qū)崿F(xiàn)上述實(shí)驗例所述的效果實(shí)施例l稱取下列重量份(kg)的原料藥白扁豆(炒)40山藥12.5雞內(nèi)金(炒)12白術(shù)(炒)12川貝母0.8木香(炒)12碳酸氫鈉12人工牛黃0.025該制劑的制備方法為以上八味，除人工牛黃、碳酸氫鈉外，白扁豆等六味粉碎成細(xì)粉，將人工牛黃研細(xì)，與碳酸氫鈉及上述粉未配研，過篩，混勻，即得。實(shí)施例2-3照實(shí)施例1相同的處方量及制法制備2批中試樣品。質(zhì)量控制方法a.木香的定性檢測分別取實(shí)施例1-3的嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在306(TC范圍的石油醚5ml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液。另取木香對照藥材0.lg，加入沸點(diǎn)在306CTC范圍的石油醚lml，振搖提取10分鐘，靜置，上清液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液各2nl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以10:1比例的石油醚(3060°C)—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。b.白術(shù)的定性檢測分別取實(shí)施例1-3的嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在3060'C范圍的石油醚5ml，振搖提取IO分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液。另取白術(shù)對照藥材0.1g，加入沸點(diǎn)在3060'C范圍的石油醚lml,振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為對照藥材溶液。'照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液各1H1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以50:1比例的石油醚(6090°C)—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液。105'C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。c.人工牛黃的定性檢測分別取實(shí)施例1-3的嬰兒健脾散5g,加乙醇35ml，超聲提取30分鐘，取上清液作為供試品溶液。另取膽酸對照品適量，加無水乙醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述供試品溶液10ul，對照品溶液2ul,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以20:25:3:2比例的正己垸一乙酸乙酯一甲醇-醋酸上層液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，105'C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。d.木香烴內(nèi)酯的定量檢測照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以60:40比例的甲醇-水為流動相；檢測波長為225nm;柱溫為3(TC。理論板數(shù)按木香烴內(nèi)酯峰計應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備取木香烴內(nèi)酯對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并制成每lml中約含木香烴內(nèi)酯70ug的溶液，即得。供試品溶液的制備分別取實(shí)施例1-3的嬰兒健脾散約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，浸泡過夜，在功率250W，頻率33kHz的條件下超聲處理30分鐘，放冷，稱重，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，微孔濾膜過濾，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液5W與供試品溶液10W，注入液相色譜儀，測定，即得。測定結(jié)果如下表15實(shí)施例1-3的木香烴內(nèi)酯含量測定結(jié)果實(shí)施例樣品含量(mg/g)10.5120.4930.53另外，也以處方原料藥的比例和制備工藝制成了不含木香、白術(shù)和人工牛黃的陰性樣品，按照質(zhì)量控制方法中供試樣品的制備方法制備了陰性對照溶液，在硅膠G薄層板上，所述的3種陰性樣品在相應(yīng)位置上未出現(xiàn)斑點(diǎn)。經(jīng)反復(fù)試驗，該質(zhì)量控制方法專屬性、重復(fù)性好，因此做為嬰兒健脾散的質(zhì)量控制方法，對嬰兒健脾散進(jìn)行質(zhì)量控制。權(quán)利要求1.一種嬰兒健脾散的質(zhì)量控制方法，該方法包括下列a、b、c、d四種檢測a.木香的定性檢測取嬰兒健脾散，加石油醚，振搖提取，靜置，取上清液作為供試品溶液；另取木香對照藥材，加石油醚，振搖提取，靜置，上清液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以石油醚-乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b.白術(shù)的定性檢測取嬰兒健脾散，加石油醚，振搖提取，靜置，取上清液作為供試品溶液；另取白術(shù)對照藥材，加石油醚，振搖提取，靜置，取上清液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以石油醚-乙酸乙酯混合液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液；105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.人工牛黃的定性檢測取嬰兒健脾散，加乙醇，超聲提取，取上清液作為供試品溶液；另取膽酸對照品適量，加無水乙醇制成對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸混合液的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；d.木香烴內(nèi)酯的定量檢測照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水為流動相；檢測波長為225nm；理論板數(shù)按木香烴內(nèi)酯峰計應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備取木香烴內(nèi)酯對照品，精密稱定，加甲醇溶解，即得；供試品溶液的制備取嬰兒健脾散，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，稱定重量，浸泡過夜，超聲處理，放冷，稱重，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，微孔濾膜過濾，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每克含木香以木香烴內(nèi)酯(C15H20O2)計，不得少于0.4mg。2.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法包含下述a、b、c、d四種檢測a.木香'的定性檢測'取嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在3060。C范圍的石油醚5ml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液；另取木香對照藥材0.lg，加入沸點(diǎn)在3060'C范圍的石油醚lml，振搖提取10分鐘，靜置，上清液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液各2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以10:1比例的沸點(diǎn)在3060。C范圍的石油醚一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；b.白術(shù)的定性檢測取嬰兒健脾散lg，加入沸點(diǎn)在306(TC范圍的石油醚5ml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液；另取白術(shù)對照藥材0.lg，加入沸點(diǎn)在306(TC范圍的石油醚lml，振搖提取10分鐘，靜置，取上清液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗吸取上述兩種溶液各1U1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄板上，以50:1比例的沸點(diǎn)在6090'C范圍的石油醚一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液；105i:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.人工牛黃的定性檢測取嬰兒健脾散5g，加乙醇35ml，超聲提取30分鐘，取上清液作為供試品溶液；另取膽酸對照品適量，加無水乙醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述供試品溶液10ul,對照品溶液2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以20:25:3:2比例的正己烷一乙酸乙酯一甲醇-醋酸上層液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；d.木香烴內(nèi)酯的定量檢測照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以60:40比例的甲醇-水為流動相；檢測波長為225nm;柱溫為30。C;理論板數(shù)按木香烴內(nèi)酯峰計應(yīng)不低于2000;對照品溶液的制備取木香烴內(nèi)酯對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并制成每lml中約含木香烴內(nèi)酯70ug的溶液，即得；供試品溶液的制備取嬰兒健脾散約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，浸泡過夜，在功率250W，頻率33kHz的條件下超聲處理30分鐘，放冷，稱重，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，微孔濾膜過濾，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液5W與供試品溶液10W，注入液相色譜儀，測定，即得；..本品每克含木香以木香烴內(nèi)酯(C15H2。02)計，不得少于0.4mg。全文摘要本發(fā)明公開了一種嬰兒健脾散的質(zhì)量控制方法，通過對木香、白術(shù)、人工牛黃的薄層定性鑒定，能全面地粗略反映藥品的質(zhì)量，通過對木香烴內(nèi)酯的定量測定，能更加精確的反映藥品的質(zhì)量，從而保證了藥品的安全性和有效性，提高了產(chǎn)品質(zhì)量，便于藥品的標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)。文檔編號A61K35/413GK101596269SQ20081011440公開日2009年12月9日申請日期2008年6月2日優(yōu)先權(quán)日2008年6月2日發(fā)明者付建家,付立家申請人:北京亞東生物制藥有限公司