專利名稱:小刺猴頭的發(fā)酵的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及猴頭菌絲體的發(fā)酵,屬于含有真菌的醫(yī)用配制品,IPC分類號(hào)為A61K 36/06。
背景技術(shù):
本發(fā)明所稱的猴頭菌為齒菌科真菌小刺猴頭菌(Hericium caput-medusae),其菌絲體的發(fā)酵產(chǎn)物多年來作為原料藥應(yīng)用于臨 床。我國市場(chǎng)上以猴頭菌絲體培養(yǎng)浸膏為原料制成的藥品有胃樂新沖 劑,該制劑對(duì)胃、十二指腸潰瘍、慢性胃炎等顯示出良好的療效。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供猴頭菌絲體的發(fā)酵,其包括取小刺猴頭純菌株,經(jīng)過斜面菌種培養(yǎng)、 一級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)、二 級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)、 一級(jí)種子罐培養(yǎng)、二級(jí)種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵、發(fā)酵液加熱、過濾、濃縮;所述斜面培養(yǎng)的溫度為27±1° C,時(shí)間為7_9天,搖瓶種子培 養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)和發(fā)酵的溫度為27±1° C,時(shí)間為5_7天,發(fā)酵液 加熱的溫度為100° C;
所述斜面培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為馬鈴薯100:葡萄糖l:磷酸二氫鉀 l:瓊脂l;所述搖瓶培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為葡萄糖3—4%,磷酸二氫鉀0.03 %,蛋白胨0.3%,氯化鈉0.05%,維生素B1適量,聚醚消沫劑適所述種子罐培養(yǎng)和發(fā)酵的培養(yǎng)基配方為葡萄糖0.3%,磷酸二氫 鉀0.03%,蛋白胨0.3%,氯化鈉0.05%,維生素B1適量,聚醚消 沫劑適量。
具體實(shí)施方式
取小刺猴頭純菌株,在27±1° C下斜面菌種培養(yǎng)7—9天,在 27士1° C下一級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)5—7天,在27±1° C下二級(jí)搖瓶種子 培養(yǎng)5 — 7天,在27±1° C下一級(jí)種子罐培養(yǎng)5 — 7天,在27±1° C 二級(jí)種子罐培養(yǎng)5—7天,在27±1° C下發(fā)酵5 —7天,在IOO。 C下 加熱發(fā)酵液,過濾、濃縮;所述斜面培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為馬鈴薯100: 葡萄糖l:磷酸二氫鉀l:瓊脂1;所述搖瓶培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為葡萄 糖3—4%,磷酸二氫鉀0.03%,蛋白胨0.3%,氯化鈉0.05%,維 生素Bl適量,聚醚消沫劑適量;所述種子罐培養(yǎng)和發(fā)酵的培養(yǎng)基配 方為葡萄糖0.3%,磷酸二氫鉀0.03。X,蛋白胨0.3%,氯化鈉0.05 %,維生素B1適量,聚醚消沫劑適量。 1.化學(xué)反應(yīng)過程及生產(chǎn)流程<image>image see original document page 5</image>3. 1. 1.斜面接種操作接種于無菌室超凈臺(tái)下迅速取下原種斜 面、空白斜面棉塞,將原種菌塊用接種針挑入空白斜面內(nèi),塞上棉塞, 加紗面,系上線繩,送培養(yǎng)室恒溫箱培養(yǎng);3. 1. 2.斜面培養(yǎng)基配方:
馬鈴薯 200g 葡萄糖2g磷酸二氫鉀2g 瓊脂2gPH自然制法將新鮮馬鈴薯200g去皮切成小塊加水1000ml煮沸25分 鐘,用紗布過濾取濾液,瓊脂預(yù)先浸濕后加入濾液中煮沸同時(shí)不斷攪 拌,防止沸出直至全部溶解,然后分別加入葡萄糖、磷酸二氫鉀等物 質(zhì)攪拌均勻,趁熱分裝于試管中,塞好瓶塞后置于滅菌鍋滅菌,蒸汽 壓力l.l個(gè)大氣壓,120°C,時(shí)間30分鐘,取出后自然降溫至40-45° C,鋪成斜面,空白培養(yǎng)1天,無雜菌方可使用; 3. 1. 3.搖瓶接種操作一級(jí)搖瓶接種于無菌室超凈臺(tái)下迅速取下斜面、一級(jí)搖瓶瓶塞, 將斜面菌塊用接種針挑入搖瓶后塞上棉塞;二級(jí)搖瓶接種于無菌室超凈臺(tái)下迅速取下一、二級(jí)搖瓶瓶塞,將一級(jí)種子迅速倒入二級(jí)搖瓶內(nèi),塞上棉塞,蓋上紗面,系上線繩,放搖瓶機(jī)上培養(yǎng);3. 1. 4.培養(yǎng)條件將一、二級(jí)搖瓶置于搖瓶機(jī)內(nèi)于1S0 230轉(zhuǎn), 27±1°C培養(yǎng)4一7天取下放冰箱備用;3. 1. 5.搖瓶培養(yǎng)基配方27±1°C, 5—7天左右,下斜面后4。C冰 箱保存?zhèn)溆?;搖瓶培養(yǎng)基(一、二級(jí)搖瓶制法相同) 配方葡萄糖(工業(yè)) 3-4%KH2P04 0.03%
蛋白胨 0.3%NaCl 0.05%維生素Bi 微量消沬劑 少許制法將以上試劑用蒸餾水加熱溶解,500ml瓶(一級(jí)搖瓶)內(nèi) 裝量100ml, 2000ml瓶(二級(jí)搖瓶)內(nèi)裝量500ml,塞好棉塞,裝入 滅菌鍋于一個(gè)大氣壓、12rC滅菌30分鐘,冷卻至室溫放置一天,備 用;3. 2.控制室操作到發(fā)酵臺(tái)取樣;鏡檢罐內(nèi)菌絲生長情況,判斷準(zhǔn) 確無誤;下達(dá)發(fā)酵、配料、轉(zhuǎn)罐、放罐生產(chǎn)指令;準(zhǔn)確填寫批生產(chǎn)記 錄和其它記錄;負(fù)責(zé)檢査收集車間各種生產(chǎn)記錄并存檔。3. 3.發(fā)酵配方 3. 3. 1.培養(yǎng)基配方葡萄糖(工業(yè)) 0.3%KH2P04 0.03%蛋白胨 0.3% NaCl 0.05%維生素B, 微量消沫劑 少許一、二、三級(jí)發(fā)酵,種子罐配方相同,將上述原料加入種子罐 中,加水至要求體積。3. 4.配料操作操作前開啟自來水閥門,將罐內(nèi)各部沖洗干凈,關(guān)
閉所有開孔及閥門,開啟壓縮空氣閥門排凈罐中水,關(guān)閉壓縮空氣, 開啟排氣閥泄壓,壓力表為零;開啟自來水閥及排氣閥,把水加至配 料罐大約l/2處打開(人孔)入料孔、加入工業(yè)糖,培養(yǎng)基、原料若 干,蓋好罐蓋(既人孔入料口),擰緊入料口上蓋螺絲,并用加力棒 擰緊;開啟進(jìn)罐蒸汽閥門,進(jìn)行直接加溫,溫度控制在80°C-100°C 溶解罐內(nèi)料液混合物待排氣閥排出蒸汽時(shí),關(guān)閉蒸汽閥;開啟要進(jìn)料 罐的上料閥門及靠罐(主閥門)開啟配料罐的出料閥門。開啟并調(diào)節(jié) 壓縮空氣閥門,使空氣壓力在0、 2兆帕左右,用壓差法把料液通過 料管經(jīng)過濾器壓入待消罐內(nèi),待消罐要按照規(guī)定的計(jì)料體積加夠足量 的水,蓋好罐蓋,并用加力棒擰緊,關(guān)閉上料閥門待消毒;用視鏡觀 察,待料液全部壓出后,壓力表回壓關(guān)閉壓縮空氣閥門,開啟排氣閥 門,排氣至壓力表為零,關(guān)閉排氣閥門;打開入料孔,放入自來水沖 洗清除污垢殘?jiān)?,備下次用?3. 5.發(fā)酵消毒工段 3. 5. 1.消罐3. 5. 1. 1.消總過濾器關(guān)閉空氣入總空閥門,開啟蒸汽閥門及放 冷凝水閥門,放凈管內(nèi)冷凝水;開啟車間內(nèi)14個(gè)罐分過濾器排氣閥 門及總空排氣閥門;開啟蒸汽閥門,進(jìn)行高溫消毒滅菌,把總空罐壓 控制在0.15Mpa左右(調(diào)節(jié)排氣閥和總空入蒸汽閥)滅菌時(shí)間2小時(shí);滅菌完成后,先關(guān)閉入總空蒸汽閥門,開啟空氣入總空閥門,保壓吹 干總空氣過濾器內(nèi)活性碳、棉花及潮氣吹24小時(shí)左右;關(guān)閉總空排 氣閥及14個(gè)分過濾器排氣閥門;每次停產(chǎn)重新啟動(dòng)后消毒一次;填
寫消毒記錄。3. 5. 1. 2.消種子罐(1) 操作前準(zhǔn)備操作前開啟靠罐主閥門及自來水閥門將罐內(nèi)各部 沖洗干凈,關(guān)水閥開啟下水閥,用壓縮空氣把污水壓入下水道,關(guān)閉 下水閥,開排氣卸壓;開啟上料閥,待配料罐料液壓入種子罐后關(guān)閉 上料閥,等待消毒;開啟自來水閥,加足夠量水(按種子罐內(nèi)所規(guī)定的計(jì)料體積),蓋好罐蓋,擰緊罐蓋螺絲并用加力棒較緊,等待消毒; 過濾器消毒先開啟蒸汽閥門,壓力控制在1.2公斤,慢開尾氣閥,蒸汽流量控制在0.3公斤以內(nèi),保壓計(jì)時(shí)30分鐘,先關(guān)尾汽閥,再 關(guān)蒸汽閥,同時(shí)迅速開啟空氣閥門保壓,過濾器消毒完畢;開啟接種、 空氣、放料蒸汽閥門進(jìn)蒸汽,進(jìn)行高溫消毒,在罐溫升至 120°C—130°C,罐壓控制在0.12—0.13兆帕(調(diào)節(jié)排氣閥和進(jìn)罐蒸汽 閥穩(wěn)壓)滅菌時(shí)由120°C計(jì)算,不超過130°C,滅菌時(shí)間為3040 分鐘;滅菌完成后,先關(guān)閉接種蒸汽閥門,空氣蒸汽閥門,放料進(jìn)罐 蒸汽閥門及靠罐主閥門,然后關(guān)閉排氣閥門和其它閥門,開啟冷水閥 降溫,當(dāng)罐壓低于空氣壓力時(shí),開啟壓縮空氣閥門保壓;(2) 菌種室種子罐接種關(guān)上靠罐閥門,打開排氣閥,20秒后關(guān)閉 排氣閥;打開接種管路頂端快卡,取下接種口盲板,用快卡把接種瓶 和接種口連接好并擰緊;打開排氣閥門,再慢慢打開蒸汽閥消毒10 分鐘;關(guān)排氣閥門,再關(guān)蒸汽閥門,開靠罐閥門,打開接種瓶閥門, 由發(fā)酵人員配合接種;關(guān)靠罐閥,打開排汽20秒,再關(guān)上排氣,打 開快卡,取下接種瓶,蓋上盲板,擰緊快卡,操作完畢。(3)對(duì)發(fā)酵罐中樣品糖、氮的測(cè)定;糖的測(cè)定用斐林試劑法發(fā)酵總糖的測(cè)定;取發(fā)酵液lml置入25mL比色管中,加入 2mol/LH2S0415ml,把比色管放入沸水中溶15分鐘;于250ml三角 燒瓶中分別加入斐林甲、乙試液各5mL;將沸溶后的中間體迅速冷卻, 用40%NaOH調(diào)pH6.8后置入lOOmL容量瓶中,反復(fù)沖洗比色管定 容;取pH6.8的中間體5ml于備好的250mL三角瓶中,置1200W電 爐使其沸騰,從沸騰起計(jì)時(shí)1分鐘;用0.1%葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液滴定;記 下消耗數(shù)為y;測(cè)定空白250ml三角燒瓶中加入斐林甲、乙液各5ml, 不加中間體,直接以0.1%葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液滴定,消耗數(shù)為x,然后計(jì)算??倲?shù)- (x-y) X2; 氨基氮的測(cè)定用甲醛滴定法所需試劑---1%酚酞指示劑-—陽0.5%H2SO4——0.1%甲基紅溶液——腦甲醛 ——O.lmolNaOH操作方法用1°/。酚酞指示劑O.lmolNaOH將18。/。HCHO調(diào)至半微粉 紅色置于棕色瓶中備用;用0.5。/。H2SHt與0.1%甲基紅將250ml蒸餾 水調(diào)至紅色溶液備用;將已備好的溶液分別置于100ml三角燒雞瓶中 50ml左右,然后取發(fā)酵液5ml于100ml三角燒瓶中;用O.lmolNaOH 調(diào)至淡黃色后,加入備好的18%HCH05ml,酚酞指示劑D;用O.lmol NaOH標(biāo)準(zhǔn)液滴定至茶色為終點(diǎn);
計(jì)算消耗數(shù)X0.02:氨基氮含量 測(cè)量各項(xiàng)指標(biāo)所需試劑的配制保管;將各項(xiàng)指標(biāo)做好記錄。 3. 5. 1. 3.消中罐(1) 操作前準(zhǔn)備操作前開啟靠罐主閥門及自來水閥門將罐內(nèi)各部 沖洗干凈,關(guān)閉入水閥,開啟下水閥,用壓縮空氣把污水壓入下水道, 關(guān)閉下水閥,開排氣卸壓;開啟上料閥,待配料罐料液壓入種子罐后 關(guān)閉上料閥,等待消毒;開啟自來水閥,加足夠量水(按種子罐內(nèi)所 規(guī)定的計(jì)料體積),蓋好罐蓋,擰緊罐蓋螺絲并用加力棒擰緊,等待 消毒;過濾器消毒先開啟蒸汽閥門,壓力控制在1.2MPa,慢開尾 氣閥,蒸汽流量控制在0.3 MPa以內(nèi),保壓計(jì)時(shí)30分鐘,先關(guān)尾汽 閥,再關(guān)蒸汽閥,同時(shí)迅速開啟空氣閥門保壓,過濾器消毒完畢;開 啟接種閥門、空氣閥門、放料蒸汽閥門進(jìn)蒸汽,進(jìn)行高溫消毒,在罐 溫升至120。C一130。C,罐壓控制在0.12—0.13兆巾白(調(diào)節(jié)排氣閥和 進(jìn)罐空氣閥穩(wěn)壓)滅菌時(shí)間從120。C開始計(jì)算,不超過130。C,滅菌 時(shí)間為30分鐘;滅菌完成后,先關(guān)閉接種,空氣,放料進(jìn)罐蒸汽閥 門及靠罐主閥門,然后關(guān)閉排氣閥門和所有閥門,開啟冷水閥降溫, 當(dāng)罐壓低于空氣壓力時(shí),開啟壓縮空氣閥門保壓;(2) 倒料(接種)操作法開啟閥門站(接種站)的所有尾閥及所 要接種罐給種罐(種子罐)靠罐閥門的尾閥,開啟接種站(閥門站) 的蒸汽閥門進(jìn)行接種管道滅菌,滅菌時(shí)間為30分鐘,蒸汽壓力為0.2 兆帕左右;滅菌時(shí)間到后,先關(guān)閉給種罐(種子罐)要接種罐(中罐) 靠罐閥的尾閥,然后關(guān)閉接種站(閥門站)所有尾閥,關(guān)閉接種站(閥
門站)蒸汽閥;開啟要接種罐(中罐)的接種靠罐閥進(jìn)行管道保壓。 接種時(shí)把種子罐的排氣閥關(guān)閉,調(diào)節(jié)壓縮空氣閥門,進(jìn)行罐內(nèi)升壓(0.2兆帕),要接種罐(中罐)調(diào)節(jié)排氣,把罐壓降到0.05兆帕;開啟種子罐接種靠罐閥門,用壓差法進(jìn)行接種(把種子罐藥液壓入中 罐)接種完成后關(guān)閉接種罐(中罐)靠罐閥門進(jìn)行空氣培養(yǎng)(保溫28°C);培養(yǎng)開啟供熱水(或冷卻循環(huán)水)閥門,加熱(或降溫)種子罐使罐溫控制在28°C壓縮空氣壓控制在0.15兆帕左右,排氣壓 控制在0.05兆帕左右,空氣培養(yǎng)生長;備注轉(zhuǎn)罐時(shí)可根據(jù)生產(chǎn)情況適當(dāng)延長生產(chǎn)周期,大中罐之間可以相互倒種轉(zhuǎn)罐。3. 5. 1. 4. 30噸發(fā)酵罐的消毒、倒種、培養(yǎng)、取樣同中罐; 3. 5. 2.發(fā)酵人員放罐GOT罐發(fā)酵終點(diǎn))操作3. 5. 2. 1.排冷凝水操作關(guān)空氣進(jìn)氣閥,開排氣閥,使罐壓回零;開下水閥和倒種排氣閥及閥門站的所有排氣閥,然后開進(jìn)蒸汽閥和閥門站蒸汽閥,排冷凝水;待冷凝水排凈后,先關(guān)蒸汽閥和閥門站蒸汽 閥,然后關(guān)下水閥,閥門站排氣閥及倒種排氣閥; 3. 5. 2. 2.加溫操作先開靠罐閥和倒種閥,然后開蒸汽閥,閥門 總站的蒸汽閥及空氣蒸汽閥,三路進(jìn)蒸汽,給罐加溫,待罐溫升到 7(TC左右把排氣關(guān)上,繼續(xù)加溫到100'C;溫度加到IO(TC后保持10 分鐘,降溫至9(TC,把水關(guān)上;3. 5. 2. 3.放罐打開空氣進(jìn)氣閥,升罐壓至0.2Mpa,由專人開放料 陶;3. 5. 2. 4.特殊情況剩一個(gè)罐時(shí),總空氣壓力高時(shí),調(diào)節(jié)進(jìn)空氣
閥門,控制罐壓在0.2Mpa.3. 6.提取3. 6. 1.板框過濾3. 6. 1. 1.板框過濾之前必須認(rèn)真檢查濾布是否鋪好,不得有折皺;3. 6. 1. 2.不能漏料,濾液要求澄清透明,濾液流入貯料罐內(nèi)貯存;3. 6. 1. 3.如有漏料立即關(guān)閥門不得放料進(jìn)入濃縮工段;3. 6. 1. 4.板框拆開以后,菌絲體落進(jìn)準(zhǔn)備好的不銹鋼板上;3. 6. 1. 5.用過濾布必須沖洗干凈;3. 6. 1. 6.認(rèn)真檢査板框油壓泵;3. 6. 2.化驗(yàn)條件化驗(yàn)多糖含量不低于5%。3. 7.濃縮3. 7. 1.操作前認(rèn)真檢査罐體上每個(gè)閥門,如有問題立即找人維修。 3. 7. 2.罐溫控制在60-8(TC之間,蒸汽壓力在MPaO.04-0.06左右; 真空罐真空度控制在0.06 0. 09MPa。3. 7. 3.在最上的加熱管要露出來時(shí)加料,每次料要少加勤加,約 30分鐘。3. 7. 4.濃縮到所有的料全部進(jìn)完時(shí),將兩個(gè)缸的料合在一起,放 缸前將真空度下降,罐溫度提高到9(TC左右。3. 7. 5.料濃縮到最上邊的加熱管露出取樣測(cè)婆美度,然后就要勤 測(cè)婆美度控制在33-38即要出料(不同品種除外)。 3. 7. 6.每次取樣、放料時(shí),先停泵,真空回零后再取樣測(cè)比重。 3. 7. 7.出料按SOP-SC-036-02執(zhí)行.3. 7. 8.出料裝桶時(shí)取樣測(cè)多糖,測(cè)定結(jié)果同5.5.2。3. 7. 9.料出完徹底清洗罐內(nèi),用水沖刷罐,沖后加水,煮沸后放 水,不得有罐垢。4. 成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)猴頭菌流浸膏本品為齒菌科真菌小刺猴頭Hericium Caput-Medusae(Bull.ex..Fr) Pere的發(fā)酵液與菌絲提取液的濃縮浸膏。多糖含量不得低于5% (費(fèi) 林試劑法)。性狀本品顯褐色、氣微香、味微苦。檢査溶化性應(yīng)不得有混懸物。多糖含量葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精密稱取105"C干燥至恒 重的無水葡萄糖對(duì)照品O.lg,置100ml量瓶中,加水溶解,并稀釋 至刻度,搖勻,即得(每lml中含無水葡萄糖lmg)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.2、 0.4、 0.6、 0.8、 1.0、 1.2、 1.4、 1.6ml,分別置于25ml量瓶中,加水至2.0mL,分 別精密加3, 5-二硝基水揚(yáng)酸試液1.5ml,混勻,在沸水浴中加熱5 分鐘,取出,立即用冷水冷卻至室溫,加水稀釋至刻度,搖勻,用 水作空白,照分光光度法(《中華人民共和國藥典》2005年版二部 附錄IVA)在520nm的波長處測(cè)定吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。供試品溶液的制備取本品lg,精密稱定,置50ml量瓶中,加 水30ml, 50"C水浴加熱20分鐘,取出,冷卻至室溫,加水稀釋至 刻度,搖勻,濾過,即得。
測(cè)定法總糖的測(cè)定精密量取供試品溶液2ml置25ml量瓶中, 加6mol/L鹽酸溶液5ml,水5ml,在沸水浴中加熱30分鐘,冷卻 后加酚酞指示液1滴,用20%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至微紅色,加水至 刻度,濾過,精密量取濾液lml,照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法,自 "加水至2.0ml起",依法測(cè)定吸光度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中讀出糖的濃度 值,即得。單糖的測(cè)定精密量取供試品溶液2ml,置10ml量瓶中,加水至 刻度,搖勻,濾過,精密吸取濾液lml,照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方 法,自"加水至2.0ml"起,依法測(cè)定吸光度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中讀出 糖的濃度,即得。多糖的濃度按總糖的濃度,減去單糖的濃度。多糖含量不得低于5.0%。
權(quán)利要求
1、治療胃部疾病的小刺猴頭菌(Hericium caput-medusae)發(fā)酵浸膏的制備方法,包括小刺猴頭純菌株的斜面菌種培養(yǎng)、一級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)、二級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)、一級(jí)種子罐培養(yǎng)、二級(jí)種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵、發(fā)酵液加熱、過濾、濃縮。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1的方法,所述斜面培養(yǎng)的溫度為27±1° C, 時(shí)間為7—9天,搖瓶種子培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)和發(fā)酵的溫度為27±1° C, 時(shí)間為5 — 7天,發(fā)酵液加熱的溫度為100° C。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1的方法,所述斜面培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為馬鈴 薯100:葡萄糖l:磷酸二氫鉀l:瓊脂1。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1的方法,所述搖瓶培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為葡萄 糖3_4%,磷酸二氫鉀0.03%,蛋白胨O. 3%,氯化鈉0.05%,維 生素B1適量,聚醚消沫劑適量。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1的方法,所述種子罐培養(yǎng)和發(fā)酵的培養(yǎng)基配 方為葡萄糖0.3%,磷酸二氫鉀0.03%,蛋白胨O. 3。%,氯化鈉0.05 。%,維生素B1適量,聚醚消沫劑適量。
全文摘要
一種小刺猴頭的發(fā)酵,涉及猴頭菌絲體的發(fā)酵,屬于含有真菌的醫(yī)用配制品。其制備方法,包括小刺猴頭純菌株的斜面菌種培養(yǎng)、一級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)、二級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)、一級(jí)種子罐培養(yǎng)、二級(jí)種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵、發(fā)酵液加熱、過濾、濃縮。
文檔編號(hào)C12N1/14GK101396379SQ20081005123
公開日2009年4月1日 申請(qǐng)日期2008年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2008年9月28日
發(fā)明者屹 馮, 劉淑芳, 孫立群, 李鳳才, 李敬軒 申請(qǐng)人:白求恩醫(yī)科大學(xué)制藥廠