專利名稱：可用于負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種可用于負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球及制備方法。該微球可用于對 藥物進(jìn)行包載并控制釋放。
背景技術(shù)：
載藥微球一般是指用高分子材料或其單體制備的球型高分子微球，其表面可以攜帶 具有化學(xué)反應(yīng)活性的、pH敏感性的、多孔性的、放射性的或其它功能的基團(tuán)，從而能具 有多方面的功能。微球能夠有效延長藥物在人體內(nèi)的循環(huán)半衰期，從而起到延長藥效的 作用，并通過對藥物的緩、控釋作用，減少用藥頻率，降低血藥濃度的波動，使血藥濃 度恒定在治療窗內(nèi)，降低藥物的毒副作用，保持持久、穩(wěn)定的藥效。殼聚糖(Chitosan)，化學(xué)名稱為"-(l,4)-2-氨基-2-脫氧-Z)-葡聚糖，是甲殼素脫乙酰 基的一種線性聚合產(chǎn)物，也是生物界存在的唯一一種堿性氨基多糖，不溶于水但能溶于 低濃度無機(jī)酸或有機(jī)酸，具有很好的生物降解性、良好的生物相容性、生物粘附性和促 進(jìn)藥物吸收的作用。以殼聚糖為原料制備得到的殼聚糖微球因具有控制釋藥、組織靶向、 提高藥物穩(wěn)定性等多方面的優(yōu)勢，是目前實際應(yīng)用較多的藥物緩釋形式，已成為近年來 新型給藥系統(tǒng)研究的熱點(diǎn)。以殼聚糖為原料制備殼聚糖載藥微球，通常是先將殼聚糖用低濃度無機(jī)酸或有機(jī)酸 溶解，然后將殼聚糖制成微球再負(fù)載藥物，或者是在溶解的殼聚糖溶液中添加藥物，.然 后制成載藥微球。先將殼聚糖制成微球再載藥的方式， 一般藥物包封量低，而且藥物包 封效果較差，藥物暴釋現(xiàn)象明顯，使得藥物緩釋效果差。在溶解的殼聚糖溶液中添加藥 物然后制成微球的方式，雖然藥物包封效果較好，但是由于普通殼聚糖只能溶解于低濃 度無機(jī)酸或有機(jī)酸溶液中，使得一些對酸不穩(wěn)定的藥物(如利福平、紅霉素等)難于穩(wěn) 定存在，從而限制了包載藥物的種類。目前殼聚糖微球的制備方法主要有溶劑蒸發(fā)法、凝聚法、噴霧干燥法以及乳化交聯(lián) 法等。溶劑蒸發(fā)法過程中需要加入一些對人體有害的有機(jī)溶劑，有機(jī)溶劑的殘留會為該 方法制備的微球帶來使用中的安全問題，且該方法得到的微球強(qiáng)度較低，藥物控釋效果 較差。凝聚法是通過加入三聚磷酸鈉、海藻酸鈉、硫酸鈉或檸檬酸鈉等與殼聚糖發(fā)生離 子凝聚來形成微球，得到的微球強(qiáng)度不高，球徑較大且球形度也不好。噴霧干燥法制備的殼聚糖微球強(qiáng)度也較低，藥物控釋效果不夠理想。乳化交聯(lián)法可以制備包埋多種藥物 (如親水性藥物、親脂性藥物和固體藥物等)的載藥微球，微球粒徑較小且球形度好，而 且制備工藝簡單易行，尤其是可希望通過控制交聯(lián)度來實現(xiàn)控制釋放性能。如果將普通不溶于水的殼聚糖先改性成水溶性的殼聚糖，以這種水溶性殼聚糖的溶 液采用乳化交聯(lián)的方式來制備載藥微球，可以拓寬殼聚糖載藥微球的應(yīng)用范圍，得到一 種生物降解性、生物相容性和生物粘附性好，載藥范圍廣的新型殼聚糖載藥微球，尤其 可用于對酸不穩(wěn)定的藥物的包載和控釋。但由于水溶性殼聚糖的脫乙酰度較低，能參與 交聯(lián)反應(yīng)的氨基較少，如果按照殼聚糖普通的乳化交聯(lián)方式制備水溶性殼聚糖微球，得 到的微球強(qiáng)度較差，尤其在用于載藥時制備過程中藥物易被洗脫，藥物包封率低且暴釋 現(xiàn)象嚴(yán)重，嚴(yán)重影響載藥效果。劉自強(qiáng)等在"水溶性殼聚糖及磁性殼聚糖微球的制備"(《日用化學(xué)工業(yè)》2006， Vo1.36(6))中報道了一種水溶性殼聚糖及磁性殼聚糖微球的制備方式，是將高脫乙酰度 殼聚糖制備成水溶性殼聚糖后，由其水溶液(及含有分散的納米鐵酸鈷)與液體石蠟常 溫下攪拌呈乳狀液體系，再與戌二醛反應(yīng)可得到相應(yīng)的磁性殼聚糖微球，并對殼聚糖的 質(zhì)量分?jǐn)?shù)對所成微球的影響、攪拌速度對微球形貌影響等進(jìn)行了研究探討。但由于其同 樣是采用普通的乳化交聯(lián)方式制備成水溶性殼聚糖微球，因此得到的微球也同樣存在強(qiáng) 度較差的情況，如果直接將其用于載藥，在制備過程中藥物易被洗脫，藥物包封率低且 暴釋現(xiàn)象嚴(yán)重，嚴(yán)重影響載藥效果。發(fā)明內(nèi)容針對上述情況，本發(fā)明將提供一種新形式的可用于負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球， 使其強(qiáng)度能顯著提高，對藥物的包載和控釋效果好。本發(fā)明進(jìn)一步還將提供該負(fù)載藥物 的水溶性殼聚糖微球的制備方法。本發(fā)明可用于負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球，其結(jié)構(gòu)形式是在用于負(fù)載藥物的交聯(lián) 態(tài)的水溶性殼聚糖芯核外依次包裹有交聯(lián)態(tài)的水溶性殼聚糖包覆層和交聯(lián)固化的外表 層。特別是，其中所說該交聯(lián)態(tài)的水溶性殼聚搏芯核以采用由水溶性殼聚糖與二醛類化 合物反應(yīng)所形成的交聯(lián)態(tài)結(jié)構(gòu)，并可進(jìn)一步使所說該交聯(lián)態(tài)的水溶性殼聚糖芯核及其外 包裹的交聯(lián)態(tài)水溶性殼聚糖包覆層為由二醛化合物同時分別與水溶性殼聚糖芯核內(nèi)及包 裹于外的水溶性殼聚糖反應(yīng)所形成的交聯(lián)態(tài)結(jié)構(gòu)。所說的二醛化合物作為交聯(lián)劑，可以 有多種選擇，但試驗顯示，不同二醛化合物在反應(yīng)活性上是有差異的，例如，戊二醛的 活性較理想，也是現(xiàn)有文獻(xiàn)中使用最多的，而使用如對苯二甲醛等二醛化合物進(jìn)行交聯(lián) 時的反應(yīng)活性則相對都低于戊二醛，因此仍推薦最常用的戊二醛為首選。由于二醛化合物中具有兩個活性反應(yīng)基團(tuán)的醛基，因此當(dāng)其一個醛基與殼聚糖反應(yīng) 并形成具有初步強(qiáng)度的微球芯核，另外一個醛基依然保持活性，能與后續(xù)再加入的水溶 性殼聚糖與戊二醛活性醛基反應(yīng)，從而即可進(jìn)一步方便地在已形成的微球芯核外形成交 聯(lián)態(tài)的水溶性殼聚糖包覆層。在上述可用于負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球結(jié)構(gòu)中，所說的該交聯(lián)固化外表層可通 過進(jìn)一步使上述該交聯(lián)態(tài)的水溶性殼聚糖包覆層與交聯(lián)劑進(jìn)行第二次交聯(lián)反應(yīng)而在其表 面形成一交聯(lián)固化層，從而成為強(qiáng)度得到顯著增加的水溶性殼聚糖微球結(jié)構(gòu)。該微球中 用于負(fù)載藥物的部分為其芯核，所負(fù)載的藥物可以為任何所希望的水溶性的藥物，如蛋 白質(zhì)分子(如胰島素)、多肽(如促胰液素)、抗癌劑(如順鉑)、抗生素(如紅霉素、利 福平)等多種藥物，其中特別適用于對酸不穩(wěn)定而不宜用常規(guī)的酸溶性殼聚糖微球進(jìn)行 包載的藥物，擴(kuò)大了可適用藥物的范圍。本發(fā)明上述負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球的一種制備方法，可按下述方式進(jìn)行1'將與水不互溶的油性成分與表面活性劑充分?jǐn)嚢杈鶆蜃鳛橛拖嗷旌衔锖?，將均?混合有水溶性殼聚糖和希望負(fù)載的水分散的藥物的混合溶液加入該油相混合物并充分?jǐn)?拌，形成油包水(W/0)型混合物，然后在充分?jǐn)嚢柘屡c加入的二醛類化合物交聯(lián)劑進(jìn) 行第一次交聯(lián)反應(yīng)，得到載藥的水溶性殼聚糖微球芯核。二醛類化合物與殼聚糖成分的 用量可根據(jù)所用二醛類化合物與殼聚糖進(jìn)行反應(yīng)所需的活性醛基量決定。如，以含量為 2 4wt^的水溶性殼聚糖溶液與常用的15 50wt^的戊二醛交聯(lián)劑反應(yīng)為例，水溶性殼 聚糖溶液與交聯(lián)劑的用量比一般在100:0.5 1 (質(zhì)量)范圍內(nèi)都是允許的；2'將另一水溶性殼聚糖的水溶液在充分?jǐn)嚢柘录尤肷喜郊盒纬傻妮d藥水溶性殼聚 糖微球芯核的反應(yīng)體系中繼續(xù)進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)，得到在該微球芯核外形成交聯(lián)態(tài)水溶性殼 聚糖包覆層的中間產(chǎn)物；3'充分?jǐn)嚢柘孪蛲瓿缮喜椒磻?yīng)的體系中加入第二交聯(lián)劑進(jìn)行第二次交聯(lián)反應(yīng)，在上 步中間產(chǎn)物的交聯(lián)態(tài)水溶性殼聚糖包覆層外形成交聯(lián)固化的外表層，得到所說的負(fù)載了 藥物的水溶性殼聚糖微球目標(biāo)產(chǎn)物，與反應(yīng)體系分離后充分洗滌并干燥后，即可得到負(fù) '載有相應(yīng)藥物的本發(fā)明水溶性殼聚糖微球。 上述方法中所說的水溶性殼聚糖，可以由目前已有報道和減使用的方式得至U。例如， 可以采用前述文獻(xiàn)所提供的方法得到，也可以按下述方式制備將脫乙酰度為80 95%的普通殼聚糖配置成濃度為1 3wt^殼聚糖乙酸溶液，加入 到甲醇中，攪拌下滴加乙酸酐，靜置陳化，500 600轉(zhuǎn)/分鐘攪拌下加入到5 15wt% KOH(或NaOH)無水乙醇溶液中，過濾，用無水乙醇多次過濾洗滌至中性，烘干磨細(xì)過篩得到水溶性殼聚糖原料。其中殼聚糖溶液與甲醇、乙酸酐、KOH(或NaOH)無水乙醇 溶液的質(zhì)量比一般可以采用殼聚糖溶液:甲醇:乙酸酐:KOH(或NaOH)無水乙醇溶液二 100:200 400:1.1 ~1.3:1000 2000 。制備方法第r步中所說形成w/o型混合物時所用的與水不互溶的油性成分， 一般可以選擇在制藥中可以接受的垸類碳?xì)浠衔?，如液體石蠟、橄欖油、葵花子油等油性成分。所說的表面活性劑一般以選擇HLB值為4~7，特別是5~6的非離子表面活性劑為好， 特另U是如Span60、 Span65、 Span80、 Span85、 Tween20、 Tween40、 Tween60、 Tween80 等Span系列和Tween系列及其相互搭配的混合物等。例如，特別是以采用HLB值分別 為4.7、 2.1、 4.3、 1.8的Span60、 Span65、 Span80或Span85的Span系列，與HLB值分 別為16.7、 15.6、 14.9、 15的Tween20、 Tween40、 Tween60或Tween80的Tween系列 間以適當(dāng)比例相互配合使用，以調(diào)整和實現(xiàn)所說HLB值的方式最為方便。試驗結(jié)果顯示，制備所說的微球時，為獲得滿意效果，在保證所成微球的均勻性以 及所負(fù)載藥物在殼聚糖中的充分溶解分散以實現(xiàn)滿意包封的情況下，攪過速度一般可控 制在1200 2000轉(zhuǎn)/分，尤其以1800 2000轉(zhuǎn)/分為優(yōu)選。攪拌速度過低則需通過延長 攪拌時間來彌補(bǔ)，速度過快則可能會影響成球均勻性。如上述，進(jìn)行第一次交聯(lián)反應(yīng)時的二醛類化合物交聯(lián)劑，在不排除可選擇其它二醛 類化合物的情況上，尤推薦使用的是戊二醛。在進(jìn)行第一次交聯(lián)反應(yīng)時，用于形成載藥 微球芯核與用于形成交聯(lián)態(tài)水溶性殼聚糖包覆層分別使用的水溶性殼聚糖的質(zhì)量比,一 般以1:0.8 L2的大致等量為好。用于形成載藥微球芯核的殼聚糖過多而用于形成交聯(lián)態(tài) 水溶性殼聚糖包覆層的殼聚糖太少，顯然會難以形成有效的包覆；反之則包覆層過厚顯 然也可能會影響對藥物的緩釋效果。由于戊二醛有一定的揮發(fā)性，較高溫度也常易使某些藥物和/或殼聚糖受到不利影 響，因此使用戊二醛作為交聯(lián)劑時，反應(yīng)溫度不宜過高，在保證其不致顯著揮發(fā)、及所 負(fù)載的藥物和/或殼聚糖發(fā)生變性的情況下，可適當(dāng)提高反應(yīng)溫度。例如試驗結(jié)果顯示， 加熱溫度一般在室溫 60'C范圍內(nèi)均可采用，其中特別以3(TC-4(TC為優(yōu)選。同時.為'使交聯(lián)反應(yīng)能充分、滿意完成，反應(yīng)溫度較高時，所需的反應(yīng)時間相應(yīng)較短，反之亦然， 具體可根據(jù)實際反應(yīng)溫度及檢測結(jié)果適當(dāng)調(diào)整，在上述芯核外己形成有交聯(lián)態(tài)水溶性殼聚糖包覆層的中間產(chǎn)物外進(jìn)一步形成交聯(lián)固 化的外表層的第二次交聯(lián)反應(yīng)中使用的第二交聯(lián)劑，除同樣可以使用包括戊二醛在內(nèi)的 二醛類化合物外，還可以使用包括如常用的甲醛、香草醛等醛類化合物在內(nèi)的化學(xué)交聯(lián) 齊U，或包括如常用的三聚磷酸鈉、硫酸鈉、檸檬酸鈉等在內(nèi)的離子型交聯(lián)劑。仍以使用含量2 4wtX的水溶性殼聚糖水溶液為例，第二交聯(lián)劑與之前用于形成交聯(lián)態(tài)水溶性殼 聚糖包覆層的該殼聚糖水溶液的質(zhì)量比一般控制在質(zhì)量比為2 5:100范圍內(nèi)均是允許 的。交聯(lián)反應(yīng)可在延續(xù)前步反應(yīng)的條件下進(jìn)行。根據(jù)所用交聯(lián)劑的不同，完成反應(yīng)的時 間相應(yīng)有所差別， 一般在1.5~4小時內(nèi)均可滿意完成。在保證交聯(lián)反應(yīng)充分進(jìn)行的前提 下，過多延長交聯(lián)反應(yīng)時間并不會帶來更多的積極效果。對經(jīng)本發(fā)明上述過程制備得到的載藥水溶性殼聚糖微球目標(biāo)產(chǎn)物，可以采用目前已 有報道和/或使用的離心、過濾等多種方式進(jìn)行分離，其中以離心分離方式較好，有利于 減少產(chǎn)物的損失量。分離后可采用目前己有報道和/或使用的方式，分別用石油醚(或其 它酯性溶劑，以方便破乳化)和異丙醇(或其它醇類溶劑)依次充分洗滌，除盡未參與 反應(yīng)的多余殼聚糖和/或交聯(lián)劑成分后， 一般在室溫或不超過50'C的加熱時間下真空(如 0.05 0.08Mpa)干燥，以防止對所負(fù)載的藥物和/或殼聚糖造成不利影響，并能加快干燥 速度。試驗結(jié)果顯示，通過本發(fā)明上述兩次交聯(lián)方式得到的可載藥水溶性殼聚糖微球的球 形度好，不僅具有優(yōu)良的生物相容性和生物粘附性能，而且有效地解決了水溶性殼聚糖 微球強(qiáng)度低的問題，使水溶性殼聚糖載藥微球的載藥量能得以保證，并顯著提高了藥物 的包封率，具有優(yōu)異的藥物控釋性能，解決了對酸不穩(wěn)定的藥物難以用只溶解于酸溶液 的傳統(tǒng)殼聚糖包載的技術(shù)障礙，大大拓寬了殼聚糖微球載藥的應(yīng)用范圍，以滿足作為緩! 控釋藥物的載體，可供包括皮下注射、靜脈注射、腹腔注射和口服等多種給藥方式的藥 物使用。本發(fā)明上述可用于負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球的制備方法條件溫和，工藝簡 單易行，生產(chǎn)成本較低。通過對制備過程中反應(yīng)條件的控制和/或調(diào)整，例如對乳液體系 的選擇、對表面活性劑的種類和用量的調(diào)整、交聯(lián)劑的種類和/或用量的改變、以及對攪 拌速度調(diào)整等，可以制備出具有不同粒徑分布和不同控釋效果的載藥微球，以滿足不同 的實際使用需要。以下結(jié)合由附圖所示實施例的具體實施方式
，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳 細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。在不脫離本發(fā)明 上述技術(shù)思想情況下，根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識和慣用手段做出的各種替換或變更，均 應(yīng)包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。


圖1是本發(fā)明方法制備的載藥水溶性殼聚糖微球的掃描電鏡的照片。圖2是本發(fā)明方法制備的載藥水溶性殼聚糖微球的紅外譜圖。圖3是本發(fā)明方法制備的載藥水溶性殼聚糖微球的激光粒度分布圖。
具體實施方式
實施例1將脫乙酰度為95X的殼聚糖2g，在濃度為2wt^的乙酸溶液中配置成2wtX殼聚糖 乙酸溶液100g，加入到100g甲醇中，攪拌下滴加0.64g乙酸酐，靜置陳化24小時，600 轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入到500g濃度10城％的KOH無水乙醇溶液中，過濾，用無水乙 醇洗滌至中性，烘干磨細(xì)過200目篩，取篩下物為水溶性殼聚糖原料。將水溶性殼聚糖2g溶解于48g水中得到50g水溶性殼聚糖溶液，取25g水溶性殼聚 糖溶液，將模型藥物利福平0.4g均勻分散在其中，作為水相；將100g液體石蠟、1.7g Span80和0.3gTween80—起攪拌均勻作為油相；將水相加入到油相中，1800轉(zhuǎn)/分鐘攪 拌30分鐘得到乳液。在水浴35'C、 1800轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入濃度為25wt^戊二醛溶液0.18g，繼續(xù) 攪拌30分鐘。在45。C、 1600轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下，加入水溶性殼聚糖溶液25g,攪拌30 分鐘后加入濃度為25wtX戊二醛溶液0.7g,繼續(xù)攪拌反應(yīng)2小時。加入石油醚100g攪 拌10分鐘后停止攪拌，離心分離奴固體產(chǎn)物，每次用60g異丙醇離心洗滌5次，室溫真 空干燥12h得成品微球。所得載藥微球的掃描電鏡(SEM)照片如圖1所示，其紅外(IR) 光譜圖如圖2所示，其粒徑分布如圖3所示。實施例2將脫乙酰度為卯^的殼聚糖2g，在濃度為2wtX的乙酸溶液中配置成lwt^殼聚糖 乙酸溶液200g，加入到150g甲醇中，攪拌下滴加0.61g乙酸酐，靜置陳化24小時，500 轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入到700g濃度10wt^的KOH無水乙醇溶液中，過濾，用無水乙 醇洗滌至中性，烘干磨細(xì)過200目篩，取篩下物為水溶性殼聚糖原料。將水溶性殼聚糖2g溶解于48g水中得到50g水溶性殼聚糖溶液，取25g水溶性殼 聚糖溶液，將模型藥物0.2g順鉑均勻分散在其中，作為水相；將120g橄欖油、1.8g Span6G 和0.2gTween80 —起攪拌均勻作為油相；將水相加入到油相中，1500轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分 鐘得到乳液。在水浴4(TC 、 2000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入濃度為25wt^戊二醛溶液0.25g，繼續(xù) 攪拌25分鐘。在5(TC、 1800轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下，加入水溶性殼聚糖溶液25g，攪拌25 分鐘后加入濃度為25wt%甲醛水溶液l:2g，繼續(xù)攪拌反應(yīng)2小時。加入石油醚100g攪 拌10分鐘后停止攪拌，離心分離取固體產(chǎn)物，每次用60g異丙醇離心洗滌5次，室溫真 空干燥12h得成品微球。實施例3將脫乙酰度為85X的殼聚糖2g,在濃度為2wt^的乙酸溶液中配置成2wt^殼聚糖 乙酸溶液100g，加入到100g甲醇中，攪拌下滴加0.58g乙酸酐，靜置陳化24小時，500 轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入到1000g濃度5wt^的KOH無水乙醇溶液中，過濾，用無水乙 醇洗滌至中性，烘干磨細(xì)過200目篩，取篩下物為水溶性殼聚糖原料。將水溶性殼聚糖2g溶解于48g水中得到50g水溶性殼聚糖溶液，取27.8g水溶性 殼聚糖溶液，將模型藥物0.2g促胰液素均勻分散在其中，作為水相；將150g葵花子油、 l.lg Span65和0.4g Tween40 —起攪拌均勻作為油相；將水相加入到油相中，1600轉(zhuǎn)/分 鐘攪拌25分鐘得到乳液。在水浴3(TC、 1800轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入濃度為25wt^戊二醛溶液0.28g,繼續(xù) 攪拌20分鐘。在45'C、 1600轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下，加入水溶性殼聚糖溶液22.2g,攪拌 20分鐘后加濃度為25wt^香草醛乙醇溶液0.8g，繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時。加入石油醚100g 攪拌10分鐘后停止攪拌，離心分離取固體產(chǎn)物，每次用60g異丙醇離心洗滌5次，室溫 真空干燥12h得成品微球。實施例4將脫乙酰度為80X的殼聚糖2g，在濃度為2wt^的乙酸溶液中配置成3wt^殼聚糖 乙酸溶液66.7g，加入到200g甲醇中，攪拌下滴加0.55g乙酸酐，靜置陳化24小時，600 轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入到700g濃度10wt^的NaOH無水乙醇溶液中，過濾，用無水乙 醇洗滌至中性，烘干磨細(xì)過200目篩，取篩下物為水溶性殼聚糖原料將水溶性殼聚糖2g溶解于48g水中得到50g水溶性殼聚糖溶液，取25g水溶性殼 聚糖溶液，將模型藥物0.28胰島素均勻分散在其中5作為水相；將200g液體石蠟、2.1g Span85和0.9g Tween60 —起攪拌均勻作為油相；將水相加入到油相中，1500轉(zhuǎn)/分鐘攪 拌30分鐘得到乳液。在水浴35i:、 2000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入濃度為25wt^戊二醛溶液0.15g，繼續(xù) 攪拌40分鐘。在50'C、 1500轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入水溶性殼聚糖溶液25g，攪拌40 分鐘后加入飽和三聚磷酸鈉溶液1.2g，繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時。加入石油醚100g攪拌10 分鐘后停止攪拌，離心分離取固體產(chǎn)物，每次用60g異丙醇離心洗滌5次，室溫真空干 燥12h得成品微球。實施例5將脫乙酰度為85X的殼聚糖2g，在濃度為2wt^的乙酸溶液中配置成2wt^殼聚糖 乙酸溶液100g，加入到100g甲醇中，攪拌下滴加0.58g乙酸酐，靜置陳化24小時，500轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入到1000g濃度5wt^的NaOH無水乙醇溶液中，過濾，用無水乙 醇洗滌至中性，烘干磨細(xì)過200目篩，取篩下物為水溶性殼聚糖原料。將水溶性殼聚糖2g溶解于48g水中得到50g水溶性殼聚糖溶液，取22.2g水溶性 殼聚糖溶液，將模型藥物0.4g紅霉素均勻分散在其中，作為水相；將150g葵花子油、 1.7g Span80和0.3g Tween40 —起攪拌均勻作為油相；將水相加入到油相中，1800轉(zhuǎn)/分 鐘攪拌20分鐘得到乳液。在水浴3CTC、 2000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入濃度為25wt^戊二醛溶液0.2g，繼續(xù)攪 拌30分鐘。在4(TC、 1600轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入水溶性殼聚糖溶液27.8繼續(xù)攪拌40 分鐘，加入飽和硫酸鈉溶液1.3g,繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時。加入石油醚100g攪拌10分鐘 后停止攪拌，離心分離取固體產(chǎn)物，每次用60g異丙醇離心洗滌5次，室溫真空干燥12h 得成品微球。實施例6將脫乙酰度為95X的殼聚糖2g，在濃度為2wt^的乙酸溶液中配置成3wtX殼聚糖 乙酸溶液66.7g，加入到100g甲醇中，攪拌下滴加0.64g乙酸酐，靜置陳化24小時，600 轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入到500g濃度10wt^的KOH無水乙醇溶液中，過濾，用無水乙 醇洗滌至中性，烘干磨細(xì)過200目篩，取篩下物為水溶性殼聚糖原料。將水溶性殼聚糖2g溶解于48g水中得到50g水溶性殼聚糖溶液，取24g水溶性殼 聚糖溶液，將模型藥物0.4g鹽酸小檗堿均勻分散在其中，作為水相；將100g液體石蠟、 1.4g Span65和0.6g Tween80 —起攪拌均勻作為油相；將水相加入到油相中，2000轉(zhuǎn)/分 鐘攪拌20分鐘得到乳液。在水浴35'C、 2000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入濃度為25wt^戊二醛溶液0.2g，繼續(xù)攪 拌30分鐘。在45'C、 1600轉(zhuǎn)/分鐘攪拌條件下加入水溶性殼聚糖溶液26g繼續(xù)攪拌30 分鐘，加入飽和檸檬酸鈉溶液1.3g,攪拌反應(yīng)4小時。加入石油醚100g攪拌10分鐘后 停止攪拌，離心分離取固體產(chǎn)物，每次用60g異丙醇離心洗滌5次，室溫真空干燥12h 得成品微球。
權(quán)利要求
1.可用于負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球，其特征是在用于負(fù)載藥物的交聯(lián)態(tài)的水溶性殼聚糖芯核外依次包裹有交聯(lián)態(tài)的水溶性殼聚糖包覆層和交聯(lián)固化的外表層。
2. 如權(quán)利要求1所述的可用于負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球，其特征是所說的交 聯(lián)態(tài)的水溶性殼聚糖芯核由水溶性殼聚糖與二醛類化合物反應(yīng)所形成的交聯(lián)態(tài)結(jié)構(gòu)。
3. 如權(quán)利要求2所述的可用于負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球，其特征是所說的交 聯(lián)態(tài)的水溶性殼聚糖芯核及其外包裹的交聯(lián)態(tài)水溶性殼聚糖包覆層為由二醛化合物分別 與水溶性殼聚糖芯核內(nèi)及包裹于外的水溶性殼聚糖反應(yīng)所形成的交聯(lián)態(tài)結(jié)構(gòu)。
4. 如權(quán)利要求1至3之一所述的可用于負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球，其特征是 所說的交聯(lián)固化外表層為由所說該交聯(lián)態(tài)的水溶性殼聚糖包覆層與交聯(lián)劑反應(yīng)所形成的 交聯(lián)固化層。
5. —種負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球的制備方法，其特征是按下述方式進(jìn)行1'將與水不互溶的油性成分與表面活性劑充分?jǐn)嚢杈鶆蜃鳛橛拖嗷旌衔锖螅瑢⒕鶆?混合有水溶性殼聚糖和希望負(fù)載的水分散的藥物的混合溶液加入該油相混合物并充分?jǐn)?拌，形成油包水型混合物，然后'在充分?jǐn)嚢柘屡c加入的二醛類化合物交聯(lián)劑進(jìn)行第一次 交聯(lián)反應(yīng)，得到載藥的水溶性殼聚糖微球芯核；2'將另一水溶性殼聚糖的水溶液在充分?jǐn)嚢柘录尤肷喜揭研纬傻妮d藥水溶性殼聚 糖微球芯核的反應(yīng)體系中繼續(xù)進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)，得到在該微球芯核外形成交聯(lián)態(tài)水溶性殼 聚糖包覆層的中間產(chǎn)物；3'充分?jǐn)嚢柘孪蛲瓿缮喜椒磻?yīng)的體系中加入第二交聯(lián)劑進(jìn)行第二次交聯(lián)反應(yīng)，在上 步中間產(chǎn)物的交聯(lián)態(tài)水溶性殼聚糖包覆層外形成交聯(lián)固化的外表層，得到所說的負(fù)載了 藥物的水溶性殼聚糖微球目標(biāo)產(chǎn)物，與反應(yīng)體系分離后充分洗滌并干燥。
6. 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是所說進(jìn)行第一次交聯(lián)反應(yīng)用的油相混 合物為包括液體石蠟、橄欖油、葵花子油在內(nèi)的烷類碳?xì)浠衔锱cHLB值為4~7的非 離子表面活性劑的混合溶液。
7. 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是所說進(jìn)行第一次交聯(lián)反應(yīng)用的二醛類 化合物交聯(lián)劑為戊二醛。
8. 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是所說進(jìn)行第一次交聯(lián)反應(yīng)中用于形成 載藥微球芯核和形成交聯(lián)態(tài)水溶性殼聚糖包覆層分別使用的水溶性殼聚糖的質(zhì)量比為 1:0.8~1.2。
9. 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是所用的水溶性殼聚糖為含量2 4wtX 的水溶液，形成交聯(lián)固化的外表層的第二交聯(lián)劑為包括甲醛、戊二醛、香草醛在內(nèi)的化 學(xué)交聯(lián)劑，或包括三聚磷酸鈉、硫酸鈉、檸檬酸鈉在內(nèi)的離子交聯(lián)劑，第二交聯(lián)劑與用 于形成交聯(lián)態(tài)水溶性殼聚糖包覆層的含量2 4wtX的水溶液的質(zhì)量比為2 5:100。
10. 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是所說得到的負(fù)載了藥物的水溶性殼 聚糖微球目標(biāo)產(chǎn)物經(jīng)離心分離后，分別用石油醚和異丙醇依次充分洗滌，并在室溫下真 空干燥。
全文摘要
可用于負(fù)載藥物的水溶性殼聚糖微球及其制備方法。微球的結(jié)構(gòu)是在可負(fù)載藥物的交聯(lián)態(tài)水溶性殼聚糖芯核外依次包裹有交聯(lián)態(tài)水溶性殼聚糖包覆層和交聯(lián)固化外表層，可用于對藥物包載和控制釋放。制備方法是先用將混合有水溶性殼聚糖和相應(yīng)水分散的藥物與油性成分形成W/O型混合物，與二醛類交聯(lián)劑反應(yīng)得到載藥的微球芯核，再用水溶性殼聚糖溶液在其外側(cè)形成交聯(lián)態(tài)包覆層，最后經(jīng)第二次交聯(lián)反應(yīng)形成交聯(lián)固化表層。該殼聚糖載藥微球粒徑分布和緩釋效果可控，強(qiáng)度顯著提高，生物相容性和生物粘附性好，擴(kuò)大了載藥的適用范圍，藥物包載和控釋效果好，可用于皮下、靜脈及腹腔注射給藥和口服等多種給藥方式，且制備方法簡單易行，條件溫和，生產(chǎn)成本較低。
文檔編號A61K9/16GK101214228SQ20081004517
公開日2008年7月9日 申請日期2008年1月14日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月14日
發(fā)明者孫愛民, 奕 左, 利 張, 李峻峰, 李玉寶 申請人:四川大學(xué)