專利名稱：：靈芝孢子油在制備美白祛斑化妝品或藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種靈芝孢子油的應(yīng)用，具體涉及一種靈芝孢子油在制備美白祛斑化妝品或藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：人類皮膚的顏色取決于黑色素的含量與分布，而黑色素細(xì)胞的結(jié)構(gòu)功能和數(shù)量直接影響皮膚中黑色素的含量，也是產(chǎn)生黑色素的決定因素。在皮膚代謝循環(huán)過程中，存在于黑色素細(xì)胞組織中的酪氨酸在酪氨酸酶、多巴色素互變酶、二羥基吲哚酸(DHICA)氧化酶作用下經(jīng)過多巴、多巴醌、多巴色素、二羥基吲哚酸等中間體逐步轉(zhuǎn)化為真黑色素。當(dāng)黑色素過速增長(zhǎng)和分布不均時(shí)，就會(huì)造成局部皮膚過黑及色素沉著。另外，黑色素細(xì)胞接受到存在于細(xì)胞外部一種稱之為"內(nèi)皮素"的物質(zhì)，就得到了加速制造黑色素的信息，而且酪氨酸酶也被激活，皮膚就變黑了。皮膚不同區(qū)域產(chǎn)生的內(nèi)皮素多少不同，皮膚就會(huì)產(chǎn)生深淺不一，從而產(chǎn)生色斑。按照《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》中的定義，化妝品是以涂抹、噴灑或其他類似的方法，施于人體表明任何部位(皮膚、毛發(fā)、指甲、口唇、口腔黏膜等)，以達(dá)到清潔、消除不良?xì)馕?、護(hù)膚、美容和修飾目的的產(chǎn)品。美白化妝品可以增進(jìn)肌膚白皙，淡化色素、色斑。美白化妝品正在為改善、提高人們的生活起著不可忽視的作用，也越來越受到消費(fèi)者的青睞，作為美容事業(yè)中的一大產(chǎn)業(yè)，隨著美白化妝品需求量的增加，其市場(chǎng)前景廣闊。在篩選美白劑有效成分時(shí)，在考慮其美白效果的同時(shí)，也應(yīng)關(guān)注其衛(wèi)生安全性，開發(fā)出高效、低毒的美白化妝品才是真正服務(wù)大眾。實(shí)踐證明，一些天然中草藥成分具有很好的美白、祛斑效果，并得到一定的臨床肯定，而我國(guó)中藥藥源豐富、無不良反應(yīng)，因此篩選有效的中草藥并結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的新型制劑組成新的低毒或無毒但有效美白的劑型將有著廣闊的研究應(yīng)用前景。靈芝，別名赤芝、紅芝、木靈芝、菌靈芝、靈芝草。來源于多孔科真菌靈芝/"c^wm(Z^饑e;c的子實(shí)體。菌柄側(cè)生，極少偏生，長(zhǎng)于菌蓋直徑，紫褐色至黑色，有漆樣光澤，堅(jiān)硬。靈芝是我國(guó)中醫(yī)藥寶庫(kù)中的珍品，素有"仙草"之美譽(yù)。古今藥理與臨床研究均列為可"養(yǎng)生、無毒、長(zhǎng)期服用無副作用，能使身子輕盈、防老化、益元?dú)?、延年益壽的上?，明代著名醫(yī)藥學(xué)家李時(shí)珍的《本草綱目》記載，靈芝主治胸中結(jié)，益心氣，補(bǔ)中，增智慧，不忘；久食，輕身不老，延年神仙。現(xiàn)代藥理學(xué)與臨床實(shí)踐進(jìn)一步證實(shí)了靈芝的藥理作用，現(xiàn)在，靈芝作為藥物已經(jīng)正式被國(guó)家藥典收載，同時(shí)它又是國(guó)家批準(zhǔn)的新資源食品，無毒副作用，可以藥食兩用?？茖W(xué)研究表明，靈芝的藥理成分非常豐富，其中有效成分可分為十大類，包括靈芝多糖、靈芝多肽、三萜類、16種氨基酸(其中含有七種人體必需氨基酸)、蛋白質(zhì)、甾類、甘露醇、香豆精苷、生物堿、有機(jī)酸(主要含有延胡索酸)，以及微量元素Ge、P、Fe、Ca、Mn、Zn等。靈芝對(duì)人體具有雙向調(diào)節(jié)作用，所治病種，涉及心腦血管、消化、神經(jīng)、內(nèi)分泌、呼吸、運(yùn)動(dòng)等各個(gè)系統(tǒng)，尤其對(duì)腫瘤、肝臟病變、失眠及衰老的防治作用十分顯著。靈芝孢子粉是靈芝發(fā)育后期彈射釋放出來的種子，生物學(xué)上稱為擔(dān)孢子，集中起來后成粉末狀，通稱靈芝孢子粉。靈芝孢子粉富含多糖肽、三萜類靈芝酸、天然有機(jī)鍺、酶類、硒元素等活性物質(zhì)。靈芝孢子粉經(jīng)破壁后進(jìn)行二氧化碳超臨界萃取，即得靈芝孢子油，為靈芝孢子中的活性物質(zhì)，主要成分為靈芝酸，不飽和脂肪酸等，為清涼黃色透明液體。經(jīng)藥理實(shí)驗(yàn)證明具有如下功效1、雙向調(diào)節(jié)人體免疫力；2、抑制腫瘤細(xì)胞的生理活性，預(yù)防癌細(xì)胞的再生和轉(zhuǎn)移；3、創(chuàng)造治療機(jī)會(huì)，使只能保守治療的患者能夠有機(jī)會(huì)接受手術(shù)及放、化療。4、減輕患者因放化療引起的毒副作用，尤其是白細(xì)胞減少癥，提高患者對(duì)放化療的耐受性。但是，至今還未見靈芝孢子油外用的報(bào)道，特別是在具有美白祛斑效果的化妝品或藥物中的應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供靈芝孢子油的新用途，即靈芝孢子油在制備美白祛斑的化妝品或藥物中應(yīng)用。靈芝孢子油可單獨(dú)使用直接涂抹于皮膚用于美白祛斑；或加入用于化妝品領(lǐng)域的普通添加劑，如防腐劑、抗氧化劑、穩(wěn)定劑、臭味吸收劑、螯合劑、顏料、表面活性劑、香料、溶劑等按照制備化妝品的常規(guī)工藝制備面霜、面膜、護(hù)膚水等；或加入藥學(xué)上可接受的輔料按照制備外用藥物的常規(guī)工藝制備美白祛斑的外用藥物。采用靈芝孢子油制備的具有美白祛斑效果的化妝品或藥物存在形態(tài)及采用的劑型可以不限于任何形式。本發(fā)明經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)靈芝孢子油無毒、無刺激性、并可以增進(jìn)肌膚白皙，淡化色素、色斑，適于在制備美白祛斑的化妝品或藥物中應(yīng)用。其中，所述的斑點(diǎn)不限于任何形式的色素沉著的斑點(diǎn)；所述的藥物為具有美白祛斑效果的外用藥物。皮膚毒性、刺激性試驗(yàn)和美白效果試驗(yàn)-受試物靈芝孢子油，按實(shí)施例2方法制備得到。1、大鼠急性經(jīng)皮性試驗(yàn)大鼠急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)采用最大限量法。設(shè)10000mg/kg—個(gè)劑量組，20只SD大鼠，雌雄各半。備皮剪去大鼠脊椎兩側(cè)的被毛，去毛面積為4x5cm2。24h后確認(rèn)無皮膚損傷，以lml/100g.bw將該劑量組溶液滴于6層紗布上，貼敷于已去毛的皮膚上，覆蓋稱量紙，膠布固定。4h后，取下紗布，洗去殘留物，觀察其中毒癥狀、體征，連續(xù)觀察二周，判定其毒性分類。靈芝孢子油lOgZkg.bw劑量經(jīng)皮染毒后，兩周內(nèi)未見動(dòng)物死亡，亦無明顯的中毒癥狀或不良反應(yīng)，結(jié)果見表5。兩周實(shí)驗(yàn)結(jié)束后剖殺全部動(dòng)物，內(nèi)臟器官未見明顯異常改變。即靈芝孢子油對(duì)雌、雄性SD大鼠的急性經(jīng)皮MTD大于10g/kg.bw，屬實(shí)際無毒類。表l靈芝孢子油對(duì)SD大鼠的急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>2、皮膚刺激性試驗(yàn)家兔急性皮膚刺激試驗(yàn)白色家兔4只，剪去脊柱兩側(cè)的被毛，去毛面積兩側(cè)各為2x3cm2，24h后確認(rèn)無皮膚損傷，將l.Omg靈芝孢子油涂布在已去毛的兔背右側(cè)皮膚上，左側(cè)用蒸餾水作對(duì)照，覆蓋2層級(jí)紗布和稱量紙，膠布固定。持續(xù)4h后，取下紗布，洗去殘留物，觀察去除受試物后的l、24、48及72h的皮膚刺激反應(yīng)和恢復(fù)情況，計(jì)算刺激反應(yīng)的平均分值，作出評(píng)價(jià)。多次皮膚刺激性試驗(yàn)白色家兔4只，剪去脊柱兩側(cè)的被毛，去毛面積兩側(cè)各為2x3cm2，24h后確認(rèn)無皮膚損傷，將l.Omg靈芝孢子油涂布在已去毛的兔背右側(cè)皮膚上，左側(cè)用蒸餾水作對(duì)照，每天涂抹1次，連續(xù)涂抹14d。從第二天開始，每次涂抹前應(yīng)剪毛,用水清除殘留受試物。一小時(shí)后觀察結(jié)果，計(jì)算剌激反應(yīng)的平均分值，作出評(píng)價(jià)。靈芝孢子油對(duì)四只家兔急性皮膚刺激反應(yīng)和多次皮膚刺激反應(yīng)的紅斑、水腫形成評(píng)分之和的均值最高為0，見表2，表3。根據(jù)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，表明靈芝孢子油對(duì)家兔皮膚無刺激性。_表2靈芝孢子油對(duì)家兔皮膚刺激試驗(yàn)結(jié)果_^1小時(shí)24小時(shí)48小時(shí)72小時(shí)刺激溫度無刺激無刺激無刺激無刺激無刺激無刺激無刺激無刺激表3靈芝孢子油對(duì)家兔多次皮膚刺激性試驗(yàn)結(jié)果刺激反應(yīng)積分動(dòng)物數(shù)(只)受試物對(duì)照紅斑水腫總分紅斑水腫總分14000000240000003400000044000000540000006400000074000000840000009400000010400000011400000012400000013400000014400000014天每只動(dòng)物積分均值000000每天每只動(dòng)物積分均值0000003、家兔眼刺激試驗(yàn)白色家兔4只，確認(rèn)無眼疾病后，在一側(cè)眼結(jié)膜囊中滴入0.2mg的靈芝孢子油，另一側(cè)眼作空白對(duì)照。觀察滴眼后1、24、48、72h及4、7d的眼結(jié)膜、虹膜、角膜的刺激反物性編別號(hào)1雄2雄3雌4雌積分均值對(duì)照紅水斑腫0000000000受試物紅水斑腫0000000000對(duì)照紅水斑腫0000000000對(duì)照紅水斑腫0000000000物水腫ooooo試受紅斑coooo物水腫ooooo試受紅斑coooo水腫oooo對(duì)紅斑ooo物水腫oooo試受，y斑oooo應(yīng)和恢復(fù)情況，計(jì)算眼刺激積分指數(shù)，作出評(píng)價(jià)。靈芝孢子油對(duì)四只家兔眼睛急性剌激反應(yīng)的最高刺激指數(shù)均值為0.25，見表4，24h后為0，根據(jù)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，表明靈芝孢子家兔眼睛無刺激性。表4靈芝孢子油對(duì)家兔眼睛刺激性試驗(yàn)結(jié)果平均刺激指數(shù)000000004、皮膚美白試驗(yàn)40只成年黑色或褪色豚鼠，隨機(jī)分為2個(gè)組，即受試物組和陰性對(duì)照組，每組20只，雌雄各半。試驗(yàn)方法如下，試驗(yàn)前24h剪去豚鼠背部左側(cè)的被毛，面積為3x3cm2。24h后確定無皮膚損傷，將受試藥物組涂抹0.1mg的靈芝孢子油，封閉固定，持6h后，洗去殘留物。第3天，第5天，第7天，第9天，同樣方法重復(fù)一次。第十天將受試物與陰性對(duì)照組豚鼠皮膚進(jìn)行比較受試組皮膚顏色明顯變淺，更有彈性且飽滿度與緊致度更好。眼刺激反應(yīng)積分<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>位膜膜膜分膜膜膜分膜膜膜分膜膜膜分部結(jié)虹角積結(jié)虹角積結(jié)虹角積結(jié)虹角積分物號(hào)1總5、人體試用試驗(yàn)以靈芝孢子油乳液為供試品，選有日曬引起臉部皮膚變黑、有嚴(yán)重色斑的自愿者40人試用，年齡為4160歲。40位受試者每天睡前清潔皮膚后，涂抹按實(shí)施例l方法制備得到靈芝孢子油乳液約3~5g至臉上。30天后，統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明涂抹靈芝孢子油乳液有明顯效果(皮膚明顯變白，更加光滑細(xì)膩，色斑明顯淡化)的32人，占80%;顯效(皮膚變白，光滑，色斑淡化)的為7人，占17.5%;無效果的為l人，占2.5%。以靈芝孢子油面膜為供試品，選有日曬引起臉部皮膚變黑變粗現(xiàn)象的自愿者40人試用，年齡為2546歲。40位受試者每天下午清潔皮膚后，按實(shí)施例5方法，將23g靈芝孢子油滲于面膜紙，每天做面膜30分鐘。20天后，統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明有明顯效果的34人，占85%;顯效的為6人，占15%。靈芝孢子油面膜敷面后，面部皮膚彈性有光澤、飽滿度、白皙度、緊致度更好。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明。實(shí)施例l取靈芝孢子油10g，純凈水100g，混合后通過膠體磨乳化得乳液，用巴氏消毒法消毒后冷卻、過濾、裝瓶，裝瓶后04'C冷藏。使用時(shí)，開瓶后直接涂抹皮膚。實(shí)施例2取靈芝孢子油ioog，用巴氏消毒法消毒后冷卻、過濾、裝瓶，裝瓶后o4t:冷藏。使用時(shí)，開瓶后直接涂抹皮膚。實(shí)施例3將10g靈芝孢子油，24g硬脂酸，7g單硬脂酸甘油酯，12g液狀石蠟，2g白凡士林，10g羊毛脂加熱至80。C左右混合熔化，另將lg三乙醇胺和135g水亦加熱至8(TC左右，在等溫下將水相緩緩倒入油相中，并于80。C左右不斷攪拌至呈乳白色半固體狀，再在室溫下攪拌至近凝，裝瓶后04'C冷藏。使用時(shí)，開瓶后直接涂抹皮膚。實(shí)施例4取靈芝孢子油約23g，用蜂蜜或蛋清調(diào)和成漿。將面洗凈后，敷于面部，30min后洗去。實(shí)施例5將23g靈芝孢子油滲于面膜紙即可，每天做面膜30min。靈芝孢子油可以通過如下方法進(jìn)行提取分離可按照申請(qǐng)?zhí)枮?9123952.0的專利文獻(xiàn)公開的方法制備得到，具體步驟為選取飽滿靈芝孢子進(jìn)行破壁處理，再用純化水做粘合劑制成大小一致的粗顆粒，加水量使所述靈芝孢子粉粘結(jié)成型為準(zhǔn)，自然干燥；然后進(jìn)行二氧化碳超臨界萃取將干燥后的靈芝孢子粗顆粒裝入萃取器中，從萃取器底部通入C02氣，控制溫度為35-65°C，壓力20-35MPa，萃取135小時(shí)后，從萃取器上部流出含有靈芝孢子油的C02進(jìn)入減壓分離器，靈芝孢子油從減壓分離器底部放出，C02從減壓分離器的頂部流出；將靈芝孢子油的水及膠狀物分離除去后得到純化的靈芝孢子油，從萃取器回收脫脂的靈芝孢子份。靈芝孢子油得率為10~20%。權(quán)利要求1.靈芝孢子油在制備美白祛斑化妝品或藥物中的應(yīng)用。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物為外用藥物。全文摘要本發(fā)明公開了靈芝孢子油在制備美白祛斑化妝品或藥物中的應(yīng)用。靈芝孢子油制備的美白祛斑化妝品或藥物具有增進(jìn)肌膚白皙，淡化色素、色斑的作用，具有良好的應(yīng)用前景。文檔編號(hào)A61P17/00GK101366691SQ200810021958公開日2009年2月18日申請(qǐng)日期2008年8月20日優(yōu)先權(quán)日2008年8月20日發(fā)明者敏馮,鵬馮,誠(chéng)劉,華克偉,張文萍,潔曹,朱韻韻,王連安,錢一帆,陳素玲申請(qǐng)人:南京中科集團(tuán)股份有限公司