專利名稱：Raf抑制劑化合物及其使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
提供為Raf激酶的抑制劑的化合物，以及包含這些化合物的組合物及其使用方法。該化合物用于抑制Raf激酶以及用于治療由其介導(dǎo)的疾病。也提供使用本發(fā)明的化合物用于體外、原位和體內(nèi)診斷或治療哺乳動(dòng)物細(xì)胞和/或相關(guān)病理狀態(tài)的方法。
現(xiàn)有技術(shù)的描述 Raf/MEK/ERK(胞外信號(hào)-調(diào)節(jié)的激酶)激酶級(jí)聯(lián)在將信號(hào)從膜受體傳遞至轉(zhuǎn)錄因子是關(guān)鍵的，該轉(zhuǎn)錄因子在調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)展中控制基因表達(dá)達(dá)到終點(diǎn)(Robinson，MJ和Cobb，MH(1997)Curr.Opin.Cell Biol.，9180-186)。此級(jí)聯(lián)可通過(guò)ERK2和p90(Rsk)活化和細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白的磷酸化來(lái)阻止細(xì)胞死亡(Shelton，JG，等人(2003)Oncogene，22(16)2478-92)。該P(yáng)I3K/Akt激酶級(jí)聯(lián)也控制凋亡，且可磷酸化許多細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白。這些通路相互交織為能夠磷酸化Raf且致使其失活的Akt，且對(duì)于Akt的抗凋亡作用需要Raf。Raf為參與傳遞生長(zhǎng)、抗凋亡和分化信息的關(guān)鍵絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶。這些信號(hào)在受體連接后開(kāi)始，并且傳遞至MAP激酶級(jí)聯(lián)的膜，該MAP激酶級(jí)聯(lián)隨后活化控制基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子。
Raf為表達(dá)癌蛋白激酶的多基因家族A-Raf，B-Raf和C-Raf(也稱為Raf-1)(McCubrey，JA，等人，(1998)Leukemia 12(12)1903-1929；Ikawa，等人，(1988)Mol.and Cell.Biol.，8(6)2651-2654；Sithanandam，等人，(1990)Oncogene，51775-1780；Konishi，等人，(1995)Biochem.and Biophys.Res.Comm.，216(2)526-534)。所有的3種Raf激酶在某些人造血細(xì)胞中功能性存在，且它們的異常表達(dá)可致使廢除細(xì)胞因子依賴性。因?yàn)镃-Raf和A-Raf對(duì)于完全活化需要在激酶區(qū)域的N部位的其它絲氨酸和酪氨酸磷酸化(Mason等人，(1999)EMBO J.，182137-2148)，以及B-Raf比A-Raf或C-Raf具有更高的基礎(chǔ)激酶活性，因此它們的調(diào)節(jié)機(jī)理不同。這三種Raf癌蛋白在促有絲分裂的和抗凋亡信號(hào)的傳遞中起著重要的作用?，F(xiàn)已顯示B-Raf在多種人類癌癥中頻繁變異(Wan，等人，(2004)Cell，116855-867)。特異性Raf抑制劑的開(kāi)發(fā)可證明在癌癥治療中的有效性。血小板衍生的生長(zhǎng)因子受體(PDGFR)家族的細(xì)胞質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸激酶B-Raf和受體酪氨酸激酶通常在癌癥中被等價(jià)氨基酸的變異而活化。結(jié)構(gòu)研究已經(jīng)在為什么這些非常不同的激酶共用相似的致癌熱點(diǎn)以及為什么PDGFR近膜區(qū)為常見(jiàn)的致癌靶點(diǎn)提供了重要的線索(Dibb，NJ(2004)Nature Reviews Cancer，4(9)718-27)。
正常黑色素細(xì)胞向黑素瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)化通過(guò)生長(zhǎng)刺激通路的活化而實(shí)現(xiàn)的，該活化通常導(dǎo)致細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡和腫瘤抑制基因通路的失活。生長(zhǎng)刺激通路中的蛋白的小分子抑制劑正在積極的研究中，且它們?cè)诤谒亓龌颊咧械膽?yīng)用將代表治療策略以抑制細(xì)胞增殖或誘導(dǎo)細(xì)胞死亡(Polsky，D.，(2003)Oncogene，22(20)3087-3091；Konopleva，M.，等人，(2003)Blood，102(11)625a)。
B-Raf編碼RAS-調(diào)節(jié)的激酶，該激酶介導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)和惡性轉(zhuǎn)化激酶通路活化。在66％的黑素瘤以及較少百分比的其它許多人類癌癥中鑒定了活化的B-Raf變異。B-Raf變異也是非小細(xì)胞肺癌(NSCLCs)中常見(jiàn)的MAP激酶通路活化的主要因素，包括V600E和其它鑒定為新的變異，改變AKT-介導(dǎo)的B-Raf磷酸化中重要的殘基，這表明AKT-誘導(dǎo)的B-Raf抑制的破壞可在惡性轉(zhuǎn)化中起到作用。盡管黑素瘤中＞90％的B-Raf變異涉及密碼子600(60中的57)，但至今在NSCLC中報(bào)導(dǎo)的9個(gè)B-Raf變異中的8個(gè)為非-V600(89％；P＜10-7)，這強(qiáng)烈地表明NSCLC中的B-Raf變異與黑素瘤中的那些性質(zhì)上不同；因此，在對(duì)于RAF抑制劑的響應(yīng)中，肺癌和黑素瘤之間存在治療差異。盡管不常見(jiàn)，但人肺癌中B-Raf變異可鑒定對(duì)靶向治療敏感的子類腫瘤(Brose，MS，等人，(2002)Cancer Research，62(23)6997-7000)。
Raf蛋白激酶為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的關(guān)鍵組成，通過(guò)其特異性細(xì)胞外刺激在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中顯示精密的細(xì)胞響應(yīng)。經(jīng)活化的細(xì)胞表面受體在質(zhì)膜的內(nèi)部活化ras/rap蛋白，其反過(guò)來(lái)恢復(fù)并活化Raf蛋白。經(jīng)活化的Raf蛋白磷酸化和活化胞內(nèi)蛋白激酶MEK1和MEK2。反過(guò)來(lái)，經(jīng)活化的MEKs催化p42/p44絲裂原-活化的蛋白激酶(MAPK)的磷酸化和活化。經(jīng)活化的MAPK的許多胞質(zhì)的和核底物是已知的，其直接或間接有助于對(duì)環(huán)境變化的細(xì)胞響應(yīng)。
正在開(kāi)發(fā)Raf/MEK/ERK通路的小分子抑制劑用于抗癌治療(Thompson等人，(2005)Current Opinion in Pharmacology 51-7)。已經(jīng)表明Raf激酶的抑制劑用于破壞腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，且因此在治療癌癥中使用，例如組織細(xì)胞性淋巴瘤、肺腺癌、小細(xì)胞肺癌和胰腺癌和乳腺癌；以及也用于治療和/或預(yù)防與缺血性事件導(dǎo)致的神經(jīng)元變性相關(guān)的疾病，所述缺血時(shí)間包括心臟停搏、中風(fēng)和多發(fā)性腦梗死性癡呆后的腦缺血，以及如那些由腦損傷、手術(shù)和/或在分娩期間的腦缺血事件(神經(jīng)外傷)后的腦缺血。具體地，對(duì)于通過(guò)激酶活化的NGF誘導(dǎo)的細(xì)胞外信號(hào)傳導(dǎo)，已經(jīng)表明B-Raf為由神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)活化的主要的Raf同工型(York等人，(2000)Mol.andCell.Biol.20(21)8069-8083)。
PCT專利申請(qǐng)WO 2007/027855尤其公開(kāi)了多種作為Raf抑制劑的化合物。這些化合物據(jù)報(bào)導(dǎo)可用于治療過(guò)度增殖性疾病如癌癥。
發(fā)明概述 在一方面，本發(fā)明涉及為Raf激酶的抑制劑的化合物，尤其是為B-Raf激酶的抑制劑的化合物。某些過(guò)度增殖性疾病的特征為Raf激酶功能的過(guò)度活化，例如通過(guò)蛋白的變異或過(guò)表達(dá)。相應(yīng)地，本發(fā)明的化合物用于治療過(guò)度增殖性疾病如癌癥。
更具體地，本發(fā)明的一個(gè)方面提供式I化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1、R2、R3和R4如本文所定義。
本發(fā)明的另一方面提供式IIa化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1、R3和R4如本文所定義。本發(fā)明的另一方面提供式II化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供式IIIa化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1、R3和R4如本文所定義。
本發(fā)明的另一方面提供式III化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的另一方面提供預(yù)防或治療由Raf激酶調(diào)節(jié)的疾病(disease)或障礙(disorder)的方法，該方法包括向有此治療需要的哺乳動(dòng)物給藥有效量的本發(fā)明的化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽。此類疾病和病癥的實(shí)例包括，但不限于，過(guò)度增殖性疾病(hyperproliferative disorder)(如癌癥，包括黑素瘤和皮膚的其它癌癥)、神經(jīng)變性、心臟肥大、疼痛、偏頭痛和神經(jīng)創(chuàng)傷性疾病(neurotraumatic disease)。
本發(fā)明的另一方面提供預(yù)防或治療癌癥的方法，該方法包括向有此治療需要的哺乳動(dòng)物單獨(dú)給藥有效量的本發(fā)明的化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽，或與一種或多種其它具有抗癌性質(zhì)的化合物組合給藥。
本發(fā)明的另一方面提供治療哺乳動(dòng)物的過(guò)度增殖性疾病的方法，其包括向該哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明的另一方面提供本發(fā)明的化合物在制備用于治療過(guò)度增殖性疾病的藥物中的用途。
本發(fā)明的另一方面提供藥物組合物，其包含本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
本發(fā)明的另一方面提供制備6-取代的吲唑的方法。
本發(fā)明的另一方面包括本發(fā)明的化合物的制備方法、分離方法和純化方法。
發(fā)明詳述 現(xiàn)對(duì)本發(fā)明的某些實(shí)施方案詳細(xì)地描述，其實(shí)例在隨后的結(jié)構(gòu)和式中示例性地說(shuō)明。當(dāng)本發(fā)明與所列舉的實(shí)施方案結(jié)合來(lái)描述時(shí)，應(yīng)當(dāng)理解為其不是為了將本發(fā)明限制于那些實(shí)施方案中。相反，本發(fā)明意欲包括所有的變化、改良和等價(jià)形式，其可如由權(quán)利要求所定義的那樣包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到許多類似或等價(jià)于本文中描述的可用于實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的那些方法和物質(zhì)。本發(fā)明不以任何方式限定為所述的方法和物質(zhì)。在一個(gè)或多個(gè)所引入的文獻(xiàn)和類似的物質(zhì)不同于本申請(qǐng)或與本發(fā)明相抵觸的情況下(包括但不限于定義的術(shù)語(yǔ)、術(shù)語(yǔ)的用法、描述的技術(shù)等)，以本發(fā)明為準(zhǔn)。
定義 在此使用的術(shù)語(yǔ)″烷基″是指飽和直鏈或支鏈單價(jià)碳原子的烴基，其中該烷基可任選被一個(gè)或多個(gè)下述取代基獨(dú)立地取代。
″碳環(huán)″和″碳環(huán)基″是指單價(jià)非芳香、飽和或不飽和環(huán)，其中該碳環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)下述取代基獨(dú)立地取代。
″芳基″是指從母體芳香環(huán)體系的單碳原子上除去1個(gè)氫原子而衍生的單價(jià)碳原子的芳香烴基。在示例性結(jié)構(gòu)中，一些芳基示例性的表示為″Ar″。
″雜芳基″、″雜環(huán)基″和″雜環(huán)″所有的均指環(huán)體系，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子為雜原子，例如，氮、氧和硫。該雜環(huán)基可為飽和、部分不飽和或全部不飽和的。該雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)下述取代基獨(dú)立地取代。
術(shù)語(yǔ)″雜芳基″也包括包含一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧和硫的雜原子的芳香環(huán)。本文中一些雜芳基表示為″hetAr″。該雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)下述取代基獨(dú)立地取代。
術(shù)語(yǔ)″治療(treat)″或″治療(treatment)″是指治療性治療和預(yù)防性(prophylactic or preventative)測(cè)量，其中目標(biāo)為預(yù)防或減緩(減輕)不需要的生理學(xué)變化或障礙，如癌癥的發(fā)展或擴(kuò)散。出于本發(fā)明的目的，益處或所需的臨床結(jié)果包括，但不限于，癥狀的減輕，疾病程度的減弱、疾病狀態(tài)的穩(wěn)定(即，不惡化)、疾病發(fā)展的延遲或減緩、疾病狀態(tài)的改善或緩和，和緩解(部分或全部)，不論可檢測(cè)到還是檢測(cè)不到?！逯委煛逡部芍概c如果不接受治療期望的存活相比延長(zhǎng)存活。那些有治療的需要包括已經(jīng)患有病癥或疾病的那些以及易于患有病癥(condition)或疾病的那些，或者是其中為了要預(yù)防的病癥或疾病的那些。術(shù)語(yǔ)″治療″包括預(yù)防，即預(yù)防性治療和姑息性治療。
短語(yǔ)″治療有效量″是指本發(fā)明化合物的量，其可(i)治療或預(yù)防具體疾病、病癥或障礙，(ii)減弱、改善或消除具體疾病、病癥或障礙的一種或多種癥狀，或(iii)預(yù)防或延遲本文所述的具體疾病、病癥或障礙的一種或多種癥狀的發(fā)作。在癌癥的情況下，治療有效量的藥物可以減少癌細(xì)胞的數(shù)量；降低腫瘤的大小；抑制(即，一定程度上減緩，且優(yōu)選停止)癌細(xì)胞對(duì)周圍器官的侵入；抑制(即，一定程度上減緩，且優(yōu)選停止)腫瘤轉(zhuǎn)移；一定程度上抑制腫瘤生長(zhǎng)；和/或一定程度上減輕與癌癥相關(guān)的一種或多種癥狀。一定程度上，該藥物可阻止生長(zhǎng)和/或殺死有癌的細(xì)胞，其可為細(xì)胞生長(zhǎng)抑制藥和/或細(xì)胞毒劑。對(duì)于癌癥治療，效力可(例如)通過(guò)評(píng)價(jià)疾病進(jìn)展時(shí)間(TTP)和/或確定響應(yīng)速率(RR)來(lái)測(cè)定。
術(shù)語(yǔ)″癌癥″和″癌性的″是指或描述一般特征為細(xì)胞生長(zhǎng)失調(diào)的哺乳動(dòng)物的生理學(xué)狀態(tài)。″腫瘤″包括一種或多種癌性細(xì)胞。癌癥的實(shí)例包括，但不限于，癌瘤、淋巴瘤、母細(xì)胞瘤、肉瘤，和白血球過(guò)多癥或淋巴樣惡性腫瘤。此類癌癥更具體的實(shí)例包括鱗狀細(xì)胞癌(例如，鱗狀上皮細(xì)胞癌)、肺癌包括小細(xì)胞肺癌、非小細(xì)胞肺癌(″NSCLC″)、肺的腺癌和肺的鱗狀細(xì)胞癌、腹膜癌、肝細(xì)胞癌、腸或胃癌包括胃腸癌、胰腺癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、子宮頸癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝細(xì)胞癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、直腸癌、結(jié)腸直腸癌、子宮內(nèi)膜癌或子宮癌、唾液腺癌、腎臟(kidney)或腎(renal)癌、前列腺癌、外陰癌、甲狀腺癌、肝臟瘤(hepatic carcinoma)、肛門(mén)癌(anal carcinoma)、陰莖癌，以及頭頸癌。
″化療劑″為用于治療癌癥的化合物。化療劑的實(shí)例包括埃羅替尼(

Genentech/OSI Pharm.)、硼替佐米(

MilleniumPharm.)、氟維司群(

AstraZeneca)、索坦(SU11248，Pfizer)、來(lái)曲唑(

Novartis)、甲磺酸伊馬替尼(

Novartis)、PTK787/ZK 222584(Novartis)、奧沙利鉑(

Sanofi)、5-FU(5-氟尿嘧啶)、亞葉酸(Leucovorin)、雷帕霉素(Sirolimus，

Wyeth)、拉帕替尼(GSK572016，Glaxo Smith Kline)、洛那法尼(SCH 66336)、索拉非尼(BAY43-9006，Bayer Labs)，和吉非替尼(

AstraZeneca)、AG1478、AG1571(SU 5271；Sugen)、烷化劑例如硫替派和

環(huán)磷酰胺；烷基磺酸酯例如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶(aziridines)例如硫丹、卡波醌、美妥替哌(meturedopa)和烏瑞替哌(uredopa)；乙撐亞胺和methylamelamines包括六甲蜜胺、三亞胺嗪、噻替派、三亞乙基硫化磷酰胺和三甲基蜜胺；多聚乙酰(特別是布拉他辛和布拉它辛酮)；喜樹(shù)堿(包括合成類似物托泊替康)；苔蘚抑素；callystatin；CC-1065(包括其阿多來(lái)新、卡折來(lái)新和比折來(lái)新合成類似物)；隱藻素(cryptophycins)(特別是隱藻素1和隱藻素8)；多拉司他汀；duocarmycin(包括合成類似物、KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；水鬼蕉堿(pancratistatin)；sarcodictyin；spongistatin；氮芥例如苯丁酸氮芥、萘氮芥、cholophosphamide、雌氮芥、異環(huán)磷酰胺、雙氯乙基甲胺、鹽酸氧氮芥、美法侖、新氮芥、苯芥膽甾醇、潑尼莫司汀、曲磷胺、尿嘧啶氮芥；硝基脲例如卡莫司汀、氯脲菌素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司?。豢股乩缦┒差惪股?例如，刺孢霉素，特別是刺孢霉素γ1I和刺孢霉素ωII(Angew Chem.Intl.Ed.Engl.(1994)33183-186)；蒽環(huán)類抗生素，包括蒽環(huán)類抗生素A；二膦酸鹽，例如氯膦酸鹽；埃斯培拉霉素(esperamicin)；以及新抑癌蛋白發(fā)色團(tuán)和相關(guān)的色蛋白烯二炔類抗生物發(fā)色團(tuán))、aclacinomysins、放線菌素、authramycin、重氮絲氨酸、博來(lái)霉素、放線菌素C、carabicin、洋紅霉素、嗜癌霉素、色霉素(chromomycinis)、更生霉素、柔紅霉素、地托比星、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸、

(多柔比星)、嗎林代-多柔比星、氰基嗎啉代-多柔比星、2-吡咯啉-多柔比星和脫氧多柔比星)、表柔比星、依索比星、伊達(dá)比星、麻西羅霉素、絲裂霉素如絲裂霉素C、霉酚酸、諾加霉素、橄欖霉素、培洛霉素、紫菜霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素、三鐵阿霉素、羅多比星、鏈黑菌素、鏈唑霉素、殺結(jié)核菌素、烏苯美司、凈司他丁、佐柔比星；抗代謝物例如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；葉酸類似物例如二甲葉酸、甲氨蝶呤、蝶羅呤、三甲曲沙；嘌呤類似物例如氟達(dá)拉濱、6-巰嘌呤、硫咪嘌呤、硫鳥(niǎo)嘌呤；嘧啶類似物例如環(huán)胞苷、阿扎胞苷、6-氮尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、二脫氧尿苷、去氧氟尿苷、依諾他濱、氟尿苷；雄激素類例如卡普睪酮、丙酸甲雄烷酮、表硫雄醇、美雄烷、睪內(nèi)脂；抗腎上腺例如氨魯米特、米托坦、曲洛司坦；葉酸補(bǔ)充劑例如frolinic acid；醋葡醛內(nèi)酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶；亞葉酸；比生群；依達(dá)曲沙；地磷酰胺；地美可辛；地吖醌；elfornithine；依利醋銨；埃博霉素(epothilone)；依托格魯；硝酸鎵；羥(基)脲；磨茹多糖；氯尼達(dá)明；美登醇(maytansinoids)例如美登素和安絲菌素；米托胍腙；米托蒽醌；mopidanmol；根瘤菌劑；噴司他?。坏鞍钡妫贿寥岜刃?；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基肼類；甲基芐肼；

多糖復(fù)合物(JHS Natural Products，Eugene，OR)；丙亞胺；根霉素；西佐喃；鍺螺胺；細(xì)格孢氮雜酸；三亞胺醌；2，2′，2″-三氯三乙胺；單端孢霉烯族毒素類(特別是T-2毒素、黏液霉素A、桿孢菌素A和anguidine)；烏拉坦；長(zhǎng)春地辛；氮烯唑胺；甘露莫司?。欢甯事洞?；二溴衛(wèi)矛醇；哌血生；gacytosine；阿糖胞苷(″Ara-C″)；環(huán)磷酰胺；硫替派；紫杉烷，例如，

(紫杉醇；Bristol-Myers SquibbOncology，Princeton，N.J.)，ABRAXANETM(Cremophor-free)、紫杉醇的白蛋白構(gòu)成的納米粒子制劑(albumin-engineered nanoparticle formulations)(AmericanPharmaceutical Partners，Schaumberg，Illinois)和

(多西他賽；

-Poulenc Rorer，Antony，F(xiàn)rance)；苯丁酸氮芥；

(吉西他濱)；6-硫鳥(niǎo)嘌呤；巰嘌呤；甲氨蝶呤；鉑類似物如順鉑和卡鉑；長(zhǎng)春堿；依托泊苷(VP-16)；異環(huán)磷酰胺；米托蒽醌；長(zhǎng)春新堿；

(長(zhǎng)春瑞濱)；能滅瘤(novantrone)；鬼臼噻吩甙；依達(dá)曲沙；柔紅霉素；氨基蝶呤；希羅達(dá)；伊班膦酸鹽；CPT-11；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑RFS 2000；二氟甲基鳥(niǎo)氨酸(DMFO)；類視黃醇如視黃酸；卡培他濱；以及上述任一項(xiàng)的藥學(xué)上可接受的鹽、酸和衍生物。
定義″化療劑″也包括(i)在腫瘤中調(diào)節(jié)或抑制激素作用的抗激素藥，例如抗雌激素劑和選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMs)，包括，例如，他莫昔芬(包括

檸檬酸他莫昔芬)、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羥基他莫昔芬、曲沃昔芬、雷洛昔芬(keoxifene)、LY117018、奧那司酮和

(檸檬酸托米芬)；(ii)抑制酶芳香酶的芳香酶抑制劑(該芳香酶在腎上腺中調(diào)節(jié)雌激素產(chǎn)生)，例如，4(5)-咪唑類、氨魯米特、

(醋酸甲地孕酮)、

(依西美坦；Pfizer)、甲酚苯丙胺、法倔唑、

(伏氯唑)、

(來(lái)曲唑；Novartis)和

(阿納托唑；AstraZeneca)；(iii)抗-雄激素類，如氟他胺、尼魯米特、比卡魯胺、醋酸亮丙瑞林和戈舍瑞林；以及曲沙他濱(1，3-二氧雜環(huán)戊烷核苷胞嘧啶類似物)；(iv)蛋白激酶抑制劑；(v)脂質(zhì)激酶抑制劑；(vi)反義寡核苷酸，尤其是那些抑制在異常細(xì)胞增殖中涉及的信號(hào)通路中的基因表達(dá)的反義寡核苷酸，例如，PKC-α、Ralf和H-Ras；(vii)核酶如VEGF表達(dá)抑制劑(例如，

)和HER2表達(dá)抑制劑；(viii)疫苗如基因治療疫苗，例如，


和


rIL-2；拓?fù)洚悩?gòu)酶1抑制劑如


rmRH；(ix)抗血管生成劑(anti-angiogenic agents)如貝伐單抗(

Genentech)；和(x)上述任一項(xiàng)的藥學(xué)上可接受的鹽、酸和衍生物。
本文使用的″藥學(xué)上可接受的鹽″是指本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的有機(jī)或無(wú)機(jī)鹽。示例性的鹽包括，但不限于，硫酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸性磷酸鹽(acid phosphate)、異煙酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、酸性檸檬酸鹽(acid citrate)、酒石酸鹽、油酸鹽、鞣酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、馬來(lái)酸鹽、龍膽酸鹽、富馬酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、糖二酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽和撲酸鹽(即，1，1′-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸鹽))鹽。藥學(xué)上可接受的鹽可涉及其它分子如乙酸根離子、琥珀酸根離子或其它反離子的包合物(inclusion)。該反離子可為穩(wěn)定母體化合物電荷的任一有機(jī)或無(wú)機(jī)部分。此外，藥學(xué)上可接受的鹽可在其結(jié)構(gòu)中具有多于一個(gè)帶電的原子。在多個(gè)帶電原子為藥學(xué)上可接受的鹽的部分的情況下，可具有多個(gè)反離子。因此，藥學(xué)上可接受的鹽可具有一個(gè)或多個(gè)帶電原子和/或一個(gè)或多個(gè)反離子。
短語(yǔ)″藥學(xué)上可接受的″是指物質(zhì)或組合物與含于制劑中的其它成分和/或其用于治療的哺乳動(dòng)物必須是化學(xué)上和/或毒理學(xué)上相容的。
本發(fā)明的化合物也包括此類化合物的其它鹽，其不必是藥學(xué)上可接受的鹽，且其可用作用于制備和/或純化本發(fā)明化合物和/或用于分離本發(fā)明化合物的對(duì)映異構(gòu)體的中間體。
RAF抑制劑化合物 本發(fā)明提供化合物，及其藥物制劑，有效用于治療由Raf激酶調(diào)節(jié)的疾病、病癥和/或障礙。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案提供式I化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽，其中 R1選自H、F、Cl、Br、I、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb、-C(＝O)NRbRc、NRbRc、C1-C6烷基、C5-C8芳基、C3-C8碳環(huán)、5-8元雜環(huán)基和5-8元雜芳基，其中所述烷基、芳基、碳環(huán)、雜環(huán)基和雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、Cl、Br、I、Rd、-ORd、-COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和-NRdRe的基團(tuán)所取代； R2選自H、F、Cl、Br、I、任選取代的C1-C6烷基和-(X)Rf，其中X為O、NH或C(＝O)，且其中該烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自-ORg、-COORg、-C(＝O)NRgRh和-NRgRh的基團(tuán)所取代； R3為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、CF3、NH2和C1-C6烷基的取代基； R4選自H、F、Cl、Br、I、-NRiRj和-ORi； Ra選自H、F、Cl、Br、I和C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代； Rb和Rc選自H、C1-C6烷基和-(CRkRl)t-雜芳基，其中該雜芳基為5-8元環(huán)，且該烷基或雜芳基任選被-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代，或 Rb和Rc與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)基或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)基或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代； Rd和Re獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代，或 Rd和Re與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)基或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)基或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代； Rf選自H、C1-C4烷基、ORm和-NRmRn，其中該烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自-ORm、-COORm、-C(＝O)NRmRn和-NRmRn的基團(tuán)所取代； Rg和Rh獨(dú)立地選自H、C1-C6烷基或5-8元雜環(huán)基，其中該烷基或雜環(huán)基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)nNRmRn或-(CRkRl)tORm取代； Ri和Rj為H、C1-C6烷基、-C(＝O)Rm、-C(＝O)ORm、-S(O)2NRmRn，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代； Rk和Rl獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基； Rm和Rn為H、F、Cl、Br、I、OH、C(＝O)OH或C1-C6烷基，或 Rm和Rn與其相連的原子一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)基或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)基或雜芳基任選被F、Cl、Br、I或C1-C6烷基取代；且 t為0、1、2、3或4。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、CF3和C1-C6烷基的取代基。
在某些實(shí)施方案中，R1為5-8元雜環(huán)基。
在某些實(shí)施方案中，R1為5元雜環(huán)基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、Cl、Br、I、Rd、ORd、COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和NRdRe的基團(tuán)取代。在某些實(shí)施方案中，R1為5元雜芳基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、Cl、Br、I、Rd、ORd、COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和NRdRe的基團(tuán)所取代。在某些實(shí)施方案中，R1選自下列結(jié)構(gòu)
在某些實(shí)施方案中，R1為6元雜環(huán)基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、Cl、Br、I、Rd、ORd、COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和NRdRe的基團(tuán)所取代。在某些實(shí)施方案中，R1為6元雜芳基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、Cl、Br、I、Rd、ORd、COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和NRdRe的基團(tuán)所取代。在某些實(shí)施方案中，R1選自下列結(jié)構(gòu)
在某些實(shí)施方案中，Rd為C1-C6烷基。在某些實(shí)施方案中，Rd為甲基。
在某些實(shí)施方案中，Rd為任選被-ORm取代的C1-C6烷基。在某些實(shí)施方案中，Rm為H。
在某些實(shí)施方案中，R1為-C(＝O)NRbRc。在某些實(shí)施方案中，R1選自下列結(jié)構(gòu)
在某些實(shí)施方案中，Rb為-(CRkRl)t-雜芳基，其中該雜芳基為6元環(huán)。在某些實(shí)施方案中，Rk和Rl為H。在某些實(shí)施方案中，t為1或2。在某些實(shí)施方案中，該雜芳基為吡啶。
在某些實(shí)施方案中，Rb為C1-C6烷基。在某些實(shí)施方案中，Rb為異丙基。
在某些實(shí)施方案中，Rc為H。
在某些實(shí)施方案中，R1為-C(＝O)ORb。在某些實(shí)施方案中，Rb為乙基(-CH2CH3，“Et”)。在某些實(shí)施方案中，R1為-C(＝O)OEt。
在某些實(shí)施方案中，R1為H。
在某些實(shí)施方案中，R2為H。
在某些實(shí)施方案中，R2為Cl。
在某些實(shí)施方案中，R2為任選被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)Rg、COORg、-C(＝O)NRgRh和NRgRh的基團(tuán)所取代的C1-C6烷基。在某些實(shí)施方案中，R2為乙基(-CH2CH3)。在某些實(shí)施方案中，R2為被COORg取代的乙基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R2為-CH2CH3C(＝O)OH。在某些實(shí)施方案中，R2為被ORg或NRgRh取代的丙基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R2為-CH2CH2CH2OH、-CH2CH2CH2NH2、-CH2CH2CH2NHCH3或-CH2CH2CH2N(CH3)2。
在某些實(shí)施方案中，R2為-(X)Rf。在某些實(shí)施方案中，X為C(＝O)。在某些實(shí)施方案中，Rf為ORm。在某些實(shí)施方案中，Rm為甲基(CH3)。
在某些實(shí)施方案中，R2為C(＝O)OCH3。
在某些實(shí)施方案中，R3為H。
在某些實(shí)施方案中，R3為Cl。
在某些實(shí)施方案中，R3為F。
在某些實(shí)施方案中，R3為C1-C6烷基。在某些實(shí)施方案中，R3為甲基(“Me”，-CH3)。
在某些實(shí)施方案中，R3為NH2。
在某些實(shí)施方案中，R3為1個(gè)取代基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3在6位上，如式Ia所示。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3在7位上，如式Ib所示
在某些實(shí)施方案中，R3為兩個(gè)取代基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，兩個(gè)R3取代基在6和7位上，如式Ic所示。在另一個(gè)實(shí)施方案中，兩個(gè)R3取代基在5和7位上，如式Id所示。在另一個(gè)實(shí)施方案中，兩個(gè)R3取代基在5和6位上，如式Ie所示
在某些式Ic的實(shí)施方案中，一個(gè)R3為甲基且另一個(gè)R3為Cl。在某些式Ic的實(shí)施方案中，6位R3為甲基且7位R3為Cl。
在某些實(shí)施方案中，R4為H。
在某些實(shí)施方案中，R4為Cl。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案提供如上所述的式I化合物，條件是式I不包括下述化合物
″本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供式IIa化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽，其中 R1選自H、F、Cl、Br、I、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb、-C(＝O)NRbRc、NRbRc、C1-C6烷基、C5-C8芳基、C3-C8碳環(huán)、5-8元雜環(huán)基和5-8元雜芳基，其中所述烷基、芳基、碳環(huán)、雜環(huán)基和雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、Cl、Br、I、Rd、-ORd、-COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和-NRdRe的基團(tuán)所取代； R3為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、CF3、NH2和C1-C6烷基的取代基； R4選自H、F、Cl、Br、I、-NRiRj和-ORi； Ra選自H、F、Cl、Br、I和C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代； Rb和Rc選自H、C1-C6烷基和-(CRkRl)t-雜芳基，其中該雜芳基為5-8元環(huán)，且該烷基或雜芳基任選被-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代，或 Rb和Rc與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)基或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)基或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代； Rd和Re獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代，或 Rd和Re與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)基或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)基或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代； Ri和Rj為H、C1-C6烷基、-C(＝O)Rm、-C(＝O)ORm、-S(O)2NRmRn，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代； Rk和Rl獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基； Rm和Rn為H、F、Cl、Br、I、OH、C(＝O)OH或C1-C6烷基，或 Rm和Rn與其相連的原子一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)基或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)基或雜芳基任選被F、Cl、Br、I或C1-C6烷基取代；且 t為0、1、2、3或4。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、CF3和C1-C6烷基的取代基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3和R4為H，且Rl為嘧啶。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供式II化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供式IIIa化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽，其中 R1選自H、F、Cl、Br、I、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb、-C(＝O)NRbRc、NRbRc、C1-C6烷基、C5-C8芳基、C3-C8碳環(huán)、5-8元雜環(huán)基和5-8元雜芳基，其中所述烷基、芳基、碳環(huán)、雜環(huán)基和雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、Cl、Br、I、Rd、-ORd、-COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和-NRdRe的基團(tuán)所取代； R3為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、CF3、NH2和C1-C6烷基的取代基； R4選自H、F、Cl、Br、I、-NRiRj和-ORi； Ra選自H、F、Cl、Br、I和C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代； Rb和Rc選自H、C1-C6烷基和-(CRkRl)t-雜芳基，其中該雜芳基為5-8元環(huán)，且該烷基或雜芳基任選被-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代，或 Rb和Rc與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)基或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)基或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代； Rd和Re獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代，或 Rd和Re與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)基或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)基或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代； Ri和Rj為H、C1-C6烷基、-C(＝O)Rm、-C(＝O)ORm、-S(O)2NRmRn，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代； Rk和Rl獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基； Rm和Rn為H、F、Cl、Br、I、OH、C(＝O)OH或C1-C6烷基，或 Rm和Rn與其相連的原子一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)基或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)基或雜芳基任選被F、Cl、Br、I或C1-C6烷基取代；且 t為0、1、2、3或4。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、CF3和C1-C6烷基的取代基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3和R4為H，且R1為嘧啶。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供式III化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的化合物可含有不對(duì)稱或手心中心，且因此存在不同的立體異構(gòu)形式。因此，本發(fā)明化合物的所有立體異構(gòu)形式，包括但不限于，立體異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體和阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(atropisomer)，以及其混合物如外消旋混合物，構(gòu)成了本發(fā)明的一部分。
在本文所示的結(jié)構(gòu)中，當(dāng)任何特定的手性原子的立體化學(xué)沒(méi)有指定時(shí)，則本發(fā)明的化合物包括所有的立體異構(gòu)體。當(dāng)立體化學(xué)通過(guò)實(shí)心鍥形或虛線表示具體構(gòu)型來(lái)指定時(shí)，則該立體異構(gòu)體如此指定且定義。
本發(fā)明的化合物可以非溶劑合物以及與藥學(xué)上可接受的溶劑如水、乙醇等形成的溶劑合物的形式存在，且本發(fā)明意欲包括溶劑合物和非溶劑合物形式。
RAF抑制劑化合物的合成 本發(fā)明的化合物可通過(guò)合成路線來(lái)合成，該合成路線包括類似于化學(xué)領(lǐng)域中公知的那些方法，尤其根據(jù)本文的描述。起始原料通常從商業(yè)來(lái)源如Aldrich Chemicals (Milwaukee，WI)商購(gòu)得到或使用對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備(例如，通過(guò)描述于Louis F.Fieser和Mary Fieser，Reagents forOrganic Synthesis，v.1-19，Wiley，N.Y.(1967-1999ed.)或Beilsteins Handbuchder organischen Chemie，4，Aufl.ed.Springer-Verlag，Berlin，包括增補(bǔ)本(也通過(guò)Beilstein在線數(shù)據(jù)庫(kù)獲得)中的方法制備)。
出于示例性地說(shuō)明的目的，合成方案1-4顯示了制備本發(fā)明化合物以及關(guān)鍵中間體的通用方法。為了更詳細(xì)地描述單個(gè)步驟，參見(jiàn)下列實(shí)施例部分。本領(lǐng)域的技術(shù)人員會(huì)理解，其它的合成路線可用于合成本發(fā)明的化合物。盡管具體的起始原料和試劑在合成方案中描述且在下面討論，但是可以容易地使用其它起始原料和試劑替代以提供多種衍生物和/或反應(yīng)條件。此外，由下述方法制備的許多化合物可以根據(jù)公開(kāi)內(nèi)容使用對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)化學(xué)進(jìn)一步修飾。

合成方案1 合成方案1表示合成中間體化合物5的通用方案，該中間體化合物5用于合成式I化合物。如在合成方案1中所示，取代的2-硝基甲苯(R為，例如，H、烷基、烷氧基或鹵素；參見(jiàn)例如Yan-Hong，L.，等人，Molecules 2005，10，978-989)與硝化劑如硝酸反應(yīng)，得到取代的2，6-二硝基甲苯2，其為2，3-和2，5-二硝基甲苯的混合物(未顯示出)。此類二硝基化合物通過(guò)硫化銨或氯化錫可選擇性還原為單胺，得到氨基甲苯3。3向相應(yīng)的硝基吲唑4的轉(zhuǎn)化可在酸性條件下使用亞硝酸鈉或在堿性條件下使用亞硝酸異戊酯而實(shí)現(xiàn)。4的硝基可通過(guò)多種方法還原，包括硫化銨、氯化錫、鐵粉和乙酸、鈀碳?xì)浠?，得到氨基吲?。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供制備6-取代的吲唑的方法。該實(shí)施方案包括制備式5化合物的方法
其中R為H、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基，該方法包括 (a)將式1的取代的2-硝基甲苯
與硝化劑反應(yīng)，得到式2的取代的2，6-二硝基甲苯
(b)選擇性還原式2的取代的2，6-二硝基甲苯，得到式3的氨基甲苯
(c)將式3的氨基甲苯轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式4的硝基吲唑

和 (d)還原式4的硝基吲唑，得到式5的6-取代的吲唑。
步驟(a)的反應(yīng)包括與硝化劑如硝酸的反應(yīng)，使用或不使用溶劑，得到取代的二硝基甲苯的混合物。用于硝化反應(yīng)的適宜的溶劑包括濃硫酸和三氟乙酸，優(yōu)選濃硫酸。該硝化反應(yīng)可在約0℃至約100℃的溫度下進(jìn)行。優(yōu)選將取代的二硝基甲苯的混合物在進(jìn)行下一步前進(jìn)行分離。
步驟(b)的反應(yīng)包括將取代的2，6-二硝基甲苯通過(guò)硫化銨、鐵粉與乙酸或氯化銨、鈀碳?xì)浠蚵然a二水合物選擇性還原反應(yīng)。
步驟(c)的反應(yīng)包括將氨基甲苯轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的硝基吲唑，該反應(yīng)如下進(jìn)行通過(guò)使用乙酸酐或乙酰氯?；桨?，接著使用亞硝酸鈉和乙酸作為溶劑或與有機(jī)亞硝酸酯如亞硝酸異戊酯于適宜的溶劑，如二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿或乙酸乙酯中形成吲唑。
步驟(d)的反應(yīng)包括還原硝基吲唑，得到6-取代的吲唑。該還原反應(yīng)可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種方法進(jìn)行，包括，例如，硫化銨、氯化錫二水合物、鐵粉與乙酸或氯化銨、和鈀碳?xì)浠?br>
合成方案2 合成方案2顯示了合成中間體化合物12的通用方案，其用于合成式I化合物。根據(jù)合成方案2，將化合物6用堿如NaOH在溴存在下處理，促進(jìn)了3-氨基異煙酸7的形成?；衔?可以使用使用亞硝酸鈉和濃硫酸轉(zhuǎn)化為3-羥基異煙酸8?；衔?可通過(guò)改良的Fisher酯化方法從化合物8中分離。然后將化合物9與羥乙酸乙基酯在Mistunobu條件下縮合，得到羥基酯10，其可在堿如NaH的存在下環(huán)化為化合物11。11向相應(yīng)的三氟甲磺酸酯12的轉(zhuǎn)化可使用三氟甲磺酸酐在堿如吡啶的存在下實(shí)現(xiàn)。

合成方案3 合成方案3顯示了合成式I化合物的通用方案。化合物13(其中R1如上所定義)可以使用實(shí)施例2和9中描述的步驟制備?；衔?4(其中R2和R3如上所定義)可以使用實(shí)施例1、4和7中描述的步驟制備。三氟甲磺酸酯13和吲唑14可在Pd催化的Buchwald條件下在堿的存在下偶聯(lián)，得到化合物15，并且保護(hù)基團(tuán)可使用酸如三氟乙酸除去，得到化合物16。

合成方案4 合成方案4顯示合成式I化合物的通用方案。鹵代呋喃并吡啶前體17可使用實(shí)施例44中描述的步驟制備。將鹵代呋喃并吡啶前體17(其中W為鹵素，R1、R2和R3如上所定義)置于鋼反應(yīng)釜中，并與合適的親核試劑(XH)，(其中X為ORy或NRyRz(其中Ry和Rz選自H和C1-C6烷基))在高溫(150℃-200℃)下反應(yīng)，得到化合物18。
分離方法 可以有利地從彼此之間和/或從起始原料中分離反應(yīng)產(chǎn)物。各個(gè)步驟或系列步驟的所需產(chǎn)物通過(guò)本領(lǐng)域的常用技術(shù)分離和/或純化(下文稱為分離)至所需程度的均勻性。一般的此類分離涉及多相萃取，從溶劑或溶劑混合物中結(jié)晶，蒸餾，升華或色譜。色譜可涉及多種方法，包括，例如反相和正相；空間排除(size exclusion)；離子交換；高壓、中壓和低壓液相色譜方法和設(shè)備；小規(guī)模分析型色譜；模擬移動(dòng)床(SMB)和制備型薄層或厚層色譜，以及小規(guī)模薄層和快速色譜技術(shù)。
另一類分離方法涉及用試劑處理混合物，選擇該試劑與混合物結(jié)合或使得所需產(chǎn)物，未反應(yīng)的起始原料，由產(chǎn)物的反應(yīng)等可分離。此類試劑包括吸附劑或吸收劑如活性碳、分子篩、離子交換介質(zhì)等?；蛘撸撛噭┛蔀樵趬A性物質(zhì)的情況下時(shí)為酸，在酸性物質(zhì)的情況下為堿，結(jié)合試劑如抗體，結(jié)合蛋白，選擇性螯合劑如冠醚，液相/液相離子萃取試劑(LIX)等。
適宜分離方法的選擇取決于拆分物質(zhì)的性質(zhì)。例如，在蒸餾和升華中的沸點(diǎn)和分子量，色譜中存在或不存在極性官能團(tuán)，多相萃取中物質(zhì)在酸性和堿性介質(zhì)中的穩(wěn)定性等。本領(lǐng)域的技術(shù)人員會(huì)使用最有可能實(shí)現(xiàn)所需分離的技術(shù)。
基于它們的物理化學(xué)差別，非對(duì)映異構(gòu)混合物可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法(如通過(guò)色譜和/或分步結(jié)晶)分離為它們單個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體。對(duì)映異構(gòu)體可通過(guò)下列方法分離將對(duì)映異構(gòu)混合物用適宜的光學(xué)活性化合物(例如，手性助劑如手性醇或Mosher′s酰氯)轉(zhuǎn)化為非對(duì)映異構(gòu)混合物，分離非對(duì)映異構(gòu)體以及將單個(gè)非立體異構(gòu)體轉(zhuǎn)化(例如，水解)為相應(yīng)的純的對(duì)映異構(gòu)體。同樣，本發(fā)明的一些化合物可為阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(例如，取代的聯(lián)芳基)，且認(rèn)為為本發(fā)明的一部分。對(duì)映異構(gòu)體也可使用手性HPLC柱分離。
單個(gè)立體異構(gòu)體，例如，對(duì)映異構(gòu)體，基本上不含其立體異構(gòu)體，可通過(guò)外消旋混合物的拆分而獲得，其使用方法如使用光學(xué)活性的拆分試劑形成非對(duì)映異構(gòu)體(Eliel，E.和Wilen，S.″Stereochemistry of Organic Compounds，″John Wiley&Sons，Inc.，New York，1994；Lochmuller，C.H.，(1975)J.Chromatogr.，113(3)283-302)。本發(fā)明的手性化合物的外消旋混合物可通過(guò)任何適宜的方法分離并純化，該方法包括(1)與手性化合物形成離子性、非對(duì)映異構(gòu)鹽，以及通過(guò)分步結(jié)晶或其它方法分離，(2)與手性衍生化試劑形成非對(duì)映異構(gòu)化合物，分離非對(duì)映異構(gòu)體，以及轉(zhuǎn)化為純的立體異構(gòu)體，和(3)直接在手性條件下分離基本上純的或富集的立體異構(gòu)體。參見(jiàn)DrugStereochemistry，Analytical Methods and Pharmacology，″Irving W.Wainer，Ed.，Marcel Dekker，Inc.，New York(1993). 在方法(1)下，非對(duì)映異構(gòu)鹽可通過(guò)對(duì)應(yīng)異構(gòu)純的手性堿如番木鱉堿、奎寧、麻黃素、士的寧、α-甲基-β-苯基乙基胺(安非他明)等與具有酸性的不對(duì)稱化合物如羧酸和磺酸反應(yīng)形成。非對(duì)映異構(gòu)鹽可通過(guò)分步結(jié)晶或離子色譜而分離。對(duì)于分離氨基化合物的光學(xué)異構(gòu)體，加入手性羧酸或磺酸，如樟腦磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸可致使形成非對(duì)映異構(gòu)鹽。
或者，通過(guò)方法(2)，將要拆分的底物與手性化合物的一個(gè)對(duì)映異構(gòu)體反應(yīng)，形成非對(duì)映異構(gòu)體對(duì)(E.和Wilen，S.″Stereochemistry of OrganicCompounds″，John Wiley&Sons，Inc.，1994，p.322)。非對(duì)映異構(gòu)化合物可通過(guò)下述方法制備將不對(duì)稱化合物與對(duì)應(yīng)異構(gòu)純的手性衍生化試劑如薄荷基(menthyl)衍生物反應(yīng)，接著分離非對(duì)映異構(gòu)體并水解，得到純的或富集的對(duì)映異構(gòu)體。確定光學(xué)純度的方法涉及制備外消旋混合物的手性酯，如薄荷酯，例如，外消旋混合物的(-)薄荷基氯甲酸酯在堿的存在下，或Mosher酯，α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯基乙酸酯(Jacob III.J.Org.Chem.，(1982)474165)，并對(duì)兩種阻轉(zhuǎn)異構(gòu)對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體的存在分析1H NMR譜。穩(wěn)定的阻轉(zhuǎn)異構(gòu)化合物的非對(duì)映異構(gòu)體可通過(guò)正相和反相色譜接著分離阻轉(zhuǎn)異構(gòu)化的萘基-異喹啉而分離并純化(WO 96/15111)。通過(guò)方法(3)，兩種對(duì)映異構(gòu)體的外消旋混合物可通過(guò)使用手性固定相的色譜分離(″Chiral LiquidChromatography″(1989)W.J.Lough，Ed.，Chapman和Hall，New York；Okamoto，J.ofChromatogr.，(1990)513375-378)。富集的或純化的對(duì)映異構(gòu)體可通過(guò)用于區(qū)別其它具有不對(duì)稱碳原子的手性分子的方法，如旋光和圓二色譜而區(qū)別。
生物學(xué)評(píng)價(jià) 將B-Raf突變蛋白447-717(V600E)與伴侶蛋白Cdc37(與Hsp90復(fù)合)共表達(dá)(Roe，等人Cell，(2004)11687-98；Stancato，等人J.Biol.Chem.，(1993)26821711-21716)。
通過(guò)許多直接和間接檢測(cè)方法在樣品中測(cè)量Raf的活性是可能的(例如，美國(guó)專利公開(kāi)2004/082014)。人重組體B-Raf蛋白的活性可在體外通過(guò)將放射標(biāo)記的磷酸嵌入至重組體MAP激酶(MEK)的測(cè)試來(lái)評(píng)價(jià)，該MAP激酶為已知的B-Raf的生理學(xué)底物，根據(jù)美國(guó)專利2004/127496和WO 03/022840。V600E全長(zhǎng)B-Raf的活化/抑制通過(guò)將放射標(biāo)記的磷酸從[γ-33P]ATP嵌入至FSBA-改性的野生型MEK測(cè)量(實(shí)施例8)。
Raf活化的適宜的方法取決于樣品的性質(zhì)。在細(xì)胞中，Raf的活性一方面由在細(xì)胞中表達(dá)的Raf的量決定，另一方面由被活化的Raf決定。用于Raf蛋白(特別是B-Raf蛋白)編碼的基因轉(zhuǎn)錄的活化可(例如)通過(guò)測(cè)定RafmRNA的量來(lái)進(jìn)行?，F(xiàn)有技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)方法包括(例如)DNA芯片雜交、室溫PCR、引物延伸和RNA保護(hù)。此外，基于誘導(dǎo)或抑制各自Raf基因的轉(zhuǎn)錄上的Raf活性的確定，也可通過(guò)將Raf促進(jìn)子偶聯(lián)至適宜的報(bào)道基因構(gòu)造物而進(jìn)行。適宜的報(bào)導(dǎo)基因的實(shí)例為氯霉素轉(zhuǎn)移酶基因、綠色熒光蛋白(GFP)及其變體、螢光素酶基因和Renilla基因。然而，Raf蛋白的表達(dá)增加的測(cè)量可在蛋白水平上進(jìn)行，在此情況下，例如通過(guò)抗Raf蛋白的抗體檢測(cè)蛋白的量。然而，Raf蛋白的活性的變化也可歸因于蛋白的磷酸化或脫磷酸化作用的增加或減少。例如，B-Raf激酶受到599Thr和602Ser殘基的磷酸化的調(diào)節(jié)(Zhang B.H.和Guan K.L.EMBO J.，(2000)195429)。B-Raf蛋白的磷酸化的變化可以(例如)由抗磷酸化的蘇氨酸或絲氨酸的抗體來(lái)檢測(cè)。
由于Raf蛋白為蘇氨酸/絲氨酸激酶，Raf蛋白的活性也可通過(guò)它們的酶活性來(lái)確定。例如蛋白MEK為B-Raf的底物，且MEK的磷酸化的程度可以確定樣品中的B-Raf活性。以相同方式，其它底物，如例如MBP和由Raf特異性磷酸化的肽(Salh，等人，Anticancer Res.，(1999)19731-740；Bondzi，等人Oncogene，(2000)195030-5033)，Raf蛋白的磷酸化可以用于確定各自的活性。由于Raf為信號(hào)級(jí)聯(lián)的一部分，其中一系列的激酶由上級(jí)(superordinated)的激酶各自磷酸化且并被活化，因此Raf的活性也可通過(guò)評(píng)價(jià)Raf上級(jí)的各個(gè)激酶的磷酸化程度來(lái)確定。這種所謂的MAP激酶途徑也導(dǎo)致(在其它的特征中)轉(zhuǎn)錄因子的特異性活化，且由此導(dǎo)致基因的轉(zhuǎn)錄激活，從而Raf的活性可間接地通過(guò)測(cè)量這些靶向基因的活性而確定。
給藥和藥物制劑 本發(fā)明的化合物可通過(guò)任何適于所要治療的病癥的常規(guī)途徑給藥。適宜的途徑包括口服、腸胃外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、真皮內(nèi)、鞘膜內(nèi)和硬膜外(epidural))、透皮、直腸、鼻、局部(包括口含和舌下)、陰道內(nèi)、腹腔內(nèi)、肺內(nèi)和鼻內(nèi)給藥。對(duì)于局部免疫抑制治療，化合物可通過(guò)損傷內(nèi)(intralesional)給藥，包括灌注或使移植物在移植前與抑制劑接觸。應(yīng)當(dāng)理解的是，優(yōu)選的給藥途徑可隨著例如患者的狀況而變化。
該化合物可以以任意常規(guī)的給藥形式給藥，例如片劑、粉劑、膠囊、溶液、分散液、混懸液、糖漿、噴霧劑、栓劑、凝膠劑、乳劑、貼劑等。此類組合物可包含藥物制劑中常規(guī)組分，例如稀釋劑、載體、pH調(diào)節(jié)劑、增甜劑、填充劑和其它活性劑。如果需要腸胃外給藥，該組合物將為無(wú)菌的且為適于注射或輸注的溶液或混懸液形式。當(dāng)該化合物為腸胃外給藥時(shí)，將其與藥學(xué)上可接受的腸胃外載體一起配制，且為單位可注射劑型。當(dāng)該化合物為口服給藥時(shí)，可將其與藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑配制為丸劑、膠囊、片劑等。
典型的制劑通過(guò)將本發(fā)明的化合物和載體或賦形劑混合制備。大部分這些載體或賦形劑詳細(xì)描述于，例如，Howard C.Ansel等人，PharmaceuticalDosage Forms和Drug Delivery Systems，(8th Ed.2004)；Alfonso R.Gennaro等人，RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy，(20th Ed.2000)；和Raymond C.Rowe，Handbook of Pharmaceutical Excipients，(5th Ed.2005)。適宜的載體和賦形劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的，且包括物質(zhì)如碳水合物、石蠟、水可溶的和/或可溶脹的聚合物、親水性或憎水性物質(zhì)、明膠、油、溶劑、水等。具體使用的載體或賦形劑將取決于本發(fā)明化合物所欲實(shí)施的方法和目的。溶劑通常選擇本領(lǐng)域技術(shù)人員所認(rèn)識(shí)到的對(duì)于哺乳動(dòng)物給藥安全(GRAS)的溶劑。通常，安全的溶劑為無(wú)毒水性溶劑如水和其它溶于水或與水互溶的無(wú)毒溶劑。適宜的水性溶劑包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如，PEG 400、PEG 300)，等及其混合物。該制劑也可包含一種或多種緩沖液、穩(wěn)定劑、表面活性劑、潤(rùn)濕劑、潤(rùn)滑劑、乳化劑、助懸劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑(opaquing agents)、助流劑、加工助劑、著色劑、增甜劑、芳香劑、調(diào)味劑、稀釋劑和其它已知的添加劑，以得到精美存在的藥物(即本發(fā)明的化合物或其藥物組合物)或有助于制備藥物產(chǎn)品(即藥物)。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案包括包含式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供藥物組合物，其包含式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽，以及藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
使用本發(fā)明化合物的治療方法 本發(fā)明包括通過(guò)給藥一種或多種本發(fā)明的化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽治療或預(yù)防疾病或病癥的方法。根據(jù)本發(fā)明的方法可治療的患者的疾病和病癥包括，但不限于，癌癥、中風(fēng)、糖尿病、肝腫大、心血管疾病、阿爾茨海默氏病、囊型纖維化、病毒病、自身免疫性疾病、動(dòng)脈粥樣硬化、再狹窄、牛皮癬、變應(yīng)性病癥、炎癥、神經(jīng)障礙、激素相關(guān)的疾病(hormone-related disease)、與器官移植相關(guān)的病癥、免疫缺陷性疾患、破壞性骨病(destructive bone disorders)、增殖性疾病、感染性疾病、與細(xì)胞死亡相關(guān)的病癥、凝血酶引起的血小板聚集、慢性髓細(xì)胞性白血病(CML)、肝病、涉及T細(xì)胞活化的病理學(xué)免疫病癥(pathologic immune conditions)，和CNS障礙。在一個(gè)實(shí)施方案中，人患者用式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽，以及藥學(xué)上可接受的載體、助劑或溶媒，以可檢測(cè)到的抑制Raf激酶活性的量治療。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在有此治療需要的哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防癌癥的方法，其中該方法包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽。該癌癥選自乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、前列腺癌、睪丸癌、生殖泌尿道癌、食管癌、喉癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、胃癌、皮膚癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮樣癌、大細(xì)胞癌、非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、小細(xì)胞癌、肺腺癌、骨癌、結(jié)腸癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲狀腺癌、濾泡性癌、未分化癌、乳頭狀癌、精原細(xì)胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和膽道癌、腎癌、骨髓病、淋巴病、毛細(xì)胞瘤、口腔(buccal cavity)癌和咽(oral)癌、唇癌、舌癌、口癌、咽癌、小腸癌、結(jié)腸-直腸癌、大腸癌、直腸癌、腦癌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)、霍奇金病和白血球過(guò)多癥。本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在有此治療需要的哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防心血管疾病的方法，該心血管疾病選自再狹窄、心肥大癥、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死或充血性心力衰竭，其中該方法包括向哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的包含式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物。本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療心血管疾病的藥物中的用途，該心血管疾病選自再狹窄、心肥大癥、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死或充血性心力衰竭。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在有此治療需要的哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防神經(jīng)變性疾病的方法，該神經(jīng)變性疾病選自阿爾茨海默氏病、帕金森病、肌萎縮側(cè)索硬化、亨延頓舞蹈病、腦缺血或由跌打損傷引起的神經(jīng)變性疾病、谷氨酸鹽神經(jīng)毒性或缺氧，其中該方法包括向哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的包含式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物。本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療神經(jīng)變性疾病的藥物中的用途，該神經(jīng)變性疾病選自阿爾茨海默氏病、帕金森病、肌萎縮側(cè)索硬化、亨延頓舞蹈病、腦缺血或由跌打損傷引起的神經(jīng)變性疾病、谷氨酸鹽神經(jīng)毒性或缺氧。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在有此治療需要的哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防炎性疾病的方法，該炎性疾病選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、接觸性皮炎和遲發(fā)型超敏反應(yīng)，其中該方法包括向哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的包含式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物。本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療炎性疾病的藥物中的用途，該炎性疾病選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、接觸性皮炎和遲發(fā)型超敏反應(yīng)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，治療或預(yù)防由Raf激酶調(diào)節(jié)的疾病或障礙的方法，包括向有此治療需要的哺乳動(dòng)物給藥有效量的式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽。此類疾病和病癥的實(shí)例包括，但不限于，過(guò)度增殖性疾病(如癌癥，包括黑素瘤和其它的皮膚癌)、神經(jīng)變性、心臟肥大、疼痛、偏頭痛和神經(jīng)創(chuàng)傷性疾病。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，提供了治療哺乳動(dòng)物的過(guò)度增殖性疾病的方法，包括向該哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供式I化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療過(guò)度增殖性疾病的藥物中的用途。
組合治療 本發(fā)明的化合物及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽可以單獨(dú)使用或與其它用于治療過(guò)度增殖性疾病(例如，癌癥)的治療劑組合使用。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與具有抗-過(guò)度增殖性質(zhì)或用于治療過(guò)度增殖性疾病(例如，癌癥)的第二化合物混合于藥物組合制劑中，或作為組合治療的劑量方案。藥物組合制劑或劑量方案的第二化合物優(yōu)選具有對(duì)本發(fā)明的化合物補(bǔ)充的活性，從而它們彼此之間不會(huì)產(chǎn)生不利作用。此類分子以有效用于所需目的的量適宜地存在于組合中。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包含本發(fā)明的化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽，以及如在本文所描述的化療劑。
在具體的實(shí)施方案中，抗-癌治療中，本發(fā)明的化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽可與如那些在本文中描述的其它的化療劑、激素或抗體組合，以及與手術(shù)治療或放射治療組合。因此，本發(fā)明的組合治療包括給藥至少一種本發(fā)明的化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽，以及使用至少一種其它的癌癥治療方法。在某些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合治療包括給藥至少一種本發(fā)明的化合物或其立體異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽，以及至少一種其它的藥物活性化療劑。本發(fā)明的化合物和其它的藥物活性化療劑可在單一藥物組合物中一起給藥或分開(kāi)給藥，且當(dāng)分開(kāi)給藥時(shí)，其可以同時(shí)給藥或以任何順序連續(xù)給藥。該連續(xù)給藥可在時(shí)間上間隔較小或在時(shí)間上間隔較長(zhǎng)。為了得到所需的組合的治療效果，可以選擇本發(fā)明的化合物和其它藥物活性治療劑的量以及給藥的相對(duì)時(shí)間。
實(shí)施例 為了示例性地說(shuō)明本發(fā)明，包括下列實(shí)施例。然而，應(yīng)當(dāng)理解，這些實(shí)施例并不是用于限制本發(fā)明，且其僅僅意指實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的方法。本領(lǐng)域的技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到所描述的化學(xué)反應(yīng)可以適宜地改變以制備本發(fā)明的許多其它的Raf抑制劑，并且用于制備本發(fā)明化合物的其它方法也認(rèn)為包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。例如，合成本發(fā)明的非示例性的化合物可以通過(guò)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的改良來(lái)成功地實(shí)現(xiàn)，例如，通過(guò)適宜地保護(hù)干擾基團(tuán)，通過(guò)使用除了那些已描述的外本領(lǐng)域中已知的其它適宜的試劑，和/或通過(guò)反應(yīng)條件的路徑改良?；蛘撸疚乃_(kāi)的或本領(lǐng)域中已知的其它反應(yīng)也認(rèn)為適用于制備本發(fā)明的其它化合物。
在下述的實(shí)施例中，除非另有說(shuō)明，否則所有的溫度溫度為攝氏度。試劑從商品供應(yīng)商如Aldrich Chemical Company，Lancaster，TCI或Maybridge處購(gòu)買(mǎi)，且除非另有說(shuō)明沒(méi)有進(jìn)一步純化而使用。
下列闡述的反應(yīng)通常在氮?dú)饣驓鍤獾恼龎合禄蚴褂酶稍锕?除非另有說(shuō)明)于無(wú)水溶劑中進(jìn)行，并且反應(yīng)燒瓶通常配有橡膠塞以用于通過(guò)注射器加入底物和試劑。玻璃儀器被烘箱干燥和/或加熱干燥。
柱色譜在帶有硅膠柱的Biotage體系(制造商Dyax Corporation)或在二氧化硅SepPak柱(Waters)上進(jìn)行。1H NMR譜在Varian儀器上在400MHz下記錄。1H-NMR譜以CDCl3、d6-DMSO、CH3OD或d6-丙酮溶液(以ppm報(bào)導(dǎo))，使用氯仿作為參比標(biāo)準(zhǔn)(7.25ppm)而獲得。當(dāng)報(bào)導(dǎo)峰的多重性時(shí)，使用下列縮寫(xiě)s(單峰)，d(二重峰)，t(三重峰)，q(四重峰)，m(多重峰)，br(寬峰)，dd(雙二重峰)，dt(雙三重峰)。當(dāng)給出耦合常數(shù)時(shí)，其以赫茲(Hz)報(bào)導(dǎo)。
實(shí)施例1 1-(4-氨基-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備
步驟A1-(4-硝基-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備向2-甲基-3-硝基苯胺(2.00g，13.1mmol)于氯仿(0.8M)中的溶液中在室溫下加入乙酸鉀(1.55g，15.8mmol)。將該溶液冷卻0℃的溫度，并滴加乙酸酐(3.72mL，39.4mmol)。將該混懸液再用氯仿(20mL)稀釋，向燒瓶裝上冷凝管，并加熱至40℃的溫度。通過(guò)滴液漏斗滴加亞硝酸異戊酯(3.52mL，26.3mmol)，并將反應(yīng)加熱回流18小時(shí)。將反應(yīng)冷卻并濃縮。將殘余物溶于水中，并劇烈攪拌。通過(guò)過(guò)濾收集得到的固體(2.4g，89％產(chǎn)率)，其直接在步驟B中使用。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝8.85(1H，d，J＝8.6Hz)；8.80(1H，s)；8.29(1H，d，J＝7.8Hz)；7.71(1H，m)；2.87(3H，s)。
步驟B1-(4-氨基-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備制備1-(4-硝基-1H-吲唑-1-基)乙酮(1.1g，5.36mmol)于乙醇(“EtOH”，30mL)中的溶液，并加入10％Pd/C(0.0571g，0.536mmol)。反應(yīng)混合物用N2除氣，使用H2(30psi)氫化3小時(shí)。反應(yīng)通過(guò)硅藻土過(guò)濾，濃縮并通過(guò)色譜(1-10％甲醇/二氯甲烷)純化。分離所需產(chǎn)物(750mg，79％產(chǎn)率)，為橙色固體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝8.07(1H，s)；7.81(1H，d，J＝8.6Hz)；7.33(1H，m)；6.56(1H，d，J＝7.8Hz)；4.17(2H，br s)，2.76(3H，s)。
實(shí)施例2 2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯的制備
步驟A嘧啶-2-羧酸甲基酯的制備在0℃的溫度下，將HCl氣體通過(guò)甲醇(“MeOH”，700mL)鼓泡30分鐘，得到飽和溶液。將嘧啶-2-甲腈(21.585g，205.38mmol)加至該溶液中，并將該混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，然后在約40至約50℃的溫度范圍下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮，并將殘余物溶于水中。使用固體NaHCO3將pH調(diào)節(jié)至約7.0。水層用20％異丙醇(“iPrOH”)/二氯甲烷(“DCM”)(3X)萃取。合并的有機(jī)物用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在真空下濃縮，得到所需產(chǎn)物，為白色固體(23.0g，81％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.97-98.96(d，J＝4.7Hz，2H)，7.53-7.50(t，J＝4.7Hz，1H)，4.09(s，3H)。
步驟B嘧啶-2-基甲醇的制備制備嘧啶-2-羧酸甲基酯(659mg，4.77mmol)于EtOH(25mL)中的冷溶液(0℃)，并加入硼氫化鈉(181mg，4.77mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)用水(5mL)終止并濃縮。粗產(chǎn)物使用硅膠色譜純化，得到所需產(chǎn)物，為白色固體(154mg，30％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.76-8.75(d，J＝4.7Hz，2H)，7.27-7.25(t，J＝4.7Hz，1H)，4.87(s，2H)，4.10(br s，1H)。
步驟C3-(嘧啶-2-基甲氧基)異煙酸乙基酯的制備制備三苯基膦(14.29g，54.49mmol)于四氫呋喃(“THF”，150mL)中的冷溶液(-15℃)，并加入二羧酸二異丙基酯(“DIAD”，10.70mL，54.49mmol)。將得到的白色混懸液在-15℃的溫度下攪拌10分鐘，然后加入嘧啶-2-基甲醇(5.00g，45.41mmol)于THF(30mL)中的溶液。將該混合物在-15℃的溫度下攪拌10分鐘，并加入3-羥基異煙酸乙基酯(7.590g，45.41mmol)于THF(75mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物在-15℃的溫度下攪拌15分鐘，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。粗產(chǎn)物濃縮，通過(guò)硅膠色譜純化，得到所需產(chǎn)物，為橙色油狀物(7.238g，61％)。MS(APCI-pos)M+1＝260.1。
步驟D呋喃并[2，3-c]吡啶-3-醇的制備制備3-(嘧啶-2-基甲氧基)異煙酸乙基酯(7.238g，27.92mmol)于二甲基甲酰胺(“DMF”，100mL)中的冷溶液(0℃)，并分小批加入NaH(4.466g，111.7mmol)。撤去冷浴，將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。反應(yīng)混合物用水終止并濃縮。粗產(chǎn)物使用硅膠色譜純化，得到產(chǎn)物，為米色固體(2.7g，45％)。MS(APCI-pos)M+1＝214.3。
步驟E2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯的制備在0℃的溫度，制備呋喃并[2，3-c]吡啶-3-醇(1.0當(dāng)量)于CH2Cl2中的溶液，加入吡啶(1.5當(dāng)量)和三氟甲磺酸酐(“Tf2O”，1.2當(dāng)量)并攪拌1小時(shí)。加入水，并分離各層。水層用氯仿萃取1次，干燥合并的有機(jī)物(硫酸鈉)。過(guò)濾后，粗物質(zhì)濃縮，通過(guò)硅膠色譜(使用乙酸乙酯/己烷洗脫)純化，得到所需三氟甲磺酸酯。MS(APCI-pos)M+1＝214.3。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.11(s，1H)，8.97-8.96(d，J＝4.5Hz，2H)，8.62-8.61(d，J＝5.7Hz，1H)，7.64-7.62(d，J＝4.7Hz，1H)，7.41-7.39(t，J＝4.7Hz，1H)。
實(shí)施例3 N-(1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備
步驟A1-(4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備在氬氣下，將1-(4-氨基-1H-吲唑-1-基)乙酮(60mg，0.34mmol)，2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(100mg，0.29mmol)，磷酸鉀(98mg，0.46mmol)，Xantphos(33mg，0.05mmol)和Pd2dba3(53mg，0.05mmol)加至圓底燒瓶中。將溶液在真空下用氬氣吹掃，并將固體混懸于甲苯(10mL)中。將該混懸液用氬氣重復(fù)脫氣，并在氬氣下加熱至110℃的溫度，持續(xù)18小時(shí)。將溶液冷卻并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化，使用2-5％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到所需產(chǎn)物(53mg，49％)。
步驟BN-(1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備將5M的HCl(0.0249mL，0.125mmol)加至1-(4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-基)乙酮(42mg，0.113mmol)于甲醇/二噁烷(10mL，9∶1)中的混懸液中。將該溶液加熱回流18小時(shí)。反應(yīng)濃縮，傾倒至飽和碳酸氫鈉溶液中，并用乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化，使用1-6％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到所需產(chǎn)物(12mg，32％)。MS(APCI)M+1＝329.3。
實(shí)施例4 1-(4-氨基-7-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮和1-(4-氨基-5-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備
標(biāo)題化合物使用Neale，R.S.等人，JOC，1964，29，3390中描述的方法制備。
將N-氯琥珀酰亞胺(8.38g，63mmol)加至1-(4-氨基-1H-吲唑-1-基)乙酮(10g，57mmol)于苯(50mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物加熱回流2小時(shí)。將反應(yīng)冷卻，傾倒至水中，并用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)物用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮。將粗產(chǎn)物溶于二氯甲烷中，并吸附至無(wú)水硅膠柱上。區(qū)域異構(gòu)體通過(guò)柱色譜分離，使用20-30％乙酸乙酯/己烷+1％甲醇，得到1-(4-氨基-5-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮(8g，66％)和1-(4-氨基-7-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮(1.3g，11％)。
1-(4-氨基-5-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝8.04(1H，s)；7.74(1H，d，J＝8.6Hz)；7.39(1H，d，J＝8.6Hz)；4.56(2H，br s)；2.76(3H，s)。
1-(4-氨基-7-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝8.06(1H，s)，7.32(1H，d，J＝7.8Hz)；6.51(1H，d，J＝7.8Hz)；4.17(2H，br s)，2.81(3H，s)。
實(shí)施例5 N-(7-氯-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備
步驟A1-(7-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備將1-(4-氨基-7-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮(105mg，0.5mmol)，2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(130mg，0.376mmol)，磷酸鉀(170mg，0.8mmol)，Xantphos(58mg，0.1mmol)和Pd2dba3(91mg，0.1mmol)加至圓底燒瓶中。并將該燒瓶在真空下用氬氣吹掃，并將固體混懸于甲苯(10mL)中。將反應(yīng)混合物使用氬氣重復(fù)脫氣，并在氬氣下加熱至110℃的溫度，持續(xù)18小時(shí)。將溶液冷卻并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化，使用1-8％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到所需產(chǎn)物(20mg，27％)。MS(APCI-pos)M+1＝405.1，407.1。
步驟BN-(7-氯-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備將5M的HCl(0.0581mL，0.291mmol)加至1-(7-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-基)乙酮(0.056g，0.138mmol)于甲醇/二噁烷(4mL，3∶1)中的混懸液中。將該溶液加熱至70℃的溫度，持續(xù)12小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，并使用飽和碳酸氫鹽溶液中和至pH約6至約7。通過(guò)過(guò)濾收集固體(30mg，59％)，用水，乙酸乙酯洗滌和在高真空下干燥。MS (APCI-pos)M+1＝363.3，365.3。
實(shí)施例6 N-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備
化合物按照實(shí)施例5中的描述制備，用1-(4-氨基-5-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮代替1-(4-氨基-7-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮。MS(APCI)M+1＝363.3，365.3。
實(shí)施例7 4-氨基-7-甲基-2H-吲唑-2-羧酸叔丁基酯的制備
步驟A2，6-二甲基-3-硝基乙酰胺的制備該化合物使用EP 153855中描述的步驟制備。
步驟B2，6-二甲基-3-硝基苯胺的制備將濃硫酸(30mL)加至2，6-甲基-3-硝基乙酰胺(14.8g，71mmol)于EtOH(200mL)中的溶液中。將該溶液加熱回流96小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，使用1M的NaOH中和，傾倒至鹽水中，并用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)物用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化，使用2-10％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到所需產(chǎn)物(11.8g，55％)。
步驟C7-甲基-4-硝基-1H-吲唑和7-甲基-6-硝基-1H-吲唑的制備Organic Synthesis Collective Volume 3，1955，p 660中描述的步驟。將2，6-二甲基-3-硝基苯胺(6.1g，37mmol)于冰乙酸(25mL)中的混懸液置于冰浴中，并且其內(nèi)部溫度使用溫度計(jì)監(jiān)測(cè)。將亞硝酸鈉(2.5g，37mmol)于水(6.0mL)中的溶液一次性加至其中。觀察到快速放熱，當(dāng)添加時(shí)內(nèi)部溫度從約9℃升溫至約50℃。將得到的混懸液在室溫下攪拌3天，然后用水終止。固體通過(guò)過(guò)濾收集，為吲唑區(qū)域異構(gòu)體混合物。粗產(chǎn)物直接在步驟D中使用。
步驟D7-甲基-6-硝基-2H-吲唑-2-羧酸叔丁基酯和7-甲基-4-硝基-2H-吲唑-2-羧酸叔丁基酯的制備將7-甲基-4-硝基-1H-吲唑和7-甲基-6-硝基-1H-吲唑的混合物(600mg，3.11mmol)混懸于二氯甲烷(20mL)中。并將Boc2O(0.678g，3.11mmol)加至其中，接著加入三乙胺(0.433mL，3.11mmol)。將反應(yīng)在室溫下攪拌16小時(shí)，然后用水(30mL)終止。水層用二氯甲烷(3X 50mL)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。區(qū)域異構(gòu)體通過(guò)柱色譜分離，使用20％乙酸乙酯/己烷，得到7-甲基-6-硝基-2H-吲唑-2-羧酸叔丁基酯(410mg，47％)和7-甲基-4-硝基-2H-吲唑-2-羧酸叔丁基酯(350mg，40％)。
7-甲基-6-硝基-2H-吲唑-2-羧酸叔丁基酯1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝8.6(1H，s)；7.61(1H，d，J＝9.3Hz)；7.56(1H，d，J＝9.3Hz)；2.94(3H，s)；1.73(9H，s)。
7-甲基-4-硝基-2H-吲唑-2-羧酸叔丁基酯1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝9.14(1H，s)；8.15(1H，d，J＝7.04Hz)；7.21(1H，d，J＝7.04Hz)；2.72(3H，s)；1.75(9H，s)。
步驟E4-氨基-7-甲基-2H-吲唑-2-羧酸叔丁基酯的制備將10％Pd/C(0.154g，1.44mmol)加至4-硝基-7-甲基-2H-吲唑-2-羧酸叔丁基酯(400mg，1.44mmol，1當(dāng)量)于MeOH(30mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物用N2除氣，使用H2(45psi)氫化16小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，并將濾液濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化，使用20-30％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到所需產(chǎn)物(287mg，80％)。
實(shí)施例8 N-(7-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備
步驟A7-甲基-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-4，7-二氫-2H-吲唑-2-羧酸叔丁基酯的制備向燒瓶中加入4-氨基-7-甲基-2H-吲唑-2-羧酸叔丁基酯(107mg，0.43mmol)，2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(100mg，0.29mmol)，磷酸鉀(98mg，0.46mmol)，Xantphos(33mg，0.05mmol)和Pd2dba3(26mg，0.029mmol)。燒瓶用氬氣除氣，將固體混懸于甲苯(8mL)中，并用氬氣脫氣。將溶液在氬氣下加熱至90℃的溫度，持續(xù)18小時(shí)。將溶液冷卻并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化，使用1-5％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到所需產(chǎn)物。
步驟BN-(7-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備將TFA(2.0mL)滴加至7-甲基-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯于二氯甲烷(2.0mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。粗混合物濃縮，粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用2-8％MeOH/二氯甲烷洗脫，得到所需產(chǎn)物，為固體(6mg；6％2步)。MS(APCI-pos)M+1＝343.4。
實(shí)施例9 3-(三氟甲基磺?；趸?呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯的制備
步驟A3-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)異煙酸乙基酯的制備反應(yīng)在配有內(nèi)部溫度計(jì)、滴液漏斗和N2入口的3-頸燒瓶(3L)中進(jìn)行。將三苯基膦(150.6g，574mmol)溶于THF(1L)中，并冷卻至-10℃的溫度。經(jīng)30分鐘，將DIAD通過(guò)滴液漏斗滴加。將得到的白色混懸液在-10℃下再保持30分鐘。將羥乙酸乙基酯(50.84mL，526.4mmol)于THF(500mL)中的溶液通過(guò)滴液漏斗以保持內(nèi)部溫度低于-10℃的溫度加入。添加完畢后，將反應(yīng)混合物在-10℃的溫度下再保持30分鐘，然后傾倒入3-羥基異煙酸乙基酯(80g，478.6mmol)于THF(500mL)中的混懸液。將反應(yīng)緩慢升溫至環(huán)境溫度過(guò)夜。將反應(yīng)混合物濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯(1L)，并用1N的HCl(1x 500mL然后5x 250mL)萃取。水層用NaHCO3處理至pH約8，然后用乙酸乙酯(1L X 3)萃取。合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮，得到所需產(chǎn)物(92.0g，76％)。MS(APCI-pos)M+1＝254.3。
步驟B3-羥基呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯的制備將3-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)異煙酸乙基酯(92.0g，363mmol)于THF(300mL)中的溶液通過(guò)滴液漏斗滴加至NaH(17.4g，436mmol，60％混懸液，于礦物油物油中)于冷THF(200mL，0℃)中的混懸液。添加完畢后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃的溫度，小心地用冰終止，然后在真空下濃縮以除去大部分的THF。剩余的漿液用飽和NaHCO3(1L)稀釋，并攪拌30分鐘。固體通過(guò)過(guò)濾收集，用水(200mL)和乙酸乙酯(500mL)洗滌，并將固體放在一邊。將濾液轉(zhuǎn)移至分液漏斗，并分離各層。水層用乙酸乙酯(300mL X 3)洗滌，并將有機(jī)物棄去。水層與固體一起收集，并小心地用乙酸(“AcOH”，100mL)酸化至pH約5。將得到的黃色固體通過(guò)過(guò)濾收集和在真空下干燥過(guò)夜，得到所需產(chǎn)物(63.4g，84％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.9(s，1H)，8.5(d，J＝4.8Hz，1H)，7.7(d，J＝5.2Hz，1H)，4.5(q，J＝7.0Hz，2H)，1.5(t，J＝7.0Hz，3H)ppm.MS(APCI-pos)M+1＝208.2。
步驟C3-(三氟甲基磺?；趸?呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯的制備將Tf2O(4.50mL，26.6mmol)滴加至3-羥基呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸酯(4.6g，22.2mmol)和吡啶(2.33mL，28.9mmol)于二氯甲烷(50mL)中的冷(0℃)溶液中。2小時(shí)后，反應(yīng)混合物用水終止，水層用二氯甲烷(50mL X 2)萃取。將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(6.74g，90％)。MS(APCI-pos)M+1＝340.0。
實(shí)施例10 3-(1-乙酰基-7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯和3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯的制備
向燒瓶中加入1-(4-氨基-7-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮(695mg，3.3mmol)，3-(三氟甲基磺酰基氧基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯(750mg，2.21mmol)，磷酸鉀(751mg，3.54mmol)，Xantphos(512mg，0.884mmol)和Pd2dba3(405mg，0.442mmol)。將燒瓶用氬氣除氣，并將固體混懸于甲苯(20mL)中。將反應(yīng)混合物用氬氣脫氣，并加熱至90℃的溫度，持續(xù)24小時(shí)。將反應(yīng)冷卻，用二氯甲烷稀釋，過(guò)濾并濃縮。產(chǎn)物3-(1-乙酰基-7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯(200mg，22％；APCI-pos，M+1＝399.1，401.1)和3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯(140mg，17％；APCI-pos，M+1＝357.2，359.2)的混合物通過(guò)柱色譜分離，使用0％至3％甲醇/二氯甲烷。
實(shí)施例11 N-(7-氯-1H-吲唑-4-基)-2-(3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備
將3-(1-乙?；?7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯(0.050g，0.125mmol)和(Z)-N′-羥基乙脒(0.0557g，0.752mmol)于EtOH/乙腈(2mL，1∶1)中的混懸液密封，并加熱至100℃的溫度，持續(xù)12小時(shí)。將溶液冷卻，并將固體通過(guò)過(guò)濾收集，得到所需產(chǎn)物(15mg，32％)。MS(APCI-pos)M+1＝367.2，369.2。
實(shí)施例12 3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-甲酰胺的制備
在0℃的溫度下，將三甲基鋁(2.0M的甲苯溶液，0.3134mL，0.6269mmol)加至吡啶-3-基甲胺(0.06383mL，0.6269mmol)于甲苯(5mL)中的溶液中。30分鐘后，加入3-(1-乙酰基-7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯(0.050g，0.1254mmol)，并將溶液加熱至80℃的溫度，持續(xù)3小時(shí)。將反應(yīng)冷卻0℃的溫度，并用冰冷的水終止。乳液用30％Rochelle′s鹽溶液處理?；旌衔镉靡宜嵋阴ポ腿?，硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化，使用2-7％甲醇/二氯甲烷，得到所需產(chǎn)物(12mg，23％)。MS(APCI-pos)M+1＝419.1，421.1。
實(shí)施例13 3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)-N-(2-(吡啶-3-基)乙基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-甲酰胺的制備
化合物按照實(shí)施例12中的描述制備，用3-氨基乙基吡啶代替吡啶-3-基甲胺。MS(APCI)M+1＝433.1，435.1。
實(shí)施例14 N-(7-氯-1H-吲唑-4-基)-2-(1，3，4-噁二唑-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備
步驟A3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-甲酰肼的制備將肼(0.1334mL，4.204mmol)加至3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯(0.150g，0.4204mmol)于乙醇(2mL)中的混懸液中。將反應(yīng)器密封，并加熱至90℃的溫度，持續(xù)18小時(shí)。將反應(yīng)冷卻，固體通過(guò)過(guò)濾收集，得到所需產(chǎn)物(65mg，45％)。MS(APCI)M+1＝343.1，345.1。
步驟BN-(7-氯-1H-吲唑-4-基)-2-(1，3，4-噁二唑-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備將3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-甲酰肼(90mg，0.26mmol)于含有乙酸(0.5mL)的原甲酸三乙酯(4mL)中的混懸液在Biotage Initiator微波反應(yīng)器中密封，并加熱至130℃的溫度，持續(xù)30分鐘。將溶液冷卻并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化，使用2-5％甲醇/二氯甲烷，得到所需產(chǎn)物(21mg，23％)。MS(APCI-pos)M+1＝353.2，355.2。
實(shí)施例15 3-氯-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備
步驟A3-氯-4-硝基-1H-吲唑的制備將4-硝基-1H-吲唑(1.0g，6.13mmol)加至NaOH(0.981g，24.5mmol)于H2O(30mL)中的溶液中，并將混合物加熱至40℃的溫度，直到形成紅色溶液為止。將反應(yīng)冷卻0℃的溫度，然后加入NaClO(11.1g，6.15％wt商購(gòu)的CHLOROX溶液)。撤去冷浴，并將反應(yīng)在室溫下攪拌60小時(shí)。pH用1N的HCl調(diào)節(jié)至約7。水層用乙酸乙酯(100mLX3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(1.0g，83％)。MS(APCI-neg)M-1＝196.2，198.2。
步驟B3-氯-4-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將三乙胺(0.212mL，1.52mmol)加至3-氯-4-硝基-1H-吲唑(0.3g，1.52mmol)于二氯甲烷(50mL)中的混懸液中。然后加入Boc2O(0.325g，1.49mmol)。將反應(yīng)在室溫下攪拌16小時(shí)，然后用水(30mL)終止。水層用二氯甲烷(50mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物(0.47g)在步驟C中使用不用純化。
步驟C4-氨基-3-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將Zn粉(0.93g，14.3mmol)加至3-氯-4-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.425g，1.428mmol)于MeOH/飽和NH4Cl水溶液(10mL，1∶1)中的混懸液中。將反應(yīng)在室溫下攪拌16小時(shí)。剩余的Zn通過(guò)過(guò)濾除去，濾餅用乙酸乙酯洗滌。分離有機(jī)層，水層用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(20∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.26g，68％)。
步驟D3-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(0.12g，0.348mmol)和4-氨基-3-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.093g，0.348mmol)混懸于甲苯(5mL)中，并用氬氣脫氣15分鐘。將Xantphos(0.040g，0.070mmol)，Pd2(dba)3(0.032g，0.035mmol)和K3PO4(0.162g，0.765mmol)加至其中。將反應(yīng)混合物再脫氣15分鐘，然后在氬氣下加熱回流過(guò)夜。將反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶1)，己烷/乙酸乙酯(1∶2)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.11g，68％)。MS(APCI-pos)M+1＝462.9，464.9。
步驟E3-氯-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備將三氟乙酸(“TFA”，2.0mL)滴加至3-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.11g，0.24mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的混懸液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。將粗混合物濃縮，并將殘余物使用飽和NaHCO3水溶液(5.0mL)中和至pH約7。將得到的固體(0.070g，81％)通過(guò)過(guò)濾收集，依次用水(～20mL)，乙酸乙酯(～20mL)洗滌，并在真空下干燥。MS (APCI-pos)M+1＝363.3，365.3。
實(shí)施例16 3-乙基-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備
步驟A3-碘-4-硝基-1H-吲唑的制備在0℃下，將粉末KOH(10.6g，195mmol)加至4-硝基-1H-吲唑(3.86g，23.7mmol)于DMF(50mL)中的溶液中。然后將于DMF(80mL)中的I2(24.0g，94.6mmol)通過(guò)滴液漏斗滴加。將反應(yīng)混合物在室溫下放置40小時(shí)。過(guò)量的I2用10％Na2S2O3水溶液猝滅，并將pH用飽和NaHCO3水溶液調(diào)節(jié)至約7。將反應(yīng)混合物濃縮以除去DMF，殘余物用水稀釋。得到的固體(6.5g，95％)通過(guò)過(guò)濾收集和真空下干燥。
步驟B3-碘-4-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將三乙胺(0.67mL，4.81mmol)加至3-碘-4-硝基-1H-吲唑(1.07g，3.70mmol)于二氯甲烷(50mL)中的混懸液中，接著加入Boc2O(0.97g，4.44mmol)。將反應(yīng)在室溫下攪拌30分鐘，然后用水(30mL)終止。水層用二氯甲烷(50mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(20∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(1.1g，77％)。
步驟C4-硝基-3-乙烯基-1H-吲唑的制備將3-碘-4-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.11g，0.28mmol)和乙烯基三氟硼酸鉀(0.11g，0.848mmol)混懸于異丙醇/THF(4∶1，10mL)中，并將混合物用氬氣脫氣15分鐘。加入PdCl2(dppf)dcm(0.023g，0.028mmol)，三乙胺(0.12mL，0.85mmol)，并將該反應(yīng)混合物再脫氣15分鐘。然后將反應(yīng)混合物在氬氣下加熱至90℃的溫度，持續(xù)40小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(4∶1)，己烷/乙酸乙酯(1∶2)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.033g，62％)。
步驟D4-硝基-3-乙烯基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將三乙胺(0.032mL，0.23mmol)加至4-硝基-3-乙烯基-1H-吲唑(0.033g，0.17mmol)于二氯甲烷(20mL)中的混懸液中，接著加入Boc2O(0.046g，0.21mmol)。將反應(yīng)在室溫下攪拌2小時(shí)，然后用水(20mL)終止。水層用二氯甲烷(20mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(20∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.036g，71％)。
步驟E4-氨基-3-乙基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將10％Pd/C(0.013g，0.012mmol)加至4-硝基-3-乙烯基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.036g，0.12mmol)于MeOH/乙酸乙酯混合物(1∶4，20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物用N2除氣，使用H2(14psi)氫化16小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液濃縮，得到所需產(chǎn)物(0.032g，98％)。MS(APCI-pos)M+1＝261.8。
步驟F3-乙基-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(0.043g，0.125mmol)和4-氨基-3-乙基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.034g，0.131mmol)混懸于甲苯(5mL)中，并用氬氣脫氣15分鐘。加入Xantphos(0.014g，0.025mmol)，Pd2(dba)3(0.011g，0.013mmol)和K3PO4(0.058g，0.27mmol)。將反應(yīng)混合物再脫氣15分鐘，然后在氬氣下加熱回流過(guò)夜。將該冷卻的反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(2∶1)，己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.037g，65％)。MS(APCI-pos)M+1＝457.0。
步驟G3-乙基-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備將TFA(2.0mL)滴加至3-乙基-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.037g，0.081mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的混懸液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。粗混合物濃縮，殘余物使用飽和NaHCO3水溶液(5.0mL)中和至pH約7。水層用二氯甲烷(20mL x 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶4)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.025g，87％)。MS(APCI-pos)M+1＝357.4。
實(shí)施例17 3-(4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-3-基)丙-1-醇的制備
步驟A3-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙-1-炔基)-4-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將PdCl2(PPh3)2(0.162g，0.23mmol)和CuI(0.11g，0.576mmol)加至3-碘-4-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(1.12g，2.88mmol)，叔丁基二甲基(丙-2炔基氧基)硅烷(0.88g，5.18mmol)和三乙胺(4mL)于THF(20mL)中的溶液中。將混合物用氬氣除氣15分鐘，然后在氬氣下在室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(20∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.64g，51％)。
步驟B4-氨基-3-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將10％Pd/C(0.158g，0.148mmol)加至3-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙-1-炔基)-4-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.64g，1.48mmol)于MeOH/乙酸乙酯混合物(1∶4，100mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物用N2除氣，使用H2(30psi)氫化16小時(shí)。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液濃縮，得到所需產(chǎn)物(0.54g，89％)。MS(APCI-pos)M+1＝405.9。
步驟C3-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(0.43g，1.25mmol)和4-氨基-3-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.53g，1.31mmol)混懸于甲苯(25mL)中，并用氬氣脫氣15分鐘。加入Xantphos(0.144g，0.25mmol)，Pd2(dba)3(0.114g，0.13mmol)和K3PO4(0.58g，2.74mmol)。將反應(yīng)混合物再脫氣15分鐘，然后在氬氣下加熱回流過(guò)夜。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(4∶1)和己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.33g，43％)。MS(APCI-pos)M+1＝601.1。
步驟D3-(3-羥基丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將1.0M四-丁基氟化銨溶液的THF溶液(0.21mL，0.21mmol)加至3-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.082g，0.14mmol)于THF (5.0mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后用水(5.0mL)中終止。水層用乙酸乙酯(20mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶4)，乙酸乙酯洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.044g，66％)。MS(APCI-pos)M+1＝487.0。
步驟E3-(4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-3-基)丙-1-醇的制備將TFA(2.0mL)滴加至3-(3-羥基丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.044g，0.090mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。粗混合物濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷(4.0mL)中，并用三乙胺(1mL)處理30分鐘。反應(yīng)混合物濃縮，固體(0.030g，86％)通過(guò)過(guò)濾收集，用水(～20mL)洗滌，并真空下干燥。MS(APCI-pos)M+1＝387.3。
實(shí)施例18 3-(3-(二甲基氨基)丙基)-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備
步驟A3-(3-氧代丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將Dess-Martin高碘烷(0.157g，0.37mmol)加至3-(3-羥基丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.12g，0.25mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。反應(yīng)用水(10mL)終止，水層用二氯甲烷(20mL X 3)萃取。合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶2)，己烷/乙酸乙酯(1∶4)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.083g，70％)。MS(APCI-pos)M+1＝485.0。
步驟B3-(3-(二甲基氨基)丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將2.0M二甲基胺的THF溶液(0.86mL，1.71mmol)加至3-(3-氧代丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.83g，0.171mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物攪拌10分鐘，然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(0.036g，0.171mmol)。將該混合物在室溫下放置16小時(shí)。反應(yīng)用小心地用MeOH終止，然后濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷(20mL)和水(20mL)中，水層用二氯甲烷(50ml X 3)萃取。合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化，使用乙酸乙酯，二氯甲烷/MeOH(20∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.075g，85％)。MS(APCI-pos)M+1＝514.0。
步驟C3-(3-(二甲基氨基)丙基)-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備將TFA(2.0mL)滴加至3-(3-(二甲基氨基)丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.088g，0.17mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。粗混合物濃縮，殘余物用飽和NaHCO3水溶液(5.0mL)處理。水層用二氯甲烷(20mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用二氯甲烷/MeOH(10∶1)，二氯甲烷/MeOH/三乙胺(10∶1∶0.1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.044g，62％)。MS(APCI-pos)M+1＝414.2。
實(shí)施例19 3-(4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-3-基)丙酸的制備
步驟A3-(1-(叔丁氧羰基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-3-基)丙酸的制備將2-甲基丁-2-烯(2.0M的THF溶液，0.64mL，1.29mmol)，亞氯酸鈉(0.07g，0.77mmol)和NaH2PO4(0.124g，1.03mmol)于2.0mL水中的溶液加至3-(3-氧代丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.125g，0.258mmol)于t-BuOH(5.0mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌48小時(shí)。粗混合物濃縮，殘余物用水(10mL)稀釋。pH使用AcOH調(diào)節(jié)至約5。水層用二氯甲烷(20mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用乙酸乙酯洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.068g，53％)。MS(APCI-pos)M+1＝501.0。
步驟B3-(4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-3-基)丙酸的制備將TFA(2.0mL)滴加至3-(1-(叔丁氧羰基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-3-基)丙酸(0.068g，0.14mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。粗混合物濃縮，將殘余物溶于水(4.0mL)中。pH使用飽和NaHCO3水溶液調(diào)節(jié)至約5。得到的固體(0.028g，51％)通過(guò)過(guò)濾收集，用水(～20mL)，二氯甲烷洗滌，并在真空下干燥。MS(APCI-pos)M+1＝401.1。
實(shí)施例20 3-(3-氨基丙基)-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備
步驟A3-(3-(甲基磺酰基氧基)丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將甲磺酰氯(0.069mL，0.89mmol)加至3-(3-羥基丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.310g，0.64mmol)和三乙胺(0.178mL，1.27mmol)于二氯甲烷(20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。粗混合物濃縮，直接在步驟B中使用。MS(APCI-pos)M+1＝656.0。
步驟B3-(3-疊氮基丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將NaN3(0.043g，0.666mmol)加至3-(3-(甲基磺?；趸?丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.188g，0.333mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在100℃的溫度下攪拌3小時(shí)。粗混合物用乙酸乙酯(50mL)和水(20mL)稀釋。水層用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶1)，己烷/乙酸乙酯(1∶2)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.053g，25％)，為薄膜。MS(APCI-pos)M+1＝512.0。
步驟C3-(3-氨基丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將10％Pd/C(0.011g，0.010mmol)加至3-(3-疊氮基丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.053g，0.10mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物用N2除氣，使用H2(14psi)氫化3小時(shí)。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液濃縮，得到所需產(chǎn)物(0.045g，89％)。MS(APCI-pos)M+1＝485.9。
步驟D3-(3-氨基丙基)-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備將TFA(2.0mL)滴加至3-(3-氨基丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.088g，0.17mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。粗混合物濃縮，殘余物用飽和NaHCO3水溶液(5.0mL)處理。水層用二氯甲烷(20mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用二氯甲烷/MeOH(10∶1)，二氯甲烷/MeOH/三乙胺(12∶1∶0.1)，二氯甲烷/MeOH/三乙胺(10∶1∶0.1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.032g，65％)。MS(APCI-pos)M+1＝386.2。
實(shí)施例21 3-(3-(甲基氨基)丙基)-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備
將2.0M甲基胺的THF溶液(17.7mL，35.4mmol)加至3-(3-(甲基磺?；趸?丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.100g，0.177mmol)于THF(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。粗產(chǎn)物濃縮和通過(guò)快速柱色譜純化，使用二氯甲烷/MeOH(10∶1)，二氯甲烷/MeOH/三乙胺(10∶1∶0.1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.017g，24％)。MS(APCI-pos)M+1＝400.1。
實(shí)施例22 3，7-二氯-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備
步驟A4-氨基-3，7-二氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將N-氯琥珀酰亞胺(0.183g，1.37mmol)加至4-氨基-3-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.334g，1.25mmol)于乙腈(20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在60℃下攪拌16小時(shí)。粗混合物濃縮，通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(10∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.127g，34％)。
步驟B3，7-二氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(0.14g，0.40mmol)和4-氨基-3，7-二氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.129g，0.43mmol)混懸于甲苯(25mL)中，并用氬氣脫氣15分鐘。加入Xantphos(0.047g，0.081mmol)，Pd2(dba)3(0.037g，0.040mmol)和K3PO4(0.189g，0.89mmol)。將反應(yīng)混合物再脫氣15分鐘，然后在氬氣下加熱回流過(guò)夜。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶1)，乙酸乙酯洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.141g，70％)。MS(APCI-pos)M+1＝496.8，498.8。
步驟C3，7-二氯-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備將TFA(2.0mL)滴加至3，7-二氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.141g，0.28mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的混懸液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。粗混合物濃縮，并將殘余物使用飽和NaHCO3水溶液(5.0mL)中和至pH約7。得到的固體(0.062g，55％)通過(guò)過(guò)濾收集，依次用水(～20mL)，乙酸乙酯(～20mL)洗滌，并在真空下干燥。MS(APCI-pos)M+1＝397.4，399.3。
實(shí)施例23 3-(7-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-3-基)丙-1-醇的制備
步驟A4-氨基-3-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)-7-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將N-氯琥珀酰亞胺(0.057g，0.426mmol)加至4-氨基-3-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.157g，0.387mmol)于乙腈(20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在60℃下攪拌16小時(shí)。粗混合物濃縮，通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(10∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.038g，22％)。MS(APCI-pos)M+1＝439.8，441.8。
步驟B3-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)-7-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(0.807g，2.34mmol)和4-氨基-3-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)-7-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.98g，2.23mmol)混懸于甲苯(50mL)中，并用氬氣脫氣15分鐘。加入Xantphos(0.129g，0.22mmol)，Pd2(dba)3(0.102g，0.11mmol)和K3PO4(0.756g，3.56mmol)。將反應(yīng)混合物再脫氣15分鐘，然后在氬氣下加熱回流過(guò)夜。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.756g，53％)。MS(APCI-pos)M+1＝635.0，637.0。
步驟C7-氯-3-(3-羥基丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將1.0M四-丁基氟化銨的THF溶液(3.57mL，3.57mmol)加至3-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)-7-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.756g，1.1.9mmol)于THF(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，然后用水(10mL)終止。水層用乙酸乙酯(50mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用乙酸乙酯，二氯甲烷/MeOH(20∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.288g，47％)。MS(APCI-pos)M+1＝521.0，523.0。
步驟D3-(7-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-3-基)丙-1-醇的制備將TFA(2.0mL)滴加至7-氯-3-(3-羥基丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.050g，0.096mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。粗混合物濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷(4.0mL)中，并用三乙胺(1mL)處理30分鐘。反應(yīng)混合物濃縮，固體(0.022g，54％)通過(guò)過(guò)濾收集，用水(～20mL)洗滌，并在真空下干燥。MS(APCI-pos)M+1＝421.3，423.2。
實(shí)施例24 3-(3-氨基丙基)-7-氯-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備
步驟A7-氯-3-(3-(甲基磺?；趸?丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將甲磺酰氯(0.050mL，0.64mmol)加至7-氯-3-(3-羥基丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.24g，0.46mmol)和三乙胺(0.129mL，0.92mmol)于二氯甲烷(20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。粗混合物濃縮，直接在步驟B中使用。MS(APCI-pos)M+1＝598.9，600.9。
步驟B3-(3-疊氮基丙基)-7-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將NaN3(0.060g，0.92mmol)加至7-氯-3-(3-(甲基磺?；趸?丙基)-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.276g，0.46mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在100℃的溫度下攪拌3小時(shí)。粗混合物用乙酸乙酯(50mL)和水(20mL)稀釋。水層用乙酸乙酯(50mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶1)，己烷/乙酸乙酯(1∶2)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.18g，72％)，為薄膜。MS(APCI-pos)M+1＝546.0，548.0。
步驟C3-(3-氨基丙基)-7-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將三苯基膦(0.112g，0.429mmol)加至3-(3-疊氮基丙基)-7-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.180g，0.33mmol)于THF/H2O(9∶1，10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物加熱回流2小時(shí)。粗產(chǎn)物濃縮，通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶1)，乙酸乙酯洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.018g，11％)，為薄膜。MS(APCI-pos)M+1＝519.9，521.9。
步驟D3-(3-氨基丙基)-7-氯-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備將TFA(2.0mL)滴加至3-(3-氨基丙基)-7-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.019g，0.036mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。粗混合物濃縮，殘余物用飽和NaHCO3水溶液(5.0mL)處理。水層用二氯甲烷(20mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用二氯甲烷/MeOH(10∶1)，二氯甲烷/MeOH/三乙胺(12∶1∶0.1)，二氯甲烷/MeOH/三乙胺(10∶1∶0.1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.008g，55％)。MS(APCI-pos)M+1＝420.1，422.1。
實(shí)施例25 2-(5-溴嘧啶-2-基)-3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)呋喃并[2，3-c]吡啶的制備
步驟A呋喃并[2，3-c]吡啶-3(2H)-酮鹽酸鹽的制備將3-羥基呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯(2.0g，9.65mmol)混懸于4M HCl(10mL)中，并加熱回流6小時(shí)。將反應(yīng)冷卻并濃縮，得到固體(1.60g，95％)。粗產(chǎn)物直接在步驟B中使用。MS(APCI-pos)M+1＝136.4。
步驟B3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)呋喃并[2，3-c]吡啶的制備將咪唑(1.65g，24.2mmol)和叔丁基氯二苯基硅烷(3.71mL，14.5mmol)依次加至呋喃并[2，3-c]吡啶-3(2H)-酮鹽酸鹽(1.60g，9.67mmol)于二氯甲烷(100mL)中的混懸液中。將混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，然后用水(50mL)終止。水層用二氯甲烷(100mL X 3)萃取。將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(9∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(3.39g，94％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.7(s，1H)，8.4(d，J＝5.6Hz，1H)，7.7(m，4H)，7.5(m，3H)，7.4(m，4H)，6.8(s，1H)，1.2(s，9H)ppm.MS(APCI-pos)M+1＝374.3。
步驟C2-溴-3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)呋喃并[2，3-c]吡啶的制備將Br2(1.67g，10.4mmol)與CHCl3(5.0mL)的溶液加至3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)呋喃并[2，3-c]吡啶(1.30g，3.48mmol)于CHCl3(20mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后用飽和Na2S2O3水溶液和飽和NaHCO3水溶液終止。水層用二氯甲烷(100mL X 3)萃取。將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮(浴溫約20℃)。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用二氯甲烷，二氯甲烷/乙酸乙酯(9∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(1.42g，90％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.6(s，1H)，8.0(d，J＝5.6Hz，1H)，7.7(m，4H)，7.4(m，6H)，6.7(d，J＝5.6Hz，1H)，1.2(s，9H)ppm。MS(APCI-pos)M+1＝452.3，454.2。
步驟D2-(5-溴嘧啶-2-基)-3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)呋喃并[2，3-c]吡啶的制備將異丙基MgCl(“i-PrMgCl”，2.0M的THF溶液，1.12mL，2.23mmol)通過(guò)注射器緩慢地加至經(jīng)火焰干燥的50mL圓底燒瓶(“RBF”)中，該燒瓶中含有于冷(-10℃)THF(20mL)中的2-溴-3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)呋喃并[2，3-c]吡啶(0.674g，1.49mmol)。將該反應(yīng)混合物在-10℃的溫度下攪拌1小時(shí)。加入ZnCl2(0.5M的THF溶液，4.47mL，2.23mmol)。撤去冷浴，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15分鐘。將Pd(PPh3)4(0.172g，0.149mmol)，5.0mL無(wú)水THF和5-溴-2-碘嘧啶(0.637g，2.23mmol)在氬氣下再加入另一50mL經(jīng)火焰干燥的RBF中。將該芳基鋅溶液通過(guò)導(dǎo)管加至其中。將反應(yīng)混合物在室溫下在氬氣下放置過(guò)夜。反應(yīng)混合物濃縮，殘余物用水(20mL)和乙酸乙酯(50mL)稀釋。水層用乙酸乙酯(50mL X 3)萃取。將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(4∶1)，己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.62g，79％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.9(s，1H)，8.7(s，2H)，8.1(d，J＝5.6Hz，1H)，7.8(m，4H)，7.4-7.3(m，6H)，6.9(d，J＝5.6Hz，1H)，1.2(s，9H)ppm。MS(APCI-pos)M+1＝530.3，532.3。
實(shí)施例26 3-(2-(3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-基)嘧啶-5-基)丙-1-醇的制備
步驟A4-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將三乙胺(5.3mL，38mmol)加至4-硝基-1H-吲唑(5.2g，32mmol)于二氯甲烷(100mL)中的混懸液中，接著加入Boc2O(7.7g，35mmol)。將反應(yīng)在室溫下攪拌16小時(shí)，然后用水(50mL)終止。水層用二氯甲烷(50mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(9∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(8.1g，97％)。
步驟B4-氨基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將10％Pd/C(0.9g)加至4-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(8.1g，30.8mmol)于MeOH/乙酸乙酯混合物(1∶4，100mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物用N2除氣，使用H2(30psi)氫化16小時(shí)。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(4∶1)，己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(6.0g，84％)。MS(APCI-pos)M+1＝233.7。
步驟C4-氨基-7-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將N-氯琥珀酰亞胺(1.19g，1.37mmol)加至4-氨基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(1.90g，8.14mmol)于乙腈(50mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在60℃的溫度下攪拌16小時(shí)。粗混合物濃縮，通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(4∶1)，己烷/乙酸乙酯(3∶2)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.731g，34％)。1H NMR(400MHz，CDCL3)δ＝8.10(s，1H)，7.29(d，J＝8.0Hz，1H)，6.46(d，J＝8.8Hz，1H)，4.18(br s，2H)，1.71(s，9H)。
實(shí)施例27 7-氯-N-(2-(5-甲氧基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備
步驟A(Z)-3-(二甲基氨基)-2-甲氧基丙烯醛的制備反應(yīng)在配有內(nèi)部溫度計(jì)的3-頸燒瓶(500mL)中進(jìn)行。保持內(nèi)部溫度低于30℃，將PCl5(64.4g，294mmol)分小批(～5g)加至1，1，2-三甲氧基乙烷(36g，294mmol)的冷(0℃)溶液中。將混合物加熱至60℃，持續(xù)75分鐘，然后置于冰浴中。保持內(nèi)部溫度低于10℃的溫度，將DMF(66mL，852mmol)通過(guò)滴液漏斗加入。將混合物在室溫下攪拌40小時(shí)，保持內(nèi)部溫度低于10℃，通過(guò)滴液漏斗滴加MeOH(100mL)。將溶液轉(zhuǎn)移至滴液漏斗中，保持內(nèi)部溫度低于20℃，滴加至30％甲醇鈉(403mL，2.17mol)的MeOH溶液。將該混合物加熱回流4小時(shí)，然后濃縮。將殘余物溶于水(500mL)中，并用二氯甲烷(500mL X 3)萃取。將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮，得到所需產(chǎn)物(19g，25％)。MS(APCI-pos)M+1＝130.0。
步驟B5-甲氧基嘧啶-2-醇的制備將(Z)-3-(二甲基氨基)-2-甲氧基丙烯醛(17.1g，66mmol)和尿素(15.9g，265mmol)混懸于MeOH(100mL)中，并用濃HCl溶液(12mL)處理。將混合物加熱回流16小時(shí)，然后濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用二氯甲烷/MeOH(20∶1)，二氯甲烷/MeOH(10∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(5.6g，34％)。
步驟C5-甲氧基嘧啶-2-基三氟甲磺酸酯的制備將5-甲氧基嘧啶-2-醇(1.02g，0.09mmol)和三乙胺(2.26mL，16.2mmol)于二氯甲烷(50mL)中的混懸液在0℃的溫度下攪拌10分鐘。加入Tf2O(2.72mL，16.2mmol)，并繼續(xù)攪拌30分鐘。混合物用水(50mL)終止，水層用二氯甲烷(50mL X 3)萃取。將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(20∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.5g，24％)。
步驟D3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)-2-(5-甲氧基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶的制備將i-PrMgCl(2.0M的THF溶液，1.19mL，2.39mmol)通過(guò)注射器緩慢地加至經(jīng)火焰干燥的50mL RBF中，其含有于冷(-10℃)THF(20mL)中的2-溴-3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)呋喃并[2，3-c]吡啶(0.90g，1.59mmol)。將反應(yīng)在-10℃的溫度下攪拌1小時(shí)。加入ZnCl2(0.5M的THF溶液，4.8mL，2.39mmol)。撤去冷浴，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15分鐘。將Pd(PPh3)4(0.184g，0.159mmol)，5.0mL無(wú)水THF和5-甲氧基嘧啶-2-基三氟甲磺酸酯(0.431g，1.67mmol)在氬氣下加至另一50mL經(jīng)火焰干燥的圓底燒瓶中。將芳基鋅溶液通過(guò)導(dǎo)管加入。將該反應(yīng)混合物在室溫下在氬氣下放置過(guò)夜。反應(yīng)混合物濃縮，將殘余物用水(20mL)和乙酸乙酯(50mL)稀釋。水層用乙酸乙酯(50mL X 3)萃取。將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(4∶1)，己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.40g，52％)。MS(APCI-pos)M+1＝482.4。
步驟E2-(5-甲氧基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-醇的制備將4NNaOH(0.25mL，1.0mmol)加至3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)-2-(5-甲氧基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶(0.400g，0.83mmol)于EtOH(10mL)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物使用AcOH(0.3mL)酸化，然后濃縮。粗產(chǎn)物直接在步驟F中使用。MS(APCI-pos)M+1＝244.3。
步驟F2-(5-甲氧基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯的制備將2-(5-甲氧基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-醇(0.202g，0.83mmol)和吡啶(0.087mL，1.08mmol)于二氯甲烷(50mL)中的混懸液在0℃的溫度下攪拌10分鐘。加入Tf2O(0.168mL，1.0mmol)，并將混合物攪拌1小時(shí)。混合物用水(50mL)終止，水層用二氯甲烷(50mL X 3)萃取。將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.16g，51％)。MS(APCI-pos)M+1＝375.9。
步驟G7-氯-N-(2-(5-甲氧基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備將2-(5-甲氧基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(0.160g，0.426mmol)和1-(4-氨基-7-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮(0.107g，0.512mmol)混懸于甲苯(20mL)中，并用氬氣脫氣15分鐘。加入Xantphos(0.049g，0.085mmol)，Pd2(dba)3(0.039g，0.043mmol)和K3PO4(0.199g，0.938mmol)。將反應(yīng)混合物再脫氣15分鐘，然后在氬氣下加熱回流過(guò)夜。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶1)，己烷/乙酸乙酯(1∶4)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.004g，2％)。MS(APCI-pos)M+1＝393.4，395.3。
實(shí)施例28 3-(2-(3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-基)嘧啶-5-基)丙-1-醇的制備
步驟A2-(5-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙-1-炔基)嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-醇的制備將PdCl2(PPh3)2(0.074g，0.11mmol)和CuI(0.038g，0.20mmol)加至2-(5-溴嘧啶-2-基)-3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)呋喃并[2，3-c]吡啶(0.70g，1.32mmol)，叔丁基二甲基(丙-2-炔基氧基)硅烷(0.67g，3.96mmol)和三乙胺(4mL)在THF(20mL)中的溶液中。將混合物用氬氣除氣15分鐘，然后在室溫下在氬氣下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.20g，40％)。MS(APCI-pos)M+1＝382.3。
步驟B2-(5-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-醇的制備將10％Pd/C(0.042g，0.039mmol)加至2-(5-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙-1-炔基)嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-醇(0.15g，0.39mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物用N2除氣，使用H2(14psi)氫化1小時(shí)。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.096g，63％)。MS(APCI-pos)M+1＝386.4。
步驟C2-(5-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯的制備將2-(5-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-醇(0.096g，0.25mmol)，吡啶(0.026mL，0.32mmol)于二氯甲烷(20mL)中的混懸液在0℃的溫度下攪拌10分鐘。加入Tf2O(0.050mL，0.30mmol)，并繼續(xù)攪拌1小時(shí)?；旌衔镉盟?20mL)終止，水層用二氯甲烷(50mL X 3)萃取。將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.073g，57％)。MS(APCI-pos)M+1＝518.1。
步驟D4-(2-(5-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-7-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將2-(5-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(0.073g，0.141mmol)和4-氨基-7-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.041g，0.155mmol)混懸于甲苯(20mL)中，并用氬氣脫氣15分鐘。加入Xantphos(0.025g，0.042mmol)，Pd2(dba)3(0.019g，0.021mmol)和K3PO4(0.048g，0.226mmol)。將反應(yīng)混合物再脫氣15分鐘，然后在氬氣下加熱回流過(guò)夜。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(2∶1)，己烷/乙酸乙酯(1∶4)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.070g，78％)。MS(APCI-pos)M+1＝634.9，636.9。
步驟E3-(2-(3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-基)嘧啶-5-基)丙-1-醇的制備將TFA(2.0mL)滴加至4-(2-(5-(3-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)丙基)嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-7-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.070g，0.11mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。粗混合物濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷(4.0mL)中，并用三乙胺(1mL)處理30分鐘。粗混合物濃縮，粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(2∶1)，己烷/乙酸乙酯(1∶4)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.020g，35％)。MS(APCI-pos)M+1＝421.4，423.4。
實(shí)施例29 N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-胺的制備
步驟A4-硝基-1H-苯并[d]咪唑的制備將3-硝基苯-1，2-二胺(1.0g，6.5mmol)于甲酸(10mL)中的溶液加熱回流16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并濃縮。將得到的固體混懸于水中，并用飽和NaHCO3水溶液處理直到pH為約7至約8為止。固體通過(guò)過(guò)濾收集，并真空下干燥，得到所需產(chǎn)物(1.0g，94％)。MS(APCI-neg)M-1＝162.2。
步驟B4-硝基-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將三乙胺(1.03mL，7.36mmol)加至4-硝基-1H-苯并[d]咪唑(1.0g，6.13mmol)于二氯甲烷(50mL)中的混懸液中，接著加入Boc2O(1.61g，7.36mmol)。將反應(yīng)在室溫下攪拌16小時(shí)，然后用水(20mL)終止。水層用二氯甲烷(50mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(1.50g，93％)。
步驟C4-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將10％Pd/C(0.013g，0.012mmol)加至4-硝基-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁基酯(1.50g，5.70mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物用N2除氣，使用H2(30psi)氫化2小時(shí)。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液濃縮，得到所需產(chǎn)物(1.32g，99％)。MS(APCI-pos)M+1＝233.7。
步驟D4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(0.10g，0.29mmol)和4-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁基酯(0.081g，0.348mmol)混懸于甲苯(5mL)中，并用氬氣脫氣15分鐘。加入Xantphos(0.033g，0.058mmol)，Pd2(dba)3(0.027g，0.029mmol)和K3PO4(0.135g，0.64mmol)。將反應(yīng)混合物再脫氣15分鐘，然后在氬氣下加熱回流過(guò)夜。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶1)，乙酸乙酯洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.074g，60％)。MS(APCI-pos)M+1＝429.0。
步驟EN-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-胺的制備將TFA(2.0mL)滴加至4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁基酯(0.074g，0.17mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的混懸液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。粗混合物濃縮，殘余物使用飽和NaHCO3水溶液(5.0mL)中和至pH約7。得到的固體(0.040g，71％)通過(guò)過(guò)濾收集，依次用水(～20mL)，乙酸乙酯(～20mL)洗滌，并在真空下干燥。MS(APCI-pos)M+1＝329.3。
實(shí)施例30 N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-6-胺的制備
步驟A6-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將三乙胺(1.71mL，12.3mmol)加至6-硝基-1H-吲唑(2.0g，12.3mmol)于二氯甲烷(50mL)中的混懸液中，接著加入Boc2O(2.62g，12.0mmol)。將該反應(yīng)在室溫下攪拌16小時(shí)，然后用水(20mL)終止。水層用二氯甲烷(50mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(9∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(2.91g，90％)。
步驟B6-氨基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將10％Pd/C(0.355g，0.334mmol)加至6-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.88g，3.34mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物用N2除氣，使用H2(30psi)氫化2小時(shí)。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液濃縮，得到所需產(chǎn)物(0.76g，98％)。MS(APCI-pos)M+1＝233.8。
步驟C6-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(0.082g，0.24mmol)和6-氨基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.083g，0.354mmol)混懸于甲苯(5mL)中，并用氬氣脫氣15分鐘。加入Xantphos(0.027g，0.047mmol)，Pd2(dba)3(0.043g，0.047mmol)和K3PO4(0.110g，0.52mmol)。將反應(yīng)混合物再脫氣15分鐘，然后在氬氣下加熱回流過(guò)夜。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶1)，己烷/乙酸乙酯(2∶3)洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.018g，18％)。MS(APCI-pos)M+1＝429.0。
步驟DN-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-6-胺的制備將TFA(2.0mL)滴加至6-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(0.018g，0.034mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的混懸液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。粗混合物濃縮，殘余物使用飽和NaHCO3水溶液(5.0mL)中和至pH約7。水層用二氯甲烷(20mL X 3)萃取，將合并的有機(jī)物干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(1∶4)，乙酸乙酯洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.005g，45％)。MS(APCI-pos)M+1＝329.4。
實(shí)施例31 7-氯-3-乙基-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備
步驟A4-氨基-7-氯-3-乙基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將N-氯琥珀酰亞胺(190.1mg，1.424mmol)加至4-氨基-3-乙基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(310mg，1.186mmol)于乙腈(25mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在60℃的溫度下攪拌16小時(shí)。粗混合物濃縮，通過(guò)快速柱色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(10∶1)洗脫，得到所需產(chǎn)物(125.2mg，36％)。MS(APCI-pos)M+1＝295.7，297.7。
步驟B7-氯-3-乙基-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備將2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(145.9mg，0.4226mmol)和4-氨基-7-氯-3-乙基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(125mg，0.4226mmol)混懸于甲苯(5mL)中，并用氬氣脫氣15分鐘。加入Xantphos (12.23mg，0.02113mmol)，Pd2(dba)3(19.35mg，0.02113mmol)和K3PO4(134.6mg，0.6340mmol)。將反應(yīng)混合物再脫氣15分鐘，然后在氬氣下加熱回流過(guò)夜。反應(yīng)混合物過(guò)濾(GF/F紙)，濾液通過(guò)柱色譜純化，使用3％MeOH/二氯甲烷洗脫，得到所需產(chǎn)物(148.2mg，71.4％)。MS(APCI-neg)M-1＝489.1，491.1。
步驟C7-氯-3-乙基-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備將TFA(2.0mL)滴加7-氯-3-乙基-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(148mg，0.301mmol)于二氯甲烷(2.0mL)中的混懸液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。粗混合物濃縮，通過(guò)快速柱色譜純化，使用5％MeOH/二氯甲烷洗脫，得到所需產(chǎn)物(0.0849g，72％)。MS(APCI-pos)M+1＝391.3，393.3。
實(shí)施例32 1-(4-氨基-6-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備
步驟A5-氯-2-甲基-1，3-二硝基苯的制備將4-氯-1-甲基-2-硝基苯(20.0g，116.6mmol)于60mL濃硫酸中的溶液冷卻至0℃的溫度，保持溫度低于60℃，通過(guò)滴液漏斗滴加硝酸(26.23mL，582.8mmol)。將反應(yīng)加熱至90℃的溫度，持續(xù)2小時(shí)，然后冷卻至室溫。加入水(1.0L)，沉淀通過(guò)過(guò)濾收集，并在高真空下干燥過(guò)夜。通過(guò)柱色譜純化，使用50∶1己烷/乙酸乙酯，得到所需產(chǎn)物(5.5g，21.8％)。MS(APCI-neg)M+1＝215.9，217.9。
步驟B5-氯-2-甲基-3-硝基苯胺的制備將5-氯-2-甲基-1，3-二硝基苯(2.14g，9.88mmol)溶于100mL EtOH中。加入50％硫化銨水溶液(6.75mL，49.4mmol)，并將反應(yīng)加熱至50℃的溫度，持續(xù)2小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，并在乙酸乙酯和水之間分配。分離有機(jī)層，用Na2SO4干燥，濃縮，通過(guò)硅膠色譜純化(4∶1己烷/乙酸乙酯)，得到標(biāo)題化合物(0.039g，58.0％)，為固體。
步驟C1-(6-氯-4-硝基-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備標(biāo)題化合物按照實(shí)施例7，步驟C中的描述制備，用5-氯-2-甲基-3-硝基苯胺代替2，6-二甲基-3-硝基苯胺，得到標(biāo)題化合物，為固體。MS(APCI-neg)M+1＝238.9，240.9。
步驟D1-(4-氨基-6-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備將1-(6-氯-4-硝基-1H-吲唑-1-基)乙酮(0.0163g，0.0680mmol)，F(xiàn)e(0)(0.0380g，0.680mmol)和NH4Cl(0.00182g，0.0340mmol)溶于EtOH(1mL)和水(0.25mL)中，并加熱至78℃的溫度，持續(xù)1小時(shí)。將反應(yīng)濃縮，溶于二氯甲烷中以形成漿液，通過(guò)硅藻土過(guò)濾，并濃縮。通過(guò)硅膠色譜(二氯甲烷)純化，得到標(biāo)題化合物(0.0055g，38.6％)，為固體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，7.85(s，1H)，6.56(s，1H)，4.26(br s，2H)，2.76(s，3H)。
實(shí)施例33 N-(6-氯-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備
步驟A1-(6-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備標(biāo)題化合物按照實(shí)施例15，步驟D中的描述制備，用1-(4-氨基-6-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮代替4-氨基-3-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯，得到標(biāo)題化合物，為固體。MS(APCI-pos)M+1＝405.2，407.2。
步驟BN-(6-氯-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備將1-(6-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-基)乙酮(0.003g，0.0074mmol)溶于MeOH(1mL)中，并加入1.0N HCl(0.037mL，0.037mmol)。將反應(yīng)加熱至60℃的溫度。將反應(yīng)在乙酸乙酯和飽和NaHCO3水溶液之間分配。分離有機(jī)層，用Na2SO4干燥，濃縮，通過(guò)硅膠色譜(2％至10％MeOH/二氯甲烷)純化，得到標(biāo)題化合物(0.0018g，67.0％)，為固體。MS(APCI-pos)M+1＝363.4，365.4。
實(shí)施例34 1-(4-氨基-6-甲基-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備
化合物按照實(shí)施例32中的描述制備，用1，4-二甲基-2-硝基苯代替4-氯-1-甲基-2-硝基苯，得到標(biāo)題化合物，為固體。MS(APCI-pos)M+1＝190.0。
實(shí)施例35 N-(6-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備
化合物按照實(shí)施例33中的描述制備，用1-(4-氨基-6-甲基-1H-吲唑-1-基)乙酮代替1-(4-氨基-6-氯-1H-吲唑-1-基)乙酮，得到標(biāo)題化合物，為固體。MS(APCI-pos)M+1＝343.4。
實(shí)施例36 3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)-N-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-甲酰胺的制備
將嘧啶-2-胺(0.0800g，0.841mmol)溶于甲苯(2mL)中，并冷卻至0℃的溫度。滴加三甲基鋁(0.420mL，0.841mmol)，并在0℃的溫度下攪拌10分鐘。將混合物溫?zé)嶂潦覝?。?-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)呋喃并[2，3-c]吡啶-2-羧酸乙基酯(0.060g，0.168mmol)溶于甲苯(2.0mL)中，通過(guò)注射器加至反應(yīng)中，然后加熱至100℃的溫度，持續(xù)3小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，用水終止，并通過(guò)硅藻土過(guò)濾。加入乙酸乙酯，分離有機(jī)層，Na2SO4干燥，濃縮，通過(guò)硅膠色譜(3％MeOH/二氯甲烷)純化，得到標(biāo)題化合物(0.031g，46.0％)，為固體。MS(APCI-pos)M+1＝406.2，408.1。
實(shí)施例37 3-(7-氯-1H-吲唑-4-基氨基)-N-異丙基呋喃并[2，3-c]吡啶-2-甲酰胺的制備
化合物按照實(shí)施例36中的描述制備，用丙-2-胺代替嘧啶-2-胺，得到標(biāo)題化合物，為固體。MS(APCI-pos)M+1＝370.2，372.2。
實(shí)施例38 2-碘-4，6-二甲基嘧啶的制備
將57％氫碘酸于水(13.9mL，105.2mmol)中的溶液加至2-氯-4，6-二甲基嘧啶(3.0g，21.04mmol)中，并在室溫下攪拌3天。反應(yīng)使用固體K2CO3中和，并用10％KHSO3脫色。將該溶液通過(guò)硅藻土過(guò)濾，然后在5℃的溫度下放置過(guò)夜。收集得到的固體，并在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(0.4g，8.3％)。MS(APCI-pos)M+1＝235.1。
實(shí)施例39 3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)-2-(4，6-二甲基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶的制備
化合物按照實(shí)施例27，步驟D中的描述制備，用2-碘-4，6-二甲基嘧啶代替5-甲氧基嘧啶-2-基三氟甲磺酸酯，得到標(biāo)題化合物，為固體。MS(APCI-pos)M+1＝480.5。
實(shí)施例40 2-(4，6-二甲基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯的制備
化合物按照實(shí)施例27，步驟E和F中的描述制備，用3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)-2-(4，6-二甲基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶代替3-(叔丁基二苯基硅烷基氧基)-2-(5-甲氧基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶。MS(APCI-pos)M+1＝374.0。
實(shí)施例41 2-(4，6-二甲基嘧啶-2-基)-N-(1H-吲唑-4-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備
步驟A1-(4-(2-(4，6-二甲基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-基)乙酮的制備化合物按照實(shí)施例15，步驟D中的描述制備，用2-(4，6-二甲基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯代替2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯，以及用1-(4-氨基-1H-吲唑-1-基)乙酮代替4-氨基-3-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯。MS(APCI-pos)M+1＝399.2。
步驟B2-(4，6-二甲基嘧啶-2-基)-N-(1H-吲唑-4-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備將1-(4-(2-(4，6-甲基嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-基)乙酮(0.0041g，0.010mmol)溶于MeOH(1mL)中，并加入1.0N HCl(0.11mL，0.011mmol)。將反應(yīng)加熱至60℃的溫度。將反應(yīng)在乙酸乙酯和飽和NaHCO3水溶液之間分配。分離有機(jī)層且用Na2SO4干燥，濃縮，通過(guò)硅膠色譜(2％至3％MeOH/二氯甲烷)純化，得到標(biāo)題化合物(0.0017g，46.0％)，為固體。MS(APCI-pos)M+1＝357.4。
實(shí)施例42 7-氯-N-(呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備
將呋喃并[2，3-c]吡啶-3(2H)-酮鹽酸鹽(0.30g，1.75mmol)和1-(4-氨基-1H-吲唑-1-基)乙酮(0.367g，1.75mmol)混懸于MeOH(25mL)中，并將該混合物加熱回流40小時(shí)。反應(yīng)混合物濃縮，殘余物用飽和NaHCO3水溶液處理。得到的固體(0.262g，53％)通過(guò)過(guò)濾收集，用水(～20mL)，二氯甲烷洗滌，并在真空下干燥。MS(APCI-pos)M+1＝285.3，287.2。
實(shí)施例43 7-氯-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯的制備
步驟A2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯-N-氧化物的制備將3-氯過(guò)氧苯甲酸(1.07g，70％wt，4.34mmol)加至2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(1.00g，2.90mmol)于二氯甲烷中的溶液中，并將該混合物在室溫下放置16小時(shí)。粗混合物濃縮，通過(guò)硅膠色譜純化，使用乙酸乙酯，乙酸乙酯/MeOH(20∶1)洗脫，得到標(biāo)題化合物(0.964g，92％)，為黃色固體。MS(APCI-pos)M+1＝362.0。
步驟B7-氯-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯的制備將POCl3(1.47mL，16.0mmol)加至2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯-N-氧化物(0.964g，2.67mmol)于CHCl3(20mL)中的冷(0℃)溶液中。撤去冷浴，將混合物回流16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，然后濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(8∶1)洗脫，得到標(biāo)題化合物(0.548g，54％)，為白色固體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.0(d，J＝4.7Hz，2H)，8.4(d，J＝5.6Hz，1H)，7.6(d，J＝5.6Hz，1H)，9.0(t，J＝4.7Hz，1H)。
實(shí)施例44 7-氯-N-(7-氯-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備
步驟A7-氯-4-(7-氯-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備7-氯-4-(7-氯-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯根據(jù)實(shí)施例15，步驟D中描述的步驟制備，用4-氨基-7-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯代替4-氨基-3-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯，以及用7-氯-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯代替2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯。MS(APCI-pos)M+1＝496.9，498.9。
步驟B7-氯-N-(7-氯-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺的制備7-氯-N-(7-氯-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺根據(jù)實(shí)施例15，步驟E中描述的步驟制備，用7-氯-4-(7-氯-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯代替3-氯-4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯。MS(APCI-pos)M+1＝397.3，399.3。
實(shí)施例45 1-叔丁基3-甲基4-氨基-1H-吲唑-1，3-二羧酸酯的制備
步驟A4-硝基-3-乙烯基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯的制備在-78℃的溫度下，將臭氧鼓泡至4-硝基-3-乙烯基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(3.0g，10.4mmol)于CH2Cl2(50mL)中的溶液中，直到反應(yīng)混合物變藍(lán)為止(約45分鐘)。將PS-三苯基膦(7.1g，15mmol，基于2.16mmol/g負(fù)載)加至反應(yīng)中，將該反應(yīng)溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度。將樹(shù)脂濾除，用CH2Cl2(2X)和MeOH(2X)淋洗。濾液通過(guò)硅膠色譜(使用5％乙酸乙酯/己烷至40％乙酸乙酯/己烷梯度洗脫)純化，得到3-甲?；?4-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯，為固體(642mg，21％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ10.38(s，1H)，8.63(d，J＝8.5Hz，1H)，8.00(d，J＝7.1Hz，1H)，7.73(m，1H)，1.77(s，9H)。
步驟B和C1-叔丁基3-甲基4-硝基-1H-吲唑-1，3-二羧酸酯的制備將3-甲酰基-4-硝基-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(194mg，0.666mmol)和2.0M的2-甲基-2-甲苯的THF溶液(3.33mL，6.66mmol)于t-BuOH(6mL)中的漿液用NaH2PO4·H2O(479mg，3.47mmol)和亞氯酸鈉(工業(yè)級(jí)，234mg，2.07mmol)于水(2mL)中的混合物在室溫下處理。將反應(yīng)在環(huán)境溫度下攪拌4小時(shí)，揮發(fā)物通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去。將殘余物溶于CH2Cl2和水中，混合物用冰AcOH(1mL)中和。收集有機(jī)層并濃縮，得到粗1-(叔丁氧羰基)-4-硝基-1H-吲唑-3-甲酸。將粗酸溶于4∶1THF∶MeOH(10mL)中，加入2.0M TMS-重氮甲烷的己烷溶液(0.5mL，1.0mmol)。30分鐘后，將揮發(fā)物通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去，粗殘余物通過(guò)硅膠色譜(洗脫使用20％乙酸乙酯/己烷)純化，得到1-叔丁基3-甲基4-硝基-1H-吲唑-1，3-二羧酸酯，為固體(149mg，70％，2步)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.61(d，J＝8.6Hz，1H)，8.06(d，J＝7.8Hz，1H)，7.69(m，1H)，4.01(s，3H)，1.72(s，9H)。MS(APCI-neg)M-1＝320.9。
步驟D1-叔丁基3-甲基4-氨基-1H-吲唑-1，3-二羧酸酯的制備將1-叔丁基3-甲基4-硝基-1H-吲唑-1，3-二羧酸酯(149mg，0.46mmol)于MeOH(20mL)中的溶液用10％Pd/C(約100mg)處理，并在Parr振蕩器(40psi H2)中氫化2小時(shí)。反應(yīng)通過(guò)GF/F紙過(guò)濾，濾液通過(guò)硅膠(使用20％乙酸乙酯/己烷洗脫)色譜，得到1-叔丁基3-甲基4-氨基-1H-吲唑-1，3-二羧酸酯(77mg，57％)，為油狀物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46(d，J＝8.7Hz，1H)，7.30(t，J＝8.2Hz，1H)，6.51(d，J＝7.9Hz，1H)，5.81(br s，2H)，4.03(s，3H)，1.73(s，9H)。MS(APCI-neg)M-Boc-1＝190.1。
實(shí)施例46 4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-3-羧酸甲基酯的制備
步驟A1-叔丁基3-甲基4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1，3-二羧酸酯的制備將2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基三氟甲磺酸酯(98mg，0.28mmol)和1-叔丁基3-甲基4-氨基-1H-吲唑-1，3-二羧酸酯(77mg，0.26mmol)的混合物溶于甲苯(5mL)中，并用Ar脫氣15分鐘。將XantPhos(32mg，0.06mmol)，Pd2(dba)3(25mg，0.03mmol)和K3PO4(123mg，0.6mmol)加至該混合物中。將混合物再脫氣15分鐘，加熱至110℃的溫度，持續(xù)13小時(shí)。將反應(yīng)冷卻，用CH2Cl2稀釋，通過(guò)GF/F紙過(guò)濾。濾液通過(guò)硅膠色譜(使用乙酸乙酯洗脫)純化，得到1-叔丁基3-甲基4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1，3-二羧酸酯(19mg，15％)，為油狀物。MS(APCI-neg)M-Boc-1＝385.2。
步驟B4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-3-羧酸甲基酯的制備將1-叔丁基3-甲基4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-1，3-二羧酸酯(19mg，0.04mmol)于CH2Cl2(4mL)中的溶液在環(huán)境溫度下用TFA (2mL)處理。將反應(yīng)攪拌1小時(shí)，將揮發(fā)物在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上除去。將殘余物在飽和NaHCO3水溶液和CH2Cl2之間分配，分離各層。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過(guò)濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，得到4-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基氨基)-1H-吲唑-3-羧酸甲基酯(7mg，46％)，為固體。MS(APCI-pos)M+1＝387.3。
實(shí)施例47 N4-(7-氯-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4，7-二胺
將7-氯-N-(7-氯-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1H-吲唑-4-胺(0.14g，0.35mmol)于二噁烷(4.0mL)和28％氨水溶液(6.0mL)中的混懸液在鋼釜中在170℃下加熱20小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫。將揮發(fā)物通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去，粗殘余物通過(guò)硅膠色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(4∶1)，己烷/乙酸乙酯(2∶1)，己烷/乙酸乙酯(1∶4)洗脫，得到標(biāo)題化合物(10mg，8％)，為固體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.8(m，3H)，8.1(s，1H)，7.5(d，J＝5.6Hz，1H)，7.2(t，J＝4.6Hz，1H)，6.9(d，J＝5.6Hz，1H)，6.8(d，J＝7.8Hz，1H)，6.7(d，J＝7.8Hz，1H)。MS(APCI-pos)M+1＝378.3，380.3。
實(shí)施例48 N-(7-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺
步驟A2，5-二甲基-3-硝基苯胺的制備標(biāo)題化合物按照實(shí)施例32，步驟A和B中的描述制備，用1，4-二甲基-2-硝基苯代替4-氯-1-甲基-2-硝基苯，得到標(biāo)題化合物，為固體。
步驟B2-氯-3，6-二甲基-5-硝基苯胺的制備將2，5-二甲基-3-硝基苯胺(0.415g，2.50mmol)和N-氯琥珀酰亞胺(0.367g，2.75mmol)溶于DMF(30mL)中，并加熱至80℃，持續(xù)1小時(shí)。然后將混合物冷卻至室溫。加入水(100mL)，并將得到的沉淀出的固體通過(guò)過(guò)濾收集，在高真空下干燥。通過(guò)硅膠色譜純化，得到標(biāo)題化合物(0.143g，29％)，為固體。
步驟C7-氯-6-甲基-4-硝基-1H-吲唑的制備標(biāo)題化合物按照實(shí)施例7，步驟C中的描述制備，用2，6-二甲基-3-硝基苯胺代替2-氯-3，6-二甲基-5-硝基苯胺，得到標(biāo)題化合物，為固體。MS(APCI-neg)M-1＝210.2。
步驟D7-氯-6-甲基-4-硝基-1-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑的制備將7-氯-6-甲基-4-硝基-1H-吲唑(0.102g，0.482mmol)溶于THF(4.0mL)中，并冷卻至0℃。加入NaOtBu(0.0556g，0.578mmol)，并將反應(yīng)在0℃下攪拌30分鐘。加入(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(0.102mL，0.578mmol)，并將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝兀掷m(xù)1小時(shí)。將反應(yīng)在乙酸乙酯和水之間分配。分離有機(jī)層，用Na2SO4干燥，濃縮，并通過(guò)SiO2塞過(guò)濾，使用8∶1Hex/EtOAc。產(chǎn)物直接在下一步使用。
步驟E7-氯-6-甲基-1-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-胺的制備標(biāo)題化合物按照實(shí)施例32，步驟D中的描述制備，用7-氯-6-甲基-4-硝基-1-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑代替1-(6-氯-4-硝基-1H-吲唑-1-基)乙酮，得到標(biāo)題化合物，為固體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.96(s，1H)，6.36(s，1H)，6.08(s，2H)，4.10(br s，2H)，3.62-3.64(m，2H)，2.47(s，3H)，0.95-0.99(m，2H)，0.00(s，9H)。
步驟FN-(7-氯-6-甲基-1-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺標(biāo)題化合物按照實(shí)施例15，步驟D中的描述制備，用7-氯-6-甲基-1-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-胺代替4-氨基-3-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯，得到標(biāo)題化合物，為固體。MS(APCI-pos)M+1＝507.2，509.1。
步驟GN-(7-氯-6-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備將7-氯-6-甲基-N-(2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-基)-1-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-胺(0.0066g，0.013mmol)溶于10∶1MeOH/濃HCl(1mL)中，并加熱至50℃，持續(xù)1小時(shí)。將溶液濃縮，通過(guò)硅膠色譜純化，得到標(biāo)題化合物(0.0013g，24％)，為白色固體。MS(APCI-pos)M+1＝377.3。
實(shí)施例49 N-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺
步驟AN-(6-氟-2-甲基-3-硝基苯基)乙酰胺的制備標(biāo)題化合物按照實(shí)施例32，步驟A中的描述制備，用N-(2-氟-6-甲基苯基)乙酰胺代替4-氯-1-甲基-2-硝基苯，得到標(biāo)題化合物，為固體。MS(APCI-neg)M-1＝211.2。
步驟B7-氟-4-硝基-1H-吲唑的制備標(biāo)題化合物按照實(shí)施例7，步驟C中的描述制備，用N-(6-氟-2-甲基-3-硝基苯基)乙酰胺代替2，6-二甲基-3-硝基苯胺，得到標(biāo)題化合物，為固體。MS(APCI-neg)M-1＝180.2。
步驟C7-氟-2-(甲氧基甲基)-4-硝基-2H-吲唑的制備將7-氟-4-硝基-1H-吲唑(0.020g，0.110mmol)溶于THF(3.0mL)中，并冷卻至0℃。加入NaOtBu(0.0127g，0.133mmol)，并將反應(yīng)在0℃下攪拌30分鐘。加入氯(甲氧基)甲烷(0.0101mL，0.133mmol)，并將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，持續(xù)1小時(shí)。將反應(yīng)在乙酸乙酯和水之間分配。分離有機(jī)層，用Na2SO4干燥并濃縮。通過(guò)硅膠色譜純化，得到標(biāo)題化合物(0.011g，44％)，為固體。MS(APCI-neg)M-1＝225.0。
步驟D7-氟-2-(甲氧基甲基)-2H-吲唑-4-胺的制備標(biāo)題化合物按照實(shí)施例32，步驟D中的描述制備，用7-氟-2-(甲氧基甲基)-4-硝基-2H-吲唑代替1-(6-氯-4-硝基-1H-吲唑-1-基)乙酮，得到標(biāo)題化合物，為固體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.07(s，1H)，6.51-6.56(m，1H)，6.28-6.30(m，1H)，5.64(s，2H)，4.17(bs，2H)，3.39(s，3H)。
步驟EN-(7-氟-2H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺標(biāo)題化合物按照實(shí)施例15，步驟D中的描述制備，用7-氟-2-(甲氧基甲基)-2H-吲唑-4-胺代替4-氨基-3-氯-1H-吲唑-1-羧酸叔丁基酯，得到標(biāo)題化合物，為固體。MS(APCI-pos)M+1＝507.2，509.1。
步驟FN-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺的制備將N-(7-氟-2-(甲氧基甲基)-2H-吲唑-4-基)-2-(嘧啶-2-基)呋喃并[2，3-c]吡啶-3-胺(0.0125g，0.03202mmol)溶于6N HCl(2mL)中，并加熱至60℃，持續(xù)30分鐘。將反應(yīng)在乙酸乙酯和飽和NaHCO3水溶液之間分配。分離有機(jī)層，用水洗滌，Na2SO4干燥并濃縮。MS(APCI-pos)M+1＝347.3。
本發(fā)明與示例性的實(shí)施方案一起描述，應(yīng)當(dāng)理解的是，它們并不是將本發(fā)明限制在那些實(shí)施方案中。相反，本發(fā)明意欲包括所有的變化，改良和等價(jià)形式，其如權(quán)利要求所定義的那樣包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。因此，認(rèn)為前述說(shuō)明書(shū)僅用于示例性的說(shuō)明本發(fā)明的原理。
在本說(shuō)明書(shū)和所附權(quán)利要去中使用的詞″包含″、″包括″為意欲指出已述特征、組成、部分或步驟的存在，但是它們不排除一種或多種其它特征、組成、部分、步驟或基團(tuán)的存在或加入。
權(quán)利要求
1.化合物，其選自式I的化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽，其中
R1選自H、F、Cl、Br、I、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb、-C(＝O)NRbRc、NRbRc、C1-C6烷基、C5-C8芳基、C3-C8碳環(huán)、5-8元雜環(huán)基和5-8元雜芳基，其中所述烷基、芳基、碳環(huán)、雜環(huán)基和雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、Cl、Br、I、Rd、-ORd、-COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和-NRdRe的基團(tuán)所取代；
R2選自H、F、Cl、Br、I、任選取代的C1-C6烷基和-(X)Rf，其中X為O、NH或C(＝O)，且其中該烷基被一個(gè)或多個(gè)選自-ORg、-COORg、-C(＝O)NRgRh和-NRgRh的基團(tuán)所取代；
R3為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、CF3、NH2和C1-C6烷基的取代基；
R4選自H、F、Cl、Br、I、-NRiRj和-ORi；
Ra選自H、F、Cl、Br、I和C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代；
Rb和Rc選自H、C1-C6烷基和-(CRkRl)t-雜芳基，其中該雜芳基為5-8元環(huán)，且該烷基或雜芳基任選被-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代，或
Rb和Rc與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代；
Rd和Re獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代，或
Rd和Re與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代；
Rf選自H、C1-C4烷基、ORm和-NRmRn，其中該烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自-ORm、-COORm、-C(＝O)NRmRn和-NRmRn的基團(tuán)所取代；
Rg和Rh獨(dú)立地選自H、C1-C6烷基或5-8元雜環(huán)基，其中該烷基或雜環(huán)基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)nNRmRn或-(CRkRl)tORm取代；
Ri和Rj為H、C1-C6烷基、-C(＝O)Rm、-C(＝O)ORm、-S(O)2NRmRn，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代；
Rk和Rl獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基；
Rm和Rn為H或C1-C6烷基，或
Rm和Rn與其相連的原子一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)或雜芳基任選被F、Cl、Br、I或C1-C6烷基取代；且
t為0、1、2、3或4。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R3為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、CF3和C1-C6烷基的取代基。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中R4為H。
4.權(quán)利要求1或2的化合物，其中R4為Cl。
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中R3為H。
6.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中R3為Cl。
7.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中R3為F。
8.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中R3為C1-C6烷基。
9.權(quán)利要求1-4或8中任一項(xiàng)的化合物，其中R3為甲基。
10.權(quán)利要求1或3-4中任一項(xiàng)的化合物，其中R3為NH2。
11.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中一個(gè)R3為甲基且另一個(gè)R3為Cl。
12.權(quán)利要求的化合物11，其中6位R3為甲基且7位R3為Cl。
13.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物，其中R1為5-8元雜環(huán)基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自Rd、-ORd、-COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和NRcRd的基團(tuán)所取代。
14.權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的化合物，其中R1為6元雜環(huán)基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、Cl、Br、I、Rd、-ORd、-COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和NRcRd的基團(tuán)所取代。
15.權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)的化合物，其中R1選自下列結(jié)構(gòu)
16.權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的化合物，其中R1為5元雜環(huán)基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、C1、Br、I、Rd、-ORd、-COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和NRcRd的基團(tuán)所取代。
17.權(quán)利要求16的化合物，其中R1選自下列結(jié)構(gòu)
18.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物，其中R1為-C(＝O)NRbRc。
19.權(quán)利要求18的化合物，其中R1選自下列結(jié)構(gòu)
20.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物，其中R1為H。
21.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物，其中R1為-C(＝O)ORb。
22.權(quán)利要求21的化合物，其中R1為-C(＝O)OEt。
23.權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)的化合物，其中R2為H。
24.權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)的化合物，其中R2為Cl。
25.權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)的化合物，其中R2為C1-C6烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)Rg、COORg、-C(＝O)NRgRh和NRgRh的基團(tuán)所取代。
26.權(quán)利要求25的化合物，其中R2為乙基。
27.權(quán)利要求25的化合物，其中R2為被COORg取代的乙基。
28.權(quán)利要求25或27的化合物，其中R2為-CH2CH3C(＝O)OH。
29.權(quán)利要求25的化合物，其中R2為被ORg或NRgRh取代的丙基。
30.權(quán)利要求25或29的化合物，其中R2為-CH2CH2CH2OH、-CH2CH2CH2NH2、-CH2CH2CH2NHCH3或-CH2CH2CH2N(CH3)2。
31.權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)的化合物，其中R2為-(X)Rf。
32.權(quán)利要求31的化合物，其中X為C(＝O)。
33.權(quán)利要求31或32的化合物，其中Rt為ORm。
34.權(quán)利要求31-33中任一項(xiàng)的化合物，其中R2為C(＝O)OCH3。
35.化合物，其選自式IIa的化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽，其中
R1選自H、F、Cl、Br、I、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb、-C(＝O)NRbRc、NRbRc、C1-C6烷基、C5-C8芳基、C3-C8碳環(huán)、5-8元雜環(huán)基和5-8元雜芳基，其中所述烷基、芳基、碳環(huán)、雜環(huán)基和雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、Cl、Br、I、Rd、-ORd、-COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和-NRdRe的基團(tuán)所取代；
R3為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、CF3、NH2和C1-C6烷基的取代基；
R4選自H、F、Cl、Br、I、-NRiRj和-ORi；
Ra選自H、F、Cl、Br、I和C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代；
Rb和Rc選自H、C1-C6烷基和-(CRkRl)t-雜芳基，其中該雜芳基為5-8元環(huán)，且該烷基或雜芳基任選被-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代，或
Rb和Rc與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代；
Rd和Re獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代，或
Rd和Rc與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代；
Ri和Rj為H、C1-C6烷基、-C(＝O)Rm、-C(＝O)ORm、-S(O)2NRmRn，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代；
Rk和Rl獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基；
Rm和Rn為H、F、Cl、Br、I、OH、C(＝O)OH或C1-C6烷基，或
Rm和Rn與其相連的原子一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)或雜芳基任選被F、Cl、Br、I或C1-C6烷基取代；且
t為0、1、2、3或4。
36.權(quán)利要求35的化合物，其具有式II
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽。
37.化合物，其選自式IIIa的化合物
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽，其中
R1選自H、F、Cl、Br、I、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb、-C(＝O)NRbRc、NRbRc、C1-C6烷基、C5-C8芳基、C3-C8碳環(huán)、5-8元雜環(huán)基和5-8元雜芳基，其中所述烷基、芳基、碳環(huán)、雜環(huán)基和雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)選自F、Cl、Br、I、Rd、-ORd、-COORd、-C(＝O)NRdRe、-N(Rd)C(＝O)Re和-NRdRe的基團(tuán)所取代；
R3為1-3個(gè)獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、CF3、NH2和C1-C6烷基的取代基；
R4選自H、F、Cl、Br、I、-NRiRj和-ORi；
Ra選自H、F、Cl、Br、I和C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代；
Rb和Rc選自H、C1-C6烷基和-(CRkRl)t-雜芳基，其中該雜芳基為5-8元環(huán)，且該烷基或雜芳基任選被-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代，或
Rb和Rc與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代；
Rd和Re獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代，或
Rd和Re與其相連的氮一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)或雜芳基任選被C1-C6烷基、-(CRkRl)tNRmRn或-(CRkRl)tORm取代；
Ri和Rj為H、C1-C6烷基、-C(＝O)Rm、-C(＝O)ORm、-S(O)2NRmRn，其中該烷基任選被-NRmRn或-ORm取代；
Rk和Rl獨(dú)立地選自H或C1-C6烷基；
Rm和Rn為H、F、Cl、Br、I、OH、C(＝O)OH或C1-C6烷基，或
Rm和Rn與其相連的原子一起形成任選取代的5-8元雜環(huán)或5-8元雜芳基，其中該雜環(huán)或雜芳基任選被F、Cl、Br、I或C1-C6烷基取代；且
t為0、1、2、3或4。
38.權(quán)利要求37的化合物，其具有式III
及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽。
39.預(yù)防或治療由Raf激酶調(diào)節(jié)的疾病或障礙的方法，該方法包括向有此治療需要的哺乳動(dòng)物給藥有效量的權(quán)利要求1-38的化合物。
40.預(yù)防或治療癌癥的方法，該方法包括向有此治療需要的哺乳動(dòng)物單獨(dú)給藥有效量的權(quán)利要求1-38的化合物，或與一種或多種其它具有抗癌性質(zhì)的化合物組合給藥。
41.治療哺乳動(dòng)物的過(guò)度增殖性疾病方法，該方法包括向該哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的權(quán)利要求1-38的化合物。
42.權(quán)利要求1-38的化合物在制備用于治療過(guò)度增殖性疾病的藥物中的用途。
43.藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-38的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
44.制備式5化合物的方法
其中R為H、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基，其包括
(a)將式1的取代的2-硝基甲苯
與硝化劑反應(yīng)，得到式2的取代的2，6-二硝基甲苯
(b)選擇性還原式2的取代的2，6-二硝基甲苯，得到式3的氨基甲苯
(c)將式3的氨基甲苯轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式4的硝基吲唑
(d)還原式4的硝基吲唑，得到式5的6-取代的吲唑。
全文摘要
本文公開(kāi)了式(I)、(IIA)和(IIIA)的化合物，其用于抑制Raf激酶以及用于治療由其介導(dǎo)的疾病。使用式(I)、(IIA)和(IIIA)的化合物及其立體異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽，用于體外、原位和體內(nèi)診斷、預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物細(xì)胞的此類疾病，或相關(guān)的病理狀態(tài)的方法。
文檔編號(hào)A61P35/00GK101553492SQ200780040767
公開(kāi)日2009年10月7日 申請(qǐng)日期2007年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月31日
發(fā)明者亞歷山大·J·巴克梅爾特, 約瑟夫·P·萊西卡托斯, 格雷格·米克尼斯, 力 任, 史蒂文·M·溫格洛夫斯基, 布賴森·拉斯特 申請(qǐng)人:陣列生物制藥公司