專利名稱：：口服降血糖紅薯葉單方中藥及其制備方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種治療內分泌一代謝系統(tǒng)非胰島素依賴性糖尿病(NIDDM，即II型)的藥物，并預防其并發(fā)癥的非合成降糖藥，它是以植物為原料制備的。
背景技術：
：糖尿病己繼腫瘤、心腦血管疾病之后成為第三位危害人類健康的慢性非傳染性疾病。世界衛(wèi)生組織及國際糖尿病聯(lián)盟資料表明預計到2025年全世界糖尿病患者總人數(shù)將達到3.33億，而根據(jù)我國公布的19省市糖尿病普査結果顯示隨著人群平均壽命延長，經(jīng)濟收入的增加和生活方式的改變(如多食少動、精神緊張、吸煙飲酒等)，糖尿病人總數(shù)將以每年至少100萬的數(shù)量增加，其中NIDDM占全部患者的90%以上。目前,常用的口服降糖藥以磺酰脲類(D860、優(yōu)降糖、達美康、美必達、糖適平、糖腎平等)、雙胍類(苯乙雙胍、二甲雙胍等)、a-葡糖苷酶抑制劑(拜糖平)和胰島素增敏劑(噻唑烷二酮類)等西藥為主，這些藥物長期使用或效果不佳，或有較嚴重的副作用，對肝腎都會造成很大損害，還會造成低血糖反應的發(fā)生，甚至危及生命。胰島素是治療糖尿病的特效藥物，但胰島素久用會產生抗體，導致生物活性降低，劑量增加，產生高胰島素血癥，促使微血管發(fā)生病變。而中醫(yī)藥從辨病辨證論治的角度出發(fā)，根據(jù)N1DDM的病證特點，從整體水平上加以綜合調理，可以使NIDDM癥狀減輕并延緩糖尿病并發(fā)癥的出現(xiàn)。因此，從天然藥物中篩選和研究降糖藥，已為世界各國醫(yī)務工作者所矚目。紅薯是傳統(tǒng)的農作物，廣泛種植在世界各國。紅薯葉是其副產品，研究表明，它具有增強免疫能力、促進新陳代謝、延緩衰老、通便利尿的作用，對于預防動脈硬化和各種腫瘤，防止細胞癌變，保護視力等，都有良好的保健功能和醫(yī)療效果。黃酮是紅薯葉的有效成分之一，紅薯葉黃酮治療糖尿病的生物活性研究目前尚未見報道
發(fā)明內容本發(fā)明的目的在于提供一種紅薯葉單方口服降血糖中藥及其制備方法，所述紅薯葉單方口服降血糖中藥為紅薯葉的提取物，紅薯葉經(jīng)適當?shù)墓に囂幚淼玫降奶崛∥铮蔀榉且葝u素依賴型糖尿病患者提供了一種非合成的天然降糖藥，其功能明確、作用持久、無毒副作用。紅薯葉提取物的制備(1)將紅薯葉干燥后粉碎，力卩812倍體積70%的乙醇，507(TC回流提取3次，合并濾液；(2)利用旋轉蒸發(fā)儀減壓濃縮；(3)稀釋液上D101大孔吸附樹脂柱；(4)分別用蒸餾水、1020%和4060%乙醇洗脫；(5)濃縮洗脫液后用乙酸乙酯萃取3次；(6)真空干燥，獲得紅薯葉提取物。具體實施方式-以下通過實驗來進一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果，這些實驗包括了本發(fā)明藥物的藥效學實驗和臨床療效觀察實驗。實驗通過對本發(fā)明的藥物進行藥理學研究，觀察其對小鼠血糖及血脂的影響。1.實驗材料l.l動物清潔級雄性Wistar大鼠，均為50-60天年齡，體重240-250g，由協(xié)和醫(yī)院動物研究所提供。自由飲用自來水，清潔級動物飼養(yǎng)房，溫濕度適宜，光照8-10h/d。1.2試劑紅薯葉，秋季采自河北，經(jīng)植物專家對照鑒定為紅薯葉；鏈脲佐菌素，美國Sigma公司產品；TC、TG、LDL-C、HDL-C、SOD、MDA、試劑盒均為南京建成生物工程研究所產品。2.實驗方法2.1非胰島素依賴型糖尿病大鼠模型的構建Wistar大鼠予以高糖高熱量飲食(10%蔗糖，10%豬油，1%膽固醇)至4周后用0.25MSTZ(溶于0.1mol/L、PH4.2檸檬酸緩沖液，現(xiàn)用現(xiàn)配)以50mg/kg劑量一次性腹腔注射1.5ml.其后自由進普通詞料，飲自來水，72h后測空腹血糖。血糖》16.7mmo1/l視為建模成功的糖尿病大鼠。2.2紅薯葉總黃酮的制備(1)將紅薯葉干燥后粉碎，加10倍體積70%的乙醇，6(TC回流提取3次，合并濾液；(2)利用旋轉蒸發(fā)儀減壓濃縮；(3)稀釋液上D101大孔吸附樹脂柱；(4)分別用蒸餾水、20%和60%乙醇洗脫；(5)濃縮洗脫液后用乙酸乙酯萃取3次；(6)真空干燥，獲得紅薯葉提取物。2.3實驗分組將40只Wistar大鼠隨機分為正常對照組(8只)、造模組(32只)。成模后的大鼠隨機分為模型對照組、紅薯葉黃酮組(100mg/kg)和羅格列酮組(3mg/kg)，各8只。灌胃4周。2.4血糖測定利用日本京都血糖測試儀和試紙檢測。2.5急性毒理實驗采用最大濃度最大體積(40mL/kg)—次性灌胃昆明小鼠(19-21g)，連續(xù)觀察7d，記錄受試小鼠的行為、活動、攝食量、體重、糞便和死亡等情況，未死亡的小鼠于l周后處死進行尸檢。2.6血脂測定禁食12h后，從眼眶取血2ml，取出后立即2000r/min，4°C，離心10min，獲得血清用來測定血清膽固醇、三脂酰甘油、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白水平，利用試劑盒，在OLYMPUS生化分析儀上測定。用分光光度法測總抗氧化能力和丙二醛(MDA);用黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶(SOD)活力。所有操作嚴格按說明書進行。2.7血清胰島素(Ins)測定利用酶聯(lián)免疫法檢測胰島素，按試劑盒說明書操作。2.8糖耐量的測定口服糖耐量實驗在紅薯葉黃酮處理后的第15天和第30天進行。大鼠禁食2小時后按2g/kg體重灌胃葡萄糖，尾靜脈采血分別測定0min，30min，60min，90min和120min血糖。3本發(fā)明的實驗結果3.1急性毒理試驗結果20只小鼠給藥當天毛色光滑，活動、飲食、糞便色澤與質地均正常，觀察紅薯葉黃酮24h灌胃后產生的急性毒性和死亡情況。給小鼠灌胃，使藥物達到最大濃度(溶液已經(jīng)非常濃，很難再對其進行濃縮)，l周內無死亡及其它異?，F(xiàn)象發(fā)生。處死后進行尸檢，各主要臟器(心、肝、脾、肺、腎)經(jīng)肉眼觀察未見明顯異常改變。說明紅薯葉黃酮實際無毒較安全。3.2紅薯葉黃酮對NIDDM大鼠體重的影響建模前，各組大鼠體重沒有統(tǒng)計學差異。紅薯葉黃酮處理4周后，大鼠體重比模型對照組明顯降低(PO.05).結果表明紅薯葉黃酮具有降低糖尿病肥胖鼠體重的作用。表1紅薯葉黃酮對NIDDM大鼠體重的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>與正常對照組相比，※PO.01;;與模型對照組相比，AP<0.05F舊L:紅薯葉黃酮；NIDDM:非胰島素依賴型糖尿病3.3紅薯葉黃酮對NIDDM大鼠糖耐量、FINS和ISI的影響紅薯葉黃酮處理4周后，尾靜脈采血分別測定Omin,30min，60min和120min時的血糖和胰島素水平。模型組大鼠血糖水平在給予葡萄糖后30min達到高峰，盡管此后血糖水平開始下降，但是120min后仍然很高。紅薯葉黃酮處理組與模型對照組比較，60min后血糖水平降低，并且在120min時，血糖接近正常水平，并且，胰島素敏感指數(shù)顯著增加。以上結果表明，紅薯葉黃酮能改善非胰島素依賴型糖尿病大鼠胰島素抵抗狀態(tài)和不正常的糖耐量水平。表2紅薯葉黃酮對NIDDM大鼠口服糖耐量的影響(i±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>正常對照818.29±4.08-4.45±0.2118.97±3.01-4.46±0.24模型對照831.23士3.25※-5.26±0.16》29.65土3.21※國5.23土0.17※羅格列酮(3mg/kg)830.55士3.79※國5.18土0.13※23.14士2.12※,-4.72±0.11畫F舊L(100mg/kg)830.36土2.61※.5.23土0.16※24.25±2.28《A-4.93±0.14*與正常對照組相比，，※PO.01;與模型對照組相比，Ap<0.05，"p<0.01F舊L:紅薯葉黃酮；舊l:胰島素敏感指數(shù)；FINS空腹血清胰島素；NIDDM:非胰島素依賴型糖尿病3.4紅薯葉黃酮對NIDDM大鼠血脂的影響紅薯葉黃酮處理4周后，與模型對照組比較，高密度脂蛋白含量有所增加，但沒有統(tǒng)計學差異(P>0.05);總膽固醇、甘油三脂和低密度脂蛋白水平顯著降低，分別降低26.48%(PO.Ol)、14.07%(P<0.01)禾t]40.82%(PO.Ol)。上述結果表明，紅薯葉黃酮對非胰島素依賴型糖尿病大鼠具有明顯的降脂作用。表4紅薯葉黃酮對NIDDM大鼠TC,TGHDL-C和LDL-C水平的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與正常對照組相比，《P<0.05，"<0.01;與模型對照組相比，"PO.01F舊L:紅薯葉黃酮；TC:膽固醇；TG:甘油三脂；HDLC:高密度脂蛋白；LDL-C:低密度脂蛋白；NIDDM:非胰島素依賴型糖尿病3.5紅薯葉黃酮對NIDDM大鼠SOD和MDA的影響紅薯葉黃酮處理4周，與模型對照組比，SOD含量增加17.67%(PO.Ol)，而MDA含量顯著降低38.69%(PO.Ol)。此結果表明紅薯葉黃酮有很好的抗氧化性。表5紅薯葉黃酮對NIDDM大鼠SOD和MDA水平的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>正常對照組相比，《P<0.05,AP<0.01;與模型對照組相比，"PO.01F舊L:紅薯葉黃酮；SOD:超氧化物歧化酶；MDA:丙二醛；NIDDM:非胰島素依賴型糖尿病4.討論本動物實驗經(jīng)重復實驗證明效果可靠，同時該動物停藥后三個月，再測血糖，血糖仍維持在正常水平，精神狀態(tài)很好。本研究中非胰島素依賴型糖尿病模型大鼠血糖、血脂和脂質過氧化水平升高，而紅薯葉黃酮處理組血糖、血脂和脂質過氧化水平降低，抗氧化酶含量增加。說明該藥物可用于非胰島素依賴型糖尿病的治療。此外，本發(fā)明可根據(jù)實際情況制備成膠囊劑、散劑、顆粒劑或片劑提供臨床應用，在制備上述制劑時可加入適量淀粉或其它輔料作為添加劑。權利要求1.一種口服降血糖紅薯葉單方中藥，其特征是所述單方口服降血糖中藥為紅薯葉的提取物，所述紅薯葉的提取物含有紅薯葉總黃酮成分；上述提取物具有降血糖、降血脂等新的醫(yī)藥用途。2.—種制備權利要求l所述的紅薯葉單方口服降血糖中藥的方法，其特征是紅薯葉提取物的制備是-(1)將紅薯葉干燥后粉碎，力[]812倍體積70。％的乙醇，507(TC回流提取3次，合并濾液；(2)利用旋轉蒸發(fā)儀減壓濃縮；(3)稀釋液上D101大孔吸附樹脂柱；(4)分別用蒸餾水、1020%和4060%乙醇洗脫；(5)濃縮洗脫液后用乙酸乙酯萃取3次；(6)真空干燥，紅薯葉提取物。3.根據(jù)權利要求2所述的口服降血糖紅薯葉單方中藥的方法，其特征是:上述提取物可制備成膠囊劑、散劑、顆粒劑或片劑在臨床應用。4.根據(jù)權利要求3所述的口服降血糖紅薯葉單方中藥的方法，其特征是:可加入適量淀粉或其它輔料作為添加劑。全文摘要本發(fā)明公開一種紅薯葉單方口服降血糖中藥及其制備方法，它是從植物紅薯的葉中經(jīng)乙醇回流、提取、濃縮得乙醇浸膏，浸膏經(jīng)大孔吸附樹脂吸附后分別用蒸餾水、10-20％和40-60％乙醇洗脫，濃縮洗脫液后再用乙酸乙酯萃取，回收萃取液，濃縮得浸膏，浸膏經(jīng)干燥獲得其有效成分--紅薯葉黃酮。經(jīng)藥理實驗證明，它具有降低血糖的功效，其作用持久，無毒副作用。可用于治療II型糖尿病及其引起的并發(fā)癥，為非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM)患者提供了一種天然的降血糖藥物。文檔編號A61K36/39GK101167781SQ20071018523公開日2008年4月30日申請日期2007年11月9日優(yōu)先權日2007年11月9日發(fā)明者磊劉,李青旺,蕊趙,高大威申請人:燕山大學