專利名稱：：一種用大米分離蛋白制備降血壓肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于食品加工技術(shù)或制藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及功能性食品加工技術(shù)，特別是用大米分離蛋白制備降血壓肽的方法。
背景技術(shù)：
：ACE抑制劑是降血壓藥物中發(fā)展最快的一種，但是合成的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶具有不良反應(yīng)，如引發(fā)蛋白尿和白細(xì)胞減少等，另外，在停藥后易引起"停藥綜合癥"，嚴(yán)重威脅患者的生命安全。來源于食物蛋白質(zhì)的降血壓肽完全可以克服藥物治療中出現(xiàn)的種種副作用，它只對高血壓患者起到降壓作用，對血壓正常者卻無降壓作用；這些肽是經(jīng)酶在溫和條件下水解獲得，安全性高，同時它還有免疫調(diào)節(jié)等其他作用。因此，開發(fā)天然降血壓肽產(chǎn)品將成為非藥物治療中的重要組成部分。目前已有研究發(fā)現(xiàn)大豆蛋白、膠原蛋白和酪蛋白等蛋白質(zhì)經(jīng)堿性蛋白酶水解后的產(chǎn)物具有ACE抑制活性，并通過離子交換色譜、高效液相色譜等分析了部分有抑制活性的組分。這些研究選擇的原料多為動物蛋白質(zhì)，且分離方法或者成本太高，或者肽中灰分含量較高而影響其活性等，不適合大規(guī)模生產(chǎn)。利用堿性蛋白酶水解大米分離蛋白生產(chǎn)降血壓肽國內(nèi)外目前還未見報道。為了克服上述方法的不足，本發(fā)明利用來源廣泛的碎米或米渣為原料，分離提取碎米或米渣中的蛋白質(zhì)，利用堿性蛋白酶水解大米分離蛋白，水解產(chǎn)物經(jīng)大孔吸附樹脂脫鹽后，獲得具有ACE抑制活性的小分子肽。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目前可通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)。將重量百分比濃度為5-15%(W/W)的大米分離蛋白溶液，用堿性蛋白酶水解，水解的工藝條件為pH值為8-10、反應(yīng)溫度40-50°C、加酶量O.5-2%、反應(yīng)時間120-180min,攪拌酶解。然后經(jīng)大孔吸附樹脂脫鹽，經(jīng)脫鹽后的小分子肽再經(jīng)濃縮或干燥，進(jìn)一步制成液態(tài)或固態(tài)制劑。具體地來說，本發(fā)明工藝包括3個主要步驟，即大米分離蛋白的制備—酶解大米分離蛋白—脫鹽精制，其中脫鹽精制選擇大孔吸附樹脂。具體的制備方法將分離得到的大米分離蛋白配制成濃度為5-15%的溶液，調(diào)節(jié)pH值為8-10,石咸性蛋白酶的添加量為0.5-2%。40-50。C水解120-1801^11后，離心分離。上清液經(jīng)濃縮后經(jīng)大孔吸附樹脂脫鹽精制，樹脂為NKA,用40-80%的酒精洗脫。洗脫液經(jīng)濃縮回收酒精后，進(jìn)行噴霧或冷凍干燥，即可獲得具有ACE抑制活性的大米降血壓肽制口P。本發(fā)明具有的優(yōu)點1.提供了一種制備降血壓肽的新方法本發(fā)明制品具有生理功能，對ACE具有極強的抑制活性。同其他生物活性肽一樣，具有直接、快速、主動、完整吸收的特點，特別是對高血壓等心血管疾病有療效。本發(fā)明的制成品可作為功能食品、食品、食品添加劑、藥物增效劑等。2.工藝科學(xué)合理、簡單易行3.原料來源廣泛本發(fā)明所選擇的原料來源廣泛，資源豐富，使本發(fā)明具有較強的適用性。具體實施方式實施例1采用廣西南寧龐博生物工程有限公司提供的堿性蛋白酶(酶活力為150萬U/g)，工藝條件為大米分離蛋白濃度15%，pH值為8，反應(yīng)溫度5(TC，加酶量1%,反應(yīng)時間12Omin。測定大米降血壓肽制品對ACE的抑制率和濃度，計算ICw,以及灰分等其他指標(biāo)見表l。表l大米降血壓肽制品主要理化指標(biāo)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實施例2采用無錫杰能科生物工程有限公司提供的堿性蛋白酶(酶活力為60萬U/g)，工藝條件為大米分離蛋白濃度10%，pH值為9.5,反應(yīng)溫度40°C,加酶量2%,反應(yīng)時間18Omin。測定大米降血壓肽制品對ACE的抑制率和濃度，計算IC5。，以及灰分等其他指標(biāo)見表2。表2大米降血壓肽制品主要理化指標(biāo)項目指標(biāo)IC5。/(mg/mL)1.35灰分(以干基計)/%6.5可溶性氮(以干基計)/%88.2肽(以干基計)/%77.6pH(10%水溶液)6.9實施例3采用諾維信(中國)生物技術(shù)有限公司提供的堿性蛋白酶(酶活力為2.4AU/g),工藝條件為大米分離蛋白濃度10%，pH值為8.5,反應(yīng)溫度45。C，加酶量1°/。，反應(yīng)時間150min。測定大米降血壓肽制品對ACE的抑制率和濃度，計算IC5。，以及灰分等其他指標(biāo)見表3。表3大米P爭血壓肽制品主要理化指標(biāo)項目指才示IC5。/(mg/mL)0.5灰分(以干基計)/%3.0可溶性氮(以干基計)/%92,4肽(以干基計)/%81.2pH(10%水溶液)7.0權(quán)利要求1.一種用大米蛋白制備降血壓肽的方法，其特征在于將重量百分比濃度為5-15％(W/W)的大米分離蛋白溶液，用堿性蛋白酶水解，水解的工藝條件為pH值為8-10、反應(yīng)溫度40-50℃、加酶量0.5-2％、反應(yīng)時間120-180min，攪拌酶解。然后經(jīng)大孔吸附樹脂脫鹽，制得具有ACE抑制活性的小分子肽。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大米分離蛋白制備P爭血壓肽的方法，其特征在于經(jīng)脫鹽后的小分子肽再經(jīng)濃縮或干燥，進(jìn)一步制成液態(tài)或固態(tài)制劑。全文摘要本發(fā)明公開了一種用大米分離蛋白制備降血壓肽的方法，其技術(shù)要點是將重量百分比濃度為5-15％(W/W)的大米分離蛋白溶液，用堿性蛋白酶水解，水解的工藝條件為pH值為8-10、反應(yīng)溫度40-50℃、加酶量1-2％、反應(yīng)時間120-180min，攪拌酶解。然后經(jīng)大孔吸附樹脂脫鹽，樹脂為NKA，用40-80％的酒精洗脫。經(jīng)脫鹽后的小分子肽再經(jīng)濃縮或干燥，制得具有血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制活性的小分子肽。本發(fā)明所具有的特點提供了一種制備降壓肽的新方法；工藝科學(xué)合理、簡單易行；原料來源廣泛。文檔編號A61P9/00GK101126105SQ20071005257公開日2008年2月20日申請日期2007年6月28日優(yōu)先權(quán)日2007年6月28日發(fā)明者英劉,楊國燕,陳季旺申請人:武漢工業(yè)學(xué)院