專利名稱：：用于藥物重構(gòu)或稀釋的氯化鈉溶液的制作方法用于藥物重構(gòu)或稀釋的氯化鈉溶液本申請要求于2005年11月1日提交的美國序列號60/732,221的優(yōu)先權(quán)，將其全部內(nèi)容在此引入作為參考。文中引用的所有專利、專利申請以及出版物以其全部內(nèi)容在此引入作以更加完整地描述直至本文所描述和要求保護(hù)的本發(fā)明之日本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的本領(lǐng)域的狀況。本專利文件的一部分公開內(nèi)容中含有受著作權(quán)保護(hù)的材料。著作權(quán)擁有人不反對任何人對該專利文件或?qū)＠_內(nèi)容進(jìn)行摹寫復(fù)制(facsimilereproduction),因為它出現(xiàn)于專利商標(biāo)局專利檔案或記錄內(nèi)，但在其它方面則保留所有的著作權(quán)。
背景技術(shù)：
：當(dāng)全血與藥物溶液混合時，例如在給藥可靜脈內(nèi)(IV)注射藥物期間、在靜脈管路內(nèi)，如果藥物溶液不含有足夠的離子強(qiáng)度，可能會發(fā)生紅細(xì)胞疊聯(lián)(rouleaux)或紅細(xì)胞聚集(也稱為紅細(xì)胞凝集)。例如，在使用5%右旋糖水溶液(一種常用大體積注射液)和許多具有低離子強(qiáng)度的藥品(pharmaceuticalproducts)時，會發(fā)生紅細(xì)胞聚集。經(jīng)常將藥品冷凍干燥，因此在腸胃外注射前，需要使用溶液進(jìn)行重構(gòu)(reconstituted)。然而，當(dāng)將凍干產(chǎn)品用低離子強(qiáng)度的溶液重構(gòu)時，所得到的制劑也可能引起紅細(xì)胞聚集。盡管相對于無菌注射用水，使用生理鹽水溶液(0.9%NaCl)重構(gòu)凍干塊(lyophilizedcake)會提供額外的離子強(qiáng)度，但是得到的藥物溶液可能是高滲的，并且在注射時可能會有不希望的副作用。因此，仍需要如下所述的溶液，其用于重構(gòu)凍干塊或稀釋藥物溶液，以提供注射用制劑，該制劑與血漿等滲并且具有足夠的離子強(qiáng)度，因此它不會引起紅細(xì)胞聚集。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供以下發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞凝集是由與血液接觸的低離子強(qiáng)度溶液所造成的。因此，當(dāng)藥物制劑是通過在低離子強(qiáng)度溶液(例如5%右旋糖、3%葡聚糖或sWFI(無菌注射用水))中重構(gòu)或稀釋而制備以供靜脈注射時，所得到的制劑可能具有與血液大約等滲的所必需的同滲容摩(osmolarity),但它們通常不具有足以防止凝集的離子強(qiáng)度。另一方面，當(dāng)藥物制劑是通過使用高離子強(qiáng)度溶液[例如鹽水溶液(0.9。/。NaCl或154mMNaCl)重構(gòu)或稀釋而制備以供靜脈內(nèi)注射時，所得到的制劑可能具有可防止凝集的足夠的離子強(qiáng)度，但它可能具有對于血液而言為高滲的同滲容摩，因而，如果重復(fù)注射是頻繁的或長期的話，會造成紅細(xì)胞(RBCs)脫水、靜脈發(fā)炎和/或可能引起血栓性靜脈炎。一方面，本發(fā)明提供配制用于靜脈內(nèi)注射的藥物制劑方法，該方法包括將約25mM至約150mM的氯化鈉溶液加至藥物制劑中，從而得到配制的用于靜脈內(nèi)注射的制劑，其中該配制的制劑對于血漿而言大約是等滲的，或者對于血漿而言是稍微低滲的或稍微高滲的，并且該配制的制劑具有可防止紅細(xì)胞凝集(或紅細(xì)胞聚集)的足夠的離子強(qiáng)度。例如，當(dāng)配制的制劑具有約270mOsm/L至約330mOsm/L的同滲容摩時，它對于血漿而言大約是等滲的。例如，當(dāng)配制的制劑具有約220mOsm/L至約270mOsm/L的同滲容摩時，它對于血漿而言是稍微低滲的。例如，當(dāng)配制的制劑具有約330mOsm/L至約600mOsm/L的同滲容摩時，它對于血漿而言是稍微高滲的。在一個方面，當(dāng)配制的制劑具有例如至少約25mEq/L的Na+和Cl一離子時，它具有足以防止紅細(xì)胞凝集的離子強(qiáng)度。在另一個方面，當(dāng)配制的制劑具有例如在少約40mEq/L的Na+和Cl—離子時，它具有足以防止紅細(xì)胞凝集的離子強(qiáng)度。在另一個方面，當(dāng)配制的制劑具有例如至少約40mEq/L的Na+和C廠離子且低于約150mEq/L的Na+和C「離子時，它具有足以防止紅細(xì)胞凝集的離子強(qiáng)度。在另一個方面，當(dāng)配制的制劑具有例如以導(dǎo)電率測定的至少為約2.5mS/cm的離子強(qiáng)度時，它具有足以防止紅細(xì)胞凝集的離子強(qiáng)度。在另一個方面，當(dāng)配制的制劑具有例如以導(dǎo)電率測定至少為約4.0mS/cm的離子強(qiáng)度時，它具有足以防止紅細(xì)胞凝集的離子強(qiáng)度。配制的用于注射的該藥物制劑可以是例如非液體制劑或溶液制劑。因此，非液體制劑可用氯化鈉濃度為約25-150mM、25-100mM、25-80mM、25-40mM、25-35mM、25-30mM或約40mM的氯化鈉溶液重構(gòu)為溶液。因此，液體或溶液制劑可用氯化鈉濃度為約25-150mM、25-100mM、25-80mM、25-40mM、25-35mM、25-30mM或約40mM的氯化鈉溶液稀釋。非液體制劑可以例如是凍干制劑。在一個方面，被加入的氯化鈉溶液含有約40mM至約150mM氯化鈉。在一個方面，被加入的氯化鈉溶液基本上是由約40mM至約150mM氯化鈉所構(gòu)成。在一個方面，纟皮加入的氯化鈉溶液含有約40mM氯化鈉。在一個方面，被加入的氯化鈉溶液基本上是由40mM氯化鈉溶液所構(gòu)成。在一個方面，被加入的氯化鈉溶液基本上是由溶液(其含有約40mM±10mM氯化鈉的氯化鈉溶液)所構(gòu)成。在一個方面，其中在加入上述氯化鈉溶液之前，藥物制劑不含有可察覺(appreciable)量的離子化鹽。離子化鹽的可察覺量可以是例如大于約5mM的量。在另一個方面，離子化鹽的可察覺量可以是例如大于約25mM的量。如果該藥物制劑是凍干制劑，當(dāng)該凍干制劑在水中重構(gòu)時，如果它含有不高于例如5mM或25mM的離子化鹽，則它不含有可察覺量的離子化鹽。在一個方面，其中在加入該氯化鈉溶液之前，藥物制劑含有組氨酸、甘氨酸、蔗糖和聚山梨醇酯。在另一個方面，其中在加入該氯化鈉溶液之前，藥物制劑含有組氨酸、甘氨酸、蔗糖、聚山梨醇酯和治療性蛋白質(zhì)。在文中，治療性蛋白質(zhì)可以是例如用于治療凝血障礙或用于止血的蛋白質(zhì)，包括但不限于凝血因子VII、凝血因子VIII、凝血因子IX、凝血因子XIII、抗體、它們的相關(guān)類似物以及它們的衍生物。在另一個方面，其中在加入該氯化鈉溶液之前，藥物制劑含有組氨酸、甘氨酸、蔗糖、聚山梨醇酯以及凝血因子IX[包含重組凝血因子IX(rFIX)]。如文中所使用，凝血因子IX可包含凝血因子IX的修飾型(modifiedversion),包括例如，聚乙二醇化凝血因子IX;含有凝血因子IX的蛋白質(zhì)融合體，例如白蛋白-凝血因子IX或免疫球蛋白[它的整體或區(qū)域(domains)卜凝血因子IX;以及糖基化凝血因子IX。在一個方面，其中藥物制劑是凍干制劑，在加入該氯化鈉溶液之前，該制劑，就如將其重構(gòu)于水中[體積等于填充體積(fillvolumn)，即該制劑在凍干前的體積來測定，含有(a)約5mM至約30mM的組氨酸；(b)約0.1M至約0.3M的甘氨酸；(c)約0.5%至約2%的蔗糖；和(d)約0.001%至約0.05%的聚山梨醇酯(或約0.005%至約0.05%)。在一個方面，就如將其重構(gòu)于水中來測定，該制劑可另外含有(e)約O.lmg/mL至約100mg/mL或更多的治療性蛋白質(zhì)，或者約10、50、100、200、300、400、500、1000、2000IU/mL(國際單位/mL)或更多的治療性蛋白質(zhì)。在一個方面，就如將其重構(gòu)于水中來測定，該制劑可另外含有(e)約0.1mg/mL至約100mg/mL或更多的凝血因子IX，或約0.4mg/mL至約20mg/mL的凝血因子IX，或約10、50、100、200、300、400、500、1000、2000IU/mL(國際單位/mL)或更多的凝血因子IX。在一個方面，本發(fā)明提供用于防止由靜脈內(nèi)注射所引起的紅細(xì)胞凝集的方法，該方法包括"使用約25mM至約150mM的氯化鈉溶液重構(gòu)或稀釋藥物制劑，從而使得重構(gòu)或稀釋的藥物制劑具有足夠的離子強(qiáng)度，以在將該重構(gòu)或稀釋的藥物制劑靜脈內(nèi)注射給藥至個體時防止紅細(xì)胞凝集。在一個方面，本發(fā)明提供配制用于靜脈內(nèi)注射的凍干藥物制劑的方法，該方法包括使用約25mM至約150mM的氯化鈉溶液重構(gòu)該凍干藥物制劑，從而使得在重構(gòu)之后，該制劑具有足以防止紅細(xì)胞凝集的離子強(qiáng)度，并具有大約等滲的(或稍微高滲的或稍微低滲的)的同滲容摩。在一個方面，使用上述氯化鈉溶液重構(gòu)凍干的制劑，其中用于重構(gòu)的氯化鈉溶液體積少于凍干前制劑的體積(即填充體積)。以此方式，本發(fā)明提供用于減少被注射的制劑的體積的方法。在一個方面，使用上述氯化鈉溶液重構(gòu)凍干的制劑，其中用于重構(gòu)的氯化鈉溶液的體積大于凍干前制劑的體積(即填充體積)。以此方式，本發(fā)明提供用于維持被注射制劑的等滲性的方法。例如，凍干制劑可用大于凍干前的制劑的體積的氯化鈉溶液重構(gòu)，例如當(dāng)該凍干前的制劑體積是4mL時，可用5mL氯化鈉重構(gòu)。例如，重構(gòu)于4mL水中的凍干的4mL制劑是含有10mM組氨酸、260mM甘氨酸、1%蔗糖、0.005%聚山梨醇酯的等滲溶液，它約是300mOsm/L。但是如果該凍干制劑用4mL的40mMNaCl(80mOsm/L)溶液重構(gòu)，則所得到的制劑將為稍微高滲的溶液(300mOsm/L+80mOsm/L=380mOsm/L)。但如果該凍干制劑用5mL的40mMNaCl溶液重構(gòu)，則所得到的溶液含有約8mM(8mOsm/L)組氨酸、208mM(208mOsm/L)甘氨酸、0.8%(24mOsm/L)蔗糖、0.004%(可忽略的同滲容摩)聚山梨醇酯和40mM(80mOsm/L)NaCl，其約為320mOsm/L。因此，通過用體積大于填充體積的氯化鈉溶液重構(gòu)凍干前約為等滲的制劑，本發(fā)明可以提供仍為大約等滲的制得的溶液。換言之，用體積少于或約等于填充體積的氯化鈉溶液來重構(gòu)凍干前大約為等滲的制劑可以形成稍微高滲的溶液。為避免這種情況發(fā)生，本發(fā)明提供用以維持等滲性的方法，該方法通過用體積大于凍干前的制劑的體積的氯化鈉溶液來重構(gòu)凍干制劑。在一個方面，本發(fā)明提供用以維持凍干制劑在重構(gòu)后的等滲性的方法，該方法包括將凍干制劑重構(gòu)于比凍干前制劑的體積至少大20%的體積內(nèi)，其中該凍干前的制劑大約是等滲的，從而重構(gòu)的制劑大約是等滲的并且具有足以防止紅細(xì)胞凝集的離子強(qiáng)度。通過將凍干制劑重構(gòu)于大于它的凍干前體積的體積內(nèi)，與凍千前相比，凍干塊對于同滲容摩的貢獻(xiàn)隨重構(gòu)的體積的增加呈正比'f生降低。例如，在體積X內(nèi)的凍干前制劑具有300mOsm/L的滲壓性，如果用比體積X大20%的體積Y重構(gòu)于溶液中，則上述300mOsm/L變?yōu)轶w積Y中的240mOsm/L(由于體積增加20%，所以同滲容摩減少20%)。如果具有體積Y的溶液是氯化鈉溶液，則氯化鈉溶液對于張力的貢獻(xiàn)是該溶液中氯化鈉濃度的兩倍。例如，如果具有體積Y的溶液是40mM，則重構(gòu)的溶液具有240mOsm/L加上80mOsm/L的張力，它大約是等滲的，而且它具有足夠的離子強(qiáng)度以防止紅細(xì)胞聚集。在一個方面，本發(fā)明提供配制用于靜脈內(nèi)注射的凍干的凝血因子IX制劑的方法，該方法包括將約25mM至約150mM的氯化鈉溶液加至凍干的凝血因子IX制劑中，從而形成配制的用于靜脈內(nèi)注射的制劑，其中該配制的制劑對于血漿而言大約是等滲的，或者對于血漿而言是稍微低滲的或稍微高滲的，并且其中該配制的制劑具有足以防止紅細(xì)胞凝集的離子強(qiáng)度。在一個方面，該凍干的凝血因子IX制劑，當(dāng)就如重構(gòu)于水中來測量時，含有(a)約5mM至約30mM的組氨酸；(b)約0.1M至約0.3M的甘氨酸；(c)約0.5%至約2°/。的蔗糖；(d)約0.001%至約0.05%的聚山梨醇酯；以及(e)約0.4mg/mL至約20mg/mL的凝血因子IX，或約0.1mg/mL至約100mg/mL或某種其它可溶量的凝血因子IX，或約10IU/mL至約500IU/mL的凝血因子IX，或約10IU/mL至約5000IU/mL的凝血因子IX。在一個方面，將約40mM的氯化鈉溶液加至凍干的凝血因子IX制劑中。在一個方面，將大約5mL的約40mM氯化鈉溶液加至凍干的凝血因子IX制劑中。在一個方面，就如將其它重構(gòu)于水中來測量時，該凍干的凝血因子IX制劑含有約10mM的組氨酸、約0,26M的甘氨酸、約1%的蔗糖以及約0.005%的聚山梨醇酯。在一個方面，本發(fā)明提供藥盒(pharmaceuticalkit)，該藥盒包含(a)含有凍干塊的小瓶，其中如果將該凍干塊重構(gòu)于5mL的水中，則該溶液將含有(i)約5mM至約30mM的組氨酸；(ii)約0.1M至約0.3M的甘氨酸；(iii)約0.5%至約2%的蔗糖；(iv)約0.001%至約0.05%的聚山梨醇酯；和(v)約0.4mg/mL至約20mg/mL的凝血因子IX，或約0.1mg/mL至約100mg/mL或某種其它可溶量的凝血因子IX,或約50IU/mL至約500IU/mL的凝血因子IX，或約10IU/mL至約5000IU/mL的凝血因子IX;(b)Z5mM至約1S0mM的氯化鈉溶液；以及(c)-使用該氯化鈉溶液來重構(gòu)該凍干塊的說明書，使得在重構(gòu)之后，所形成的溶液大約是等滲的，并且具有足夠的離子強(qiáng)度以在靜脈內(nèi)注射時防止紅細(xì)胞聚集。在一個方面，本發(fā)明提供藥盒，該藥盒含有(a)含有凍干塊的小瓶，其中如果將該凍干塊重構(gòu)于4mL的水中，則該溶液將含有(i)約10mM的組氨酸；(ii)約0.26M的甘氨酸；(iii)約1%的蔗糖;(iv)約0.005%的聚山梨醇酯80;和(v)約50IU/mL至約5000IU/mL的凝血因子IX;(b)約40mM的氯化鈉溶液；以及(c)用約5mL的約40mM氯化鈉溶液來重構(gòu)該小瓶中的凍干塊的說明書，使得在重構(gòu)之后，所形成的溶液含有(i)約7或8至約10mM的組氨酸；(ii)約200至約210mM的甘氨酸；(iii)約0.7%至約0.9%的蔗糖；(iv)約0.004%的聚山梨醇酯80;(v)約50IU/mL至約5000IU/mL的凝血因子IX;和(vi)約40mM的NaCl。圖1顯示來自實(shí)施例3中描述的實(shí)驗的紅細(xì)胞沉降結(jié)果。紅細(xì)胞沉降是使用改良的韋斯特格倫氏法(modifiedWestergrenmethod)的調(diào)整方法(adaptation)在60分鐘時進(jìn)行測量的(參見實(shí)施例2)，其中收集在EDTA中的人類血液與測試溶液1:4混合。在60分鐘后，以mm為單位測定零點(diǎn)標(biāo)記(zeromark)和紅細(xì)胞血漿界面之間的距離。水平短線(horizontalbars)表示來自總共12個供體的平均值，而垂直括號(verticalbrackets)代表標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果是合并自4個獨(dú)立的實(shí)驗，每個實(shí)驗評估來自于3個供體的血液。圖2顯示對使用NaCl溶液重構(gòu)的BeneFIX⑧制劑的紅細(xì)胞沉降的評估。當(dāng)用于重構(gòu)當(dāng)前市售的BeneFIX⑧產(chǎn)品或BeneFIX⑧的新制劑(BeneFIX-R，其中在凍干前，填充溶液為4mL并且含有10mM組氨酸、260mM甘氨酸、1%蔗糖、0.005%聚山梨醇酯80;而在凍干后，將它用5mL的40mM氯化鈉重構(gòu)，從而在重構(gòu)后，BeneFIX-R含有40mMNaCl、8mM組氨酸、208mM甘氨酸、0.8%蔗糖和0.004%聚山梨醇酯)時，40mMNaCl溶液足以防止紅細(xì)胞凝集。發(fā)明詳述本發(fā)明提供配制用于注射的藥物制劑(特別是即可靜脈內(nèi)注射的制劑)的方法，該藥物制劑不會引起紅細(xì)胞凝集、溶血和/或細(xì)胞皺縮。為防止凝集，即可注射的藥物制劑需要具有足夠的離子強(qiáng)度。為防止溶血或細(xì)胞皺縮，即可注射的藥物制劑需要與血漿大約等滲。本發(fā)明提供配制用于注射的藥物制劑的方法，該用于注射的藥物制劑具有足以防止凝集的離子強(qiáng)度以及防止明顯的溶血或細(xì)胞脫水或皺縮的必需的張力。本發(fā)明方法涉及約為25mM至約150mM的氯化鈉溶液用以重構(gòu)凍干塊(或其它非液體藥物制劑)成為溶液或用以稀釋藥物制劑溶液的用途。無論該氯化鈉溶液是用于重構(gòu)還是用于稀釋的，加入特定的氯化鈉溶液致使形成用于注射的藥物制劑，它與血漿或血液是大約等滲的，并且具有足夠的離子強(qiáng)度以在注射時(特別是靜脈內(nèi)注射時)防止紅細(xì)胞聚集。術(shù)語如文中所用，溶液的"質(zhì)量摩爾濃度"是每千克溶劑中溶質(zhì)的摩爾數(shù)。如文中所用，溶液的"體積摩爾濃度"是每升溶液中的溶質(zhì)的摩爾數(shù)。如文中所用，"滲摩(osmole)"是一種物質(zhì)在理想溶液中使溶劑的凝固點(diǎn)降低1.86K的那個粒子數(shù)[阿佛加德羅常數(shù)(Avogadro，snumber)I的數(shù)量。如文中所用，溶液的"同滲質(zhì)量摩爾濃度"是每千克溶劑中的溶質(zhì)的滲摩的數(shù)目。同滲質(zhì)量摩爾濃度是存在于溶液中的粒子數(shù)目的量度，而與粒子的尺寸或重量無關(guān)。它可以僅通過利用溶液的只依賴于粒子濃度的性質(zhì)進(jìn)行測量。這些性質(zhì)是蒸氣壓降低、凝固點(diǎn)降低、沸點(diǎn)升高和滲透壓，并且統(tǒng)稱為依數(shù)性。如文中所用，溶液的"同滲容摩"是每升溶液中的溶質(zhì)的滲摩的數(shù)目。如文中所用，即可注射的或配制的用于注射的"藥物制劑，，可以是任何意欲給藥至個體的藥物。例如，藥物制劑可以是凍干塊、溶液、粉末或固體。該制劑，如果不為液體形式，用本發(fā)明的NaCl溶液重構(gòu)成溶液。如果該制劑是液體形式的，該制劑可用本發(fā)明的NaCl溶液稀釋或混合。離子強(qiáng)度離子強(qiáng)度是電解質(zhì)溶液(正和負(fù)電荷離子溶解于內(nèi)的液體)的一種特性。它通常表現(xiàn)為電解質(zhì)離子間的平均靜電相互作用。電解質(zhì)的離子強(qiáng)度是通過將各個離子的重量摩爾濃度(每單位質(zhì)量溶劑中的物質(zhì)的量)與其價數(shù)的平方相乘所得到的總數(shù)的一半。離子強(qiáng)度與電解質(zhì)的濃度是密切相關(guān)的，并且表明在特定的離子上的電荷是如何有效地被電解質(zhì)中的其它離子(所謂的離子氛)遮蔽或禾穩(wěn)定化。離子強(qiáng)度與電解質(zhì)濃度之間的主要差異是如果某些離子是更高電荷的，前者是更高的。例如，含有被完全解離(分解)的硫酸鎂(Mg"S042—)的溶液的離子強(qiáng)度是相同濃度的氯化鈉(Na+Cl—)溶液的離子強(qiáng)度的4倍。在該二者之間的另一個差異是離子強(qiáng)度反映自由離子的濃度，而不只是有多少鹽被加入溶液中。有時鹽可能被溶解但是各個離子仍然成對地結(jié)合在一起，類似于溶液中的無電荷的分子。在該情況下，離子強(qiáng)度要比鹽濃度低得多。就本發(fā)明而言，將藥物制劑配制用于注射，使得它們不但是等滲的，而且具有足夠的離子強(qiáng)度以防止RBC凝集。可立即注射的制劑(即用本發(fā)明的NaCl溶液重構(gòu)的凍千塊或用本發(fā)明的NaCl溶液稀釋的藥物溶液)的足夠的離子強(qiáng)度可為例如每升至少約25毫當(dāng)量(mEq/L)的Na+和C1—離子。在一個實(shí)施方案中，足夠的離子強(qiáng)度是至少約30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或至少約40mEq/L的Na+和Cl—離子。離子強(qiáng)度也可用溶液的導(dǎo)電率進(jìn)行描述。導(dǎo)電率是物質(zhì)或溶液傳導(dǎo)電流的能力。儀器用來測量導(dǎo)電率的原理是簡單的-將兩個極板置于樣品中，將電位施加于上述極板(通常是正弦波電壓)，測量電流。導(dǎo)電率(G)，電阻率(R)的倒數(shù)，是根據(jù)奧姆定律G-I/Rd(安培)/E(伏特)由電壓和電流值得到的。因為溶液中的離子上的電荷會促進(jìn)電流的電導(dǎo)，所以溶液的導(dǎo)電率正比于它的離子濃度。然而，在某些情況中，導(dǎo)電率可能與濃度不直接相關(guān)。但是，對于氯化鈉溶液而言，導(dǎo)電率直接與離子濃度成正比。導(dǎo)電率的基本單位是西門子(siemens，S)，先前被稱為姆歐(mho)。因為測試樣品的幾何形狀會影響導(dǎo)電率的值，標(biāo)準(zhǔn)化的量測用比導(dǎo)電率單位(S/cm)表示，以補(bǔ)償電極尺寸上的差異。比導(dǎo)電率(C)僅是測得的導(dǎo)電率(G)與電極電池常數(shù)(L/A)的乘積，其中L是介于電極之間的液柱的長度，而A是電極的面積。C=Gx(L/A)。如果該電池系數(shù)是lcm",比導(dǎo)電率與測得的溶液的導(dǎo)電率相同。盡管電極的形狀會不同，但是電極總可用等價的理論電池代表。因此，在一個實(shí)施方案中，即可注射的制劑的足夠的離子強(qiáng)度可具有，例如，至少約為4mS/cm或更高的導(dǎo)電率。在另一個實(shí)施方案中，即可注射的溶液的足夠的離子強(qiáng)度是至少約2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8或至少約3.9mS/cm。還可用溶液是否具有足夠的可防止紅細(xì)胞凝集的離子強(qiáng)度的操作性定義解釋術(shù)語"足夠的離子強(qiáng)度"。例如，這可以根據(jù)如下實(shí)驗確定將測試溶液加至全血，并觀察紅細(xì)胞沉降的距離。(參見實(shí)施例2;經(jīng)調(diào)整的改良的韋斯特格倫氏法)。在一個實(shí)施方案中，當(dāng)以4:1的比例與全血混合時，如果測試溶液在60分鐘時提供小于約10mm的紅細(xì)胞沉降(例如，參見實(shí)施例2，圖1和圖2)，則該測試溶液具有可防止紅細(xì)胞凝集的足夠的離子強(qiáng)度。在另一個實(shí)施方案中，當(dāng)以4:1的比例與全血混合時，如果測試溶液在60分鐘時提供小于約5mm的紅細(xì)胞沉降，則該測試溶液具有足以防止紅細(xì)胞凝集的足夠的離子強(qiáng)度。溶液同滲容摩本發(fā)明的方法提供用于注射的藥物制劑，它與血液大約是等滲的。為了確定藥物制劑是否與血液大約等滲，人們應(yīng)計算包括稀釋劑的溶液的全部化學(xué)組分的同滲容摩。用于注射的藥物制劑(腸胃外溶液的容積滲摩濃度(osmolarconcentration))可以對人體的血液細(xì)胞和血管產(chǎn)生不良作用?？梢杂嬎愕玫搅黧w以及經(jīng)溶解或經(jīng)稀釋的藥物的張力，它以每升液體的毫滲摩爾(mOsm/L)的數(shù)值表示。此數(shù)值也稱為同滲容摩。血液的同滲容摩范圍落在285和310mOsm/L之間。當(dāng)將低滲的或高滲的溶液注射至血液中時，液體移進(jìn)或移出細(xì)胞，這可造成各種負(fù)面效應(yīng)。液體同滲容摩部分地基于滲透和滲透壓的概念。滲透是通過例如血管或細(xì)胞膜的半透膜的溶質(zhì)(被溶解的粒子)的擴(kuò)散或液體的轉(zhuǎn)移。滲透壓可促進(jìn)分子跨膜輸送，它以容積滲摩濃度表示，并且當(dāng)與例如血液或血漿的生物流體相比較時，將其稱為低滲的(低張的)、等滲的(等張的)或高滲的(高張的)。通常將術(shù)語"張力，，以及"滲透壓，，視為是同義的。滲透壓是對抗水因應(yīng)"滲透梯度"(即在膜兩側(cè)的不同粒子濃度)而通過半透膜移動所需的流體靜壓(或液壓)。血清同滲容摩可以通過使用滲透壓計進(jìn)行測量，或者它可以作為存在于溶液中的溶質(zhì)濃度的總和而被計算。在實(shí)驗室中測得的數(shù)值通常指同滲質(zhì)量摩爾濃度。從溶質(zhì)濃度計算出的數(shù)值被實(shí)驗室以同滲容摩進(jìn)行報導(dǎo)。該滲摩差異(osmolargap)是這兩個數(shù)值之間的差異。在文中，認(rèn)為張力和滲透壓是同義的，并且應(yīng)進(jìn)行廣義地理解。張力可以指有效的同滲質(zhì)量摩爾濃度，并且等于溶液中的溶質(zhì)的濃度的總和，所述溶質(zhì)有能力產(chǎn)生跨膜(包括細(xì)胞膜)滲透力。嚴(yán)格來說，同滲質(zhì)量摩爾濃度是特定溶液的性質(zhì)而與任何膜無關(guān)。張力是溶液相對于特定膜的性質(zhì)。然而，本發(fā)明涉及與生物溶液(例如血液或血漿)等滲的溶液，該說法將包含下列意義對于在血液或血漿或其它生物溶液中的細(xì)胞的細(xì)胞膜而言，該特定溶液與血液或血漿是等滲的。"張力"的操作性定義可用于解釋該術(shù)語。這可以基于將測試溶液加至全血并且觀察結(jié)果的實(shí)驗來完成。如果全血中的RBCs膨脹并破裂，則該測試溶液與正常血漿相比是低滲的。如果RBCs鈹縮并變成圓鋸齒狀的，則該測試溶液與正常血漿相比是高滲的。如果RBC保持不變，則該測試溶液與血漿是等滲的。RBC細(xì)胞膜是參考膜(referencemembrane)。例如，置于生理鹽水(即0.9%氯化鈉)中的全血不會膨脹，因此生理鹽水是等滲的。等滲溶液的特性本發(fā)明提供配制或預(yù)備用于注射至個體的藥物制劑的方法，其中將該制劑配制成溶液，該溶液(l)就血液(或血漿或其它生物流體)而言大約是等滲的，或者是不會引起明顯的溶血、血栓或血管刺激的高滲或低滲的；且(2)具有足夠的離子強(qiáng)度以防止紅細(xì)胞聚集。在一個實(shí)施方案中，即可注射的等滲(對于血液而言)藥物制劑具有大于約270mOsm/L并且低于約330mOsm/L的張力或同滲容摩。在一個實(shí)施方案中，即可注射的等滲藥物制劑具有大于約270mOsm/L并且低于約328mOsm/L的張力或同滲容摩。盡管例如0.9%氯化鈉和5%右旋糖的溶液是等滲的，但是當(dāng)將它們用于重構(gòu)或稀釋許多藥物制劑時，所形成的溶液可能不具有可防止紅細(xì)胞凝集的足夠的離子強(qiáng)度(就5%右旋糖而言)，或可能具有太高的離子強(qiáng)度而使得所形成的溶液是高滲的。因此，本發(fā)明的方法使用用于稀釋或重構(gòu)的溶液，該溶液含有如下的最小濃度的氯化鈉，其提供(a)足夠的離子強(qiáng)度以減輕紅細(xì)胞聚集，和(b)足夠的張力以防止溶血；和如下的最大濃度的氯化鈉，其提供(c)未大到可成為高滲溶液的得到的張力。此外，本發(fā)明的方法使用用于稀釋或重構(gòu)的溶液，它可以提供足夠的離子強(qiáng)度并對于血液是等滲的，而同時對于藥物制劑而言可保持實(shí)用的注射體積。低滲溶液的特性本發(fā)明提供配制用于注射至個體的藥物制劑的方法，其中該制劑被配制成溶液，該溶液對于血液而言不是低滲的或者不是可引起明顯溶血那樣低滲的(即對于血液而言是稍微低滲的)。在一個實(shí)施方案中，被認(rèn)為對于血液而言是稍微低滲的即可注射的藥物制劑可能具有低于約270mOsm/L并且大于約240mOsm/L的張力或同滲容摩。在一個實(shí)施方案中，被認(rèn)為對于血液而言是稍微低滲的即可注射的藥物制劑可能具有少于約270mOsm/L并且大于約220mOsm/L的張力或同滲容摩。低張力溶液的實(shí)例包括許多含有無菌水的即可注射的藥物制劑。當(dāng)將低張力溶液注射時，發(fā)生流體轉(zhuǎn)移(fluidshift),水移動至靜脈的內(nèi)皮細(xì)胞和血液細(xì)胞中。吸收太多水的細(xì)胞會破裂，而因此低張力溶液的注射可引起血管刺激、靜脈炎和溶血。高張力溶液的特性本發(fā)明提供配制用于注射至個體的藥物制劑的方法，其中該制劑被配制成溶液，該溶液對于血液而言不是高滲的或者不是可引起明顯的血栓和/或血管刺激那樣高滲的(即稍微高滲的)。在一個實(shí)施方案中，被認(rèn)為是稍微高滲的即可注射的藥物制劑可能具有大于約340mOsm/L并且低于約600mOsm/L的張力或同滲容摩。在一個實(shí)施方案中，被認(rèn)為是稍微高滲的即可注射的藥物制劑可能具有大于約340并且少于約375、400、425、450、475、500或約575mOsm/L的張力或同滲容摩。一般而言，高滲溶液具有大于約340mOsm/L的張力。具有大于約600mOsm/L的同滲容摩的溶液在注射時應(yīng)小心使用。非所期的高滲溶液的實(shí)例包括許多含有10%右旋糖或多種可影響同滲容摩的添加劑的即可注射的藥物制劑。當(dāng)高滲溶液被注射時，發(fā)生流體轉(zhuǎn)移，水被從靜脈的內(nèi)皮細(xì)胞和血液細(xì)胞中吸出。損失太多水的細(xì)胞會鈹縮，因此注射高滲溶液可引起血管刺激、靜脈炎以及血栓。pH值血液的pH值范圍落在約7.35至約7.45，這被j見為是中性的。認(rèn)為具有低于7的pH值的藥物制劑是酸性藥物，而具有低于4.1的pH值的那些是非常酸性的。認(rèn)為具有高于7.5的pH值的藥物是堿性(basic)或堿性(alkaline)藥物，而具有高于9.0的pH值的那些是非常堿性的。非常酸性或非常堿性的藥物溶液可引起靜脈炎和血栓。因此，在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于重構(gòu)凍千藥物制劑或用于稀釋液體藥物制劑以使這些制劑即可靜脈內(nèi)注射的氯化鈉溶液，其中該即可注射的制劑(1)具有不小于4.1或不大于9.0的pH值，(2)具有可防止紅細(xì)胞聚集的足夠的離子強(qiáng)度，和(3)對于血液而言大約是等滲的(或稍微高滲或低滲的)，從而使RBC不會發(fā)生溶血或皺縮。然而，對于溶液是否具有足夠的離子強(qiáng)度以防止紅細(xì)胞聚集而言，不用考慮溶液的pH值。也就是說，如果當(dāng)用水重構(gòu)時凍干制劑具有小于4.1或大于9.0的pH值，這不妨礙使用用于重構(gòu)的氯化鈉溶液以防止紅細(xì)胞凝集。計算同滲容摩任何藥物制劑的同滲容摩可以通過下列公式進(jìn)行計算同滲容摩=(物質(zhì)的重量(g)除以物質(zhì)的分子量(g/L))乘以物種的數(shù)目乘以1000作為毫同滲容摩。術(shù)語"物種"是指當(dāng)溶解發(fā)生時所形成的離子或化學(xué)物種的數(shù)目。可立即使用的或配制的用于注射的藥物制劑本發(fā)明提供將凍干藥物產(chǎn)品重構(gòu)成溶液以配制用于注射至個體的藥物產(chǎn)品的方法。因為具有足夠的離子強(qiáng)度和對于血液而言大約是等滲的張力，該重構(gòu)藥物產(chǎn)品是即可注射的。本發(fā)明的方法還涉及稀釋藥物溶液以配制用于注射至個體的藥物溶液。因為其具有足夠的離子強(qiáng)度并且對于血液而言大約是等滲的，稀釋的藥物溶液是即可注射的。在一個實(shí)施方案中，凍干或干燥的藥物產(chǎn)品/制劑，如果重構(gòu)于水中，會具有約100mOsm/L至約360mOsm/L的同滲容摩。因為本發(fā)明提供使用約25mM至約150mM的氯化鈉溶液進(jìn)行重構(gòu)的方法，醫(yī)師應(yīng)根據(jù)重構(gòu)成氯化鈉溶液的凍干藥物產(chǎn)品的預(yù)期組合同滲容摩而使用特定的氯化鈉溶液。因此，例如，如果凍干的藥物產(chǎn)品(如重構(gòu)于水中時)具有約300mOsm/L的同滲容摩，則用于重構(gòu)的NaCl溶液應(yīng)該是約25mM至約30mM。在另一個實(shí)例中，如果凍干的藥物產(chǎn)品(如重構(gòu)于水中時)具有約100mOsm/L的同滲容摩，則用于重構(gòu)的NaCl溶液應(yīng)該是約25mM至約130mM。在一個實(shí)施方案中，通過本發(fā)明方法而被配制以供注射的藥物產(chǎn)品(不論是凍干的或是溶液中的)不含有HES(羥乙基淀粉)。含有HES的制劑，盡管為了離子強(qiáng)度而使用NaCl溶液重構(gòu)或稀釋，在體外實(shí)驗中可引起紅細(xì)胞沉降和凝集。在另一個實(shí)施方案中，因為經(jīng)調(diào)整的改良韋斯特格倫氏法(參見實(shí)施例2)顯示NaCl的加入不會抵消葡聚糖類可能引起的增強(qiáng)的沉降效應(yīng)，所以通過本發(fā)明方法而被配制以供注射的藥物產(chǎn)品不含有葡聚糖。在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供配制用于靜脈內(nèi)注射的藥物制劑的方法，其中該藥物制劑是含有主要填充劑(bulkingagent)的凍干塊。該主要填充劑可以例如基本上是非離子化的。非離子化的填充劑包括但不限于甘露糖醇、甘氨酸、蔗糖、乳糖、其它二醣類、治療性蛋白質(zhì)或制劑本身的活性成分或本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的其它填充劑。非離子化的填充劑的濃度不會顯著影響溶液是否具有可防止凝集的足夠的離子強(qiáng)度。然而，它們的濃度對同滲容摩有影響，因此它們的濃度可能對張力有影響。例如，甘氨酸的濃度等于它對同滲容摩的貢獻(xiàn)，因此10mM甘氨酸相當(dāng)于10mOsm/L。藥物制劑中的蛋白質(zhì)成分，包括活性成分，不會明顯地影響溶液的離子強(qiáng)度或溶液的同滲容摩。例如，假設(shè)蛋白質(zhì)分子量為50,000，并且假設(shè)1-2mL溶液中的2.5mg該蛋白質(zhì)將被注射。這相當(dāng)于0.05mM，因此，該蛋白質(zhì)對同滲容摩的貢獻(xiàn)是可忽略不計的。藥物制劑還通常含有表面活性劑，例如聚山梨醇酯-80。聚山梨醇酯-80和其它表面活性劑是大分子量分子，因此通常存在于制劑中的量(例如0.001%到0.01%)太少，以致于對同滲容摩或離子強(qiáng)度的貢獻(xiàn)是可忽略不計的。其它表面活性劑包括Brij⑧35、Brij30、Lubrol-pxTM、TritonX曙IO、PluronicF127以及十二烷基硫酸鈉(SDS)。可能小量存在于藥物制劑中的對同滲容摩或離子強(qiáng)度的貢獻(xiàn)可忽略的其它大分子量分子是聚合物，前提是它們不是類似于硫酸葡聚糖的鹽。示例性聚合物包括葡聚糖、聚乙烯醇(PVA)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、明膠、聚乙二醇(PEG)以及聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。藥物制劑通常還含有蔗糖或其它糖類或多元醇類，通常以0-2、0-5或0-10%或更高的量存在。例如，當(dāng)制劑不含有填充劑時，可以使用5-10%的蔗糖。一般而言，當(dāng)制劑是凍干的時，當(dāng)該制劑的量在文中以百分比或體積摩爾濃度的量表征時，這是意指溶液在凍干前的百分比和體積摩爾濃度(即填充量)。因此，當(dāng)溶液具有1%蔗糖，這是相當(dāng)于29.2mM。因為蔗糖在溶液中幾乎不離子化或解離，29mM的蔗糖相當(dāng)于29mOsm/L。其它在溶液中幾乎不離子化或解離的糖類或多元醇類包括甘油、木糖醇、山梨糖醇、甘露醇(也可用作填充劑)、葡萄糖、肌醇、棉子糖、麥芽三糖、乳糖以及海藻糖。藥物制劑還可含有緩沖劑。緩沖劑包括例如醋酸鹽、檸檬酸鹽、甘氨酸、組氨酸、磷酸鹽(鈉或鉀)、二乙醇胺以及三幾甲基氨基甲烷(Tris)。緩沖劑包括那些維持溶液pH值在可接受的范圍內(nèi)的物質(zhì)。例如甘氨酸、組氨酸以及二乙醇胺的緩沖劑基本上是非離子化的，因此它們的濃度等于同滲容摩，而在考慮即可注射的制劑是否是約等滲的時應(yīng)將其考慮在內(nèi)。例如醋酸鹽和檸檬酸鹽的緩沖劑是通常使用的鹽，并是離子化的，就計算它們對溶液同滲容摩的貢獻(xiàn)而言，它們的濃度要被乘算。藥物制劑基本上可以包含任何活性成分，包括蛋白質(zhì)、核酸、病毒以及化學(xué)化合物。這些分子大部分幾乎不影響要被注射的溶液的離子強(qiáng)度或同滲容摩。如果這些分子是鹽，如小分子化合物經(jīng)常是藥用鹽類，則它們能夠可感知地影響離子強(qiáng)度和/或同滲容摩。某些氨基酸還見于某些藥物制劑中，并且用作為抗凍劑(cryoprotectants)、冷凍保護(hù)劑(lyoprotectants)和/或填充劑。某些氨基酸(例如組氨酸)基本上是非離子化的，因此當(dāng)計算溶液的同滲容摩時，應(yīng)當(dāng)只考慮制劑中的氨基酸的濃度，以使即可注射的制劑對于血液而言大約是等滲的。BeneFIXBeneFIX⑧是通過遺傳工程化的中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞系制備的，該細(xì)胞系被廣泛地特性鑒定并顯示不含有傳染原(infectiousagent)。被保存的細(xì)胞庫不含血液或血漿產(chǎn)物。該CHO細(xì)胞系分泌重組型凝血因子IX(rFIX)至不含有任何衍生自動物或人類來源的蛋白質(zhì)的確定的細(xì)胞培養(yǎng)基中，該重組型凝血因子IX通過不需要單克隆抗體步驟的色譜純化方法進(jìn)行純化，得到高純度的活性產(chǎn)物。為了另外的病毒安全性(viralsafety),采用了具有能留置表觀分子量〉70,000的分子(例如大的蛋白質(zhì)和病毒粒子)能力的膜過濾步驟。通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳評估，BeneFIX⑧主要是一單一組分。效力(以國際單位I.U.(IU)計)是使用針對凝血因子IX濃縮物的世界衛(wèi)生組織(WHO)國際標(biāo)準(zhǔn)的活體外單期血凝實(shí)驗(one-stageclottingassay)進(jìn)行測定的。一個國際單位是存在于lmL匯集的正常人血漿中的凝血因子IX活性的量。BeneFIX⑧的比活性(specificactivity)大于或等于每毫克的蛋白質(zhì)180IU。BeneFIX⑧不衍生自人類血液并且不含有防腐劑或添加的動物或人類組分。BeneFIX⑧被配制成無菌無熱原的凍千散劑。BeneFIX⑧意欲用于靜脈內(nèi)(IV)注射。它可在單次使用的小瓶中使用，該小瓶含有標(biāo)示量的凝血因子IX活性(以國際單位(IU)表示)。各個小瓶含有例如標(biāo)稱的250、500或1000IU(或更多，包括2000IU)的凝固因子IX(重組型)。在使用無菌水重構(gòu)凍干的藥物產(chǎn)品之后，在500和1000IU劑量強(qiáng)度中的賦形劑的濃度是10mML-組氨酸、1%蔗糖、260mM甘氨酸、0.005。/。聚山梨醇酯80。在250IU劑量強(qiáng)度中的重構(gòu)后的濃度是上述其它兩種劑量強(qiáng)度的濃度的一半。500和1000IU劑量強(qiáng)度在重構(gòu)之后是等滲的，而250IU劑量強(qiáng)度在重構(gòu)之后具有上述其它兩種劑量強(qiáng)度的一半的張力。經(jīng)重構(gòu)后，全部劑量強(qiáng)度得到透明的無色溶液。在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供配制注射至個體的BeneFIX⑧的方法，其中BeneFIX⑧重構(gòu)于氯化鈉溶液中，其中氯化鈉溶液大于約25mM并且少于約150mM。在一個實(shí)施方案中，用于重構(gòu)BeneFIX⑧的氯化鈉溶液是約40mM。在一個實(shí)施方案中，將一瓶凍干的BeneFIX⑧重構(gòu)于約4-5mL的25mM-150mM氯化鈉溶液中。再制的(reformulated)BeneFIX⑧(BeneFIX-R)因為重構(gòu)于水中的BeneFIX⑧是低離子強(qiáng)度的，所以制備各種不同的再制劑(reformulations)(再制的BeneFIX(BeneFIX-R))。目的是將足夠的離子強(qiáng)度加入BeneFIX⑧制劑，以減少RBC凝集的可能性。為了增強(qiáng)BeneFIX⑧的離子強(qiáng)度，通過替換作為重構(gòu)溶液的sWFI，可將氯化鈉溶液引入至重構(gòu)產(chǎn)品中。或者可將NaCl加至凍干前的制劑而將BeneFIX⑧再配制，如此重構(gòu)可以仍用水來實(shí)現(xiàn)，但要凍干鹽溶液是更為困難的，而使用NaCl溶液簡便地重構(gòu)凍千塊是更為可行的。對于其它當(dāng)使用sWFI重構(gòu)以防止凝集時不具有足夠的離子強(qiáng)度的凍干藥物制劑而言，這亦是真實(shí)的。在一個實(shí)施方案中，BeneFIX⑧-R可在與BeneFIX(10mML-組氨酸、260mM甘氨酸、1%蔗糖、0.005%聚山梨醇酯80)相同的制劑中凍干，而只是rFIX濃度會不同。BeneFIX-R原藥物產(chǎn)品(bulkdrugproduct)可能用10mML-組氨酸、260mM甘氨酸、1%蔗糖、0.005%聚山梨醇酯80填充為例如每小瓶4mL，并凍干。在與當(dāng)前的凍干前BeneFIX⑧制劑相比較時，當(dāng)將BeneFIX-R用25-150mMNaCl溶液(例如40mMNaCl)重構(gòu)至每小瓶5mL時，賦形劑的濃度減少了20%。這個策略得到的制劑是(l)等滲的，(2)具有足夠的離子強(qiáng)度以降低RBC凝集的可能性，以及(3)對較高劑量的rFIX而言，降低注射體積。BeneFIX-R可以以例如每小瓶250、500、1000和2000IU的rFIX的劑量強(qiáng)度提供。因此，在使用5mL的25-150mMNaCl溶液重構(gòu)之后，所得到的BeneFIX-R制劑溶液可以含有約7至約9mM組氨酸；約188至約220mM甘氨酸；約0.7%至約0.9%蔗糖；以及約0.004%聚山梨醇酯80。根據(jù)小瓶中rFIX的量，例如，250、500、1000或2000IU,在5mLNaCl溶液中重構(gòu)會分別得到約50、100、200或400IU/mL的rFIX濃度。重構(gòu)于5mL的40mMNaCl溶液中的BeneFIX-R制劑的同滲容摩是約320mOsm/L。配制的用于注射的示例性制劑重組型凝血因子IX還可在美國專利號6,372,716中描述的制劑中凍干，為了所有目的將該專利在此引入作為參考，包括其中描述的制劑。描述在該專利中的制劑可被本發(fā)明所使用，其中所述制劑不限于含有rFIX作為活性成分。因此，例如，可以使用25mM-150mM氯化鈉溶液重構(gòu)凍干制劑，以將它們配制為注射液，所述凍千制劑包括含有下列成分的制劑甘氨酸、聚山梨醇酯、蔗糖、組氨酸和活性成分。例如，該活性成分基本上可以是任何蛋白質(zhì)、病毒、核酸或化學(xué)化合物。甘氨酸可以具有例如約0.1M到0.3M的濃度。聚山梨醇酯可以具有例如約0.001至約0.05%的濃度。蔗糖可以具有例如約0.5%至約2%的濃度。組氨酸可以具有例如約5mM至約30mM的濃度。在一個實(shí)施方案中，欲使用25-150mM氯化鈉溶液重構(gòu)的凍干制劑含有約0.1到0.3M的甘氨酸、約0.5-2°/。的蔗糖、0.001%至約0.05%的聚山梨醇酯、約5至約30mM的組氨酸以及約0.1至約20mg/mL的活性成分?；钚猿煞挚梢允抢鐁FIX。在另一個實(shí)施方案中，欲使用25-150mM氯化鈉溶液重構(gòu)的rFIX凍干制劑含有約0.13至約3mg/ml的rFIX或約50至約600IU/mL的rFIX、約0.26M的甘氨酸、約10mM的組氨酸、約1%的蔗糖以及約0.005%聚山梨醇酯。實(shí)施例提供下面所述的實(shí)施例，以例示說明本發(fā)明的方面，而不是為了限制本發(fā)明的目的將其引入。實(shí)施例1:抗凝血劑和制劑組分對BeneFIX⑧-相關(guān)的RBC凝集的影響在蝶型導(dǎo)管管路(butterflycatheterlines)和注射器內(nèi)的BeneFIX⑧-相關(guān)的RBC凝集的偶有報道。對來自于血友病犬的血液的最近研究證實(shí)在制劑緩沖液中缺乏重組型人類FIX時，凝集會發(fā)生。因此本研究調(diào)查標(biāo)準(zhǔn)的抗凝血劑、不同的BeneFIX⑧組分和離子強(qiáng)度是否會影響B(tài)eneFIX-相關(guān)的凝集現(xiàn)象。血液得自于一群匿名的人類自愿者，并且收集于含有標(biāo)準(zhǔn)抗凝血劑(例如乙二胺四乙酸(EDTA)、檸檬酸鈉或肝素)的真空采血管(Vacutainertubes)(BectonDickinson,FranklinLakes,NJ)內(nèi)。為了測試凝集，首先將真空采血管中的血液樣品在章動器(nutator)上持續(xù)地混合。在48-孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，將血液(12.5nL)稀釋于87.5jiL的測試溶液中，大室溫下孵育2分鐘，然后在倒置相差顯微鏡下以400X放大倍率觀察。將各個孔錄像以捕捉靜止影像，根據(jù)列在下面表l中的以下標(biāo)準(zhǔn)對RBC凝集評分。表l:RBC凝集評分標(biāo)準(zhǔn)<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>標(biāo)準(zhǔn)抗凝血劑對RBC凝集的影響第一個研究包括對來自于3個供體的血液樣品的分析。就每個供體而言，將血液收集至EDTA、肝素和檸檬酸鈉真空采血管內(nèi)。將包含BeneFIX(100IU/mL)的檢品重構(gòu)于以下各濃度的NaCl溶液中0mM(sWFI)、20mM、40mM、60mM以及77mMNaCl。此外，將在水中的5。/。右旋糖(D5W)作為陽性對照。將樣品以血液對BeneFIX⑧或血液對D5W為l:8的比例進(jìn)行稀釋。就凝集而言，將影像捕捉、數(shù)字化儲存、遮蔽(masked)并計分。在將血液加至使用sWFI重構(gòu)的BeneFIX⑧后的2分鐘時，不管使用的抗凝血劑的類型是什么，在來自于全部3個供體的樣品中觀察到凝集。當(dāng)使用增加濃度的NaCl時，凝集反應(yīng)減輕。當(dāng)將血液加入D5W中時，觀察到顯著的凝集。NaCl對經(jīng)預(yù)篩選供體(pre-screeneddonor)的RBC凝集的影響將供體樣品收集于肝素化真空采血管內(nèi)。因為已于某些先前的樣品中觀察到自發(fā)性凝集，所有的供體最初使用154mMNaCl進(jìn)行篩選。如果觀察到凝集，就取消該樣品進(jìn)行進(jìn)一步分析的資格。剩余的來自各個供體的樣品以1:8稀釋至下列兩種制劑之一中(l)使用sWFI重構(gòu)的100IU/mLBeneFIX,和(2)4吏用154mMNaCl重構(gòu)的100IU/mLBeneFIX。就凝集而言，將影像捕捉、數(shù)字化儲存、遮蔽并計分。對于使用sWFI重構(gòu)的BeneFIX⑧而言，觀察到凝集，而對于使用154mMNaCl的重構(gòu)減少或消除凝集作用(參見關(guān)于評分的表2)。表2:<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>制劑組分和BeneFIX⑧濃度的影響對BeneFIX⑧的數(shù)個制劑進(jìn)行評估，以確定不同組分對RBC凝集的影響。制備含有或不含有154mMNaCl的8種不同的混合物，總數(shù)為16種混合物(表3)。就自發(fā)性凝集，對12個供體進(jìn)行篩選，將2個供體取消進(jìn)行進(jìn)一步研究的資格。將剩余的來自10個供體中的5個供體的血液樣品用于第一組的8個制劑(樣品l-A至l-H)，而將另外5個供體樣品用于第二組的8個制劑(樣品2-1至2-P)。如前將樣品1:8稀釋，如前所述捕捉影像并計分。表3:<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>表4A:凝集評分-不同的BeneFIX⑧濃度<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>表4B:凝集評分-賦形劑影響<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>較低濃度的NaCl在經(jīng)預(yù)篩選的供體中對RBC凝集的影響將供體樣品收集至肝素化真空采血管中。因為已在某些先前的樣品中被觀察到凝集，所以所有的供體最初用154mMNaCl進(jìn)行篩選。如果觀察到凝集，則取消樣品的進(jìn)一步分析的資格。剩余的來自各個供體的樣品如前以1:8稀釋在下列3種制劑當(dāng)中的一種(1)100IU/mLBeneFIX(使用sWFI);(2)100IU/mLBeneFIX(使用40mMNaCl);或(3)100IU/mLBeneFIX(使用77mMNaCl)。如前所述進(jìn)行影像捕捉、收集并評分。結(jié)果提供在下面表5中。在含有用水重構(gòu)的BeneFIX⑧的所有5個樣品中觀察到凝集，而使用40Mm或77mMNaCl的BeneFIX⑧的重構(gòu)會降低或消除凝集反應(yīng)。表5:凝集評夯<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>分析當(dāng)以血液與重構(gòu)的BeneFIX⑧體積比為1:8的比例與BeneFIX混合時，在用肝素、EDTA或檸檬酸鈉抗凝的血液中可發(fā)生RBC凝集。沒有觀察到抗凝血劑類型對凝集的影響，因此將肝素用作隨后的評估中的抗凝血劑。在某些樣品中，在僅0.9%NaCl(就凝集而言的陰性對照)存在下發(fā)生凝集。因此，隨后的評估只用那些使用0.9。/。NaCl對照而沒有表現(xiàn)出凝集的樣品來進(jìn)行。當(dāng)與肝素抗凝的血液以血液對BeneFIX⑧體積比為1:8混合時，將重構(gòu)于sWFI或NaCl溶液的3個濃度(IOO、300或600IU/mL)的BeneFIX和BeneFIX⑧的各個單獨(dú)組分對RBC凝集的影響進(jìn)行評估。去除任何特定組分(包括重組型人類FIX蛋白質(zhì))并對凝集反應(yīng)沒有影響。這表明可以使用NaCl溶液制備(重構(gòu)或稀釋)許多不同的藥物制劑，以用于靜脈內(nèi)注射。移除甘氨酸會造成RBC溶胞。然而，使用40mM(0.234%NaCl，可注射的)、77mM(0.45%NaCl,可注射的)或154mMNaCl(0.9%NaCl,可注射的)進(jìn)行重構(gòu)可降低或消除凝集反應(yīng)和溶胞。因此，這些結(jié)果顯示BeneFIX⑧制劑沒有與觀察到的凝集相關(guān)的特定的組分。雖然從BeneFIX⑧制劑移除甘氨酸以及使用水進(jìn)行重構(gòu)致使得到引起溶胞的低滲溶液，但是同滲容摩和張力是與離子強(qiáng)度和凝集不同的概念(concern)。結(jié)果顯示凝集與重構(gòu)于sWFI中的重組型凝血因子IX的低離子強(qiáng)度有關(guān)，使用NaCl重構(gòu)可減弱或消除凝集。因此，使用NaCl溶液(甚至濃度低于154mM的NaCl溶液)重構(gòu)其它藥物制劑可以防止在靜脈內(nèi)注射時的凝集和溶胞。實(shí)施例2:用以評估由藥學(xué)物質(zhì)或藥物制劑所誘導(dǎo)的紅細(xì)胞聚集的紅細(xì)胞沉降速率量定的改良韋斯特格倫氏法的調(diào)整方法當(dāng)前市售的BeneFIX⑧制劑是非離子制劑。在將重構(gòu)于sWFI中的BeneFIX⑧制劑給藥期間，當(dāng)患者的血液與重構(gòu)的BeneFIX⑧混合時，少見地觀察到紅細(xì)胞聚集(即凝集)，例如在靜脈管路中。本發(fā)明提供下列發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞聚集與制劑而非rFIX相關(guān)，并可被含有至少40mMNaCl的稀釋劑所阻止。為了協(xié)助設(shè)計含有至少約40mMNaCl的特制的(custom)稀釋劑，設(shè)計了可用于測量紅細(xì)胞沉降的可定量實(shí)驗，這是用來評估體外紅細(xì)胞聚集的已建立的方法。將改良的韋斯特格倫氏法(其中血液以4:5稀釋于生理鹽水中)進(jìn)行調(diào)整，以評估已用鹽水或測試溶液(即特制的稀釋劑)以1:4或l:8稀釋的血液中的聚集。人類血液取自于健康成人志愿者，并且收集至含有EDTA的試管中。為了證明血液樣品對于沉降實(shí)驗的適合性，通過改良的韋斯特格倫氏法測量臨床上定義的紅細(xì)胞沉降速率(ESR6Q)。簡單地說，將經(jīng)充分混合的血液使用154mMNaCl以4:5稀釋，緩和地混合充分，然后立即裝載至已置放于特制的10-試管架中的自動調(diào)零(self-zeroing)的韋斯特格倫氏管。在60分鐘之后測量并記錄自試管頂部的零標(biāo)記起至血漿紅細(xì)胞界面的以mm計的距離。將ESR6o結(jié)果與公開的標(biāo)準(zhǔn)參考值相比較(Morris，M.W.等人，血液的基本檢查(BasicExaminationofBlood)，在Henry，J.B.，編者，ClinicalDiagnosisandManagementbyLaboratoryMethods,Philadelphia,PA，WBSaunders,2001:479-519)。進(jìn)行了顯示經(jīng)調(diào)整的改良韋斯特格倫氏法(用以評估與藥物制劑有關(guān)的紅細(xì)胞聚集)的合適性的兩個實(shí)驗。人類血液樣品適于在這些分析中使用，因為它們?nèi)烤哂性跇?biāo)準(zhǔn)限度內(nèi)的ESR6。值。這些樣品在笫一個實(shí)驗中以1:4稀釋，并且在第二個實(shí)驗中以l:8稀釋。在第一個實(shí)驗中，紅細(xì)胞沉降被5%葡聚糖70或者被用sWFI或10mMNaCl重構(gòu)的BeneFIX⑧增強(qiáng)。在5分鐘內(nèi)，在已裝填有使用3%葡聚糖70或重構(gòu)于sWFI中的BeneFIX⑧稀釋的血液的試管中可觀察到凝聚物。到60分鐘時，當(dāng)與鹽水對照相比較時，這些試管中的紅細(xì)胞沉降明顯增強(qiáng)(表6)。到90分鐘時，用重構(gòu)于10mMNaCl中的BeneFIX⑧稀釋的來自一個供體的血液具有兩相沉降式樣，其帶有位于離零標(biāo)記8mm處的澄清紅細(xì)胞血漿界面以及另一位于離零標(biāo)記149mm處的介于密集堆積的與較不密集堆積的紅細(xì)胞之間的界面。表6:以1:4稀釋于BeneFIX⑧或3%葡聚糖中的人類血液的紅細(xì)胞沉降(以mm測得的從零標(biāo)記起的沉降距離)<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>NaCl濃度是用于重構(gòu)BeneFIX⑥的那些NaCl濃度在第二個實(shí)驗中，紅細(xì)胞沉降被5%右旋糖、"MFR-927，，(用于缺乏rFIX的BeneFIX⑧的制劑緩沖液)以及使用10mMNaCl重構(gòu)的BeneFIX⑧(表7)所增強(qiáng)。不同于第一個實(shí)驗，這些試管中的沉降是快速的，在15至30分鐘時達(dá)至最大或接近最大沉降。表7:以1:8稀釋于MFR-927、BeneFIX⑧或5。/。右旋糖的人類血液的紅細(xì)胞沉降<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>NaCl濃度是用于重構(gòu)BeneFIX⑧的那些NaCl濃度；MFR-927是用于缺乏rFIX的BeneFIX的制劑緩沖液。這些實(shí)驗的結(jié)果證實(shí)可以將用于測量紅細(xì)胞沉降的改良韋斯特格倫氏法進(jìn)4亍調(diào)整，以評估由藥物制劑(preparations)或制劑(formulations)所豫導(dǎo)的紅細(xì)胞聚集。例如，在裝載用測試溶液以1:4稀釋的血液60分鐘之后，測量韋斯特格倫氏管內(nèi)的紅細(xì)胞沉降足以區(qū)分增強(qiáng)聚集的試劑(即，5%右旋糖、3%葡聚糖70、MFR-927和重構(gòu)于sWFI中的BeneFIX⑧)和那些不增強(qiáng)聚集的試劑(即，鹽水和重構(gòu)于含有約25mM或更多NaCl的稀釋劑中的BeneFIX)。實(shí)施例3:就再制的BeneFIX⑧而言，在稀釋劑中的40mMNaCl對減輕與制劑有關(guān)的紅細(xì)胞聚集的適當(dāng)性(adequacy)當(dāng)前市售的BeneFIX⑧的非離子制劑與體外紅細(xì)胞聚集有關(guān)，當(dāng)患者血液在靜脈管路內(nèi)與BeneFIX⑧混合時，在給藥期間可能發(fā)生紅細(xì)胞聚集。本發(fā)明提供下列發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞聚集與制劑而非重組型凝血因子IX相關(guān)，并且可以通過^f吏用含有至少40mMNaCl來重構(gòu)BeneFIX⑧而防止聚集。該實(shí)施例的目標(biāo)是測試用于重構(gòu)再制的BeneFIX⑧(BeneFIX⑧-R)制劑的40mM稀釋劑的穩(wěn)健性(robustness)。特別地，設(shè)計實(shí)驗以確定對于防止與制劑有關(guān)的紅細(xì)胞聚集而言，偏離40mM達(dá)10%的NaCl濃度是否是足夠的，這可用測量紅細(xì)胞沉降速率(ESR)的經(jīng)調(diào)整的改良韋斯特格倫氏法進(jìn)行評估。此外，用高(即2000IU)和低(即250IU)劑量小瓶的BeneFIX-R評估NaCl濃度對紅細(xì)胞沉降的穩(wěn)健性。BeneFIX-R制劑、MFR-927和3%葡聚糖70對紅細(xì)胞沉降的影響是在室溫下利用如實(shí)施例2中所述的改良的韋斯特格倫氏法的經(jīng)調(diào)整方法進(jìn)行測量的。將本研究設(shè)計概述于表8中。表8:實(shí)施侈3的研究設(shè)計<formula>formulaseeoriginaldocumentpage34</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>在實(shí)驗的當(dāng)天，高劑量小瓶(包含2000IUrFIX的凍干BeneFIX-R的小瓶)和低劑量小瓶(包含250IUrFIX的凍干BeneFIX-R的小瓶)的BeneFIX-R在使用之前，用5mL的36mM、40mM或44mMNaCl立即重構(gòu)。陽性對照溶液3。/。(w/v)葡聚糖70在無菌的Dulbecco氏改良的不含鈞和鎂的磷酸緩沖鹽溶液(PBS-CMF，pH7.4)中制備。人類血液取自于供體并收集至含有EDTA的真空采血管中。在收集后3小時內(nèi)，將血液樣品用于紅細(xì)胞沉降實(shí)驗。將全血以1:4稀釋于測試溶液中(即，400|LiL全血加至1.2mL測試溶液中)，充分混合，然后裝載于絕對水平地放置于專用的定制架子中的自動調(diào)零的一次性的玻璃韋斯特格倫氏管中。在紅細(xì)胞沉降60分鐘后，測量并且記錄從試管頂部的零標(biāo)記到血漿-紅細(xì)胞界面的以mm計的距離。來自全部12個供體的結(jié)果是類似的。當(dāng)前市售的缺乏rFIX的BeneFIX⑧制劑緩沖液(MFR-927)和3。/。葡聚糖70(標(biāo)準(zhǔn)陽性對照溶液)與已經(jīng)混于NaCl測試溶液中的血液相比較時，展現(xiàn)出增強(qiáng)的紅細(xì)胞沉降(參見圖1)。不管緩沖液內(nèi)的NaCl濃度(36mM、40mM,或44mM)或產(chǎn)品內(nèi)的rFIX濃度如何，只要BeneFIX⑧-R是用NaCl稀釋劑重構(gòu)的，則它不會增強(qiáng)紅細(xì)胞沉降。來自本研究的結(jié)果證實(shí)在BeneFIX-R稀釋劑內(nèi)的比40mM高或低10%的NaCl濃度對于防止紅細(xì)胞沉降或聚集(凝集)增強(qiáng)是足夠的。結(jié)果還表明NaCl對與制劑有關(guān)的紅細(xì)胞聚集的減輕效果不受活性成分(即，rFIX)的濃度影響。實(shí)施例4:用于重構(gòu)BeneFIX⑧的緩沖液的離子強(qiáng)度在引起RBC凝集中的作用通過靜脈穿刺從4位不同供體收集人類血液標(biāo)準(zhǔn)的肝素化采集管中。RBC凝集物的形成是通過吸出2.6mL的緩沖液或重構(gòu)的BeneFIX⑧蛋白質(zhì)到注射器內(nèi)，然后吸取0.6mL經(jīng)肝素化的血液來測試的。在這些注射器中隨時間推移觀察凝集物的混合/沉降行為，并用數(shù)碼相機(jī)照像記錄。當(dāng)前的BeneFIX⑧制劑凍干前的組成是rFIX、約10mM組氨酸、約260mM的甘氨酸、約1%的蔗糖以及約0.005%的聚山梨醇酯-80，pH為6.8。BeneFIX⑧制劑是凍干的，并且在注射之前重構(gòu)于sWFI中。最初，懷疑蔗糖是凝集的原因。因此，測試緩沖液用1%、0.5%或0%蔗糖配制。將各個蔗糖測試緩沖液吸取至注射器中，然后吸取少量的經(jīng)肝素化的血液。發(fā)現(xiàn)對于這三種緩沖液而言RBC的凝集和隨后的快速沉降是相同的，這暗示BeneFIX⑧制劑的蔗糖含量并不是所觀察到的凝集的原因。重構(gòu)于生理鹽水溶液而非無菌水的BeneFIX不造成凝集。這些資料指出當(dāng)BeneFIX⑧重構(gòu)于水中時，BeneFIX⑧制劑的離子強(qiáng)度不足以防止凝集。為了測定消除凝集所需要的最小離子強(qiáng)度，使用具有不同濃度的NaCl溶液(O、10、15、20、25、30、35、40、50、75、100和137mM)重構(gòu)BeneFIX(或者可以將BeneFIX的凍干前制劑改變成包含氯化鈉，但是與凍干不含氯化鈉的制劑相比較，用于凍干氯化鈉制劑的方法是較困難的)。還將BeneFIX⑧重構(gòu)于含有154mMNaCl的生理鹽水中。在全部這些溶液中檢測RBC凝集和沉降行為。表9顯示這些溶液中的一些溶液以及其它常見靜脈內(nèi)用溶液的同滲質(zhì)量摩爾濃度和離子強(qiáng)度(以導(dǎo)電率表示)。一旦將氯化鈉加至BeneFIX⑧制劑中，不論是在凍干之前直接加入還是使用氯化鈉溶液重構(gòu)凍干物(lyophilisate)，預(yù)期NaCl將完全解離為等濃度的Na+和C廠離子。因此，如果制劑緩沖液不含有其它離子，預(yù)測加有NaCl的制劑緩沖液的離子強(qiáng)度(以mEq/L(毫當(dāng)量/L)表示的Na+和C廠)等于NaCl濃度。表9:不同溶液的特性<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>一旦血液與表9內(nèi)的溶液在注射器內(nèi)接觸，逐個觀察RBC凝集，然后將注射器溫和地混合，并倒置以觀察血液沉降。在使用至少約40mMNaCl重構(gòu)的全部BeneFIX⑧制劑中沒有觀察到凝集形成(注意在上述實(shí)施例中，約36mMNaCl也足以防止凝集)。血液細(xì)胞在這些含有至少40mMNaCl的溶液中的行為與在生理鹽水中的行為是無法區(qū)別的。在一系列含有稀釋(如凍干前的)/重構(gòu)(如經(jīng)凍干的)于降低濃度的NaCl(起始于40mM)的BeneFIX⑧制劑中，在倒置15分鐘之后，測定血液沉降。對于凝集形成和隨后的沉降速率而言，存在有一致性的濃度-依賴響應(yīng)隨著緩沖液中的NaCl濃度的降低，凝集增加而且沉降加快。對于一個含有￡25mMNaCl的緩沖液內(nèi)的血液樣品和另一個含有;S30mMNaCl的緩沖液中的血液樣品而言，可觀察到明顯的凝集。在具有^40mMNaCl的緩沖液的全部制劑中，血液細(xì)胞的行為與在生理鹽水或重構(gòu)于生理鹽水的BeneFIX⑧中的那些血液細(xì)胞行為是無法區(qū)別的。使用40mMNaCl重構(gòu)的BeneFIX⑧對應(yīng)于為4mS/cm的計算導(dǎo)電率。5%右旋糖注射溶液(每mL溶液含有在注射水中的50mg無水右旋糖USP)具有250mOsm/L的計算同滲質(zhì)量摩爾濃度和0mS/cm的計算離子強(qiáng)度。該溶液通常靜脈給藥，它也會造成類似于對重構(gòu)于水中的BeneFIX制劑所觀察到的RBC凝集和非?？焖俚难撼两?。因此，這些結(jié)果指出由重構(gòu)于水中的BeneFIX⑧所引起的RBC凝集是由于BeneFIX⑥制劑的低離子強(qiáng)度(0mEq/L計算離子強(qiáng)度，<0.2mS/cm測量導(dǎo)電率)的緣故。此問題可以通過重構(gòu)于含有^40mMNaCl的NaCl溶液中而矯正，使得用于注射的重構(gòu)溶液具有為約40mEq/L或更高的計算離子強(qiáng)度(防止凝集的足夠的離子強(qiáng)度也可以計算為約4mS/cm或更高的導(dǎo)電率)。權(quán)利要求1.配制用于靜脈內(nèi)注射的藥物制劑的方法，該方法包括將約25mM至約150mM的氯化鈉溶液加至該藥物制劑，從而得到配制的用于靜脈內(nèi)注射的制劑，其中該配制的制劑對于血漿而言大約是等滲的，或者對于血漿而言是稍微低滲或稍微高滲的，并且其中該配制的制劑具有防止紅細(xì)胞凝集的足夠的離子強(qiáng)度。2.權(quán)利要求l的方法，其中配制的制劑對于血漿而言大約是等滲的，并且具有約270mOsm/L至約330mOsm/L的同滲容摩。3.權(quán)利要求l的方法，其中配制的制劑對于血漿而言是稍微低滲的，并且具有約220mOsm/L至約270mOsm/L的同滲容摩。4.權(quán)利要求l的方法，其中配制的制劑對于血漿而言是稍微高滲的，并且具有約330mOsm/L至約600mOsm/L的同滲容摩。5.權(quán)利要求1-4中任何一項的方法，其中配制的制劑具有至少為約25mEq/L的Na+與Cl—離子的離子強(qiáng)度。6.權(quán)利要求1-4中任何一項的方法，其中配制的制劑具有至少為約30mEq/L的Na+與Cl—離子的離子強(qiáng)度。7.權(quán)利要求1-4中任何一項的方法，其中配制的制劑具有至少為約36mEq/L的Na+與Cr離子的離子強(qiáng)度。8.權(quán)利要求1-4中任何一項的方法，其中配制的制劑具有至少為約40mEq/L的Na+與C「離子的離子強(qiáng)度。9.權(quán)利要求1-4中任何一項的方法，其中配制的制劑具有至少為約40mEq/L的Na+與Cl—離子并且低于約150mEq/L的Na+與Cr離子的離子強(qiáng)度。10.權(quán)利要求1-4中任何一項的方法，其中配制的制劑具有以導(dǎo)電率測得的至少為2.5mS/cm的離子強(qiáng)度。11.權(quán)利要求1-4中任何一項的方法，其中配制的制劑具有以導(dǎo)電率測得的至少為4.0mS/cm的離子強(qiáng)度。12.權(quán)利要求l-ll中任何一項的方法，其中配制的用于注射的藥物制劑是凍干制劑。13.權(quán)利要求l-ll中任何一項的方法，其中配制的用于注射的藥物制劑是溶液。14.權(quán)利要求1-13中任何一項的方法，其中氯化鈉溶液是約40mM至約150mM。15.權(quán)利要求1-13中任何一項的方法，其中氯化鈉溶液是約36mM至約44mM。16.權(quán)利要求1-13中任何一項的方法，其中氯化鈉溶液是約40mM。17.權(quán)利要求1-16中任何一項的方法，其中在加入所述氯化鈉溶液之前，藥物制劑不含有可察覺量的離子化鹽。18.權(quán)利要求10的方法，其中凍干制劑，當(dāng)重構(gòu)于水中時，不含有高于5mM的離子化鹽。19.權(quán)利要求10的方法，其中凍干制劑，當(dāng)重構(gòu)于水中時，不含有高于25mM的離子化鹽。20.權(quán)利要求1-19中任何一項的方法，其中在加入所述氯化鈉溶液之前，藥物制劑含有組氨酸、甘氨酸、蔗糖和聚山梨醇酯。21.權(quán)利要求1-19中任何一項的方法，其中在加入所述氯化鈉溶液之前，藥物制劑含有組氨酸、甘氨酸、蔗糖、聚山梨醇酯和治療性蛋白質(zhì)。22.權(quán)利要求1-21中任何一項的方法，其中在加入所述氯化鈉溶液之前，藥物制劑含有組氨酸、甘氨酸、蔗糖、聚山梨醇酯和凝血因子IX。23.權(quán)利要求1-21中任何一項的方法，其中在加入所述氯化鈉溶液之前，所述藥物制劑當(dāng)被重構(gòu)于水中時含有(a)約5mM至約30mM的組氨酸；(b)約0.1M至約0.3M的甘氨酸；(c)約0.5%至約2%的蔗糖；和(d)約0.001%至約0.05%的聚山梨醇酯。24.權(quán)利要求23的方法，其中在加入所述氯化鈉溶液之前，所述藥物制劑當(dāng)被重構(gòu)于水中時另外含有(e)約50IU/mL至約2000IU/mL的凝血因子IX。25.配制用于靜脈內(nèi)注射的凍干凝血因子IX制劑的方法，該方法包括將約25mM至約150mM的氯化鈉溶液加至凍干的凝血因子IX制劑，從而得到配制的用于靜脈內(nèi)注射的制劑，其中該配制的制劑對于血漿而言大約是等滲的，或者對于血漿而言是稍微低滲或稍微高滲的，并且其中該配制的制劑具有足以防止紅細(xì)胞凝集的足夠的離子強(qiáng)度。26.權(quán)利要求25的方法，其中凍干的凝血因子IX制劑當(dāng)被重構(gòu)于水中時含有(a)約5mM至約30mM的組氨酸；(b)約0.1M至約0.3M的甘氨酸；(c)約0.5%至約2%的蔗糖；以及(d)約0.001%至約0.05%的聚山梨醇酯。27.權(quán)利要求26的方法，其中將約40mM的氯化鈉溶液加至所述凍干的凝血因子IX制劑中。28.權(quán)利要求27的方法，其中將約5mL的約40mM氯化鈉溶液加至所述凍干的凝血因子IX制劑中。29.權(quán)利要求28的方法，其中所述凝血因子IX制劑具有約4mL的凍千前體積。30.權(quán)利要求26的方法，其中所述凍干的凝血因子IX制劑當(dāng)被重構(gòu)于水中時含有約10mM組氨酸、0.26M甘氨酸、1%蔗糖、0.005%聚山梨醇酯和凝血因子IX。31.藥盒，該藥盒含有(a)含有凍干塊的小瓶，其中當(dāng)將該凍干塊重構(gòu)于5mL水中時，溶液將含有(i)約5mM至約30mM的組氨酸；(ii)約0.1M至約0.3M的甘氨酸；(iii)約0.5%至約2%的蔗糖；(iv)約0.001%至約0.05%的聚山梨醇酯；和(v)約50IU/mL至約2000IU/mL的凝血因子IX;(b)25mM至約150mM的氯化鈉溶液；和(c)使用該氯化鈉溶液重構(gòu)該凍干塊的說明書，以使得在重構(gòu)之后所得到的溶液大約是等滲的，并且具有足夠的離子強(qiáng)度以防止在靜脈內(nèi)注射時的紅細(xì)胞聚集。32.藥盒，該藥盒含有(a)含有凍干塊的小瓶，其中當(dāng)將該凍干塊重構(gòu)于4mL水中時，溶液將含有(i)約10mM的組氨酸；(ii)約0.26M的甘氨酸；(iii)約1%的蔗糖；(iv)約0.005%的聚山梨醇酯80;和(v)約50IU/mL至約2000IU/mL的凝血因子IX;(b)約40mM的氯化鈉溶液；和(c)使用約5mL該氯化鈉溶液重構(gòu)該小瓶中的凍干塊的說明書，以使得在重構(gòu)之后所得到的溶液含有(i)約7至約9mM的組氨酸；(ii)約200至約210mM的甘氨酸；(iii)約0.7%至約0.9%的蔗糖；(iv)約0.004%的聚山梨醇酯80;(v)約50IU/mL至約2000IU/mL的凝血因子IX;和(vi)約40mM的NaCl。33.凍干塊，其中當(dāng)將該凍干塊重構(gòu)于5mL水中時，溶液將含有(i)約5mM至約30mM的組氨酸；(ii)約0.1M至約0.3M的甘氨酸；(iii)約0.5%至約2%的蔗糖；(iv)約0.001%至約0.05%的聚山梨醇酯；和(v)約50IU/mL至約2000IU/mL的凝血因子IX。34.凍千塊，其中當(dāng)將該凍干塊重構(gòu)于4mL水中時，溶液將含有(i)約10mM的組氨酸；(ii)約0.26M的甘氨酸；(iii)約1%的蔗糖；(iv)約0.005%的聚山梨醇酯訓(xùn)；和(v)約50IU/mL至約2000IU/mL的凝血因子IX。35.含有凍干塊的小瓶，其中當(dāng)將該凍干塊重構(gòu)于5mL水中時，溶液將含有(i)約5mM至約30mM的組氨酸；(ii)約0.1M至約0.3M的甘氨酸；(iii)約0.5%至約2%的蔗糖；(iv)約0.001%至約0.05%的聚山梨醇酯；和(v)約50IU/mL至約2000IU/mL的凝血因子IX。36.含有凍干塊的小瓶，其中當(dāng)將該凍干塊重構(gòu)于4mL水中時，溶液將含有(i)約10mM的組氨酸；(ii)約0.26M的甘氨酸；(iii)約l。/。的蔗糖；(iv)約0.005%的聚山梨醇酯80;和(v)約50IU/mL至約2000IU/mL的凝血因子IX。全文摘要本發(fā)明提供配制用于注射的藥物制劑的方法，以使得一經(jīng)注射，該制劑不會引起紅細(xì)胞凝集、溶血和/或細(xì)胞皺縮。為防止凝集，即可注射的藥物制劑需要具有足夠的離子強(qiáng)度。為防止溶血或細(xì)胞皺縮，即可注射的藥物制劑對于血漿而言需要大約是等滲的。本發(fā)明提供配制用于注射的藥物制劑的方法，該藥物制劑具有足以防止凝集的離子強(qiáng)度和防止明顯的溶血或細(xì)胞脫水或皺縮所必需的張力。本發(fā)明方法涉及約25mM至約150mM的氯化鈉溶液用以將凍干塊(或其它非液態(tài)的藥物制劑)重構(gòu)成溶液或用以稀釋藥物制劑溶液的用途。文檔編號A61K47/18GK101351190SQ200680040080公開日2009年1月21日申請日期2006年10月27日優(yōu)先權(quán)日2005年11月1日發(fā)明者C·A·韋布,J·澤爾法斯申請人:惠氏公司