專(zhuān)利名稱(chēng)：：丙型肝炎病毒的大環(huán)抑制劑的制作方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中(VI)中的X代表羥基或離去基團(tuán)；所述反應(yīng)特別是O-芳基化反應(yīng),其中X代表離去基團(tuán)，Mitsunobu反應(yīng)，其中X是羥基；.(e)由其中PG代表氮保護(hù)基的相應(yīng)的氮-保護(hù)的中間體(VII)制備其中W是氫的式(I)化合物，所述化合物由(I-d)代表<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(f)通過(guò)功能團(tuán)轉(zhuǎn)化反應(yīng)將式(I)化合物彼此轉(zhuǎn)化；或者(g)通過(guò)將游離形式的式(I)化合物與酸或堿反應(yīng)來(lái)制備鹽形式,丙型肝炎病毒的大環(huán)抑制劑本發(fā)明涉及對(duì)于丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus)(HCV)的復(fù)制具有抑制活性的大環(huán)化合物。本發(fā)明還涉及包含這些化合物作為活性組分的組合物，以及制備這些化合物和組合物的方法。在世界范圍內(nèi)，丙型肝炎病毒是慢性肝病的主要原因，并且已成為大量醫(yī)療研究的焦點(diǎn)。HCV是肝炎病毒屬(/7e/7a"vzn^)中的黃病毒科(F/""WWh6/"e)的一員，與黃病毒屬(/7"Wwy附)關(guān)系密切，黃病毒屬包括與人類(lèi)疾病相關(guān)的多種病毒，例如登革熱病毒和黃熱病病毒，其與動(dòng)物痘病毒屬(peWv/n^)家族也4艮相近，瘟病毒屬包括牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)。HCV是正義單鏈RNA病毒，具有大約9,600個(gè)堿基的基因組。該基因組包括5，和3，端未翻譯區(qū)，其采用RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)和中央開(kāi)放讀框，所述中央開(kāi)放讀框編碼一個(gè)具有大約3,010-3,030個(gè)氨基酸的多蛋白。該多蛋白編碼十種基因產(chǎn)物，所述基因產(chǎn)物是通過(guò)協(xié)調(diào)結(jié)合系列的共翻譯和翻譯后內(nèi)切蛋白酶解切割從前體多蛋白產(chǎn)生的，所述切割是由宿主和病毒蛋白酶所介導(dǎo)的。病毒結(jié)構(gòu)蛋白包括核殼蛋白和兩個(gè)包被糖蛋白El和E2。非-結(jié)構(gòu)(NS)蛋白編碼一些必需病毒酶功能(解旋酶、聚合酶、蛋白酶)，以及具有未知功能的蛋白。病毒基因組的復(fù)制通過(guò)由非結(jié)構(gòu)蛋白5b(NS5B)編碼的RNA-依賴(lài)性RNA聚合酶介導(dǎo)。除了聚合酶以外，在雙功能NS3蛋白中編碼的病毒解旋酶功能和蛋白酶功能也已經(jīng)顯示出是HCVRNA復(fù)制所必需的。除了NS3絲氨酸蛋白酶，HCV還在NS2區(qū)域編碼金屬蛋白酶。初始急性感染之后，大部分感染的個(gè)體發(fā)展成肝炎，因?yàn)镠CV優(yōu)先在肝細(xì)胞中復(fù)制，但不是直接細(xì)胞病變的。特別是，缺少?gòu)?qiáng)有力的T-淋巴細(xì)胞反應(yīng)以及病毒對(duì)于突變的高傾向性，似乎促進(jìn)了高比例的慢性感染。慢性肝炎可發(fā)展成肝纖維變性，導(dǎo)致肝硬化、晚期肝病和HCC(肝細(xì)胞癌)，從而使其成為肝移植的主要原因。存在6個(gè)主要的HCV基因型以及50個(gè)以上的亞型，它們?cè)诘乩砩系姆植疾煌?型HCV是歐洲和美國(guó)主要的基因型。HCV的廣泛遺傳異質(zhì)性具有重要的診斷和臨床含義，也許解釋了在疫苗開(kāi)發(fā)和缺少治療應(yīng)答方面的困難。HCV可通過(guò)接觸一皮污染的血液或血液制品進(jìn)行傳播，例如在輸血或者靜脈內(nèi)使用藥物后。在血液篩查中使用的診斷試驗(yàn)的引入降低了輸血后HCV的發(fā)病率。然而，鑒于對(duì)晚期肝病的緩慢進(jìn)展，現(xiàn)存的感染在未來(lái)的數(shù)十年內(nèi)仍將繼續(xù)帶來(lái)嚴(yán)重的醫(yī)療和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。目前HCV的治療是基于(聚乙二醇化的(pegylated))a-干擾素(IFN-a)和利巴韋林的聯(lián)合治療。這種組合療法在感染了基因型1病毒的患者中產(chǎn)生了超過(guò)40%的持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答，在感染了基因型2和3病毒的患者中產(chǎn)生了大約80%的病毒學(xué)應(yīng)答。除了對(duì)于1型HCV的有限效力，該組合療法還具有顯著的副作用，并且在很多患者中具有很差的耐受性。主要副作用包括流感樣癥狀、血液異常和神經(jīng)精神病癥狀。因此需要更有效、更方便和更好耐受性的療法。最近，兩種肽模擬HCV蛋白酶抑制劑已經(jīng)作為臨床候選對(duì)象而引起了注意，即公開(kāi)在WO00/59929中的BILN-2061和公開(kāi)在WO03/87092中的VX-950。在學(xué)術(shù)和專(zhuān)利文獻(xiàn)中已經(jīng)/>開(kāi)了多種類(lèi)似的HCV蛋白酶抑制劑。現(xiàn)已4艮明顯，持續(xù)給予BILN-2061或VX-950選擇了對(duì)于各自藥物具有抗藥性的HCV突變體，所謂的藥物逃逸突變體。這些藥物突變體在HCV蛋白酶基因組中具有特征性突變，尤其是D168V、D168A和/或A156S。因此，需要具有不同抗病毒才莫式的另外的藥物來(lái)給治療失敗的患者提供治療選擇，并且具有多種藥物的組合治療在將來(lái)有可能成為標(biāo)準(zhǔn)，甚至是對(duì)于一線治療。用HIV藥物和HIV蛋白酶抑制劑進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)已進(jìn)一步表明，亞最佳藥動(dòng)學(xué)和復(fù)雜給藥方案迅速導(dǎo)致非故意配合性失敗。這是指，在HIV治療方案中，對(duì)于各自的藥物，24小時(shí)直達(dá)濃度(24hourtroughconcentration)(最小血漿濃度)經(jīng)常落入有關(guān)該天大部分時(shí)間的IC90或ED9o閾值之下。據(jù)考慮，至少I(mǎi)C的24小時(shí)直達(dá)水平，并且更現(xiàn)實(shí)地，IC90或ED9Q是減慢藥物逃逸突變體發(fā)展所必需的。獲得必需的藥動(dòng)學(xué)以及藥物代謝以達(dá)到這樣的直達(dá)水平對(duì)于藥物設(shè)計(jì)提供了嚴(yán)格挑戰(zhàn)。具有多個(gè)肽鍵的現(xiàn)有技術(shù)HCV蛋白酶抑制劑的強(qiáng)肽模擬性質(zhì)給有效給藥方案帶來(lái)了藥動(dòng)學(xué)障礙。需要這樣的HCV抑制劑，其可以克服目前HCV治療的缺點(diǎn)，例如副作用、有限的效力、出現(xiàn)抗藥性以及配合性不好。本發(fā)明涉及HCV抑制劑，所述抑制劑在一個(gè)或多個(gè)下列藥理相關(guān)性質(zhì)方面是優(yōu)良的，即效力、降低的細(xì)胞毒性、改善的藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)、改善的抗藥性、可接受的劑量以及給藥負(fù)擔(dān)(pillburden)。本發(fā)明涉及可由式(I)代表的HCV復(fù)制抑制劑及其N(xiāo)-氧化物、鹽和立體異構(gòu)形式，其中虛線代表原子C7與C8之間的任選雙鍵；W是氫或Cw烷基；RZ是氬或Cw烷基；且n是3、4、5或6。本發(fā)明涉及HCV復(fù)制抑制劑的兩個(gè)亞組，其可由式(I-a)和(I-b)代表及其N(xiāo)-氧化物、鹽和立體異構(gòu)形式，其中R1、！^和n如本文所定義。本發(fā)明還涉及制備式(I)化合物、其N(xiāo)-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物以及立體化學(xué)異構(gòu)形式的方法，其中間體，以及中間體在制備式(I)化合物中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及用作藥物的式(I)化合物本身、其N(xiāo)-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物以及立體化學(xué)異構(gòu)形式。本發(fā)明還涉及藥物組合物，其含有載體和抗病毒有效量的本文說(shuō)明的式(I)化合物。藥物組合物可含有上述化合物與其它抗HCV藥物的組合。本發(fā)明還涉及用于向患有HCV感染的個(gè)體給藥上述藥物組合物。本發(fā)明涉及式(I)化合物、其N(xiāo)-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物或立體化學(xué)異構(gòu)形式在制備用于抑制HCV復(fù)制的藥物中的應(yīng)用。或者，本發(fā)明涉及在溫血?jiǎng)游镏幸种艸CV復(fù)制的方法，所述方法包括施用式(I)化合物、其N(xiāo)-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物或立體化學(xué)異構(gòu)形式。除非另有說(shuō)明，如在上下文中使用的，應(yīng)用下列定義。作為基團(tuán)或基團(tuán)一部分的本文所用"C"烷基"定義為具有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基，例如曱基、乙基、l-丙基、2-丙基、1-丁基、2-丁基、2-曱基-l-丙基、l-戊基、2-戊基、3-戊基、l-己基、2-己基、2-曱基-l-丁基、2-曱基-l-戊基、2-乙基-l-丁基、3-曱基-2-戊基等。優(yōu)選的d.6烷基是CM烷基。當(dāng)在下文中使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)"式(I)化合物"或"本發(fā)明化合物"或類(lèi)似術(shù)語(yǔ)意欲包括式(I)化合物、其前藥、N-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物以及立體化學(xué)異構(gòu)形式。一個(gè)實(shí)施方案包括式(I)化合物或本文中說(shuō)明的式(I)化合物的任何亞組，及其7V-氧化物、鹽和可能的立體異構(gòu)體形式。另一個(gè)實(shí)施方案包括式(I)化合物或本文中說(shuō)明的式(I)化合物的任何亞組及其鹽和可能的立體異構(gòu)體形式。式(I)化合物具有幾個(gè)手性中心，并且以立體化學(xué)異構(gòu)形式存在。本文所用術(shù)語(yǔ)"立體化學(xué)異構(gòu)體形式"被定義為式(I)化合物可以具有的，由相同的原子通過(guò)相同的鍵合順序組成但具有不同的三維結(jié)構(gòu)且不可以互換的所有可能的化合物。在提到其中使用("或(5)來(lái)指定取代基內(nèi)手性原子的絕對(duì)構(gòu)型的情況下，在進(jìn)行指定來(lái)考慮整個(gè)化合物而不是孤立的取代基。除非有其他描述或指示，一個(gè)化合物的化學(xué)命名包括所述化合物可具有的所有可能的立體異構(gòu)形式的混合物。所述混合物可包括所述化合物基本分子結(jié)構(gòu)的所有非對(duì)映體和/或?qū)τ丑w。無(wú)論是純的形式還是彼此的混合物，本發(fā)明化合物的所有立體異構(gòu)形式均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本文所述的化合物及中間體的純立體異構(gòu)體形式定義為基本上不含有所述化合物或中間體的相同基本分子結(jié)構(gòu)的其他對(duì)映體或非對(duì)映體形式的異構(gòu)體。特別是，術(shù)語(yǔ)"立體異構(gòu)體純"是指立體異構(gòu)過(guò)量為至少80%(即一種異構(gòu)體至少為90%,而其它可能的異構(gòu)體最多為10%)至立體異構(gòu)過(guò)量為100%(即一種異構(gòu)體為100%,而沒(méi)有其它異構(gòu)體)的化合物或中間體；更特別地，為立體異構(gòu)過(guò)量90%至100%的化合物或中間體；更特別地為立體異構(gòu)過(guò)量94%至100%的化合物或中間體；最特別地，為立體異構(gòu)過(guò)量97%至100%的化合物或中間體。術(shù)語(yǔ)"對(duì)映體純"和"非對(duì)映體純"應(yīng)當(dāng)理解為相似的含義，不過(guò)應(yīng)當(dāng)分別表示為所述混合物中對(duì)映體過(guò)量和非對(duì)映體過(guò)量。本發(fā)明化合物和中間體的純立體異構(gòu)體可通過(guò)應(yīng)用現(xiàn)有技術(shù)已知的方法獲得。例如，可以通過(guò)用旋光性酸或堿選擇性地結(jié)晶其非對(duì)映體鹽來(lái)分離出對(duì)映體。所述旋光性酸或堿的實(shí)例是酒石酸、二苯曱?；剖?、二曱苯曱?；剖岷驼聊X磺酸?；蛘?，可利用手性固定相通過(guò)色譜技術(shù)來(lái)分離對(duì)映體。所述純立體異構(gòu)體形式還可以衍生自適當(dāng)起始原料的相應(yīng)純立體異構(gòu)體形式，條件是反應(yīng)以立體特異性方式發(fā)生。優(yōu)選地，如果特異性的立體異構(gòu)體是希望的，所述化合物可通過(guò)立體特異性制備方法來(lái)合成得到。這些方法將有利地使用對(duì)映體純的起始原料。式(I)化合物的非對(duì)映體的外消旋體可通過(guò)常規(guī)方法獲得?？梢苑奖愕貞?yīng)用的適當(dāng)?shù)奈锢矸蛛x方法是例如選^^性結(jié)晶和色譜法，例如柱色i普法。對(duì)于某些式(I)化合物、其N(xiāo)-氧化物、鹽、溶劑化物、季胺或金屬絡(luò)合物以及用于其制備的中間體，沒(méi)有通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定絕對(duì)立體化學(xué)構(gòu)型。本領(lǐng)域:技術(shù)人員能夠-使用本領(lǐng)域已知的方法例如X-射線書(shū)f射方法來(lái)確定這樣的化合物的絕對(duì)構(gòu)型。素包括具有相同原子序數(shù)但不同質(zhì)量數(shù)的那些原子。舉丄個(gè)常規(guī)汁l的例子但不限于此，氫的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括C-13和C-14。本文中使用的術(shù)語(yǔ)"前藥"是指藥理學(xué)可接受的衍生物，例如酯、酰胺和磷酸酯，使得所得的這種衍生物在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物是在本發(fā)明式(I)化合物中定義的活性藥物。一般性地描述了前藥的GoodmanandGilman(ThePharmacologicalBasisofTherapeutics,8thed，McGraw-Hill,Int.Ed.1992,"BiotransformationofDrugs",p13—15)所著的參考文獻(xiàn)在此引用作為參考。前藥優(yōu)選具有優(yōu)良的水溶解度，提高的生物利用度，并且易于在體內(nèi)代謝成活性抑制劑。本發(fā)明化合物的前藥是通過(guò)修飾化合物的官能團(tuán)而制備得到的，修飾物可通過(guò)常規(guī)手段或者在體內(nèi)裂解為母化合物。優(yōu)選的是可藥用酯前藥，其在體內(nèi)可水解，并且衍生自具有羥基或羧基的式(I)化合物。體內(nèi)可水解的酯這樣的酯，其在人或動(dòng)物體內(nèi)水解，生成母酸或醇。對(duì)于羧基，合適的可藥用酯包括d-6烷氧基曱基酯，例如甲氧基甲基酯，d-6鏈烷酰基氧基曱基酯，例如新戊?；趸鶗趸?，2-苯并[C]呋喃酮基酯，C3-8環(huán)烷氧基羰基氧基d-6烷基酯，例如l-環(huán)己基羰基氧基乙基酯；1,3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮基曱基酯，例如5-曱基-l,3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮基曱基酯；和d-6烷氧基羰基氧基乙基酯，例如l-甲氧基羰基氧基乙基酯，其可以在本發(fā)明化合物中的任何羧基上形成。含有羥基的式(I)化合物的體內(nèi)可水解酯包括無(wú)機(jī)酯，例如磷酸酯，和Ct-酰氧基烷基醚以及相關(guān)化合物，作為體內(nèi)水解的結(jié)果，該酯裂解，生成母羥基。a-酰氧基烷基醚的實(shí)例包括乙酰氧基曱氧基醚和2,2-二曱基丙酰氧基-曱氧基醚。對(duì)于羥基，體內(nèi)可水解酯形成基團(tuán)的選擇包括鏈烷?；⒈綍貂；?、苯基乙?；腿〈谋郊柞；捅交阴；?、烷氧基羰基(以生成烷基碳酸酯)、二烷基氨基甲?；蚇-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲?；?以生成氨基曱酸酯)、二烷基氨基乙?；汪冗B接到苯甲?；h(huán)的3-或4-位上的嗎啉代和哌。泰子基。對(duì)于治療用途，式(I)化合物的鹽是其中抗衡離子可藥用的那些。然而，不可藥用的酸和石咸的鹽也可以應(yīng)用，例如，用于制備或純化本發(fā)明可藥用化合物。所有的鹽，無(wú)論是可藥用的還是不可藥用的，都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。上文提及的可藥用酸和堿加成鹽包括式(I)化合物能夠形成的有治療活性的無(wú)毒的酸和4^加成鹽?？伤幱盟峒映甥}可以通過(guò)用合適的酸處理堿形式來(lái)方便地獲得。合適的酸包括例如無(wú)機(jī)酸，如氫卣酸，例如鹽酸或氪溴酸，石充酸，硝酸，磷酸等；或者有機(jī)酸例如乙酸、丙酸、羥乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、馬來(lái)酸、富馬酸、蘋(píng)果酸(即羥基丁二酸)、酒石酸、檸檬酸、曱磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對(duì)曱苯磺酸、環(huán)拉酸、水楊酸、對(duì)氨基水楊酸、雙羥萘酸等。反之，所述鹽形式可以通過(guò)用合適的堿處理而轉(zhuǎn)化成游離堿形式。包含酸質(zhì)子的式(I)化合物經(jīng)由適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)或無(wú)機(jī)堿處理，還可以轉(zhuǎn)換成其無(wú)毒金屬或胺加成堿鹽形式。適當(dāng)?shù)膲A鹽形式包括，例如銨鹽，堿和堿土金屬鹽例如鋰、鈉、鉀、鎂、釣鹽等，與有機(jī)堿例如千星青霉素、N-甲基-D-葡萄糖胺、海巴明形成的鹽，以及與氨基酸例如精氨酸、賴(lài)氨酸形成的鹽等等。術(shù)語(yǔ)加成鹽還包括式(I)化合物及其鹽能夠形成的溶劑化物。這樣的溶劑化物是例如水合物、醇化物等等。上文中使用的術(shù)語(yǔ)"季胺"是定義式(I)化合物能夠形成的季銨鹽，是通過(guò)式(I)化合物的堿性氮與合適的季銨化劑的反應(yīng)而形成的，所述季銨化劑是例如任選取代的烷基卣、芳基卣或芳基烷基卣，例如甲基碘或千基碘。還可以使用具有良好離去基團(tuán)的其他試劑，例如三氟曱磺酸烷基酯，甲磺酸烷基酯，和對(duì)曱苯磺酸烷基酯。季胺具有帶正電荷的氮。可藥用抗衡離子包括氯、溴、碘、三氟乙酸根和乙酸根。選擇的抗衡離子可使用離子交換樹(shù)脂來(lái)引入。本發(fā)明化合物的W-氧化物形式包括式(I)化合物，其中一個(gè)或多個(gè)氮原子被氧化成所謂的iV-氧化物。應(yīng)當(dāng)理解，式(I)化合物可具有金屬結(jié)合、螯合、絡(luò)合物形成性質(zhì)，因此可以作為金屬絡(luò)合物或金屬螯合物存在。式(I)化合物的這樣的金屬衍生物包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。某些式(I)化合物還可以以其互變異構(gòu)體形式存在。雖然在上面的結(jié)構(gòu)式中沒(méi)有明顯指出這樣的形式，但是其也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。如上所述，式(I)化合物具有幾個(gè)不對(duì)稱(chēng)中心。為了更有效地指出這些不對(duì)稱(chēng)中心中的每一個(gè)，使用如在下面的結(jié)構(gòu)式中給出的編號(hào)系統(tǒng)。不對(duì)稱(chēng)中心存在于大環(huán)的1、4和6位，以及在吡咯烷環(huán)的3，碳原子上。這些不對(duì)稱(chēng)中心的每一個(gè)都可以以R或S構(gòu)型存在。在1位的立體化學(xué)優(yōu)選與L-氨基酸構(gòu)型的立體化學(xué)，即L-脯氨酸的立體化學(xué)相對(duì)應(yīng)。式(I)化合物包括如在下面結(jié)構(gòu)片段中顯示的環(huán)丙基:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中C7代表在7位的碳，并且在4位和6位的碳是環(huán)丙烷環(huán)的不對(duì)稱(chēng)碳原子。盡管本發(fā)明化合物的其他部分上有其他可能的不對(duì)稱(chēng)中心，存在這兩個(gè)不對(duì)稱(chēng)中心意味著化合物可以作為非對(duì)映體混合物存在，例如作為式(I)化合物的非對(duì)映體的混合物存在，其中在7位的碳與羰基是順式，或者與酰胺是順式，如下所示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>C7與羰基呈順式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>C7與酰胺呈順式一個(gè)實(shí)施方案涉及式(I)化合物，其中7-位碳與羰基呈順式構(gòu)型。另一個(gè)實(shí)施方案涉及式(I)化合物，其中在4-位碳上的構(gòu)型為R。式(I)化合物的一個(gè)具體亞組是這樣的化合物，其中7-位碳與羰基呈順式構(gòu)型，并且其中在4-位碳上的構(gòu)型為R。式(I)化合物還包括脯氨酸殘余物。優(yōu)選的是這樣的式(I)化合物，其中在1(或5')位的取代基與在3'位的取代基呈反式構(gòu)型。值得特別關(guān)注的是式(I)化合物，其中1位具有與L-脯氨酸相一致的構(gòu)型，并且在3位的取代基與l位呈反式構(gòu)型。優(yōu)選地，式(I)化合物具有如下所示的式(I-C)結(jié)構(gòu)所顯示的立體化學(xué)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>(I-C)優(yōu)選地，在式(I)化合物、(I-C)或式(I)化合物的任何亞組中，在碳原子7與8之間的虛線是雙鍵。更優(yōu)選地，所述在碳原子7與8之間的雙鍵是順式構(gòu)型。其他亞組，還包括這樣的化合物的任何W-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物和立體化學(xué)異構(gòu)體形式。當(dāng)n是2時(shí)，通過(guò)"n"加括號(hào)的部分-CHr與式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組中的乙二基相對(duì)應(yīng)。當(dāng)n是3時(shí)，通過(guò)"n"加括號(hào)的部分-CH2-與式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組中的丙二基相對(duì)應(yīng)。當(dāng)n是4時(shí)，通過(guò)"n"加括號(hào)的部分-CH2-與式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組中的丁二基相對(duì)應(yīng)。當(dāng)n是5時(shí)，通過(guò)"n"加括號(hào)的部分-CH2-與式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組中的戊二基相對(duì)應(yīng)。當(dāng)n是6時(shí)，通過(guò)"n"加括號(hào)的部分-CHr與式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組中的己二基相對(duì)應(yīng)。式(I)化合物的特別亞組是其中n為4或5的那些化合物。本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中W是氫或曱基。本發(fā)明的實(shí)施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中W是氫或CM烷基，即曱基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基或異丁基。、—、、、-。、、-、。、組，其中W是氫。本發(fā)明化合物的另一個(gè)亞組是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中W是甲基。式(I)化合物由3個(gè)主要構(gòu)件Pl、P2和P3構(gòu)成，每個(gè)構(gòu)件通過(guò)彎曲的正弦樣線劃界。構(gòu)件Pl還含有Pl，尾端基。用星號(hào)標(biāo)記的羰基可以是構(gòu)件P2或構(gòu)件P3的一部分。構(gòu)件Pl與P2、P2與P3以及Pl與Pl，的連接涉及形成酰胺鍵。構(gòu)件Pl與P3的連接涉及形成雙鍵。構(gòu)件Pl、Pl，、P2和P3的連接以制備式(I)化合物可以以任何給定的順序進(jìn)行。最后一個(gè)步驟涉及環(huán)合，由此形成大環(huán)。OMe(I)下文描述的合成方法意味著可適用于外消旋體、立體化學(xué)純中間體或作為任何立體異構(gòu)體混合物的終產(chǎn)物。外消旋體或立體化學(xué)混合物可在合成方法的任何階段分離成立體異構(gòu)體形式。在一個(gè)實(shí)施方案中，中間體和終產(chǎn)物具有在如上式(I-C)化合物中具體說(shuō)明的立體化學(xué)。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物(I)通過(guò)首先形成酰胺鍵，隨后形成在P3和Pl之間的雙鍵連接，并伴隨環(huán)化成大環(huán)來(lái)制備。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，其中C7和C8之間的鍵是雙鍵的式(I)化合物(其是如上所定義的式(I-a)化合物)可如以下反應(yīng)方案所示來(lái)制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>大環(huán)的形成可在合適的金屬催化劑，例如由Miller,S丄,Blackwell,H.E.,Grubbs,R.H.J.Am.Chem.Soc.118,(1996)，9606-9614;Kingsbury,J.S.,Harrity,J.P.A.,Bonitatebus,P.J.，Hoveyda,A.H.,J.Am.Chem.Soc.121,(1999),791-799;andHuang等人，J.Am.Chem.Soc.121,(1999),2674-2678報(bào)道的基于Ru的催化劑，例如Hoveyda-Grubbs催化劑存在下經(jīng)烯烴復(fù)分解反應(yīng)來(lái)進(jìn)行。可使用空氣穩(wěn)定的Ru催化劑，例如氯化二(三環(huán)己基膦)-3-苯基-lH-茚-l-亞基釕(NeolystM盧)或二氯化二(三環(huán)己基膦)[(苯硫基)亞曱基]釕(IV)。可使用的其它催化劑是Grubbs第一和第二代催化劑，即分別亞千基-二(三環(huán)己基膦)二氯化釕和(l,3-二-(2,4,6-三曱基苯基)-2-亞咪唑烷基)二氯化(苯基亞曱基)-(三環(huán)己基膦)釕。值得特別關(guān)注的是Hoveyda-Grubbs第一代和第二代催化劑，它們分別是二氯化(鄰異丙氧基苯基亞甲基)(三環(huán)己基膦)-釕(II)和1,3-二-(2,4,6-三曱基苯基)-2-亞咪唑烷基)二氯化(鄰異丙氧基笨基亞曱基)釕。含有其他過(guò)渡金屬例如Mo的其他催化劑也可用于該反應(yīng)。復(fù)分解反應(yīng)可在合適的溶劑中進(jìn)行，所述溶劑是例如醚，例如THF、二氧雜環(huán)己烷；卣代烴，例如二氯曱烷、CHC13、1,2-二氯乙烷等。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，復(fù)分解反應(yīng)在甲苯中進(jìn)行。這些反應(yīng)在氮?dú)夥障掠诟邷叵逻M(jìn)行。其中大環(huán)中C7和C8之間的連接是單鍵的式(I)化合物，即式(I-b)化合物，可通過(guò)將在式(I-a)化合物中的C7-C8雙鍵還原而由式(I-a)化合物制備。還原可用氫氣在貴金屬催化劑，例如Pt、Pd、Rh、Ru或阮內(nèi)鎳存在下通過(guò)催化氫化進(jìn)行。值得關(guān)注的是以氧化鋁為載體的Rh。氫化反應(yīng)優(yōu)選在溶劑，例如醇如甲醇、乙醇，或醚例如THF或其混合物中進(jìn)行，也可在這些溶劑或溶劑混合物中加入水?？梢栽诤铣傻娜魏坞A段，即在環(huán)合之前或之后，或者在環(huán)合與如上所述的還原之前或者之后，將尾端基Pl，與Pl構(gòu)件連接。可通過(guò)在兩個(gè)部分之間形成酰胺4建而將Pl，與Pl連接。在一個(gè)實(shí)施方案中，如下面的反應(yīng)方案所述，在合成化合物(i)的最后一個(gè)步驟引入pr基團(tuán)，其中G代表基團(tuán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>在該方法中，通過(guò)酰胺形成反應(yīng)，例如下文描述的用于形成酰胺鍵的任何方法，將環(huán)丙基磺酰胺(IV)與中間體(III)反應(yīng)。特別是，可將(III)用偶聯(lián)劑例如W-羰基二咪唑(CDI)、EEDQ、IIDQ、EDCI或苯并三唑-l-基-氧基-三-p比咯烷子基鑄六氟磷酸鹽(作為PyBOP⑧商購(gòu)獲得)在溶劑例如THF中處理，然后與所需環(huán)丙基磺酰胺(IV)在堿例如三烷基胺如三乙胺或二異丙基乙胺，或1,8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)或二異丙基乙胺存在下反應(yīng)。如上面的反應(yīng)中描述的(III)中的羧酸的活化可以導(dǎo)致內(nèi)環(huán)合反應(yīng)，生成下式的氮雜內(nèi)酯其中W和n如上面所定義，并且其中立體中心可具有如上面所指出的立體化學(xué)構(gòu)型，例如在(I-c)中所指出的。可以使用常規(guī)方法從反應(yīng)混合物中分離出中間體(III-a),然后將分離的中間體(III-a)與(IV)反應(yīng)，或者，可以將含有(III-a)的反應(yīng)混合物與(IV)進(jìn)一步反應(yīng)，而不分離出(III-a)。在一個(gè)實(shí)施方案中，其中用偶聯(lián)劑進(jìn)行的反應(yīng)是在水不可混溶的溶劑中進(jìn)行的，可將含有(III-a)的反應(yīng)混合物用水或弱堿性的水洗滌以除去所以水溶性副產(chǎn)物。然后可將由此獲得的洗滌的溶液與(IV)反應(yīng)，而沒(méi)有另外的純化步驟。另一方面，中間體(m-a)的分離可以提供一些優(yōu)點(diǎn)，因?yàn)樵谌芜x的進(jìn)一步純化之后，將分離的產(chǎn)物與(IV)反應(yīng)，能生成較少的副產(chǎn)物，并且反應(yīng)更易于進(jìn)行后處理。式(I)化合物還可以如下面的反應(yīng)方案所示，通過(guò)將中間體(V)用式(VI)的壹啉醚化而制得<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>(VI)中的x表示羥基或離去基團(tuán)，例如卣化物，例如溴化物或氯化物，或芳基磺酰基，例如曱磺酸酯、三氟曱磺酸酯或曱苯磺酸酯等。在一個(gè)實(shí)施方案中，(V)與(VI)的反應(yīng)是O-芳基化反應(yīng)，x代表離去基團(tuán)。該反應(yīng)可根據(jù)E.M.Smith等人(J.Med.Chem.(1988)，31,875-885)描述的方法進(jìn)行。該反應(yīng)尤其在;成，優(yōu)選強(qiáng)》咸存在下在反應(yīng)惰性溶劑例如上述用于酰胺鍵形成的溶劑之一中進(jìn)行。在一個(gè)實(shí)施方案中，原料(V)與喹啉(VI)在足夠強(qiáng)以由羥基轉(zhuǎn)移氫原子的堿，例如堿性堿金屬氬化物，例如LiH或氫化鈉或堿性》咸金屬醇鹽，例如曱醇或乙醇鈉或鉀、A又丁醇鉀存在下，在反應(yīng)惰性溶劑，例如偶才及非質(zhì)子溶劑，例如DMA、DMF等中反應(yīng)。將所生成的醇鹽與芳基化試劑(VII)反應(yīng)，其中X是如上所述合適的離去基團(tuán)。用此類(lèi)型O-芳基化反應(yīng)將(V)轉(zhuǎn)化為(I)不改變攜帶羥基或-O-喹啉基團(tuán)的碳上的立體化學(xué)構(gòu)型?；蛘?，(V)與(VI)的反應(yīng)還可以經(jīng)由Mitsunobu反應(yīng)來(lái)進(jìn)行(Mitsunobu,1981,Synthesis,January,1-28;Rano等人,TetrahedronLett,1995,36,22,3779-3792;Krchnak等人，TetrahedronLett.,1995,36,5,6193-6196;Richter等人，TetrahedronLett.,1994，35,27,4705-4706)。該反應(yīng)包括用其中X是羥基的喹啉(VI)在三苯基膦和活化劑，例如偶氮二甲酸二烷基酯，例如偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)、偶氮二曱酸二異丙酯(DIAD)等存在下處理中間體(V)。Mitsunobu反應(yīng)改變攜帶羥基或-O-喹啉基團(tuán)的碳上的立體化學(xué)構(gòu)型其中W是氫的式(I)化合物，所述化合物還可以由(I-d)代表，還可以由其中PG代表氮保護(hù)基的相應(yīng)的氮-保護(hù)的中間體(VII)制得。下文中描述了合適的N-保護(hù)基。在一個(gè)實(shí)施方案中，(VII)中的PG是千基或取代的千基，特別是4-曱氧基千基。(VII)(i-d)在上面反應(yīng)中的原料(vn)可以按照制備式(i)化合物所描述的方法，但是使用其中基團(tuán)W是PG的中間體來(lái)制得?；蛘撸瑸榱酥苽涫?I)化合物，首先在構(gòu)件P2與Pl之間形成酰胺鍵，然后將P3構(gòu)件與Pl-P2中的Pl部分偶聯(lián)，隨后在P3與P2-P1-P3中的P2部分之間形成酰胺鍵，伴隨著閉環(huán)。同樣，可以將P1，尾端基與Pl構(gòu)件在式(I)化合物合成的任何階段鍵合，例如，在構(gòu)件P2與Pl偶聯(lián)之前或者之后；在構(gòu)件P3與Pl偶聯(lián)之前或者之后；或者在構(gòu)件P3與P2偶聯(lián)之前或者之后，伴隨著閉環(huán)。另一合成方法是，在構(gòu)件P2與P3之間形成酰胺鍵，然后將構(gòu)件Pl與P3偶聯(lián)，最后在Pl與P2之間形成酰胺鍵，同時(shí)閉環(huán)。同樣，可以將P1，尾端基與Pl構(gòu)件在式(I)化合物合成的任何階段鍵合，在這種方法中，在構(gòu)件P2與P3偶聯(lián)之前或者之后；在構(gòu)件P1與P3偶聯(lián)之前或者之后；或者在構(gòu)件Pl與P2偶聯(lián)之前或者之后，伴隨著閉環(huán)。構(gòu)件Pl與P3可通過(guò)在碳7與碳8之間形成雙鍵來(lái)連接，如果需要的話，然后將C7-C8雙鍵還原?？蓪⒂纱诵纬傻腜l-P3構(gòu)件與構(gòu)件P2偶聯(lián)，然后通過(guò)形成酰胺鍵來(lái)環(huán)合。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，不將構(gòu)件P1-P3還原，并且以這樣的形式與P2偶聯(lián)，環(huán)合，生成化合物(I-1)。在任一上述方法中，構(gòu)件Pl和P3可通過(guò)雙4建形成，例如通過(guò)下文描述的烯烴復(fù)分解反應(yīng)或Wittig型反應(yīng)來(lái)連接。應(yīng)當(dāng)注意，在式(I)化合物中，構(gòu)件P2與P3之間的酰胺4建形成可以在脲部分的兩個(gè)不同位置完成。第一個(gè)酰胺鍵形成包括將吡咯烷環(huán)的氮與作為P3構(gòu)件一部分的相鄰活化羰基(用星號(hào)表示的)反應(yīng)。第二個(gè)酰胺鍵形成包括將作為P2構(gòu)件一部分的用星號(hào)表示的活化羰基與NHRW基團(tuán)反應(yīng)，其中R^如式(I)化合物或其亞組中所定義，并且其中W還可以是氮保護(hù)基；且R是P3烷基部分?；罨挠眯翘?hào)表示的羰基可通過(guò)將吡咯烷或胺NHRR1與光氣或光氣衍生物反應(yīng)來(lái)引入?？梢允紫戎苽涓鱾€(gè)構(gòu)件，然后偶聯(lián)在一起，或者，可以將構(gòu)件的前體偶聯(lián)在一起，并且在以后的步驟修飾，以得到所需的分子組成?？梢詫⒃诿恳粋€(gè)構(gòu)件中的官能團(tuán)保護(hù)起來(lái)以避免副反應(yīng)。酰胺鍵的形成可以使用標(biāo)準(zhǔn)方法，例如在肽合成中用于偶聯(lián)氨基酸的方法來(lái)進(jìn)行。后一方法包括一個(gè)反應(yīng)物的羧基與另一個(gè)反應(yīng)物的氨基的脫水偶聯(lián)，以形成酰胺鍵。酰胺鍵形成可以這樣進(jìn)行在偶聯(lián):劑存在下將原料反應(yīng)，或者，將羧基官能團(tuán)轉(zhuǎn)化成活性形式例如活性酯或酰氯或酰溴。關(guān)于這樣的偶聯(lián)反應(yīng)以及其中所使用的試劑的一般描述可以參見(jiàn)肽化學(xué)的一般教科書(shū)，例如M.Bodanszky,"PeptideChemistry",2ndreved.,Springer-Verlag,Berlin,Germany,(1993)，下文簡(jiǎn)稱(chēng)為Bodanszky,其內(nèi)容引入本文以供參考。形成酰胺鍵的偶聯(lián)反應(yīng)的實(shí)例包括疊氮化物方法，混合碳酸-羧酸酐(氯曱酸異丁酯)方法，碳二亞胺(二環(huán)己基碳二亞胺、二異丙基碳二亞胺或水溶性碳二亞胺例如W-乙基-W'-[(3-二曱基氨基)丙基]碳二亞胺)方法，活性酯(對(duì)硝基苯基酯、N-羥基琥珀酰亞氨基酯)方法，Woodward試劑K-方法，羰基二咪唑方法，磷試劑或氧化-還原方法。這些方法當(dāng)中的某一些可以通過(guò)加入合適的催化劑來(lái)促進(jìn)，例如，在碳二亞胺方法中，通過(guò)加入l-羥基苯并三唑、DBU(1,8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳_7_烯)或4-DMAP來(lái)促進(jìn)反應(yīng)。另外的偶聯(lián)劑是(苯并三唑-l-基基)三-(二曱基氨基)錛六氟磷酸鹽，單獨(dú)使用或者在1-羥基苯并三唑或4-DMAP存在下；或者2-(lH-苯并三唑-l-基)-N,N,N',N'-四曱基脲四氟硼酸鹽，或0-(7-氮雜苯并三唑-l-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽。這些偶耳關(guān)反應(yīng)可以在溶液(液相)或固相中進(jìn)^f亍。優(yōu)選的酰胺鍵形成方法采用N-乙基氧基羰基-2-乙氧基-l,2-二氫喹啉(EEDQ)或N-異丁氧基-羰基-2-異丁氧基-1,2-二氫喹啉(IIDQ)來(lái)進(jìn)行。與經(jīng)典的酸酐方法不同，EEDQ和IIDQ不需要堿，也不用低反應(yīng)溫度。方法通常包括使等摩爾量的羧基與胺組分在有機(jī)溶劑(可使用多種不同溶劑)反應(yīng)，隨后加入過(guò)量EEDQ或IIDQ，并且將混合物在室溫下攪拌。偶聯(lián)反應(yīng)優(yōu)選在惰性溶劑中進(jìn)行，所述惰性溶劑是例如卣代烴，例如二氯甲烷、氯仿，偶極非質(zhì)子溶劑例如乙腈、二甲基甲酰胺、二曱基乙酰胺、DMSO、HMPT,醚例如四氬呋喃(THF)。在很多情況下，偶聯(lián)反應(yīng)是在合適的堿存在下進(jìn)行，所迷堿是例如叔胺，例如三乙胺、二異丙基乙胺(DIPEA)、N-曱基嗎啉、N-甲基吡咯烷、4-DMAP或1,8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)。反應(yīng)溫度可以為0°C-50°C,并且反應(yīng)時(shí)間可以為15分鐘-24小時(shí)?？梢詫⒖蛇B接在一起的構(gòu)件中的官能團(tuán)保護(hù)以防止形成不需要的鍵?？墒褂玫暮线m的保護(hù)基列在例如Greene,"ProtectiveGroupsinOrganicChemistry",JohnWiley&Sons,NewYork(1999)和"ThePeptides:Analysis,Synthesis,Biology",Vol.9,AcademicPress,NewYork(1987)中。下文中簡(jiǎn)稱(chēng)為Greene。歡基可以作為酯被保護(hù)，可以將酯裂解以給出羧酸。可使用的保護(hù)基包括l)烷基酯例如曱基、三曱基曱硅烷基和叔丁基酯；2)芳烷基酯例如千基和取代的千基酯；或3)可通過(guò)弱堿或弱還原手段裂解的酯，例如三氯乙基和苯曱酰曱基酯。氨基可通過(guò)多種N-保護(hù)基保護(hù)，例如1)?；缂柞；?、三氟乙?；⑧彵蕉柞；蛯?duì)甲苯磺酰基；2)芳族氨基甲酸酯基團(tuán)例如芐基氧基羰基(Cbz或Z)和取代的芐基氧基羰基，和9-芴基甲基氧基羰基(Fmoc);3)脂族氨基曱酸酯基團(tuán)例如叔丁基氧基羰基(Boc)、乙氧基羰基、二異丙基曱氧基-羰基和烯丙氧基羰基；4)環(huán)烷基氨基曱酸酯基團(tuán)，例如環(huán)戊基氧基羰基和金剛烷基氧基羰基；5)烷基例如三苯基甲基，千基或取代的千基例如4-曱氧基千基；6)三烷基曱硅烷基例如三曱基甲硅烷基或叔丁基二曱基曱硅烷基；和7)含有巰基的基團(tuán)例如苯硫基羰基和二疏代琥珀?；?yōu)選的氨基保護(hù)基是Boc和Fmoc。優(yōu)選地，在下一個(gè)偶聯(lián)步驟之前，將氨基保護(hù)基裂解。N-保護(hù)基可使用本領(lǐng)域已知方法來(lái)除去。當(dāng)使用Boc基團(tuán)時(shí)，選擇的方法是三氟乙酸，單獨(dú)使用或者在二氯甲烷中，或者HC1在二氧雜環(huán)己烷或乙酸乙酯中的溶液。然后將所得銨鹽在偶聯(lián)之前或者在原位用堿溶液中和，所述堿溶液是例如水緩沖液，或者叔胺在二氯甲烷或乙腈或二甲基-甲酰胺中的溶液。當(dāng)使用Fmoc基團(tuán)時(shí)，選擇的試劑是在二曱基甲酰胺中的哌咬或取代的哌啶，但是可以使用任何仲胺。脫保護(hù)在0。C-室溫，通常在15-25。C或20-22。C溫度下進(jìn)行。會(huì)干擾構(gòu)件的偶合反應(yīng)的其他官能團(tuán)也可以被保護(hù)。例如羥基可保護(hù)成卡基或取代的千基醚，例如4-曱氧基千基醚、苯曱?；蛉〈谋綍貂；?，例如4-硝基苯甲酰基酯，或用三烷基甲硅烷基(例如三曱基甲硅烷基或叔丁基二甲基曱硅烷基)保護(hù)。另外的氨基可以通過(guò)可選擇性地裂解的保護(hù)基保護(hù)起來(lái)。例如，當(dāng)Boc用作a-氨基保護(hù)基時(shí)，下列側(cè)鏈保護(hù)基是合適的對(duì)曱苯磺酰基(對(duì)曱苯磺酰基)部分可用于保護(hù)另外的氨基；千基(Bn)醚可用于保護(hù)羥基；并且節(jié)基酯可用于保護(hù)另外的羧基?；蛘?，當(dāng)選擇Fmoc用于a-氨基保護(hù)，通常基于叔丁基的保護(hù)基是可接受的。例如，Boc可用于另外的氨基；叔丁基醚用于羥基；并且叔丁基酯用于另外的羧基。任何保護(hù)基可以在合成操作的任何階段除去，但是優(yōu)選地，不參與反應(yīng)步驟的任何官能團(tuán)的保護(hù)基在大環(huán)構(gòu)建完成之后被除去。保護(hù)基的除去可以通過(guò)保護(hù)基的選擇所指示的方法來(lái)進(jìn)行，所述方法是本領(lǐng)域沖支術(shù)人員已知的。式(II)中間體可如下面的反應(yīng)方案所示，通過(guò)將中間體(VIII)與烯胺(IX)在羰基引入劑存在下反應(yīng)來(lái)制得。(V"l)L是PG1,L是基團(tuán)(a)(II)L代表O-保護(hù)基PG1或以下基團(tuán)OMeo-保護(hù)基可以是本文提及的任何基團(tuán)，特別是苯甲?；蛉〈谋郊柞；?，例如4-硝基苯曱?；Ｋ鲷驶雱┌ü鈿?、光氣衍生物例如羰基二咪唑(CDI)等。在一個(gè)實(shí)施方案中，將(vni)與co引入劑在合適的堿和溶劑存在下反應(yīng)，所述堿和溶劑可以是在如上所述的酰胺形成反應(yīng)中使用的堿和溶劑。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，堿是碳酸氬鹽例如NaHC03,或叔胺例如三乙胺等，并且溶劑是醚或卣代烴例如THF、CH2C12、CHC13等。然后，如上面的反應(yīng)方案中所示，加入胺(IX),由此獲得中間體(XII)或(XII-a)。使用類(lèi)似反應(yīng)條件的另一方法包括，首先將CO引入劑與胺(IX)反應(yīng)，然后將由此形成的中間體與(vm)反應(yīng)。當(dāng)L是PG時(shí)，(VIII)與(IX)的反應(yīng)生成中間體(II-a)?？蓪⑦@些中間體脫保護(hù)，例如當(dāng)PG1是苯曱?；〈谋郊柞；鶗r(shí)，通過(guò)與堿金屬氫氧化物(LiOH、NaOH、KOH)反應(yīng)，特別是，當(dāng)PGi是4-硝基苯曱酰基時(shí)，與LiOH反應(yīng)，所述反應(yīng)在包含水與水溶性有機(jī)溶劑例如鏈烷醇(甲醇、乙醇)和THF的含水介質(zhì)中進(jìn)行。按照上述關(guān)于(V)與(VI)的反應(yīng)所述，將所得醇(即其中L是氫的中間體(II-a))與中間體(VI)反應(yīng)，該反應(yīng)生成中間體(II)。式(III)中間體可這樣制得；如下所述，首先將酯中間體(X)環(huán)合生成大環(huán)酯(XI),然后將其轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的大環(huán)羧酸(m):L是PG1(III-a)L是基團(tuán)(a)(III)L如上所述，且PGZ是羧基保護(hù)基，例如一個(gè)上述羧基保護(hù)基，特別是Cw烷基或千基酯，例如甲基、乙基或叔丁基酯。？01基團(tuán)可使用本領(lǐng)域已知方法來(lái)除去，曱基或乙基酯通過(guò)在含水介質(zhì)中用堿金屬氫氧化物處理來(lái)除去，叔丁基酯用弱酸除去，或者節(jié)基酯通過(guò)催化氫化來(lái)除去。當(dāng)L是基團(tuán)(a)時(shí)，該反應(yīng)生成中間體(III)。這些中間體可通過(guò)除去是O-保護(hù)基的L，并且將由此形成的醇用如上所述的中間體(VI)醚化來(lái)制得。式(VII)中間體可這樣制得將其中PG是如上所述的氮保護(hù)基的中間體(xn)環(huán)合，生成在大環(huán)(vn-a)中具有雙鍵的中間體(vii),可將其還原，生成在大環(huán)(VII-b)中具有單鍵的相應(yīng)的中間體(VII):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>L是PG1(VII-a匿l)L是PG1(VII-b-l)L是基團(tuán)(a)(VII-a)L是基團(tuán)(a)(VII-b)L如上所定義。當(dāng)L是基團(tuán)(a)時(shí)，該反應(yīng)生成中間體(VII-a)或(VII-b)。這些中間體可通過(guò)除去是O-保護(hù)基的L,并且將由此形成的醇用如上所述的中間體(VI)醚化來(lái)制得。在上述反應(yīng)中的磺?；０坊鶊F(tuán)可以是酯(即如上所定義的-OPGa基團(tuán))，可將其除去，并且按照上文描述的方法與環(huán)丙基酰胺(IV)縮合。環(huán)丙基磺酰胺基團(tuán)可以在合成的任何階段，作為如上所述的最后一個(gè)步驟，或者如下面的反應(yīng)方案所示在大環(huán)形成之前引入。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>L如上所定義，PG2代表如上所定義的羧基，且1^是氮保護(hù)基(如上所定義的PG),或者U是基團(tuán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>其中W和n如上所定義，或者其中W還可以代表氮保護(hù)基(如上所定義的基團(tuán)PG)。顯然，當(dāng)W代表氮保護(hù)基時(shí)，其可以在合成的所需階段除去。其中LM戈表基團(tuán)(b)的中間體(XIV)相當(dāng)于中間體(II)或(II-a),并且可以如上所述進(jìn)一步處理。Pl和P2構(gòu)件的偶聯(lián)按照上述方法，使用酰胺形成反應(yīng)，將P1和P2構(gòu)件連接。Pl構(gòu)件可具有羧基保護(hù)基PG2(如在(XVI-a)酯)，或者可以已經(jīng)與Pl，基團(tuán)連接(如在(XVI-b)中)。！^是氬或如上所述的基團(tuán)L。在上述方案的方法中，使用酰胺形成反應(yīng)例如上述標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件將環(huán)丙基氨基酸(XVI-a)或(XVI-b)與P2構(gòu)件的酸官能團(tuán)偶聯(lián)。采用用于所用保護(hù)基的合適條件除去(xm)中的酸保護(hù)基團(tuán)，隨后如上所述與環(huán)丙基磺酰胺(iv)偶聯(lián)，同樣得到中間體(xiv)。在一個(gè)實(shí)施方案中，U是基團(tuán)(b),并且這些反應(yīng)涉及P1與P2-P3的偶聯(lián)，這生成上述中間體(X)或(II)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，y是如上所述的N-保護(hù)基PG,并且偶聯(lián)反應(yīng)生成中間體(XV-a),可使用如上所述的反應(yīng)條件除去基團(tuán)PG而由其獲得中間體(XIII-a):在一個(gè)實(shí)施方案中，反應(yīng)中的PG是BOC基團(tuán)。此外，當(dāng)I^是氫時(shí)，原料是Boc-L-羥基脯氨酸。基團(tuán)y可以是O-保護(hù)基PG1,其引入到原料(XV)中，其中1^是氫，其朝著基團(tuán)PG而被選擇性地裂解。P3與P2構(gòu)件的偶聯(lián)按照上述關(guān)于(VII)與(IX)偶聯(lián)的方法，使用脲形成反應(yīng)，來(lái)連接P3和P2構(gòu)件。下面的反應(yīng)方案中呈現(xiàn)了一種一般方法，其中L如上所定義，并且L3是基團(tuán)-0-P或以下基團(tuán)在(XVIII)中，R1如上所定義，但是也可以是氮保護(hù)基，其可以在合成的所需階段用氮脫保護(hù)劑除去。當(dāng)(xvm)中的L3是基團(tuán)-OPG2時(shí),可除去PG"基團(tuán)，并且將所得酸與環(huán)丙基氨基酸(XVI-a)或(XVI-b)偶聯(lián),<formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>生成其中！^是基團(tuán)(b)的中間體(XIII)或(XIV)。用于制備式(iM乜合物的構(gòu)件pi、pr、p2和p3可由已知的中間體制備，下文更詳細(xì)說(shuō)明了多種這樣的合成。合成p2構(gòu)件構(gòu)件p2可以通過(guò)0-芳基化反應(yīng)制得，例如按照上述方法，如下面的反應(yīng)方案所示，其中1^如上所定義，并且特別是N-保護(hù)基PG,X如上所定義，且l/是羥基、基團(tuán)-OPG2,其中PGZ是羧基保護(hù)基，例如上述任何羧基保護(hù)基；或者L"是p1基團(tuán)，例如如上所定義的基團(tuán)(c)或(d)。將原料(XIX)與試劑(VI)按照上文關(guān)于由(V)和(VI)合成(I-d)的方法反應(yīng)。類(lèi)似地，該反應(yīng)可以在保留(用作為離去基團(tuán)的X芳基化)或反轉(zhuǎn)(Mitsunobu反應(yīng))攜帶羥基的碳原子上的立體化學(xué)的情況下進(jìn)行。在用作為離去基團(tuán)的X進(jìn)行的芳基化中，l/還可以是羥基，在Mitsunobu反應(yīng)，！/是基團(tuán)-OPG2。在一個(gè)實(shí)施方案中，基團(tuán)1^是PG,其是Boc,并且原料(vni)是商購(gòu)獲得的Boc-L-羥基脯氨酸，或者是其任何其他立體異構(gòu)體形式。當(dāng)(XX)中的OPG、于，羧基保護(hù)基PGZ可以使用如上所述的方法除去，獲得了羥基脯氨酸衍生物(XVII)。在一個(gè)實(shí)施方案中，PG1是Boc,且PGZ是低級(jí)烷基酯，特別是甲基或乙基酯?？赏ㄟ^(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法將所述酯水解成酸，例如使用HC1在曱醇或乙醇中的溶液進(jìn)行酸水解，或者用堿金屬氬氧化物，例如氳氧化鈉，或優(yōu)選氫氧化鋰來(lái)水解。中間體(VI)可以使用已知原料通過(guò)本領(lǐng)域已知方法制得。他們可如下所示制得在溶劑例如二氯曱烷中，在一種或多種路易斯酸例如三氯化硼和三氯化鋁存在下，使用酰化劑例如乙酰氯等將商購(gòu)獲得或通過(guò)本領(lǐng)域已知方法制備的3-曱氧基苯胺(XXII)進(jìn)行Friedel-Craft?；?，獲得(XXIII)。將(XXIII)與4-異丙基-漆唑-2-曱酸(XXIV)在堿性條件下偶聯(lián)，例如在吡啶中，在羧酸基團(tuán)活化劑例如P0C13存在下進(jìn)行偶聯(lián)，然后在^4性條件例如^又丁醇鉀在^又丁醇中的溶液下進(jìn)行閉環(huán)和脫水，獲得喹啉衍生物(VI-a)?？蓪⒑笳咿D(zhuǎn)化成其中LG是離去基團(tuán)的(VI-b),例如將(XII)與卣化劑如磷酰氯等反應(yīng)，或者與芳基磺酰氯例如甲苯磺酰氯反應(yīng)。2-羧基-4-異丙基-噻唑(XXIV)是用本領(lǐng)域已知方法，特別是如下所示合成的<formula>formulaseeoriginaldocumentpage34</formula>將硫代草氨酸乙S旨(XXVI)與卩-溴酮(XXVII)反應(yīng)以形成噻唑基甲酸酯(xxvm),將其水解成相應(yīng)的酸(xxiv)。將在這些中間體中的乙酯用如上所定義的其他羧基保護(hù)基PG2替代。中間體(XXIII)可按照Brown等人，J.Med.Chem.1989,32,807-826中描述的方法或在以下反應(yīng)方案中描繪的方法制得。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage34</formula>將商購(gòu)獲得的原料乙酰乙酸乙酯和乙氧基亞曱基丙二腈在合適的堿例如乙醇鈉以及溶劑例如乙醇等存在下反應(yīng)。該反應(yīng)獲得了中間體(XXIX)。將該中間體水解，例如用堿如堿金屬氬氧化物例如NaOH或LiOH在合適的溶劑例如乙醇/水中水解，以獲得(XXX)。將中間體(XXX)脫羧形成中間體(XXXI),該反應(yīng)在高溫下進(jìn)行直至氣體釋放停止，優(yōu)選在堿性溶劑例如喹啉中進(jìn)行。在合適的溶劑(例如DMF等)中，在合適的堿(例如K2C03)存在下，用特別是曱基化劑例如Mel將中間體(XXXI)甲基化，獲得(XXXII)。可將中間體(XXXII)與格氏試劑例如MeMgBr在合適的溶劑(例如THF)中反應(yīng)，然后水解，例如用鹽酸水解，獲得中間體(XXIII)。合成Pl構(gòu)件用于制備P1片段的環(huán)丙烷氨基酸可商購(gòu)獲得或者可以使用已知方法制得。氨基-乙烯基-環(huán)丙基乙酯(XXI-a)可以按照WO00/09543中描述的方法獲得或者如下面的反應(yīng)方案所示制得，其中PGS是如上所定義的羧基保護(hù)基<XVI-a-1)(xv|-a)將商購(gòu)獲得的或者易于獲得的亞胺(xxxm)用i,4-二囟代丁烯在堿存在下處理，生成(xxxiv),將其水解后獲得具有與羧基呈順式的烯丙基取代基的環(huán)丙基氨基酸(XVI-a)。拆分對(duì)映體混合物(XVI-a),獲得(XVI-a-l)。所述拆分使用本領(lǐng)域已知方法進(jìn)行，例如酶分離；用手性酸結(jié)晶；或化學(xué)衍生；或手性柱色譜?；酋０费苌?XVI-b)可按照下面的反應(yīng)方案獲得，其中R和PG如上所定義。35\\<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>(XVI-C)與磺酰胺(IV)的反應(yīng)是酰胺形成方法，其可以按照上述方法來(lái)進(jìn)行。該反應(yīng)生成中間體(XVI-d),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法例如上述方法將氨基保護(hù)基從所述中間體中除去。這導(dǎo)致形成所需中間體(XVI-b)。原料(XVI-c)可通過(guò)首先引入N-保護(hù)基PG以及隨后除去基團(tuán)PGS而由中間體(XVI-a)制得。合成P3構(gòu)件P3構(gòu)件(IX)可根據(jù)本領(lǐng)域已知方法制得。下面的反應(yīng)方案顯示了這些方法當(dāng)中的一種，并且是由保護(hù)的胺(XXXVI),特別是由單酰化胺，例如三氟乙酰胺，或由Boc-保護(hù)的胺的開(kāi)始合成。在該實(shí)施方案中，LG是如上所述的N-保護(hù)基，特別是BOC或三氟乙?；籛和n如上所定義，并且其中W還可以是氮保護(hù)基，其可以朝著基團(tuán)PG而被選擇性地裂解。LG是如上所定義的離去基團(tuán)，特別是，LG是氯或溴。當(dāng)W代表氮保護(hù)基時(shí)，其可以通過(guò)用氮脫保護(hù)劑在合成的所需階段除去。將單酰化胺(XXXVI)用強(qiáng)堿例如氬化鈉處理，然后與卣代C3-8鏈烯基(xxxvii)反應(yīng)，生成相應(yīng)的保護(hù)的胺(xxxvin)。將(xxxvni)脫保護(hù)，獲得(IX)。脫保護(hù)將取決于基團(tuán)PG，因此如果PG是Boc,脫保護(hù)可用較弱酸例如三氟乙酸來(lái)完成，或者當(dāng)PG是三氟乙酰基時(shí)，除去用石成例如氫IUt鈉來(lái)進(jìn)4亍。其中R1是氫的中間體(IX)可以經(jīng)由鏈烯基胺的Gabriel合成來(lái)制得，這可以通過(guò)用石咸例如氬氧化鉀和(XXXX)處理鄰苯二曱酰亞胺(XXXIX)來(lái)進(jìn)行，然后水解以生成鏈烯基胺(IX-a)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula>在上面的反應(yīng)方案中，LG是卣素，且n如上所定義?？砂凑毡绢I(lǐng)域已知的用于將三價(jià)氮轉(zhuǎn)化成其N(xiāo)-氧化物形式的方法將式(I)化合物轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的,氧化物形式。所述,氧化反應(yīng)一般通過(guò)將式(I)原料與合適的有機(jī)或無(wú)機(jī)過(guò)氧化物反應(yīng)來(lái)進(jìn)行。合適的無(wú)機(jī)過(guò)氧化物包括例如過(guò)氧化氫，堿金屬或堿土金屬過(guò)氧化物，例如過(guò)氧化鈉、過(guò)氧化鉀；合適的有機(jī)過(guò)氧化物可包括過(guò)氧酸，例如過(guò)苯甲酸或卣素取代的過(guò)苯曱酸如3-氯過(guò)苯曱酸，過(guò)氧鏈烷酸例如過(guò)乙酸，烷基過(guò)氧化氬，例如叔丁基過(guò)氧化氬。合適的溶劑是例如水，低級(jí)醇如乙醇等，烴例如曱苯，酮例如2-丁酮，卣代烴例如二氯甲烷，以及這樣的溶劑的混合物。得。非對(duì)映體可通過(guò)物理分離方法例如選擇性結(jié)晶和色鐠技術(shù)，例如逆流分布、液相色語(yǔ)法等來(lái)分離。式(I)化合物可作為對(duì)映體的對(duì)映體的外消旋混合物獲得，其可通過(guò)本領(lǐng)域已知的拆分方法彼此分離開(kāi)。通過(guò)分別與合適的手性酸或手性堿反應(yīng)，可鉀具有足夠堿性或酸性的外消旋式(I)化合物轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的非對(duì)映體鹽形式。然后通過(guò)例如選擇性或分步結(jié)晶將所述非對(duì)映體鹽形式分離，并且通過(guò)堿或酸由其釋放出對(duì)映體。分離式(I)化合物的對(duì)映體形式的另一方法涉及液體色語(yǔ)法，特別是使用手性固定相的液相色譜法。所述純立體化學(xué)對(duì)映體形式還可以衍生自適當(dāng)起始原料的^口的方法來(lái)獲相應(yīng)純立體化學(xué)對(duì)映體形式，條件是反應(yīng)以立體特異性方式發(fā)生。優(yōu)選地，如果特異性的立體異構(gòu)體是希望的，所述化合物可通過(guò)立體特異性制備方法來(lái)合成得到。這些方法將有利地使用對(duì)映體純的起始原料。在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的如本文所定義的式(I)化合物或任何亞組的如本文所定義的式(I)化合物與可藥用載體。在上下文中，治療有效量是指，在感染個(gè)體或者有感染危險(xiǎn)的個(gè)體中，足以預(yù)防性地抵抗、穩(wěn)定或減輕病毒感染，特別是HCV病毒感染的量。在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及制備如本文所述的藥物組合物的方法，所述方法包括將可藥用載體與治療有效量的如本文所定義的式(I)化合物或任何亞組的如本文所定義的式(I)化合物充分混合。因此，為了給藥目的，可將本發(fā)明化合物或其任何亞組配制呈各種藥物形式。作為合適的組合物，可提及的是通常用于全身施用藥物的所有組合物。為了制備本發(fā)明藥物組合物，將作為活性組分的任選呈加成鹽形式或金屬絡(luò)合物形式的特定化合物與可藥用載體充分混合，根據(jù)給藥所需的制劑形式，所述載體可呈多種形式。理想起見(jiàn)，這些藥物組合物呈適于口服、直腸、經(jīng)皮或通過(guò)胃腸外注射給藥的單位劑型。例如，為了制備口服劑型的組合物，可使用任何常用的藥物介質(zhì)，對(duì)于口服液體制劑例如懸浮液、糖漿劑、酏劑、乳劑和溶液，藥物介質(zhì)是例如水，二醇，油，醇等；或者，對(duì)于粉劑、丸劑、膠嚢和片劑，藥物介質(zhì)是固體載體，例如淀粉、糖、陶土、潤(rùn)滑劑、粘合劑、崩解劑等。由于其易于給藥，片劑和膠囊是最有利的口服單位劑型，在這種情況下，顯然采用固體藥物載體。對(duì)于胃腸外給藥用組合物，他們的載體通常包括無(wú)菌水，至少大部分無(wú)菌水，也可以加入其他組分來(lái)例如促進(jìn)溶解。例如，可制備注射液，其中載體包括鹽水溶液、葡萄糖溶液或鹽水與葡萄糖溶液的混合物。還可以制得可注射懸浮液，在這種情況下，可采用合適的液體載體、懸浮劑等。還包括用于在臨用之前轉(zhuǎn)化成液體形式制劑的固體形式制劑。在適于經(jīng)皮給藥的組合物中，載體任選包含滲透促進(jìn)劑和/或合適的潤(rùn)濕劑，任選與次要比例的合適的任何性質(zhì)的添加劑聯(lián)合使用，所述添加劑不對(duì)皮膚產(chǎn)生顯著不利影響。本發(fā)明化合物還可以通過(guò)經(jīng)口吸入或吹入來(lái)給藥，這是采用本領(lǐng)域用于經(jīng)由該方式給藥所使用的方法和制劑。因此，本發(fā)明化合物一般可以以溶液、懸浮液或干粉形式對(duì)肺給藥，溶液是優(yōu)選的。用于通過(guò)經(jīng)口吸入或吹入來(lái)遞送溶液、懸浮液或干粉的所開(kāi)發(fā)的任何系統(tǒng)都適用于給藥本發(fā)明化合物。因此，本發(fā)明還提供了適于經(jīng)由口通過(guò)吸入或吹入來(lái)給藥的藥物組合物，所述組合物包含式(I)化合物和可藥用載體。優(yōu)選地，本發(fā)明化合物在噴霧化或氣霧化劑量中通過(guò)溶液的吸入來(lái)給藥。特別有利的是，將上述藥物組合物配制成易于給藥劑量一致性的單位劑型。本文使用的單位劑型是指適于用作單位劑量的物理上不連續(xù)的單位，每個(gè)單位含有經(jīng)計(jì)算產(chǎn)生所需療效的預(yù)定量的活性組分與所需藥物載體。這樣的單位劑型的實(shí)例有片劑(包括加刻痕或包衣的片劑)、膠嚢、丸劑、栓劑、粉末小包、糯米紙嚢劑、注射液或懸浮液等，及其被分隔的多個(gè)部分。式(I)化合物表現(xiàn)出抗病毒性質(zhì)。能夠使用本發(fā)明化合物治療的病毒感染及其相關(guān)疾病包括HCV和其他致病性黃病毒屬帶來(lái)的感染，例如是黃熱病、登革熱(類(lèi)型1-4)、圣路易士腦炎、日本腦炎、摩累谷腦炎、西尼羅病毒和庫(kù)京病毒。與HCV相關(guān)的疾病包括漸進(jìn)性肝纖維化、導(dǎo)致肝硬化的炎癥和壞死、末期肝病和HCC;與其他黃病毒屬病毒相關(guān)的疾病包括黃熱病、登革熱、出血性發(fā)熱和腦炎。此外，多種本發(fā)明化合物具有抗HCV的突變株的活性。另外，很多本發(fā)明化合物表現(xiàn)出有利的藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)，并且在生物利用度方面具有有吸引力的性質(zhì)，包括可接受的半衰期、AUC(曲線下面積)和峰值，并且沒(méi)有不利的現(xiàn)象，例如不足的快速釋放和組織保留。在基于Lohmann等人(1999)Science285:110-113的細(xì)胞HCV復(fù)制子系統(tǒng)中，并且按照Krieger等人(2001)JournalofVirology75:4614-4624(引入本文以供參考)的描述做進(jìn)一步改進(jìn)，測(cè)試式(I)化合物的抗HCV的體外抗病毒活性，在實(shí)施例部分中對(duì)此進(jìn)一步舉例說(shuō)明。該模型雖然不是完全的HCV感染模型，但是已經(jīng)被廣泛接受為目前可使用的最有力和高效的自動(dòng)HCVRNA復(fù)制模型。在該細(xì)胞模型中表現(xiàn)出抗-HCV活性的化合物視為候選物，來(lái)用于治療哺乳動(dòng)物中HCV感染的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)。應(yīng)當(dāng)理解，區(qū)別開(kāi)以下兩類(lèi)化合物是很重要的特異性地干擾HCV功能的化合物，以及在HCV復(fù)制子模型中施加細(xì)胞毒性或細(xì)胞抑制作用，并且作為結(jié)果引起HCVRNA或相關(guān)報(bào)道基因酶濃度下降的化合物。在本領(lǐng)域中，用于評(píng)估細(xì)胞毒性的試驗(yàn)是已知的，其基于例如線粒體酶的活性，使用產(chǎn)生熒光的氧化還原染料例如刃天青。此外，有細(xì)胞計(jì)數(shù)篩選來(lái)評(píng)估相關(guān)報(bào)道基因活性，例如螢火蟲(chóng)熒光素酶的非選擇性抑制?？赏ㄟ^(guò)其表達(dá)依賴(lài)于構(gòu)成型活性基因啟動(dòng)子的熒光素酶報(bào)道基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染來(lái)裝配合適的細(xì)胞類(lèi)型，并且這樣的細(xì)胞可用作計(jì)數(shù)篩選以消除非選擇性抑制劑。由于其抗病毒性質(zhì)，特別是其抗-HCV性質(zhì)，式(I)化合物或其亞組、其W-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物和其立體化學(xué)異構(gòu)體形式可用于治療表現(xiàn)出病毒感染，特別是HCV感染的個(gè)體，以及用于預(yù)防這些感染。一般，本發(fā)明化合物可用于治療被病毒，特別是黃病毒屬病毒，例如HCV感染的溫血?jiǎng)游铩Ｒ虼?，本發(fā)明化合物或其任意亞組可用作藥物。所述用作藥物或者治療方法包括對(duì)感染病毒的個(gè)體全身給藥有效量的化合物，以抵御與病毒感染，特別是HCV感染相關(guān)的病癥。病毒感染，特別是HCV感染的藥物中的應(yīng)用。此外，本發(fā)明還涉及治療被病毒感染，或者有病毒，特別是HCV感染危險(xiǎn)的溫血?jiǎng)游锏姆椒?，所述方法包括施用抗病毒有效量的如本文所定義的式(I)化合物或如本文所定義的任何亞組的式(I)化合物。同樣地，已知抗-HCV化合物和式(I)化合物的組合也可以在聯(lián)合治療中作為藥物使用，所述已知抗-HCV化合物例如是干擾素-a(IFN-a)、聚乙二醇化(pegylated)的干擾素-a和/或利巴韋林。術(shù)語(yǔ)"聯(lián)合治療"涉及必須包含下述成分的產(chǎn)品(a)式(I)化合物，和(b)任選的其他抗-HCV化合物，其作為一種組合制品同時(shí)、分開(kāi)或連續(xù)使用用于治療HCV感染，特別是用于治療HCV感染?？?HCV化合物包含選自HCV聚合酶抑制劑、HCV蛋白酶抑制劑、在HCV生命周期中的其它目標(biāo)的抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑、抗病毒劑及其組合的活性劑。HCV聚合酶抑制劑包括但不限于NM283(valopicitabine)、R803、JTK-109、JTK陽(yáng)003、HCV畫(huà)371、HCV-086、HCV-796和R-1479。HCV蛋白酶抑制劑(NS2-NS3抑制劑和NS3-NS4A抑制劑)包括但不限于WO02/18369的化合物(參見(jiàn)例如第273頁(yè)第9-22行和第274頁(yè)笫4行至第276頁(yè)第11行)；BILN-2061、VX-950、GS-9132(ACH-806)、SCH-503034和SCH-6。可使用的其他活性劑是在下列專(zhuān)利中公開(kāi)的那些W098/17679、WO-00/056331(Vertex);WO98/22496(Roche);WO99/07734(BoehringerIngelheim)、WO2005/073216、WO2005073195(Medivir),和結(jié)構(gòu)上類(lèi)似的活性劑。在HCV生命周期中其它目標(biāo)的抑制劑，包括NS3解螺旋酶、金屬蛋白酶抑制劑、反義寡核苷酸抑制劑，例如ISIS-14803、AVI-4065等。siRNA,s,例如SIRPLEX-140-N等，載體編碼的短發(fā)夾RNA(shRNA);DAN酶;HCV特異性核酶,例如heptazyme、RPI.13919等;進(jìn)入抑制劑，例如HepeX-C、HuMax-HepC等；a-葡糖苷酶抑制劑，例如西戈斯韋、UT國(guó)231B等；KPE-02003002和BIVN401。免疫調(diào)節(jié)劑包括但不限于天然和重組干擾素同種型化合物，包括a-干擾素、(3-干擾素、y-干擾素、co-干擾素等，例如IntronA、Roferon-A、Canferon-A300、Advaferon、Infergen、Humoferon、SumiferonMP、Alfaferone、IFN-beta、Feron⑧等；聚乙二醇衍生的(聚乙二醇化)干擾素化合物，例如PEG干擾素-a-2a(Pegasys⑧)、PEG干擾素-a-2b(PEG-Intron)、聚乙二醇化IFN-a-conl等；干擾素化合物長(zhǎng)效制劑和衍生物，例如白蛋白融合的干擾素albuferona等；刺激干擾素在細(xì)胞內(nèi)合成的化合物，例如雷西莫特等；白介素類(lèi)；提高1型輔助T細(xì)胞反應(yīng)的發(fā)展的化合物，例如SCV-07等；TOLL樣受體激動(dòng)劑，例如CpG-10101(actilon)、isatonbme等；胸腺素a-1;ANA-245;ANA-246;纟且胺二鹽酸鹽；propagermanium;tetrachlorodecaoxide;聚肌胞；IMP-321;KRN-7000;抗體，例如civacir、XTL-6865等；和預(yù)防和治療疫苗，例如InnoVacC、HCVE1E2/MF59等。其它抗病毒藥劑包括但不限于利巴韋林、金剛胺、三唑核苷、硝唑尼特；汰比夫定；NOV-205;他立偉林(taribavirin);內(nèi)核糖體進(jìn)入的抑制劑；廣譜病毒抑制劑，例如IMPDH抑制劑(例如US5,807,876、US6,498,178、US6,344,465、US6,054,472、WO97/40028、W098簡(jiǎn)81、WO00/56331的化合物，和霉酚酸及其衍生物，包括但不限于VX-950、merimepodib(VX-497)、VX-148和/或VX-944);或上述的任何組合。因此，為了抵抗或治療HCV感染，式(I)化合物可以和例如下列活性劑聯(lián)合給藥干擾素-a(IFN-a),聚乙二醇化的干擾素-a和/或利巴韋林以及基于抗體的治療，所述抗體針對(duì)的是HCV抗原決定簇，小干擾性RNA(SiRNA),核酶，DNA酶，反義RNA,例如NS3蛋白酶，NS3解螺旋酶和NS5B聚合酶的小分子拮抗劑。因此，本發(fā)明涉及如上所定義的式(I)化合物或其任何亞組在制備用于在感染HCV病毒的哺乳動(dòng)物中抑制HCV活性的藥物中的應(yīng)用，其中所述藥物是在聯(lián)合治療中使用，所述聯(lián)合治療優(yōu)選包含式(I)化合物和另一種HCV抑制化合物，例如(聚乙二醇化)IFN-a和/或利巴韋林。在另一方面，提供了本文所定義的式(I)化合物與抗HIV化合物的組合。后者優(yōu)選是具有對(duì)藥物代謝和/或改善生物利用度的藥物動(dòng)學(xué)具有正面影響的HIV抑制劑。這樣的HIV抑制劑的實(shí)例是利托那韋。同樣，本發(fā)明還提供了含有(a)式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑或其可藥用鹽與(b)利托那韋或其可藥用鹽的組合?；衔锢心琼f和其可藥用的鹽及其制備方法描述在W094/14436中。對(duì)于利托那韋的優(yōu)選劑型，參見(jiàn)US6,037,157和其中引用的文獻(xiàn)US5,484,801、US08/402,690和WO95/07696以及WO95/09614。利托那韋具有如下通式在其它實(shí)施方案中，包括(a)式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑或其可藥用鹽和(b)利托那韋或其可藥用鹽的組合還包括選自如本文所述化合物的另外的抗HCV化合物。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，其提供制備如上所述組合的方法，所述方法包括混合式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑或其可藥用鹽與利托那韋或其可藥用鹽。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案提供了方法，其中所述組合包括一種或多種另外的如本文所述的活性劑。本發(fā)明的組合還可用作藥物，所述作為藥物的用途或治療方法包括向HCV感染的個(gè)體全身給藥有效對(duì)抗與HCV和其它致病黃病毒和瘟病毒有關(guān)的病癥的量。因此，本發(fā)明的組合可用于制備在哺乳動(dòng)物中用于治療、預(yù)防或?qū)垢腥净蚺cHCV感染有關(guān)的疾病，尤其是用于治療與HCV和其它致病黃病毒和瘥病毒有關(guān)的病癥的藥物。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，獲得了藥物組合物，其含有本文所述任一個(gè)實(shí)施方案所定義的組合與可藥用賦形劑。本發(fā)明尤其提供了藥物組合物，其含有(a)治療有效量的式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑或其可藥用鹽，(b)治療有效量的利托那韋或其可藥用鹽，和(c)可藥用賦形劑。藥物組合物任選還含有另外的活性劑，其選自HCV聚合酶抑制劑、HCV蛋白酶抑制劑、HCV生命周期中的其他目標(biāo)的抑制劑和免疫調(diào)節(jié)劑、抗病毒劑及其組合。組合物可配制成合適的藥物劑型，例如如上所述的劑型。每種活性成分可分別配制，制劑可以共同給藥，或一種制劑含有兩者，并且如果需要，還可以提供另外的活性成分。用于本文的術(shù)語(yǔ)"組合物"是指包括產(chǎn)品，其含有特定的組分以及任何產(chǎn)物，其直接或間接產(chǎn)生自特定組分的組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的組合還可配制成用于同時(shí)、分別或依次用于HIV治療的聯(lián)合制劑。在此情況下，通式(I)化合物或其任何亞組配制在含有其他可藥用賦形劑的藥物組合物中，并且利托那韋分別配制成含有其它可藥用賦形劑的藥物組合物中。方便的是，此兩種單獨(dú)的藥物組合物可以是用于同時(shí)、分別或依次使用的藥盒的部分。藥或同時(shí)以分開(kāi)或單一聯(lián)合形式給藥。因此，本發(fā)明應(yīng)理解為包含同時(shí)或交替治療的所有方案，從而解釋了術(shù)語(yǔ)"給藥"。在優(yōu)選實(shí)施方案中，單獨(dú)的劑型大致同時(shí)給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合包括一定量的利托那韋或其可藥用鹽，相對(duì)于式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑單獨(dú)給藥時(shí)的生物利用度，其足以在臨床上改善所述式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑的生物利用度。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合包含一定量的利托那韋或其可藥用鹽，相對(duì)于式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑單獨(dú)給藥時(shí)的至少一個(gè)藥動(dòng)學(xué)變量，其足以改善所述式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑的至少一個(gè)藥動(dòng)學(xué)變量，所述變量選自t^、Cmin、Cmax、Css、在12小時(shí)的AUC或在24小時(shí)的AUC。其它實(shí)施方案涉及提高HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑的生物利用度的方法，所述方法包括向需要該提高的個(gè)體給藥如上所定義的組合，所述組合含有治療有效量的所述組合的每種組分。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及利托那韋或其可藥用鹽作為式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑的至少一個(gè)藥動(dòng)學(xué)變量的改善劑的用途，所述變量選自t1/2、C讓、Cmax、Css、12小時(shí)的AUC或24小時(shí)的AUC,其前提是，所述用途不實(shí)施于人體或動(dòng)物體。.用于本文的術(shù)語(yǔ)"個(gè)體"是指已成為治療、觀察或?qū)嶒?yàn)對(duì)象的動(dòng)物，優(yōu)選哺乳動(dòng)物，最優(yōu)選人體。生物利用度定義為給藥的劑量達(dá)到系統(tǒng)循環(huán)的分?jǐn)?shù)，t^表示半衰期或血漿濃度下降至原始值一半時(shí)所需的時(shí)間。css是穩(wěn)定狀態(tài)濃度，即在藥物輸入速率等于排除速率時(shí)的濃度。Cmm定義為在給藥間隔中測(cè)量的最低(最小)濃度，Cmax表示在給藥間隔中測(cè)量的最高(最大)濃度。AUC定義為對(duì)確定的時(shí)間周期血漿濃度-時(shí)間曲線下的面積。向人體給藥。包含在所述組合中的組分可一起或單獨(dú)給藥。式(I)的NS3/4a蛋白酶抑制劑或其任何亞組和利托那韋或其可藥用鹽或酯可以具有約每天0.02-5.0g的劑量水平。當(dāng)式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑與利托那韋聯(lián)合給藥時(shí)，式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑與利托那韋的重量比合適地是在約40:1-約1:15的范圍，或約30:1-約1:15,或約15:1-約1:15，典型地為約10:1-約1:10,更典型地為約8:1-約1:8。同樣有用的是，式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑與利托那韋的重量比范圍為約6:1-約1:6,或約4:1-約1:4，或約3:1-約1:3,或約2:1-約1:2,或約1.5:1-約1:1.5。一方面，式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑的重量等于或大于利托那韋的重量，其中式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑與利托那韋的重量比合適地在約1:1-約15:1范圍，典型地為約1:1-約10:1,更典型地為約1:1-約8:1。同樣有用的是，式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑與利托那韋的重量比的范圍為約1:1-約6:1,或約1:1-約5:1，或約1:1-約4:1,或約3:2-約3:1,或約1:1-約2:1或約1:1-約1.5:1。用于本文的術(shù)語(yǔ)"治療有效量"是指活性化合物或組分或藥物活性劑的量，根據(jù)本發(fā)明，其在組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人體中產(chǎn)生研究者、獸醫(yī)、醫(yī)師或其它臨床醫(yī)生尋求的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)反應(yīng)，其包括減輕所治療疾病的癥狀。由于本發(fā)明涉及包含兩種或多種活性劑的聯(lián)合，"治療有效量"是指活性劑聯(lián)合在一起的量，因而聯(lián)合效果產(chǎn)生所需生物學(xué)或醫(yī)學(xué)反應(yīng)。例如，含有(a)式(I)化合物和(b)利托那韋的組合物的治療有效量應(yīng)是在一起給藥時(shí)具有聯(lián)合效果，即是治療有效的式(I)化合物的量和利托那韋的量。通常預(yù)期的是抗病毒有效日劑量將為0.01mg/kg-500mg/kg體重，更優(yōu)選為0.1mg/kg-50mg/kg體重。合適的是所需劑量作為整天內(nèi)以合適間隔的2、3、4或更多亞劑量。所述亞劑量可作為單位劑型配制，例如每個(gè)單位劑型含有1-1000mg，尤其是5-200mg活性成分。給藥的精確劑量和頻率取決于所用的特定式(I)化合物，所治療的嚴(yán)重程度，特定患者的年齡、體重、性別、病癥和一般身體狀況的程度，以及個(gè)體可采用的其他藥物，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的。此外，根據(jù)治療個(gè)體的反應(yīng)和/或根據(jù)開(kāi)本發(fā)明化合物處方的醫(yī)生的評(píng)估，顯然所述有效日劑量可以降低或增加。因此，上述有效日劑量?jī)H是指導(dǎo)性的。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑和利托那韋可一天一次或兩次同時(shí)給藥，優(yōu)選口服，其中每劑量式(I)化合物的量為約l-約2500mg，每劑量利托那韋的量是1-約2500mg。在另一實(shí)施方案中，用于每天一次或兩次共同給藥的每劑量的量為約50-約1500mg式(I)化合物和約50-約1500mg利托那韋。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用于每天一次或兩次共同給藥的每劑量的量為約100-約1000mg式(I)化合物和約100-約800mg利托那韋。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用于每天一次或兩次共同給藥的每劑量的量為約150-約800mg式(I)化合物和約100-約600mg利托那韋。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用于每天一次或兩次共同給藥的每劑量的量為約200-約600mg式(I)化合物和約100-約400mg利托那韋。在另一實(shí)施方案中，用于每天一次或兩次共同給藥的每劑量的量為約200-約600mg式(I)化合物和約20-約300mg利托那韋。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用于每天一次或兩次共同給藥的每劑量的量為約100-約400mg式(I)化合物和約40-約lOOmg利托那韋。用于一次或兩次日劑量的式(I)化合物(mg)/利托那韋(mg)組合的實(shí)例包括50/100、100/100、150/100、200/100、250/100、300/100、350/100、400/100、450/100、50/133、100/133、150/133、200/133、250/133、300/133、50/150、100/150、150/150、200/150、250/150、50/200、100/200、150/200、200/200、250/200、300/200、50/300、80/300、150/300、200/300、250/300、300/300、200/600、400/600、600/600、800/600、1000/600、200/666、400/666、600/666、800/666、1000/666、1200/666、200/800、400/800、600/800、800/800、1000/800、1200/800、200/1200、400/1200、600/1200、800/1200、1000/1200和1200/1200。用于一次或兩次日劑量的式(I)化合物(mg)/利托那韋(mg)組合的其他實(shí)例包括1200/400、800/400、600/400、400/200、600/200、600/100、500/100、400/50、300/50和200/50。在本發(fā)明的一項(xiàng)實(shí)施方案中，其提供產(chǎn)品，其包括有效治療HCV感染或抑制HCV的NS3蛋白酶的組合物和包裝材料，包括說(shuō)明組合物可用于治療HCV感染的標(biāo)簽，其中組合物含有如上所述的式(I)化合物或其4壬何亞組，或如本文所述的組合。本發(fā)明的另一實(shí)施方案涉及藥盒或容器，其含有在確定潛在藥物抑制HCVNS3/4a蛋白酶、HCV生長(zhǎng)或兩者的能力測(cè)試或試驗(yàn)中用作標(biāo)準(zhǔn)或試劑的有效量的式(I)化合物或其任何亞組或本發(fā)明的組合，所述組合包含式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑或其可藥用鹽和利托那韋或其可藥用鹽。本發(fā)明的此方面可發(fā)現(xiàn)其在藥物研究程序中的用途。本發(fā)明的化合物和組合可用于高通量目標(biāo)分析物試驗(yàn)，例如用于測(cè)定所述組合在HCV治療中的效力的那些物質(zhì)。實(shí)施例下列實(shí)施例是為了舉例說(shuō)明本發(fā)明，而不是將本發(fā)明限制于此。實(shí)施例1:制備A418-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉-4-基-氧基]-2，15-二氧代-3,14,16-三氮雜三環(huán)[14.3.0.04'6]十九碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺，其具有如在下面化合物(9)中所示的具體立體化學(xué)將2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉-4-醇(1,3.6g)在三氯氧化磷(20mL)中的溶液于100°C加熱40分鐘(通過(guò)LC-MS監(jiān)測(cè)反應(yīng))。然后，將該反應(yīng)冷卻至室溫，并且將過(guò)量三氯氧化磷蒸發(fā)。將殘余油狀物在與飽和NaHC03溶液之間分配，并用乙醚(3x70mL)萃取，將合并的有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，用MgS04干燥，通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，并且過(guò)短的二氧化硅墊(己烷)，獲得了3.6g(62。/o)所需產(chǎn)物2，為白色粉末。向Boc-4-羥基脯氨酸，其具有如在上式中所示的具體立體化學(xué)(2.6g,11.2mmol)在DMSO(80mL)內(nèi)的攪拌著的溶液中加入叔丁醇鉀(3.8g，3eq)。攪拌大約1小時(shí)后，加入4-氯-2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-甲氧基喹啉(2,3.6g,11.2mmo1),并且將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。然后，將該反應(yīng)混合物用水(350mL)稀釋?zhuān)⑶矣?NHC1中和。將所得懸浮液萃取到乙酸乙酯(3x100mL)內(nèi)，用鹽水洗滌，并用MgS04干燥。過(guò)濾并通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，在高度真空下干燥過(guò)夜后，獲得了3.6g(62%)所需產(chǎn)物3:通過(guò)HPLC測(cè)定的純度>95%,m/z=514(M+H)+。步驟C將酸3(3.6g,7mmol)與1-氨基-2-乙烯基-環(huán)丙烷-甲酸乙酯鹽酸鹽，其具有如在上式中所示的具體立體化學(xué)(1.47g,7.6mmol)混合，然后溶解在DMF中。將該反應(yīng)混合物用氬氣吹掃，在在冰浴中冷卻，并且一次性加入DIPEA(1.5mL)。然后，將該反應(yīng)混合物在0°C攪拌10-15分鐘，然后在0°C于氬氣下一次性加入HATU(2.93g，7.7mmol)。在0°C保持40分鐘后(通過(guò)LC-MS監(jiān)測(cè)反應(yīng))，將該反應(yīng)混合物通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮(不蒸發(fā)至完全干燥)，然后與飽和碳酸氫鈉溶液干燥，并且萃取到EtOAc(3x100mL)內(nèi)。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用MgS04干燥，并通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。通過(guò)二氧化硅柱色譜純化(DCM),然后在YMC二氧化硅上通過(guò)柱色譜純化(200g,己烷/EA3:2-2:3梯度)，獲得了3.81g(84。/。)目標(biāo)產(chǎn)物4,為白色粉末。步驟D<formula>formulaseeoriginaldocumentpage49</formula>將4(3.81g,5.8mmol)在CH2C12(30mL)和三氟乙酸(30mL)中的溶液于室溫?cái)嚢杓s1.5小時(shí)。然后將溶劑蒸發(fā)，并且將殘余物在飽和碳酸氳鈉(100mL)與乙醚(3xl00mL)之間分配。將乙醚層合并，用鹽水洗滌，用MgS04干燥并蒸發(fā)，獲得了3.13g(98.3%)目標(biāo)產(chǎn)物5:m/z=551(M+H)+。步驟E將NaHC03(1.0g)加到5(1.4g,2.5mmol)在四氫呋喃(50mL)內(nèi)的溶液中。然后，在0°C于氬氣下加入光氣(5mL,1.9M在曱苯中的溶液)。將所得懸浮液在室溫?cái)嚢?0分鐘(通過(guò)LC-MS監(jiān)測(cè))。然后，將該反應(yīng)混合物過(guò)濾，并用THF(2x30mL)洗滌。將濾液通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，并且再溶解在CH2Cl2(50mL)中。加入NaHC03(1.0§)和^-曱基庚-6-烯基胺(1.5g，13mmo1)。將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，然后過(guò)濾。通過(guò)硅膠色譜法純化(乙醚)，獲得了1.42g(84%)3標(biāo)產(chǎn)物6:m/z=690(M+H)+。步驟F<formula>formulaseeoriginaldocumentpage50</formula>向6(1.42g，2mmol)在無(wú)水二氯乙烷(900mL,0.0023M溶液)內(nèi)的溶液中通入氬氣大約15分鐘。然后，加入Hoveyda-Grubbs第一代催化劑(120mg,12mol%)，并且將該反應(yīng)混合物在攪拌以及慢氬氣流下加熱回流16小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并且把MP-TMT鈀清除劑(大約200mg)加到該混合物中。2.5小時(shí)后，將清除劑通過(guò)過(guò)濾除去，并用50mLCH2Cl2洗滌。將所獲得的溶液通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。將殘余物通過(guò)在YMC二氧化硅上柱色語(yǔ)純化(IOOg，EtOAc/己烷1:1),獲得了806mg(57。/。)目標(biāo)產(chǎn)物7:m厶=662(M+H)+。步驟G將氬氧化鋰(300mg)在水(6mL)中的溶液加到大環(huán)酯7(806mg,2.1mmol)在四氬呋喃(12mL)和曱醇(6mL)內(nèi)的溶液中。在50。C保持1小時(shí)后，通過(guò)蒸發(fā)將體積減少一半，加入水(30mL)。酸化(pH-2),然后用氯仿萃取，獲得了760mg目標(biāo)產(chǎn)物8,為白色并分末w/z=662(M+H)+。步驟H將酸8(760mg,1.2mmol)和CDI(389mg,2.4mmol,2eq)在無(wú)水THF(10mL)中的溶液于氮?dú)庀录訜峄亓?小時(shí)。如果需要的話，可任選分離出氮雜內(nèi)酯衍生物。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并且加入石黃酰胺(如WO03/053349中所述制備的)(436mg，3.6mmol,3叫)和DBU(0.5mL,3mmol)在無(wú)水THF(10mL)中的混合物。將所得溶液在55°C加熱18小時(shí)(通過(guò)LC-MS監(jiān)測(cè))。然后，將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，將溶劑蒸發(fā)，并且將殘余物在EtOAc與水(用HCl將pH調(diào)節(jié)至3.0)之間分配。將粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化(EtOAc/石油醚1:1),獲得了380mg含有最高達(dá)20。/。原料磺酰胺(NMR測(cè)定)的目標(biāo)產(chǎn)物。將該產(chǎn)物在預(yù)填充的柱(乙醚至乙醚/THF,3:1梯度)上通過(guò)柱色語(yǔ)純化。再通過(guò)柱色譜純化(YMC二氧化硅50g,乙醚，然后乙醚-曱醇9:l),獲得了176mg本標(biāo)題化合物，為淺黃色粉末，將其進(jìn)一步通過(guò)制備HPLC純化，獲得了55mg本標(biāo)題產(chǎn)物，為淺黃色粉末。w/z=737,(M+H)+,麗R數(shù)據(jù)(125MHz,CDC13):13C，56.3,6.5,6.9,22.0,22.7,22.8,25.4,26.7,28.6,29.1，29.7,31.3,32.7,34.7,38.4,45.3,51.8，55.8,60.1,77.0,96.7,107.5,114.7,116.5,119.4,123.2,125.8，136.4,151.4,153.1,157.7,160.2,161.8,165.5,168.2,168.7,178.2。實(shí)施例2:合成Aqi7-(2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-甲氧基喹啉-4-基-氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺，其具有如在下面化合物(16)中所示的具體立體化學(xué)方法A:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage52</formula>步驟A向BOC-4-鞋基脯氨酸，其具有如在上式中所示的具體立體化學(xué)(2.59g,11.2mmol)在DMSO(80mL)內(nèi)的攪拌著的溶液中加入叔丁醇鉀(3.77g,33.6mmol)。在室溫?cái)嚢鑜小時(shí)后，加入喹啉氯化物2(3.57g,11.2mmol),并且將該溶液在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。將該混合物用H20(350mL)稀釋?zhuān)肊tOAc(100mL)洗滌，并且用1MHC1酸化至約pH3。將所得懸浮液用EtOAc(3xl00mL)萃取，用鹽水洗涂，并用MgS04干燥。蒸發(fā)后，獲得了化合物10(3.60g,62%)。步驟B將化合物10(3.60g,7.02mmol)溶解在DMF(20mL)中。然后加入1-氨基-2-乙烯基-環(huán)丙烷甲酸乙酯鹽酸鹽(1.47g,7.68mmol),并且將該反應(yīng)混合物用氬氣吹掃，并且冷卻至0。C。加入DIPEA(3.00mL,17.2mmol)和HATU(2.93g,7.66mmol)，并且將該反應(yīng)混合物在0°C攪拌40分鐘。將該溶液蒸發(fā)，與飽和NaHC03混合，并用EtOAc(3x100mL)萃取。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，用MgS04干燥，并蒸發(fā)。通過(guò)快速柱色譜純化(己烷/EtOAc3:2—己烷/EtOAc2:3),獲得了化合物U(3.81g,84%),為白色粉末。歩驟C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage53</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>將ll(3.81g,5.86mmol)在CH2Cl2(30mL)和TFA(30mL)中的溶液于室溫?cái)嚢?.5小時(shí)。然后將揮發(fā)物蒸發(fā)。將飽和碳酸氫鈉(100mL)加到所得油狀物中，并且將該漿液用乙醚(3x100mL)萃取。將有機(jī)層合并，用鹽水洗滌，用MgS04干燥，并蒸發(fā)，獲得了化合物12(3.13g，98%)。步驟D向化合物12(1.41g,2.56mmol)在THF(40mL)內(nèi)的溶液中加入NaHC03(4湯匙)和光氣在曱苯中的溶液(1.93M,4.0mL,7.7mmol)。將該混合物在室溫劇烈攪拌1小時(shí)，然后將其過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物溶解在CH2C12(40mL)中，加入NaHC03(3湯匙)和己-5-烯基-曱基胺鹽酸鹽(770mg,5.15mmo1)。在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜后，將該反應(yīng)混合物過(guò)濾，將化合物13(1.53g,2.18mmol)溶解在1，2-二氯乙烷(1.50L)中，并將該溶液用氮?dú)饷摎?。加入HoveydaGrubbs第一代催化劑(95mg,0.16mmol),并且將該混合物在氮?dú)庀禄亓鬟^(guò)夜。將該溶液冷卻至60°C，然后加入一湯匙清除劑MP-TMT。將該反應(yīng)混合物攪拌3小時(shí)(同時(shí)冷卻至室溫)，過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物溶解在CH2C12中，加入約3g二氧化硅，并且將該漿液蒸發(fā)至干。通過(guò)快速柱色譜純化后(乙醚—3%甲醇在乙醚中的混合物)化合物14(1.09g,74%),獲得了白色棱鏡狀物。步驟F加入約3g二氧化硅，并且將該漿液蒸發(fā)至干。通過(guò)快速柱色譜純化(乙醚—3%曱醇在乙醚中的混合物)，獲得了化合物13(1.57g,89%),為淺黃色粉末。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>將化合物14(1.00g，1.51mmol)溶解在THF/曱醇/H202:1:1(200mL)中。在室溫用10分鐘滴加LiOH水溶液(lM,15.1mL,15.1mmol)，并且將所得反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?0小時(shí)。將該溶液用1MHCl酸化至約pHl，并濃縮直至幾乎所有THF和甲醇已經(jīng)一皮除去。將所得漿液用CH2Cl2萃取4次，并且將有機(jī)相合并，干燥(MgS04)并蒸發(fā)，獲得了化合物15(960mg，100%),為淺黃色粉末。步驟G將化合物15(960mg，1.51mmol)在THF(75mL)中的溶液置于氮?dú)庀拢缓蠹尤媵驶溥?CDI)(510mg,3.14mmo1)。將該混合物在氮?dú)庀禄亓?小時(shí)，然后讓其達(dá)到室溫?？扇芜x將氮雜內(nèi)酯衍生物分離。加入環(huán)丙基-磺酰胺(550mg，4.54mmol)和DBU(530pL，540mg，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>3.54mmol),并且將該溶液在55。C于氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。將溶劑蒸發(fā)，并且把殘余粗產(chǎn)物溶解在CH2C12中。加入約3g二氧化硅，并且將該漿液蒸發(fā)至干。通過(guò)快速柱色譜純化(乙醚—5%曱醇在乙醚中的混合物)，獲得了化合物16(960mg,86%),為白色粉末。方法B:合成酸15的另一方法步驟A<formula>formulaseeoriginaldocumentpage57</formula>將Boc-保護(hù)的4-羥基脯氨酸(10.2g,44.1mmo1)、HATU(18.7g,49.2mmol)和環(huán)丙基酯(9.31g，48.6mmol),二者具有如在上式中所示的具體立體化學(xué)，溶解在DMF(120mL)中，并且冷卻至0°C。加入二異丙基乙胺(DIPEA)(30.0mL,172mmol)。將該溶液溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢柽^(guò)夜。加入CH2C12(~80mL),并且將該反應(yīng)混合物用飽和NaHC03水溶液、檸檬酸、H20和鹽水洗滌，然后干燥(MgS04)。加入約30g二氧化硅，并且將該漿液蒸發(fā)至干。通過(guò)快速柱色鐠純化(乙醚—7%曱醇在乙醚中的混合物)，獲得了化合物17(13.0g,80%),為白色粉末。步驟B<formula>formulaseeoriginaldocumentpage57</formula>將化合物17(8.11g,22.0mmol)、對(duì)硝基苯曱酸(5.51g,33.0mmol)和Ph3P(8.66g,33.0mmol)溶解在THF(100mL)中。將該溶液冷卻至0。C,滴力卩DIAD(6.50mL,33.0mmol)。將該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，并且攪拌過(guò)夜。加入飽和NaHC03水溶液(60mL),并且將該混合物用CH2Cl2萃取幾次。將有機(jī)相合并，干燥(MgS04),然后加入約40g二氧化硅，并且將該漿液蒸發(fā)至干。通過(guò)快速柱色譜純化(戊烷/乙醚2:l—戊烷/乙醚1:2~>2%曱醇在乙醚中的混合物)，獲得了Boc-保護(hù)的中間體(9.50g,83%),為白色粉末。將該中間體(9.50g,18.4mmol)溶解在CH2C12(66mL)中，并將該溶液冷卻至0°C。滴加TFA(33mL),并且將該混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，將揮發(fā)物蒸發(fā)，加入CH2Cl2(100mL),加入Na2CO3水溶液(0.50M)直至達(dá)到pH約為8。分離后，將有^/L相干燥(MgS04)并蒸發(fā)，獲得了化合物18(7.68g,83%),為淺黃色粉末。步驟C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage58</formula>向化合物18(6.90g，16.5mmol)在THF(240mL)內(nèi)的溶液中加入NaHC03(15湯匙)和光氣在曱苯中的溶液(1.93M,18.0mL,34.7mmol)。將該混合物在室溫劇烈攪拌1小時(shí)，然后將其過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物溶解在CH2C12(250mL)中，加入NaHC03(15湯匙)和己-5-烯基-甲基胺鹽酸鹽(5.00g,33.4mmol)。在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜后，將該反應(yīng)混合物過(guò)濾，加入約17g二氧化硅，并且將該漿液蒸發(fā)至干。通過(guò)快速柱色譜純化(乙醚—3%曱醇在乙醚中的混合物)，獲得了化合物19(8.00g,87%)，為白色粉末。歩驟D將化合物19(1.61g,2.90mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(1.50L)中，并將該溶液用N2脫氣。加入HoveydaGrubbs第一代催化劑(125mg,0.21mmol)，并且將該混合物在氮?dú)庀禄亓鬟^(guò)夜。將該溶液冷卻至60°C，然后加入一湯匙清除劑MP-TMT。將該反應(yīng)混合物攪拌3小時(shí)(同時(shí)冷卻至室溫)，過(guò)濾，并蒸發(fā)。將殘余物溶解在CH2C12中，加入約3g二氧化硅，并且將該漿液蒸發(fā)至干。通過(guò)快速柱色譜純化(乙醚—3%曱醇在乙醚中的混合物)，獲得了化合物20(1.13g,74%)，為淺灰色粉末。步驟E將化合物20(200mg，0.38mmol)溶解在THF/曱醇/水(2:l:1,20mL)中，并且在冰浴中冷卻。緩慢地加入LiOH水溶液(lM,1.9ml,1.9mmol)。將該混合物在0°C攪拌4小時(shí)，然后用1MHC1中和，并用CH2Cl2萃取。將有機(jī)層用飽和NaHC03水溶液、H20和鹽水洗滌。干燥(MgS04)和蒸發(fā)后，把剩余粗產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化(2%曱醇在CH2C12中的混合物44%甲醇在CH2C12中的混合物)，獲得了化合物21(115mg,80%)，為淺灰色粉末。步驟F15將化合物21(100mg,0.26mmol)、Ph3P(100mg,0.38mmol)和2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉-4-醇(1)(117mg,0.39mmol)在THF(10-15mL)中混合，將該漿液在水浴中冷卻至0。C。滴加DIAD(77HL,0.39mmol)。然后移去冰浴，并且將該混合物在室溫?cái)嚢?2小時(shí)。將溶劑蒸發(fā)，并且將粗產(chǎn)物溶解在THF/甲醇/H202:1:1(12mL)中。加入LiOH水溶液(lM,3.80mL,3.80mmol),并且將該混合物在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。通過(guò)加入水把體積增加一倍，并且將該漿液用乙醚萃取。將水相用1MHC1酸化至pH約為1,并用CH2Cl2萃取。將CH2Cl2相干燥(MgS04)并蒸發(fā)。將所需產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜純化(2%甲醇在乙醚中的混合物直至洗脫出過(guò)量喹啉1，然后用10%甲醇在CH2C12中的混合物洗脫)，獲得了化合物15(71mg,42%)。實(shí)施例3:制備環(huán)丙烷磺酸{17-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉-4-基氧基]-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]-十八碳-7-烯-4-羰基}-酰胺，其具有如在下面化合物(26)中所示的具體立體化學(xué)o26步驟A:制備1-({1-[己-5-烯基-(4-曱氧基千基)-氨基甲酰基]-4-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉-4-基氧基]-他咯烷-2-羰基}-氨基)-2-乙烯基-環(huán)丙烷曱酸乙酯，其具有如在下面化合物(22)中所示的具體立體化學(xué)22將在實(shí)施例1步驟D中描述的化合物5(1.97g,3.58mmol)與約200mgNaHC〇3(2小匙)和THF(20ml)混合。將3ml1.9M光氣在曱苯中的溶液加到將該反應(yīng)混合物中，并且將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢杓s1.5小時(shí)。將該反應(yīng)通過(guò)LC-MS監(jiān)測(cè)。原料消失，并且形成了氯羰基中間體的峰(>90%,根據(jù)LC-MS數(shù)據(jù))。將該反應(yīng)混合物過(guò)濾，并通過(guò)旋轉(zhuǎn)7蒸發(fā)濃縮。然后將氣溶解在CH2Ch中，并且加入己-5-烯基-(對(duì)甲氧基-千基)胺(0.9g)以及100-150mg(l匙)NaHC03。將該反應(yīng)混合物在室溫<formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula>攪拌過(guò)夜，然后過(guò)濾并且通過(guò)二氧化硅柱色語(yǔ)純化(EtOAc/石油醚)，獲得了純的本標(biāo)題化合物22(1.42g,84%)。MS(M+)797。步驟B:制備17-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉-4-基氧基]-13-(4-曱氧基千基)-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-曱酸乙酯，其具有如在下面化合物(23)中所示的具體立體化學(xué)、023將在步驟A中制備的化合物22(1.68g，2.1mmol)溶解在無(wú)水二氯乙烷(用CaH蒸餾的，約800ml)中，通入氬氣約10分鐘。然后將Hoveyda第一代催化劑(88mg,7mol。/。)力口到將該溶液中，并且將該反應(yīng)混合物在攪拌以及慢氬氣流下于100。C加熱16小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入MP-TMT鈀清除劑(約100mg)，并且將該混合物攪拌2.5小時(shí)。將清除劑通過(guò)過(guò)濾除去，并用100mlCH2Ch洗滌。將所獲得的溶液通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，并且在高度真空下干燥，獲得了本標(biāo)題化合物("z厶=599,(M+H)+)，HPLC純度79%(二極管陣列)，95%(ELSD)。產(chǎn)率63%。步驟C:制備17-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-甲氧基喹啉-4-基氧基]-13-(4-曱氧基千基)-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯_4-曱酸，其具有如在下面化合物(24)中所示的具體立體化學(xué)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>24將在步驟B中制備的化合物23(910mg,1.2mmol)溶解在30mLTHF、15mL甲醇和15mLH20中。將1MLiOH溶液(IOmL)加到該溶液中。將該反應(yīng)在50。C攪拌2小時(shí)以讓所有原料反應(yīng)(通過(guò)LC-MS檢查的)。將該反應(yīng)混合物用檸檬酸酸化，用氯仿(3x75mL)萃取，并用鹽水洗滌。將有機(jī)相用MgS04干燥。將粗產(chǎn)物通過(guò)快速色譜純化(從乙酸乙酉旨/己烷梯度2:1的梯度)，獲得了化合物(24),為淺黃色固體(864mg)。HPLC純度96%。步驟D:制備環(huán)丙烷磺酸『17-『2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉-4-基氧基]-13-(4-甲氧基芐基)-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)-[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基]-酰胺，其具有如在下面化合物(25)中所示的具體立體化學(xué)在2ml微波瓶中，將化合物24(50mg,0.068mmol,1eq)與溶解在THF(1.0mL)中的CDI(44mg,3eq)混合。附上蓋子，并且用氬氣吹掃。在微波爐中于100QC進(jìn)行12分鐘活化(標(biāo)準(zhǔn)；沒(méi)有預(yù)先攪拌)。將該反應(yīng)通過(guò)LC-MS檢查(100%轉(zhuǎn)化成活化中間體-質(zhì)量小于底物M+-16)?？扇芜x將氮雜內(nèi)酯衍生物分離。在單獨(dú)的瓶中，將環(huán)丙基磺酰胺(49mg,4叫)與THF混合，并且加入DBU(60(_il,4eq)。完全活化后，通過(guò)注射器將該混合物加到該反應(yīng)瓶中。將該反應(yīng)混合物在微波爐中于100QC加熱1小時(shí)。將該反應(yīng)混合物通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，與EtOAc和水混合，并且加入一滴3MHC1。將水相用EtOAc(3xl5ml)洗滌。將合并的有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，并用MgS04干燥。把干燥劑過(guò)濾之后，通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，將粗產(chǎn)物在YMC二氧化珪上通過(guò)柱色譜純化(70mg,乙酸乙酯，R尸0.7,石黃酰胺原料0.6)。將含有所需產(chǎn)物的級(jí)份合并，并通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，獲得了化合物25(83mg,產(chǎn)率98%),具有86%純度。該化合物不用另外的純化直接用于下一步驟。歩驟E:制備環(huán)丙烷磺酸{17-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉-4-基氧基]-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基卜酰胺，其具有如在下面化合物(26)中所示的具體立體化學(xué)將化合物25(65mg,0.077mmol)溶解在4mLDCM中。加入2mLTFA,并且將該溶液攪拌20分鐘。將該反應(yīng)混合物倒在含有NaHC03和CHCl3的分液漏斗中。用CHC13(3x50mL)萃取，并且用NaHC03(2x50mL)和鹽水洗滌。將有機(jī)相用MgS04干燥，并通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。將粗產(chǎn)物在YMC二氧化硅上通過(guò)快速色譜純化(20g,乙醚)，獲得了產(chǎn)物26,為白色固體(25mg,產(chǎn)率45%)。實(shí)施例4:制備l-甲基-環(huán)丙烷磺酸[17-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉_4-基氧基]-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳_7_烯_4-羰基]-酰胺，其具有如在下面化合物(28)中所示的具體立體化學(xué)步驟A:制備1-曱基-環(huán)丙烷磺酸[17-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉_4_基氧基]_13_(4-曱氧基芐基)-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基]-酰胺，其具有如在下面化合物(27)中所示的具體立體化學(xué)按照實(shí)施例3步驟D中描述的方法，但是使用1-甲基環(huán)丙基磺酰胺來(lái)代替環(huán)丙基磺酰胺(如WO2004/043339中所述制得的)，通過(guò)二氧化硅柱色譜純化(洗脫劑為乙醚)后，獲得了本標(biāo)題化合物(27)(24.5mg,43%)，為白色固體。步驟B:制備1-曱基-環(huán)丙烷磺酸[17-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉_4-基氧基]-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯_4-羰基]-酰胺，其具有如在下面化合物(28)中所示的具體立體化學(xué)將化合物27(20mg,0.023mmol)溶解在3ml二氯甲烷中，加入1mlTFA,并且將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘。HPLC表明不存在原料。將飽和碳酸氬鈉溶液(5ml)加到將該反應(yīng)混合物中，并且將所得混合物萃取到CH2C12內(nèi)。將有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，用MgS04干燥，并通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。將所得油狀物在YMC二氧化硅上通過(guò)柱色語(yǔ)純化(20g,乙醚)，獲得了本標(biāo)題化合物(28)(14.7mg,85%),為白色粉末。HPLC純度〉95%。實(shí)施例5:制備1-曱基-環(huán)丙烷磺酸[18-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-甲氧基喹啉_4-基氧基]-2,15-二氧代-3,14,16-三氮雜-三環(huán)[14.3.0.04'6]十九碳-7_烯_4-羰基]-酰胺，其具有如在下面化合物(33)中所示的具體立體化學(xué)步驟A:制備l-[[l-[庚-6-烯基-(4-曱氧基芐基)-氨基曱?；鵠-4-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-甲氧基喹啉-4-基氧基]-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-2-乙烯基-環(huán)丙烷曱酸乙酯，其具有如在下面化合物(29)中所示的具體立體化學(xué)本標(biāo)題化合物29是按照實(shí)施例3步驟A中描述的方法，但是使用庚_6-烯基-(對(duì)甲氧基千基)-胺代替己-5-烯基-(對(duì)曱氧基千基)-胺制得的。歩驟B:制備18-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉-4-基氧基]-14-(4-甲氧基芐基)-2,15-二氧代-3,14,16-三氮雜-三環(huán)[14.3.0.04'6]十九碳-7-烯_4-曱酸乙酯，其具有如在下面化合物(30)中所示的具體立體化學(xué)根據(jù)實(shí)施例3步驟B中描述的方法處理在步驟A中獲得的化合物(29)，獲得了本標(biāo)題化合物(30)。步驟C:制備18-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-甲氧基喹啉-4-基氧基]-14-(4-甲氧基芐基)-2，15-二氧代-3,14，16-三氮雜-三環(huán)[14.3.0.04'6]十九碳-7_烯_4-甲酸，其具有如在下面化合物(31)中所示的具體立體化學(xué)根據(jù)實(shí)施例3步驟C中描述的方法處理在步驟B中獲得的化合物(30),獲得了本標(biāo)題化合物(31)。歩驟D:制備1-甲基-環(huán)丙烷磺酸[l8-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉_4-基氧基]-14-(4-曱氧基芐基)-2,15-二氧代-3,14，16-三氮雜-三環(huán)[14.3.0.04'6]十九碳-7-烯-4-羰基]-酰胺，其具有如在下面化合物(32)中所示的具體立體化學(xué)根據(jù)實(shí)施例3步驟D中描述的方法處理在步驟C中獲得的化合物(31),但是使用LiHMDS作為堿來(lái)代替DBU(4叫，1M在THF中的溶液)。在室溫2小時(shí)后該反應(yīng)完全。通過(guò)二氧化^5圭柱色i普純化后，獲得了本標(biāo)題化合物(32),為白色固體，其不用另外的純化而直接用于下一步驟。步驟E:制備1-甲基-環(huán)丙烷磺酸[18-[2-(4-異丙基-噻唑-2-基)-7-曱氧基喹啉_4-基氧基]-2,15-二氧代-3,14，16-三氮雜-三環(huán)-[14.3.0.04'6]十九碳-7-烯-4-羰基]-酰胺，其具有如在下面化合物(33)中所示的具體立體化學(xué)按照實(shí)施例3步驟E中描述的方法處理在上面步驟D中獲得的化合物(32)(100mg),獲得了本標(biāo)題化合物(33)(55mg,73%)。實(shí)施例6:式(I)化合物的活性復(fù)制子試驗(yàn)在細(xì)胞試驗(yàn)中測(cè)定式(I)化合物抑制HCVRNA復(fù)制的活性。本試驗(yàn)證明了式(I)化合物在細(xì)胞培養(yǎng)中具有抗HCV復(fù)制子功能的活性。細(xì)胞試驗(yàn)是基于雙順?lè)幢磉_(dá)構(gòu)建體，如Lohmann等人(1999)Sciencevol.285pp.110-113,Kneger等人(2001)JournalofVirology75:4614-4624在多靶篩選策略方面作了改進(jìn)。該方法基本上如下文所述。該試驗(yàn)利用了穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系Huh-7luc/neo(此后被稱(chēng)作Huh-Luc)。該細(xì)胞系包含用于編碼雙順?lè)幢磉_(dá)構(gòu)造的RNA,所述表達(dá)構(gòu)建體包含HCVlb型的野生型NS3-NS5B區(qū)域，由腦心肌炎病毒(EMCV)的內(nèi)核糖體進(jìn)入位點(diǎn)(IRES)翻譯而來(lái)，其前面是報(bào)道分子部分(FfL-熒光素酶)和可選標(biāo)記部分(neo11、新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶)之后。該構(gòu)建體通過(guò)5'和3'NTRs(非翻譯區(qū))與HCVlb型接壤。在G418(neo"的存在下，復(fù)制子細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)依賴(lài)于HCVRNA的復(fù)制。表達(dá)HCVRNA的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的復(fù)制子細(xì)胞被用于篩選抗病毒化合物，所述HCVRNA自動(dòng)復(fù)制并達(dá)到高水平，其尤其是編碼熒光素酶。將復(fù)制子細(xì)胞平鋪在添加有不同濃度的試驗(yàn)和對(duì)照化合物的384孔板上。培養(yǎng)3天后，通過(guò)測(cè)定熒光素酶的活性(使用標(biāo)準(zhǔn)焚光素酶測(cè)定底物和試劑，PerkinElmerViewLuxTmultraHTS微量培養(yǎng)板圖像儀)，來(lái)測(cè)定HCV的復(fù)制。在對(duì)照培養(yǎng)物中的復(fù)制子細(xì)胞在不存在任何抑制劑的情況下具有高的熒光素酶表達(dá)。在Huh-Luc細(xì)胞上監(jiān)測(cè)化合物對(duì)于熒光素酶活性的抑制活性，對(duì)于每個(gè)測(cè)定化合物得到了劑量-反應(yīng)曲線。然后計(jì)算ECs。值，該值代表了使被檢測(cè)的熒光素酶的活性水平或者更特別是在遺傳上相關(guān)聯(lián)的HCV復(fù)制子RNA的復(fù)制能力降低50%所需要的化合物的量。抑制試驗(yàn)該試驗(yàn)的目的是測(cè)定本發(fā)明化合物對(duì)于HCVNS3/4A蛋白酶復(fù)合物的抑制作用。該試驗(yàn)提供了本發(fā)明化合物抑制HCVNS3/4A蛋白酶解活性的有效性。基本上按照Poliakov,2002ProtExpression&Purification25363371中描述的方法測(cè)定全長(zhǎng)丙型肝炎病毒NS3蛋白酶的抑制。簡(jiǎn)言之，在肽輔因子KKGSVVIVGRIVLSGK(AkeEngstr6m,DepartmentofMedicalBiochemistryandMicrobiology,UppsalaUniversity,Sweden).[Landro,1997#Biochem369340-9348]存在下通過(guò)分光熒光法測(cè)定depsipeptide底物Ac-DED(Edans)EEAbu\|/[COO]ASK(Dabcyl)-NH2(AnaSpec，SanJos6，USA)的水解。將該酶(lnM)在含有25NS4A輔因子和抑制劑的50mMHEPES,pH7.5,10mMDTT,40%甘油，0.1。/。正辛基-D-葡糖苷中于3(TC培養(yǎng)10分鐘，通過(guò)加入0.5pM底物來(lái)開(kāi)始反應(yīng)。將抑制劑溶解在DMSO中，超聲處理30秒，并且渦旋。在測(cè)定之間，把溶液在-20。C貯存。將DMSO在測(cè)定樣本中的終濃度調(diào)節(jié)至3.3%。#>據(jù)7>開(kāi)的方法[Liu,1999AnalyticalBiochemistry267331-335]來(lái)校正水解速度的內(nèi)濾器效應(yīng)。使用竟?fàn)幮砸种颇Ｐ秃凸潭ǖ腒m值(0.15pM)，通過(guò)非線性回歸分析(GraFit，ErithacusSoftware,Staines,MX，UK)來(lái)估算Ki值。對(duì)于所有測(cè)定，都至少進(jìn)行兩個(gè)平行測(cè)定。下表1列出了根據(jù)上面的實(shí)施例制備的化合物。所測(cè)定的化合物的活性也列在表1中。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage71</column></row><table>實(shí)施例7:式(T)化合物的滲透性該實(shí)施例測(cè)定通過(guò)人胃腸管細(xì)胞(canal)的式(I)化合物的轉(zhuǎn)運(yùn)。該分析使用傳代數(shù)為40-60的眾所周知的Caco-2細(xì)胞。頂端(A)至底側(cè)(B)的運(yùn)送將每一種化合物在2-4個(gè)孔中進(jìn)行試驗(yàn)。底側(cè)與頂側(cè)孔分別含有1.5mL及0.4mL轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液(TB),且測(cè)試物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)濃度為10|liM。此外，所有試驗(yàn)溶液及緩沖液均含有1%DMS0。于實(shí)驗(yàn)前將轉(zhuǎn)運(yùn)平板用含有10。/。血清的培養(yǎng)基預(yù)包被30分鐘以避免非特異性結(jié)合至塑料物質(zhì)上。于過(guò)濾器支架上培育21至28天后，細(xì)胞已準(zhǔn)備好用于滲透實(shí)驗(yàn)。1號(hào)轉(zhuǎn)運(yùn)平板包括3行，每行各有4個(gè)孔。第l行表示"洗滌"，第2行表示"30分鐘"，且第3行表示"60分鐘"。2號(hào)轉(zhuǎn)運(yùn)平板包括3行，每行各有4個(gè)孔。第4行代表"90分鐘"，第5行代表"120分鐘"，且剩余的行數(shù)未經(jīng)指定。將培養(yǎng)基從頂端孔中移除，且將插入物轉(zhuǎn)移至2個(gè)平板當(dāng)中不具有插入物的轉(zhuǎn)運(yùn)平板(第1平板)中的洗滌行(第1行)中，其已在第1至5行中用1.5mL轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液(HBSS,25mMHEPES,pH7.4)制備。在A_>B篩選中，底側(cè)孔中的TB還含有1%牛血清白蛋白。將0.5mL轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液(HBSS,25mMMES，pH6.5)加到插入物中,且將細(xì)胞單層在轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖系統(tǒng)中于37。C在多混合震動(dòng)器中平衡30分鐘。在緩沖系統(tǒng)中平衡后，通過(guò)EVOM碎塊棒儀器(chopstickinstrument)在各孔中測(cè)量經(jīng)上皮的電阻值(TEER)。每孔的TEER值通常為400-1000Q(依所用的傳代數(shù)而定)。將轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液(TB,pH6.5)從頂端取出，且將插入物轉(zhuǎn)移至30分鐘的行列(第2行)中，且將包括測(cè)試物質(zhì)的新鮮的425TB(pH6.5)添加至頂端(供給者)孔中。將平板在多混合震動(dòng)器中于37。C以約150至300rpm的低震動(dòng)速度培育。在第2行中培育30分鐘后，每隔30分鐘，將插入物轉(zhuǎn)移到新的預(yù)-溫?zé)岬牡讉?cè)(接受者)孔中；第3行(60分鐘)，第4行(90分鐘)以及第5行(120分鐘)。在實(shí)驗(yàn)約2分鐘以及結(jié)束時(shí)，從頂端溶液中取出25pL樣品。這些樣品代表從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始到結(jié)束的供給者樣品。在安排的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上，從底側(cè)(接受者)孔中取出300pL,并且在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)測(cè)量TEER的后值。將乙腈加到所有收集的樣品中至在樣品中最終濃度為50%。將所收集的樣品貯存在-20。C下直到通過(guò)HPLC或LC-MS進(jìn)行分析。底側(cè)至頂端的轉(zhuǎn)運(yùn)將每種化合物在2-4個(gè)孔中進(jìn)行測(cè)試。底側(cè)和頂端的孔分別含有1.55mL和0.4mLTB,且測(cè)試物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)濃度為10|uM。此外，所有的試驗(yàn)溶液和緩沖液都含有1%DMS0。實(shí)驗(yàn)之前，將轉(zhuǎn)運(yùn)平板用含有10%血清的培養(yǎng)基預(yù)包被30分鐘以避免非特異性結(jié)合到塑料物質(zhì)上。在濾器支架上培養(yǎng)21至28天后，細(xì)胞已準(zhǔn)備好用在滲透實(shí)驗(yàn)。將培養(yǎng)基從頂端孔取出，并且將插入物轉(zhuǎn)移到不含插入物的新平板(轉(zhuǎn)運(yùn)平板)中的洗滌行(第l行)。轉(zhuǎn)運(yùn)平板包括3行，每行有4個(gè)孔。第1行表示"洗滌，，，且第3行為"實(shí)驗(yàn)行"。轉(zhuǎn)運(yùn)平板已在前面在洗滌行第1行中用1.5mLTB(pH7.4)和在實(shí)驗(yàn)行第3行(供給者側(cè))中用1.55mLTB(pH7.4),包括測(cè)試物質(zhì)制備。將0.5mL轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液(HBSS,25mMMES,pH6.5)加到第1行的插入物中，且將細(xì)胞單層在轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖系統(tǒng)中于37。C在多混合震動(dòng)器中平衡30分鐘。在緩沖系統(tǒng)中平衡后，通過(guò)EVOM碎塊棒儀器(chopstickinstrument)在各孔中測(cè)量TEER值。將轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液(TB,pH6.5)從頂端側(cè)取出，并且將插入物轉(zhuǎn)移至第3行，且加入400|uL新鮮的TB,pH6.5。30分鐘后，從頂孔(接受者)中取出250pL,且用新鮮的轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液替代。然后，提取250pL樣品，且每隔30分鐘用新鮮的轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液替代直到120分鐘實(shí)驗(yàn)結(jié)束，最后，在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)測(cè)定TEER的后值。在約2分鐘后且在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，從底側(cè)(供給者)隔室中提取25(iL樣品。這些樣品代表來(lái)自在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)的供給者樣品。將乙腈加到所有收集的樣品中至在樣品中最終濃度為50%。將所收集的樣品貯存在-20。C下直到通過(guò)HPLC或LC-MS進(jìn)行分析測(cè)定所吸收的累積分?jǐn)?shù)FAcum對(duì)時(shí)間，通過(guò)以下公式計(jì)算計(jì)算FAc職對(duì)時(shí)間其中Q^是在間隔i結(jié)束時(shí)的接受者濃度，并且CD,是在間隔i開(kāi)始時(shí)的供給者濃度。應(yīng)該獲得線性關(guān)系。滲透系數(shù)(Papp,cm/s)是通過(guò)以下公式計(jì)算的P=，r卿一(掘)其中1^是轉(zhuǎn)運(yùn)速度(1^11-1),定義為通過(guò)將吸收的累積分?jǐn)?shù)(FAcum)作為時(shí)間(min)的函數(shù)進(jìn)行線性回歸而獲得的斜率，VR是接受室(mL)中的體積，和A是濾器的面積(cm2)。表2:參照化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage74</column></row><table>下表3顯示了，當(dāng)在上述滲透性試驗(yàn)中測(cè)定時(shí)，本發(fā)明化合物的滲透性結(jié)果(Papp),以l(T6cm/s為單位表示。<table>tableseeoriginaldocumentpage74</column></row><table>實(shí)施例8:利托那韋對(duì)于HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑的體外代謝阻斷使用3(iM受試化合物與作為加強(qiáng)劑化合物的lO(iM利托那韋，在代謝阻斷實(shí)驗(yàn)中測(cè)試不同的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑。將受試化合物和利托那韋加到懸浮在磷酸鉀緩沖液(pH=7.4)內(nèi)的人肝臟微粒體(蛋白濃度1mg/ml)中，以在最終的反應(yīng)混合物中達(dá)到3^M受試化合物和10fiM利托那韋的濃度。在未加強(qiáng)的平行反應(yīng)中，不加入利托那韋。使用人肝臟微粒體來(lái)用于空白實(shí)-驗(yàn)。加入由P-煙酰胺腺。票呤二核苷酸磷酸鹽(卩-NADP,0.5mg/ml,653.2^4)、D-葡萄糖-6-磷酸(2mg/ml，7.1mM)、葡萄糖-6-磷酸脫氬酶(1.5U/ml)在2%NaHC03內(nèi)組成的輔因子混合物(以1:3的比例)之后，將該反應(yīng)混合物在37°C培養(yǎng)30或120分鐘，然后通過(guò)把溫度提高至95。C來(lái)停止該反應(yīng)。使用HPLC-MS測(cè)定受試化合物濃度。結(jié)果總結(jié)在下表4中。值是在指定培養(yǎng)時(shí)間之后，與初始受試化合物濃度相比，測(cè)定的受試化合物的百分比。每個(gè)值是兩個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的平均值。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage75</column></row><table>實(shí)-瞼表明，通過(guò)加入IOnM利托那韋，受試化合物(3inM)的代謝幾乎被完全阻斷了。實(shí)施例9:利托那韋對(duì)化合物9在狗中的藥動(dòng)學(xué)的體內(nèi)影響使用在50%PEG400/水中制劑，測(cè)定以10mg/kg單劑量給藥后化合物9在雄性小獵狗(Beagledogs)中的口服藥動(dòng)學(xué)和10mg/kg利托那韋的"加強(qiáng)"影響。將6只雄性小獵狗(體重為8-10kg)隨機(jī)分成分別每組由3只動(dòng)物組成的2組(加強(qiáng)和未加強(qiáng))。包括未治療或載體治療的對(duì)照動(dòng)物。動(dòng)物在給藥之前禁食過(guò)夜(大約12h禁食期)，并且在給藥之前不接受任何食物直至給藥后6小時(shí)。整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間保持隨意獲得飲水。未加強(qiáng)組的狗接受單次口服10mg/kg劑量的化合物9,配制成權(quán)利要求1.具有式(I)的化合物及其N(xiāo)-氧化物、鹽和立體異構(gòu)形式，其中虛線代表原子C7與C8之間的任選雙鍵；R1是氫或C1-6烷基；R2是氫或C1-6烷基；且n是3、4、5或6。2.權(quán)利要求l的化合物，其中所述化合物具有式(I-a):OMe3.權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)的化合物，其中所述化合物具有式(I-b):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的化合物，其中n是4或5。5.權(quán)利要求1_3任一項(xiàng)的化合物，其中W是氫或曱基6.權(quán)利要求1_3任一項(xiàng)的化合物，其中尺2是氫.7.權(quán)利要求1_3任一項(xiàng)的化合物，其中R"是曱基.8.權(quán)利要求1_3任一項(xiàng)的化合物，其中所述化合物選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>9.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)的化合物，其中所述化合物不是N-氧化物或鹽。10.—種組合，所述組合包含(a)權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所定義的化合物或其可藥用鹽；和(b)利托那韋或其可藥用鹽。11.藥物組合物，所述組合物包含載體與作為活性組分的抗病毒有效量的權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所定義的化合物或權(quán)利要求10的組合。12.用作藥物的權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的化合物或權(quán)利要求10的組合。13.權(quán)利要求l-9任一項(xiàng)的化合物或權(quán)利要求IO的組合在制備用于抑制HCV復(fù)制的藥物中的應(yīng)用。14.在溫血?jiǎng)游镏幸种艸CV復(fù)制的方法，所述方法包括施用有效量的權(quán)利要求1_9任一項(xiàng)的化合物或有效量的權(quán)利要求10的組合的各個(gè)組分。15.制備如權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所定義的化合物的方法，其中所述方法包括(a)制備其中C7與Cs之間的鍵是雙鍵的式(I)化合物其中，其是如權(quán)利要求2中所定義的式(I-a)化合物，包括在。7與Cs之間形成雙鍵，特別是經(jīng)由烯烴復(fù)分解反應(yīng)來(lái)形成雙鍵，同時(shí)環(huán)合成大環(huán)，如下面的反應(yīng)方案所示(d)如下面的反應(yīng)方案所示，用式(VI)的喹啉將中間體(V)醚化:6(b)將式(I-a)化合物轉(zhuǎn)化成其中大環(huán)中C7與C8之間的連接是單鍵的式(I)化合物，即如權(quán)利要求3中所定義的式(I-b)化合物，包括將式(I-a)化合物中的C7-C8雙鍵還原；(c)如下面的反應(yīng)方案所示，經(jīng)由酰胺形成反應(yīng)將環(huán)丙基磺酰胺(IV)與中間體(III)反應(yīng)全文摘要式(I)的HCV抑制劑，及其N(xiāo)-氧化物、鹽和立體異構(gòu)形式，其中虛線代表原子C7與C8之間的任選雙鍵；R¹是氫或C_1-6烷基；R²是氫或C_1-6烷基；且n是3、4、5或6；包含化合物(I)的藥物組合物，以及制備化合物(I)的方法。還提供了式(I)的HCV抑制劑與利托那韋的生物可利用的組合。文檔編號(hào)A61P31/14GK101233147SQ200680027542公開(kāi)日2008年7月30日申請(qǐng)日期2006年7月28日優(yōu)先權(quán)日2005年7月29日發(fā)明者A·A·K·羅森奎斯特,B·B·薩穆?tīng)柹?D·安托諾夫,H·A·德科克,K·A·西門(mén),K·M·尼爾森,M·S·林德斯特龍,P·C·卡恩伯格,P·J·-M·B·拉博伊森申請(qǐng)人:泰博特克藥品有限公司;美迪維爾公司