專利名稱：腦功能改善用組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于改善腦功能的組合物，還涉及這些組合物作為食品以及藥物的用途。
背景技術(shù)：
日本本國正迎來急劇的高齡化社會，因此，可以預(yù)想到腦血管障礙或癡呆癥的增加。為了預(yù)防或治療這些腦疾病，正在進(jìn)行腦循環(huán)/代謝改善藥或抗癡呆藥等具有腦功能改善性的藥物的研究和開發(fā)。
近年來，正在多個方面對提高學(xué)習(xí)能力、記憶力等腦功能的物質(zhì)進(jìn)行探索、研究。并且，從預(yù)防的觀點(diǎn)出發(fā)，還需要可通過日常的飲食生活等攝取的可改善腦功能的物質(zhì)。
專利文獻(xiàn)1中記載了有效成分為北海道針蘑科(エゾハリタケ科)的蘑菇的子實(shí)體或其處理物的腦功能改善劑；專利文獻(xiàn)2中記載了具有改善腦功能、增強(qiáng)學(xué)習(xí)能力以及增強(qiáng)記憶力的作用的功能性食品，其中含有乳酸菌發(fā)酵乳或乳酸菌與酵母的共生發(fā)酵乳作為有效成分；專利文獻(xiàn)3中記載了有效成分為茶氨酸(theanine)的腦功能改善劑。
藍(lán)莓(blueberry)的果實(shí)中含有作為花色素(anthocyanidin)衍生物的花色素苷(anthocyanin)。對于該花色素苷，已知其有視覺功能改善作用、體內(nèi)的活性氧去除作用、血管強(qiáng)化作用、抗炎癥作用、抗?jié)冏饔玫人幚硇Ч?，在歐美被許可為藥品。
專利文獻(xiàn)4中記載了有效成分為從藍(lán)莓的果實(shí)提取的花色素衍生物的抗癌劑。
但是，對于藍(lán)莓果實(shí)的腦功能改善作用，至今還不知曉。
專利文獻(xiàn)1日本特開2002-80390號公報專利文獻(xiàn)2日本特開平9-23848號公報專利文獻(xiàn)3日本特開平8-73350號公報專利文獻(xiàn)4日本特開2003-277271號公報發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供對腦功能的改善或提高有效的組合物。
本發(fā)明者為了解決上述課題進(jìn)行了深入研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)藍(lán)莓衍生物(ブル一ベリ一由來物)具有改善或提高腦功能的功效，從而完成了本發(fā)明。
即，本發(fā)明涉及腦功能改善用組合物，該腦功能改善用組合物的特征在于，其含有藍(lán)莓衍生物。
本發(fā)明的組合物具有改善或提高腦功能的效果。
另外，本發(fā)明的組合物即使長期服用也無需擔(dān)心副作用等，安全性高。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明中使用的藍(lán)莓果實(shí)衍生物(ブル一ベリ一果実由來物)，只要是以屬于杜鵑花科越桔屬(vaccinium)的植物(下面還稱為“藍(lán)莓”)的果實(shí)為原料得到的物質(zhì)即可，沒有特別限定，例如可以舉出果實(shí)本身；果實(shí)的細(xì)片、粉末(例如將果實(shí)干燥后粉末化得到的物質(zhì)等)、以及它們的懸濁液；果實(shí)的提取液、濃縮提取液以及萃取粉末等提取物；以及對該提取物進(jìn)行精制得到的精制物等。在得到優(yōu)異的腦功能改善效果的方面，優(yōu)選藍(lán)莓果實(shí)提取物，特別優(yōu)選精制物。
本發(fā)明中，這些藍(lán)莓果實(shí)提取物可以僅使用1種，也可以2種以上并用。
本發(fā)明中，作為藍(lán)莓的果實(shí)，使用了果實(shí)本身，但也可以僅使用果肉或果皮。
并且，本發(fā)明中，作為藍(lán)莓的果實(shí)，可以使用純的(生の)果實(shí)、果肉或果皮，也可以使用經(jīng)干燥的果實(shí)、果肉或果皮。
作為上述藍(lán)莓，只要是屬于杜鵑花科越桔屬的植物即可，沒有特別限定，可以舉出兔眼藍(lán)莓(V.shei)、澳洲越橘(V.australe)、北方高叢藍(lán)莓(V.corymbosum)、歐洲越桔(V.myrtillus)、或矮叢藍(lán)莓(V.angustifolium)，在能夠發(fā)揮優(yōu)異的腦功能改善效果的方面，優(yōu)選歐洲越桔(又稱為山桑子(bilberry))。
本發(fā)明中，作為藍(lán)莓果實(shí)衍生物，還可以舉出藍(lán)莓的果實(shí)中含有的成分。作為這種成分，可以舉出花色素衍生物例如花色素、花色素苷、黃烷-3-醇以及黃酮醇糖苷等。
在發(fā)揮優(yōu)異的腦功能改善效果的方面，優(yōu)選花色素衍生物，特別優(yōu)選花色素苷。
藍(lán)莓的果實(shí)中含有的花色素苷具有例如下述通式所示的花色素結(jié)構(gòu)。
通式中，Glyc表示阿拉伯糖、葡萄糖以及半乳糖中的任意一種。并且，通式中R1、R2和R3具有表1所述的組合。
表1 歐洲越桔的果實(shí)中所含有的花色素苷共計(jì)15種，其是在如表1所示的R1～R3的取代基不同的5種花色素上鍵合有3種糖(阿拉伯糖、葡萄糖以及半乳糖)而成的。另外，下面將這15種花色素苷統(tǒng)稱為“花色素苷”。
可利用公知的方法從藍(lán)莓中提取花色素苷。例如，將對藍(lán)莓果實(shí)進(jìn)行榨汁得到的藍(lán)莓汁吸附到Sep-Pac Plus C18Cartridge柱(Waters公司制)上，利用無菌水(滅菌水)進(jìn)行清洗，然后用1％的HCl-甲醇溶液洗脫，由此提取純度為90％的花色素苷。
另外，在得到含有大量的花色素苷的藍(lán)莓果實(shí)提取物的方面，優(yōu)選利用SEPHADEXLH-20柱(Amersham Pharmacia Biotech AB公司制Cat17-0090-01)進(jìn)行提取。
將如此得到的提取液進(jìn)行HPLC(高效液相色譜法)，將色譜圖與作為標(biāo)準(zhǔn)品的花色素苷的色譜圖進(jìn)行比較，結(jié)果確認(rèn)到在提取液中含有上述15種花色素苷。
另外，用于得到花色素苷的原料不限于對藍(lán)莓的果實(shí)進(jìn)行榨汁得到的藍(lán)莓汁，也可以使用市售的藍(lán)莓粉末或濃縮液。
本發(fā)明的組合物可以是藍(lán)莓果實(shí)衍生物例如藍(lán)莓的果實(shí)、其提取物、其精制物、或花色素苷本身，也可以含有其它成分，例如改善或提高腦功能的物質(zhì)等。
作為改善或提高腦功能的物質(zhì)，優(yōu)選例如銀杏葉提取物、蜂王漿、靈芝、高麗人參、小球藻(chlorella)、糙米黑醋(玄米黑酢)、蜂膠、芝麻素(sesamin)、姜黃、大豆卵磷脂、DHA、磷脂酰絲氨酸(Phosphatydyl serine)。
本發(fā)明的組合物，可以是藍(lán)莓果實(shí)衍生物例如藍(lán)莓的果實(shí)、其提取物、其精制物、或花色素苷本身，在不損害本發(fā)明的效果的前提下，可以含有賦形劑、甜味劑、酸味劑、增稠劑、香料、色素、乳化劑以及其它通常用于藥品、食品等中的添加劑或材料。
本發(fā)明的組合物用于預(yù)防和/或治療腦功能障礙。作為這類腦功能障礙，可以舉出例如腦血管性癡呆、阿耳茨海默(Alzheimer)型癡呆以及兩者的混合型等的癡呆癥；健忘癥或記憶障礙(物忘れ)等記憶力下降；理解力下降學(xué)習(xí)能力下降梅尼埃爾氏病(Meniere′s disease)以及膜下出血、腦出血、腦血栓、腦梗塞以及腦浮腫等腦血管障礙的后遺癥，作為這種后遺癥有例如意識障礙、運(yùn)動障礙和語言障礙(出血或梗塞引起的腦的相對側(cè)的手腳麻痹)、構(gòu)音障礙(有時伴隨面部神經(jīng)麻痹)、失語癥、感情障礙、思考障礙、感覺障礙、記憶障礙以及姿勢異常等。尤其，本發(fā)明的組合物在預(yù)防和/或治療腦功能性障礙方面有用阿耳茨海默型癡呆；梅尼埃爾氏??；以及膜下出血、腦出血、腦血栓、以及腦梗塞的后遺癥。
并且，本發(fā)明的組合物不僅可用于預(yù)防、治療腦功能障礙，還可用于進(jìn)一步提高健康人的學(xué)習(xí)能力、記憶力或反射反應(yīng)能力等腦功能。
本發(fā)明的組合物，可以作為食品或動物用飼料，例如作為健康食品、功能性食品、健康增補(bǔ)食品、特定保健用食品、美容食品、或營養(yǎng)增補(bǔ)食品(補(bǔ)品，supplement)使用。這些食品和動物用飼料也可以是例如茶和果汁等飲料水；以及冰淇淋、果凍、糖、巧克力以及口香糖等形式。并且，也可以是液劑、粉劑、粒劑、膠囊劑或片劑的形式。此處，動物用飼料的動物包括寵物、畜產(chǎn)動物或動物園等中飼養(yǎng)的動物，包括需要預(yù)防或治療水腫(むくみ)的全部動物。
本發(fā)明的組合物可以用作藥品或準(zhǔn)藥品。這些藥品或準(zhǔn)藥品，能夠以例如散劑、片劑、包衣片、糖衣片、硬明膠膠囊劑或軟明膠膠囊劑、液劑、乳濁劑、或懸濁劑的形式經(jīng)口施用，也可以例如以栓劑的形式經(jīng)直腸施用，或例如以注射劑或輸液的形式施用；例如以軟膏、霜劑、凝膠劑或液劑的形式進(jìn)行局部或經(jīng)皮的非經(jīng)口施用。優(yōu)選經(jīng)口施用。
以片劑的形式使用本發(fā)明的組合物時，可以使用在藥學(xué)上或食品學(xué)上許可的各種載體，可以舉出乳糖、葡萄糖等賦形劑；水、乙醇等結(jié)合劑；瓊脂末、干燥淀粉等崩解劑；甘油硬脂酸酯、可可油等崩解抑制劑；高嶺土、膨潤土等吸附劑；十二烷基硫酸鈉等吸收促進(jìn)劑；甘油、淀粉等保濕劑；硼酸末、聚乙二醇等潤滑劑等。
本發(fā)明的組合物的攝取量沒有特別限定，可以根據(jù)劑型以及使用者或患者等攝取者或攝取動物的年齡、體重以及癥狀進(jìn)行適當(dāng)選擇。
例如，作為有效成分量，按花色素苷量計(jì)，攝取者或攝取動物的每1kg體重每日經(jīng)口攝取0.3mg～5mg、優(yōu)選0.35mg～3kg、更優(yōu)選0.35mg～1.5mg，能夠得到優(yōu)異的腦功能改善效果，所以較理想。
攝取時間間隔(期間)可根據(jù)攝取者或攝取動物的年齡、癥狀，任意決定。
實(shí)施例下面，舉出制造例、制劑例、試驗(yàn)例等，更詳細(xì)具體地說明本發(fā)明，但本發(fā)明不限于此。尤其，此處沒有給出將本發(fā)明的藍(lán)莓的果實(shí)分成果肉和果皮的實(shí)施例，但也可以從果肉分離果皮后分別使用。
使用的藍(lán)莓為インデイナ公司出售的商品名為ミルトセレクト的山桑子提取物。該山桑子提取物含有表A所示的花色素苷。另外，結(jié)合糖僅為半乳糖和阿拉伯糖。所使用的山桑子含有較多的翠雀素類(36.7％)、花青素類(28.7％)、牽牛素類(14.7％)和翠雀素類的花色素苷。
表A使用的藍(lán)莓(野莓wild berry，ウイルドベリ一)的花色素苷的種類和量

1.藍(lán)莓果實(shí)提取物的制造例1將藍(lán)莓(歐洲越桔)的果實(shí)榨汁，將得到的藍(lán)莓汁吸附到Sep-Pac PlusC18Cartridge柱(Waters公司制)上，利用無菌水進(jìn)行清洗后，用1％的HCl-甲醇溶液洗脫，從而提取藍(lán)莓中的花色素苷。利用蒸發(fā)裝置在溫度37℃下對這樣得到的提取液進(jìn)行濃縮后，將pH調(diào)整為7.0，溶解于DMSO(二甲亞砜)中，接著進(jìn)行干燥，得到藍(lán)莓果實(shí)提取物。另外，在想得到含有大量的花色素苷的藍(lán)莓果實(shí)提取物時，還可以使用SEPHADEXLH-20柱(Amersham Pharmacia Biotech AB公司制Cat17-0090-01)。
2.試驗(yàn)食物的制造根據(jù)以下處方，按照慣用的方法，在軟膠囊(OVAL No.6)中填充混合成分，制造了作為試驗(yàn)食物的制劑例1和空白食物。
表2 試驗(yàn)食物的組分(1個膠囊中)

膠囊的外皮含有明膠末、甘油、二氧化鈦以及焦糖色素。
3.受試者在試驗(yàn)實(shí)施前進(jìn)行了生活習(xí)慣問卷調(diào)查的50歲～70歲的男女中，選擇下述排除標(biāo)準(zhǔn)以外的人作為受試者。
排除標(biāo)準(zhǔn)1)已經(jīng)常用藍(lán)莓的人2)常用以藍(lán)莓為主成分的藥品或健康增補(bǔ)食品的人3)正在攝取影響腦功能或血液流動的藥品(華法令等)或健康增補(bǔ)食品的人4)具有糖尿病或在腦功能、血液流動、消化器、胰腺、肝臟或腎臟等方面具有嚴(yán)重的疾病的人5)開始本試驗(yàn)時，正在參加其它臨床試驗(yàn)的人6)具有食物過敏(包括藍(lán)莓)的人7)根據(jù)生活習(xí)慣問卷調(diào)查的結(jié)果，判斷為不適合作為受試者的人(例如，因試驗(yàn)食物組分中的成分引起過過敏的人、具有極端酗酒傾向的人等)8)具有色覺異?；蛏X障礙的人9)其它由試驗(yàn)負(fù)責(zé)醫(yī)生判斷為不合適的人4.試驗(yàn)日程表試驗(yàn)以雙盲檢測平行組間比較來進(jìn)行。
首先，使上述的受試者在試驗(yàn)期間的初日(試驗(yàn)第一天)來到醫(yī)院，進(jìn)行問診、身體測量以及腦功能檢查1和2。
接著，將這些受試者分為試驗(yàn)組和空白組2組，隨機(jī)分為23名和24名，開始試驗(yàn)食物的攝取。
按照每日1次、2個膠囊、連續(xù)12周，使試驗(yàn)組的受試者攝取制劑例1，使空白組的受試者攝取空白食物。另外，在攝取中讓受試者記日記。
從開始攝取起4周后(試驗(yàn)第28天)、8周后(試驗(yàn)第56天)、以及12周后(試驗(yàn)第84天)，分別進(jìn)行了問診、身體測量以及腦功能檢查2。
5.檢查項(xiàng)目在本試驗(yàn)中，進(jìn)行了問診、身體測量以及腦功能檢查。各檢查方法如下。并且，在各檢查中得到的值以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差表示。
1)問診詢問有無主觀和客觀癥狀。
2)身體測量測量身高、體重、體脂肪、血壓、脈動數(shù)以及視力。
3)腦功能檢查作為腦功能檢查，進(jìn)行了如下的腦功能檢查1和2。檢查在空腹?fàn)顟B(tài)下進(jìn)行。并且，對于吸煙者，在檢查結(jié)束之前禁止吸煙。
腦功能檢查1利用改良長谷川式簡易智力評價等級(HDS-R)進(jìn)行檢查。
腦功能檢查2利用單詞的想起試驗(yàn)和叫色心理測驗(yàn)(stroop test)進(jìn)行檢查。各試驗(yàn)按照如下進(jìn)行。
(i)單詞的想起試驗(yàn)指示受試者“請盡可能多地說出您所知道的動物的名字”，記錄從舉出的第一個動物的名字到60秒以內(nèi)列舉的動物的名字。記錄除去了重復(fù)的名字的所列舉的動物的名字的數(shù)量，作為想起數(shù)量。
怎么也想不起第一個動物的名字時，對受試者進(jìn)行引導(dǎo)，“例如，狗是動物的名字，除此之外還有哪些呢”。若該引導(dǎo)之后也不能想起，經(jīng)過了30秒時，中止試驗(yàn)，將想起數(shù)量記為0。
動物不限于哺乳類，爬蟲類、鳥類、魚類等名字也加到想起數(shù)量中。
同樣地，使受試者分別列舉蔬菜以及以“あ”開頭的單詞，記錄它們的想起數(shù)量。
并且，合計(jì)這些動物、蔬菜以及以“あ”開頭的單詞的各自的想起數(shù)量，將它作為總想起數(shù)量。
(ii)叫色心理測驗(yàn)進(jìn)行如下4種試驗(yàn)，記錄讀取所需的時間，4種試驗(yàn)分別為讀出隨機(jī)寫有“紅”“藍(lán)”“黑”3種顏色的70個字的文字的試驗(yàn)(步驟1)；讀出70個“紅”“藍(lán)”“黑”3種顏色的試驗(yàn)(步驟2)；以及將寫有“紅”“藍(lán)”“黑”的70個字隨機(jī)分配為“紅”“藍(lán)”“黑”的3種顏色，讀取其文字的試驗(yàn)(步驟3)以及讀取其顏色的試驗(yàn)(步驟4)，記錄讀取所需要的秒數(shù)。
4)日記使受試者記載試驗(yàn)食物的攝取狀況、主觀和客觀癥狀以及其它藥品的服藥狀況。
6.試驗(yàn)結(jié)果1)受試者的背景空白組和試驗(yàn)組中，分別有24名和23名的受試者(共計(jì)47名)參加了試驗(yàn)，沒有掉隊(duì)、中止的人。將參加了試驗(yàn)的受試者的背景示于表3。在年齡、性別以及基于HDS-R的分?jǐn)?shù)方面在組間未見不均衡(P＞0.05)。另外，統(tǒng)計(jì)分析利用方差分析(ANOVA)進(jìn)行。
表3 受試者的背景

值平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差2)有效性根據(jù)試驗(yàn)第1天、第28天、第56天、第84天的受試者腦功能檢查2的測定值，評價制劑例1對腦功能的有效性。
在同一組內(nèi)比較試驗(yàn)第1天、試驗(yàn)第28天、試驗(yàn)第56天、第84天時，根據(jù)組內(nèi)的對應(yīng)的某一t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析。顯著性水平為雙側(cè)5％。
3)腦功能檢查(i)單詞的想起試驗(yàn)試驗(yàn)組中，動物、蔬菜、以及以“あ”開頭的單詞的想起數(shù)量以及總想起數(shù)量與攝取前相比有所增大(表4)，但在空白組中，未見增加。
(ii)叫色心理測驗(yàn)試驗(yàn)組中，步驟1～4的各步驟中的讀取所需的秒數(shù)減少(表5)，但在空白組中，未見減少。
如上所述，空白組中沒有看到明顯的效果，但可判斷出制劑例1的腦功能改善效果。
表4 試驗(yàn)食物對腦功能的作用(單詞的想起試驗(yàn))

單位個值平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差()內(nèi)表示從試驗(yàn)第1天的值的增加率(％)。
*與試驗(yàn)第1天的值的比較。t檢驗(yàn)P＜0.05**與試驗(yàn)第1天的值的比較。t檢驗(yàn)P＜0.01表5 試驗(yàn)食品對腦功能的作用(叫色心理測驗(yàn))

單位秒值平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差分別示出下述數(shù)值步驟1讀取文字所需的秒數(shù)；步驟2讀取顏色所需的秒數(shù)；步驟3讀取帶有顏色的文字所需的秒數(shù)；步驟4讀取帶有顏色的文字的顏色所需的秒數(shù)。
()內(nèi)表示從試驗(yàn)第1天的值的減少率(％)。
*與試驗(yàn)第1天的值的比較。t檢驗(yàn)P＜0.05**與試驗(yàn)第1天的值的比較。t檢驗(yàn)P＜0.015)安全性體重、血壓以及脈動未見異常。在日記中也沒有特別顯示異常的發(fā)現(xiàn)。并且，本試驗(yàn)期間，未見與試驗(yàn)食物相關(guān)的有害現(xiàn)象。
由以上，證實(shí)了制劑例1具有安全性。
產(chǎn)業(yè)上的可利用性本發(fā)明的組合物能夠適用于腦功能的改善。
該組合物能夠在上述的目的中用作藥品或健康食品、健康增補(bǔ)食品、特定保健用食品、或營養(yǎng)增補(bǔ)食品等食品。
權(quán)利要求
1.一種腦功能改善用組合物，其中，所述腦功能改善用組合物含有藍(lán)莓果實(shí)衍生物。
2.如權(quán)利要求1所述的腦功能改善用組合物，其中，所述藍(lán)莓果實(shí)衍生物是藍(lán)莓的果實(shí)。
3.如權(quán)利要求1所述的腦功能改善用組合物，其中，所述藍(lán)莓果實(shí)衍生物是花色素苷。
4.如權(quán)利要求1所述的腦功能改善用組合物，其中，所述藍(lán)莓果實(shí)衍生物是野莓果實(shí)衍生物。
5.如權(quán)利要求3所述的腦功能改善用組合物，其特征在于，所述花色素苷含有翠雀素、花青素、牽牛素作為主要成分。
6.一種具有腦功能改善功能的食品，其中，所述食品是將權(quán)利要求1～5所述的腦功能改善用組合物添加在食品中而形成的。
7.一種具有腦功能改善功能的補(bǔ)品，其中，所述補(bǔ)品含有權(quán)利要求1～5所述的腦功能改善用組合物作為主成分。
8.一種具有腦功能改善功能的藥品，其中，所述藥品含有權(quán)利要求1～5所述的腦功能改善用組合物作為主成分。
全文摘要
本發(fā)明提供腦功能改善用組合物。本發(fā)明所述的腦功能改善用組合物的特征在于，其含有藍(lán)莓衍生物。
文檔編號A61P25/00GK1957970SQ20061014279
公開日2007年5月9日 申請日期2006年10月31日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月31日
發(fā)明者佐佐木憲一 申請人:自然路有限公司