專利名稱：一種防治骨質疏松及抑郁癥的丹參有效部位群提取工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及用于治療骨質疏松癥和抑郁癥的藥物提取工藝，該提取工藝的藥物是中藥丹參，該提取工藝提取的丹參水溶性有效部位群中其主要標志性成分丹參素的含量是傳統(tǒng)工藝提取的38倍以上。
背景技術：
丹參為唇形科植物丹參Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根莖，其水溶性部分在化學成分、藥理作用方面已被廣泛研究。丹參水溶性部分主要含酚酸類成分，具有抗心絞痛，增加冠脈血流量和對抗ADP所致血小板凝集等作用，臨床可用于防治心腦血管疾病如冠心病，高血壓，腦卒中，動脈粥樣硬化等，同時還用于治療肝纖維化，消化性潰瘍，白內障，癌癥，記憶缺失，愛滋病等疾病。我們的研究發(fā)現(xiàn)丹參的水溶性部分有明顯防治腎上腺糖皮質激素導致的骨質疏松的作用，同時也發(fā)現(xiàn)了丹參的水溶性部分有明顯防治抑郁癥的作用。我們對丹參的水溶性成分進行了系列的實驗研究，發(fā)現(xiàn)了用酸水熱提法可使丹參的水溶性有效成分明顯提高，本申請就該生產(chǎn)工藝提出發(fā)明申請。
目前對丹參水溶性成份的提取工藝主要有傳統(tǒng)水煎法，乙醇回流法，動態(tài)溫浸法，超聲波法，滲漉法以及水醇綜合提取工藝等，有人做了系統(tǒng)的研究和比較，證明了這些方法提取的丹參素等主要活性成分，以傳統(tǒng)水煎法較好[劉重芳等，丹參不同提取工藝比較，中成藥，1999，21(8)38]，文獻報道的有關丹參素提取的得率不一，一般在0.2~2.8‰，即每公斤丹參藥材可提取0.2~2.8克的丹參素。我們發(fā)明的酸水熱提法可使丹參素的得率增加到20‰，即每公斤丹參藥材可提取20克的丹參素，比傳統(tǒng)工藝增加7到70倍。

發(fā)明內容
我們通過大量的實驗研究和篩選，建立了丹參水溶性有效部位群的酸水熱提法，該方法的主要技術是；取丹參原藥材，粉碎成20到100目左右的細粉，用酸水滲泡，然后，加熱提取，提取時間45～180分鐘。過濾，保存濾液，藥渣繼續(xù)用10倍左右的酸水，水或堿水提，提取時間45～180分鐘。過濾，保存濾液，合并兩次濾液，濃縮，干燥，按常規(guī)工藝制成可供藥用的制劑。
本發(fā)明中丹參水溶性有效部位群的酸水熱提法的提取工藝所提到的酸是指在鹽酸或醋酸，酸水是指在水溶液中加入鹽酸或醋酸，酸與水的重量比是0.1～4％，酸水滲泡，是指丹參藥材粉碎后放在上述酸水中滲泡1～48小時，酸水熱提是指把丹參原藥材粉碎后滲泡在酸水中加熱至85～100℃，45～180分鐘。
本發(fā)明藥渣第二次提取，可以采用酸水提取，酸為鹽酸或醋酸，也可采用堿水提，堿為氫氧化鈉，碳酸鈉或碳酸氫鈉。
實施例一取丹參原藥材粉碎成40目，按1克丹參加10ml 1％HCL的比例投料進行酸水滲泡2小時，加熱提取，從水沸后，保持微沸提取70分鐘，過濾，保留上清液，濾渣再按1克丹參加10ml水的比例進行第二提取，保持微沸60分鐘，過濾，保留上清液，合并兩次上清液，用NaOH調節(jié)PH值至中性，濃縮。
同時，另取同一批丹參做水提兩次對照。
兩批產(chǎn)品用高效液相色譜分析，檢測方法色譜柱ODS2 C18柱，25℃；波長281nm；流速1ml/min；流動相A1％乙酸溶液，B1％乙酸甲醇。梯度洗脫B由10％開始加至35％洗脫30min。
上樣條件進樣量均為5微升。標樣配制原兒茶醛0.0013克，丹參素0.0026克，丹酚酸B 0.0045克，加1％乙酸配制成25ml。
檢測丹參素，原兒茶醛和丹酚酸B標準品的高效液相色譜指紋圖見說明書附圖1，丹參水提對照的高效液相色譜指紋圖譜見說明書附圖2，本發(fā)明的酸水熱提法的高效液相色譜指紋圖譜見說明書附圖3。
與對照品比較，計算出丹參水提對照法提取的丹參素的含量為2.83mg/g生藥，原兒茶醛的含量為0.132mg/g生藥，丹酚酸B含量為23.38mg/g生藥。
用本發(fā)明的酸水熱提法工藝提取的丹參素含量為201.35mg/g生藥，原兒茶醛的含量為0.256mg/g生藥，丹酚酸B含量為12.82mg/g生藥。
丹參酸水熱提法丹參素的得率為丹參水提對照的71倍，原兒茶醛約為2倍，丹酚酸B約為0.5倍。
實施例二取丹參原藥材粉碎成40目，按1克丹參加10ml 1％HCL的比例投料進行酸水滲泡2小時，加熱提取，從水沸后，保持微沸提取70分鐘，過濾，保留濾液，濾渣再按1克丹參加10ml水的比例加0.3％NaOH進行堿提取，保持微沸60分鐘，過濾，保留上清液，合并兩次濾液，濃縮。
同時，另取同一批丹參做水提對照，第二次提取按1克丹參加10ml水的比例加0.3％NaOH進行堿提取，進行比較。兩批產(chǎn)品用高效液相色譜分析，檢測丹參素，原兒茶醛和丹酚酸B的含量，方法同實施例一，丹參加堿水提對照的高效液相指紋圖譜見說明書附圖4，本發(fā)明的酸水熱提法的高效液相色譜指紋圖譜見說明書附圖5。
丹參水提對照丹參素的含量為3.41mg/g生藥，原兒茶醛的含量為0.228mg/g生藥，丹酚酸B含量為24.81mg/g生藥。
丹參酸水熱提法丹參素的含量為171.17mg/g生藥，原兒茶醛的含量為0.217mg/g生藥，丹酚酸B含量為14.57mg/g生藥。
丹參酸水熱提法丹參素的得率為丹參水提對照的50倍，原兒茶醛約為0.95倍，丹酚酸B約為0.6倍。
實施例三取丹參原藥材粉碎成40目，按1克丹參加10ml 1％HCL的比例投料進行酸水滲泡2小時，加熱提取，從水沸后，保持微沸提取70分鐘，過濾，保留濾液，濾渣再按1克丹參加10ml水的比例加2％NaOH進行堿第二提取，保持微沸60分鐘，過濾，保留濾液，合并兩次濾液，用HCL調節(jié)PH值至中性，濃縮。
同時，另取同一批丹參做水提對照，第二次提取按1克丹參加10ml水的比例加2％NaOH進行堿提取，進行比較。兩批產(chǎn)品用高效液相色譜分析，檢測丹參素，原兒茶醛和丹酚酸B的含量，方法同實施例一。丹參加堿水提對照的高效液相指紋圖譜見說明書附圖6，酸水熱提法的高效液相色譜指紋圖譜見說明書附圖7。
丹參堿水提對照丹參素的含量為2.93mg/g生藥，原兒茶醛的含量為0.326mg/g生藥，丹酚酸B含量為5.67mg/g生藥。
丹參酸水熱提法丹參素的含量為168.27mg/g生藥，原兒茶醛的含量為0.177mg/g生藥，丹酚酸B含量為6.52mg/g生藥。
丹參酸水熱提法丹參素的得率為丹參水提對照的57倍，原兒茶醛約為0.5倍，丹酚酸B約為1.15倍。
實施例四本發(fā)明的丹參酸熱水提工藝稱取過40目篩的丹參粉末100g，加入含40ml鹽酸的水溶液1000ml，于蒸餾瓶中蒸餾，加熱回流70min。抽濾，收集濾液，藥渣加入1000ml蒸餾水，加熱回流60min，抽濾，收集濾液。合并兩次濾液，濃縮。
丹參水提對照工藝稱取過40目篩的丹參粉末100g，加入蒸餾水1000ml，于蒸餾瓶中蒸餾，加熱回流70min。抽濾，收集濾液，藥渣加入1000ml蒸餾水，加熱回流60min，抽濾，收集濾液。合并兩次濾液，濃縮備用。
兩批產(chǎn)品用高效液相色譜分析，檢測方法色譜柱ODS2 C18柱，波長281nm；流速1ml/min；流動相A5％乙酸溶液，B甲醇。梯度洗脫0min A∶B＝90％∶10％；5min A∶B＝90％∶10％；10min A∶B＝65％∶35％；30min A∶B＝90％∶10％。檢測結果丹參素，原兒茶醛和丹酚酸B標準品出峰時間分別為丹參素4.7min，原兒茶醛7.1min，丹酚酸B20.4min。各組的成分含量見下述。丹參水提對照的高效液相指紋圖譜見說明書附圖8，酸水熱提法的高效液相色譜指紋圖譜見說明書附圖9，丹參藥材對照品的高效液相指紋圖譜見說明書附圖10，丹參素，原兒茶醛，丹酚B標準品對照高效液相圖譜見說明書附圖11。
丹參水提對照丹參素的含量為1.137mg/g生藥，原兒茶醛的含量為0.937mg/g生藥，丹酚B含量為55.2mg/g生藥。
丹參酸水熱提法丹參素的含量為42.933mg/g生藥，原兒茶醛的含量為0.637mg/g生藥，丹酚酸B含量為8.45mg/g生藥。
丹參酸水熱提法丹參素的得率為丹參水提對照的38倍，原兒茶醛約為0.8倍，丹酚酸B約為0.15倍。
研究證明，按上述工藝提取的丹參水溶性有效部位群制成的制劑，對各種骨質疏松癥有明顯的預防和治療作用，特別是對糖皮質激素造成的骨質疏松有明顯的防治作用。同時，研究還發(fā)現(xiàn)，按上述工藝提取的丹參水溶性有效部位群可以保護腦組織，特別是腦組織的海馬部位的神經(jīng)元細胞，使其不被其他不良刺激損傷，可用于預防和治療抑郁癥等神經(jīng)精神性疾病。用本工藝提取的丹參水溶性有效部位群制備的各種制劑，還可用于臨床丹參可治療的各種疾病如心腦血管疾病等。
本發(fā)明專利使丹參的主要有效成分丹參素的得率提高38~70倍，可用于制藥企業(yè)制備含丹參的制劑，可大大降低成本，提高藥效。本發(fā)明專利提供的相關的高效液相色譜指紋圖譜，可作為制藥企業(yè)控制質量的質量標準應用。


圖1丹參素，原兒茶醛和丹酚酸B標準品的高效液相色譜圖；圖2丹參按傳統(tǒng)工藝水提對照的高效液相色譜指紋圖譜；圖3丹參用本發(fā)明的酸水熱提法工藝的高效液相色譜指紋圖譜；圖4丹參加堿水提對照的高效液相指紋圖譜；圖5丹參用本發(fā)明的酸水熱提法工藝的高效液相色譜指紋圖譜；圖6丹參加堿水提對照的高效液相指紋圖譜；圖7丹參用本發(fā)明的酸水熱提法的高效液相色譜指紋圖譜；圖8丹參水提對照的高效液相指紋圖譜；圖9丹參用本發(fā)明的酸水熱提法的高效液相色譜指紋圖譜；圖10丹參藥材對照品的高效液相指紋圖譜；圖11丹參素，原兒茶醛，丹酚酸B標準品對照高效液相圖譜。
權利要求
1.一種丹參水溶性有效部位群的提取工藝，其特征在于該提取工藝是把原藥材粉碎后先用酸水熱提法進行首次提取，之后再按傳統(tǒng)工藝進行提取，過濾，濃縮，干燥，制備成可供藥用的制劑。
2.如權利要求1所述的一種丹參水溶性有效部位群的提取工藝，其特征是該提取工藝所提到的酸是指鹽酸或醋酸，酸水是指在水溶液中加入鹽酸或醋酸，酸與水的重量比是0.1～4％，酸水滲泡，是指丹參藥材粉碎后放在上述酸水中滲泡1～48小時，酸水熱提是指把丹參原藥材粉碎后滲泡在酸水中加熱至85～100℃，45～180分鐘。
3.如權利要求1所述的一種丹參水溶性有效部位群的提取工藝，其特征是該提取工藝是指下述工藝①取丹參原藥材粉碎成40目，按1克丹參加10ml 1％HCL的比例投料進行酸水滲泡2小時，加熱提取，從水沸后，保持微沸提取70分鐘，過濾，保留濾液，濾渣再按1克丹參加10ml水的比例進行第二次提取，保持微沸60分鐘，過濾，保留濾液，合并兩次濾液，用NaOH調節(jié)PH值至中性，濃縮。②取丹參原藥材，粉碎成40目，按1克丹參加10ml 1％HCL的比例投料進行酸水滲泡2小時，加熱提取，從水沸后，保持微沸提取70分鐘，過濾，保留濾液，濾渣再按1克丹參加10ml水的比例加0.3％NaOH進行堿提取，保持微沸60分鐘，過濾，保留濾液，合并兩次濾液，濃縮。③取丹參原藥材粉碎成40目，按1克丹參加10ml 1％HCL的比例投料進行酸水滲泡2小時，加熱提取，從水沸后，保持微沸提取70分鐘，過濾，保留濾液，濾渣再按1克丹參加10ml水的比例加2％NaOH進行堿第二次提取，保持微沸60分鐘，過濾，保留濾液，合并兩次濾液，用HCL調節(jié)PH值至中性，濃縮。④稱取過40目篩的丹參粉末100g，加入含40ml鹽酸的水溶液1000ml，于蒸餾瓶中蒸餾，加熱回流70min。抽濾，收集濾液，藥渣加入1000ml蒸餾水，加熱回流60min，抽濾，收集濾液。合并兩次濾液，濃縮。
4.如權利要求1所述的一種丹參水溶性有效部位群的提取工藝，可用于制備各種含有丹參的可供藥用的制劑。
5.如權利要求1所述的一種丹參水溶性有效部位群的提取工藝制備的可供藥用的制劑，可用于臨床骨質疏松，抑郁癥，神經(jīng)精神性疾病，老年性癡呆，心腦血管疾病的預防和治療。
6.如權利要求3所述的丹參水溶性有效部位群的提取工藝，其附圖所示的高效液相色譜指紋圖譜可作為其藥品鑒別與質量標準的圖譜。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種防治骨質疏松及抑郁癥的中藥有效部位群的提取工藝，該提取工藝的藥物是丹參，該提取工藝提取的丹參水溶性有效部位群中其主要標志性成分是丹參素，原兒茶醛和丹酚酸B。該工藝提取的丹參素的含量是傳統(tǒng)工藝提取的38～71倍。該提取工藝的特征是用酸水熱提。該法提取的丹參水溶性有效部位群可制備成可供藥用的各種制劑。這些制劑可用于預防和治療骨質疏松癥，抑郁癥，神經(jīng)精神性疾病以及心腦血管疾病等。
文檔編號A61P19/00GK1887309SQ20061007443
公開日2007年1月3日 申請日期2006年4月9日 優(yōu)先權日2006年4月9日
發(fā)明者崔燎, 吳鐵, 孫宇, 林堅濤 申請人:廣東醫(yī)學院