專利名稱：：一種黑素再生治療白癜風的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療白癜風的藥物，具體地說是一種以中草藥為原料制備的中成藥。
背景技術(shù)：
：白癜風又稱白蝕癥，是以皮膚出現(xiàn)局限性白色斑片，然后逐漸擴大蔓延為主要臨床表現(xiàn)的皮膚病。白癜風在自然人群中的發(fā)病率約為0.15%~2%,國外也有報道約為1~2%;本病可隨地區(qū)、人種、膚色而異。隨著工業(yè)化進程的加速，環(huán)境污染日益嚴重，醫(yī)源性、藥源性疾病激增等多種因素，都促使白癜風的發(fā)病率逐年增高。一般膚色越深的人發(fā)病率越高。白癜風病雖不痛不癢，但侵蝕著患者健康的肌膚和心靈，嚴重損壞人的容貌，挫傷人的精神，影響其正常生活、4昏姻、工作和社交，是世界性難治病之一。國內(nèi)雖然也有一些治療白癜風的中成藥，但見效慢、療程長、治愈率低，療效不理想，生產(chǎn)成本高，患者經(jīng)濟負擔重。從國內(nèi)外臨床治療情況看，白癜風的治療尚處于顯效慢、療程長、治愈率低的階段。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種具有宣肺行氣、活血通絡(luò)，改善微循環(huán)、調(diào)節(jié)機體體液免疫和細胞免疫，恢復(fù)黑素再生功能的治療白癜風的藥物。本發(fā)明的解決方案是基于祖國傳統(tǒng)醫(yī)學對白癜風發(fā)病機理的認識及治療原則，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學知識，從肺及經(jīng)絡(luò)入手，對白癜風的病因病機進行了系統(tǒng)的分析和研究，創(chuàng)造性地提出了"黑白同病、黑白同治"全新理論，在此基礎(chǔ)上，按照整體調(diào)理與局部治療相結(jié)合的方案，參考現(xiàn)代藥理研究成就，從祖國醫(yī)學寶庫中，篩選出宣肺氣、通經(jīng)絡(luò)、活氣血、扶正培本的天然食用植物藥，按照中醫(yī)理論組方，提取精華，使其發(fā)揮改善微循環(huán)、調(diào)節(jié)機體體液免疫和細胞免疫、恢復(fù)黑素再生功能等作用，采用桔梗、浮萍、刺蒺藜、川芎、丹參、當歸、補骨脂、黃芪等藥物組成基本方劑，研制出了一種黑素再生治療白癜風的藥物。本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的，一種黑素再生治療白癜風的藥物，制成有效成分的藥物原;阡組成為，桔梗6~18重量份浮萍5~15重量4分刺蒺藜920重量份丹參6~48重量份當歸6~15重量份川芎6~15重量份補骨脂10~18重量份黃芪6~15重量份。本發(fā)明之藥物的臨床使用結(jié)果表明，有下列優(yōu)點1)見效快，1-4天見效；療程短，一般l-2個療程治愈；治愈率高，總治愈率84.2%;不易復(fù)發(fā)。2)具有降低血液粘度、增加血液流動性、改善微循環(huán)、提高銅藍蛋白含量、降低體液免疫及增強細胞免疫功能的作用，促進皮膚黑素再生。3)未見有明顯的毒副反應(yīng)，臨床應(yīng)用安全有效。4)費用低。與同類治療白癜風的藥物相比，具有成本低、易于制備等優(yōu)點，可減輕病人的經(jīng)濟負擔。具體實施例方式下面進一步說明本發(fā)明。制成有效成分的藥物原料的最佳重量配比為桔梗915重量份浮萍812重量份刺蒺藜1015重量份丹參916重量份當歸9~12重量份川芎912重量份補骨脂1216重量份黃芪9~12重量份。本發(fā)明之藥物的一種制備方法是1)、將上述原料洗凈、烘干并切或搗碎；2)、將川芎、黃芪、當歸、桔梗用冷水浸泡1525分鐘，煎煮提取3040分鐘，過濾，取出濾液，然后再加水，煎煮30一0分鐘，過濾，合并兩次濾液。將合并后的濾液用低溫真空方法進行濃縮，至稠膏狀后烘干，粉碎成細粉，過80~100目篩，待用；3)、將其它藥物原料研成過50150目篩的細粉，再與上述浸膏混合均勻，然后制粒、干燥，制成本發(fā)明之藥物的顆粒劑。當然，本發(fā)明之藥物也可以制成適合口服的粉劑、膠嚢劑等劑型。為表明本發(fā)明藥物對白癜風的治療效果，我們對413例白癜風患者進行了臨床治療研究。研究中，根據(jù)中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學會制定的白癜風的臨床分型及診斷標準診斷治療。413例臨床癥狀典型。排除某些皮滲消退后遺留的色素脫失、貧血痣、白化病、老年性白斑、日光浴性白斑、合并有血管、腎和造血系統(tǒng)等嚴重原發(fā)性疾病、精神病患者、未按規(guī)定用藥、資料不全無法判定療效者等病例。262例白癜風患者為研究組，臨床癥狀典型，依據(jù)中醫(yī)理論辨證分型。治療方法為內(nèi)服本發(fā)明之藥物的顆粒劑，一日2次，每次5g，早晚各服1次。選擇病史、病情、年齡與研究組相當、有可比性的151例白癜風患者為對照組。對照組治療方法為內(nèi)服白靈片(廣東產(chǎn)，批號為961106)，一次4片，一日3次。兩組均為三個月一療程，可連續(xù)用藥2-4療程。1)組織病理學4企查方法以白斑內(nèi)與邊緣部分取材，用方特那(Fontana)及多巴(Dopa)染色法、光鏡特染，觀察治療前后黑素細胞與黑素顆粒。治療前，早期皮損表皮基底層黑素細胞減少，晚期皮損區(qū)黑素細胞完全缺失，多巴染色或銀染色不顯示黑素，邊緣可見大而變形的黑素細胞，樹枝突長而充滿黑素顆粒。治愈后，可見白斑區(qū)及邊緣黑素細胞形態(tài)正常。2)統(tǒng)^十方法收集每例患者所有臨床資料，應(yīng)用t檢驗和X"檢驗，對資料進行統(tǒng)計學處理。3)療效的判斷標準參照中華人民共和國衛(wèi)生部《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》，痊愈白斑完全消失，恢復(fù)正常膚色，組織病理學檢查正常。顯效白斑50%以上消失，白斑消失部分，組織病理學檢查正常。有效白斑消失占原面積的20%~50%，或在白斑內(nèi)有較多的色素島，有色素復(fù)生處做組織病理學檢查正常。無效治療前后無變化或白斑擴大。臨床治療結(jié)果發(fā)現(xiàn)，研究組中262例患者在1-4天內(nèi)見效的243例，占92.7%;5-10天見效的8例，占3.1%;11-30天見效的7例，占2.7%,總有效率為98.5%。而對照組中151例患者在IO天以內(nèi)見效的O例，11-30天效的6例，占3.97%;31-90天效的17例，占11.2%;91-180天見效的52例，占34.4%，總有效率49.7%。研究組與對照組的總療效對比情況見表1。表1研究組與對照組總療效比較組別病例總數(shù)療效(例數(shù))治愈(％)顯效有效無效總有效率研究組262183(69.8)5421498.5對照組1516(3.9)20497649.7X''=245.04P<0.001研究組治愈率69.8%，對照組治愈率3.9%,研究組是對照組的17.9倍。研究組總有效率98.5%，對照組總有效率49.7%，研究組是對照組的1.98倍。研究組明顯優(yōu)于對照組。兩組的治愈率、總有效率對比，經(jīng)統(tǒng)計學處理，有極顯著性差異(P<0.001)。研究組五種類型的白癜風的療效結(jié)果見表2表2研究組五種類型白癜風療效結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>五種類型白瘕風的治愈率脾蘊濕熱型為86.4%,肝郁氣滯型為80.9%，氣血虛熱型為68.5%，肝腎不足型為57.1%,經(jīng)絡(luò)瘀滯型為36.1%?？梢姱熜ы樞蛞来螢槠⑻N濕熱型〉肝郁氣滯型〉氣血虛弱型〉肝腎不足型〉經(jīng)絡(luò)癡滯型。研究組與對照組皮損(白斑)出現(xiàn)治療效果的時間情況見表3。表3研究組與對照組出現(xiàn)效果的時間比較<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>研究組大部分l-4天內(nèi)見效，平均見效時間為3.1天；對照組多數(shù)91-180天見效，平均見效時間為109.3天。一療程(90天)內(nèi)，兩組見效時間經(jīng)統(tǒng)計學處理(四表格精確檢驗法)，有極顯著性差異(P〈0.005)。二療程(180天)內(nèi)，兩組見效時間經(jīng)統(tǒng)計學處理，有極顯著性差異(P<0.001)。皮損恢復(fù)正常膚色的療程比4交見表4。_表4研究組與對照組恢復(fù)正常膚色的療程比較<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注上表中的"-1"表示l個月之內(nèi)。"-2，'表示"l個月及以上，但不到2個月"，余類推。研究組白斑恢復(fù)正常膚色多數(shù)在3-5個月，平均療程為3.72個月。對照組多數(shù)在11-12個月，平均療程為11.5個月。研究組比對照組療程縮短7.78個月。兩組經(jīng)統(tǒng)計學處理(四表格精確檢驗法)，有極顯著性差異(P<0.005)。過敏及不良反應(yīng)情況的比較見表5(,表5過敏及不良反應(yīng)比較<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>研究組中外用藥有0.76°/。的患者出現(xiàn)輕微灼瘙癢，有的出現(xiàn)紅色丘滲,停藥后癥狀自行消失。對照組有5.30°/。的患者出現(xiàn)過敏及不良反應(yīng)，兩組經(jīng)統(tǒng)計學處理有顯著性差異。痊愈患者隨訪比較見表6。_表6痊愈患者隨訪比較(％)__<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>兩組部分痊愈者，進行半年至三年的隨訪調(diào)查.研究組復(fù)發(fā)率3.8%，對照組為83.3%。對兩組隨訪患者進行統(tǒng)計學處理(四表格精確檢驗法)，有極顯著性差異(p<0.005)。通過以上比較可以看出，本發(fā)明之藥物具有見效快、療程短、治愈率高、無不良反應(yīng)、不易復(fù)發(fā)等特點，治療效果大大優(yōu)于對照組。下面是實驗研究資料。以上述研究組中的42例患者為觀察組，以40例健康者為對照組，分別進行治療前后的血液流變學、免疫學、血清銅藍蛋白的檢測.1)血液流變學檢測參考值全血粘度高切(200/s)5.67士0.54mPa.s,低切(3/s)7.90士1.22mPa.s;全血還原粘度6.06--0.32mPa.s，血漿粘度1.3-1.6mPa.s，血沉方程K值53士40,血沉(ESR):0-20(ram/h)，紅細胞壓積37-47(1/1)，結(jié)果見表7。表7觀察組治療前后血液流變學改變(x—士s,n=42)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>ESR治療前后有顯著差異，P<0.05;全血粘度高切、全血粘度低切、全血還原粘度高切、全血還原粘度低切以及紅細胞壓積治療前后都有非常顯著差異，P<0.01。2)血清銅藍蛋白檢測(比濁法)參考值0.15-0.6mg/ml,結(jié)果見表8表8觀察組治療前后血清銅藍蛋白變化與對照組的比較(x士s,mgZl)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>觀察組銅藍蛋白治療前顯著低于對照紐(P〈0.05),治療后與對照組差別無顯著性(P>0.05)。觀察組治療前后差異非常顯著(P復(fù)01)。3)免疫學^^測①體液免疫測定采用美國Beckman司生產(chǎn)的ARRAY360自動化特種蛋白測定儀進行測定(結(jié)果見表9、10),參考值，6-60歲，IgG:6.5-16.0，lgA:0.35-3.5，IgM:0.5-3.0。表9觀察組治療前后免疫球蛋白變化與對照組的比較(x—士s,g/1)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>表IO觀察組治療前后免疫球蛋白變化比較(x士s，g/1)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>觀察組免疫球蛋白TgA、IgG治療前顯著高于對照組P〈0.01，治療后與對照組差別無顯著性(PX).05),IsM治療前與治療后均無明顯變化。從表10可見觀察組治療后IgA、IgG較治療前有非常顯著改善(P〈0.01),IgM變化無顯著性。②細胞免疫功能測定a.T淋巴細胞總數(shù)的檢測E花環(huán)實驗(ERPT):采用戊二醛交聯(lián)技術(shù)將McAb(單克隆抗體)與單紅細胞(SRBC)結(jié)合，制成致敏的SRBC。依法操作，用May-Gruenwalcl和Clemsa染液染色，高倍鏡檢查，淋巴細胞周圍粘附有3個以上SRBC者，即為花環(huán)陽性細胞.共計數(shù)200個淋巴細胞，計算出花環(huán)形成細胞百分比，結(jié)果見表ll(參考值60%一8oy。)。b.淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗(LTT):形態(tài)學計數(shù)法取肝素抗凝新鮮血標本加入絲裂原植物血凝素(PHA),依法操作。在血片上滴加Cleffisa-Wright混合染色液，加Pn6.9磷酸鹽緩沖液，干燥后用油鏡觀察200個淋巴細胞，結(jié)果見表11(參考值70%左右)。轉(zhuǎn)化的淋巴細胞淋巴細胞轉(zhuǎn)化率(％)=------------x100%轉(zhuǎn)化和未轉(zhuǎn)化的淋巴細胞表11T淋巴細胞總數(shù)的檢測與淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗tl治療前治療后ERFT(%)LTT)ERFTW)LTT)對照組4058.1±12.3072.85±7.2658.1±12.3072.85±7.26觀察組4249.8±12.0165.2±11.1254±7.3270.13±6.67t3.053.631.821.74p<0.01<0.01>0.05〉0.05T淋巴細胞總數(shù)的檢測與淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗的結(jié)果，治療前，觀察組明顯低于對照組P〈0.Ol,治療后，觀察組兩項測定結(jié)果升高，兩組無明顯差異(P〉0.05)。4)微循環(huán)檢測用目鏡測微計測量曱皺微循環(huán)管袢情況(參考值管袢條數(shù)8-15條/mm-管袢長度為100-400urn)。結(jié)果見表12。表12觀察組治療前后微循環(huán)變化與對照組的比較(x士s)n治療前治療后管袢條數(shù)輸入支輸出支袢頂直徑管袢長度管袢條數(shù)輸入支輸出支袢頂直徑管袢長度(條/mm)直徑(Ulll)直徑(畫)(腦)(腦)(條/mm)直徑直徑(um)(腿)(體)對照組409.012162009.0i216200±1.0±2±3土3土50士l,0±2土3士3±50觀察組427.267.69g.6910.10151.219.84u.8:、14.2314.()6土l.63士3,12±3.04士3.2S±51.94±1.60±2."士l.85±2,23±44.0(15.807.437.528.564.332.800.31.40:、341.70p<0.05<0.01<0.0〗<0.01<0.01<0.01>0.05<().05《01<「).0;觀察組治療前管拌條數(shù)顯箸低于對照組(P<0.05),輸入支直徑、輸出支直徑、袢頂直徑、管袢長度都非常顯著低于對照組(P<0.01)。治療后，管袢條數(shù)不但恢復(fù)而且顯著超出對照組(P<0.01)。輸入支管徑恢復(fù)正常，與對照組無差別(P〉0.05)。輸出支管徑和治療前比較明顯改善，但和對照組比仍有差異(P<0.05)。袢頂直徑治療后較治療前有明顯改善，但與對照組比仍有明顯差異(P<0.01)。管袢長度治療后恢復(fù)正常，而且非常顯著地超過了對照組(P〈0.01)。通過以上實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療前發(fā)現(xiàn)患者的血流變等絕大多數(shù)指標都顯示明顯異常，呈現(xiàn)一種明顯的高血粘度和微循環(huán)障礙，銅藍蛋白也較正常人明顯低下，免疫球蛋白IgA、IgG明顯高于正常人，體液免疫功能增強，T細胞總數(shù)、淋巴細胞轉(zhuǎn)化率降低，細胞免疫功能低下。治療后各項指標明顯得到改善，表明本發(fā)明之藥物的顆粒劑具有降低血液粘度、增加血液流動性、改善微循環(huán)、提高銅藍蛋白含量、降低體液免疫及增強細胞免疫功能的作用。由此我們認為，人體的肺氣受損，肺經(jīng)氣血運行不暢，皮膚不得滋養(yǎng)，而致色素脫失。本發(fā)明之藥物通過補氣宣肺以增加免疫功能，通過活血通絡(luò)以改善血流變和微循環(huán)，從而達到恢復(fù)黑素再生的功能。中醫(yī)認為，白癜風與風邪襲表，肺氣失宣，血瘀氣滯，正氣虛弱有關(guān),故以桔梗、浮萍、刺蒺蓼、川穹、丹參、當歸、黃芪、補骨脂等藥物組成基本方劑。方中桔梗苦辛而平，苦泄辛散，開提肺氣；浮萍辛寒，質(zhì)輕上浮，功能宣肺發(fā)表，《外科大成》曾以之組方，名為浮萍丸，善治白斑；刺蒺藜辛散祛風。《千金方》記載單用本品研末沖服，專治白癜風。上藥共同宣發(fā)肺氣，發(fā)表祛風，發(fā)表助宣肺，宣肺利于發(fā)表，相輔以相成。肺主皮毛，輸布津液。肺氣宣發(fā)正常，津液得輸，布散于皮毛，皮毛自養(yǎng)。我們結(jié)合血流變學的測定，白癜風患者血流變粘質(zhì)度增高，不利于血液的流動，所以我們又選用了川芎辛溫，丹參苦寒，當歸甘辛溫，三藥大多味辛善行，均能活血祛瘀。川芎又能行氣，氣行則血行，合用相得益彰。癡血不去，新血不生，肌膚失養(yǎng)。藥后血通氣行，新血易生，肌膚自潤。既宣肺祛風，又活血行氣，有助于局部病變的恢復(fù)。當歸溫潤尚能補血，黃芪益氣固表，補骨脂補腎助陽。相互配伍氣血陰陽皆補，兼顧正氣以改善患者體質(zhì)，增強抵抗力。諸藥合用共奏宣肺氣、祛風邪、行氣血、扶正氣之功。另外，通過實驗研究發(fā)現(xiàn)白癜風患者存在著一些免疫功能紊亂，如一些細胞免疫低下及體液免疫亢進。通過治療后，有不同程度的改善。所以我們又著重選用了調(diào)節(jié)免疫功能的藥物。如黃芪、川考等對免疫系統(tǒng)均具有一定雙向調(diào)節(jié)作用。而補骨脂則有致光敏作用，內(nèi)服或外涂，經(jīng)日光或紫外線照射，可以使局部色素沉著。下面是動物試驗資料。1)實驗材料本發(fā)明之藥物的顆粒劑，將其研碎，以蒸餾水配置成混懸液，2g/ml，分為高、中、低三個劑量組，給動物分別灌服混懸液20g/kg、10g/kg、5g/kg，分別相當于臨床人用劑量的21.51倍、10.75倍、5.38倍。白靈片，廣東佛山制藥一廠，批號為9805003-059,將其研碎，以蒸餾水配置成混懸液，4'C儲存?zhèn)溆?。動物用?.5g/kg,相當于臨床人用劑量的12.5倍，左旋多巴(L-DA),蘑菇酪氨酸酶，植物凝集素(PHA)，Sigma公司產(chǎn)品。垂體后葉注射液，上海天豐藥廠，批號為9801002。1，4-對笨二酚，北京化學試劑廠生產(chǎn)，批號980806。721分光光度儀，上海分析儀器廠。LDF-2型微循環(huán)血流測定儀，天津南開電子儀器廠。實驗用昆明系小白鼠、黑花豚鼠，山東省衛(wèi)生防疫站實驗動物室提供，魯動質(zhì)字980103。實驗動物灌胃容量小白鼠20ral/kg,黑花豚鼠10ml/kg。實驗數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計學"t"檢驗法進行組間顯著性差異比較。2)本發(fā)明之藥物的顆粒劑抗對苯二酚致皮膚黑色素減少實驗健康黑花豚鼠60只，體重260-280克，雄雌兼具，隨機分為六組，用脫毛劑將動物背部黑毛脫去(5x5cm)。其中一組為正常對照組，不加處理；另外五組造模動物每天在背部脫毛區(qū)局部外涂5%對笨二酚0.5ml兩次(上午8:00及下午15:00),連續(xù)20d。同時該五組動物每天分別給予常水、本發(fā)明之藥物的顆粒劑以及白靈片灌胃。實驗第21d，將動物麻醉，在其背部脫毛區(qū)中心取皮膚lxlcm，常規(guī)固定包埋切片，用硫酸亞鐵Littie法進行黑色素染色，光鏡下觀察80個毛嚢，計算其中黑色素毛囊數(shù)目，結(jié)果見表13。表13本發(fā)明之藥物的顆粒劑抗對笨二酚致皮膚黑色素減少實驗結(jié)果組別劑量(g/kg)黑色素毛囊數(shù)目(X土SD)P<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>3)本發(fā)明之藥物的顆粒劑對多巴色素氧化生成黑素量的影響參照Matsuda等方法并加以改進。首先將本發(fā)明之藥物的顆粒劑用磷酸緩沖液稀釋成高(100rag/ml)、中(50mg/ml)、{氐(1Omg/ml)三個不同濃度的備用中藥液。將研碎過濾后的白靈片用磷酸緩沖液稀釋成備用藥液(50mg/ml)。將蘑菇酪氨酸酶lml(100u)與左旋多巴液lml(1.5mg)混勻，25。C溫育5ra.，再分別加入不同濃度的中藥液lml,置25。C繼續(xù)溫育60m.用lmol/LHC10.2ml終止反應(yīng)。將反應(yīng)混合物離心，3000r/min,15m,丟棄上清液，沉淀物用60mol/LHC1洗1次，雙蒸水洗2次，離心，沉淀物用lmol/LNaOH3ml充分溶解，離心，上清液置分光光度計400nm處置0.D值。黑素生成量用藥物組的O.D值除以空白對照組的0.D值的百分率表示。結(jié)果見表14。表14本發(fā)明之藥物的顆粒劑對多巴色素氧化生成黑素量影響實驗結(jié)果組別劑量(mg/ml)黑色素生成量(％,X±SD)P白靈片50140.1±27.0------本發(fā)明之顆粒劑10146.0±33.7>0.05本發(fā)明之顆粒劑50172.8±24.6<0.01本發(fā)明之顆粒劑100160.6±29.2〉0.05n=94)本發(fā)明之藥物的顆粒劑抗垂體后葉素致微循環(huán)障礙實驗健康小白鼠50只，體重14-16克，雄雌兼用，隨機分為五組；分別灌服常水、本發(fā)明之藥物的顆粒劑及白靈片，每日一次，連續(xù)7d。實驗時將動物置于固定器內(nèi)，暴露其尾部。調(diào)節(jié)激光微循環(huán)血流儀，頻率響應(yīng)12K赫茲，時間常數(shù)0.22s,增益10。將激光探頭置于動物尾巴中外1/3交界處，測定該部位血流量為正常值。動物尾靜脈注射垂體后葉素注射液0.2ml/只，2min后重復(fù)以上測定，結(jié)果見表15。表15本發(fā)明之藥物的顆粒劑抗微循環(huán)障礙實驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>n=10與對照組比較fP〈0.01。5)血清溶血素水平測定健康小白鼠50只，體重18-21克，隨機分為5組，雄雌各半；動物給藥均同實驗2、3,每日一次，連續(xù)7d。實驗第ld動物均腹腔注射5%CRBC0。2ml/只，刺激動物免疫。實驗第8d,摘取動物眼球取血，離心3000轉(zhuǎn)/m,10m,所取血清用NS稀釋100倍取稀釋血清lml,力口入5%CRBCO.5ml,10%補體0.5ml，混勻，370。C水浴溫育30m，(TC終止反應(yīng)。將上述液體離心，3000轉(zhuǎn)/m,10m，上清液于分光光度計540nm處比色，測0.D值，以0.D值的大小反應(yīng)血清溶血素水平的高低。結(jié)果見表16。表16血清溶血素水平測定結(jié)果組別動物數(shù)劑量(g/gk)OD值(X±SD)P對照組10------0.0703±0.0310-----本發(fā)明之顆粒劑105.00.1471±0.1197〉0.05本發(fā)明之顆粒劑1010.00.5077±0.132<0.01本發(fā)明之顆粒劑1020.00.3053±0.0833<0.01白靈片101.50.2010±0.0557<0.016)植物凝集素(PHA)刺激淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗(體內(nèi)刺激誘導(dǎo)法)健康雄性小白鼠50只，體重18-20克，隨機均分為5組；動物給藥同實驗4),每日一次，連續(xù)7d。實驗第ld給動物均肌肉注射PHA10ml/kg,連續(xù)注射3d。實驗第8d時，摘取動物眼球，常規(guī)涂血片，瑞士染色，油鏡下計數(shù)100個淋巴細胞，并計算淋巴母細胞所占百分率，以反映淋巴細胞轉(zhuǎn)化情況，結(jié)果見表18。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>通過以上藥效學研究表明，一定劑量的對苯二酚可使動物皮膚的黑色素含量減少；而同時應(yīng)用本發(fā)明之藥物的顆粒劑(10g，20g/kg)可明顯對抗對苯二酚的作用，使皮膚黑色素含量增加。多巴氧化是黑色素細胞合成黑色素的重要環(huán)節(jié)。體外實驗證實，一定劑量的本發(fā)明之藥物的顆粒劑(50mg/ml)可顯著促進多巴氧化生成黑色素(P〈0.01)。充分說明，本發(fā)明之藥物的顆粒劑可對抗某些化學物質(zhì)對黑色素細胞的損傷作用，并可促進黑色素的化學合成，這是本發(fā)明之藥物的顆粒劑治療白癜風的基本藥效作用之一，但其發(fā)揮作用的基本環(huán)節(jié)及機理尚待進一步研究與闡明。抗微循環(huán)障礙實驗表明，本發(fā)明之藥物的顆粒劑(5,10,20g/kg)可拮抗垂體后葉素所致的微循環(huán)障礙，顯著增加微循環(huán)血流量，呈現(xiàn)改善微循環(huán)的作用(P<0.01)。給動物連續(xù)應(yīng)用中、大劑量的本發(fā)明之藥物的顆粒劑可使血清溶血素水平明顯升高，表明其可增強機體體液免疫水平；其對細胞免疫功能的影響，僅可見中等劑量的本發(fā)明之藥物的顆粒劑有增強作用，可促進淋巴細胞轉(zhuǎn)化，余未見顯著性影響。本發(fā)明之藥物的顆粒劑對微循環(huán)及免疫功能的作用無疑有助于白癜風的治療，是其治療白癜風重要藥效作用原因之一。綜上所述，本發(fā)明之藥物的顆粒劑可對抗對苯二酚致皮膚黑色素減少作用，能。實施例l、稱取桔梗900g，浮萍500g，刺蒺藜750g，丹參600g,當歸750g，川芎650g,補骨脂900g，黃芪750g，洗凈、烘千并切或搗碎；將川考、黃芪、當歸、桔梗用冷水浸泡20分鐘，煎煮提取35分鐘，過濾，取出濾液，然后再加水，煎煮35分鐘，過濾，合并兩次濾液。將合并后的濾液用j氐溫真空方法進行濃縮，至稠膏狀后烘千，粉碎成細粉，過90目篩，待用；將其它藥物研成過IOO目篩細粉，再與上迷浸膏混合均勻，混合后制粒、干燥，制成本發(fā)明之藥物的顆粒劑。實施例2、稱取桔梗400g，浮萍600g，刺蒺藜1000g，丹參500g，當歸500g，川芎650g，補骨脂900g,黃芪750g,洗凈、烘干并切或搗碎；將川考、黃芙、當歸、桔梗用冷水浸泡20分鐘，煎煮提取35分鐘，過濾，取出濾液，然后再加水，煎煮35分鐘，過濾，合并兩次濾液。將合并后的濾液用低溫真空方法進行濃縮，至稠膏狀后烘干，粉碎成細粉，過90目篩，待用；將其它藥物研成過IOO目篩細粉，再與上述浸膏混合均勻，混合后制粒、干燥，制成本發(fā)明之藥物的顆粒劑。實施例3、稱取桔梗400g,浮萍700g,刺蒺藜500g，丹參750g，當歸750g，川穹300g,補骨脂600g，黃芪500g，洗凈、烘干并切或搗碎；將川考、黃芪、當歸、桔梗用冷水浸泡20分鐘，煎煮提取35分鐘，過濾，取出濾液，然后再加水，煎煮35分鐘，過濾，合并兩次濾液。將合并后的濾液用低溫真空方法進行濃縮，至稠膏狀后烘干，粉碎成細粉，過90目篩，待用；將其它藥物研成過IOO目篩細粉，再與上述浸膏混合均勻，混合后制粒、干燥，制成本發(fā)明之藥物的顆粒劑。權(quán)利要求1、一種黑素再生治療白癜風的藥物，其特征在于，制成有效成分的藥物原料組成為，桔梗6～18重量份浮萍5～15重量份刺蒺藜9～20重量份丹參6～18重量份當歸6～15重量份川芎6～15重量份補骨脂10～18重量份黃芪6～15重量份。2、如權(quán)利要求1所述的一種黑素再生治療白癜風的藥物，其特征在于，其中各原料的重量配比為，桔梗9~45重量份浮萍8-"12重量份刺蒺藜10--15重量份丹參9~46重量份當歸9~42重量份川穹9-42重量份補骨脂12-46重量份黃芪9--12重量份。全文摘要本發(fā)明提供了一種黑素再生治療白癜風的藥物，它以桔梗、浮萍、刺蒺藜、丹參、當歸、川芎、補骨脂、黃芪為原料按配比制成，本發(fā)明之藥物的臨床使用結(jié)果表明有下列優(yōu)點1)見效快，1-4天見效；療程短，一般1-2個療程治愈；治愈率高，總治愈率84.2％；不易復(fù)發(fā)。2)具有降低血液粘度、增加血液流動性、改善微循環(huán)、提高銅藍蛋白含量、降低體液免疫及增強細胞免疫功能的作用，促進皮膚黑素再生。3)未見有明顯的毒副反應(yīng)，臨床應(yīng)用安全有效。4)費用低。與同類治療白癜風的藥物相比，具有成本低、易于制備等優(yōu)點，可減輕病人的經(jīng)濟負擔。文檔編號A61P17/00GK101099799SQ200610045478公開日2008年1月9日申請日期2006年7月8日優(yōu)先權(quán)日2006年7月8日發(fā)明者成愛華申請人:成愛華