專利名稱：作為Tie2抑制劑的磺酰氨基大環(huán)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及磺酰氨基大環(huán)及其鹽、包括所述磺酰氨基大環(huán)的藥物組合物和制備所述磺酰氨基大環(huán)的方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
為了戰(zhàn)勝血管生長調(diào)節(jié)異常疾病如癌癥，開發(fā)了不同的策略。一種可能的策略是阻斷腫瘤組織的血管發(fā)生，因?yàn)槟[瘤血管發(fā)生是實(shí)體瘤生長的先決條件。
在脈管系統(tǒng)的發(fā)生過程中，血管發(fā)生(angiogenesis)是除了血管生成(vasculogenesis)以外的兩個(gè)基本過程之一。血管生成表示在胚胎發(fā)育過程中新生成脈管系統(tǒng)，而血管發(fā)生描述由現(xiàn)有脈管系統(tǒng)的萌芽或分化而新生成脈管系統(tǒng)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)兩個(gè)受體VEGF-受體(血管內(nèi)皮生長因子)和Tie-受體(也稱為tek)，它們對(duì)于脈管組織正常發(fā)育為血管很重要(Dumont等，(1994).內(nèi)皮受體酪氨酸激酶Tie2的顯性失活突變和定向無效突變揭示了其在胚胎血管生成中的關(guān)鍵作用。(Genes Dev，81897-909；Sato等“Distinct roles of the receptor tyrosine kinases Tie-1 and Tie-2 inblood vessel formation”Nature.1995，Jul 6；376(6535)70-4.)。
不同研究者描述了Tie2信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制的特征，發(fā)現(xiàn)其中涉及不同的血管生成素。所以可以解釋為如果血管生成素-1與Tie2-受體的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合，就會(huì)刺激自身磷酸化并活化細(xì)胞內(nèi)激酶結(jié)構(gòu)域。但是，血管生成素-1活化Tie2不會(huì)刺激有絲分裂，而是會(huì)刺激遷移。血管生成素-2能夠阻斷血管生成素-1介導(dǎo)的Tie2活化以及所致的內(nèi)皮遷移。這提示血管生成素-2是Tie2活化的天然抑制劑(Maisonpierre等“Angiopoietin-2，anatural antagonist for Tie2 that disrupts in vivo angiogenesis”.Science.1997，Jul 4；277(5322)55-60；Witzenbichler等“Chemotactic properties ofangiopoietin-1 and-2，ligands for the endothelial-specific receptor tyrosinekinase Tie2”.J.Biol Chem.1998，Jul 17；273(29)18514-21)。對(duì)于總結(jié)，參見由Peters等人改良的

圖1(Peters等“Functional significance of Tie2signalling in the adult vasculature”.Recent Prog Horm Res.2004；5951-71.Review.)。
受體二聚導(dǎo)致特異性酪氨酸殘基的交叉磷酸化。受體交叉磷酸化具有雙重效果它增強(qiáng)受體的激酶活性，還為具有磷酸酪氨酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域(SH2和PTB結(jié)構(gòu)域)的信號(hào)傳導(dǎo)分子提供結(jié)合部位(Pawson T.“Regulation andtargets of receptor tyrosine kinases”.Eur J Cancer. 2002，Sep，38 Suppl 5S3-10.Review)。
對(duì)Tie2下游的最佳趨化響應(yīng)需要PI3-K途徑和Dok-R途徑之間的信號(hào)交匯作用(cross-talk)。其它近期研究已經(jīng)顯示，內(nèi)皮一氧化氮合酶(eNOS)活化、粘著斑激酶活化、和蛋白酶分泌都需要Tie2介導(dǎo)的PI3-K/Akt途徑的活化，所有這些可能顯著影響血管發(fā)生過程中的Tie2功能(Kim I.等“Angiopoietin-1 regulates endothelial cell survival through thephosphatidylinositol 3′-Kinase/Akt signal transduction pathway”.Circ Res.2000，Jan 7-21；86(1)24-9；Babaei等“Angiogenic actions of angiopoietin-1require endothelium-derived nitric oxide”.Am J Pathol.2003，Jun；162(6)1927-36)。
對(duì)于正常發(fā)育，受體和所謂配體之間的平衡相互作用是必需的。尤其是通過Tie2受體傳導(dǎo)信號(hào)的血管生成素在血管發(fā)生中具有重要作用(Babaei等，2003)。
已經(jīng)在轉(zhuǎn)基因小鼠中，使用Tie2啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的報(bào)道基因證實(shí)了Tie2在成人脈管系統(tǒng)中的廣泛表達(dá)(Schlaeger等“Uniform vascular-endothelial-cell-specific gene expression in both embryonic and adult transgenic mice”.Proc Natl Acad Sci U S A.1997，Apr 1；94(7)3058-63；Motoike等“UniversalGFP reporter for the study of vascular development”.Genesis.2000，Oct；28(2)75-81)。免疫組織化學(xué)分析證實(shí)了Tie2在經(jīng)歷血管發(fā)生的成年大鼠組織中的表達(dá)。在卵巢卵泡發(fā)生過程中，在發(fā)育中的黃體新脈管中表達(dá)Tie2。血管生成素-1和血管生成素-2還在黃體中表達(dá)，其中血管生成素-2定位在繁殖脈管的前沿，而血管生成素-1廣泛定位在前沿之后(Maisonpierre等，1997)。提出血管生成素-2介導(dǎo)的Tie2活化抑制可用于使脈管“去穩(wěn)定化”，以使它響應(yīng)其它血管發(fā)生生長因子如VEGF。隨后，血管生成素-1介導(dǎo)的Tie2活化將觸發(fā)新脈管系統(tǒng)的穩(wěn)定化。
在轉(zhuǎn)基因小鼠中，破壞Tie2功能顯示Tie2與新血管發(fā)生之間的關(guān)聯(lián)，其導(dǎo)致起因于脈管異常的早期胚胎死亡(Dumont等，1994；Sato等，1995)。Tie2-/-胚胎不能發(fā)展正常脈管層次，暗示脈管不能分枝和分化。Tie2-/-胚胎具有減少數(shù)量的內(nèi)皮細(xì)胞，而且內(nèi)皮細(xì)胞與潛在周細(xì)胞/平滑肌細(xì)胞之間的接觸也較少。這暗示其在新形成脈管系統(tǒng)的成熟和穩(wěn)定中的作用。
在Tie2基因轉(zhuǎn)基因或切除Tie2基因的小鼠體內(nèi)的研究提示，Tie2在胚胎和成年脈管系統(tǒng)的脈管發(fā)育成熟中具有重要作用。在純合的小鼠內(nèi)皮中，Tie2對(duì)Tie2無效等位基因的條件表達(dá)部分拯救了Tie2無效表型的胚胎死亡(Jones N等“Tie receptorsnew modulators of angiogenic andlymphangiogenic responses.”Nat Rev Mol Cell Biol.2001 Apr；2(4)257-67.Review)。缺少功能性血管生成素-1表達(dá)的小鼠和過度表達(dá)血管生成素-2的小鼠兩者都顯示與Tie2-/-小鼠類似的表型(Suri等“Requisite role ofangiopoietin-1，a ligand for the Tie2 receptor，during embryonic angiogenesis.”Cell.1996 Dec 27；87(7)1171-80；Maisonpierre PC等“Angiopoietin-2，anatural antagonist for Tie2 that disrupts in vivo angiogenesis”.Science.1997 Jul4；277(5322)55-60.)。
血管生成素-2-/-小鼠在淋巴脈管系統(tǒng)的生長和模式方面具有深刻缺陷，不能重塑和回歸新生晶狀體的玻璃狀脈管系統(tǒng)(Gale等“Angiopoietin2 is required for postnatal angiogenesis and lymphatic patterning，and only thelatter role is rescued by Angiopoietin-1”.Dev Cell.2002，Sep；3(3)411-23)。血管生成素-1可拯救淋巴缺陷，但不能拯救脈管重塑缺陷。所以血管生成素-2可能在血液脈管系統(tǒng)中作為Tie2拮抗劑，但在發(fā)育中的淋巴脈管系統(tǒng)中作為Tie2激動(dòng)劑。
Tie2還在病理性血管發(fā)生中具有作用。顯示Tie2的突變可引起遺傳靜脈畸形，并增強(qiáng)配體依賴性和非依賴性Tie2激酶的活性(Vikkula等“Dysmorphogenesis caused by an activating mutation in the receptor tyrosinekinase Tie2”.Cell.1996，Dec 27；87(7)1181-90)。在人乳腺癌腫瘤樣本中研究了Tie2表達(dá)，在正常乳房組織和乳腺瘤的脈管內(nèi)皮中都發(fā)現(xiàn)了Tie2表達(dá)。與正常乳房組織相比，腫瘤中Tie2-陽性腫瘤微脈管的比例增加(PetersKG等“Expression of Tie2/Tek in breast tumour vasculature provides a newmarker for evaluation of tumour angiogenesis”.Br J Cancer.1998，77(1)51-6)。
血管生成素-1在腫瘤模型中的過度表達(dá)導(dǎo)致腫瘤生長減少。該效果可能涉及血管生成素-1介導(dǎo)的腫瘤脈管系統(tǒng)的穩(wěn)定化，從而使得脈管抵抗血管發(fā)生刺激(Hayes等“Expression and function of angiopoietin-1 in breastcancer”.Br J Cancer.2000，Nov；83(9)1154-60；Shim等“Inhibition ofangiopoietin-1 expression in tumour cells by an antisense RNA approachinhibited xenograft tumour growth in immunodeficient mice”.Int J Cancer.2001，Oct 1；94(1)6-15；Shim等“Angiopoietin 1 promotes tumourangiogenesis and tumour vessel plasticity of human cervical cancer in mice”.Exp Cell Res.2002，Oct 1；279(2)299-309；Hawighorst等“Activation of theTie2 receptor by angiopoietin-1 enhances tumour vessel maturation and impairssquamous cell carcinoma growth”.Am J Pathol.2002，Apr；160(4)1381-92.；Stoeltzing等“Angiopoietin-1 inhibits vascular permeability，angiogenesis，andgrowth of hepatic colon cancer tumours”.Cancer Res.2003，Jun 15；63(12)3370-7.)。
由腫瘤細(xì)胞條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)的角膜血管發(fā)生受到重組sTie的抑制，盡管存在VEGF。在皮膚室(skin chamber)腫瘤模型中，乳腺腫瘤生長受到重組sTie2的顯著抑制(Lin等“Inhibition of tumour angiogenesis using asoluble receptor establishes a role for Tie2 in pathologic vascular growth”.JClin Invest.1997，Oct 15；100(8)2072-8；Lin等“Antiangiogenic gene therapytargeting the endothelium-specific receptor tyrosine kinase Tie2”.Proc NatlAcad Sci U S A.1998，Jul 21；95(15)8829-34)。類似的sTie構(gòu)建體已經(jīng)在不同腫瘤模型中顯示出相當(dāng)?shù)男Ч?Siemeister等“Two independentmechanisms essential for tumour angiogenesisinhibition of human melanomaxenograft growth by interfering with either the vascular endothelial growthfactor receptor pathway or the Tie-2 pathway”.Cancer Res.1 999，Jul 1；59(13)3185-91；Stratmann等“Differential inhibition of tumour angiogenesisby Tie2 and vascular endothelial growth factor receptor-2 dominant-negativereceptor mutants”.Int J Cancer.2001，F(xiàn)eb 1；91(3)273-82；Tanaka等“Tie2vascular endothelial receptor expression and function in hepatocellularcarcinoma”.Hepatology.2002，Apr；35(4)861-7)。
當(dāng)通過應(yīng)用中和抗血管生成素-2單克隆抗體阻斷血管生成素-2與其受體的相互作用時(shí)，可有效阻斷實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤的生長，從而再次指明Tie2在腫瘤血管發(fā)生和生長中的重要作用(Oliner等“Suppression of angiogenesis andtumour growth by selective inhibition of angiopoietin-2”.Cancer Cell.2004，Nov；6(5)507-16.)。所以，抑制Tie2途徑將抑制病理性血管發(fā)生。
要影響受體與配體之間的相互作用，可證明可以用干擾VEGF信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)至內(nèi)皮細(xì)胞的阻斷劑如阿瓦斯汀(Avastin)阻斷血管發(fā)生。
阿瓦斯汀是臨床有效的抗體，它通過阻斷VEGFR介導(dǎo)的血管發(fā)生信號(hào)傳導(dǎo)而作為腫瘤生長抑制劑。因此干擾VEGF信號(hào)是被證實(shí)的臨床原理。VEGF-C是通過VEGFR 3誘導(dǎo)淋巴血管發(fā)生的分子。阻斷該信號(hào)途徑可抑制與淋巴血管發(fā)生相關(guān)的疾病如淋巴水腫以及相關(guān)疾病(Saharinen等“Lymphatic vasculaturedevelopment，molecular regulation and role intumour metastasis and inflammation.”Trends Immunol.2004，Jul25(7)387-95.Review)。
已經(jīng)常常將嘧啶及其衍生物描述為各種疾病的治療劑。一系列近期公開的專利申請(qǐng)記載了它們作為各種蛋白激酶抑制劑的應(yīng)用，例如WO2003/032994A、WO2003/063794A、和WO2002/096888A。更具體地，已經(jīng)公開某些嘧啶衍生物可作為參與血管發(fā)生的蛋白激酶如VEGF或Tie2的抑制劑，例如苯并咪唑取代的2，4-二氨基嘧啶(WO2003/074515A)或(二)苯胺基嘧啶(WO2003/066601A)。最近，已經(jīng)分別報(bào)道其中嘧啶組成大環(huán)體系一部分的嘧啶衍生物可作為CDKs和/或VEGF(WO2004/026881A)、或CDK2和/或CDK5(WO2004/078682A)的抑制劑。
使用這些已知物質(zhì)作為抑制劑或阻斷劑的具體問題在于，它們的使用經(jīng)常同時(shí)伴有對(duì)正常發(fā)育和增殖的組織的不希望有的細(xì)胞毒性副作用。這源自所述物質(zhì)的選擇性較小以及劑量耐受性問題。
因此，本發(fā)明的目的是提供如下化合物，其可用于治療血管生長調(diào)節(jié)異常疾病或伴有血管生長調(diào)節(jié)異常的疾病。而且將預(yù)防現(xiàn)有領(lǐng)域的問題，尤其是將提供如下化合物，其對(duì)正常增殖的組織具有低毒副作用，卻可以在小濃度下有效抑制內(nèi)皮細(xì)胞遷移。這將進(jìn)一步減少不希望有的副作用。

發(fā)明內(nèi)容
通過提供源自一類磺酰氨基大環(huán)及其鹽的化合物、制備磺酰氨基大環(huán)的方法、包含所述磺酰氨基大環(huán)的藥物組合物、所述化合物作為藥物的應(yīng)用、以及使用所述化合物治療疾病的方法，可解決上述問題，所有這些全部依照本說明書、并如本申請(qǐng)的權(quán)利要求書所定義。
本申請(qǐng)涉及通式I的化合物及其溶劑化物、水合物、N-氧化物、異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體和鹽 其中
A為亞苯基或C6-亞雜芳基；Z優(yōu)選選自O(shè)、S、NR3和CHR3；R1、R2和R3相同或不同，優(yōu)選分別獨(dú)立地選自氫和-C1-C10-烷基，其中-C1-C10-烷基是未取代或被羥基單取代或多取代；R4優(yōu)選選自氫、鹵素、硝基、氨基、氰基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷氧基、-NH-C1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-(CH2)p-COR5、-(CH2)p-NHCOR5、-(CH2)p-NH-CO-NR5R6、-(CH2)p-NHS(O)2R5、-(CH2)p-CO-NR5R6和-O-(CH2)p-COR5；X為鍵或亞甲基；Y優(yōu)選選自亞甲二氧基苯基、亞乙二氧基苯基、-亞苯基-D-NH-COR5、-亞苯基-D-NH-CONR5R6、-亞苯基-D-NH-S(O)2R5、-亞苯基-D-O-(CH2)p-COR5、-亞苯基-D-O-(CH2)p-R7、-N-(R5-G)-哌嗪-N’-基甲基、-N-(R7-SO2-)-哌嗪-N’-基、-氧-C6-C18-芳基、-氧-C5-C18-雜芳基、-氧-(CH2)n-NH-COR5、-氧-(CH2)n-NH-CONR5R6、-氧-(CH2)n-NH-S(O)2R5、-NH-(CH2)n-NH-COR5、-NH-(CH2)n-NH-CONR5R6、-NH-(CH2)n-NH-S(O)2R5和-亞苯基-NH-E-CONR5R6，其中亞苯基是未取代的或分別獨(dú)立地被羥基、鹵素、硝基、氰基、羧基、氨基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷氧基、-NH-C1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-C1-C6-鹵代烷基、-C1-C6-鹵代烷氧基、-C1-C6-烷硫基和/或-C1-C6-烷基羰基單取代或多取代；并且其中-氧-C6-C18-芳基和-氧-C5-C18-雜芳基是未取代的或分別獨(dú)立地被羥基、鹵素、硝基、氰基、羧基、氨基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷氧基、NH-C1-C6-烷基、N(C1-C6-烷基)2、-C1-C6-鹵代烷基、C1-C6-鹵代烷氧基、C1-C6-烷硫基、C1-C6-烷基羰基、-NH-S(O)2-R5、-NH-COR5、-NHCONR5R6、-O-(CH2)p-COR5和/或-O-(CH2)p-R5單取代或多取代；D為鍵、亞甲基或亞乙基；E為-CR8R9-，其中R8和R9相同或不同，優(yōu)選分別獨(dú)立地選自氫和甲基；或者R8和R9一起形成3-至10-元亞甲基鏈(tether)，其中至多兩個(gè)亞甲基任選地被O、S和/或NR1代替；
G為-S(O)2-、-CONH-、或-C＝O；R5優(yōu)選選自氫和選自-C1-C6-烷基、-C2-C6-烯基、-C2-C6-炔基、-C3-C8-環(huán)烷基、-(CH2)p-C6-C11-芳基和-(CH2)p-C5-C10-雜芳基的殘基，其中所述殘基是未取代的或者分別獨(dú)立地被羥基、鹵素、硝基、氰基、羧基、氨基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烯基、-C1-C6-炔基、-C1-C6-烷氧基、-NH-C1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-C1-C6-鹵代烷基、-C1-C6-鹵代烷氧基、-C1-C6-烷硫基、-S(O)-C1-C6-烷基、-S(O)2-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷基羰基、苯基、苯氧基和/或吡啶基單取代或多取代，其中-C3-C8-環(huán)烷基的C-骨架的C原子是未中斷的或者被氮原子、氧原子、硫原子和/或一個(gè)或多個(gè)C＝O部分單次或多次中斷，和/或其中一個(gè)或多個(gè)雙鍵可以包含在所述C-骨架中；或者R5和R6一起形成3-至10-元亞甲基鏈，其中至多兩個(gè)亞甲基可以被O、S和/或-NR1代替；R6為氫或-C1-C10-烷基，或者R5和R6一起形成3-至10-元亞甲基鏈，其中至多兩個(gè)亞甲基可以被O、S和/或-NR1代替；R7為-C6-C11-芳基或-C5-C10-雜芳基，其中-C6-C11-芳基或-C5-C10-雜芳基是未取代的或者被羥基、鹵素、硝基、氰基、羧基、氨基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷氧基、-NH-C1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-C1-C6-鹵代烷基、-C1-C6-鹵代烷氧基、-C1-C6-烷硫基、-S(O)-C1-C6-烷基、-S(O)2-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷基羰基、苯基、苯氧基和/或吡啶基單取代或多取代；m為3至6；n為2或3；p為0至2。
具體實(shí)施例方式
在用于本文時(shí)，下文和權(quán)利要求書中所述的術(shù)語優(yōu)選具有下列意義在用于本文時(shí)，術(shù)語“烷基”理解為優(yōu)選指支鏈或直鏈的烷基，是指例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、異戊基、己基、庚基、辛基、壬基和癸基及其異構(gòu)體。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“烷氧基”理解為優(yōu)選指支鏈或直鏈的烷氧基，是指例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、戊氧基、異戊氧基、己氧基、庚氧基、辛氧基、壬氧基、癸氧基、十一烷氧基和十二烷氧基及其異構(gòu)體。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“環(huán)烷基”理解為優(yōu)選指環(huán)烷基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。被氮原子、氧原子和/或硫原子單次或多次中斷的環(huán)烷基部分指例如氧雜環(huán)丙烷基、氧雜環(huán)丁烷基、氮雜環(huán)丙烯基、氮雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基、吡咯烷基、嗎啉基、二噻烷基、硫代嗎啉基、哌嗪基、三噻烷基和chinuclidinyl。其中所述C-骨架包含一個(gè)或多個(gè)雙鍵的環(huán)烷基部分指例如環(huán)烯基，例如環(huán)丙烯基、環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基和環(huán)庚烯基，其中可向雙鍵或單鍵提供所述聯(lián)接。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“鹵素”理解為優(yōu)選指氟、氯、溴或碘。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“烯基”理解為優(yōu)選指支鏈或直鏈的烯基，例如乙烯基、丙烯-1-基、丙烯-2-基、丁-1-烯-1-基、丁-1-烯-2-基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-2-基、丁-1-烯-3-基、2-甲基-丙-2-烯-1-基和2-甲基-丙-1-烯-1-基。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“炔基”理解為優(yōu)選指支鏈或直鏈的炔基，例如乙炔基、丙-1-炔-1-基、丁-1-炔-1-基、丁-2-炔-1-基和丁-3-炔-1-基。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“芳基”在每種情況下被定義為具有3-12個(gè)碳原子，優(yōu)選6-12個(gè)碳原子，例如環(huán)丙烯基、丙戊二烯基、苯基、托品基、環(huán)辛二烯基、茚基、萘基、甘菊環(huán)基、聯(lián)苯基、芴基、蒽基等，苯基是優(yōu)選的。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“亞芳基”指環(huán)狀或多環(huán)芳族基團(tuán)，例如亞苯基、亞萘基和聯(lián)亞苯基。更具體地，術(shù)語“亞苯基”理解為指鄰亞苯基、間亞苯基、或?qū)啽交?yōu)選地，它為間亞苯基。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“雜芳基”理解為指如下芳族環(huán)體系其中包括3-16個(gè)環(huán)原子，優(yōu)選5、6、9或10個(gè)原子，其中包含相同或不同的至少一個(gè)雜原子，所述雜原子為例如氧、氮或硫，該雜芳環(huán)可能是單環(huán)、雙環(huán)、或三環(huán)，而且在每種情況下可能是苯并縮合的。優(yōu)選地，雜芳基選自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異噁唑基、異噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、硫-4H-吡唑基(thia-4H-pyrazolyl)等、及其苯并衍生物，例如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基、異吲哚基等；或者吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等、及其苯并衍生物，例如喹啉基、異喹啉基等；或吖辛因基、吲嗪基、嘌呤基等、及其苯并衍生物；或噌啉基、2，3-二氮雜萘基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘吡啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、呫噸基、或氧雜環(huán)庚烯(oxepinyl)等。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“亞雜芳基”理解為優(yōu)選指環(huán)狀或多環(huán)芳族基團(tuán)，例如指五元雜芳族基團(tuán)，例如硫代亞苯基、亞呋喃基、亞噁唑基、亞噻唑基、亞咪唑基、亞吡唑基、亞三唑基、硫-4H-亞吡唑基及其苯并衍生物，或指六元雜芳族基團(tuán)，例如亞吡啶基、亞嘧啶基、亞三嗪基及其苯并衍生物，例如亞喹啉基、亞異喹啉基。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“鹵代烷基”或“鹵代烷氧基”理解為指如上面所定義的“烷基”或“烷氧基”，其中一個(gè)或多個(gè)氫原子被各自數(shù)量的鹵素原子代替，術(shù)語“鹵素”如上面所定義。
在用于本文時(shí)，當(dāng)用于本發(fā)明全文如在定義“C1-C10-烷基”的語境中，術(shù)語“C1-C10”理解為指具有限定數(shù)量的1至10個(gè)碳原子，即1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10個(gè)碳原子的烷基。進(jìn)一步理解為所述術(shù)語“C1-C10”被解釋為其中包括任何子范圍，例如C1-C10、C2-C9、C3-C8、C4-C7、C5-C6、C1-C2、C1-C3、C1-C4、C1-C5、C1-C6、C1-C7、C1-C8、C1-C9；優(yōu)選C1-C2、C1-C3、C1-C4、C1-C5、C1-C6；更優(yōu)選C1-C3。
類似地，在用于本文時(shí)，當(dāng)用于本發(fā)明全文如在定義“C1-C6-烷基”、“C1-C6-烷氧基”、“C1-C6-烷硫基”、“C1-C6-羥基烷基”、“C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基”、“-NH-C1-C6-烷基”、“-N(C1-C6-烷基)2”、“-S(O)2(C1-C6-烷基)”和“-C1-C6-烷酰基”的語境中，術(shù)語“C1-C6”理解為指具有限定數(shù)目的1至6個(gè)碳原子，即1、2、3、4、5、或6個(gè)碳原子的烷基。進(jìn)一步理解為所述術(shù)語“C1-C6”被解釋為其中包括任何子范圍，例如C1-C6、C2-C5、C3-C4、C1-C2、C1-C3、C1-C4、C1-C5、C1-C6；優(yōu)選C1-C2、C1-C3、C1-C4、C1-C5、C1-C6；更優(yōu)選C1-C3。
類似地，在用于本文時(shí)，當(dāng)用于本發(fā)明全文如在定義“C2-C6-烯基”和“C2-C6-炔基”的語境中，術(shù)語“C2-C6”理解為指具有限定數(shù)目的2至6個(gè)碳原子，即2、3、4、5、或6個(gè)碳原子的烯基或炔基。進(jìn)一步理解為所述術(shù)語“C2-C6”被解釋為其中包括任何子范圍，例如C2-C6、C3-C5、C3-C4、C2-C3、C2-C4、C2-C5；優(yōu)選C2-C3。
而且，在用于本文時(shí)，當(dāng)用于本發(fā)明全文如在定義“C3-C8-環(huán)烷基”的語境中，術(shù)語“C3-C8”理解為指具有限定數(shù)目的3至8個(gè)碳原子，即3、4、5、6、7或8個(gè)碳原子，優(yōu)選5或6個(gè)碳原子的環(huán)烷基。進(jìn)一步理解為所述術(shù)語“C3-C8”被解釋為其中包括任何子范圍，例如C3-C8、C4-C7、C5-C6、C3-C4、C3-C5、C3-C6、C3-C7；優(yōu)選C5-C6。
另外，在用于本文時(shí)，當(dāng)用于本發(fā)明全文如在定義“C6-C11-芳基”的語境中，術(shù)語“C6-C11”理解為指具有限定數(shù)目的6至11個(gè)碳原子，即6、7、8、9、10、或11個(gè)碳原子，優(yōu)選5、6或10個(gè)碳原子的芳基。進(jìn)一步理解為所述術(shù)語“C6-C11”被解釋為其中包括任何子范圍，例如C6-C11、C7-C10、C8-C9、C9-C10；優(yōu)選C5-C6或C9-C10。類似地，在用于本文時(shí)，當(dāng)用于本發(fā)明全文如在定義“C5-C10-雜芳基”的語境中，術(shù)語“C5-C10”理解為指具有限定數(shù)目的5至10個(gè)碳原子，即5、6、7、8、9、或10個(gè)碳原子，優(yōu)選5、6或10個(gè)碳原子的雜芳基，其中至少一個(gè)碳原子被雜原子代替，所述雜原子為前面所定義。進(jìn)一步理解為所述術(shù)語“C5-C10”被解釋為其中包括任何子范圍，例如C5-C10、C6-C9、C7-C8；優(yōu)選C5-C6或C9-C10。
式I的化合物(磺酰氨基大環(huán))能夠作為N-氧化物存在，其定義為通式I化合物的至少一個(gè)氮可以被氧化。
式I的化合物(磺酰氨基大環(huán))能夠作為溶劑化物、尤其是水合物存在，其中式I的化合物可以包含極性溶劑、尤其是水作為化合物晶格的結(jié)構(gòu)部件。極性溶劑、尤其是水的數(shù)量可以以化學(xué)計(jì)量比或非化學(xué)計(jì)量比存在。在化學(xué)計(jì)量溶劑如水合物的情況下，可能分別是半溶劑化物或水合物、(半個(gè)溶劑化物或水合物)、一溶劑化物或水合物、一個(gè)半溶劑化物或水合物、二溶劑化物或水合物、三溶劑化物或水合物、四溶劑化物或水合物、五溶劑化物或水合物等。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“異構(gòu)體”指化學(xué)化合物與另一個(gè)化學(xué)物種具有相同數(shù)量和類型的原子。存在兩個(gè)主要的異構(gòu)體類型構(gòu)成異構(gòu)體(constitutional isomer)和立體異構(gòu)體。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“構(gòu)成”異構(gòu)體指化學(xué)化合物具有相同數(shù)目和類型的原子，但它們以不同的順序連接。存在官能異構(gòu)體、結(jié)構(gòu)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體或價(jià)異構(gòu)體。
在立體異構(gòu)體中，原子按照相同的方式按順序連接，從而兩種異構(gòu)體分子的縮寫式是相同的。然而，異構(gòu)體在原子空間排列方式上是不同的。存在兩個(gè)主要的立體異構(gòu)體子類通過圍繞單鍵旋轉(zhuǎn)而互變的構(gòu)象異構(gòu)體、和不易互變的構(gòu)型異構(gòu)體。
然后，構(gòu)型異構(gòu)體包括對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體。對(duì)映異構(gòu)體是互為鏡像關(guān)系的立體異構(gòu)體。對(duì)映異構(gòu)體可能包含任意數(shù)量的立體異構(gòu)中心，只要每個(gè)中心是另一個(gè)分子中相應(yīng)中心的準(zhǔn)確鏡像。如果這些中心中一個(gè)或多個(gè)的構(gòu)型不同，則兩個(gè)分子不再是鏡像。不是對(duì)映異構(gòu)體的立體異構(gòu)體被稱為非對(duì)映異構(gòu)體。還具有不同構(gòu)成的非對(duì)映異構(gòu)體是非對(duì)映異構(gòu)體的另一個(gè)子類，其中最有名的是簡單的順-反異構(gòu)體。
為了限定不同類型的異構(gòu)體，參考IUPAC Rules Section E(Pure ApplChem 45，11-30，1976)。
在用于本文時(shí)，術(shù)語“體內(nèi)可水解的酯”理解為指其中包含羧基或羥基的式(I)化合物的體內(nèi)可水解的酯，例如藥物學(xué)可接受的酯，其在人或動(dòng)物體內(nèi)被水解以產(chǎn)生母體酸或醇。羧基的合適的藥物學(xué)可接受酯包括例如烷基、環(huán)烷基和任選取代的苯基烷基、尤其是芐基酯、C1-C6烷氧基甲基酯，例如甲氧基甲基酯、C1-C6烷酰氧基甲基酯，例如新戊酰氧基甲基酯、2-苯并[c]呋喃酮基酯、C3-C8環(huán)烷氧基-羰基氧基-C1-C6-烷基酯，例如1-環(huán)己基羰基氧基乙基酯；1，3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮基甲基酯，例如5-甲基-1，3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮基甲基酯；和C1-C6-烷氧基羰基氧基乙基酯，例如1-甲氧基羰基氧基乙基酯，且可以在本發(fā)明化合物的任何羧基上形成。包含羥基的式(I)化合物的體內(nèi)可水解酯包括無機(jī)酯如磷酸酯和α-酰氧基烷基醚以及相關(guān)的化合物，它們作為酯體內(nèi)水解的結(jié)果分解以產(chǎn)生母體羥基。α-酰氧基烷基醚的例子包括乙酰氧甲氧基和2，2-二甲基丙酰氧甲氧基。與羥基形成體內(nèi)可水解的酯的基團(tuán)的選擇包括烷?；?、芐?；?、苯乙?；约叭〈钠S?；捅揭阴；⑼檠趸驶?以得到烷基碳酸酯)、二烷基氨基甲酰基和N-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲?；?以得到氨基甲酸酯)、二烷基氨基乙酰基和羧基乙?；?。
式I的化合物(磺酰氨基大環(huán))能夠作為游離形式或鹽的形式存在。本發(fā)明磺酰氨基大環(huán)的合適的藥物學(xué)可接受鹽為例如足夠堿性的本發(fā)明磺酰氨基大環(huán)的酸加成鹽，例如與例如無機(jī)酸或有機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、三氟乙酸、檸檬酸或馬來酸的酸加成鹽。此外，足夠酸性的本發(fā)明磺酰氨基大環(huán)的合適的藥物學(xué)可接受鹽為堿金屬鹽，例如鈉鹽或鉀鹽，堿土金屬鹽，例如鈣鹽或鎂鹽，銨鹽或與提供生理學(xué)可接受的陽離子的有機(jī)堿的鹽，例如與N-甲基-葡糖胺、二甲基-葡糖胺、乙基-葡糖胺、賴氨酸、1，6-己二胺、乙醇胺、葡萄糖胺、肌氨酸、絲氨醇、三羥基-甲基-氨基甲烷、氨基丙二醇、sovak堿、1-氨基-2，3，4-丁三醇的鹽。
有益地，優(yōu)選如下化合物其中A為亞苯基；R1、R2和R3相同或不同，優(yōu)選分別獨(dú)立地選自氫和C1-C10-烷基，其中C1-C10-烷基是未取代的或被羥基單取代或多取代；Z為-NR3；m為3。
有益地，更優(yōu)選如下化合物其中A為亞苯基；R1和R2為氫原子，Z為NH，m為3，R4為氫原子。
還優(yōu)選其中A為亞吡啶基的化合物。
還更特別優(yōu)選如下化合物，其中
X為鍵，Y為亞甲二氧基苯基或亞乙二氧基苯基；或者X為鍵，Y為-亞苯基-D-NH-COR5；或者X為鍵，Y為-亞苯基-D-NH-CONR5R6；或者X為鍵，Y為-亞苯基-D-NH-S(O)2R5；或者X為鍵，Y為-亞苯基-D-O-(CH2)p-COR5，其中D為鍵或亞甲基；或者X為鍵，Y為-亞苯基-NH-E-CONR5R6；或者X為鍵，Y為-氧-C6-C18-芳基，其中-氧-C6-C18-芳基是未取代的或分別獨(dú)立地被羥基、鹵素、硝基、氰基、羧基、氨基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷氧基、-NH-C1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-C1-C6-鹵代烷基、-C1-C6-鹵代烷氧基、-C1-C6-烷硫基、-C1-C6-烷基羰基、-NH-S(O)2-R5、-NH-COR5、-NHCONR5R6、-O-(CH2)p-COR5、和/或-O-(CH2)p-R5單取代或多取代，優(yōu)選C6-C18-芳基為苯基，它可以被-NH-COR5或-NH-CONHR5取代；或者X為鍵或亞甲基，Y為-N-(R5-G)-哌嗪-N’-基甲基；或者X為鍵或亞甲基，Y為-N-(R5-S(O)2)-哌嗪-N’-基；或者X為鍵，Y為-氧-(CH2)n-NH-COR5；或者X為鍵，Y為-氧-(CH2)n-NH-CONR5R6；或者X為鍵，Y為-氧-(CH2)n-NH-S(O)2R5；或者X為鍵，Y為-NH-(CH2)p-NH-COR5；或者X為鍵，Y為-NH-(CH2)p-NH-CONR5R6；或者X為鍵，Y為-NH-(CH2)n-NH-S(O)2R5；另外這些化合物優(yōu)選具有A＝亞苯基；Z＝-NR3；和m＝3。
本發(fā)明的化合物能夠用于治療血管生長調(diào)節(jié)異常疾病或伴有血管生長調(diào)節(jié)異常的疾病。尤其是，所述化合物可有效干擾血管生成素，從而影響Tie2信號(hào)傳導(dǎo)。令人驚訝地是，所述化合物可阻斷Tie2信號(hào)傳導(dǎo)，其中Tie2激酶活性被阻斷，同時(shí)在低濃度下顯示對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞以外的細(xì)胞沒有細(xì)胞毒性或有極低的細(xì)胞毒性，這相對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的物質(zhì)是重要的優(yōu)點(diǎn)。因此當(dāng)持久血管發(fā)生具有病理學(xué)作用時(shí)，這種效果能夠允許用所述化合物對(duì)患者進(jìn)行延長治療，從而提供良好的耐受性和高抗血管發(fā)生功效。
因此本發(fā)明的化合物能夠用于治療伴有新血管發(fā)生的疾病。這主要適用于所有實(shí)體瘤，例如乳腺瘤、結(jié)腸瘤、腎瘤、肺瘤和/或腦瘤，且能夠擴(kuò)展至其中存在持久病理學(xué)血管發(fā)生的許多疾病。該治療可用于與炎癥相關(guān)的疾病、與各種形式的水腫相關(guān)的疾病和與基質(zhì)增殖以及病理性基質(zhì)反應(yīng)相關(guān)的許多疾病。尤其適合治療婦科疾病，其中對(duì)具有病理學(xué)特征的血管發(fā)生、炎癥和基質(zhì)過程的抑制可能被抑制。同時(shí)在正常增殖組織中的毒副作用很低。因此該治療可補(bǔ)充現(xiàn)有方法，用于治療與新血管發(fā)生相關(guān)的疾病。
本發(fā)明的化合物特別能用于治療和預(yù)防腫瘤生長和轉(zhuǎn)移，尤其是經(jīng)或未經(jīng)治療的具有所有適應(yīng)癥和階段的實(shí)體瘤，只要腫瘤生長伴有持久血管發(fā)生。然而，它不僅限于腫瘤治療，而且對(duì)具有血管生長調(diào)節(jié)異常的其它疾病的治療也具有極大價(jià)值。這些疾病包括視網(wǎng)膜病和其它血管發(fā)生依賴性眼病(例如角膜移植排斥、年齡相關(guān)的黃斑變性)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、和與血管發(fā)生相關(guān)的其它炎癥疾病如銀屑病、遲發(fā)型超敏反應(yīng)、接觸性皮炎、哮喘、多發(fā)性硬化、動(dòng)脈再狹窄、肺動(dòng)脈高壓、中風(fēng)和炎性腸病，如克羅恩病。包括冠狀動(dòng)脈和外周動(dòng)脈疾病。它可用于疾病狀態(tài)如腹水、水腫，如腦瘤相關(guān)的水腫、高原創(chuàng)傷、缺氧誘導(dǎo)的腦水腫、肺水腫和黃斑水腫或燒傷和外傷后的水腫。而且，它可用于慢性肺病、成人型呼吸窘迫綜合征。而且可用于骨再吸收和良性增殖疾病如肌瘤、良性前列腺增生和用于傷口愈合以減少疤痕形成。它對(duì)于如下疾病的治療具有治療價(jià)值，其中纖維蛋白或細(xì)胞外基質(zhì)的沉積是個(gè)問題，而且基質(zhì)增殖加速(例如纖維化、硬化、腕管綜合征等)。而且它可用于減少受損神經(jīng)再生過程中的疤痕形成，從而允許重接軸突。其它應(yīng)用是子宮內(nèi)膜異位、先兆子癇、絕經(jīng)后出血和卵巢過度刺激。
本發(fā)明的第二個(gè)方面是藥物組合物，其中包含式I的化合物或其藥物學(xué)可接受的鹽、異構(gòu)體或異構(gòu)體的混合物，以及一種或多種合適的賦形劑。該組合物特別適合用于治療上述血管生長調(diào)節(jié)異常疾病或伴有血管生長調(diào)節(jié)異常的疾病。
為了將本發(fā)明的化合物用作藥物產(chǎn)品，可以在藥物組合物中提供所述化合物或其混合物，該組合物以及用于腸、口服或非腸道應(yīng)用的本發(fā)明化合物可適當(dāng)包含藥物學(xué)可接受的有機(jī)或無機(jī)惰性基質(zhì)材料，例如凈化水、明膠、阿拉伯樹膠、乳酸鹽、淀粉、硬脂酸鎂、滑石、植物油、聚亞烷基二醇等。
可以固體形式提供所述藥物組合物，例如作為片劑、糖錠劑、栓劑、膠囊，或者以液體形式提供所述藥物組合物，例如作為溶液劑、混懸劑或乳劑。所述藥物組合物可以額外地包含輔助物質(zhì)，例如防腐劑、穩(wěn)定性、潤濕劑或乳化劑、用于調(diào)節(jié)滲透壓的鹽或緩沖劑。
對(duì)于非腸道施用(包括靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、血管內(nèi)或輸液)，無菌注射溶液或懸浮液是優(yōu)選的，尤其是所述化合物在包含聚羥基乙氧基的蓖麻油中的水溶液。
本發(fā)明的藥物組合還可以包含表面活性劑，例如沒食子酸(gallenicacid)的鹽、動(dòng)物或植物來源的磷脂、其混合物和脂質(zhì)體及其部分。
對(duì)于具有滑石和/或含烴載體以及粘合劑如乳糖的口服應(yīng)用片劑、糖錠劑或膠囊，玉米淀粉和馬鈴薯淀粉是優(yōu)選的。其它液體形式的應(yīng)用是可能的，例如作為藥汁，如果必需，可包含甜味劑。
將根據(jù)施用途徑、患者的年齡、體重、被治療疾病的種類和嚴(yán)重性以及類似的因素對(duì)劑量進(jìn)行必要的改變。每日劑量范圍為0.5-1,500mg。劑量可作為單位劑量或者其部分施用并且在一天中分配。因此最佳劑量將由治療任意特定患者的醫(yī)師確定。
本發(fā)明的另一方面是用于制備本發(fā)明化合物的方法。
下面的表格列出了用于本段、以及實(shí)施例部分的簡寫。以它們?cè)趫D譜中出現(xiàn)的那樣表述NMR峰的形式，沒有考慮可能更高級(jí)別的效果。


下列路線和通用程序說明制備本發(fā)明通式I化合物的通用合成途徑，并非用于限制。具體實(shí)施例描述于隨后的段落。因此，通過金屬催化的偶聯(lián)反應(yīng)如Suzuki、Heck、或Sonogashira偶聯(lián)，尤其是由過渡金屬如Cu、Pd催化的偶聯(lián)反應(yīng)，或者通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的胺化方法，能夠從鹵代大環(huán)(A)開始制備本發(fā)明的化合物。
第一種通用反應(yīng)路線描繪如下

路線1大環(huán)A的偶聯(lián)，例如Suzuki或Ullmann偶聯(lián)，其中A在大環(huán)A中優(yōu)選為亞苯基，Z為-NR3，m＝3，其中在式I中X為鍵，Y為例如具有上述意義的-亞苯基-D-NH-COR5、-亞苯基-D-NH-CONR5R6、-亞苯基-D-NH-S(O)2R5、-亞苯基D-O-(CH2)p-COR5、-氧-C6-C11-芳基、或-氧-C5-C10-雜芳基。
第二種特定反應(yīng)路線描繪如下 路線2用X-Y將大環(huán)A胺化，其中在大環(huán)A中A優(yōu)選為亞苯基，Z為-NR3，m＝3，其中在式I中X為鍵，Y為例如具有上述意義的-NH-(CH2)n-COR5-、-NH-(CH2)n-CONR5R6、或-NH-(CH2)n-S(O)2R5。
鹵代大環(huán)A的合成描述于WO2004/026881A中，在本文中具體示范作為關(guān)于溴化大環(huán)A的制備例A、和關(guān)于碘化大環(huán)A的制備例B。
制備例A15-溴-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phane-4，4-二氧化物的制備 方法A
在2.5小時(shí)內(nèi)，通過注射泵將200mg(0.48mmol)3-氨基-N-[3-(5-溴-2-氯-嘧啶-4-基氨基)-丙基]-苯磺酰胺的乙腈/水/2-丁醇(9.0ml/1.0ml/0.3ml)溶液添加到乙腈/水/4摩爾鹽酸的二氧六環(huán)溶液(45ml/5ml/0.6ml)的回流混合物中。在回流另外3小時(shí)后，關(guān)閉油浴，將反應(yīng)溶液在室溫下攪拌過夜。濾除所形成的沉淀物，用水洗滌，然后真空干燥。獲得112mg(0.31mmol)產(chǎn)物。通過在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中蒸發(fā)來濃縮濾液。用水洗滌所形成的沉淀物并過濾。在干燥后，獲得另外45mg(0.12mmol)產(chǎn)物。因此，產(chǎn)物的總收率為157mg(0.41mmol，相當(dāng)于理論值的85％)。
方法B將450mg(1.00mmol)N-[3-(5-溴-2-氯-嘧啶-4-基氨基)-丙基]-3-硝基-苯磺酰胺的9.5ml乙醇溶液與960mg氯化錫(II)混合，在70℃攪拌30分鐘。在冷卻后，將反應(yīng)混合物小心地添加到冰水中，用1N NaOH溶液使成堿性。用乙酸乙酯(3x)萃取。將合并的有機(jī)相干燥(Na2SO4)，過濾并蒸發(fā)濃縮。通過色譜法(乙酸乙酯/己烷4∶1)純化剩余的殘留物。獲得72mg粗產(chǎn)物。將它與1N HCl混合物，用乙酸乙酯萃取。無色的固體從水相中沉淀出來。將固體過濾并干燥。獲得20mg(0.05mmol，相當(dāng)于理論值的5％)產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO)10.45(s，1H)，9.07(s，1H)，8.35(br，1H)，8.18(s，1H)，7.78(t，1H)，7.45(m，2H)，7.32(m，1H)，3.44(m，2H)，3.28(m，2H)，1.82(m，2H)。
MS384(ES)。
中間產(chǎn)物的制備3-氨基-N-[3-(5-溴-2-氯-嘧啶-4-基氨基)-丙基]-苯磺酰胺的制備
在氬和室溫下，將1.35g(2.99mmol)N-[3-(5-溴-2-氯-嘧啶-4-基氨基)-丙基]-3-硝基-苯磺酰胺的100ml四氫呋喃溶液與15ml 15％Ti(III)Cl3的約10％鹽酸溶液混合。在17小時(shí)后，將反應(yīng)溶液再與1ml所述Ti(III)Cl3溶液混合，另外攪拌3小時(shí)。用1N NaOH溶液使該批次成堿性，然后過濾。在每種情況下，用100ml乙酸乙酯/MeOH(30ml/20ml)將濾餅再洗滌2次。通過在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中蒸發(fā)來濃縮濾液，然后用乙酸乙酯萃取(2x)。用NaCl溶液洗滌合并的有機(jī)相，干燥(Na2SO4)，過濾并蒸發(fā)濃縮。通過色譜法(二氯甲烷/MeOH 95∶5，F(xiàn)lashmaster II)純化剩余的殘留物。獲得624mg(1.48mmol，相當(dāng)于理論值的49％)產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO)8.21(s，1H)，7.63(t，1H)，7.38(t，1H)，7.13(t，1H)，6.97(m，1H)，6.83(m，1H)，6.71(m，1H)，5.53(s，2H)，3.30(m，2H)，2.75(m，2H)，1.65(m，2H)。
制備例B15-碘-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phane-4，4-二氧化物的制備 在3小時(shí)內(nèi)，通過注射泵將2.34g(5.00mmol)3-氨基-N-[3-(5-碘-2-氯-嘧啶-4-基氨基)-丙基]-苯磺酰胺的乙腈/水/2-丁醇(94mL/10.4mL/3.1mL)溶液添加到乙腈/水/4摩爾鹽酸的二氧六環(huán)溶液(470mL/52mL/6.2mL)的回流混合物中。在回流另外3小時(shí)后，關(guān)閉各油浴的加熱，將反應(yīng)溶液在室溫下攪拌過夜。濾除所形成的沉淀物，用乙腈洗滌，然后真空干燥，以得到1.71g(79％收率)所需產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO，300MHz)10.81(s，1H)，9.02(s，1H)，8.30-8.38(m，1H)，8.27(s，1H)，7.82(t，1H)，7.43-7.56(m，2H)，7.29-7.40(m，1H)，3.38-3.52(m，2H)，3.21-3.36(m，2H)，1.72-1.90(m，2H)。
ESI-MS[M+H+]＝432。
中間產(chǎn)物的制備3-氨基-N-[3-(5-碘-2-氯-嘧啶-4-基氨基)-丙基]-苯磺酰胺的制備 在氬和室溫下，將9.95g(20.0mmol)N-[3-(5-碘-2-氯-嘧啶-4-基氨基)-丙基]-3-硝基-苯磺酰胺的660mL四氫呋喃溶液與100mL 15％Ti(III)Cl3的約10％鹽酸溶液混合。在2小時(shí)后，將反應(yīng)溶液再與7mL所述Ti(III)Cl3溶液混合，另外攪拌一小時(shí)。通過添加1N NaOH溶液使混合物成堿性(pH14)，然后用硅藻土過濾。用乙酸乙酯萃取(3×400mL)濾液，然后用鹽水(200mL)洗滌合并的有機(jī)層，真空濃縮。用500ml乙酸乙酯/MeOH(3∶2)將濾餅再洗滌4次，然后將所得洗滌部分蒸發(fā)。將所得殘留物合并，通過硅膠柱色譜法(二氯甲烷/乙酸乙酯)純化，以得到5.42g(58％收率)目標(biāo)化合物。
1H-NMR(DMSO，300MHz)8.31(s，1H)，7.39(t，1H)，7.27(t，1H)，7.16(t，1H)，6.95-7.01(m，1H)，6.82-6.88(m，1H)，6.68-6.76(m，1H)，5.53(s，2H)，3.27-3.39(m，2H)，2.68-2.82(m，2H)，1.64(mc，2H)。
ESI-MS[M+H+]＝468(35Cl信號(hào)；還充分檢測(cè)了37Cl同位素)。
適當(dāng)?shù)呐悸?lián)伙伴或者是市售的，或者能夠通過如路線3所示的簡單標(biāo)準(zhǔn)官能化程序制備，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是公知的
路線3Suzuki偶聯(lián)構(gòu)成嵌段的合成使用下列通用Suzuki偶聯(lián)程序制備例1至32通用程序1(GP1)Suzuki偶聯(lián)(典型范圍0.25mmol)在室溫下，用相應(yīng)的有機(jī)硼化合物(1.25eq.)、K2CO3(2.5eq.，或者作為固體或者作為2M水溶液)、和POPd(2.5-5mol-％)處理相應(yīng)的大環(huán)鹵化物的DMF(8mL/mmol鹵化物)溶液。將被攪拌的所得混合物放置到預(yù)熱至100℃的油浴中。通過TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)過程，在大環(huán)鹵化物在2h后沒有完全轉(zhuǎn)化的情況下，添加另外部分的POPd和有機(jī)硼化合物，然后在100℃再攪拌。在冷卻到室溫后，添加水，將所得懸浮液攪拌30min。通過真空過濾分離粗產(chǎn)物，真空干燥，通過柱色譜法純化，然后任選地用甲醇研磨和/或進(jìn)行制備HPLC(例如YMC Pro C18RS 5μ，150×20mm，0.2％NH3的水/乙腈溶液)，以獲得分析純的產(chǎn)物?；蛘?，在完全轉(zhuǎn)化后，用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，用水淬滅。分離各層，用乙酸乙酯將有機(jī)層萃取兩次，將合并的有機(jī)層干燥，真空濃縮，然后進(jìn)行上述進(jìn)一步的純化步驟。
在下面的部分中描述了不能購買得到的用作Suzuki偶聯(lián)底物的有機(jī)硼化合物的制備。
通用程序GP2羥基苯基硼酸頻哪酯(pinacolate ester)的烷基化(典型范圍0.5至1mmol)在氮?dú)夥罩校肒2CO3(1.2eq.)、然后用相應(yīng)的ω-溴苯乙酮(1.1eq.)處理4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊烷-2-基)-苯酚的DMF(4mL/mmol)溶液。將所得混合物在室溫下攪拌3h，然后蒸發(fā)至干。在乙酸乙酯和水之間分配殘留物，將有機(jī)層干燥并濃縮。對(duì)粗殘留物進(jìn)行閃式柱色譜法純化，以得到分析純的產(chǎn)物。
根據(jù)通用程序GP2，由4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊烷-2-基)-苯酚和適當(dāng)取代的ω-溴苯乙酮制備下列硼酸頻哪酯(中間體1至6)。


通用程序GP3脲的形成(典型范圍0.5至2mmol)
在室溫和氮?dú)夥罩?，用相?yīng)的異氰酸酯(1.05eq.)、然后用TEA(1.1eq.；在一些情況下使用10eq.TEA；參見表格)處理相應(yīng)的氨基取代的苯基硼酸頻哪酯(在一些情況下使用相應(yīng)的鹽酸鹽)的DCM溶液(5mL/mmol硼酸酯)。將所得混合物攪拌過夜，然后通過TLC分析。如果在20h后沒有達(dá)到完全反應(yīng)，則補(bǔ)充額外的試劑(異氰酸酯，0.26eq.；TEA，0.28eq.)，繼續(xù)攪拌直到TLC顯示反應(yīng)完全。將混合物蒸發(fā)，然后進(jìn)行閃式柱色譜法純化。
根據(jù)通用程序GP3，由相應(yīng)的氨基化合物和適當(dāng)取代的異氰酸酯制備下列硼酸頻哪酯(中間體7至17)。



通用程序GP4磺酰胺的形成(典型范圍0.5至2mmol)在室溫和氮?dú)夥罩?，用相?yīng)的磺酰氯(1.05eq.)、然后用吡啶(1.1eq.；在一些情況下使用10eq.吡啶，參見表格)處理相應(yīng)的氨基取代的苯基硼酸頻哪酯(在一些情況下使用相應(yīng)的鹽酸鹽)的DCM溶液(5mL/mmol硼酸酯)。將所得混合物攪拌過夜，然后蒸發(fā)，然后將粗殘留物進(jìn)行柱色譜法純化，以得到純磺酰胺。
根據(jù)通用程序GP4，由相應(yīng)的氨基化合物和適當(dāng)取代的磺酰氯制備下列硼酸頻哪酯(中間體18至27)。



通用程序GP5酰胺的形成在室溫下，將相應(yīng)的氨基取代的苯基硼酸頻哪酯(1.0eq.)和相應(yīng)的羧酸氯化物(1.5eq.；通過用亞硫酰氯處理相應(yīng)的羧酸、然后真空濃縮制得)在吡啶(0.2M)中攪拌2天。在真空中除去揮發(fā)物，將殘留物溶于二氯甲烷中，通過添加己烷結(jié)晶所需的酰胺。
根據(jù)通用程序GP5，通過與適當(dāng)取代的碳環(huán)酸氯化物反應(yīng)，由4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊烷-2-基)-苯胺或類似的芐胺制備下列酰胺(中間體28至30)。

中間體311-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊烷-2-基)苯基]-3-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]脲的制備按路線A所示制備中間體31。
路線A1-(4-溴-2-氟苯基)-3-[2-氟-5-(三氟甲基)-苯基]脲的制備(步驟31.1)將950mg 4-溴-2-氟-苯基胺(5mmol)溶于20mL DCM中，在0℃和氬氣氛中，用0.8mL 1-氟-2-異氰酸基-4-(三氟甲基)苯(5.5mmol，1.1eq.)處理。在室溫下繼續(xù)攪拌16h。將混合物在0℃冷卻10min，將沉淀物過濾，以獲得1.58g 1-(4-溴-2-氟苯基)-3-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]脲，為白色固體。
1H-NMR(DMSO，300 MHz)9.28(br.s，2H)；8.58(dd，1H)；8.12(t，1H)；7.56(dd，1H)；7.47(dd，1H)；7.31-7.40(m，2H)。
1-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊烷-2-基)苯基]-3-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]脲的制備(步驟31.2)將853mg 1-(4-溴-2-氟苯基)-3-[2-氟-5-(三氟甲基)-苯基]脲(2.16mmol)、820mg雙(頻哪醇基)二硼(3.24mmol，1.5eq.)、176.3mgPdCl2(dppf)·CH2Cl2絡(luò)合物(0.22mmol，0.1eq.)和640mg KOAc(6.48mmol，3.0eq.)稱量到火焰干燥的Schlenk燒瓶中，放置在氬氣氛中。添加7.5mL DMSO，將所得溶液在80℃攪拌4h。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)物，用水淬滅，用硅藻土過濾，用乙酸乙酯將水層萃取兩次。將合并的有機(jī)層干燥，真空濃縮，進(jìn)行閃式柱色譜法純化，提供1-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊烷-2-基)苯基]-3-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]脲，收率為80％。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)8.60(dd，1H)；8.20(t，1H)；7.58(d，1H)；7.48(m，2H)；7.16(t，1H)；1.34(s，12H)。
MS(ESI)[M+H]+＝443。
中間體324-[4，4-二氧代-4λ6-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基]苯胺的制備 根據(jù)通用程序GP1，由15-碘-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-4，4-二氧化物和4-(4，4，5，5，四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜戊烷-2-基)-苯胺制備中間體32。收率12％。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)9.50(s，1H)；9.47(s，1H)；7.76(t，1H)；7.70(s，1H)；7.32-7.41(m，1H)；7.21-7.31(m，2H)；7.03(d，2H)；6.73(t br，1H)；6.65(d，2H)；5.18(s br，2H)；3.19-3.50(m，4H)；1.73-1.93(m，2H)。
MS(ESI)[M-H]-＝397。
實(shí)施例化合物的制備通過Suzuki偶聯(lián)，根據(jù)通用程序GP1，由15-碘-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-4，4-二氧化物和相應(yīng)的硼酸頻哪酯制備下列實(shí)施例(實(shí)施例2-32)。對(duì)于實(shí)施例化合物1，使用市售的硼酸代替。











實(shí)施例331-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯基]-3-(3-乙基苯基)脲的制備

用3-乙基苯基異氰酸酯(1.2eq)和TEA(10eq)處理4-[4，4-二氧代-4λ6-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基]苯胺(中間體32)的DMF(4mL/mmol)溶液，在120℃回流攪拌7h。重復(fù)添加試劑，繼續(xù)在120℃攪拌直到TLC顯示反應(yīng)完全。將混合物真空濃縮，用水稀釋，再次蒸發(fā)。對(duì)粗殘留物進(jìn)行柱色譜法純化，然后在甲醇中研磨，以得到目標(biāo)化合物，收率28％。
1H-NMR(DMSO，400MHz)9.57(s，1H)；9.46(s br，1H)；8.75(s，1H)；8.61(s，1H)；7.72-7.80(m，2H)；7.53(d，2H)；7.38-7.43(m，1H)；7.24-7.35(m，6H)；7.18(t，1H)；6.92(t br，1H)；6.83(d，1H)；3.21-3.50(m，4H)；1.76-1.92(m，2H)。
MS(ESI)[M+H]+＝544。
使用前述方法或根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)程序能夠獲得下列實(shí)施例化合物



生物學(xué)實(shí)驗(yàn)1ELISA方法為了證明本發(fā)明化合物作為Tie2激酶和Tie2自身磷酸化抑制劑的高效活性，建立并使用下列ELISA方法。
這里通過已知技術(shù)，使用DHFR缺陷作為選擇標(biāo)記，用Tie2穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞培養(yǎng)物，通過血管生成素-2刺激培養(yǎng)基。采用三明治-ELISA(sandwich-ELISA)，使用抗Tie2抗體捕捉，使用偶聯(lián)至HRP的抗磷酸酪氨酸抗體作為檢測(cè)，從而定量Tie2受體的特異性自身磷酸化。
材料96孔組織培養(yǎng)平板，無菌，Greiner96孔FluoroNunc平板MaxiSorp Surface C，Nunc96孔聚丙烯平板，用于在DMSO中稀釋化合物CHO Tie2/DHFR(轉(zhuǎn)染細(xì)胞)PBS-；PBS++，DMSO有Glutamax-I、沒有核糖核苷和脫氧核糖核苷的MEMα培養(yǎng)基(Gibco#32561-029)，在透析！后具有10％FCS、和1％PenStrep裂解緩沖液1片“完全”蛋白酶抑制劑1蓋(cup)釩酸鹽(1mL＞40mg/mL；工作溶液2mM)添加50mL Duschl-PufferpH7.6抗TIE-II抗體1425稀釋于包被緩沖液pH9.6中貯備液1.275mg/mL＞工作溶液3μg/mLPBST2瓶PBS(10x)+10ml Tween，用VE-水填滿RotiBlock 1∶10稀釋于VE-水中抗磷酸酪氨酸HRP綴合物1∶10000稀釋于3％TopBlock中3％TopBlock的PBST溶液BM化學(xué)發(fā)光ELISA底物(POD)溶液B1∶100稀釋于溶液ASF9細(xì)胞培養(yǎng)基Ang2-Fc在SF9細(xì)胞培養(yǎng)基中細(xì)胞實(shí)驗(yàn)將5×104個(gè)細(xì)胞/孔/98μL分配在96孔組織培養(yǎng)平板中在37℃/5％CO2溫育在24h后，根據(jù)所需濃度添加化合物還向不含化合物的對(duì)照和刺激值添加2μL DMSO并且在室溫下混合幾分鐘向除對(duì)照外的所有孔添加100μL Ang2-Fc，對(duì)照接受昆蟲培養(yǎng)基在37℃溫育20min。
用3×PBS++洗滌添加100μl裂解緩沖液，在室溫下?lián)u動(dòng)幾分鐘在用于ELISA前，將裂解物貯存在20℃進(jìn)行三明治-ELISA用抗Tie2 Mab 1∶425的包被緩沖液pH9.6溶液包被96孔FluoroNunc平板MaxiSorp表面C；以100μL/孔在4℃過夜用PBST洗滌2次用250μL/孔R(shí)otiBlock 1∶10的VE-水溶液阻斷平板在室溫下溫育2h或者在4℃過夜，同時(shí)搖動(dòng)用PBST洗滌2次向孔中添加解凍的裂解物，在4℃溫育過夜，同時(shí)搖動(dòng)用PBST洗滌2次添加100μL/孔抗磷酸酪氨酸HRP綴合物1∶10000的3％TopBlock(3％TopBlock的PBST溶液)溶液，在搖動(dòng)下溫育過夜用PBST洗滌6次添加100μL/孔BM化學(xué)發(fā)光ELISA底物(POD)溶液1和2(1∶100)用LumiCount確定發(fā)光。
生物學(xué)實(shí)驗(yàn)2Tie-2激酶HTRF測(cè)定為了證明本發(fā)明化合物的效力，建立Tie-2激酶HTRF測(cè)定法。
Tie-2可將人造底物polyGAT(生物素化的(biotinylated)PolyGluAlaTyr)的酪氨酸殘基磷酸化。通過三聚檢測(cè)復(fù)合物特異性地檢測(cè)磷酸化產(chǎn)物，所述復(fù)合物由磷酸化底物、與生物素結(jié)合的鏈霉抗生物素-XLent(SA-XLent)、和與磷酸化酪氨酸結(jié)合的銪穴狀化合物標(biāo)記的抗磷酸酪氨酸抗體PT66組成。用337nm的光線激發(fā)銪熒光，導(dǎo)致發(fā)射620nm的長壽命(long lived)光線。在形成三聚檢測(cè)復(fù)合物的情況下，部分能量將被轉(zhuǎn)移到SA-XLent熒光團(tuán)，然后它本身發(fā)射665nm的長壽命光線(FRET熒光共振能量轉(zhuǎn)移)。未磷酸化的底物不會(huì)在665nm發(fā)射光線，因?yàn)椴荒苄纬赡軌虬l(fā)生FRET的三聚檢測(cè)復(fù)合物。在Packard Discovery或BMG Rubystar儀中進(jìn)行測(cè)量。A計(jì)數(shù)(665nm的發(fā)射)除以B計(jì)數(shù)(620nm的發(fā)射)，再乘以系數(shù)10000。將所得數(shù)字稱為樣品的“孔比”(well ratio)。
材料酶Tie-2激酶，室內(nèi)，貯存于-80℃的等份(12×10mL)，底物用生物素標(biāo)記的PolyGAT(1000μg/mL)；CIS Bio；#61GATBLB；貯存于-20℃的等份ATPAmersham Pharmacia Biotech Inc.#27-2056-01；100mM；貯存于-20℃抗體PT66-Eu穴狀化合物；CIS Bio；#61T66KLB；30μg/mL；貯存于-20℃的等份SA-Xlent；CIS Bio；#611SAXLB；1000μg/mL；貯存于-80℃的等份微平板384 Well black，SV，Greiner，#784076溶液測(cè)定緩沖液50mM HEPES(pH7.0)，25mM MgCl2，5mM MnCl2，1mM DTT，0.5mM Na3VO4，0.01％(v/v)NP40，1×完全不含EDTA酶工作溶液將Tie-2貯備溶液以1∶250稀釋到測(cè)定緩沖液中底物工作溶液將PolyGAT(1000μg/mL；36.23μM)以1∶90.6稀釋成400nM或77.3ng/孔，將ATP(100mM)以1∶5000稀釋成20.0μM。兩種稀釋均在測(cè)定緩沖液中進(jìn)行。最終測(cè)定濃度poly-GAT200nM或5.25μg/mL，ATP10μM(各1×Km)。
檢測(cè)溶液50mM HEPES(pH 7.0)，BSA 0.2％，0.6 M KF，200mMEDTA，PT66-銪穴狀化合物2.5ng/孔，SA-XLent Cis Bio 90ng/孔。
測(cè)定步驟所有步驟在20℃進(jìn)行1.0.75μL化合物溶液在30％(v/v)DMSO中2.添加7μL底物工作溶液3.添加7μL酶工作溶液4.溫育75min(反應(yīng)體積14.75μL)5.添加8μL檢測(cè)溶液6.溫育180min或在4℃過夜(總體積22.75μL)7.在Packard Discovery或BMG Rubystar儀中測(cè)定HTRF(延遲50μs，積分時(shí)間400μs)最終濃度(在14.75μL反應(yīng)體積中)酶未知polyGAT(1×Km)200nM(77.3ng)ATP(1×Km)10μMDMSO1.5％(v/v)緩沖液條件50mM HEPES(pH7.0)，25mM MgCl2，5mM MnCl2，1mM DTT，0.5mM NaVO4，0.01％(v/v)NP40，1×完全對(duì)照C0未抑制的反應(yīng)(僅DMSO)Ci用20μM星形孢菌素抑制反應(yīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)3增殖實(shí)驗(yàn)為了檢查細(xì)胞毒性，建立細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)。
使用細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驒z查不同腫瘤細(xì)胞系(例如Du 145)。以2.000細(xì)胞/100μL培養(yǎng)基/孔(96孔平板)的細(xì)胞密度將細(xì)胞分配到RPMI 1640培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基補(bǔ)充有10％(v/v)胎牛血清和1％(v/v)青霉素/鏈霉素溶液。在三小時(shí)后，用PBS(包含鈣和鎂)洗滌細(xì)胞。添加具有0.1％(v/v)胎牛血清的100μl上述培養(yǎng)基，在37℃和5％CO2氣氛中培養(yǎng)。第二天，添加在DMSO中稀釋到適當(dāng)濃度的本發(fā)明化合物和具有0.5％(v/v)胎牛血清的另外100μL培養(yǎng)基。在5天后，用PBS洗滌在37℃和5％CO2氣氛中培養(yǎng)的細(xì)胞。添加20μL戊二醛溶液(11％(v/v))，將細(xì)胞在室溫下輕微搖動(dòng)15min。然后將細(xì)胞洗滌3次，在空氣中干燥。添加100μL結(jié)晶紫溶液(0.1％pH3.5)，將細(xì)胞搖動(dòng)30min。用自來水洗滌細(xì)胞并風(fēng)干。強(qiáng)力搖動(dòng)5min，用100μL乙酸(10％(v/v))溶解顏色。在595nm波長處測(cè)定吸收。
生物學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示，如用ELISA方法所測(cè)量的，本申請(qǐng)?zhí)岢龅幕衔镒鳛門ie2激酶和Tie2自身磷酸化的抑制劑具有高效活性。其IC50值低于1μM。同時(shí)，所述化合物的毒性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于1μM，這與該結(jié)構(gòu)類別的其它化合物不同，其它化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞系的毒性很高，以至于觀察到IC50值低于1μM。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的某些化合物是Tie2的有效抑制劑。更具體地，在Tie2激酶測(cè)定或在Tie2自身磷酸化ELISA測(cè)定中，所合成的實(shí)施例化合物1、2、3、8、9、10和23全部(throughout)抑制Tie2，其IC50值為1μM或更低。盡管具有對(duì)抗Tie2激酶活性的高抑制力，但已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的某些化合物具有特別弱的細(xì)胞毒性或沒有細(xì)胞毒性。
生物學(xué)實(shí)驗(yàn)4未預(yù)先活化激酶的Tie-2激酶測(cè)定使用GST的重組融合蛋白和在昆蟲細(xì)胞(Hi-5)中表達(dá)并通過谷胱甘肽-瓊脂糖親和色譜純化的Tie-2細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域作為激酶?；蛘?，可能使用市售GST-Tie2融合蛋白(Upstate Biotechnology，Dundee，Scotland)。作為激酶反應(yīng)的底物，使用生物素化的肽生物素-Ahx-EPKDDAYPLYSDFG(酰胺形式的C-末端)，它可以從例如Biosynthan GmbH公司(Berlin-Buch，Germany)購得。
在10μM三磷酸腺苷(ATP)和1μM底物肽(生物素-Ahx-EPKDDAYPLYSDFG-NH2)存在的情況下，用受試化合物在5μl測(cè)定緩沖液[50mM Hepes/NaOH pH7，10mM MgCl2，0.5mM MnCl2，1.0mM二硫蘇糖醇，0.01％NP40，蛋白酶抑制劑混合物(來自Roche的“完全w/oEDTA”，1片/2.5ml)，1％(v/v)二甲基亞砜]中的不同濃度溶液(0μM，以及在0.001-20μM范圍內(nèi)的濃度)將Tie-2(3.5ng/測(cè)量點(diǎn))在22℃溫育60min。通過添加包含EDTA(90mM)、HTRF(均相時(shí)間分辨熒光)檢測(cè)試劑鏈霉抗生物素-XLent(0.2μM，來自Cis Biointernational，Marcoule，F(xiàn)rance)和PT66-Eu螯合物(0.3ng/μl；來自Perkin Elmer的銪螯合物標(biāo)記的抗磷酸-酪氨酸抗體)的5μl水性緩沖液(25mM Hepes/NaOH pH7.5，0.28％(w/v)牛血清白蛋白)終止反應(yīng)。
將所得混合物在22℃溫育1h，以允許生物素化的磷酸化肽與鏈霉抗生物素-XLent和PT66-Eu螯合物結(jié)合。然后通過測(cè)量從PT66-Eu螯合物到鏈霉抗生物素-XLent的共振能量轉(zhuǎn)移，評(píng)價(jià)磷酸化底物肽的量。因此，在HTRF讀取器，例如Rubystar(BMG Labtechnologies，Offenburg，Germany)或Viewlux(Perkin-Elmer)中，測(cè)量以350nm激發(fā)后的620nm和665nm熒光發(fā)射。將665nm和622nm處的發(fā)射比作為磷酸化底物肽的量的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)。將所得數(shù)據(jù)歸一化(沒有抑制劑的酶反應(yīng)＝0％抑制，除酶以外的所有其它實(shí)驗(yàn)組分＝100％抑制)，使用固有軟件，通過4參數(shù)擬合計(jì)算IC50值。
生物學(xué)實(shí)驗(yàn)5預(yù)先活化激酶的Tie-2激酶測(cè)定使用GST的重組融合蛋白和在昆蟲細(xì)胞(Hi-5)中表達(dá)并通過谷胱甘肽-瓊脂糖親和色譜純化的Tie-2細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域作為激酶。作為激酶反應(yīng)的底物，使用生物素化的肽生物素-Ahx-EPKDDAYPLYSDFG(酰胺形式的C-末端)，它可以從例如Biosynthan GmbH公司(Berlin-Buch，Germany)購得。
對(duì)于活化，在22℃，在250μM三磷酸腺苷(ATP)存在的情況下，以12.5ng/μl的濃度將Tie-2在測(cè)定緩沖液[50mM Hepes/NaOH pH7，10mMMgCl2，0.5mM MnCl2，1.0mM二硫蘇糖醇，0.01％NP40，蛋白酶抑制劑混合物(來自Roche的“完全w/o EDTA”，1片/2.5ml)]中溫育20min。
對(duì)于隨后的激酶反應(yīng)，在10μM三磷酸腺苷(ATP)和1μM底物肽(生物素-Ahx-EPKDDAYPLYSDFG-NH2)存在的情況下，用受試化合物在5μl測(cè)定緩沖液[50mM Hepes/NaOH pH7，10mM MgCl2，0.5mM MnCl2，0.1mM原釩酸鈉，1.0mM二硫蘇糖醇，0.01％NP40，蛋白酶抑制劑混合物(來自Roche的“完全w/o EDTA”，1塊/2.5ml)，1％(v/v)二甲基亞砜]中的不同濃度溶液(0μM，濃度范圍為0.001-20μM)將預(yù)先活化的Tie-2(0.5ng/測(cè)量點(diǎn))在22℃溫育20min。通過添加包含EDTA(90mM)、HTRF(均相時(shí)間分辨熒光)檢測(cè)試劑鏈霉抗生物素-XLent(0.2μM，來自CisBiointernational，Marcoule，F(xiàn)rance)和PT66-Eu螯合物(0.3ng/μl；來自Perkin Elmer的銪螯合物標(biāo)記的抗磷酸-酪氨酸抗體)的5μl水性緩沖液(25mM Hepes/NaOH pH7.5，0.28％(w/v)牛血清白蛋白)終止反應(yīng)。
將所得混合物在22℃溫育1h，以允許生物素化的磷酸化肽與鏈霉抗生物素-XLent和PT66-Eu螯合物結(jié)合。然后通過測(cè)量從PT66-Eu螯合物到鏈霉抗生物素-XLent的共振能量轉(zhuǎn)移，評(píng)價(jià)磷酸化底物肽的量。因此，在HTRF讀取器，例如Rubystar(BMG Labtechnologies，Offenburg，Germany)或Viewlux(Perkin-Elmer)中，測(cè)量以350nm激發(fā)后的620nm和665nm熒光發(fā)射。將665nm和622nm處的發(fā)射比作為磷酸化底物肽的量的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)。將所得數(shù)據(jù)歸一化(沒有抑制劑的酶反應(yīng)＝0％抑制，除酶以外的所有其它實(shí)驗(yàn)組分＝100％抑制)，使用固有軟件，通過4參數(shù)擬合計(jì)算IC50值。
因此本發(fā)明的化合物作為抗血管發(fā)生抑制劑具有有益的活性，而且不是可直接影響腫瘤細(xì)胞和其它增殖組織細(xì)胞的細(xì)胞抑制劑或細(xì)胞毒性劑。
權(quán)利要求
1.一種通式I的化合物及其溶劑化物、水合物、N-氧化物、異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體和鹽 其中A為亞苯基或C6-亞雜芳基；Z優(yōu)選選自O(shè)、S、NR3和CHR3；R1、R2和R3相同或不同，優(yōu)選分別獨(dú)立地選自氫和-C1-C10-烷基，其中-C1-C10-烷基是未取代或被羥基單取代或多取代的；R4優(yōu)選選自氫、鹵素、硝基、氨基、氰基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷氧基、-NH-C1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-(CH2)p-COR5、-(CH2)p-NHCOR5、-(CH2)p-NH-CO-NR5R6、-(CH2)p-NHS(O)2R5、-(CH2)p-CO-NR5R6和-O-(CH2)p-COR5；X為鍵或亞甲基；Y優(yōu)選選自亞甲二氧基苯基、亞乙二氧基苯基、-亞苯基-D-NH-COR5、-亞苯基-D-NH-CONR5R6、-亞苯基-D-NH-S(O)2R5、-亞苯基-D-O-(CH2)p-COR5、-亞苯基-D-O-(CH2)p-R7、-N-(R5-G)-哌嗪-N’-基甲基、-N-(R7-SO2-)-哌嗪N’-基、-氧-C6-C18-芳基、-氧-C5-C18-雜芳基、-氧-(CH2)n-NH-COR5、-氧-(CH2)n-NH-CONR5R6、-氧-(CH2)n-NH-S(O)2R5、-NH-(CH2)n-NH-COR5、-NH-(CH2)n-NH-CONR5R6、-NH-(CH2)n-NH-S(O)2R5和-亞苯基-NH-E-CONR5R6，其中亞苯基是未取代的或分別獨(dú)立地被羥基、鹵素、硝基、氰基、羧基、氨基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷氧基、-NH-C1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-C1-C6-鹵代烷基、-C1-C6-鹵代烷氧基、-C1-C6-烷硫基和/或-C1-C6-烷基羰基單取代或多取代；并且其中-氧-C6-C18-芳基和-氧-C5-C18-雜芳基是未取代的或分別獨(dú)立地被羥基、鹵素、硝基、氰基、羧基、氨基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷氧基、NH-C1-C6-烷基、N(C1-C6-烷基)2、-C1-C6-鹵代烷基、C1-C6-鹵代烷氧基、C1-C6-烷硫基、C1-C6-烷基羰基、-NH-S(O)2-R5、-NH-COR5、-NHCONR5R6、-O-(CH2)p-COR5和/或-O-(CH2)p-R5單取代或多取代；D為鍵、亞甲基或亞乙基；E為-CR8R9-，其中R8和R9相同或不同，優(yōu)選分別獨(dú)立地選自氫和甲基；或者R8和R9一起形成3-至10-元亞甲基鏈，其中至多兩個(gè)亞甲基任選地被O、S和/或NR1代替；G為-S(O)2-、-CONH-、或-C＝O；R5優(yōu)選選自氫和選自-C1-C6-烷基、-C2-C6-烯基、-C2-C6-炔基、-C3-C8-環(huán)烷基、-(CH2)p-C6-C11-芳基和-(CH2)p-C5-C10-雜芳基的殘基，其中所述殘基是未取代的或者分別獨(dú)立地被羥基、鹵素、硝基、氰基、羧基、氨基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烯基、-C1-C6-炔基、-C1-C6-烷氧基、-NH-C1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-C1-C6-鹵代烷基、-C1-C6-鹵代烷氧基、-C1-C6-烷硫基、-S(O)-C1-C6-烷基、-S(O)2-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷基羰基、苯基、苯氧基和/或吡啶基單取代或多取代，其中-C3-C8-環(huán)烷基的C-骨架的C原子是未中斷的或者被氮原子、氧原子、硫原子和/或一個(gè)或多個(gè)C＝O部分單次或多次中斷，和/或其中一個(gè)或多個(gè)雙鍵可以包含在所述C-骨架中；或者R5和R6一起形成3-至10-元亞甲基鏈，其中至多兩個(gè)亞甲基可以被O、S和/或-NR1代替；R6為氫或-C1-C10-烷基，或者R5和R6一起形成3-至10-元亞甲基鏈，其中至多兩個(gè)亞甲基可以被O、S和/或-NR1代替；R7為-C6-C11-芳基或-C5-C10-雜芳基，其中-C6-C11-芳基或-C5-C10-雜芳基是未取代的或者被羥基、鹵素、硝基、氰基、羧基、氨基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷氧基、-NH-C1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-C1-C6-鹵代烷基、-C1-C6-鹵代烷氧基、-C1-C6-烷硫基、-S(O)-C1-C6-烷基、-S(O)2-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷基羰基、苯基、苯氧基和/或吡啶基單取代或多取代；m為3至6；n為2或3；p為0至2。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中A為亞苯基；R1、R2和R3相同或不同，優(yōu)選分別獨(dú)立地選自氫和-C1-C10-烷基，其中-C1-C10-烷基是未取代的或被羥基單取代或多取代；Z為-NR3；和m為3。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中A為亞苯基，R1和R2為氫原子，Z為NH，和R4為氫原子。
4.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為亞甲二氧基苯基或亞乙二氧基苯基。
5.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-亞苯基-D-NH-COR5。
6.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-亞苯基-D-NH-CONR5R6。
7.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-亞苯基-D-NH-S(O)2R5。
8.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-亞苯基-D-O-(CH2)p-COR5。
9.權(quán)利要求7的化合物，其中D為鍵或亞甲基。
10.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-亞苯基-NH-E-CONR5R6。
11.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-氧-C6-C18-芳基，其中-氧-C6-C18-芳基是未取代的或分別獨(dú)立地被羥基、鹵素、硝基、氰基、羧基、氨基、-C1-C6-烷基、-C1-C6-烷氧基、-NH-C1-C6-烷基、-N(C1-C6-烷基)2、-C1-C6-鹵代烷基、-C1-C6-鹵代烷氧基、-C1-C6-烷硫基、-C1-C6-烷基羰基、-NH-S(O)2-R5、-NH-COR5、-NHCONR5R6、-O-(CH2)p-COR5和/或-O-(CH2)p-R5單取代或多取代。
12.權(quán)利要求1 1的化合物，其中-C6-C18-芳基為苯基。
13.權(quán)利要求11或12的化合物，其中苯基被-NH-COR5或-NH-CONHR5取代。
14.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵或亞甲基，和Y為-N-(R5-G)-哌嗪-N’-基甲基。
15.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵或亞甲基，和Y為-N-(R7-SO2)-哌嗪-N’-基。
16.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-氧-(CH2)n-NH-COR5。
17.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-氧-(CH2)n-NH-CONR5R6。
18.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-氧-(CH2)n-NH-S(O)2R5。
19.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-NH-(CH2)n-NH-COR5。
20.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-NH-(CH2)n-NH-CONR5R6。
21.權(quán)利要求1、2或3之一的化合物，其中X為鍵，和Y為-NH-(CH2)n-NH-S(O)2R5。
22.權(quán)利要求1或2之一的化合物，選自15-(1，3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phane 4，4-二氧化物；2-[4-[4，4-二氧代-4λ6-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基]苯氧基]-1-(4-氟苯基)-乙酮；2-[4-[4，4-二氧代-4λ6-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基]苯氧基]-1-苯基乙酮；2-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯氧基]-1-(4-甲氧基苯基)-乙-1-酮；1-(4-氯苯基)-2-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯氧基]-乙-1-酮；2-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯氧基]-1-(4-甲基苯基)-乙-1-酮；1-(2，4-二甲基苯基)-2-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯氧基]-乙-1-酮；N-[4-[4，4-二氧代-4λ6-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基]苯基]-N’-苯基脲；N-[4-[4，4-二氧代-4λ6-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基]苯基]-N’-[3-(三氟甲基)-苯基]脲；N-[4-[4，4-二氧代-4λ6-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基]苯基]-N’-[2-氟-5-(三氟甲基)-苯基]脲；1-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯基]-3-(4-甲氧基苯基)-脲；1-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)-2-氟苯基]-3-[2-氟-5-(三氟甲基)-苯基]脲；1-[3-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯基]-3-苯基脲；1-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]-3-苯基脲；1-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]-3-(4-甲氧基苯基)-脲；1-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]-3-[3-(三氟甲基)-苯基]脲；1-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]-3-[2-氟-5-(三氟甲基)-苯基]脲；1-[3-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]-3-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]脲；1-[3-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]-3-苯基脲；N-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯基]苯磺酰胺；2，3-二氯-N-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯基]苯磺酰胺；2，3-二氯-N-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)-2-氟苯基]-苯磺酰胺；N-[4-[4，4-二氧代-4λ6-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基]苯基]-4-甲氧基苯磺酰胺；N-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]苯磺酰胺；N-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]-4-甲氧基苯磺酰胺；2，3-二氯-N-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-密啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]苯磺酰胺；N-[3-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]苯磺酰胺；N-[3-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]-4-甲氧基苯磺酰胺；2，3-二氯-N-[3-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]苯磺酰胺；N-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯基]-1-苯基環(huán)丙烷羧酰胺；N-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)芐基]-1-苯基環(huán)丙烷羧酰胺；N-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯基]-2-苯基-異丁酰胺；和1-[4-(4，4-二氧代-4-硫雜-2，5，9-三氮雜-1(2，4)-嘧啶雜-3(1，3)-苯雜環(huán)壬phan-15-基)苯基]-3-(3-乙基苯基)脲。
22.一種用于制備權(quán)利要求1-21之一的化合物的方法，其中所述方法包括下列方法步驟 其中大環(huán)A中的R1、R2、R4、A、Z和m具有與式I中相同的意義，其中在式I中X為鍵，Y選自具有上述意義的-亞苯基-D-NH-COR5、-亞苯基-D-NH-CONR5R6、-亞苯基-D-NH-S(O)2R5、-亞苯基-D-O-(CH2)p-COR5、-氧-C6-C11-芳基、或-氧-C5-C10-雜芳基。
23.一種用于制備權(quán)利要求1-21之一的化合物的方法，其中所述方法包括下列方法步驟 其中大環(huán)A中的R1、R2、R4、A、Z和m具有與式I中相同的意義，其中在式I中X為鍵，Y選自具有上述意義的-NH-(CH2)n-COR5-、-NH-(CH2)n-CONR5R6、或-NH-(CH2)n-S(O)2R5。
24.一種藥物組合物，其包括權(quán)利要求1至21之一的式I化合物、或其藥物學(xué)可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯、以及藥物學(xué)可接受的稀釋劑或載體。
25.權(quán)利要求1至21之一的化合物在制備用于治療血管生長調(diào)節(jié)異常疾病或伴有血管生長調(diào)節(jié)異常的疾病的藥物組合物中的應(yīng)用。
26.權(quán)利要求25的應(yīng)用，其中所述疾病為視網(wǎng)膜病、其它血管發(fā)生依賴性眼病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、以及與血管發(fā)生相關(guān)的其它炎癥疾病。
27.權(quán)利要求26的應(yīng)用，其中所述血管發(fā)生依賴性眼病為角膜移植排斥、年齡相關(guān)的黃斑變性。
28.權(quán)利要求26的應(yīng)用，其中所述與血管發(fā)生相關(guān)的炎癥疾病為銀屑病、遲發(fā)型超敏反應(yīng)、接觸性皮炎、哮喘、多發(fā)性硬化、動(dòng)脈再狹窄、肺動(dòng)脈高壓、中風(fēng)、和腸病。
29.權(quán)利要求25的應(yīng)用，其中所述疾病為冠狀動(dòng)脈和外周動(dòng)脈疾病。
30.權(quán)利要求25的應(yīng)用，其中所述疾病為腹水、水腫，如腦瘤相關(guān)的水腫、高原創(chuàng)傷、缺氧誘導(dǎo)的腦水腫、肺水腫和黃斑水腫或燒傷和外傷后的水腫、慢性肺病、成人型呼吸窘迫綜合征、骨再吸收和良性增殖疾病如肌瘤、良性前列腺增生和用于傷口愈合以減少疤痕形成、減少受損神經(jīng)再生過程中的疤痕形成、子宮內(nèi)膜異位、先兆子癇、絕經(jīng)后出血和卵巢過度刺激。
31.權(quán)利要求25的應(yīng)用，其中所述疾病為實(shí)體瘤和/或其轉(zhuǎn)移。
32.權(quán)利要求1至12之一的式(I)化合物，其用作激酶Tie-2的抑制劑。
33.一種通過使用權(quán)利要求1至21之一的化合物來治療血管生長調(diào)節(jié)異常疾病或伴有血管生長調(diào)節(jié)異常的疾病的方法。
34.權(quán)利要求33的方法，其中所述疾病為視網(wǎng)膜病、其它血管發(fā)生依賴性眼病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、以及與血管發(fā)生相關(guān)的其它炎癥疾病。
35.權(quán)利要求34的方法，其中所述血管發(fā)生依賴性眼病為角膜移植排斥、年齡相關(guān)的黃斑變性。
36.權(quán)利要求34的方法，其中所述與血管發(fā)生相關(guān)的炎癥疾病為銀屑病、遲發(fā)型超敏反應(yīng)、接觸性皮炎、哮喘、多發(fā)性硬化、動(dòng)脈再狹窄、肺動(dòng)脈高壓、中風(fēng)、和腸病。
37.權(quán)利要求33的方法，其中所述疾病為冠狀動(dòng)脈和外周動(dòng)脈疾病。
38.權(quán)利要求33的方法，其中所述疾病為腹水、水腫，如腦瘤相關(guān)的水腫、高原創(chuàng)傷、缺氧誘導(dǎo)的腦水腫、肺水腫和黃斑水腫或燒傷和外傷后的水腫、慢性肺病、成人型呼吸窘迫綜合征、骨再吸收和良性增殖疾病如肌瘤、良性前列腺增生和用于傷口愈合以減少疤痕形成、減少受損神經(jīng)再生過程中的疤痕形成、子宮內(nèi)膜異位、先兆子癇、絕經(jīng)后出血和卵巢過度刺激。
39.權(quán)利要求33的方法，其中所述疾病為實(shí)體瘤和/或其轉(zhuǎn)移。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式I的磺酰氨基大環(huán)及其鹽、包括所述磺酰氨基大環(huán)的藥物組合物和制備磺酰氨基大環(huán)的方法及其應(yīng)用，用于制備藥物組合物來治療血管生長調(diào)節(jié)異常疾病或伴有血管生長調(diào)節(jié)異常的疾病，其中所述化合物可有效干擾血管生成素并因此影響Tie2信號(hào)。其中R
文檔編號(hào)A61P35/00GK101087797SQ200580044293
公開日2007年12月12日 申請(qǐng)日期2005年12月19日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月22日
發(fā)明者G·克特紹, H·布里姆, I·哈通, U·呂金, M·舍費(fèi)爾, K·蒂勞赫, W·施韋德, M·胡澤曼 申請(qǐng)人:拜耳先靈醫(yī)藥股份有限公司