專利名稱：含有免疫球蛋白和低聚糖的營養(yǎng)組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療腸道和/或呼吸道感染的方法，所述方法包括給予一種含有抗體和不可消化低聚糖的營養(yǎng)組合物。
背景技術(shù)：
呼吸道和腸道是發(fā)生病原體感染的常見位置。盡管宿主生物通常具有功能性免疫系統(tǒng)，但由于呼吸道和腸道直接與物理環(huán)境接觸并暴露于可例如通過接觸、空氣和食物傳播的病原微生物(例如病毒、細菌、原生動物、真菌等)中，因此呼吸道和腸道經(jīng)常被感染。有多種能導(dǎo)致嬰兒和其他個體的疾病的微生物。對于免疫系統(tǒng)受到損害的個體來說，發(fā)生感染和嚴重疾病的危險性更大。
呼吸道合胞體病毒(RSV)是導(dǎo)致嬰兒和兒童嚴重的下呼吸道疾病的主要原因。原發(fā)RSV感染通常發(fā)生在6周至2歲的兒童身上。據(jù)估計RSV導(dǎo)致了多達75％的兒童細支氣管炎和多達40％的兒童肺炎。RSV感染危險性較高的兒童包括早產(chǎn)兒和患有支氣管肺發(fā)育異常、先天性心臟病、先天性免疫缺陷或獲得性免疫缺陷以及纖維囊泡癥的兒童?；加行呐K或肺部疾病并由于RSV感染而住院的嬰兒的死亡率為3％-4％。對于確診的RSV疾病，可選擇的治療方法很有限。下呼吸道的嚴重RSV疾病通常需要相當(dāng)多的支持療法，包括給予增濕氧氣以及呼吸輔助。
流行病學(xué)研究也表明，12歲及12歲以下的兒童中哮喘和過敏的發(fā)病率，對于嬰兒時期曾因為RSV感染而住院的兒童而言相當(dāng)高。
急性中耳炎(AOM)是醫(yī)師辦公室中對1-4歲的兒童最常見的診斷結(jié)果。鼻咽中病毒的存在與中耳炎的發(fā)生有很大關(guān)系；已使用敏感分子試驗方法(sensitive molecular testing method)(例如PCR)在多達90％的病例中檢出呼吸道病毒。最常見的是RSV、腺病毒和流感病毒；RSV在中耳液的病毒分離物中占據(jù)了10-70％。在對患有細支氣管炎的2-24個月大的嬰兒進行的研究中發(fā)現(xiàn)，其中的86％患有AOM；從71％的患者身上分離出了RSV。在多數(shù)病例中，鼻咽部和遠端管(distal tube)的病毒感染導(dǎo)致咽鼓管機能障礙，從而導(dǎo)致暫時性中耳負壓，因此促成繼發(fā)性病毒性或細菌性中耳炎。RSV-細菌混合感染中涉及的最常見的細菌是肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae)和流感嗜血桿菌(Haemophilus influenzae)。此外，有證據(jù)表明，感染了RSV的中耳中促炎細胞因子和細胞黏附分子合成的增加可能促進中耳炎的炎癥進程。
RSV在老年人中也很普遍，并常伴隨有流感，是導(dǎo)致死亡的一大原因，然而，目前為止還沒有可預(yù)防由RSV導(dǎo)致的死亡的疫苗。
輪狀病毒感染可導(dǎo)致腸胃炎。它經(jīng)常感染嬰兒和幼兒。對于3個月至2歲大的兒童，輪狀病毒是導(dǎo)致腹瀉和住院的最常見原因之一。輪狀病毒在冬季月份中導(dǎo)致腹瀉的爆發(fā)，這對于兒童保健中心和兒童醫(yī)院來說特別成問題。幾乎所有兒童在3歲之前都曾感染過輪狀病毒。被感染的嬰兒可能會經(jīng)歷一系列癥狀，包括嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、脫水和疼痛以至于更嚴重的長期并發(fā)癥，例如乳糖吸收不良、碳水化合物不耐受、早發(fā)性蛋白質(zhì)不耐受以及對其他感染的敏感性增加。在公共衛(wèi)生系統(tǒng)不完善的國家，輪狀病毒是嬰兒死亡的主要原因。
已經(jīng)證實呼吸道和腸道感染的預(yù)防是很困難的，只有極少的疫苗能夠預(yù)防呼吸道或腸道感染，特別是與RSV和輪狀病毒相關(guān)的上述感染。嘗試通過定期進行單克隆抗體的肌內(nèi)注射以使RSV致死危險性較高的嬰兒預(yù)防RSV感染。所述單克隆抗體具有使具危險性的兒童出現(xiàn)嚴重RSV病例的發(fā)生率降低的效果。但是該方法具有高度侵害性，價格非常昂貴，并且只對一小部分具有RSV感染危險性和患有RSV感染導(dǎo)致的疾病的人起作用。
母乳喂養(yǎng)的嬰兒患呼吸道和腸道感染的幾率較小，嚴重性較低。本領(lǐng)域中目前認為該幾率和嚴重性的降低一部分是由于母乳中含有具有使病毒和/或其他微生物失效的活性的免疫球蛋白。
腸道和呼吸道感染通常難以治療。多數(shù)情況下只能進行緩和療法。對輪狀病毒感染的治療局限于口服補液和/或靜脈補液。對于呼吸道感染只有少數(shù)有效藥物可用，并且治療通常需要將藥物進行肺部給藥。對于較幼小的嬰兒這會導(dǎo)致強烈的應(yīng)激性。因此需要更有效的藥劑，并且優(yōu)選其給藥對嬰兒和兒童不產(chǎn)生應(yīng)激性或至少應(yīng)激性較小。
一些通過腸道和/或呼吸道進入體內(nèi)的病原體與全身性疾病相關(guān)。例如，皰疹病毒可首先通過呼吸道進入，然后侵入并在停留在體內(nèi)的其他部位，隨著時間延長導(dǎo)致疾病。
WO 9613271記載了一種改善腸胃健康的組合物，含有有效量的有益的人類腸道微生物和有效量的免疫球蛋白組合物，所述免疫球蛋白組合物含有濃縮的具有免疫活性的免疫球蛋白。另一種可恢復(fù)和保持胃腸健康的組合物含有40-60重量％的免疫球蛋白組合物和40-60％重量的可溶膳食纖維，所述免疫球蛋白組合物含有濃縮的具有免疫活性的免疫球蛋白，所述可溶膳食纖維選自菊粉、低聚果糖、果膠、瓜爾膠及其混合物。

發(fā)明內(nèi)容
在多中心臨床試驗中，本發(fā)明人驚訝地發(fā)現(xiàn)，向嬰兒腸內(nèi)給予含有半乳寡聚糖的營養(yǎng)組合物可用于降低感染的幾率和/或嚴重性，特別是對于呼吸道感染。在此之前沒有對含有半乳糖的可溶膳食纖維——例如半乳寡聚糖(GOS)——的抗感染效果進行過記載。
此外，本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)半乳寡聚糖能夠激發(fā)免疫系統(tǒng)。從這樣的現(xiàn)象中得出了以下假設(shè)，即含有半乳糖的益生元成分所具有的減少感染的特性是免疫應(yīng)答提高和腸內(nèi)微生物區(qū)系的正刺激(positivestimulation)相結(jié)合的結(jié)果。
這些對含半乳糖的低聚糖的作用機制的理解使得可以進一步改善嬰兒營養(yǎng)物，并且使得開發(fā)出減少感染的本發(fā)明組合物和本發(fā)明方法。
本發(fā)明提供一種包括含半乳糖的益生元成分和一種或多種免疫球蛋白的組合物，所述免疫球蛋白具有抵抗一種或多種病原微生物的活性，所述病原微生物例如一種或多種致病病毒、細菌、真菌等。優(yōu)選從經(jīng)過抗原處理的哺乳動物所產(chǎn)生的初乳或乳汁中獲得免疫球蛋白，所述哺乳動物例如對一種或多種人類病原體高度免疫的奶牛。
特別地，GOS的免疫激發(fā)作用與免疫球蛋白的使呼吸道病毒失效作用的結(jié)合提供了一種用于治療和預(yù)防病毒導(dǎo)致的呼吸道感染的有利結(jié)合。
在另一種優(yōu)選的實施方案中，GOS的雙歧桿菌激發(fā)作用、免疫激發(fā)作用和免疫球蛋白的使病毒失效作用的結(jié)合對于治療和/或預(yù)防腸道感染例如輪狀病毒感染特別有效。
低聚糖和(一種或多種)特異性免疫球蛋白協(xié)同作用?？馆啝畈《镜拿庖咔虻鞍着c輪狀病毒結(jié)合，然后腸道免疫系統(tǒng)使之失效。
低聚糖激發(fā)雙歧桿菌的生長，從而減少輪狀病毒的感染。此外，低聚糖還能夠在輪狀病毒感染期間和感染之后激發(fā)正常的腸內(nèi)微生物區(qū)系的重建。這樣可以降低腹瀉的嚴重性并縮短其持續(xù)時間，并減少被病原體重新感染的幾率。此外，可將兩種成分結(jié)合用于嬰兒營養(yǎng)物中，使得不必再介入其他手段。
在另一種優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明涉及一種或多種免疫球蛋白、含半乳糖的低聚糖和酸性低聚糖的結(jié)合物。酸性低聚糖可防止病原體附著在上皮細胞上，從而進一步降低感染(降低感染和/或再感染的幾率和/或嚴重性)。
在一種特別有效的實施方案中，本發(fā)明提供一種包括含半乳糖的低聚糖、具有使呼吸道病毒失效的活性的免疫球蛋白和具有使腸道病毒失效的活性的免疫球蛋白的組合物?？赏ㄟ^使奶牛對上述兩種病毒高度免疫并將其乳房分泌產(chǎn)物與含半乳糖的低聚糖結(jié)合而容易地制得本發(fā)明的組合物。
本發(fā)明的組合物對于預(yù)防和降低嬰兒的感染特別有效，并且無需通過活性疫苗的方式注射或口服多種抗原、或者注射單克隆抗體。實際上，本發(fā)明組合物優(yōu)選口服，并且可以作為食物或藥用制劑給予，優(yōu)選本發(fā)明組合物包括在食物組合物中。
具體實施例方式
本發(fā)明一方面提供一種治療和/或預(yù)防感染的方法，所述方法包括給予一種組合物，該組合物包括含有至少兩個末端糖單元的、含有半乳糖的不可消化低聚糖，其中至少一個末端糖單元選自葡萄糖和半乳糖，并且至少一個末端糖選自半乳糖和巖藻糖；以及具有抵抗一種或多種病原微生物的活性的免疫球蛋白。
本發(fā)明另一方面提供一種適用于治療和/或預(yù)防感染或疾病的組合物，所述組合物包括含有至少兩個末端糖單元的、含有半乳糖的不可消化低聚糖，其中至少一個末端糖單元選自葡萄糖和半乳糖，并且至少一個末端糖選自半乳糖和巖藻糖；以及具有抵抗病原微生物的活性的免疫球蛋白。
低聚糖本發(fā)明包括給予含有至少兩個末端糖單元的、含有半乳糖的不可消化低聚糖(GAL-oligo)，其中至少一個末端糖單元選自葡萄糖和半乳糖，并且至少一個末端糖選自半乳糖和巖藻糖。GAL-oligo中的糖優(yōu)選為β連接。
術(shù)語“末端糖”指連接到另一個糖單元上的糖(例如半乳糖、葡萄糖、果糖或巖藻糖)。本發(fā)明的GAL-oligo優(yōu)選含有不超過4個末端糖，優(yōu)選不超過2個。
本發(fā)明中使用的術(shù)語“不可消化低聚糖”指不能在腸道中在存在于人上消化道中(小腸和胃)的酸或消化酶的作用下消化或只能部分地消化的、但可被人腸內(nèi)微生物區(qū)系發(fā)酵的糖。
在一種優(yōu)選的實施方案中，GAL-oligo含有至少一個末端半乳糖、和一個至少選自末端葡萄糖和一個末端巖藻糖的糖。更優(yōu)選地，本發(fā)明的含半乳糖的不可消化低聚糖包括至少一個末端半乳糖和至少一個末端葡萄糖。優(yōu)選低聚糖由兩個末端糖單元和總共2至60個糖單元組成。
優(yōu)選GAL-oligo選自反式半乳寡聚糖、半乳寡聚糖、乳糖-N-四糖(LNT)、乳糖-N-新四糖(neo-LNT)、巖藻糖基乳糖、巖藻糖基化LNT和巖藻糖基化neo-LNT。在一種特別優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的方法包括給予反式半乳寡聚糖([半乳糖]n-葡萄糖；其中n為1至60之間的整數(shù)，即2、3、4、5、6......59、60；優(yōu)選n選自2、3、4、5、6、7、8、9或10)。反式半乳寡聚糖(TOS)為例如商標(biāo)為VivinalTM的市售產(chǎn)品(Borculo Domo Ingredients，荷蘭)。優(yōu)選反式半乳寡聚糖中的糖為β連接。
本發(fā)明的組合物可為粉末形式或液體形式。本發(fā)明組合物優(yōu)選每100克干重組合物包括0.1至12克GAL-oligo，優(yōu)選0.5至8克，更優(yōu)選1.0至7.5克。將粉末復(fù)原為液體形式并將該液體配方物給予嬰兒后，該劑量的GAL-oligo可產(chǎn)生所需的效果而不會導(dǎo)致腸部不適。
免疫球蛋白本發(fā)明組合物含有至少一種具有使一種或多種病原微生物失效的活性的免疫球蛋白。本發(fā)明的免疫球蛋白優(yōu)選具有使一種或多種病毒、細菌、原生動物、寄生物或朊病毒失效的活性。在一種優(yōu)選的實施方案中，免疫球蛋白具有使病毒失效的活性。
當(dāng)提及免疫球蛋白或免疫球蛋白的混合物(例如IgG與IgA)的“活性”或“失效活性”時，指的是免疫球蛋白與其所對抗的病原體結(jié)合并降低該病原體在體內(nèi)的有害作用的能力，特別是與用于使動物免疫的抗原相結(jié)合的能力?？梢允褂皿w外或體內(nèi)結(jié)合試驗對活性進行測定?！疤禺愋悦庖咔虻鞍住笨墒挂环N病原微生物失效(例如一種病毒或病毒毒株、一種細菌或細菌菌株等)，該病原微生物即所述特異性免疫球蛋白所對抗的。
優(yōu)選組合物包括具有使一種或多種感染呼吸道的病毒失效的活性的免疫球蛋白(即具有使呼吸道病毒失效活性的免疫球蛋白)(或免疫球蛋白的混合物)和/或具有使一種或多種感染腸道的病毒失效的活性的免疫球蛋白(即具有使腸道病毒失效活性的免疫球蛋白)(或免疫球蛋白的混合物)。更優(yōu)選本發(fā)明組合物含有一種能夠使選自以下種類的病毒失效的免疫球蛋白(或Ig混合物)，所述病毒選自粘液病毒(Myxovirus)、正粘病毒(Orthomyxokvirus)、鼻病毒(Rhinovirus)、?？刹《?Echovirus)、柯薩奇病毒(Coxsackievirus)、腺病毒(Adenovirus)、呼吸道合胞體病毒(Respiratory Syncytial Virus)(RSV)、(人類)肺炎后病毒(Meta pneumovirus)(MPV)、冠形病毒(Coronavirus)、皰疹病毒(Herpes virus)、麻疹病毒(Measles virus)、輪狀病毒(Rotavirus)、杯狀病毒(Calicivirus)、星狀病毒(Astrovirus)和細胞巨化病毒(Cytomegalovirus)。最優(yōu)選組合物包括具有使呼吸道合胞體病毒失效的活性的免疫球蛋白(或Ig混合物)和/或具有使輪狀病毒失效的活性的免疫球蛋白(或Ig混合物)。
優(yōu)選免疫球蛋白從高度免疫的哺乳動物的乳汁和/或初乳中獲得或可從其中獲得，所述高度免疫的哺乳動物優(yōu)選為高度免疫的農(nóng)場動物，最優(yōu)選為高度免疫的奶牛。優(yōu)選免疫球蛋白從高度免疫的奶牛的乳汁中獲得或可從其中獲得。從高度免疫的哺乳動物獲得這些免疫球蛋白的方法對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的，并且例如在GB 1573995中有所記載。用于本發(fā)明的免疫球蛋白優(yōu)選為從高度免疫的哺乳動物獲得的免疫球蛋白混合物。來自高度免疫的動物的免疫球蛋白混合物可與來自未經(jīng)高度免疫的哺乳動物的免疫球蛋白混合物區(qū)分，因為這些免疫球蛋白混合物與來自普通乳汁的免疫球蛋白混合物相比具有更高含量的針對特定微生物(例如病毒)的免疫球蛋白。免疫球蛋白優(yōu)選可從用呼吸道病毒抗原和/或腸道病毒抗原高度免疫的農(nóng)場動物中獲得或從其中獲得，所述農(nóng)場動物最優(yōu)選用呼吸道病毒抗原和腸道病毒抗原兩者進行免疫。這些奶牛的初乳和乳汁中含有具有使呼吸道病毒失效活性的免疫球蛋白以及具有使腸道病毒失效活性的免疫球蛋白。免疫球蛋白優(yōu)選可從用呼吸道合胞體病毒抗原和/或輪狀病毒抗原高度免疫的農(nóng)場動物中獲得或從其中獲得，所述農(nóng)場動物最優(yōu)選用呼吸道合胞體病毒抗原和輪狀病毒抗原兩者進行免疫。在一種替代的實施方案中，組合物含有乳汁和/或初乳的混合物，其中至少一種乳汁或初乳中含有具有使一種或多種感染呼吸道的病毒失效的活性的免疫球蛋白(或Ig混合物)，并且至少一種乳汁或初乳中含有具有使一種或多種感染腸道的病毒失效的活性的免疫球蛋白。因此，本發(fā)明組合物可從不同動物的初乳或乳汁中獲得，其中一組動物產(chǎn)生抵抗一種或多種呼吸道病毒的免疫球蛋白，另一組動物產(chǎn)生抵抗一種或多種腸道病毒的免疫球蛋白。
免疫球蛋白優(yōu)選為選自IgM、IgY、IgG和IgA中的一種或多種(混合物)，最優(yōu)選為IgG和/或IgA。優(yōu)選本發(fā)明組合物含有IgG和IgA。這兩類免疫球蛋白均可有效地預(yù)防病原微生物對上皮細胞的感染，并且這兩類免疫球蛋白均存在于初乳和乳汁中。禽類IgY也被證明可有效地預(yù)防病原微生物對上皮細胞的感染。優(yōu)選本發(fā)明組合物含有來自乳汁的免疫球蛋白，所述乳汁來自高度免疫的奶牛。因此優(yōu)選IgG/IgA的重量比為1至100。
免疫球蛋白優(yōu)選來自至少一種選自以下的乳品來源初乳或乳汁產(chǎn)品，優(yōu)選為新鮮乳汁、新鮮乳制品、經(jīng)過微過濾處理具有更長貯存期的乳汁、全初乳粉、脫脂初乳粉、奶粉、初乳蛋白濃縮物、乳蛋白濃縮物、乳蛋白分離物、初乳蛋白分離物、乳清蛋白濃縮物和乳清蛋白分離物。
以人類乳汁作為飲食基本組成部分的嬰兒每天可獲得約0.2g至2g免疫球蛋白。本發(fā)明的方法優(yōu)選包括每天給予0.05克/千克體重至2克/千克體重的免疫球蛋白，更優(yōu)選為每天0.1克/kg體重至1克/kg體重的免疫球蛋白。
本發(fā)明組合物，特別是本發(fā)明的嬰兒營養(yǎng)物，含有0.25重量％至5重量％的免疫球蛋白，所述重量百分比以本發(fā)明組合物的干重計。
本發(fā)明組合物優(yōu)選含有至少1重量％的具有使呼吸道合胞體病毒失效活性的免疫球蛋白，優(yōu)選至少2重量％，更優(yōu)選至少2.5重量％，所述重量百分比以免疫球蛋白的總重計。優(yōu)選不超過90重量％。本發(fā)明組合物優(yōu)選含有至少1重量％的具有使輪狀病毒失效活性的免疫球蛋白，優(yōu)選至少2重量％，更優(yōu)選至少2.5重量％，所述重量百分比以免疫球蛋白的總重計。優(yōu)選不超過90重量％。
本發(fā)明組合物中GAL-oligo免疫球蛋白的重量比優(yōu)選為0.01至100，更優(yōu)選為0.1至10。
本發(fā)明組合物優(yōu)選每天提供0.1至30g免疫球蛋白。當(dāng)將組合物給予嬰兒時，優(yōu)選每天提供0.2至5g免疫球蛋白。當(dāng)將組合物給予成人時，優(yōu)選每天提供0.5至15g免疫球蛋白。
在另一種優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明組合物包括具有使一種或多種選自以下的病原微生物失效活性的免疫球蛋白，所述病原微生物選自幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(Enterotoxigenic Escherichia coli)(ETEC)和志賀桿菌(shigella)。
可消化的半乳糖糖類本發(fā)明組合物優(yōu)選包括含有可消化的半乳糖糖類的可消化碳水化合物。組合物含有至少5重量％的可消化的半乳糖糖類，所述百分比以組合物總干重計，所述糖類選自半乳糖和含有至少兩個末端糖單元的、含有半乳糖的可消化糖，其中至少一個末端糖單元選自葡萄糖和半乳糖，并且至少一個末端糖選自半乳糖和巖藻糖。用于本發(fā)明方法的優(yōu)選的組合物含有至少5重量％的可消化的半乳糖糖類，優(yōu)選至少10重量％，更優(yōu)選至少25重量％，所述百分比以本發(fā)明組合物的總干重計。
本發(fā)明使用的術(shù)語“可消化的半乳糖糖類”指在正常的健康人類的腸內(nèi)在存在于人上消化道(小腸和胃)中的酸或消化酶的作用下可消化的單糖、二糖、三糖或多糖。本發(fā)明的方法中優(yōu)選使用乳糖。
可消化的半乳糖糖類優(yōu)選為乳糖。優(yōu)選地，本發(fā)明的方法所使用的組合物中的碳水化合物中至少50重量％為乳糖，優(yōu)選至少75重量％，更優(yōu)選至少90重量％。本發(fā)明中使用的術(shù)語“碳水化合物”與平常實踐中相同，指可消化的碳水化合物。本發(fā)明的方法中使用的組合物優(yōu)選含有至少10重量％的乳糖糖類，優(yōu)選至少25重量％，更優(yōu)選至少40重量％，最優(yōu)選至少50重量％，所述百分比以本發(fā)明組合物的總干重計。為了向嬰兒提供最佳營養(yǎng)物，即與人乳高度相似的組合物，本發(fā)明的方法優(yōu)選包括給予含40至60重量％乳糖的組合物，所述百分比以組合物的總干重計。
在另一種優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明涉及每次供應(yīng)給予約2至50克乳糖，優(yōu)選每次供應(yīng)給予約10至25克乳糖。優(yōu)選一次供應(yīng)為5至500ml，更優(yōu)選為100至300ml。
可消化的半乳糖糖類含半乳糖的不可消化低聚糖的重量比優(yōu)選大于1，更優(yōu)選大于5，再更優(yōu)選大于10。該比例優(yōu)選小于1000，更優(yōu)選小于100。
低聚糖結(jié)合物在一種特別優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的方法包括給予本發(fā)明的GAL-oligo以及選自以下的第二種不可消化低聚糖，所述第二種不可消化低聚糖選自不可消化糊精、木糖低聚糖、阿拉伯糖低聚糖、葡萄糖低聚糖、甘露寡糖、巖藻糖低聚糖、果聚糖-果聚糖型(β-D-(2→6)呋喃果糖基)nα-D-吡喃葡萄糖甙)以及果聚糖-菊粉型(β-D-(2→1)呋喃果糖基)nα-D-吡喃葡萄糖甙)。優(yōu)選第二種低聚糖選自菊粉、水解的菊粉和低聚果糖。
本發(fā)明組合物中優(yōu)選每100克干重本發(fā)明組合物包括0.5至12克第二種不可消化低聚糖，更優(yōu)選包括1至8克第二種不可消化低聚糖。第二種低聚糖的DP值優(yōu)選低于40，更優(yōu)選為10至30。
優(yōu)選地，本發(fā)明組合物中每100克干重本發(fā)明組合物總計包括(即包括或不包括第二、第三種等水溶性的不可消化低聚糖)1至12克水溶性的不可消化低聚糖，更優(yōu)選總計為2至9克。
下列重量比優(yōu)選均大于1a.(DP為2至5的低聚糖)(DP為6至9的低聚糖)；以及b.(DP為10至60的低聚糖)(DP為6至9的低聚糖)。優(yōu)選兩個重量比均大于2，更優(yōu)選均大于5。
本發(fā)明的方法優(yōu)選包括每100克干重組合物給予0.5至10克的DP為1至10的反式半乳寡聚糖，更優(yōu)選給予2至5克。本發(fā)明優(yōu)選每100克干重組合物包括0.5至10克的DP為15至40的果多糖(fructopolysaccharide)，更優(yōu)選包括1至5克。術(shù)語“果多糖”指包括具有至少10個β連接的果糖單元的鏈的不可消化多糖碳水化合物。
酸性低聚糖在另一種優(yōu)選的實施方案中，第二種不可消化低聚糖為酸性低聚糖。術(shù)語“酸性低聚糖”指含有至少一個選自以下的酸性基團的低聚糖，所述酸性基團選自N-乙酰基神經(jīng)氨酸、N-乙醇?；窠?jīng)氨酸、游離或酯化的羧酸、硫酸基團和磷酸基團。酸性低聚糖優(yōu)選為聚己糖(polyhexose)。優(yōu)選地，至少一種前述酸性基團位于酸性低聚糖的末端己糖單元上。優(yōu)選酸性低聚糖在末端己糖單元上含有羧酸，其中所述羧酸基團可為游離的或酯化的。WO 01/60378和/或WO 02/42484中提供了制造適用于本發(fā)明的方法和組合物的酯化的果膠水解產(chǎn)物的方法，所述文獻在此以引用的方式納入。
優(yōu)選地，酸性低聚糖具有一個、優(yōu)選兩個末端糖醛酸單元，所述末端糖醛酸單元可為游離的或酯化的。優(yōu)選末端糖醛酸單元選自半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、古洛糖醛酸、艾杜糖醛酸、甘露糖醛酸、核糖醛酸(riburonicacid)和阿卓糖醛酸(alturonicacid)。這些單元可為游離的或酯化的。在一種更優(yōu)選的實施方案中，末端己糖單元具有雙鍵，所述雙鍵優(yōu)選位于末端己糖單元的C4和C5位之間。優(yōu)選其中一個末端己糖單元含有雙鍵。末端己糖(例如糖醛酸)優(yōu)選具有

圖1的結(jié)構(gòu)。
圖1優(yōu)選的末端己糖酸性基團
其中R優(yōu)選選自氫、羥基或酸性基團，優(yōu)選為羥基(見前文)；并且R2、R3、R4和R5中的至少一個代表N-乙?；窠?jīng)氨酸、N-乙醇?；窠?jīng)氨酸、游離或酯化的羧酸、硫酸基團和磷酸基團，并且其余的R2、R3、R4和R5代表羥基和/或氫。優(yōu)選地，R2、R3、R4和R5中的一個代表N-乙酰基神經(jīng)氨酸、N-乙醇?；窠?jīng)氨酸、游離或酯化的羧酸、硫酸基團和磷酸基團，并且其余的R2、R3、R4和R5代表羥基和/或氫。更優(yōu)選地，R2、R3、R4和R5中的一個代表游離或酯化的羧酸，并且其余的R2、R3、R4和R5代表羥基和/或氫；并且n為整數(shù)，表示己糖單元的個數(shù)(也可參見下文的聚合度部分)，所述己糖單元可以是任何己糖單元。適合的n為1-5000之間的整數(shù)，代表己糖單元的個數(shù)，所述己糖單元優(yōu)選為糖醛酸，更優(yōu)選為半乳糖醛酸。這些單元上的羧酸基團可以為游離的或(部分)酯化的，并且優(yōu)選至少部分甲基化。
最優(yōu)選地，R2和R3代表羥基，R4代表氫，并且R5代表游離的或酯化的羧酸。
本方法中使用的酸性低聚糖的聚合度(DP)為1至5000，優(yōu)選為1至1000，更優(yōu)選為2至250，再更優(yōu)選為2至50，最優(yōu)選為2至10。如果使用具有不同聚合度的酸性低聚糖的混合物，則酸性低聚糖混合物的DP平均值優(yōu)選為2至1000，更優(yōu)選為3至250，再更優(yōu)選為3至50。
酸性低聚糖優(yōu)選其甲氧基化程度大于20％，優(yōu)選大于50％，更優(yōu)選大于70％。酸性低聚糖優(yōu)選其甲基化程度大于20％，優(yōu)選大于50％，更優(yōu)選大于70％。
酸性低聚糖優(yōu)選每天給予10mg至100g，優(yōu)選每天給予100mg至50g，再更優(yōu)選每天給予0.5至20g。
呼吸道和腸道感染本發(fā)明提供一種治療和/或預(yù)防呼吸道感染和/或腸道感染的方法。嬰兒和幼兒中最常見且最嚴重的呼吸道和腸道感染通常是由病毒感染引起的，而本發(fā)明也適用于治療和/或預(yù)防其他病原微生物引起的感染，所述病原微生物例如但不限于致病細菌、原生動物、寄生物、朊病毒、真菌等。這里的“病原微生物”指能夠引起人類疾病的微觀的或亞微觀的生物體或作用物，包括病毒和朊病毒。在一種優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明方法提供了一種用于治療和/或預(yù)防由以下病原體引起的呼吸道感染的方法，所述病原體為粘液病毒、正粘病毒、鼻病毒、?？刹《尽⒖滤_奇病毒、腺病毒、副流感病毒(Parainfluenzavirus)、呼吸道合胞體病毒(RSV)、(人類)肺炎后病毒(MPV)、冠形病毒、皰疹病毒、麻疹病毒、細胞巨化病毒、莢膜組織胞漿菌(Histoplasma capsulatum)、粗球孢子菌(Coccidiodes immitis)、皮炎芽生菌(Blastomycesdermatitidis)、隱球菌(Cryptococcus)、曲霉(Aspergillus)、毛霉菌(Mucorales)。本發(fā)明的方法特別適用于治療和/或預(yù)防呼吸道合胞體病毒感染和/或輪狀病毒感染。
在一種優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的方法涉及治療和/或預(yù)防呼吸道感染疾病，所述呼吸道感染疾病優(yōu)選選自結(jié)核、支氣管炎、細支氣管炎、氣管炎、肺炎、鼻竇炎(sinusinitis)、鼻炎、嚴重急性呼吸器官綜合征(SARS)、哮吼、會厭炎、組織胞漿菌病、球孢子菌病、酵母病、隱球菌病、曲霉病、毛霉菌病、肺膿腫和中耳炎。在一種特別優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供一種治療和/或預(yù)防病毒性肺炎和/或支氣管炎的方法。本發(fā)明的方法還適用于治療和/或預(yù)防選自以下的呼吸道感染的癥狀肺部刺激、肺部充血、粘液產(chǎn)生過多、氣喘(即呼吸困難)，特別是氣喘。本發(fā)明的方法還適用于治療和/或預(yù)防哮喘。
在另一種優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供一種治療和/或預(yù)防腸道感染的方法，所述腸道感染特別是胃腸炎，更優(yōu)選病毒性胃腸炎。本發(fā)明的方法還適用于治療和/或預(yù)防選自以下的病毒性胃腸炎的癥狀和后遺癥水瀉、嘔吐、發(fā)燒、發(fā)冷和腹部疼痛。本發(fā)明的方法還適用于治療和/或預(yù)防更嚴重的長期并發(fā)癥，例如乳糖吸收不良、碳水化合物不耐受、早發(fā)性蛋白質(zhì)不耐受以及對其他感染的敏感性增強。
通過預(yù)防可導(dǎo)致全身性疾病的病原體所引起的腸道和呼吸道早期感染，本發(fā)明也可在預(yù)防全身性疾病中起到一定作用，所述全身性疾病包括I型和II型單純性皰疹。
治療群體本發(fā)明的方法特別適用于治療和/或預(yù)防人類的呼吸道和腸道感染，優(yōu)選針對(健康的)0歲至10歲兒童，優(yōu)選0歲至4歲幼兒，更優(yōu)選1歲以下的嬰兒。本發(fā)明的方法可以有利地用于治療和/或預(yù)防早產(chǎn)兒(妊娠37周之前出生的嬰兒)的上述疾病、感染和癥狀。也適用于治療由于其他并發(fā)癥或由于其環(huán)境而具有高度危險性的嬰兒和幼兒。
本發(fā)明的方法特別適用于治療和/或預(yù)防免疫受損的哺乳動物個體的呼吸道和/或腸道感染，優(yōu)選老年人(約60歲以上的人)，感染了人類免疫缺陷病毒(HIV)的個體，患有一種或多種以下疾病的個體腎病綜合征、多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤、何杰金病，進行過器官移植的個體，患有慢性心臟病、慢性腎病或慢性肺病(尤其是慢性阻塞性肺病(COPD)、肺氣腫、結(jié)節(jié)病、纖維囊泡癥、支氣管擴張、肺癌、肺膨脹不全、呼吸衰竭、職業(yè)性肺病、哮喘)、糖尿病和酒精中毒的個體。本發(fā)明的方法可有利地用于治療和/或預(yù)防COPD患者、HIV感染患者和/或糖尿病患者，因為這些患者通常由于患病而變得虛弱。
在另一種優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的方法包括將本發(fā)明組合物給予使用呼吸器或人工呼吸機或者位于重癥監(jiān)護病房中的人，通常是住院患者，因為這些患者特別容易受到病毒感染。
因此本發(fā)明的一方面是阻止和/或降低一些通常預(yù)計其源于腸道感染的疾病的發(fā)生和嚴重性。本發(fā)明的一方面是將不可消化低聚糖的免疫激活作用與可有助于阻止病原體早期入侵及感染的免疫球蛋白相結(jié)合，所述病原體會導(dǎo)致除呼吸道或腸道疾病以外的全身性疾病。
營養(yǎng)配方食物對0至4歲的幼兒進行呼吸道感染的藥物治療通常很棘手，因為很多藥劑需要通過肺部途徑進行給藥。還沒有能夠預(yù)防這一年齡段的呼吸道疾病的有效疫苗。通過注射單克隆抗體進行預(yù)防是具有侵害性的、昂貴的并且只能部分有效。本發(fā)明提供了一種治療和/或預(yù)防呼吸道感染的方法，包括口服一種營養(yǎng)組合物。因此，本發(fā)明的方法也克服了肺部給藥或肌內(nèi)給藥的問題。
適用于本發(fā)明方法的營養(yǎng)組合物優(yōu)選含有10至60en％的脂類、5至50en％的蛋白質(zhì)、15至90en％的碳水化合物。更優(yōu)選營養(yǎng)組合物含有7.5至12.5en％的蛋白質(zhì)、40至55en％的碳水化合物、以及35至50en％的脂肪(en％是能量百分比的簡稱，代表每種組分對制劑總熱值的相對貢獻量)。
營養(yǎng)組合物優(yōu)選還含有至少一種長鏈多不飽和脂肪酸(LC-PUFA)，所述長鏈多不飽和脂肪酸優(yōu)選選自二十碳五烯酸(EPA，n-3)、二十二碳六烯酸(DHA，n-3)和花生四烯酸(AA，n-6)，因為這些物質(zhì)可以進一步減輕呼吸道感染和/或其癥狀。優(yōu)選本發(fā)明的組合物含有AA和DHA，更優(yōu)選含有AA、DHA和EPA。本發(fā)明的不可消化低聚糖和LC-PUFA的結(jié)合具有協(xié)同作用。
優(yōu)選本發(fā)明的組合物包括至少0.1重量％、優(yōu)選至少0.25重量％、更優(yōu)選至少0.5重量％、再更優(yōu)選至少0.75重量％的具有20至22個碳原子的LC-PUFA，所述百分比以總脂肪含量計。本發(fā)明的組合物中具有20至22個碳原子的LC-PUFA的含量優(yōu)選不超過總脂肪含量的15重量％，優(yōu)選不超過總脂肪含量的10重量％，更優(yōu)選不超過5重量％。
EPA含量優(yōu)選不超過總脂肪的15重量％，更優(yōu)選不超過5重量％，最優(yōu)選不超過1重量％，但優(yōu)選其至少為總脂肪的0.05重量％，更優(yōu)選至少0.1重量％。DHA含量優(yōu)選不超過總脂肪的10重量％，更優(yōu)選不超過5重量％，最優(yōu)選不超過1重量％，但其至少為0.1重量％。本發(fā)明組合物優(yōu)選包括至少0.1重量％的AA，更優(yōu)選至少0.25重量％的AA，最優(yōu)選至少0.5重量％的AA，所述百分比以總脂肪計。AA含量優(yōu)選不超過總脂肪的5重量％，更優(yōu)選不超過1重量％。
適合給予成人的組合物可包括更多量的LC-PUFA。這種情況下EPA含量優(yōu)選不超過總脂肪的15重量％，更優(yōu)選不超過10重量％，但優(yōu)選其至少為總脂肪的0.05重量％，更優(yōu)選至少0.1重量％。DHA含量優(yōu)選不超過15重量％，更優(yōu)選不超過10重量％，但其至少為總脂肪的0.1重量％。本發(fā)明組合物優(yōu)選包括至少0.1重量％的AA，更優(yōu)選包括至少0.25重量％的AA，最優(yōu)選包括至少0.5重量％的AA，所述百分比以總脂肪計。AA含量優(yōu)選不超過總脂肪的15重量％，更優(yōu)選不超過10重量％。
本發(fā)明的方法不涵蓋包括給予一種由人乳組成的組合物的方法。因此，本發(fā)明的方法優(yōu)選包括給予一種包括有非人類來源的物質(zhì)的組合物，所述非人類來源的物質(zhì)優(yōu)選為適用于人類口服的營養(yǎng)物質(zhì)，更優(yōu)選為非人類來源的纖維碳水化合物、脂肪和/或蛋白質(zhì)，優(yōu)選其來自植物、動物、細菌或合成來源。
藥用配方物本發(fā)明提供一種治療和/或預(yù)防呼吸道和/或腸道感染的方法，包括口服一種含有不可消化低聚糖和免疫球蛋白的藥用組合物。優(yōu)選的藥用制劑可為液體形式或固體形式。液體形式的產(chǎn)品可包括來源于初乳、乳汁或蛋黃的、通過用多種方法去除污染性細菌并延長貯存期的免疫球蛋白。一種優(yōu)選的用于去除細菌的方法為微過濾。固體形式的藥用組合物包括可復(fù)原的粉末、片劑、可咀嚼片劑和膠囊。本領(lǐng)域技術(shù)人員可將包括有本發(fā)明的產(chǎn)品制成制劑以將活性成分基本完整地遞送至腸內(nèi)的某些部位。
益生元在另一種優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的方法包括給予上述不可消化低聚糖和/或免疫球蛋白和益生元。優(yōu)選益生元選自乳酸菌、乳球菌、雙歧桿菌、腸球菌、丙酸菌、片球菌、桿菌和鏈球菌，更優(yōu)選選自乳酸菌和雙歧桿菌。益生元優(yōu)選為可產(chǎn)生乳酸的非致病細菌。本發(fā)明的不可消化低聚糖和益生元細菌的結(jié)合產(chǎn)生協(xié)同作用。
實施例實施例1標(biāo)準(zhǔn)嬰兒配方食物中的反式半乳寡聚糖對預(yù)防1周歲以下嬰兒的呼吸道感染的有效性方法在意大利進行了多中心臨床試驗，包括7個中心和56名兒科醫(yī)師。停止哺乳后，將嬰兒分為兩組。對A組嬰兒(n＝69)給予補加有低聚糖的NutrilonTM1或2，補加的低聚糖的量使反式半乳寡聚糖的最終濃度為0.36g/100ml(Vivinal-GOSTM；Borculo Domo Ingredients，荷蘭)、果多糖為0.04g/100ml(Raftiline HPTM，Orafti，Tienen，比利時)。對照組B中的嬰兒(n＝82)接受標(biāo)準(zhǔn)NutrilonTM1或2。
Nutrilon 1TM中含有45en％的碳水化合物，8en％的蛋白質(zhì)和47en％的脂肪；以總碳水化合物計約97重量％的乳糖；每100ml 7.3克乳糖；每100克干重的全部組合物約54克乳糖。
Nutrilon 2TM中含有47en％的碳水化合物，10en％的蛋白質(zhì)和43en％的脂肪；以總碳水化合物計約96重量％的乳糖；每100ml 7.9克乳糖；每100克干重的全部組合物約54克乳糖。
結(jié)果嬰兒的年齡在2至9個月之間變化，對嬰兒進行6個月跟蹤調(diào)查。兩組嬰兒未表現(xiàn)出營養(yǎng)攝入上的不同。A組中，共觀察到32例上呼吸道感染。對照組B中，共觀察到60例上呼吸道感染。因此A組與B組相比上呼吸道感染的發(fā)生率顯著(p＜0.01)降低.
實施例2包括含半乳糖的不可消化低聚糖的組合物的免疫激發(fā)作用實驗方案通過使小鼠攝食包括含半乳糖的不可消化低聚糖的飲食，測試包括含半乳糖的不可消化低聚糖的飲食的延遲型過敏(DTH)反應(yīng)。DTH是Th1免疫應(yīng)答的一個參數(shù)，可通過測量局部抗原攻擊之后耳部腫脹的增加而測定DTH。為產(chǎn)生DTH反應(yīng)，在小鼠兩耳上皮內(nèi)(i.c.)注射25μl經(jīng)過滲析的Influvac作為DTH攻擊。
使用了含有半乳寡聚糖(GOS)(Vivinal-GOSTM(Borculo DomoIngredients，荷蘭)和低聚果糖(FOS)(Raftiline HpTM，Orafti，Tienen，比利時)的中性低聚糖混合物(GF)，其中GOS∶FOS的重量比為9∶1。測試了含有1、2.5和5重量％GF的飲食，所述百分比以飲食的總重計。
結(jié)果給予含有1或2.5重量％GF的飲食導(dǎo)致了DTH在統(tǒng)計意義上的顯著增加(見表1)。這些結(jié)果表明含半乳糖的不可消化低聚糖具有免疫激發(fā)作用，這種作用可通過包括果多糖而進一步增強。
表1

*表明與對照組有顯著差異(P＜0.05)實施例3抗感染組合物含有40en％脂類、11en％蛋白質(zhì)和49en％碳水化合物的嬰兒配方食物，包含a.來自用輪狀病毒抗原和大腸桿菌抗原高度免疫的奶牛的乳汁，該乳汁中因此含有具有使輪狀病毒失效活性的和對抗大腸桿菌活性的免疫球蛋白(IgG)。
b.反式半乳寡聚糖(VivinalTM(Borculo Domo Ingredients，荷蘭)。)c.乳糖實施例4抗感染組合物含有40en％脂類、11en％蛋白質(zhì)和49en％碳水化合物的嬰兒配方食物，包含a.來自用輪狀病毒抗原和呼吸道合胞體病毒抗原高度免疫的奶牛的乳汁，該乳汁中因此含有具有使輪狀病毒失效活性的免疫球蛋白(IgG)和具有使呼吸道合胞體病毒失效活性的免疫球蛋白(IgG)。
b.反式半乳寡聚糖(VivinalTM(Borculo Domo Ingredients，荷蘭)。)c.乳糖。
權(quán)利要求
1.含有至少兩個末端糖單元的、含有半乳糖的不可消化低聚糖用于制造在治療和/或預(yù)防感染的方法中使用的組合物的用途，其中至少一個末端糖單元選自葡萄糖和半乳糖，并且至少一個末端糖選自半乳糖和巖藻糖，所述方法包括給予一種組合物，該組合物包括a.含有至少兩個末端糖單元的、含有半乳糖的不可消化低聚糖，其中至少一個末端糖單元選自葡萄糖和半乳糖，并且至少一個末端糖選自半乳糖和巖藻糖；以及b.具有抵抗病原微生物的活性的免疫球蛋白。
2.權(quán)利要求1的用途，其中將所述組合物給予嬰兒。
3.上述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中所述組合物為口服。
4.上述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中每天給予免疫球蛋白的量為0.05g免疫球蛋白/kg體重至2g免疫球蛋白/kg體重。
5.上述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中所述組合物在治療和/或預(yù)防呼吸道感染的方法中使用。
6.上述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中所述組合物在治療和/或預(yù)防腸胃炎的方法中使用。
7.上述權(quán)利要求中任意一項的用途，其中所述組合物在治療和/或預(yù)防與呼吸道或腸道早期感染相關(guān)的疾病的方法中使用。
8.適用于治療和/或預(yù)防感染或疾病的組合物，所述組合物包括a.含有至少兩個末端糖單元的、含有半乳糖的不可消化低聚糖，其中至少一個末端糖單元選自葡萄糖和半乳糖，并且至少一個末端糖選自半乳糖和巖藻糖；以及b.具有抵抗病原微生物的活性的免疫球蛋白。
9.權(quán)利要求8的組合物，所述組合物包括具有使呼吸道合胞體病毒失效的活性的免疫球蛋白。
10.權(quán)利要求8的組合物，所述組合物包括具有使輪狀病毒失效的活性的免疫球蛋白。
11.權(quán)利要求8-10中任意一項的組合物，其中所述組合物包括0.25重量％至5重量％的免疫球蛋白，所述重量百分比以本組合物的干重計。
12.權(quán)利要求7-9中任意一項的組合物，其中免疫球蛋白為可由高度免疫的哺乳動物的乳汁或初乳獲得的免疫球蛋白混合物。
13.權(quán)利要求8-10中任意一項的組合物，所述組合物包括10至60en％的脂類、5至50en％的蛋白質(zhì)和15至90en％的碳水化合物。
14.權(quán)利要求8-11中任意一項的組合物，所述組合物進一步包括選自低聚果糖、水解菊粉和菊粉的不可消化低聚糖。
全文摘要
本發(fā)明提供一種用于治療和/或預(yù)防感染的方法和組合物，所述方法包括使哺乳動物口服一種組合物，所述組合物包括含半乳糖的不可消化低聚糖和來源于高度免疫的奶牛的乳汁或初乳的免疫球蛋白。
文檔編號A61P31/12GK101094687SQ200580035523
公開日2007年12月26日 申請日期2005年8月24日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月24日
發(fā)明者G·貝姆, L·馬拉伯特, B·斯塔爾, J·加斯恩, A·W·斯卡梅爾, R·P·皮特爾斯 申請人:N·V·努特里奇亞