專(zhuān)利名稱(chēng)：硫糖肽在治療粘膜炎中的用途的制作方法
粘膜炎是影響粘膜的常見(jiàn)炎性疾病，特別是在腫瘤患者進(jìn)行化學(xué)療法或放射療法后如此。
這些類(lèi)型的治療除了作用于腫瘤細(xì)胞外，事實(shí)上也作用于健康組織的細(xì)胞，特別是那些快速?gòu)?fù)制的細(xì)胞。因此，口腔是受該治療產(chǎn)生的并發(fā)癥嚴(yán)重影響的區(qū)域之一；確實(shí)，實(shí)際上所有治療頭和頸腫瘤的患者以及在其他位置(白血病或淋巴瘤)進(jìn)行腫瘤放射-化學(xué)療法的約40％的患者出現(xiàn)影響口腔的并發(fā)癥(Minerva Stomatol.200251173-86)。
通常，術(shù)語(yǔ)“粘膜炎”被理解為指特征在于上皮厚度下降、紅斑密集和出現(xiàn)潰瘍的臨床現(xiàn)象，伴有疼痛綜合征狀和可能發(fā)生的感染和出血(Oncologist 19983446-52；Oncologist 199911261-6)。
關(guān)于粘膜炎、特別是口腔粘膜炎發(fā)展的生物機(jī)理細(xì)分為四個(gè)階段最初的炎性/血管階段，在此階段中，在放射療法或化學(xué)療法之后，上皮組織釋放大量的細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素1或TNF-α，所述細(xì)胞因子引起第一塊局部組織損傷；第二上皮階段，其影響上皮基底細(xì)胞的分裂，引起所述細(xì)胞更新減少、組織萎縮和潰瘍；第三潰瘍/細(xì)菌階段，該階段當(dāng)癥狀處于其最強(qiáng)烈的時(shí)候伴有損害的細(xì)菌建群。第三階段也是患者嚴(yán)重的中性白細(xì)胞減少階段；粘膜炎的第四和最后特征階段被認(rèn)為是愈合階段，伴有上皮細(xì)胞的增殖和分化的恢復(fù)，白細(xì)胞逐漸增加以及局部菌群正?；?。
目前，人們?yōu)檎衬ぱ滋峁┝祟A(yù)防性和治療性的治療。在第一方面，應(yīng)用能夠降低化療藥物粘膜吸收的物質(zhì)(例如冷凍療法、別嘌醇或毛果蕓香堿等)、減少上皮增殖改變的物質(zhì)(例如β-胡蘿卜素、谷氨酰胺或硝酸銀等)或抗炎劑和抗微生物劑(例如5-氨基水楊酸和/或氯己定)。
具體而言，關(guān)于口腔粘膜炎，冷凍療法是如今最廣泛被認(rèn)可的預(yù)防性治療；該方法基于施用冰塊使之在口中保持30分鐘，目的是使口腔粘膜血管收縮以降低一些化學(xué)療法的溫度依賴(lài)性毒性。遺憾的是，冷凍治療被證明僅在用化學(xué)療法治療(其可以作為丸劑(氟尿嘧啶)施用)的患者中顯示出重要的預(yù)防作用，但是已經(jīng)證明其對(duì)于連續(xù)灌注的化學(xué)療法無(wú)效，因?yàn)樗幬锍志眯源嬖谟谘h(huán)血中，而局部血管收縮沒(méi)有益處(Oral Oncology 1999；35453-70)。
在第二方面使用保護(hù)粘膜的物質(zhì)(例如碳酸氫鈉)、麻醉劑或鎮(zhèn)痛劑(例如利多卡因、嗎啡和他們的衍生物等)、加速愈合過(guò)程的物質(zhì)(例如維生素E、維甲酸、激光療法等)或特定飲食和/或特定口腔衛(wèi)生計(jì)劃。
治療粘膜炎的其他方法在US專(zhuān)利申請(qǐng)US2003/0064913和US2003/0236217中有描述，其引入本文作為參考。
但是，所有這些預(yù)防性策略或治療方法都沒(méi)有證明其在預(yù)防或治療粘膜炎、特別由于化學(xué)療法和/或放射療法引起的粘膜炎中完全有效，其仍然是腫瘤患者、例如頭和/或頸腫瘤患者的口腔粘膜炎中遭受痛苦的原因。
硫糖肽是從豬十二指腸中提取獲得的糖肽的硫酸多酯。硫糖肽通過(guò)酶蛋白水解、重復(fù)純化和隨后的硫酸化步驟獲得；最終的產(chǎn)物通過(guò)在醋酸纖維素上進(jìn)行電泳來(lái)鑒別。
硫糖肽是胃保護(hù)和抗?jié)兯幬?；其在腸中不吸收并且已知僅在胃腔中產(chǎn)生其作用。
事實(shí)上，硫糖肽經(jīng)常作為胃保護(hù)劑施用于胃壁被藥物如阿司匹林和?；悄懰峁艋虮环晴摅w抗炎藥類(lèi)攻擊的個(gè)體。臨床研究已經(jīng)表明了給患有類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和接受吲哚美辛和雙氯芬酸治療的患者施用硫糖肽的有效性，因此其可以預(yù)防出現(xiàn)與使用所述非甾體抗炎藥物相關(guān)的胃或十二指腸潰瘍(Scand.J.Gastroenterol.1993年10月；28(10)875-8)。
作用機(jī)理除了與胃蛋白酶失活有關(guān)，還歸因于刺激胃粘膜細(xì)胞分泌粘液和碳酸氫鹽。
特別地，已知硫糖肽是治療與幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori)炎癥相關(guān)的胃部疾病的選擇藥物。
幽門(mén)螺桿菌是螺旋狀革蘭氏陰性桿菌，它由于具有多種特征可以存活于胃粘膜的酸性環(huán)境中并且在包被胃內(nèi)壁的粘膜下增殖，粘附于粘膜細(xì)胞本身。這是十二指腸潰瘍的原因，也是慢性胃炎的主要原因。當(dāng)前的治療是基于抗生素和(在甚至更經(jīng)常發(fā)生的抗生素耐受株和復(fù)發(fā)的事件中)特定的抗?jié)兯幬铩?br> 確實(shí)，在動(dòng)物模型和多項(xiàng)臨床研究中，硫糖肽的施用已經(jīng)帶來(lái)值得關(guān)注的抗胃潰瘍活性，其可顯著改善幽門(mén)螺桿菌引起的炎癥(J.Physiol.Pharmacol.1999年6月；50(2)197-210)。硫糖肽主要通過(guò)抑制由桿菌產(chǎn)生的LPS(脂多糖)的作用來(lái)起作用，其中桿菌阻止促生長(zhǎng)素抑制素-受體結(jié)合，引起胃泌素和酸性分泌物(它們是隨后形成潰瘍的原因)的過(guò)度產(chǎn)生。
現(xiàn)在已經(jīng)驚奇地發(fā)現(xiàn)，在治療粘膜炎中應(yīng)用硫糖肽帶來(lái)了關(guān)于炎性綜合癥狀和粘膜損傷的值得關(guān)注的改善，伴有上皮細(xì)胞機(jī)能的顯著恢復(fù)。
具體而言，硫糖肽在口腔粘膜炎的治療中顯示出有效性。更具體而言，硫糖肽在化學(xué)療法和/或放射療法引起的粘膜炎的治療中有活性。
通過(guò)增加PGE2型和PGI2型前列腺素兩者的水平，硫糖肽使得粘膜分泌增加和粘膜上皮細(xì)胞的更新正常化。而且，硫糖肽能夠增加EGF(上皮生長(zhǎng)因子)的分泌并且由此確保粘膜發(fā)生更輕的疾病和使得該疾病的愈合過(guò)程加速。
事實(shí)上，EGF或其受體的量的增加使得上皮細(xì)胞的增殖增加，并且形成所述細(xì)胞上層并由此增厚粘膜、特別是口和/或胃腸粘膜，因此，其可以作為細(xì)胞毒劑(例如放射)攻擊的屏障起作用并且顯著減少任何損傷。
生長(zhǎng)因子、特別是EGF是實(shí)質(zhì)上確定上皮細(xì)胞對(duì)細(xì)胞毒劑的敏感性的因子。
因此，硫糖肽在粘膜炎、特別是口腔粘膜炎中的應(yīng)用，以及在患有腫瘤、例如頭和頸的腫瘤(例如喉癌、咽癌或食道癌)的患者進(jìn)行化學(xué)療法和/或放射療法之前或期間的應(yīng)用，引起粘膜損傷減少和該抗腫瘤治療的毒性降低，隨后解決了與之相關(guān)的粘膜炎問(wèn)題。
因此，根據(jù)本發(fā)明，硫糖肽在預(yù)防和治療粘膜炎、特別是由抗腫瘤治療例如化學(xué)療法和/或放射療法引起的口腔粘膜炎中有活性。
試驗(yàn)部分動(dòng)物試驗(yàn)進(jìn)行的目的是評(píng)價(jià)硫糖肽在保護(hù)腸粘膜的克隆源性(clonogenic)細(xì)胞免受放射誘導(dǎo)的損傷中的功效。克隆源性細(xì)胞的保護(hù)確保了腸隱窩的存活，腸隱窩可促進(jìn)正常上皮修復(fù)。
本試驗(yàn)中處理的動(dòng)物未感染幽門(mén)螺桿菌，或者其胃腸粘膜未顯示出由該桿菌引起的炎癥的特征性癥狀。
在本試驗(yàn)中，炎性損傷由13Gy劑量的X射線引起。將60只雄性BDF1小鼠分為10組、每組6只動(dòng)物進(jìn)行處理。
在放射前三天，每日通過(guò)胃管并以多個(gè)劑量(即分別為12mg/kg、50mg/kg、200mg/kg和800mg/kg)給4組動(dòng)物(加上一個(gè)對(duì)照/生理鹽水溶液組)施用硫糖肽作為預(yù)防措施，最終劑量在放射前30分鐘施用。
另外4組(加上一個(gè)對(duì)照/生理鹽水溶液組)在放射后同樣通過(guò)胃管并以多個(gè)劑量(即分別為12.5mg/kg、50mg/kg、200mg/kg和800mg/kg)立即接受硫糖肽處理，之后每天如此，共計(jì)3天，在第4天處死。
所有動(dòng)物在治療中存活并且沒(méi)有觀察到副作用。在放射后4天收集動(dòng)物并處死。每只動(dòng)物測(cè)定10個(gè)腸環(huán)狀面(每組60個(gè))，評(píng)價(jià)存活隱窩的數(shù)量和寬度，計(jì)算每組的平均值。僅包括包含10個(gè)或更多個(gè)克隆源性細(xì)胞的完整環(huán)狀面和隱窩。
下表1總結(jié)了所得數(shù)據(jù)。附圖
顯示了正常的腸形態(tài)學(xué)(圖A)或放射后具有再生中心的腸形態(tài)學(xué)，在該中心可以觀察到具有僅一個(gè)或多個(gè)克隆源性細(xì)胞且剩余的間充質(zhì)完全缺失的存活隱窩(圖B)。這些個(gè)體出現(xiàn)腹瀉并死于粘膜炎。圖C顯示了具有包含少于10個(gè)細(xì)胞的擬隱窩或隱窩的腸形態(tài)學(xué)。
表1
結(jié)果收集的數(shù)據(jù)強(qiáng)調(diào)了硫糖肽在放射損傷中的功效以及功效和不同施用劑量之間的聯(lián)系。在最低劑量(12.5mg/kg和50mg/kg)時(shí)，硫糖肽未顯示出任何對(duì)克隆源性細(xì)胞和腸隱窩損傷的預(yù)防作用；在200mg/kg劑量時(shí)發(fā)現(xiàn)了隱窩存活增加以及由此保護(hù)隱窩免受放射損傷的證據(jù)(35％)。大于200mg/kg的劑量同樣沒(méi)有顯示出保護(hù)功效。然而，雖然200mg/kg劑量就預(yù)防而言是有效的，但是在放射后處理組中未顯示出活性。
在這些案例中，僅800mg/kg的較高劑量對(duì)X射線引起的損傷有較顯著的治療作用。
總之，通過(guò)胃管以多個(gè)劑量施用于未感染幽門(mén)螺桿菌的小鼠的硫糖肽證明其在預(yù)防或治療放射損傷中有效。
權(quán)利要求
1.硫糖肽在制備用于治療和/或預(yù)防粘膜炎的藥物組合物中的用途。
2.權(quán)利要求1的用途，用于治療和/或預(yù)防口腔粘膜炎。
3.前述權(quán)利要求的用途，用于治療和/或預(yù)防抗腫瘤治療引起的口腔粘膜炎。
4.權(quán)利要求3的用途，其中抗腫瘤治療是化學(xué)療法和/或放射療法。
5.前述權(quán)利要求的用途，其中硫糖肽以12.5mg/kg至800mg/kg的量施用。
6.前述權(quán)利要求的用途，其中所述的組合物是局部劑型。
7.前述權(quán)利要求的用途，其中所述的藥物組合物是口服劑型。
8.前述權(quán)利要求的用途，其中所述的組合物是胃腸道外劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及硫糖肽在治療或預(yù)防粘膜炎中的用途。
文檔編號(hào)A61P1/04GK1972705SQ200580015927
公開(kāi)日2007年5月30日 申請(qǐng)日期2005年5月12日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月18日
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