專利名稱：含阿霉素的微球,其用途及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種阿霉素微球，其用途和其制備方法。
背景技術：
阿霉素(Adriamycin)是當今公認的強效廣譜抗癌藥。本品能直接嵌入DNA核堿對之間，干擾轉(zhuǎn)錄過程，阻止mRNA的形成，起到抗腫瘤作用。它既抑制DNA的合成又抑制RNA的合成，所以對細胞周期各階段均有作用，為一細胞周期非特異性藥物，對S期作用最強，對M、G1和G2期也有作用。此外，還可導致自由基的生成，能與金屬離子結(jié)合，與細胞膜結(jié)合。對乏氧細胞也有作用。阿霉素對機體可產(chǎn)生廣泛的生物化學效應，具有強烈的細胞毒性作用。臨床上用于急性白血病(淋巴細胞性和粒細胞性)、霍奇金病及惡性淋巴瘤、乳腺癌、支氣管肺癌、卵巢癌、軟組織肉瘤、成骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、尤文肉瘤、腎母細胞瘤、神經(jīng)母細胞瘤、膀脫癌、甲狀腺癌、前列腺癌、頭頸部鱗癌、睪丸癌、胃癌、肝癌等。阿霉素有廣譜抑瘤作用，主要因為它既含有脂溶性的蒽環(huán)配基，又有水溶性的柔紅糖胺，有酸性酚羥基和堿性氨基，易于通過細胞膜，在多靶點起作用，故療效廣泛。
傳統(tǒng)的抗腫瘤藥物是通過各種途徑給藥后，達到一定的血藥濃度分布于全身而產(chǎn)生治療作用。這種治療方法最大的缺陷是缺乏選擇性，體內(nèi)藥物行為由其理化性質(zhì)及解剖生理學特點決定。大多數(shù)常用抗腫瘤藥物分子量低，在體內(nèi)容易擴散，導致相對平均的組織分布，往往在治療的同時產(chǎn)生毒副作用，嚴重影響這些藥物的抗腫瘤治療價值。同樣，阿霉素用于臨床后最嚴峻的問題也是不良反應，目前臨床上使用的阿霉素主要不良反應是常見脫發(fā)、骨髓抑制(白細胞約于用藥后10日～14日下降至最低點)，心肌毒性發(fā)生率和嚴重程度與本品累積量成正比，遲發(fā)的嚴重噴射性心力衰竭大多在用藥后半年以后或總劑量逾700mg時發(fā)生。常見惡心、嘔吐、口腔炎、食管炎及白細胞減少、脫發(fā)。偶見心肌毒性，并應警惕充血性心力衰竭的可能，有時可發(fā)生淬死。亦可出現(xiàn)胃痛、腹瀉或全胃腸炎、高尿酸血癥和腎臟損害等。靜脈外溢可出現(xiàn)疼痛、組織壞死甚至峰窩組織炎。阿霉素的不良反應大大限制了阿霉素的臨床使用。
為了降低毒性，提高療效，近年來國內(nèi)外開發(fā)了一系列阿霉素新劑型阿霉素脂質(zhì)體、阿霉素微球、阿霉素磁性微球、阿霉素毫微粒、阿霉素乳劑。具有長效作用的貯庫式生物降解的微球，為疾病的治療提供了新的給藥途徑。生物降解緩釋微球注射劑，可每月或數(shù)月注射一次，在體內(nèi)通過聚合物生物降解作用，持續(xù)釋放藥物，維持正常生理活動所需達到的血藥濃度，同時經(jīng)皮下或肌肉注射給藥，避免了口服制劑的肝臟首過效應，具有較好的生物利用度，提高了制劑的順應性，具有顯著的藥物經(jīng)濟學效益。
聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)和聚乳酸(PLA)具有優(yōu)良的生物降解性和組織相容性，作為外科縫合線和藥物載體已經(jīng)使用多年，作為長效控釋載體也有很好的前景。藥物從聚合物微球中緩慢連續(xù)釋放，主要取決于聚合物降解對藥物釋放產(chǎn)生的限速作用。聚乳酸-羥基乙酸是由乳酸和羥基乙酸銨一定比例聚合而成的共聚物，通過調(diào)整其分子量大小、兩單體的比例等即可調(diào)節(jié)聚乳酸-羥基乙酸的親水性及降解周期等。
趙瑞玲等在中國醫(yī)院藥學雜志2004年第24卷第2期P74《阿霉素聚乳酸微球的制備及體外釋藥特性研究》中公開了一種阿霉素聚乳酸微球的制備方法。該微球制備方法包括將阿霉素粉末混懸于聚乳酸的二氯甲烷溶液中，將混懸劑加入含PVA水溶液中乳化，再經(jīng)溶劑揮發(fā)得到微球。所制備的藥物包封率為73.2％，12小時體外累積釋藥量36％。按中華人民共和國藥典2005版第二部附錄XIX E微囊、微球與脂質(zhì)體制劑指導原則中規(guī)定藥物包封率不得小于80％，因此以上公開的制備阿霉素聚乳酸微球的方法制備的聚乳酸微球包封率未達到藥典的要求，且作者只報道了該微球在體外12小時的累積釋放曲線。
而且，聚乳酸是由乳酸聚合而成，其疏水性較強，較難制備水溶性較大的藥物如阿霉素，且在體液中釋放較慢，在聚乳酸主鏈中嵌入羥基乙酸，使主鏈化學鍵組成發(fā)生變化，導致聚合物降解速率加快。聚合物的降解是雙分子水解反應，由水和不穩(wěn)定化學鍵共同參與，反應速率受兩者濃度的影響。對于疏水性較強的聚乳酸，由于其對水分的攝取受到限制，故降解速率緩慢；而聚乳酸與羥基乙酸共聚后，聚合物主鏈親水性增強，酯鍵數(shù)量增多，導致降解速率加快。尤其是在后期，自催化作用使產(chǎn)生的乳酸量顯著增加。
進一步講，由于聚乳酸的疏水性較強，制備載親水性藥物微球在體內(nèi)的釋放較難控制，易引起藥物釋放不規(guī)則，導致血藥濃度在有效濃度下或接近或超過中毒劑量。
載阿霉素微球可以采用多種給藥途徑進行局部緩釋給藥，達到降低全身血藥濃度，提高局部腫瘤組織內(nèi)血藥濃度，從而降低了阿霉素的毒副作用如心臟毒性、骨髓抑制、腎臟毒性等，并且提高了藥物的局部療效。目前文獻報道載阿霉素微球使用較多的給藥途徑是動脈栓塞給藥，微球使用的載體材料包括明膠、羧甲基化葡聚糖、乙基纖維素、白蛋白等。這些微球的載體材料親水性強，對于水溶性藥物如阿霉素的控釋作用較差，12小時內(nèi)藥物釋放均大于80％，較難在局部長時間緩釋給藥。

發(fā)明內(nèi)容
根據(jù)前述，為了達到以上目的，本發(fā)明得到一種阿霉素微球，該阿霉素微球能夠符合中華人民共和國藥典中有關微囊、微球與脂質(zhì)體制劑指導原則中的有關規(guī)定藥物包封率不得小于80％，藥物開始0.5小時內(nèi)的釋放量要求低于40％。該阿霉素微球以聚乳酸-羥基乙酸為微球材料。
因此，本發(fā)明涉及一種含阿霉素的微球，其包括阿霉素和聚乳酸-羥基乙酸。
根據(jù)本發(fā)明所述的阿霉素微球，其中聚乳酸-羥基乙酸分子量在5000-100000之間，優(yōu)選在10000-50000之間。
根據(jù)本發(fā)明所述的阿霉素微球，其中聚乳酸-羥基乙酸中乳酸和羥基乙酸的比例為10∶90至90∶10，優(yōu)選的兩者比例為25∶75至75∶25。
根據(jù)本發(fā)明所述的阿霉素微球，更優(yōu)選的聚乳酸-羥基乙酸的分子量在10000-50000之間，乳酸和羥基乙酸的比例為50∶50。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明單位劑量微球中阿霉素含量為1-20mg，優(yōu)選5mg。
本發(fā)明的再一方面涉及該微球的制備方法，其包括以下步驟a.將阿霉素溶于水中，將該水溶液加入聚乳酸-羥基乙酸的有機溶劑溶液中；b.制成初乳，將該初乳加到含乳化劑的水溶液中，攪拌得復乳(W/O/W)；c.再加入蒸餾水，繼續(xù)攪拌，使有機溶劑揮發(fā)完全，得微球；d.干燥，得到干燥的微球粉末。
在所述的阿霉素微球的制備方法中，有機溶劑為可以溶解聚乳酸-羥基乙酸的有機溶劑或兩種以上該有機溶劑的混合溶劑，優(yōu)選為二氯甲烷、乙酸乙酯或兩者按比例的混合溶劑。
在所述的阿霉素微球的制備方法中，制成初乳的方法優(yōu)選為高速勻漿或超聲分散均勻。
在所述的阿霉素微球的制備方法中，該乳化劑可為聚乙烯醇、明膠、聚乙二醇或類似物，優(yōu)選為聚乙烯醇，更優(yōu)選為6％的聚乙烯醇水溶液。
本發(fā)明的另一方面涉及該微球的用途。用該方法可以通過調(diào)整處方和制備工藝制備得到具有不同粒徑分布范圍和不同釋藥速度的微球，這些微球可以有不同的用途。這些用途包括瘤內(nèi)注射、瘤旁注射、腹腔注射、動脈栓塞等。例如可用這種方法制備得到80％以上粒徑在40-120μm之間的微球，再過篩除去小于40μm和大于120μm的微球，即可得動脈栓塞用微球。


圖1為實施例1所得含阿霉素微球的體外釋放曲線。
圖2為實施例2所得含阿霉素微球的體外釋放曲線。
圖3為實施例3所得含阿霉素微球的體外釋放曲線。
圖4為實施例4所得含阿霉素微球的體外釋放曲線。
圖5為實施例5所得含阿霉素微球的體外釋放曲線。
圖6為阿霉素注射液和實施例5所得阿霉素栓塞用微球的血藥濃藥曲線。
具體實施例方式
實施例1.含5mg的阿霉素微球?qū)⒚顾?mg溶于0.1ml水中，將該水溶液加入聚乳酸-羥基乙酸(分子量10000，乳酸、羥基乙酸比例為50∶50)的二氯甲烷溶液(200mg/ml)中，高速勻漿制成初乳，將該初乳加入4％聚乙烯醇(PVA)水溶液中，攪拌得復乳(W/O/W)，再加入蒸餾水，繼續(xù)攪拌4小時，使有機溶劑揮發(fā)完全，得微球。冷凍干燥得到干燥的微球粉末。該微球包封率為81％，體外釋放曲線見圖1。
實施例2.含5mg阿霉素微球?qū)⒚顾?mg溶于0.1ml水中，將該水溶液加入聚乳酸-羥基乙酸(分子量10000，乳酸、羥基乙酸比例為50∶50)的二氯甲烷溶液(400mg/ml)中，高速勻漿制成初乳，將該初乳加入6％聚乙烯醇(PVA)水溶液中，攪拌得復乳(W/O/W)，再加入蒸餾水，繼續(xù)攪拌4小時，使有機溶劑揮發(fā)完全，得微球。冷凍干燥得到干燥的微球粉末。該微球包封率為87％，體外釋放曲線見圖2。
實施例3.含5mg阿霉素微球?qū)⒚顾?mg溶于0.1ml水中，將該水溶液加入聚乳酸-羥基乙酸(分子量10000，乳酸、羥基乙酸比例為75∶25)的二氯甲烷溶液(300mg/ml)中，高速勻漿制成初乳，將該初乳加入6％聚乙烯醇(PVA)水溶液中，攪拌得復乳(W/O/W)，再加入蒸餾水，繼續(xù)攪拌4小時，使有機溶劑揮發(fā)完全，得微球。冷凍干燥得到干燥的微球粉末。該微球包封率為92％，體外釋放曲線見圖3。
實施例4.含5mg阿霉素微球?qū)⒚顾?mg溶于0.1ml水中，將該水溶液加入聚乳酸-羥基乙酸(分子量10000，乳酸、羥基乙酸比例為75∶25)的二氯甲烷溶液(400mg/ml)中，高速勻漿制成初乳，將該初乳加入6％聚乙烯醇(PVA)水溶液中，攪拌得復乳(W/O/W)，再加入蒸餾水，繼續(xù)攪拌4小時，使有機溶劑揮發(fā)完全，得微球。冷凍干燥得到干燥的微球粉末。該微球包封率為92％，體外釋放曲線見圖4。
實施例5.含5mg阿霉素的栓塞用微球?qū)⒚顾?mg溶于0.1ml水中，將該水溶液加入聚乳酸-羥基乙酸(分子量10000，乳酸、羥基乙酸比例為50∶50)的二氯甲烷溶液(500mg/ml)中，高速勻漿制成初乳，將該初乳加入8％聚乙烯醇(PVA)水溶液中，攪拌得復乳(W/O/W)，再加入蒸餾水，繼續(xù)攪拌4小時，使有機溶劑揮發(fā)完全，得微球。冷凍干燥得到干燥的微球粉末。過篩除去小于40μm和大于120μm的微球。該微球包封率為97％，體外釋放曲線見圖5。
實施例6.犬肝動脈栓塞的藥代動力學試驗將12只試驗犬隨機分為A、B兩組，每組6只，A組為阿霉素溶液組，B組為阿霉素栓塞微球組。將動物用戊巴比妥鈉麻醉，仰臥固定于手術臺上，一側(cè)腹股溝區(qū)剪毛、消毒、鋪巾。切開腹股溝皮膚約3cm長，分離皮下組織和肌肉，暴露并分離股動脈、靜脈和神經(jīng)，用靜脈留置針穿刺股動脈前壁，引入導絲和導管。在X射線透視下，插管至肝左動脈。在透視監(jiān)視下，緩慢灌注阿霉素溶液或阿霉素栓塞微球。給藥后按規(guī)定時間進行股靜脈取血，測定血藥濃度。測得的血藥濃度曲線見圖6。
體外釋放方法精密稱取載阿霉素微球5mg，置于50ml釋放介質(zhì)中，放置到37℃、100rpm速度振蕩的恒溫搖床中，定時取樣1ml，并補充1ml釋放介質(zhì)。將釋放介質(zhì)3000rpm離心10min，用FLUO star OPTIMA熒光分析儀，選擇460-12濾光片作為激發(fā)波長濾光片，545-10濾光片作為發(fā)射波長濾光片，測定阿霉素含量，并計算微球的累積釋放百分率。
權(quán)利要求
1.一種阿霉素微球，其含有阿霉素和聚乳酸-羥基乙酸聚合物。
2.如權(quán)利要求1所述的阿霉素微球，該微球為用于動脈栓塞、瘤內(nèi)注射、瘤旁注射、腹腔注射的微球。
3.權(quán)利要求1或2的微球，其中單位劑量微球含1-20mg阿霉素。
4.權(quán)利要求1-3任一的微球，其中聚乳酸-羥基乙酸聚合物的分子量為5000-100000，聚乳酸-羥基乙酸中乳酸和羥基乙酸比例為10∶90至90∶10。
5.權(quán)利要求4的微球，其中聚乳酸-羥基乙酸聚合物的分子量為1000-50000，聚乳酸-羥基乙酸中乳酸和羥基乙酸比例為50∶50，阿霉素的量為5mg。
6.如權(quán)利要求1所述阿霉素微球的制備方法，其包括a將阿霉素溶于水中，將該水溶液加入聚乳酸-羥基乙酸的有機溶劑溶液中；b制成初乳，將該初乳加到含乳化劑的水溶液中，攪拌得復乳(W/O/W)；c再加入蒸餾水，繼續(xù)攪拌，使有機溶劑揮發(fā)完全，得微球；d干燥，得到干燥的微球粉末。
全文摘要
一種符合藥用標準以聚乳酸－羥基乙酸共聚物為材料制備的阿霉素微球及其制備方法，可以用于動脈栓塞、瘤內(nèi)注射、瘤旁注射、腹腔注射等多種給藥途徑和用途，在提高藥效、降低毒副作用方面表現(xiàn)了較好的性能。
文檔編號A61K47/48GK1939316SQ20051010525
公開日2007年4月4日 申請日期2005年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月28日
發(fā)明者梅興國, 靳浩, 吳誠 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院毒物藥物研究所