專利名稱：一種黃酮在制備促尿酸排泄藥物的用途的制作方法
所屬領(lǐng)域本發(fā)明涉及一種源自中草藥的天然化合物3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮在制備促進(jìn)高尿酸血癥的尿酸排泄藥物的用途，該藥物可用于防治高尿酸血癥及其導(dǎo)致的痛風(fēng)、尿酸性腎結(jié)石和痛風(fēng)性腎病。
背景技術(shù)：
高尿酸血癥系機(jī)體嘌呤代謝紊亂和/或尿酸排泄減少所致的代謝性疾病，可導(dǎo)致痛風(fēng)、尿酸性腎結(jié)石和痛風(fēng)性腎病等組織損傷的一組異質(zhì)性疾病，近年來發(fā)病率正在不斷上升。
根據(jù)陳敏章、邵丙揚(yáng)主編《中華內(nèi)科學(xué)》(1999年、人衛(wèi)版、pp3326)第十七篇第五章關(guān)于“原發(fā)性高尿酸血癥和痛風(fēng)”的論述原發(fā)性高尿酸血癥和痛風(fēng)的形成有以下兩方面，(一)尿酸排泄減少。在原發(fā)性高尿酸血癥和痛風(fēng)病人中占大多數(shù)，約90％左右。病人尿酸生成一般正常，尿酸排泄減少，即使有些病人的尿酸生成增多，但與增多的尿酸相比，其尿酸排泄亦相對減低。(二)尿酸生成增多。在原發(fā)性高尿酸血癥和痛風(fēng)病人中，由尿酸生成增多所致者僅占少數(shù)，一般不超過10％。酶的缺陷為導(dǎo)致尿酸生成增多的原因，其缺陷部位可能有(1)PRPP合成酶活性增高；(2)磷酸核糖焦磷酸酰胺移換酶的濃度或活性增高；(3)次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶部分缺乏；(4)黃嘌呤氧化酶活性增高，加速次黃嘌呤轉(zhuǎn)為黃嘌呤、黃嘌呤轉(zhuǎn)為尿酸(啚1)。
目前，治療高尿酸血癥的藥物常用于抑制尿酸合成的是別嘌醇(Allopurinol)，100mg，一日2-3次，最大可一日600mg。促進(jìn)尿酸排泄的常用藥物有丙磺舒(Probenecid)、磺吡酮(Sulfinpyrazone)、苯溴馬龍(Benzbromarone)等，三者的用藥劑量依次為250mg一日二次，到500mg一日三次；50mg一日二次，到100mg一日三次；25mg/日到100mg/日。后者由于對胃腸道刺激、皮疹、過敏、骨髓毒性等副作用較前兩者低，而對有腎功能不全的病人其療效又優(yōu)于前二者，近年較為常用，但價格較高。研究開發(fā)療效確切、價格低廉的促尿酸排泄藥，仍是醫(yī)藥工作者的任務(wù)。
3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮是中草藥中常見的黃酮類化合物之一，其藥理作用比較廣泛，具有祛痰止咳、鎮(zhèn)痛、抗炎、擴(kuò)張冠狀動脈、降血脂、抗血小板凝聚、抗糖尿病并發(fā)癥等作用，近年來還發(fā)現(xiàn)有抗病毒、抗腫瘤、對多種致癌、促癌物有抑制作用[王艷芳等天然產(chǎn)物研究與開發(fā).2003，15(2)171；呂蔡國外醫(yī)藥.植物藥分冊.2005，20(3)108]。我們查閱了中國知識網(wǎng)(www.cnki.net)、美國國家生物技術(shù)信息中心(www.ncbi.nlm.nih.gov)，也僅發(fā)現(xiàn)它可抑制黃嘌呤氧化酶和黃嘌呤脫氫酶、亦即抑制尿酸形成的作用[Nagao，A.，Seki，M.，Kobayashi，H.Inhibition of xanthine oxidase by flavonoids.Bioscience，Biotechnology，and Biochemistry 1999，631787；Zhu，JX..，Wang，Y.，Kong，LD.，et al.Effects of Biota orientalis extract andits flavonid constituents，quercetin and rutin on serum uric acid levels inoxonate-induced mice and xanthine dehydrogenase and xanthine oxidaseactivities in mouse liver.J.ofEthnopharmacol.2004；93133.]，其活性強(qiáng)度不如別嘌醇；但未見它能促進(jìn)尿酸排泄的報導(dǎo)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮在制備促進(jìn)尿酸排泄藥物方面的應(yīng)用。
本發(fā)明又一個目的是3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮的天然化合物在制備治療高尿酸血癥及其導(dǎo)致的痛風(fēng)、尿酸性腎結(jié)石和痛風(fēng)性腎病藥物中的應(yīng)用。
3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮可以制成口服藥物，可用于預(yù)防和治療高尿酸血癥及其導(dǎo)致的痛風(fēng)、尿酸性腎結(jié)石和痛風(fēng)性腎病。
1.技術(shù)方案和有益效果我們從槐米中分離提取獲得黃酮化合物3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮，純度為≥98％，熔點在305C--315C的黃色粉末。以此用蒸餾水配制，供以下藥理試驗用。
試驗一3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮對次黃嘌呤誘致小鼠高尿酸血癥的影響以尿酸的前體化合物次黃嘌呤1000mg/kg腹腔注射給體重在20g-22g的雄性小鼠，造成高尿酸血癥模型。在造模前2天，分別口飼給予3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮15mg/kg、30mg/kg、60mg/kg(分別稱為小、中、大劑量的給藥組)，別嘌醇50mg/kg(別嘌醇組)或丙磺舒200mg/kg(丙磺舒組)，每日一次，並在造模前半小時再給藥一次；另設(shè)不給任何處理、僅給等體積蒸餾水的正常對照組(正常組)。在造模后的第三小時，分別采集每亇動物的尿液和血液，按北京化工廠“尿酸試盒”(磷鎢酸比色法)的測定步驟，分別測定尿液和血液中的尿酸含量。從表1的結(jié)果可以看出，黃嘌呤氧化酶抑制藥別嘌醇非常顯著抑制血液和尿液中的尿酸濃度，而3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮與促尿酸排泄藥丙磺舒的作用相似，能降低血尿酸濃度、提高尿尿酸濃度；提示3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮具有促尿酸排泄的功效。
表1. 3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮對次黃嘌呤誘致小鼠高尿酸血癥的影響

試驗二.3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮對次黃嘌呤和尿酸誘致大鼠高尿酸血癥的影響以次黃嘌呤600mg/kg或尿酸500mg/kg分別腹腔注射給Wistar種大鼠，造成高尿酸血癥模型。在造模前二天，分別口飼給予3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮50mg/kg或100mg/kg劑量，每日二次；造模前半小時再口飼給藥一次。造模同時，每鼠給予口飼蒸餾水6ml，置于代謝籠中，每籠一只，采集24小時尿液；並在造模第3小時采血。另設(shè)正常動物對照組。將各組動物的血、尿樣本，依試驗(二)方法，測定尿和血液中尿酸含量。結(jié)果如表2所示3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮均能顯著提高次黃嘌呤或尿酸造模大鼠24小時尿液中尿酸的排泄總量；而對次黃嘌呤性造模大鼠第3小時血尿酸濃度無顯著影響，對尿酸性造模大鼠血尿酸濃度有降低傾向。提示3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮主要作用在尿酸的排泄，而不是抑制尿酸的合成。
表2. 3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮對次黃嘌呤和尿酸誘致大鼠高尿酸血癥的影響

以上結(jié)果表明3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮具有顯著促進(jìn)尿酸排泄的作用。
試驗三對高尿酸血癥的促尿酸排泄取純度≥98％、熔點在305℃-315℃的3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮粉末，用蒸餾水配制，供動物口飼給藥用。
取體重在250g-300g之間的健康雄性Wistar大鼠，以尿酸500mg/kg劑量腹腔注射誘致高尿酸血癥。造模前二天開始，分別口飼給予3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮(25、50、100、200)mg/kg劑量，或口飼給予促尿酸排泄藥苯溴馬龍10mg/kg，或口飼給予抑制尿酸合成藥別嘌醇50mgk/g，均每日一次，造模前半小時再給藥一次。另設(shè)正常動物對照組。與造模同時，每只動物口飼蒸餾水6ml，以水負(fù)荷。將動物分別單亇置于代謝籠中，收集24小時尿液；並在造模后24小時時，采集血液。按試驗(一)的方法，測定尿和血液樣本的尿酸含量。結(jié)果如表3所示給予所試劑量的3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮，均能使24小時尿液中尿酸的排泄量增加，似有一定的量效關(guān)系；促尿酸排泄藥苯溴馬龍也能使尿液中的尿酸排泄量增加，抑制尿酸合成藥別嘌醇未能使尿液中的尿酸排泄增加。就造模后第24小時的血尿酸濃度而論，給予各種劑量的3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮和苯溴馬龍，血尿酸濃度比造模組均有所降低，而別嘌醇則無明顯影響。結(jié)果說明，3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮具有促尿酸排泄的作用。從表3的結(jié)果提示，100mg/k g 3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮的促尿酸排泄作用強(qiáng)表3. 3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮對尿酸造模大鼠尿尿酸排泄的促進(jìn)作用

度，相當(dāng)于10mg/kg苯溴馬龍；而10mg/kg苯溴馬龍系該藥相當(dāng)于人的臨床等效劑量，從中可以推測，3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮的臨床日用量為1000mg。
2.口服劑型的制備1).取1kg的3，3’，4’5，7-五羥基黃酮，用粉碎機(jī)研磨，所得粉末過100目篩，加適量硬脂酸鎂，混勻，裝入2號膠囊，每亇膠囊含本品250mg，供口服用。
2).取2.5kg的3，3’，4’5，7-五羥基黃酮，用粉碎機(jī)研磨，所得粉末過100目篩，加入羧甲基淀粉和微晶纖維素0.5kg，混勻，干壓制片，制成10,000片，每片含本品250mg，供口服用。
本發(fā)明的特點1.發(fā)現(xiàn)3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮能顯著促進(jìn)腎臟對尿酸的排泄；，100mg/k g 3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮的促尿酸排泄作用強(qiáng)度，相當(dāng)于10mg/kg苯溴馬龍。
2.3，3’，4’5，7-五羥基黃酮可機(jī)械研磨成精細(xì)粉體，能方便制成片劑、膠囊等口服制劑；3.制備3，3’，4’5，7-五羥基黃酮的資源豐富，成本低廉，每公斤提取的成本不高于300元人民幣，以人每日用量1.0克計算，花費(fèi)0.30元；而現(xiàn)在市售的促尿酸排泄藥苯溴馬龍，每10片38元，一日需1-2片，日花費(fèi)3.8元至7.4元。3，3’，4’5，7-五羥基黃酮加上生產(chǎn)營銷費(fèi)用，病人每日的藥費(fèi)將只是苯溴馬龍的1/10。
權(quán)利要求
1.3，3’，4’，5，7-五羥基黃酮在制備促進(jìn)尿酸排泄藥物的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中所述的藥物防治高尿酸血癥。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中所述的藥物防治高尿血癥導(dǎo)致的痛風(fēng)、尿酸性腎結(jié)石和痛風(fēng)性腎病。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3的用途，其中所述的藥物為口服藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種源自中草藥的天然化合物3，3’，4’，5，7－五羥基黃酮在制備促進(jìn)高尿酸血癥的尿酸排泄藥物的用途，該藥物可用于防治高尿酸血癥及其導(dǎo)致的痛風(fēng)、尿酸性腎結(jié)石和痛風(fēng)性腎病。本發(fā)明的特點發(fā)現(xiàn)3，3’，4’，5，7－五羥基黃酮能顯著促進(jìn)腎臟對尿酸的排泄；可機(jī)械研磨成精細(xì)粉體，能方便制成片劑、膠囊等口服制劑；制備成本低廉，資源豐富。
文檔編號A61P19/06GK1899282SQ20051008504
公開日2007年1月24日 申請日期2005年7月20日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月20日
發(fā)明者霍海如, 李蘭芳, 郭淑英, 譚洪根, 姜廷良 申請人:北京唐氏中藥研究中心