專利名稱：丹參和川芎中藥有效部位的提取方法
技術領域：
本發(fā)明涉及由丹參和川芎組成的中藥復方冠心寧有效部位的提取方法。
背景技術：
丹參和川芎及其包含此藥的各種制劑是臨床常用的治療心腦血管病中藥。自80年代對由丹參、川芎組成的復方制成的水針進行了臨床研究，通過了387例的療效分析，顯示由活血藥丹參、川芎組成的復方針劑治療冠心病心絞痛確有較好的療效，治療后心絞痛病癥有效率為91.73％，不正常心電圖有效率為44.39％，心絞痛癥狀輕、中、重度不同分級中有效率大致相同，提示該水針不僅對輕、中型心絞痛病例有效而且對重型心絞痛病例同樣有較好的療效，治療后心絞痛癥狀普遍地在較短時間內(nèi)(1～4周)得到控制。對5例因該水針治療的冠心病患者進行治療前后容量圖和心電圖的現(xiàn)象，結(jié)果初步說明該水針具有一定的強心作用，有增加心搏出量的作用，以及對細小動脈有擴張作用。從而進一步說明了該水針具有改善冠脈循環(huán)和抗血凝作用，能顯著增加冠脈血流量，改善心肌供血，預防和減少血栓的形成，使栓塞范圍縮小，病變程度減輕。
目前，對丹參的水溶性成分進行了系統(tǒng)研究，分離得到丹酚酸A(1)、B(2)、C(3)、D(4)、E(5)、F(8)、G(9)、H(11)、I(12)、J(13)，迷迭香酸(6)、紫草素(7)、異丹酚酸(10)、迷迭香酸的葡萄糖甙(14)等酚酸類化合物。(Lian-niang.Li，J.chinese pharmacenticalsciences 1997.6，57～64)。藥理實驗結(jié)果說明這些酚酸類化合物具有很強的抗脂質(zhì)過氧化、抗血栓、改善血液循環(huán)等作用。對川芎的水溶性成分也有較詳細的研究，從川芎中分離提取的川芎嗪和阿魏酸，已經(jīng)合成，并廣泛應用于臨床。
目前，由丹參和川芎組成的復方有效部位的劑型為單一水針；因酚酸類化合物化學性質(zhì)的不穩(wěn)定，在制備和儲存過程中易分解變質(zhì)，所以目前臨床用的水針所含的成分主要為活性較弱的丹參素和原兒茶醛，而活性較強的其他丹參酚酸類成分，如丹酚酸B、阿魏酸因工藝受熱時間長引起分解變質(zhì)而所剩無幾，藥理活性大打折扣。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明既是為了提供一種性能穩(wěn)定、藥理活性好的冠心寧即丹參和川芎中藥有效部位的提取方法。
為達到發(fā)明目的本發(fā)明采用的技術方案是一種丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，其特征在于所述的丹參和川芎質(zhì)量比為1∶1，所述的方法按如下步驟進行(1)丹參和川芎飲片加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得藥液；(2)對步驟(1)所得藥液進行純化；(3)步驟(2)所得藥液在30～80℃下減壓濃縮，干燥即得丹參和川芎中藥有效部位提取物。
所述的純化除雜質(zhì)步驟為醇沉。
所述的純化除雜質(zhì)步驟為上大孔吸附樹脂洗脫。
所述的純化除雜質(zhì)步驟也可為醇沉與上大孔吸附樹脂洗脫交替進行。
所述的大孔吸附樹脂為苯乙烯型大孔吸附樹脂。
所述的步驟(3)中干燥為減壓干燥、在30～80℃下進行。
所述的步驟(3)中干燥為噴霧干燥。
特別的，所述的方法按如下步驟進行(1)丹參和川芎飲片加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得藥液；(2)步驟(1)所得藥液在30～80℃下減壓濃縮至濃度為0.5～5g/mL，濃縮液加入醇至含醇量為40～90％，靜置，醇沉1～5次，吸取上清液，過濾，即得藥液；(3)步驟(2)所得藥液在30～80℃下減壓濃縮，在30～80℃下減壓干燥即得丹參和川芎中藥有效部位提取物。
或者，所述的方法按如下步驟進行(1)丹參和川芎飲片在質(zhì)量為藥材質(zhì)量3～20倍的水或醇的水溶液中，在40～100℃下提取1～5次后，合并提取液，即得藥液；(2)步驟(1)所得藥液離心后上大孔吸附樹脂，用去離子水洗至流出液無α-萘酚反應后，再用10～90％乙醇洗脫至洗脫液無明顯的酚羥基反應；(3)所得藥液在30～80℃下減壓濃縮，在30～80℃下減壓干燥即得所述的丹參和川芎中藥有效部位。
進一步，所述的方法按如下步驟進行a)丹參和川芎飲片在質(zhì)量為藥材質(zhì)量8～14倍的水或50～85％的乙醇水溶液中，在40～100℃下提取2～3次后，合并提取液，即得藥液；b)步驟(1)所得藥液在40～65℃下減壓濃縮至濃度為1.5～3g/mL，濃縮液加入乙醇至含醇量為60～85％，靜置，醇沉2～3次，過濾，即得藥液；
c)所得藥液在40～65℃下減壓濃縮，40～65℃下減壓干燥即得所述的丹參和川芎中藥有效部位。
又或者，所述的方法按如下步驟進行(1)丹參和川芎飲片在質(zhì)量為藥材質(zhì)量3～20倍的水或醇的水溶液中，在40～100℃下提取1～5次后，合并提取液，即得藥液；(2)步驟(1)所得藥液在30～80℃下減壓濃縮至濃度為0.5～5g/mL，濃縮液加入醇至含醇量為40～90％，靜置，醇沉1～5次，吸取上清液，即得藥液；(3)步驟(2)所得藥液經(jīng)減壓回收乙醇后加適量水溶解所得藥液，離心后，藥液先上大孔吸附樹脂，用去離子水洗至流出液無α-萘酚反應后，再用10～90％乙醇洗脫至洗脫液無明顯的酚羥基反應，收集洗脫液；(4)所得洗脫液在30～80℃下減壓濃縮，30～80℃下減壓干燥即得所述的丹參和川芎中藥有效部位。
進一步，所述的方法按如下步驟進行(1)丹參和川芎飲片在質(zhì)量為藥材質(zhì)量8～14倍的水或50～85％的乙醇水溶液中，在40～100℃下提取2～3次后，合并提取液，即得藥液；(2)步驟(1)所得藥液在40～65℃下減壓濃縮至濃度為1.5～3g/mL，濃縮液加入乙醇至含醇量為60～85％，靜置，醇沉1～3次，吸取上清液，過濾，即得藥液；(3)步驟(2)所得藥液經(jīng)減壓回收乙醇后加適量水溶解所得藥液，離心后，藥液先上苯乙烯型大孔吸附樹脂，用去離子水洗至流出液無α-萘酚反應后，再用10～90％乙醇洗脫至洗脫液無明顯的酚羥基反應，收集洗脫液；(4)所得洗脫液在40～65℃下減壓濃縮，40～65℃下減壓干燥即得所述的丹參和川芎中藥有效部位。
本發(fā)明所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法的有益效果主要體現(xiàn)在(1)工藝過程簡單，不需高溫高壓和特殊設備，安全，易于操作，且成本低，應用本發(fā)明的提取方法，可以得到除去大量蛋白質(zhì)，糖類，淀粉等雜質(zhì)，總酚酸的含量高，雜質(zhì)少，由于嚴格控制了提取及濃縮過程的溫度，其有效部位含量在60％以上，其中丹酚酸B的含量占有效部位的5～50％，生理活性強；(2)利用本發(fā)明方法得到的丹參、川芎總酚酸不但質(zhì)量穩(wěn)定，而且富含中藥丹參和川芎的活性成分，具有抗腦缺血，抗細胞凋亡等藥理作用，因此可以用來制備療效好，安全可靠的防治心腦血管疾病藥物。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行進一步描述實施例1丹參、川芎有效部位提取丹參、川芎各5kg飲片加去離子水在50℃浸泡24小時，60℃溫提3次，各加80L、60L、60L水，每次均溫提2小時，提取液在50℃減壓濃縮至10L，冷卻后加80％乙醇14L，靜置過夜，過濾。濾液減壓回收乙醇，所得濃縮液通過AB-8型大孔吸附樹脂，用去離子水洗至α-萘酚反應，繼續(xù)用70％乙醇洗脫至洗脫液加三氯化鐵鐵氰化鉀試劑無明顯的酚羥基反應，洗脫液在40℃下減壓濃縮至適量，40℃下減壓干燥，即得150克丹參和川芎總酚酸。
總酚酸和丹酚酸B的檢測方法
(1)丹酚酸B用HPLC法測定，檢測波長285nm，標準品丹酚酸B由中國藥品生物制品檢定所提供。
(2)丹參和川芎總酚酸含量＝F(A-B)-B其中A為分光光度法測定以丹酚酸B為對照計算的總酚酸含量B為高效液相色譜法測定的丹酚酸B含量F為校正因子總酚酸除了丹酚酸B(分子量718)外，還含有原兒茶醛(分子量138)、丹參素(分子量162)、紫草酸(分子量538)、咖啡酸(分子量180)、阿魏酸(分子量194)等酚酸類化合物，他們之間的分子量相差較大。以丹酚酸B為對照用分光光度法測定的總酚酸含量結(jié)果偏高，主要是由于其他酚酸類化合物的分子量低于丹酚酸B的分子量所致。因此，用上述6個酚酸類化合物平均分子量與丹酚酸B分子量的比值作為校正因子，以此校正后的總酚酸含量與用HPLC法分別測定原兒茶醛等6個酚酸類化合物含量之和基本一致。
阿魏酸、原兒茶醛、丹參素、咖啡酸、紫草酸、丹酚酸B由中國藥品生物制品檢定所提供。
檢測結(jié)果每克干浸膏含0.325克丹酚酸B；每克干浸膏含0.826克總酚酸。
實施例2丹參、川芎有效部位提取丹參、川芎各5kg飲片加水在100℃加熱提取3次。第一次加80L水，加熱2小時，第二、三次各加60L水，分別加熱1.5小時。提取液在60℃減壓6.7L，冷卻后加95％乙醇至含醇量達75％，靜置過夜，過濾。濾液減壓回收乙醇，60℃減壓濃縮至適量，60℃下減壓干燥，即得丹參和川芎總酚酸干粉1.3Kg。
實施例3丹參、川芎有效部位提取丹參、川芎各5kg飲片加70％乙醇回流提取3次，第一次加70％乙醇40L，加熱2小時，第二、三次各加30L水，分別加熱2小時。提取液在60℃減壓6.7L，冷卻后加95％乙醇至含醇量達75％，靜置過夜，過濾。濾液減壓回收乙醇，濃縮至5L，冷卻后加95％乙醇至含醇量達90％，靜置過夜，過濾，濾液60℃減壓濃縮至適量，噴霧干燥，即得丹參和川芎總酚酸干粉0.7Kg。
權利要求
1.一種丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，其特征在于所述的丹參和川芎質(zhì)量比為1∶1，所述的方法按如下步驟進行(1)丹參和川芎飲片加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得藥液；(2)對步驟(1)所得藥液進行純化除雜質(zhì)；(3)步驟(2)所得藥液在30～80℃下減壓濃縮，干燥即得丹參和川芎中藥有效部位提取物。
2.如權利要求1所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，所述的純化除雜質(zhì)步驟為醇沉。
3.如權利要求1所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，所述的純化除雜質(zhì)步驟為上大孔吸附樹脂洗脫。
4.如權利要求1所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，所述的純化處理步驟為醇沉與上大孔吸附樹脂洗脫交替進行。
5.如權利要求3或4所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，其特征在于所述的大孔吸附樹脂為苯乙烯型大孔吸附樹脂。
6.如權利要求1所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，其特征在于所述的步驟(3)中干燥為減壓干燥，在30～80℃下進行。
7.如權利要求1所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，其特征在于所述的步驟(3)中干燥為噴霧干燥。
8.如權利要求2所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，所述的方法按如下步驟進行(1)丹參和川芎飲片加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得藥液；(2)步驟(1)所得藥液在30～80℃下減壓濃縮至濃度為0.5～5g/mL，濃縮液加入醇至含醇量為40～90％，靜置，醇沉1～5次，吸取上清液，過濾，收集藥液；(3)步驟(2)所得藥液在30～80℃下減壓濃縮，在30～80℃下減壓干燥即得丹參和川芎中藥有效部位提取物。
9.如權利要求3所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，所述的方法按如下步驟進行(1)丹參和川芎飲片加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得藥液；(2)步驟(1)所得藥液離心后上大孔吸附樹脂，用去離子水洗至流出液無α-萘酚反應后，再用10～90％乙醇洗脫至洗脫液無明顯的酚羥基反應；(3)步驟(2)所得藥液在30～80℃下減壓濃縮，在30～80℃下減壓干燥即得丹參和川芎中藥有效部位提取物。
10.如權利要求4所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，其特征在于所述的方法如下(1)丹參和川芎飲片加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得藥液；(2)步驟(1)所得藥液在30～80℃下減壓濃縮至濃度為0.5～5g/mL，濃縮液加入醇至含醇量為40～90％，靜置，醇沉1～5次，吸取上清液，過濾，收集藥液；(3)步驟(2)的藥液經(jīng)30～80℃減壓回收乙醇后加適量水溶解所得藥液離心后先上大孔吸附樹脂，用去離子水洗至流出液無α-萘酚反應后，再用10～90％乙醇洗脫至洗脫液無明顯的酚羥基反應；(4)步驟(3)所得洗脫液在30～80℃下減壓濃縮，在30～80℃下減壓干燥即得丹參和川芎中藥有效部位提取物。
11.如權利要求7所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，其特征在于所述的方法按如下步驟進行(1)丹參和川芎飲片在質(zhì)量為藥材質(zhì)量8～14倍的水或60～85％的乙醇水溶液中，在40～100℃下提取2～3次后，合并提取液，即得藥液；(2)步驟(1)所得藥液在40～65℃下減壓濃縮至濃度為1.5～3g/mL，濃縮液加入乙醇至含醇量為60～85％，靜置，醇沉1～3次，吸取上清液，過濾，即得藥液；(3)所得藥液在40～65℃下減壓濃縮，40～65℃下減壓干燥即得所述的丹參和川芎中藥有效部位。
12.如權利要求9所述的丹參和川芎中藥有效部位的提取方法，其特征在于所述的方法按如下步驟進行(1)丹參和川芎飲片在質(zhì)量為藥材質(zhì)量8～14倍的水或60～85％的乙醇水溶液中，在40～100℃下提取2～3次后，合并提取液，即得藥液；(2)步驟(1)所得藥液在40～65℃下減壓濃縮至濃度為1.5～3g/mL，濃縮液加入乙醇至含醇量為60～85％，靜置，醇沉1～3次，吸取上清液，過濾，即得藥液；(3)步驟(2)所得藥液經(jīng)30～80℃減壓回收乙醇后加適量水溶解所得的藥液離心后先上苯乙烯型大孔吸附樹脂，用去離子水洗至流出液無α-萘酚反應后，再用10～90％乙醇洗脫至洗脫液無明顯的酚羥基反應，收集洗脫液；(4)所得洗脫液在40～65℃下減壓濃縮，40～65℃下減壓干燥即得所述的丹參和川芎中藥有效部位。
全文摘要
本發(fā)明提供了冠心寧中藥有效成分的提取方法，所述的冠心寧以丹參和川芎質(zhì)量比1∶1的組合物為原料，所述的方法按如下丹參和川芎飲片加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量3～20倍的水或醇的水溶液，在40～100℃下提取1～5次，合并提取液，即得藥液；所得藥液進行純化在30～80℃下減壓濃縮，干燥即得丹參和川芎中藥有效部位提取物。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在工藝過程簡單，不需高溫高壓和特殊設備，安全，易于操作，成本低，總酚酸的含量高，雜質(zhì)少，其有效部位含量在60％以上，生理活性強；得到的丹參、川芎總酚酸質(zhì)量穩(wěn)定，富含中藥丹參和川芎的活性成分，具有抗腦缺血，抗細胞凋亡等藥理作用，因此可以用來制備療效好，安全可靠的防治心腦血管疾病藥物。
文檔編號A61P9/10GK1679859SQ20051004929
公開日2005年10月12日 申請日期2005年1月31日 優(yōu)先權日2005年1月31日
發(fā)明者吳碧元, 管敏文, 桑睿, 沈瑩 申請人:正大青春寶藥業(yè)有限公司