專利名稱：白礬在制備治療性傳播疾病及避孕的陰道用藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及白礬在制備治療性傳播疾病及避孕的陰道用藥物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
白礬(potash alum，alumininm potassium sulphate)是載入中華人民共和國(guó)藥典的藥物。白礬別名明礬、鉀明礬，它為硫酸炎類礦物明礬石加工提煉而成，主含硫酸鋁鉀KAL(SO4)2·12H2O其中K2O 11.37％，AI2O336.9％，SO238.66％，H2O 13.05％，為無色透明結(jié)晶，易溶于水或甘油，熔點(diǎn)為105℃。味酸、澀、性寒。功能與主治外用解毒，燥濕止癢；內(nèi)服止血止瀉，祛痰開閉。用于濕疹、疥癬、耵耳流膿，鼻衄齒衄、鼻息肉等。
性傳播疾病是通過性行為傳播的疾病，它包括20多種性病。目前國(guó)內(nèi)重點(diǎn)檢測(cè)的STD為8種，即淋病、非淋病性尿道炎、梅毒、尖銳濕疣、軟性下疳、生殖器皰疹、性病性淋巴肉芽腫和艾滋病。STD的發(fā)病率在全球乃至我國(guó)呈逐年上升趨勢(shì)，如何遏制濕研究的熱點(diǎn)課題。陰道避孕(Vaginal contral eption)是人類控制生育方法之一。七十年代隨著口服避孕藥及宮內(nèi)節(jié)育器相繼發(fā)展和廣泛應(yīng)用，從流行病學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)，由它們所引起的全身性副反應(yīng)和使用禁忌癥已日益引起人們的關(guān)注，因而，人們又開始轉(zhuǎn)向安全性大，副反應(yīng)小的外用的避孕藥。由于陰道是性生活、生殖受孕的通道，所以經(jīng)陰道用藥是唯一可能達(dá)到預(yù)防STD、阻斷受孕的途徑，而目前國(guó)內(nèi)外尚無理想的藥物問世。硫酸鋁鉀陰道制劑可達(dá)到防治多種STD和抗生育的目的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的問題是提供白礬的一種用途，用白礬制備的陰道用藥物可以治療性傳播疾病及避孕。
本發(fā)明提供的技術(shù)方案是白礬在制備治療性傳播疾病及避孕的陰道用藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明將白礬作為有效成分用于制備栓劑、海綿劑、軟膏劑、硬膏劑、涂摸劑或噴霧劑。
本發(fā)明還提供了一種治療性傳播疾病及避孕的陰道用栓劑，含有0.2-1.0g白礬、0.5-3.0g半合成脂肪酸、0.1-0.9g魚肝油和0.01-0.09g VitE。
本發(fā)明為了研制出一種既能防治性傳播疾病又有避孕作用的陰道制劑，從近百種中西藥物中篩選出中藥白礬是一種理想的藥物。它既是載入中國(guó)藥典中的藥物，又是食品添加劑，具有抗菌、凝固蛋白質(zhì)和抗生育(小鼠灌胃)等作用。本發(fā)明采用白礬(硫酸鋁鉀)溶液進(jìn)行體外試驗(yàn)，證實(shí)1、有強(qiáng)的抑制淋球菌生長(zhǎng)作用(MIC＝4.5-6.0g/L)；2、抑制滴蟲活動(dòng)；3、對(duì)生殖器皰疹病毒(HSV)有預(yù)防感染作用。4、能使人精液迅速凝集，制止精子活動(dòng)及破壞精子結(jié)構(gòu)，阻止精子進(jìn)入子宮內(nèi)，有避孕作用。制止精子活動(dòng)。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1用白礬制備治療性傳播疾病及避孕的陰道用藥物將3.0g半合成脂肪酸甘油醇加熱融化后加入0.3g魚肝油、0.02g VitE及0.8g白礬，攪拌至40℃左右倒入栓劑模具中，放冷后刮模，在5℃條件下放置19分鐘后脫模制得栓劑。
實(shí)施例2用白礬制備治療性傳播疾病及避孕的陰道用藥物白礬加入賦形劑，按常規(guī)方法制成陰道噴霧劑。
實(shí)施例3用白礬制備治療性傳播疾病及避孕的陰道用藥物白礬加入賦形劑，按常規(guī)方法制成陰道海綿劑。
實(shí)施例3用白礬制備治療性傳播疾病及避孕的陰道用藥物白礬加入賦形劑，按常規(guī)方法制成陰道凝膠劑。
實(shí)施例4將0.6g半合成脂肪酸甘油醇在水浴上加熱融化后加入0.9g魚肝油、0.09g VitE及0.3g白礬，攪拌至40℃左右倒入栓劑模具中，放冷后刮模，在10℃條件下放置5分鐘后脫模制得栓劑。
一、白礬抗HSV-2的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究1.實(shí)驗(yàn)材料1.1細(xì)胞病毒HSV-2標(biāo)準(zhǔn)株為武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院病毒所保存，在vero細(xì)胞內(nèi)活化后備用。
1.2細(xì)胞vero細(xì)胞為武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院病毒所保存。細(xì)胞生長(zhǎng)液為10％小血清RPMI-1640、100U/ml青霉素、100mg/L鏈霉素，細(xì)胞維持液除含2％小牛血清外，其他成分同細(xì)胞生長(zhǎng)液。
1.3主要試劑小牛血清為Gibco公司產(chǎn)、RPM-1640和MTT為sigma公司產(chǎn)品，其他試劑為市售產(chǎn)品。
1.4藥物白礬微型陰道栓由硫酸鉀液與栓劑基質(zhì)液按不同比例充分混合(37℃)在特型模板上制成栓劑，每粒藥栓含生藥分別為0.1g、0.2g或0.4g，基質(zhì)對(duì)照栓僅含基質(zhì)。
1.4動(dòng)物5周齡Havtley雌性腺鼠體重170～190g，購(gòu)于武漢生物制品研究所動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。
2.實(shí)驗(yàn)方法2.1白礬體外抗HSV-2感染作用2.1.1藥物抗病毒生物合成作用 將100TCID50/ml滴度的HSV-2加入單層vero細(xì)胞板中，每孔50ul，37℃，5％CO2中吸附2小時(shí)。再將6種濃度硫酸鉀液加入已換過液的細(xì)胞板中，37℃，5％CO2中培養(yǎng)。逐日觀察細(xì)胞病變(CPE)。
2.1.2.藥物直接滅活病毒作用 將100TCID50/ml滴度的HSV-2與不同濃度的硫酸鉀液37℃，5％CO2中作用2小時(shí)。然后將混合液接種于單層vero細(xì)胞中，孵育1.5小時(shí)后用2％1640培養(yǎng)液維持細(xì)胞生長(zhǎng)，逐日觀察細(xì)胞病變2.1.3藥物抗病毒吸附作用 將不同濃度的硫酸鉀液加入細(xì)胞單層中，37℃，5％CO2孵育8小時(shí)，隨后棄上清，接種病毒，逐日觀察細(xì)胞病變。
2.2白礬對(duì)豚鼠生殖器HSV-2感染的保護(hù)作用動(dòng)物在按體重分4組，每組10只，隔離飼養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)開始日將含藥量分別為0.1g(小計(jì)量)、0.2g(中計(jì)量)及0.4g(大計(jì)量)的藥栓及其基質(zhì)對(duì)照栓輕柔塞入不同組豚鼠陰道內(nèi)，半小時(shí)后栓劑完全溶化后用微量加樣器一次性陰道內(nèi)接種病毒各50ul，后逐日觀察外生殖器的病變發(fā)展，病變程度及每24h陰道內(nèi)病毒滴度測(cè)定。
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1白礬體外抗HSV-2感染作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1.1藥物抗HSV-2生物合成作用HSV-2對(duì)vero細(xì)胞CPE表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹、變圓、有巨細(xì)胞和細(xì)胞融合。藥物隨著濃度的增加，CPE降低，病毒抑制率升高，有量效關(guān)系。結(jié)果見表1表1藥物抗HSV-2生物合成作用

3.1.2藥物對(duì)HSV的直接滅活作用滅活實(shí)驗(yàn)顯示藥物對(duì)HSV-2有直接滅活作用。結(jié)果見表3表2藥物對(duì)HSV的直接滅活作用

3.1.3藥物對(duì)HSV-2的拮抗作用表3藥物對(duì)HSV-2的拮抗作用

3.2白礬體內(nèi)抗HSV-2感染作用的動(dòng)物室驗(yàn)結(jié)果基質(zhì)對(duì)照接種病毒為臨床癥狀約4～5天出血，6～5天病變最為明顯最后結(jié)痂病自愈，病程10～14天，用藥劑量組臨床癥狀明顯減輕，病程縮短，部分無癥狀，陰道取樣病毒感染等濃度下降，大劑量組均無臨床病狀，每次陰道取樣，在細(xì)胞培養(yǎng)均拔望病毒引起的空泡病變。
二、白礬排制淋球藥濃試驗(yàn)1.標(biāo)準(zhǔn)株使用淋菌標(biāo)準(zhǔn)株(A、B、C、D、E)及武漢地區(qū)株(由武漢市皮膚性病防治中心提供)
2.實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果將淋球菌標(biāo)準(zhǔn)株接種于含有不同濃度藥物的瓊脂平皿上，藥物濃度小時(shí)細(xì)菌生長(zhǎng)，濃度大時(shí)細(xì)菌生長(zhǎng)被抑制，據(jù)此可測(cè)出藥物對(duì)該菌的最小抑菌濃度(MIC)。制備T-M培養(yǎng)基25個(gè)(開標(biāo)準(zhǔn)株用)。制備含有8、4、2、1、0.5g/L藥物濃度的培養(yǎng)基?；A(chǔ)為T-M培養(yǎng)基。開標(biāo)準(zhǔn)株29402、29403、29404、29405及地方株2株純培養(yǎng)，于36℃CO2培養(yǎng)24小時(shí)。用接種環(huán)刮下菌苔，用T-M肉湯制成1×107/ml(Mc Farland管比濁)的菌懸液。用特制接種環(huán)挑起菌液(約1～2μl)接種到含不同濃度藥物的瓊脂平皿上。放入CO2培養(yǎng)箱中以35℃、5％的CO2條件培養(yǎng)，24小時(shí)取出平皿，以美國(guó)疾病控制中心(center ofdisease dontrol，DCD)判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判斷并計(jì)算最低抑菌濃度(minimum inhibitoryconcentration，MIC)結(jié)果為29402MIC6.5g/L、29403MIC5.0g/L、29404MIC5.0g/L、DFZ5MIC4.5g/L、DFZ6MIC6.0g/L。
三、硫酸鋁鉀溶液抑制陰道毛滴蟲實(shí)驗(yàn)研究使用臨床獲取的滴蟲放入diamonds培養(yǎng)基，并加入500ūg/ml放線菌酮抑制酵母菌及念珠菌的生長(zhǎng)，從而獲得陰道毛滴蟲的純培養(yǎng)。置37℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí)用無菌滴管滲入管底吸取0.05ml，分別滴入含硫酸鋁鉀濃度分別為10％，5％，4％，3％，2％的Dulbecco’s磷酸緩沖液(PBS)試管及含0.5％的滅滴靈液試管種空白對(duì)照管中，5分鐘時(shí)使用懸滴發(fā)用光學(xué)顯微鏡下觀察滴蟲的運(yùn)動(dòng)、纖毛的活動(dòng)結(jié)果+2％濃度時(shí)滴蟲有小塊凝集團(tuán)，有部分游離，向前運(yùn)動(dòng)，纖毛活動(dòng)++3％-5％濃度時(shí)滴蟲凝集團(tuán)大小不等，只能原地押運(yùn)尾不能向前運(yùn)動(dòng)，纖毛活動(dòng)+++10％濃度時(shí)滴蟲凝集團(tuán)呈大塊狀，無游離滴蟲，纖毛不活動(dòng)四、白礬體外排制精子活動(dòng)實(shí)驗(yàn)及結(jié)果采用8份健康成人精液(精子計(jì)數(shù)大于6*107個(gè)/ml，活動(dòng)率大于70％，活力II-III度，液化時(shí)間在20分鐘以內(nèi)，畸形精子數(shù)小于20％)，排精后半小時(shí)開始實(shí)驗(yàn)。分別滴入含硫酸鋁鉀濃度分別為10％，5％，4％，3％，2％的Dulbecco’s磷酸緩沖液(PBS)試管及空白對(duì)照管中，1分鐘時(shí)部用肉眼觀察，5分鐘時(shí)有光學(xué)顯微鏡下觀察結(jié)果濃度達(dá)到2％時(shí)硫酸鋁鉀溶液對(duì)液化的精液有明顯的凝集作用，藥物濃度與凝集程度呈正比，肉眼與鏡下觀察的結(jié)果一致，濃度達(dá)到4％時(shí)已見不到游離精子。而對(duì)照組無凝集現(xiàn)象。
權(quán)利要求
1.白礬在制備治療性傳播疾病及避孕的陰道用藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征是白礬作為有效成分用于制備栓劑、海綿劑、軟膏劑、硬膏劑、涂摸劑或噴霧劑。
3.一種治療性傳播疾病及避孕的陰道用栓劑，其特征是含有0.2-1.0g白礬、0.5-3.0g半合成脂肪酸、0.1-0.9g魚肝油和0.01-0.09g VitE。
全文摘要
本發(fā)明涉及白礬在制備治療性傳播疾病及避孕的陰道用藥物的應(yīng)用。同時(shí)提供一種治療性傳播疾病及避孕的陰道用栓劑，含有0.2－1.0g白礬、0.5－3.0g半合成脂肪酸、0.1－0.9g魚肝油和0.01－0.09g VitE。本發(fā)明1.有強(qiáng)的抑制淋球菌生長(zhǎng)作用；2.抑制滴蟲活動(dòng)；3.對(duì)生殖器皰疹病毒(HSV)有預(yù)防感染和殺菌作用；4.制止精子活動(dòng)及破壞精子結(jié)構(gòu)。將硫酸鋁鉀粉與半合成脂肪酸甘油醇、魚肝油、維生素E在水溶上加熱溶化，攪拌至40℃左右倒入栓劑模具中，制成陰道栓。經(jīng)豚鼠陰道試驗(yàn)，證實(shí)有預(yù)防和治療生殖器皰疹病毒感染的作用。
文檔編號(hào)A61K9/00GK1823816SQ20051002008
公開日2006年8月30日 申請(qǐng)日期2005年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月20日
發(fā)明者詹炳焱, 洪莉 申請(qǐng)人:武漢大學(xué)