專利名稱：免疫治療方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及利用免疫調(diào)節(jié)劑來(lái)實(shí)現(xiàn)免疫反應(yīng)的1型T輔助細(xì)胞(TH1)或2型T輔助細(xì)胞(TH2)分支中的變化，從而對(duì)TH1或TH2介導(dǎo)的疾病進(jìn)行治療。具體地本發(fā)明涉及利用只含有特異性抗原的免疫調(diào)節(jié)劑，或者既含有特異性抗原又含有佐劑的免疫調(diào)節(jié)劑來(lái)實(shí)現(xiàn)TH1或TH2免疫反應(yīng)中的變化。
背景技術(shù)：
強(qiáng)烈極化的TH1和TH2反應(yīng)不但在保護(hù)方面起不同的作用，而且還會(huì)加速不同的免疫病理反應(yīng)。實(shí)際上，認(rèn)為許多疾病涉及由免疫反應(yīng)中主要與細(xì)胞介導(dǎo)的免疫相關(guān)的TH1支路，或者由主要驅(qū)動(dòng)抗體產(chǎn)生的TH2支路引起的病理的或不適當(dāng)?shù)拿庖叻磻?yīng)。在WO97/26883中討論了免疫反應(yīng)各方面的相互影響和重要性，包括TH1和TH2細(xì)胞的細(xì)胞因子之間的相互作用。雖然wo97/26883具體涉及被稱為RibarivinTM的具體的抗病毒化合物的效果，但是它仍然解釋說(shuō)明了藥物化合物對(duì)免疫系統(tǒng)的一些復(fù)雜和不可預(yù)見(jiàn)的效果。
免疫系統(tǒng)的TH2支路通常通過(guò)B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體特別是IgE來(lái)針對(duì)防止細(xì)胞外的病原體，例如寄生蟲(chóng)；而TH1支路通常通過(guò)自然殺傷細(xì)胞、細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞和活化的巨噬細(xì)胞的活性以及這些細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子來(lái)針對(duì)胞內(nèi)病原體，例如病毒。認(rèn)為T(mén)H2產(chǎn)生包括IL-3，IL-4，IL-5和IL-13的細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子能促進(jìn)IgE抗體的產(chǎn)生，并參與嗜酸性粒細(xì)胞(例如，接受伊紅染色的白細(xì)胞)的募集，增殖，分化，維持和存活以及其它類型細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)。
已經(jīng)公知TH1和TH2反應(yīng)是通過(guò)“交叉調(diào)整”被控制的。例如，TH1細(xì)胞因子可積極抑制TH2細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化，反之亦然(例如，參見(jiàn)Zhang，2001，J.Ex.Med.194165-172；Murphy，1996，J.Ex.Med.183901-913；O′Garra，1998，Immunity.8275-283)。
失控的TH1型反應(yīng)涉及器官特異性自身免疫，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis)，多發(fā)性硬化(multiple sclerosis)，甲狀腺炎(thyroditis)，克隆氏病(Crohn’s disease)，系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus)，實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜視網(wǎng)膜炎(experimental autoimmuneuveoretinitis)(Dubey et al.，1991，Eur.Cytokine Network，2147-152)，實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦炎(experimental autoimmune encephalitis)(Beraud et al.，1991，CellImmunol.133379-389)，胰島素依賴性糖尿病(insulin dependent diabetesmellitus)(Hahn et al.，1987，Eur.J.Immunol.182037-2042)以及接觸性皮炎(contact dermatitis)(Kapsenberg et al.，Immunol Today，12392-395)和一些慢性炎性疾病(chronic inflammatory disorder)。由TH1細(xì)胞產(chǎn)生的主要炎性細(xì)胞因子是IFN r(例如，參見(jiàn)Romragnani，ed，TH1 and TH2 Cells in Health andDisease.Chem.Immunol.，Karger，Basel，63，pp.158-170 and 187-203(1996))。
相反，失控的TH2型反應(yīng)導(dǎo)致觸發(fā)變應(yīng)性特應(yīng)性疾病(allergic atopicdisorder)(針對(duì)普通的環(huán)境變應(yīng)原)，諸如變應(yīng)性哮喘(allergic asthma)(Walkeret al.，1992，Am.Rev.Resp.Dis.148109-115)和特應(yīng)性皮炎(atopicdermatitis)(van der Heijden et al.，1991，J.Invest.Derm.97389-394)。TH2型反應(yīng)也優(yōu)選在某些原發(fā)的免疫缺陷，諸如高-IgE綜合癥(hyper-IgEsyndrome)(Del Prete et al.，1989，J.Clin.Invest.841830-1835)和Omenn′s綜合癥(Schandene et al.，1993，Eur.J.Immunol.2356-60)中誘導(dǎo)。其它與過(guò)度TH2型反應(yīng)相關(guān)聯(lián)的情況有濕疹，牛皮癬，變應(yīng)性鼻炎和枯草熱(例如，參見(jiàn)Romragnani，supra)。
因此，很明顯調(diào)節(jié)上述疾病狀態(tài)中涉及的TH1或TH2反應(yīng)將具有治療益處。具體是，如果可能在調(diào)整與具體疾病相關(guān)聯(lián)的免疫反應(yīng)的強(qiáng)度的同時(shí)控制免疫反應(yīng)中的TH1/TH2平衡將具有重要的益處。
著眼前述事實(shí)，發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)了能選擇性減弱宿主抗原特異性TH1或TH2反應(yīng)，并因此減輕或克服TH1或TH2相關(guān)疾病狀況的方法。
發(fā)明概述因此，一方面，本發(fā)明提供了一種改變個(gè)體中的特異性免疫應(yīng)答的方法，包括i).給需要的個(gè)體施用有效量的免疫治療形式的抗原，其中所述免疫反應(yīng)被下調(diào)；和
ii).隨后以免疫原形式給個(gè)體施用有效量的含有所述抗原的免疫調(diào)節(jié)劑。
優(yōu)選地，免疫調(diào)節(jié)劑還包含TH1或TH2佐劑，其中佐劑通常誘導(dǎo)是免疫治療的靶的TH反應(yīng)類型。
優(yōu)選地，免疫治療被靶向特異性免疫應(yīng)答。
在一個(gè)實(shí)施方案中，免疫治療形式的抗原的有效量包含一或多個(gè)劑量的抗原。在另一個(gè)實(shí)施方案中，免疫治療形式的抗原的有效量進(jìn)一步含有設(shè)計(jì)為用來(lái)調(diào)節(jié)特異性免疫應(yīng)答的物質(zhì)。
優(yōu)選地，特異性免疫應(yīng)答的改變是減少與正在治療的疾病的表達(dá)相關(guān)的TH反應(yīng)成分。
在一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)特異性免疫應(yīng)答的改變是將反應(yīng)中的TH1成分轉(zhuǎn)換成TH2成分，或者將TH2成分轉(zhuǎn)換成TH1成分。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)特異性免疫應(yīng)答的改變是將反應(yīng)的TH1和TH2成分的的比例顛倒，這樣，未經(jīng)治療的病人體內(nèi)包含高水平的TH1細(xì)胞因子產(chǎn)生和低水平TH2細(xì)胞因子產(chǎn)生的免疫反應(yīng)將被轉(zhuǎn)換成包含高水平TH2細(xì)胞因子產(chǎn)生和低水平TH1細(xì)胞因子產(chǎn)生的免疫反應(yīng)，反之亦然。
第二方面，本發(fā)明提供了一種治療TH1相關(guān)疾病的方法，包括i).給需要的個(gè)體施用有效量的免疫治療形式的抗原；和ii).隨后以免疫原形式給個(gè)體施用有效量的含有所述抗原的免疫調(diào)節(jié)劑，其中相對(duì)于施用所述免疫調(diào)節(jié)劑之前的特異性TH1反應(yīng)來(lái)說(shuō)，個(gè)體內(nèi)的抗原特異性TH1反應(yīng)降低。
優(yōu)選地，免疫調(diào)節(jié)劑還包含TH1佐劑。
第三方面，本發(fā)明提供了一種治療TH2相關(guān)疾病的方法，包括i).給需要的個(gè)體施用有效量的免疫治療形式的抗原；和ii).隨后給個(gè)體施用有效量的免疫調(diào)節(jié)劑，所述免疫調(diào)節(jié)劑含有免疫原形式的所述抗原，其中相對(duì)于施用所述免疫調(diào)節(jié)劑之前的特異性TH2反應(yīng)而言，個(gè)體中的抗原特異性TH2反應(yīng)降低。
優(yōu)選地，免疫調(diào)節(jié)劑還包含TH2佐劑。
第四方面，本發(fā)明提供了一種治療與混合的TH1和TH2免疫反應(yīng)相關(guān)聯(lián)的疾病的方法，包括i).給需要的個(gè)體施用有效量的免疫治療形式的抗原；和
ii).隨后以免疫原形式給個(gè)體施用有效量的含有所述抗原且能加強(qiáng)TH1和TH2免疫的免疫調(diào)節(jié)劑，其中相對(duì)于施用所述免疫調(diào)節(jié)劑之前的特異性TH1和TH2反應(yīng)來(lái)說(shuō)，個(gè)體中隨后出現(xiàn)的抗原特異性TH1和TH2反應(yīng)降低。
優(yōu)選地，免疫調(diào)節(jié)劑還包含能加強(qiáng)TH1和TH2免疫的佐劑，或者包含以TH1和TH2佐劑混合物形式存在的佐劑，其中相對(duì)于施用所述免疫調(diào)節(jié)劑之前的特異性TH1和TH2反應(yīng)來(lái)說(shuō)，個(gè)體中隨后出現(xiàn)的抗原特異性TH1和TH2反應(yīng)降低。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，免疫治療是以免疫治療形式施用有效量的一種或多種抗原，其中抗原與對(duì)需要的個(gè)體的病理性TH2免疫的表達(dá)有關(guān)。具體是，如果疾病是TH1相關(guān)疾病，抗原將主要是TH1特異性抗原。
第五方面，本發(fā)明提供了一種治療疾病的方法，包括i).給需要的個(gè)體施用有效量的免疫治療形式的抗原，其中對(duì)所述疾病的免疫反應(yīng)被下調(diào)；和ii).隨后以免疫調(diào)節(jié)形式給個(gè)體施用有效量的含有所述抗原的免疫調(diào)節(jié)劑。
優(yōu)選地，免疫調(diào)節(jié)劑還包含TH1或者TH2佐劑，其中佐劑通常誘導(dǎo)作為免疫治療形式抗原目標(biāo)靶的一類TH反應(yīng)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病是TH1相關(guān)疾病。具體地，TH1相關(guān)疾病選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，多發(fā)性硬化，甲狀腺炎，克隆氏病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜視網(wǎng)膜炎，實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦炎，胰島素依賴型糖尿病，接觸性皮炎和慢性炎性疾病組成的組。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病是TH2相關(guān)疾病。具體地，TH2相關(guān)疾病選自變應(yīng)性特應(yīng)性疾病，變應(yīng)性哮喘，特應(yīng)性皮炎，高-IgE綜合癥，Omenn′s綜合癥和過(guò)敏性鼻炎組成的組。
TH1或TH2佐劑可以是任何已知的分別特異性針對(duì)TH1或TH2反應(yīng)的佐劑。例如TH2佐劑可以選自鋁，白喉毒素(pertussis toxin)，乳酰巖藻五糖(lacto fucopentaose)III和磷酸聚合物(phosphopolymer)或其組合組成的組。
引發(fā)顯著的TH1型反應(yīng)而使用的優(yōu)選佐劑可以選自完全弗氏佐劑，單磷酸脂質(zhì)A(monophosphoryl lipid A)，3-脫氧?；鶈瘟姿嶂|(zhì)A(3-de-O-acylatedmonophosphoryl lipid A)(3D-MPL)，鋁鹽，包含CpG的寡核苷酸，免疫刺激性DNA序列，皂甙，Montanide ISA 720，SAF，ISCOMS，MF-59，SBAS-3，SBAS-4，Detox，RC-529，氨基烷基氨基葡萄糖苷4-磷酸酯(aminoalkylglucosaminide 4-phosphate)和LbeIF4A組成的組。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述個(gè)體是哺乳動(dòng)物，例如狗，貓，家畜動(dòng)物，靈長(zhǎng)類動(dòng)物或馬，以及人。優(yōu)選地，個(gè)體是人受試者。
第六方面，本發(fā)明提供了一種改變需要的個(gè)體體內(nèi)TH1或TH2反應(yīng)表型的試劑盒，包括i).一種或多種TH1抗原；或ii).一種或多種TH1或TH2佐劑；或iii).它們的組合；和iv).使用說(shuō)明書(shū)。
第七方面，本發(fā)明提供了一種免疫治療的方法，包括i).給需要的個(gè)體多次(shot)施用抗原；ii).以少于五次獨(dú)立的(individual shot)給藥，對(duì)所述個(gè)體施用與一種或多種TH1和/或TH2佐劑組合的所述抗原。
優(yōu)選地，與TH1和/或TH2佐劑結(jié)合的所述抗原的獨(dú)立施用次數(shù)少于三次。更優(yōu)選地，與TH1和/或TH2佐劑結(jié)合的所述抗原的獨(dú)立施用次數(shù)是一次。
第八方面，本發(fā)明提供利用免疫調(diào)節(jié)劑來(lái)制備治療TH1相關(guān)疾病或TH2相關(guān)疾病的藥物的用途，其中所述的免疫調(diào)節(jié)劑包含免疫調(diào)節(jié)形式的抗原。
優(yōu)選地，免疫調(diào)節(jié)劑還包含至少一種與增強(qiáng)所述疾病相關(guān)型T輔助細(xì)胞反應(yīng)有關(guān)的佐劑。
因此，第九方面，本發(fā)明提供了利用免疫調(diào)節(jié)劑來(lái)制備治療易患TH-1或TH-2相關(guān)疾病的個(gè)體中的所述疾病的藥物中的用途，其中，預(yù)先以能降低所述個(gè)體內(nèi)與所述疾病相關(guān)的T輔助細(xì)胞免疫反應(yīng)的抗原的免疫治療形式和劑量對(duì)所述個(gè)體進(jìn)行治療，所述免疫調(diào)節(jié)劑包含至少一種與增強(qiáng)所述疾病相關(guān)型T輔助細(xì)胞反應(yīng)有關(guān)的佐劑和免疫原形式的所述抗原。
第十方面，本發(fā)明提供了含有至少一種免疫原形式的抗原和至少一種佐劑的免疫調(diào)節(jié)劑，其中佐劑通常誘導(dǎo)與所述抗原引起的疾病相關(guān)聯(lián)的一類TH反應(yīng)。
在下面的說(shuō)明書(shū)中更詳細(xì)地介紹了本發(fā)明的上述各方面和其它方面的內(nèi)容。
附圖簡(jiǎn)述

圖1顯示TH2免疫的選擇性耐受。
圖2顯示TH1免疫的選擇性耐受。
圖3顯示總體OVA特異性TH細(xì)胞免疫的非選擇性耐受。
圖4顯示OVA致敏的小鼠的脫敏。
圖5顯示用免疫治療形式的OVA(舌下)處理，但沒(méi)有用調(diào)節(jié)性免疫原性(modifiying immunogenic)注射處理的對(duì)照小鼠中的IgE。
圖6顯示用免疫治療性(舌下)的OVA處理并在免疫治療后用混合的調(diào)節(jié)性免疫原性O(shè)VA ip注射處理的的小鼠中的IgE。
圖7顯示用免疫治療性(舌下)的OVA處理并在免疫治療后用鋁中的Th2調(diào)節(jié)性免疫原性O(shè)VA注射處理的小鼠中的IgE。
發(fā)明詳述在詳細(xì)描述本發(fā)明之前，應(yīng)該理解本發(fā)明并不特別限制于舉例說(shuō)明的免疫調(diào)節(jié)劑，抗原，佐劑或方法，而是顯然可以發(fā)生變化。也應(yīng)該理解這里使用的術(shù)語(yǔ)只是為了描述本發(fā)明的具體實(shí)施方案，并無(wú)意限制本發(fā)明，只有附加的權(quán)利要求才能限定本發(fā)明的范圍。
所有在這里引用的出版物，專利和專利申請(qǐng)，不論在上文還是在下文中，在此全部引入作為參考。然而，引用這里提到的出版物只是為了描述和公開(kāi)出版物中報(bào)道的可能與本發(fā)明有聯(lián)系且可能在本發(fā)明中使用的操作規(guī)程，試劑和載體。在本發(fā)明之前的這些公開(kāi)都不被認(rèn)為是對(duì)本發(fā)明內(nèi)容的在先公開(kāi)。
此外，除非另有說(shuō)明，本發(fā)明實(shí)施過(guò)程中使用了本領(lǐng)域技術(shù)人員使用了傳統(tǒng)的免疫學(xué)方法，化學(xué)和藥理學(xué)方法。本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員已經(jīng)熟知這些方法，所述方法在文獻(xiàn)中也有充分的解釋。例如，參見(jiàn)Coligan，Dunn，Ploegh，Speicher and Wingfield″Current protocols in Protein Science″(1999)Volume I and II(John Wiley & Sons Inc.)和Bailey，J.E.and Ollis，D.F.，Biochemical Engineering Fundamentals，McGraw-Hill Book Company，NY，1986。
必須指出，在這里和附加的權(quán)利要求中，單數(shù)形式“該”和“所述”包括復(fù)數(shù)，除非上下文清楚地規(guī)定有其它含義。因此，例如“蛋白質(zhì)”包括許多這種蛋白質(zhì)，參考詞“佐劑”指一或多種佐劑，等等。除非另外定義，否則這里使用的全部技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)的含義與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員的通常理解相同。雖然任何與這里描述的材料和方法類似或等效的材料和方法都可用于實(shí)施或檢測(cè)本發(fā)明，但在這里仍描述了優(yōu)選的材料和方法。
本發(fā)明涉及一種影響，改變或增強(qiáng)個(gè)體體內(nèi)特異性免疫應(yīng)答的方法。這里使用的術(shù)語(yǔ)“特異性免疫應(yīng)答”指受試者或個(gè)體對(duì)特定攻擊的反應(yīng)，也就是說(shuō)，當(dāng)用具體抗原攻擊時(shí)，個(gè)體是否具有顯著的TH1細(xì)胞或顯著的TH2細(xì)胞反應(yīng)。當(dāng)提到TH1或TH2細(xì)胞時(shí)，術(shù)語(yǔ)“優(yōu)選地”，“主要”，“基本上”及其它諸如此類的術(shù)語(yǔ)表示由一種具體TH細(xì)胞類型產(chǎn)生的細(xì)胞因子比另一種TH細(xì)胞類型產(chǎn)生的細(xì)胞因子更有優(yōu)勢(shì)。例如，術(shù)語(yǔ)“主要是TH1細(xì)胞”或等效術(shù)語(yǔ)指?jìng)€(gè)體內(nèi)由TH1細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子例如IFN-γ與TH2細(xì)胞因子例如，IL-3，IL-4，IL-5和IL-13相比更有優(yōu)勢(shì)。
這里使用的關(guān)于特異性免疫應(yīng)答的術(shù)語(yǔ)“增強(qiáng)(enhance)”或“增強(qiáng)的(enhanced)”表示與特定TH細(xì)胞類型有關(guān)的一種或多種細(xì)胞因子總量的變化。例如，術(shù)語(yǔ)“增強(qiáng)的TH1細(xì)胞”或等效術(shù)語(yǔ)指?jìng)€(gè)體內(nèi)由TH1細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子例如IFN-γ比正常情況更多，或IFN-γ比任何TH2相關(guān)細(xì)胞因子更多。例如，觀察到的TH1相關(guān)細(xì)胞因子相對(duì)于TH2相關(guān)細(xì)胞因子的數(shù)量增加可以證明這一點(diǎn)?；蛘呦鄬?duì)于正常存在的TH2相關(guān)細(xì)胞因子的量，TH1相關(guān)細(xì)胞因子的量增加。
這里使用的所有術(shù)語(yǔ)“改變或改變的”，“影響或受影響的”或“相對(duì)與…改變”都暗示或表明，與使用本發(fā)明的方法之前的特異性免疫應(yīng)答相比，個(gè)體的特異性免疫應(yīng)答已經(jīng)被改變。例如，如果在使用這里公開(kāi)的方法之前，個(gè)體具有優(yōu)勢(shì)型TH1相關(guān)的細(xì)胞因子，在使用這里的方法后，TH2相關(guān)細(xì)胞因子將變得占優(yōu)勢(shì)，或者至少非常接近TH1相關(guān)細(xì)胞因子的水平，則“相對(duì)于”TH2細(xì)胞，TH1細(xì)胞已經(jīng)被本發(fā)明的方法“改變”或“影響”。
術(shù)語(yǔ)“受試者”或“個(gè)體”在這里可交換使用，指脊索亞門(mén)(subphylumcordata)的任何成員，包括但不限于人類和其它靈長(zhǎng)類動(dòng)物，包括非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物，例如黑猩猩及其它猿和猴；農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物，例如牛，綿羊，豬，山羊和馬；養(yǎng)馴的哺乳動(dòng)物，例如狗和貓；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，包括嚙齒類動(dòng)物，例如小鼠，大鼠和豚鼠；鳥(niǎo)，包括養(yǎng)馴鳥(niǎo)，野生鳥(niǎo)和比賽用鳥(niǎo)，例如雞，火雞及其它雞形目的鳥(niǎo)，鴨，鵝等等。該術(shù)語(yǔ)并不表示具體的年齡。因此，既覆蓋了成年個(gè)體，也覆蓋了新生個(gè)體。這里描述的方法意圖用于任何上述脊椎動(dòng)物種類，因?yàn)樗羞@些脊椎動(dòng)物的免疫系統(tǒng)以相似的方式起作用。
因此，這里提供了對(duì)哺乳動(dòng)物的治療，所述哺乳動(dòng)物例如人類，以及那些在經(jīng)濟(jì)上和/或社會(huì)上對(duì)人類具有價(jià)值的哺乳動(dòng)物，例如除人類以外的食肉動(dòng)物(例如貓和狗)，豬類(豬(pig)，肥豬(hog)和野豬)，反芻動(dòng)物(例如牛，公牛，羊，長(zhǎng)頸鹿，鹿，山羊，野牛和駱駝)和馬。也提供對(duì)鳥(niǎo)的治療，所述鳥(niǎo)類包括那些瀕危鳥(niǎo)類，動(dòng)物園中飼養(yǎng)的鳥(niǎo)，禽類更具體包括對(duì)養(yǎng)馴的禽，例如家禽，如火雞，小雞，鴨，鵝，珍珠雞(guinea fowl)等，因?yàn)樗鼈円矊?duì)人類具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值。因此，也提供對(duì)家畜的治療，包括但不限于對(duì)養(yǎng)馴的豬類(豬和肥豬)，反芻動(dòng)物，馬，家禽等等的治療。
在一個(gè)實(shí)施方案中，個(gè)體患有TH1或TH2相關(guān)疾病。這里使用的術(shù)語(yǔ)″TH1相關(guān)疾病″指由TH1細(xì)胞介導(dǎo)的疾病，或者指與TH1細(xì)胞相關(guān)性抗原特異性細(xì)胞因子的生成水平相對(duì)于TH2相關(guān)細(xì)胞因子的所述水平升高有關(guān)。這樣的疾病包括但不局限于器官特異性自身免疫，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，多發(fā)性硬化，甲狀腺炎，克隆氏病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜視網(wǎng)膜炎(Dubey et al.，1991，Eur.Cytokine Network 2147-152)，實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦炎(EAE)(Beraud et al.，1991，Cell Immunol.133379-389)和胰島素依賴型糖尿病(Hahn et al.，1987，Eur.J.Immunol.182037-2042)，以及接觸性皮炎(Kapsenberg et al.，Immunol Today 12392-395)和一些慢性炎性疾病。
這里使用的術(shù)語(yǔ)“TH2相關(guān)疾病”指由TH2細(xì)胞介導(dǎo)的疾病，或者與抗原誘導(dǎo)的TH2細(xì)胞因子的生成相對(duì)于TH1細(xì)胞因子的升高有關(guān)。這樣的疾病包括，但不局限于導(dǎo)致觸發(fā)變應(yīng)性特應(yīng)性疾病(針對(duì)普通的環(huán)境變應(yīng)原)的TH2型反應(yīng)，所述疾病例如變應(yīng)性哮喘(Walker et al.，1992，Am.Rev.Resp.Dis.148109-115)和特應(yīng)性皮炎(van der Heijden et al.，1991，J.Invest.Derm.97389-394)。
患有TH1或TH2相關(guān)疾病的個(gè)體通常分別具有升高的TH1或TH2細(xì)胞因子生成水平。用這里公開(kāi)的方法“治療”這些個(gè)體時(shí)，起始步驟涉及“正在進(jìn)行免疫治療”或者“最近已經(jīng)經(jīng)過(guò)免疫治療”的個(gè)體，其中所述免疫治療至少包括以“免疫治療劑”形式給個(gè)體或受試者“施用”一或多劑量的“有效量”的TH1或TH2抗原。
通常，這里使用的術(shù)語(yǔ)“進(jìn)行治療”，“治療”等等意味著影響個(gè)體或受試者，他們的組織或細(xì)胞以獲得所需的藥理學(xué)效應(yīng)和/或生理效應(yīng)。效果可以是完全或部分預(yù)防TH1或TH2相關(guān)疾病或它們的癥狀和體征的預(yù)防性效果，和/或完全或部分治愈TH1或TH2相關(guān)疾病的治療性效果。這里使用“進(jìn)行治療”覆蓋在脊椎動(dòng)物，哺乳動(dòng)物，具體是人中對(duì)TH1或TH2相關(guān)疾病進(jìn)行的任何治療或預(yù)防，包括(a)防止對(duì)TH1或TH2相關(guān)疾病易感，但還沒(méi)有被診斷出患有這些疾病的受試者體內(nèi)TH1或TH2相關(guān)疾病的發(fā)生；(b)抑制TH1或TH2相關(guān)疾病，即阻止它的發(fā)展；或(c)減輕或改善TH1或TH2相關(guān)疾病的癥狀，也就是使TH1或TH2相關(guān)疾病的癥狀消退。
術(shù)語(yǔ)“正在進(jìn)行免疫治療”指?jìng)€(gè)體因?yàn)橐环N疾病或病癥正在接受治療，治療的目的是為了克服或減輕這種疾病或狀況的癥狀。具體地，免疫治療是為了耐受或下調(diào)個(gè)體的特異性免疫應(yīng)答，而施用與這種疾病或病癥有關(guān)的抗原。然而，也應(yīng)理解，可以在施用抗原時(shí)，或在施用抗原之前或之后施用其它的免疫治療。
在一個(gè)實(shí)施方案中，免疫治療是施用“免疫治療形式”的抗原?？乖摹懊庖咧委熜问健笔前乖?，隨時(shí)間能下調(diào)(脫敏)對(duì)抗原的免疫反應(yīng)的形式或配制劑。
已經(jīng)提議幾種免疫治療形式。(例如參見(jiàn)Smits的美國(guó)專利6,488,937；Bruttmann et al的美國(guó)專利5,244,663；Melillo的GB-A-2099698；Moran的EP-A-0135022，Glenis et al，Clinical Allergy，1986，Vol.16，483-491；Mailing，H.J.，(ed.)，Immunotherapy Position Paper，Allergy(Supp.)6，439-33(1988)，所有這些在此全部被引入作為參考。)常見(jiàn)的免疫治療形式涉及將劑量逐漸增加的抗原注射到個(gè)體體內(nèi)，通常達(dá)到最大耐受劑量(不引起主要的變態(tài)反應(yīng)的劑量)，可以采用不同的注射間隔以試圖獲得抗抗原的IgG抗體保護(hù)，并增加特異性抑制T淋巴細(xì)胞對(duì)抗原超敏反應(yīng)應(yīng)答的活性。
免疫治療形式的抗原的濃度和量取決于具有抗原超敏反應(yīng)的個(gè)體特有的許多因素。因此用滴定法對(duì)受試者進(jìn)行滴定測(cè)定以確定合適的劑量是必需的。可以用本領(lǐng)域熟知的多種標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)來(lái)實(shí)施這一過(guò)程。
術(shù)語(yǔ)“最近已經(jīng)經(jīng)過(guò)免疫治療”指與上述免疫治療類型相同的免疫治療，但也指任何隨后處理的時(shí)機(jī)。例如，本發(fā)明的方法最好施用給仍然受免疫治療效果影響的個(gè)體。因此，術(shù)語(yǔ)“最近”指免疫治療效果仍然存在的時(shí)間點(diǎn)。
術(shù)語(yǔ)TH1或TH2抗原的“有效量”指足以對(duì)TH1或TH2特異性免疫應(yīng)答產(chǎn)生影響的TH1或TH2抗原的量。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，抗原是TH1特異性抗原，當(dāng)施用“有效量”時(shí)將下調(diào)特異性免疫應(yīng)答。當(dāng)用于免疫治療形式時(shí)，術(shù)語(yǔ)“有效量”包括一或多劑量的具體抗原。
“抗原”是被抗體或T細(xì)胞抗原受體識(shí)別和特異性結(jié)合的物質(zhì)?？乖砂?，蛋白質(zhì)，糖蛋白和多糖，其一部分和組合。抗原可以是自然界中發(fā)現(xiàn)的，也可以是合成的。術(shù)語(yǔ)“抗原”也指任何免疫原性的部分或者試劑，通常是能在個(gè)體內(nèi)引發(fā)免疫反應(yīng)的高分子。該術(shù)語(yǔ)可用來(lái)指單個(gè)大分子，或者指抗原大分子的同源或異源群體?！翱乖痹谶@里使用時(shí)通常被用來(lái)指半抗原，有機(jī)或無(wú)機(jī)物，蛋白質(zhì)分子或其包含一個(gè)或多個(gè)表位的部分。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，可以從任何已知的病毒，細(xì)菌，寄生蟲(chóng)或真菌病原體，植物，人工或天然產(chǎn)生的無(wú)機(jī)或有機(jī)材料中獲得或得到抗原。該術(shù)語(yǔ)也意圖包括任何多種腫瘤特異性抗原和與自身免疫疾病有關(guān)的抗原。此外，為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，“抗原”包括具有修飾的蛋白質(zhì)，例如對(duì)天然序列進(jìn)行刪除，添加和替換(通常在自然界中是保守的)后得到的蛋白質(zhì)，只要經(jīng)修飾的蛋白質(zhì)保持了足夠的免疫原性。這些修飾可能是有意的，例如通過(guò)定點(diǎn)誘變產(chǎn)生的修飾，也可能是偶然的，例如由于產(chǎn)生抗原的宿主發(fā)生突變而產(chǎn)生的修飾。
在本發(fā)明的各個(gè)方面，抗原包含一個(gè)或多個(gè)T細(xì)胞表位?！癟細(xì)胞表位”通常指肽結(jié)構(gòu)的能夠誘導(dǎo)T細(xì)胞反應(yīng)的那些特征。在這方面，本領(lǐng)域已經(jīng)接受T細(xì)胞表位包含在MHC分子的肽結(jié)合裂縫中呈現(xiàn)延伸構(gòu)象的線性肽決定簇(Unanue et al.，1987，Science，236551-557)。這里使用的T細(xì)胞表位通常是具有至少大約7個(gè)氨基酸殘基的肽，優(yōu)選至少8-18個(gè)氨基酸殘基或更多氨基酸殘基的肽。采用許多公知的試驗(yàn)方法可以確定具體抗原促進(jìn)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)的能力，例如，可通過(guò)淋巴組織增生(淋巴細(xì)胞活化)試驗(yàn)，CTL細(xì)胞毒細(xì)胞試驗(yàn)或者通過(guò)測(cè)定致敏的受試者體內(nèi)抗原特異性T淋巴細(xì)胞來(lái)確定。例如，參見(jiàn)Erickson et al.，1993，J.Immunol.1514189-4199和Doe et al.(1994)Eur.J.Immunol.242369-2376。
在本發(fā)明的其它方面，抗原包含一個(gè)或多個(gè)B細(xì)胞表位?！癇細(xì)胞表位”通常指抗原上結(jié)合特異抗體分子的位點(diǎn)。利用本領(lǐng)域已經(jīng)公知的技術(shù)很容易完成對(duì)能引發(fā)抗體反應(yīng)的表位的鑒定。例如，參見(jiàn)Geysen et al.，1984，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，813998-4002(快速合成肽，確定給定抗原上的免疫原性表位位置的一般方法)；美國(guó)專利4,708,871(鑒定和化學(xué)合成抗原表位的程序)；和Geysen et al.，1986，Molecular Immunology，23709-715(鑒定對(duì)給定抗體具有高親和力的肽的技術(shù))。
這里使用的術(shù)語(yǔ)“TH1相關(guān)抗原”或“TH2相關(guān)抗原”指上面定義的抗原，但這些抗原與優(yōu)勢(shì)型TH1或TH2特異性免疫應(yīng)答的生成特異性相關(guān)。例如，室內(nèi)塵螨的主要變應(yīng)原--der P1在個(gè)體體內(nèi)產(chǎn)生優(yōu)勢(shì)型TH2反應(yīng)，而流感嗜血桿菌的P6外膜蛋白在個(gè)體體內(nèi)產(chǎn)生優(yōu)勢(shì)型TH1反應(yīng)。確定抗原是否在個(gè)體內(nèi)產(chǎn)生優(yōu)勢(shì)型TH1或TH2反應(yīng)是本領(lǐng)域人員已知的。下面是在本發(fā)明中可能有用的抗原列表。
在本發(fā)明的方法中治療變態(tài)反應(yīng)有用的抗原。有價(jià)值的抗原包括動(dòng)物的抗原，包括螨(例如屋塵螨(Dermatophagoides pteronyssinus)、粉塵螨(Dermatophagoides farinae)、熱帶塵螨(Blomia tropicalis))的抗原，例如變應(yīng)原(allergen)der p1(Scobie et al.，1994，Biochem.Soc.Trans.22448S；Yssel etal.，1992，J.Immunol.148738-745)，der p2(Chua et al.，1996，Clin.Exp.Allergy，26829-837)，der p3(Smith & Thomas，1996，Clin.Exp.Allergy，26571-579)，der p5，der p V(Lin et al.，1994，J.Allergy Clin.Immunol.94989-996)，der p6(Bennett & Thomas，1996，Clin.Exp.Allergy，261150-1154)，der p 7(Shen et al.，1995，Clin.Exp.Allergy，25416-422)，der f2(Yuuki et al.，1997，Int.Arch.Allergy Immunol.11244-48)，der f3(Nishiyama et al.(1995)FEBS Lett.37762-66)，der f7(Shen et al.(1995)Clin.Exp.Allergy 251000-1006)；Mag 3(Fujikawa et al.(1996)Mol.Immunol.33311-319)。有價(jià)值的抗原也可以是屋塵螨(house dust mite)變應(yīng)原Tyr p2(Eriksson et al.(1998)Eur.J.Biochem.251443-447)，Lep d1(Schmidt et al.(1995)FEBS Lett.37011-14)，谷胱苷肽S轉(zhuǎn)移酶(O′Neill et al.(1995)Immunol Lett.48103-107)；與谷胱苷肽S轉(zhuǎn)移酶同源的25,589Da、219個(gè)氨基酸的多肽(O′Neill et al.(1994)Biochim.Biophys.Acta.1219521-528)；Blo t 5(Arruda et al.(1995)Int.Arch.Allergy Immunol.107456-457)；蜜蜂毒素磷脂酶(bee venomphospholipase)A2(Carballido et al.(1994)J.Allergy Clin.Immunol.93758-767；Jutel et al.(1995)J.Immunol.1544187-4194)；牛皮膚/皮屑(dander)抗原BDA 11(Rautiainen et al.(1995)J.Invest.Dermatol.105660-663)和BDA20(Mantyjarvi et al.(1996)J.Allergy Clin.Immunol.971297-1303)；主要馬變應(yīng)原Equ c1(Gregoire et al.(1996)J.Biol.Chem.27132951-32959)；棘爪螞蟻(Jumper ant)M.pilosula變應(yīng)原Myr p I以及其同源變應(yīng)原多肽Myr p2(Donovan et al.(1996)Biochem.Mol.Biol.Int.39877-885)；熱帶塵螨的1-13，14，16kD的變應(yīng)原(Caraballo et al.(1996)J.Allergy Clin.Immunol.98573-579)；蟑螂變應(yīng)原Bla g Bd90K(Helm et al.(1996)J.Allergy Clin.Immunol.98172-80)和Bla g 2(Arruda et al.(1995)J.Biol.Chem.27019563-19568)；蟑螂Cr-PI變應(yīng)原(Wu et al.(1996)J.Biol.Chem.27117937-17943)；火蟻毒液(fire ant venom)抗原Sol i 2(Schmidt et al.(1996)J.Allergy Clin.Immunol.9882-88)；昆蟲(chóng)搖蚊(Chironomus)thummi主要變應(yīng)原Chi t 1-9(Kipp et al.(1996)Int.Arch.Allergy Immunol.110348-353)；狗變應(yīng)原Can f1或貓變應(yīng)原Fel d1(Ingram et al.(1995)J.Allergy Clin.Immunol.96449-456)；白蛋白，例如可以來(lái)源于馬，狗或貓(Goubran Botros et al.(1996)Immunology 88340-347)；分子量為22kD，25kD或60kD的鹿變應(yīng)原(Spitzaueret al.(1997)Clin.Exp.Allergy 27196-200)；20kd的奶牛主要抗原(Ylonen etal.(1994)J.Allergy Clin.Immunol.93851-858)。
花粉和草變應(yīng)原也是有用的抗原。這樣的變應(yīng)原包括，例如Hor v9(Astwood and Hill(1996)Gene 18253-62，Lig v1(Batanero et al.(1996)Clin.Exp.Allergy 261401-1410)；Lol p 1(Muller et al.(1996)Int.Arch.AllergyImmunol.109352-355)，Lol p II(Tamborini et al.(1995)Mol.Immunol.32505-513)，Lol pVA，Lol pVB(Ong et al.(1995)Mol.Immunol.32295-302)，Lol p 9(Blaher et al.(1996)J.Allergy Clin.Immunol.98124-132)；Par J I(Costa et al.(1994)FEBS Lett.341182-186；Sallusto et al.(1996)J.AllergyClin.Immunol.97627-637)，Par j 2.0101(Duro et al.(1996)FEBS Lett.399295-298)；Bet v1(Faber et al.(1996)J.Biol.Chem.27119243-19250)，Bet v2(Rihs et al.(1994)Int.Arch.Allergy Immunol.105190-194)；Dac g3(Guerin-Marchand et al.(1996)Mol.Immunol.33797-806)；Phl p 1(Petersenet al.(1995)J.Allergy Clin.Immunol.95987-994)，Phl p 5(Muller et al.(1996)Int.Arch.Allergy Immunol.109352-355)，Phl p 6(Petersen et al.(1995)Int.Arch.Allergy Immunol.10855-59)；Cry j I(Sone et al.(1994)Biochem.Biophys.Res.Commun.199619-625)，Cry j II(Namba et al.(1994)FEBS Lett.353124-128)；Cor a 1(Schenk etal.(1994)Eur.J.Biochem.224717-722)；cynd1(Smith et al.(1996)J.Allergy Clin.Immunol.98331-343)，cyn d7(Suphiogluet al.(1997)FEBS Lett.402167-172)；Pha a 1和Pha a 5的同種型(Suphioglu and Singh(1995)Clin.Exp.Allergy 25853-865)；Cha o 1(Suzukiet al.(1996)Mol.Immunol.33451-460)；來(lái)源于如梯牧草(timothy grass)或白樺花粉的profilin(Valenta et al.(1994)Biochem.Biophys.Res.Commun.199106-118)；P0149(Wu et al.(1996)Plant Mol.Biol.321037-1042)；Ory s1(Xuet al.(1995)Gene 164255-259)；以及Amb a V和Amb t 5(Kim et al.(1996)Mol.Immunol.33873-880；Zhu et al.(1995)J.Immunol.1555064-5073)。
真菌變應(yīng)原包括，但不局限于草本枝孢霉(Cladosporium herbarum)的變應(yīng)原Cla h III(Zhang et al.(1995)J.Immunol.154710-717)；來(lái)源于basidiomycete Psilocybe cubensis的真菌cyclophilin Psi c 2，(Homer et al.(1995)Int.Arch.Allergy Immunol.107298-300)；從草本枝孢霉的cDNA文庫(kù)中克隆的hsp 70(Zhang et al.(1996)Clin Exp Allergy 2688-95)；點(diǎn)青霉菌(Penicillium notatum)的68kD變應(yīng)原(Shen et al.(1995)Clin.Exp.Allergy 26350-356)；醛脫氫酶(ALDH)(Achatz et al.(1995)Mol Immunol.32213-227)；烯醇酶(Achatz et al.(1995)Mol.Immunol.32213-227)；YCP4(Id.)；酸性核糖體蛋白P2(Id.)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗原是在植物或食物中表達(dá)的重組抗原。例如是克隆到香蕉或酸乳細(xì)菌中的螨抗原Der P1。
可以在本領(lǐng)域技術(shù)人員已經(jīng)公知的動(dòng)物模型中篩選最佳抗原。用于多種情形的合適的模型例子包括膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎，人干燥綜合征的NFS/sld小鼠模型；最近被確定為人類細(xì)胞骨架蛋白模似物的120kD的器官特異性自身抗原(a-胞影蛋白(Haneji et al.，1997，Science，276604)604)，人類SLE的新西蘭黑/白F1雜交鼠模型，人類糖尿病的小鼠模型NOD小鼠，會(huì)自然地出現(xiàn)自身免疫和淋巴組織增生疾病的fas/fas配體突變小鼠(Watanabe-Fukunagaet al.，1992，Nature，356314)，實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)，其中脊髓堿性蛋白導(dǎo)致出現(xiàn)與人多發(fā)性硬化相似的疾病。
一旦診斷出個(gè)體患有TH1或TH2相關(guān)疾病，而且已經(jīng)鑒定出有用的TH1或TH2抗原或抗原組合，就可以以免疫治療形式給個(gè)體施用“有效量”的抗原。
術(shù)語(yǔ)“施用”，“正在施用”，“已施用”在這里可交換地使用。可以以包含常規(guī)無(wú)毒的可藥用的載體，佐劑和賦形劑的單位劑量制劑形式口服施用抗原，施用方式包括經(jīng)舌下施用，局部施用或經(jīng)腸胃外施用。這里使用的術(shù)語(yǔ)經(jīng)腸胃外施用包括皮下注射，氣霧劑，靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)，鞘內(nèi)，顱內(nèi)施用，經(jīng)直腸或陰道注射或輸注。優(yōu)選地，通過(guò)施用含有抗原，以及與抗原相容的可藥用的載體或稀釋劑的組合物來(lái)施用抗原。在制備這種組合物時(shí)，可以利用任何常規(guī)的可藥用的載體。
載體材料可以是適合口服的有機(jī)或無(wú)機(jī)惰性載體物質(zhì)。合適的載體包括水，明膠，阿拉伯樹(shù)膠，乳糖，淀粉，硬脂酸鎂，滑石粉，植物油，聚亞烷基二醇(polyalkylene-glycol)，凡士林等等。此外，藥學(xué)上的活性制劑可以包含其它的藥學(xué)活性成分。另外，可以參照藥學(xué)上配藥的習(xí)慣作法加入添加劑，例如調(diào)味劑，防腐劑，穩(wěn)定劑，乳化劑，緩沖劑等等。
當(dāng)口服施用抗原時(shí)，通常每隔一定時(shí)間施用一次，方便的情況是在進(jìn)餐時(shí)間施用或一天施用一次。已經(jīng)確定當(dāng)口服或局部施用藥物時(shí)，以不出現(xiàn)或只出現(xiàn)輕微副作用的劑量來(lái)施用抗原是有效的。因此通常優(yōu)選口服或局部施用抗原。
抗原制劑可以被制備成任何常規(guī)制劑形式，包括(a)用于口服，經(jīng)直腸或陰道施用的固體形式，例如，片劑，膠囊(例如硬或軟的明膠膠囊)，藥丸，囊劑(sachet)，粉劑，顆粒劑等等；和(b)用于局部施用的制劑，例如溶液，懸浮液，軟膏劑，霜?jiǎng)z劑，微?；姆蹌?，噴霧劑，氣霧劑等等；(c)也可以制備用于經(jīng)靜脈內(nèi)施用的液體制劑。藥物制劑可以是滅菌的，和/或可以包含防腐劑，穩(wěn)定劑，潤(rùn)濕劑，乳化劑，改變滲透壓的鹽和/或緩沖劑。
為了局部施用抗原制劑到皮膚或粘膜上，優(yōu)選將上述的抗原制劑制備成軟膏劑，酊劑，霜?jiǎng)?，凝膠，溶液，洗劑，噴霧劑，吸入氣霧劑和干粉劑，懸浮液等等。實(shí)際上，在本發(fā)明中可以使用任何常規(guī)的抗原制劑。在優(yōu)選方法中使用的含有本發(fā)明抗原的抗原制劑是以軟膏劑，凝膠，霜?jiǎng)?，洗劑，噴霧劑，吸入氣霧劑或干粉劑形式存在的制劑?？梢酝ㄟ^(guò)將上述的抗原制劑與通常被用于這種制劑的無(wú)毒的，無(wú)治療活性的固體或液體載體混合來(lái)制備可局部施用到皮膚上的藥物制劑。以抗原制劑的總重量為基礎(chǔ)，這些制劑通常包含0.01-5.0％重量的抗原，優(yōu)選包含0.1-1.0％重量的抗原。
在制備如上所述的局部制劑時(shí)，可以使用配制局部制劑時(shí)常用的添加劑，例如防腐劑，增稠劑，芳香劑等等。另外，常規(guī)抗氧化劑或常規(guī)抗氧化劑的混合物可以合并到包含上述活性劑的局部制劑中?？梢栽谶@些制劑中使用的常規(guī)抗氧化劑包括N-甲基生育酚胺，生育酚，丁羥基茴香醚，丁羥甲苯，乙氧喹等等。包含抗原制劑的基于霜?jiǎng)┑谋景l(fā)明所用藥物配制劑由包含脂肪醇(fatty acid alcohol)，半固體石油碳?xì)浠衔?，乙二醇和乳化劑的水乳劑組成。
符合本發(fā)明要求的包含抗原制劑的軟膏劑包含半固體石油碳?xì)浠衔锖涂乖娜軇┓稚Ⅲw的混合物?？捎糜诒景l(fā)明的包含抗原制劑的霜?jiǎng)┙M分優(yōu)選包含由保濕劑，粘度穩(wěn)定劑和水的水相，脂肪醇，半固體石油碳?xì)浠衔锖腿榛瘎┑挠拖?，以及含有分散在水性穩(wěn)定劑緩沖溶液中的抗原制劑的相形成的乳狀液。穩(wěn)定劑可被加到局部用藥的制劑中。依照本發(fā)明可以使用任何常規(guī)的穩(wěn)定劑。在油相中，脂肪醇組分起穩(wěn)定劑的作用。這些脂肪醇組分來(lái)源于包含至少14個(gè)碳原子的長(zhǎng)鏈飽和脂肪酸的還原。
在Drugs and Pharmaceutical Sciences，Marcel Dekker，New York，72547-574(1996)中描述了氣霧劑配制劑。此外，可以通過(guò)干粉吸入來(lái)遞送抗原制劑。在Pharmaceutical Technology，June 1997，pp.117-125中描述了這種配制劑和裝置。
治療方案將隨給藥的方式或類型，疾病和使用的抗原的種類而變化。然而，通常依據(jù)上述因素，每天，每周或每月對(duì)個(gè)體進(jìn)行監(jiān)控，以確定他們的特異性免疫應(yīng)答狀態(tài)。連續(xù)施用抗原，直到特異性免疫應(yīng)答下調(diào)。在這之后，以免疫原形式給個(gè)體施用相同抗原。
“免疫原形式”的抗原是包含抗原的形式或配制劑，其產(chǎn)生抗原免疫性。這種形式包括但不局限于單獨(dú)的抗原，結(jié)合一種或多種TH1或TH2相關(guān)佐劑的抗原，與部分例如與半抗原結(jié)合或偶聯(lián)的抗原。這里使用的術(shù)語(yǔ)“以免疫原形式施用的的抗原(an antigen administered inimmunogenic form)”指相對(duì)于抗原的免疫治療形式所用的給藥類型或給藥途徑而言的給藥類型或給藥途徑。例如，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)皮下給藥來(lái)施用免疫原形式的抗原，而可通過(guò)舌下給藥來(lái)施用使個(gè)體脫敏的相同抗原(免疫治療形式)。
在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，免疫原形式的抗原包含和適當(dāng)?shù)腡H1或TH2佐劑在一起的抗原，其中佐劑通常與誘導(dǎo)是免疫治療的靶的一類TH反應(yīng)有關(guān)的物質(zhì)。
通常，術(shù)語(yǔ)佐劑指被加入到免疫原性試劑中的物質(zhì)，當(dāng)受體宿主暴露于這種混合物時(shí)，該物質(zhì)能非特異性地在受體宿主體內(nèi)增強(qiáng)或加強(qiáng)針對(duì)該免疫原試劑的免疫反應(yīng)。然而，當(dāng)在這里使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)“佐劑”指“TH1佐劑”或者“TH2佐劑”。通常，TH1佐劑或免疫刺激劑誘導(dǎo)TH1細(xì)胞因子(例如IFNγ)的產(chǎn)生增加。TH2佐劑誘導(dǎo)TH2細(xì)胞因子(例如IL-4)的產(chǎn)生增加。
用來(lái)引發(fā)顯著地TH1型反應(yīng)的優(yōu)選佐劑包括例如，完全弗氏佐劑，單磷酸脂質(zhì)A，優(yōu)選3-脫氧?；瘑瘟姿嶂|(zhì)A(3D-MPL)和鋁鹽的組合。從RibiImmunoChem Research Inc.(Hamilton，Mont.；參見(jiàn)美國(guó)專利4,436,727；4,877,611；4,866,034和4,912,094)可以獲得MPL佐劑。包含CpG的寡核苷酸(其中CpG二核苷酸是未甲基化的)也誘導(dǎo)優(yōu)勢(shì)型TH1反應(yīng)。這種寡核苷酸為大家所熟知，例如在WO96/02555，WO99/33488，美國(guó)專利6,008,200和5,856,462已描述。例如，Sato et al.，Science 273352，1996也描述了免疫刺激性DNA序列，美國(guó)專利6,514,948公開(kāi)了免疫刺激性核苷酸序列(ISS)。另一種優(yōu)選的TH1佐劑是皂甙，優(yōu)選QS21(Aquila，美國(guó))，QS21可單獨(dú)使用，或者和其它佐劑組合使用。例如一種增強(qiáng)的(enhanced)系統(tǒng)包括單磷酸脂質(zhì)A和皂甙衍生物的組合，例如WO94/00153中描述的QS21和3D-MPL的組合，或者WO96/33739中描述的致反應(yīng)力較小的混合物，在該混合物中用膽固醇對(duì)QS21進(jìn)行了淬滅。其它優(yōu)選的配制劑包含水包油乳劑和生育酚。在WO95/17210中描述了包含存在于水包油乳劑中的QS21，3D-MPL和生育酚的效力特別強(qiáng)的佐劑劑型。依據(jù)它誘導(dǎo)專門(mén)的TH1免疫反應(yīng)的能力，可以預(yù)料可利用巴西利什曼原蟲(chóng)核醣體抗原(braziliensis ribosomaantigen)(LbeIF4A)和其變體作為佐劑。
其它優(yōu)選的佐劑包括Montanide ISA 720(Seppic，法國(guó))，SAF(Chiron，Calif.，美國(guó))，ISCOMS(CSL)，MF-59(Chiron)，SBAS系列佐劑(例如SBAS-2或SBAS-4，可以從SmithKline Beecham，Rixensart，比利時(shí)獲得)，Detox(Corixa，Hamilton，Mont.)，RC-529(Corixa，Hamilton，Mont.)和其它的氨基烷基氨基葡萄糖苷4-磷酸酯(aminoalkyl glucosaminide4-phosphate)(AGPs)，例如在美國(guó)專利6,113,918和6,355,257中描述的那些佐劑，在此將他們的公開(kāi)內(nèi)容全部引入作為參考。
用來(lái)引發(fā)優(yōu)勢(shì)型TH2型反應(yīng)的優(yōu)選佐劑包括，例如，磷酸聚合物(Guy etal.1998，Vaccine 16850-856.)和鋁(例如氫氧化鋁，磷酸鋁)。
其它有用的佐劑包括霍亂毒素，類霍亂原前體(procholeragenoid)，霍亂毒素B亞單位和真菌多糖，包括但不限于裂裥菌素(schizophyllan)，胞壁酰二肽(muramyl dipeptide)，胞壁酰二肽衍生物，佛波醇酯(phorbol ester)，微球(microsphere)，非幽門(mén)螺桿菌的細(xì)菌溶菌產(chǎn)物，大腸桿菌的不穩(wěn)定的毒素，嵌段聚合物，皂甙和ISCOMs。另外的佐劑，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以參考，例如，Azuma，1992，Vaccine，vol.10，1000(1992)；Pockley & Montgomery，1991，Immunology，vol.73，19-23；Adam & Lederer″Muramyl peptides asImmunomodulators″ISI Atlas of Science 205(1988)；Clements et al.1988，Vaccine，vol.6，269；Ben Ahmeida et al.，1993，Vaccine，vol.11，1302和Gupta，et al.，1993，Vaccine，vol.11，290-308。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗原和/或佐劑被合并到單一免疫調(diào)節(jié)劑中。這里使用的術(shù)語(yǔ)“免疫調(diào)節(jié)劑”指包含至少一種TH1或TH2抗原的制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑更進(jìn)一步包含至少一種TH1和/或TH2佐劑。TH1和/或TH2佐劑的使用取決于待治療的疾病或狀況是否是TH1或TH2相關(guān)疾病。
給個(gè)體施用的免疫調(diào)節(jié)劑的量被稱作“有效量”。在這里使用的術(shù)語(yǔ)“有效量”指本發(fā)明中免疫原形式的一種或多種抗原的量，其能產(chǎn)生治療反應(yīng)。例如，在本發(fā)明中，治療反應(yīng)將是TH1或TH2相關(guān)疾病的臨床癥狀的改善。免疫調(diào)節(jié)劑的“有效量”將引起TH1或TH2特異性免疫應(yīng)答的逆轉(zhuǎn)。逆轉(zhuǎn)是反應(yīng)的有效變化，例如從優(yōu)勢(shì)型TH1型反應(yīng)轉(zhuǎn)變成優(yōu)勢(shì)型TH2型反應(yīng)，反之亦然。逆轉(zhuǎn)可能是由于一種TH細(xì)胞類型的選擇性增強(qiáng)超過(guò)了另一種表型的選擇性增強(qiáng)，或者由于一種TH細(xì)胞類型的選擇性下調(diào)超過(guò)了另一種TH細(xì)胞類型的選擇性下調(diào)而引起的。
明顯地，具體的“有效量”將隨待治療的具體疾病，病人的身體狀況，待治療的個(gè)體的種類，治療的持續(xù)時(shí)間，協(xié)同治療的性質(zhì)(如果有的話)，使用的具體配方和免疫調(diào)節(jié)劑的結(jié)構(gòu)而變化。
就前述的抗原制劑而言，免疫調(diào)節(jié)劑可以和合適的“藥物載體”，例如遞送本發(fā)明的免疫調(diào)節(jié)劑到待治療的個(gè)體體內(nèi)的可藥用的溶劑，懸浮劑或者賦形劑聯(lián)用。載體可以是液體或者固體，并依據(jù)計(jì)劃的給藥方式對(duì)其進(jìn)行選擇。
在一個(gè)實(shí)施方案中，可以以試劑盒形式來(lái)提供抗原，佐劑和/或免疫調(diào)節(jié)劑，其中試劑盒包括TH1或TH2抗原，和/或TH1或TH2佐劑和任何附加藥物，遞送抗原或者佐劑到個(gè)體組織的裝置，以及確定抗原或者佐劑對(duì)治療個(gè)體的生物效應(yīng)的試劑。
在整個(gè)說(shuō)明書(shū)中，除非上下文另外要求，否則單詞“包含”或者其變體，將被理解為包括所述整數(shù)或整數(shù)的組，但不排除任何其它的整數(shù)或整數(shù)的群。
將只參考下列的非限制性例子來(lái)更進(jìn)一步地描述本發(fā)明。但是應(yīng)理解，下面的例子只是作例證，無(wú)論如何不應(yīng)將其作為對(duì)上述發(fā)明普遍性的限制。特別是，本發(fā)明詳細(xì)描述了使用具體的TH1，TH2抗原和佐劑的情況，但顯而易見(jiàn)地，應(yīng)理解這里的發(fā)現(xiàn)不局限于這些抗原或者佐劑。
實(shí)施例1 TH2免疫的選擇性耐受從動(dòng)物資源中心(Murdoch大學(xué)，西澳大利亞)購(gòu)買(mǎi)無(wú)特定病原體的C57BL/6J和BALB/c小鼠，在有屏障物的條件下圈養(yǎng)在Telethon Institute forChild Health Research。動(dòng)物維持在溫度和燈光可控的環(huán)境中，并將其飼養(yǎng)在低-塵鋪墊物上。用酸化水和高壓滅菌的不含OVA的食物丸粒飲食飼喂動(dòng)物。每天上午9點(diǎn)和下午5點(diǎn)監(jiān)控懷孕晚期的雌性動(dòng)物以確定分娩日期。出生日被指定為第0天。新生動(dòng)物定義為出生24h的動(dòng)物。6-8周大小的成年鼠就可以使用。所有的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)都經(jīng)研究所動(dòng)物道德和實(shí)驗(yàn)委員會(huì)批準(zhǔn)，該委員會(huì)遵守澳大利亞國(guó)家健康和醫(yī)學(xué)研究委員會(huì)制定的法規(guī)。
用溶解在PBS中的濃度為100mg/ml的3×1mg的OVA(V級(jí)；Sigma，MO，USA)或PBS連續(xù)3天通過(guò)胃插管飼喂成年小鼠。4周以后，腹腔注射存在于在4毫克氫氧化鋁佐劑中的100μg的OVA攻擊這些鼠，在體外用1mg/ml的OVA刺激11天后引流的淋巴結(jié)細(xì)胞，按照每份制造商的說(shuō)明(所有這些都來(lái)源于Pharmingen；San Diego，USA)通過(guò)捕獲ELISA測(cè)定培養(yǎng)上清液中的IFNγ和IL-5。利用Assayzap通用計(jì)算軟件，可以將培養(yǎng)上清液中的IFNγ和IL-5濃度內(nèi)插到已知量的重組IFNγ和IL-5標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線段。結(jié)果用pg/ml表示，IFNγ的ELISA測(cè)定法的靈敏度是15pg/ml，IL-5的所述測(cè)定法的靈敏度是40pg/ml。
圖1顯示從多個(gè)6只鼠組成的組中獲得的平均數(shù)±SEM表示的結(jié)果，其不成對(duì)的學(xué)生t檢驗(yàn)進(jìn)行比較。利用用于MacIntosh計(jì)算機(jī)的第2版的Instat軟件程序(Graphpad software，San Diego，USA)對(duì)結(jié)果進(jìn)行了分析。當(dāng)p值＜0.05.時(shí)，認(rèn)為差異是有顯著的。結(jié)果表明TH2免疫的選擇性耐受，如用氫氧化鋁中的OVA進(jìn)行攻擊之后OVA飼喂的小鼠在體外產(chǎn)生的TH2細(xì)胞因子IL-5減少，同時(shí)伴隨TH1細(xì)胞因子IFN-γ的產(chǎn)生增加所示。
實(shí)施例2 TH1免疫的選擇性耐受如上述實(shí)施例1所述，用3×1mg的OVA或PBS連續(xù)3天飼喂成年小鼠。但是，在4周后，經(jīng)腹腔利用存在于完全弗氏佐劑中的100μg的OVA攻擊所述小鼠。再一次，在體外用1mg/ml的OVA刺激11天后引流的淋巴結(jié)細(xì)胞，依據(jù)實(shí)施例1的描述測(cè)定培養(yǎng)上清液中的細(xì)胞因子。圖2顯示TH1免疫的選擇性耐受，如用完全弗氏佐劑中的OVA進(jìn)行攻擊之后OVA飼喂的小鼠在體外產(chǎn)生的TH1細(xì)胞因子IFN-γ減少，同時(shí)伴隨TH2細(xì)胞因子IL-5的產(chǎn)生增加所示。
實(shí)施例3總體OVA特異性TH細(xì)胞免疫的非選擇性耐受如上述實(shí)施例1和2所示，用3×1mg OVA或者PBS連續(xù)3天飼喂成年鼠。但是，在4周以后，經(jīng)腹腔利用存在于PBS中的100μg可溶性O(shè)VA攻擊所述小鼠。再一次，在體外用1mg/ml的OVA刺激11天后引流的淋巴結(jié)細(xì)胞，如上所述測(cè)定培養(yǎng)上清液中的細(xì)胞因子。圖3顯示總體OVA特異性TH細(xì)胞免疫的非選擇性耐受，如用不含佐劑的可溶性O(shè)VA進(jìn)行攻擊之后動(dòng)物中IL-5和IFN-g體外生成平行下降所示。
實(shí)施例4 OVA致敏的鼠的脫敏在第0天通過(guò)用TH2選擇性佐劑氫氧化鋁(AH)中的1μg的OVA進(jìn)行ip免疫，使三組鼠對(duì)OVA敏感。然后在第7，9，14，16，21，23，28，30和31天給其中一組(C組)重復(fù)皮下注射25μg OVA，其目的是使其TH2依賴性IgE反應(yīng)脫敏(免疫治療方案)。第二組改為接受重復(fù)PBS注射(B組)，第三組不接受更進(jìn)一步的治療直到第32天(A組)。在第32天，用存在于AH中的另外劑量的OVA ip攻擊所有3組。隨后在第31天和51天，對(duì)所有動(dòng)物進(jìn)行取血進(jìn)行抗OVA IgE測(cè)定。
在圖4中可以看出C組被脫敏(耐受的)，如它們不能增加針對(duì)OVA/AH攻擊的繼發(fā)IgE反應(yīng)。相反，A組和B組顯示出強(qiáng)烈的繼發(fā)IgE反應(yīng)，如第51天IgE抗體滴度出現(xiàn)大約3倍的增加所示。
這些數(shù)據(jù)為在變應(yīng)原的脫敏型注射過(guò)程(免疫治療方案)之后，利用存在于TH2偏離型(TH2-skewing)佐劑中的相同變應(yīng)原攻擊對(duì)OVA“過(guò)敏的”動(dòng)物將導(dǎo)致TH2依賴的IgE反應(yīng)的脫敏/耐受這一理論提供了證據(jù)?！懊庖咧委煼桨浮蹦M了目前治療過(guò)敏患者的變應(yīng)疾病時(shí)所用的治療類型。我們猜測(cè)在“免疫治療方案”結(jié)束時(shí)添加變應(yīng)原/AH攻擊，將會(huì)起到和“加強(qiáng)注射”一樣的功能，通過(guò)有選擇地指導(dǎo)對(duì)免疫反應(yīng)的TH2分支的耐受過(guò)程而增加IgE反應(yīng)下調(diào)的效率。
實(shí)施例5舌下給藥治療如實(shí)施例4所述，在第0天經(jīng)腹腔施用4mg鋁(TH2選擇性佐劑)中的1μg的OVA(抗原)使小鼠致敏。這樣就有效地建立對(duì)OVA“過(guò)敏的”鼠。
在試驗(yàn)的數(shù)周之內(nèi)，從第7，14，21和28天開(kāi)始，每天舌下給予小鼠5劑OVA(一共20劑)。每劑是存在于10ml PBS中的100μg的OVA。對(duì)照鼠只接受相同劑量的PBS。通常這些代表“免疫治療”步驟的處理步驟被描述為免疫治療，其中給予動(dòng)物多劑產(chǎn)生變應(yīng)反應(yīng)的抗原，并期望它們逐漸喪失對(duì)抗原的敏感性。
在第37天鼠被分成三組1).“對(duì)照組”。這些鼠接受“常規(guī)的免疫治療”，其中治療包括舌下施用OVA進(jìn)行免疫治療。
2).這些鼠接受“新的”治療方案，以免疫治療形式舌下給藥(第32天結(jié)束)，接著在第37天以免疫原形式給藥。免疫原形式給藥是腹腔注射100μgPBS中的OVA(即可溶性IgE攻擊組)；和3).這些鼠接受“新的”治療方案，以免疫治療形式舌下給藥(第32天結(jié)束)，接著在第37天以免疫原形式給藥，免疫原形式給藥是腹腔注射100μg4mg鋁(TH2佐劑)中的OVA(即IgE鋁攻擊組)。
在第75，158和206天，小鼠進(jìn)一步經(jīng)腹腔注射接受PBS中的100μg OVA，進(jìn)行加強(qiáng)免疫。
然后利用皮膚致敏的24h潛伏期，通過(guò)在大鼠中進(jìn)行的PCA測(cè)試(Ovary& Kojima，1975，International Arch.Allergy & Appl.Immunol.，4816)滴定小鼠血清中的抗OVA IgE抗體水平。簡(jiǎn)而言之就是，將血清樣品在PBS中連續(xù)稀釋，將50μl的等分試樣經(jīng)皮內(nèi)注射到雄性WAG大鼠的背側(cè)皮膚中。用含有1％Evans藍(lán)色染料的PBS中的4mg/ml的OVA經(jīng)靜脈內(nèi)攻擊，24小時(shí)后引發(fā)PCA反應(yīng)。十五分鐘以后，檢查皮膚藍(lán)色病變的發(fā)展情況。產(chǎn)生直徑為5mm的藍(lán)色病變的血清的最高稀釋度的倒數(shù)作為PCA滴度。從多次注射存在于鋁中的OVA的小鼠收集的血清作為陽(yáng)性對(duì)照。從多次注射PBS的小鼠收集的血清作為陰性對(duì)照。
圖5到7顯示在標(biāo)明的時(shí)間處所取的血清的PCA滴度?！癝.L OVA”是接受舌下施用的OVA的鼠，“S.L.PBS”接受舌下施用的PBS的鼠(也用黑色和白色長(zhǎng)條表示)。
這些結(jié)果顯示1. S.L.PBS和S.L.OVA之間的顯著差異僅見(jiàn)于在第37天只用OVA(PBS或鋁中)攻擊的小鼠中。
2.所述差異在延長(zhǎng)的時(shí)間過(guò)程里仍保持顯著，即使未攻擊組和攻擊組的對(duì)照(S.L.PBS)的最終滴度相同也是如此。
3.給予S.L.OVA，然后進(jìn)行攻擊的小鼠的IgE滴度比未被攻擊的SL組的所述滴度低。
4.用OVA和鋁攻擊的S.L.治療的小鼠中的滴度是所有組中最低的。
這些資數(shù)據(jù)證明了在舌下免疫治療(脫敏作用)后，用抗原/佐劑進(jìn)行腸胃外治療能增強(qiáng)脫敏過(guò)程的效率的理論。換句話說(shuō)，在免疫治療后，用抗原/佐劑進(jìn)行治療能“加強(qiáng)”脫敏過(guò)程。
權(quán)利要求
1.一種改變個(gè)體中的特異性免疫應(yīng)答的方法，包括i).給需要的個(gè)體施用有效量的免疫治療形式的抗原，其中所述免疫反應(yīng)被下調(diào)；和ii).隨后給個(gè)體施用有效量的免疫調(diào)節(jié)劑，所述免疫調(diào)節(jié)劑含有免疫原形式的所述抗原。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其中免疫調(diào)節(jié)劑還包含TH1或者TH2佐劑，其中所述佐劑通常誘導(dǎo)作為免疫治療的靶的TH反應(yīng)類型。
3.權(quán)利要求1或2所述的方法，其中免疫治療被靶向特異性免疫應(yīng)答。
4.權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)所述的方法，其中步驟i)中的有效量是免疫治療形式的所述抗原的一或多個(gè)劑量。
5.權(quán)利要求1-4任何一項(xiàng)所述的方法，其中免疫治療形式的所述抗原還含有被設(shè)計(jì)為用來(lái)調(diào)節(jié)特異性免疫應(yīng)答的物質(zhì)。
6.權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的方法，其中對(duì)特異性免疫應(yīng)答的改變是與正在治療的疾病的表達(dá)相關(guān)聯(lián)的TH反應(yīng)成分的減少。
7.權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的方法，其中對(duì)特異性免疫應(yīng)答的改變是將反應(yīng)的TH1成分轉(zhuǎn)換成TH2成分，或者將TH2成分轉(zhuǎn)換成TH1成分。
8.權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的方法，其中對(duì)特異性免疫應(yīng)答的改變是將反應(yīng)的TH1和TH2成分的比例顛倒。
9.權(quán)利要求8所述的方法，其中未經(jīng)治療的個(gè)體中包含高水平TH1細(xì)胞因子生成和低水平TH2細(xì)胞因子生成的免疫反應(yīng)將在治療后被逆轉(zhuǎn)。
10.權(quán)利要求8所述的方法，其中未經(jīng)治療的個(gè)體中包含高水平TH2細(xì)胞因子生成和低水平TH1細(xì)胞因子生成的免疫反應(yīng)將在治療后被逆轉(zhuǎn)。
11.一種治療TH1相關(guān)疾病的方法，包括i).給需要的個(gè)體施用有效量的免疫治療形式的抗原；和ii).隨后給個(gè)體施用有效量的免疫調(diào)節(jié)劑，所述免疫調(diào)節(jié)劑含有免疫原形式的所述抗原，其中相對(duì)于施用所述免疫調(diào)節(jié)劑之前的特異性TH1反應(yīng)而言，個(gè)體中的抗原特異性TH1反應(yīng)被降低。
12.權(quán)利要求11所述的方法，其中所述免疫調(diào)節(jié)劑還包含TH1佐劑。
13.一種治療TH2相關(guān)疾病的方法，包括i).給需要的個(gè)體施用有效量的免疫治療形式的抗原；和ii).隨后給個(gè)體施用有效量的免疫調(diào)節(jié)劑，所述免疫調(diào)節(jié)劑含有免疫原形式的所述抗原，其中相對(duì)于施用所述免疫調(diào)節(jié)劑之前的特異性TH2反應(yīng)而言，個(gè)體中的抗原特異性TH2反應(yīng)被降低。
14.權(quán)利要求13所述的方法，其中免疫調(diào)節(jié)劑還包含TH2佐劑。
15.一種治療與混合的TH1和TH2免疫反應(yīng)相關(guān)聯(lián)的疾病的方法，包括i).給需要的個(gè)體施用有效量的免疫治療形式的抗原；和ii).隨后給個(gè)體施用有效量的免疫調(diào)節(jié)劑，所述免疫調(diào)節(jié)劑含有能加強(qiáng)TH1和TH2免疫性的免疫原形式的所述抗原，其中相對(duì)于施用所述免疫調(diào)節(jié)劑之前的特異性TH1和TH2反應(yīng)而言，個(gè)體中隨后出現(xiàn)的抗原特異性TH1和TH2反應(yīng)降低。
16.權(quán)利要求15所述的方法，其中步驟i)中的免疫治療形式的抗原是經(jīng)舌下施用的抗原。
17.權(quán)利要求15或16所述的方法，其中步驟ii)中的免疫調(diào)節(jié)劑是經(jīng)胃腸外施用的劑型。
19.權(quán)利要求15-18任何一項(xiàng)所述的方法，其中所述免疫調(diào)節(jié)劑還包含能加強(qiáng)TH1和TH2免疫性的佐劑或TH1和TH2佐劑的混合物，其中相對(duì)于施用所述免疫調(diào)節(jié)劑之前的特異性TH1和TH2反應(yīng)而言，個(gè)體中隨后出現(xiàn)的抗原特異性TH1和TH2反應(yīng)被降低。
20.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述免疫治療是給需要的個(gè)體施用有效量的一或多種免疫治療形式的抗原，其中所述抗原與病理性TH2免疫的表達(dá)有關(guān)。
21.權(quán)利要求21所述的方法，其中所述個(gè)體患TH1相關(guān)疾病，所述免疫治療形式的抗原主要是TH1特異性抗原。
22.一種治療疾病的方法，包括i).給需要的個(gè)體施用有效量的免疫治療形式的抗原，其中所述疾病的免疫反應(yīng)被下調(diào)；和ii).隨后給個(gè)體施用有效量的免疫調(diào)節(jié)劑，所述免疫調(diào)節(jié)劑含有免疫調(diào)節(jié)形式的所述抗原。
23.權(quán)利要求22所述的方法，其中所述免疫調(diào)節(jié)劑還包含TH1或者TH2佐劑，其中佐劑通常誘導(dǎo)作為免疫治療形式的抗原的靶的TH反應(yīng)類型。
24.權(quán)利要求22所述的方法，其中所述疾病是TH1相關(guān)疾病，其選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，多發(fā)性硬化，甲狀腺炎，克隆氏病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜視網(wǎng)膜炎，實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦炎，胰島素依賴型糖尿病，接觸性皮炎和慢性炎性疾病組成的組。
25.權(quán)利要求22所述的方法，其中所述疾病是TH2相關(guān)疾病，其選自變應(yīng)性特應(yīng)性疾病，變應(yīng)性哮喘，特應(yīng)性皮炎，高-IgE綜合癥，Omenn′s綜合癥和過(guò)敏性鼻炎組成的組。
26.權(quán)利要求2所述的方法，其中TH2佐劑選自鋁，白喉毒素，乳酰巖藻五糖III和磷酸聚合物或其組合組成的組。
27.權(quán)利要求2所述的方法，其中TH1佐劑選自完全弗氏佐劑，單磷酸脂質(zhì)，3-脫氧酰基單磷酸脂質(zhì)A(3D-MPL)，鋁鹽，包含CpG的寡核苷酸，免疫刺激性DNA序列，皂甙，Montanide ISA 720，SAF，ISCOMS，MF-59，SBAS-3，SBAS-4，Detox，RC-529，氨基烷基氨基葡萄糖苷4-磷酸酯和LbeIF4A組成的組。
28.權(quán)利要求1-27任何一項(xiàng)所述的方法，其中所述個(gè)體是哺乳動(dòng)物。
29.權(quán)利要求28所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是狗，貓，家畜動(dòng)物，靈長(zhǎng)類動(dòng)物或馬。
30.權(quán)利要求28所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
31.用于改變需要的個(gè)體中的TH1或TH2反應(yīng)表型的試劑盒，包括i).一種或多種TH1抗原；或ii).一種或多種TH1或TH2佐劑；iii).它們的組合；和iv).使用說(shuō)明書(shū)。
32.一種免疫治療的方法，包括i).給需要的個(gè)體多次施用抗原；ii).以少于五次獨(dú)立的給藥，對(duì)所述個(gè)體施用與一種或多種TH1和/或TH2佐劑組合的所述抗原。
33.權(quán)利要求32所述的方法，其中與TH1和/或TH2佐劑組合的所述抗原的獨(dú)立給藥次數(shù)少于三次。
34.權(quán)利要求32所述的方法，其中與TH1和/或TH2佐劑組合的所述抗原的獨(dú)立給藥次數(shù)為一次。
35.免疫調(diào)節(jié)劑在制備治療TH1相關(guān)疾病或TH2相關(guān)疾病的藥物中的用途，其中所述的免疫調(diào)節(jié)劑包含免疫調(diào)節(jié)形式的抗原。
36.權(quán)利要求35所述的用途，其中所述免疫調(diào)節(jié)劑還包含至少一種與增強(qiáng)所述疾病相關(guān)型T輔助細(xì)胞反應(yīng)有關(guān)的佐劑。
37.免疫調(diào)節(jié)劑在制備治療易患TH-1或TH-2相關(guān)疾病的個(gè)體所患的所述疾病的藥物中的用途，其中所述個(gè)體已經(jīng)預(yù)先用能降低所述個(gè)體內(nèi)與所述疾病相關(guān)的T輔助細(xì)胞免疫反應(yīng)的抗原的免疫治療形式和劑量治療，其中所述免疫調(diào)節(jié)劑還包含至少一種與增強(qiáng)所述疾病相關(guān)型T輔助細(xì)胞反應(yīng)有關(guān)的佐劑和免疫原形式的所述抗原。
38.權(quán)利要求37所述的用途，其中所述免疫治療形式被靶向特異性免疫應(yīng)答。
39.權(quán)利要求37所述的用途，其中對(duì)特異性免疫應(yīng)答的改變是與待治療的疾病的表達(dá)相關(guān)聯(lián)的THL反應(yīng)成分的減少。
40.權(quán)利要求37所述的用途，其中對(duì)特異性免疫應(yīng)答的改變是將反應(yīng)的TH1成分轉(zhuǎn)換成TH2成分，或者將TH2成分轉(zhuǎn)換成TH1成分。
41.權(quán)利要求37所述的用途，其中對(duì)特異性免疫應(yīng)答的改變是將反應(yīng)中TH1和TH2成分的比例顛倒。
42.權(quán)利要求37所述的用途，其中未經(jīng)治療的個(gè)體中包含高水平TH1細(xì)胞因子生成和低水平TH2細(xì)胞因子生成的免疫反應(yīng)將在治療后被逆轉(zhuǎn)。
43.權(quán)利要求37所述的用途，其中未經(jīng)治療的個(gè)體中包含高水平TH2細(xì)胞因子生成和低水平TH1細(xì)胞因子生成的免疫反應(yīng)將在治療后被逆轉(zhuǎn)。
44.權(quán)利要求37所述的用途，其中所述疾病是TH1相關(guān)疾病，其選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，多發(fā)性硬化，甲狀腺炎，克隆氏病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜視網(wǎng)膜炎，實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦炎，胰島素依賴型糖尿病，接觸性皮炎和慢性炎性疾病組成的組。
45.權(quán)利要求37所述的用途，其中所述疾病是TH2相關(guān)疾病，其選自變應(yīng)性特應(yīng)性疾病，變應(yīng)性哮喘，特應(yīng)性皮炎，高-IgE綜合癥，Omenn′s綜合癥和過(guò)敏性鼻炎組成的組。
46.權(quán)利要求37所述的用途，其中TH2佐劑選自鋁，白喉毒素，乳酰巖藻五糖III和磷酸聚合物或其組合組成的組。
47.權(quán)利要求37所述的用途，其中TH1佐劑選自完全弗氏佐劑，單磷酸脂質(zhì)，3-脫氧?；鶈瘟姿嶂|(zhì)A(3D-MPL)，鋁鹽，包含CpG的寡核苷酸，免疫刺激性DNA序列，皂甙，Montanide ISA 7370，SAF，ISCOMS，MF-59，SBAS-3，SBAS-4，Detox，RC-5379，氨基烷基氨基葡萄糖苷4-磷酸酯和LbeIF4A組成的組。
48.權(quán)利要求35-47任何一項(xiàng)所述的用途，其中所述個(gè)體是哺乳動(dòng)物。
49.權(quán)利要求48所述的用途，其中所述哺乳動(dòng)物是狗，貓，家畜動(dòng)物，靈長(zhǎng)類動(dòng)物或馬。
50.權(quán)利要求48所述的用途，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
51.包含至少一種免疫原形式的抗原和至少一種佐劑的免疫調(diào)節(jié)劑，其中所述佐劑通常誘導(dǎo)與所述抗原引起的疾病相關(guān)的TH反應(yīng)類型。
全文摘要
本發(fā)明涉及利用免疫調(diào)節(jié)劑來(lái)實(shí)現(xiàn)免疫反應(yīng)的1型T輔助細(xì)胞(TH1)或2型T輔助細(xì)胞(TH2)分支的變化，從而對(duì)TH1或TH2介導(dǎo)的疾病進(jìn)行治療。具體地，本發(fā)明涉及一種改變個(gè)體中特異性免疫應(yīng)答的方法，包括i)給需要的個(gè)體施用有效量的免疫治療形式的抗原，其中所述免疫反應(yīng)被下調(diào)；和ii)隨后給個(gè)體施用有效量的免疫調(diào)節(jié)劑，其中所述免疫調(diào)節(jié)劑含免疫原形式的所述抗原。
文檔編號(hào)A61P37/00GK1886156SQ200480035504
公開(kāi)日2006年12月27日 申請(qǐng)日期2004年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月30日
發(fā)明者帕特里克·霍爾特, 韋恩·托馬斯, 蒂蒂克·I·托巴古斯 申請(qǐng)人:特萊索恩兒童健康研究院