專利名稱：一種用于治療慢性腎炎的藥物及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)用配制品及其制備方法，具體地說(shuō)是特別適用于治療慢性腎炎的藥物及制備方法。
背景技術(shù)：
慢性腎小球腎炎(簡(jiǎn)稱慢性腎炎)是由多種原因、多種病理類型組成的原發(fā)于腎小球的一組免疫性疾病。臨床特點(diǎn)是起病隱匿，病程冗長(zhǎng)，常規(guī)尿檢中有不同程度的蛋白尿、血尿及管型尿，大多數(shù)病人伴有不同程度的水腫、高血壓及腎功能損害。本病常呈緩慢進(jìn)展性，治療困難、預(yù)后較差，病情逐漸發(fā)展至慢性腎炎晚期時(shí)，由于腎單位不斷地毀損，健存的腎單位越來(lái)越少，纖維組織增生、腎萎縮，最終導(dǎo)致腎功能衰竭。慢性腎炎是引起慢性腎功能衰竭的主要病因之一，它已成為影響人們健康的主要疾病。
對(duì)慢性腎炎的治療，目前尚無(wú)特效藥物?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)多采用降壓、抗凝、利尿等療法，但其多為對(duì)癥治療，且不能從根本上解決問(wèn)題。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為慢性腎炎屬本虛標(biāo)實(shí)證。在治療上通常采用清熱利濕、益氣健脾、活血化瘀藥物進(jìn)行治療，但目前尚缺乏療效確切的成藥?，F(xiàn)已上市用于治療慢性腎炎的中成藥，很多都存在一些難以克服的問(wèn)題。如雷公藤多甙、火把花根片、昆明山海棠，這些藥物的活性成分都屬于雷公藤屬植物提取物。研究表明，雷公藤雖然具有抗炎和免疫抑制作用，但其只能控制病情，不能根治原發(fā)病。再則，雷公藤的副作用很大。近年來(lái)關(guān)于雷公藤對(duì)腎毒害的報(bào)道越來(lái)越多，已被列為腎毒性藥物之一。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種療效好、毒副作用小的用于治療慢性腎炎的藥物，同時(shí)提供一種該藥物的制備方法。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明藥物的活性成份是由下述重量份比的原料制成的積雪草20-100份，黃芪24-96份，川芎10-40份。
其優(yōu)選方案為，它的活性成份是由下述重量份比的原料制成的積雪草30-60份，黃芪24-48份，川芎20-30份。
本發(fā)明藥物的活性成份可采用水提取工藝，即
稱取所述重量份比的原料，加8倍量體積的水煎煮2小時(shí)，過(guò)濾，濾液留用，藥渣加水煎煮兩次，每次2小時(shí)，過(guò)濾，濾液合并，減壓濃縮得含有活性成分的稠膏。
本發(fā)明藥物的活性成份也可采用水提醇沉工藝，即稱取所述重量份比的原料，加8倍量體積的水煎煮提取3次，每次2小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至藥材的1～2倍量體積，加乙醇至溶液中醇濃為70％，冷藏靜置過(guò)夜，分離得上清液，減壓回收乙醇，繼續(xù)濃縮得含活性成分的稠膏。
最能體現(xiàn)本發(fā)明藥物優(yōu)良效果的是采用本發(fā)明所提供的制備方法，即樹脂提取工藝，它包括以下步驟(1)提取藥物活性成分a、按以下重量配比稱取原藥材積雪草20-100份，黃芪24-96份，川芎10-40份；b、將上述藥材加入8-10倍量的40％--60％濃度的乙醇，回流提取，合并提取液，回收乙醇；c、回收乙醇后的提取液加入3-5倍量的去離子水，煮沸，放冷，靜置10-24小時(shí)；取上清液經(jīng)弱極性大孔吸附樹脂處理，先用2--3倍柱體積的去離子水洗脫，再以2--3倍柱體積的20％--30％乙醇洗脫，再以1倍柱體積的40％--50％的乙醇洗脫，最后以2-3倍柱體積的80％-95％乙醇洗脫，收集80％以上乙醇洗脫的流份，減壓條件下回收乙醇，蒸干，得原料藥的活性成分；該步驟中優(yōu)選的工藝參數(shù)為在取上清液經(jīng)弱極性大孔吸附樹脂處理時(shí)，先用3倍柱體積的去離子水洗脫，再以3倍柱體積的20％乙醇洗脫，再以1倍柱體積的40％的乙醇洗脫，最后以3倍柱體積的95％乙醇洗脫，收集95％乙醇洗脫的流份，減壓條件下回收乙醇，蒸干，得原料藥的活性成分；(2)將上述活性成分加入常規(guī)輔料，制備成藥物制劑。
本發(fā)明藥物的活性組分可以加入制備不同劑型時(shí)所需的各種輔料，如崩解劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑，以中藥常規(guī)制劑方法制備成各種常用的口服劑型。如丸劑、散劑、膠囊劑、口服液等。
本發(fā)明具有顯著的清熱利濕、益氣健脾、活血化瘀等功效?？捎行Ы档湍虻鞍住⒀◆?、尿素氮，提高血漿蛋白，改善腎功能，故可用于治療慢性腎炎。
本發(fā)明藥物為純中藥制劑，經(jīng)動(dòng)物長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)及臨床應(yīng)用，未發(fā)現(xiàn)毒副作用。故用于治療慢性腎炎時(shí)安全、可靠，從而有效避免了現(xiàn)有藥物自身毒性所引發(fā)的危害。
本發(fā)明的有益效果通過(guò)下述實(shí)驗(yàn)得到了證實(shí)本發(fā)明藥物對(duì)慢性血清病系膜增生性腎炎的影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組遠(yuǎn)交系健康雄性SD大鼠85只，體重150±21克，10周齡，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物經(jīng)普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，尿蛋白定性結(jié)果陰性，隨機(jī)分為空白組、模型組、樹脂組、水提組、醇沉組、陽(yáng)性對(duì)照組(其中樹脂組、水提組、醇沉組統(tǒng)稱為治療組)，空白組10只，其余每組15只。
給藥方法治療組均以人體每公斤體重給藥量的15倍量的本發(fā)明藥物灌胃(人每日處方量按79克生藥計(jì))，空白組、模型組給與相應(yīng)量的蒸餾水。
樹脂組所給的本發(fā)明藥物是采用本發(fā)明制備方法制備的(即采用本發(fā)明所述的樹脂提取方法)。
水提組所給的本發(fā)明藥物是采用水提法制備的(即本發(fā)明所述的水提取工藝)。
醇沉組所給的本發(fā)明藥物是采用水提醇沉法制備的(即本發(fā)明所述的水提醇沉工藝)。
陽(yáng)性對(duì)照組以人體每公斤體重給藥量的15倍量的雷公藤藥物灌胃(人每日處方量按60毫克計(jì))。
主要試劑完全弗氏佐劑及不完全弗氏佐劑(GIBCO公司)，牛血清白蛋白(BSA)和大腸桿菌內(nèi)毒素(SIGMA公司)。
大鼠實(shí)驗(yàn)性系膜增生性腎炎模型的復(fù)制采用改良的慢性血清病性MsPGN模型[1]，40只雄性SD大鼠，氯胺酮靜脈麻醉后經(jīng)背部切除左側(cè)腎臟，休養(yǎng)1周后進(jìn)行預(yù)免疫。在每只大鼠背部皮下分點(diǎn)注射完全弗氏佐劑0.1ml加BSA3mg，于1周末、2周末背部皮下注射不完全弗氏佐劑0.1ml加BSA3mg，3周末，腹腔注射BSA連續(xù)4次，每次間隔1h，注射劑量每只分別為0.5、1、1.5、3.0mg；次日每只在腹腔注射BSA2mg。正式免疫于預(yù)免疫完成后第一天起，尾靜脈與腹腔注射隔日交替進(jìn)行，每只鼠尾靜脈注射BSA劑量從0.5mg開始，每次增加0.5mg，至2.5mg為止，繼續(xù)每周加量0.5mg，至每日用量5mg為止。腹腔注射量是尾靜脈注射量的1倍，至每日用量10mg為止。免疫2周后尾靜脈注射大腸桿菌內(nèi)毒素100μg/只。全部大鼠與正式免疫8周后處死取腎組織。
正式免疫4周末，測(cè)定空白組和模型組尿蛋白量，詳見(jiàn)表1。
表1正式免疫4周末空白組和模型組24小時(shí)尿蛋白的比較

注&與空白相比P＜0.01結(jié)果表明正式免疫4周末空白組和模型組24小時(shí)尿蛋白的比較，有顯著性差異，說(shuō)明模型組已經(jīng)出現(xiàn)病理?yè)p傷。
生化及病理學(xué)檢查生化檢查(1)24小時(shí)尿蛋白定量；(2)血尿素氮、肌酐；(3)血清總蛋白、白蛋白。半自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)腎臟組織形態(tài)學(xué)的檢查。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明對(duì)MsPGN大鼠尿蛋白的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，模型組的24小時(shí)尿蛋白定量與正常組相比明顯升高，治療各組均有不同程度的蛋白尿，但與模型組相比各治療組顯著降低。其中以樹脂組的24小時(shí)尿蛋白定量最低，樹脂組能明顯減輕MsPGN大鼠的蛋白尿。詳見(jiàn)表2。
表2各組24h尿蛋白定量變化情況(mg/24h)

▲與正常組相比P＜0.01#與模型組相比P＜0.01本發(fā)明對(duì)MsPGN大鼠血肌酐、尿素氮及血漿蛋白的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，模型組的血CRE、BUN均明顯高于正常組p＜0.01，治療組和陽(yáng)性對(duì)照組的BUN與模型組相比明顯降低p＜0.01。治療組、陽(yáng)性對(duì)照組的CRE與模型組相比明顯降低，p＜0.01或p＜0.05，其中以樹脂組和陽(yáng)性對(duì)照組療效較好。
第十周末時(shí)，模型組的血漿蛋白與正常組相比明顯降低p＜0.01，樹脂組的總蛋白與模型組相比明顯升高p＜0.05，而其他各組與模型組相比，無(wú)明顯差別。樹脂組、水提組、陽(yáng)性對(duì)照組的白蛋白與模型組相比明顯升高，p＜0.01或p＜0.05。但以樹脂組療效較好。詳見(jiàn)表3。
表3第十周末血肌酐、尿素氮及血漿蛋白變化情況

注&與模型組相比P＜0.01#與模型組相比P＜0.05▲與模型組相比P＞0.05@與醇沉組相比P＜0.01腎組織學(xué)光鏡檢查以下結(jié)合附圖，對(duì)其檢查結(jié)果進(jìn)行說(shuō)明。


圖1為正常組的病理HE染色圖。
圖2為模型組的病理HE染色圖。
圖3為樹脂組的病理HE染色圖。
圖4為水提組的病理HE染色圖。
圖5為醇沉組的病理HE染色圖。
圖6為陽(yáng)性對(duì)照組的病理HE染色圖。
圖7為正常組的病理染色PAS圖。
圖8為模型組的病理PAS染色圖。
圖9為樹脂組的病理PAS染色圖。
圖10為水提組的病理PAS染色圖。
圖11為醇沉組的病理PAS染色圖。
圖12為陽(yáng)性對(duì)照組的病理PAS染色圖。
從圖1、圖7與圖2-圖12對(duì)比可以看出，模型組部分腎小球增大，腎小球毛細(xì)血管明顯擴(kuò)張，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，炎細(xì)胞浸潤(rùn)，系膜細(xì)胞局灶節(jié)段性增生，部分腎小囊粘連，多數(shù)呈現(xiàn)彌漫的輕重不等的系膜組織增生，大部分區(qū)域?yàn)橹卸仍錾?，表現(xiàn)為系膜區(qū)增寬，增寬的系膜區(qū)內(nèi)系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)均有增生，個(gè)別區(qū)域出現(xiàn)重度增生，毛細(xì)血管腔狹小，個(gè)別結(jié)構(gòu)破壞，血管消失。治療組及腎小球系膜細(xì)胞輕度增生，系膜基質(zhì)輕度增寬，管腔無(wú)擠壓現(xiàn)象，其中以樹脂組和陽(yáng)性對(duì)照組病理變化較輕。
上述實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明可有效預(yù)防和治療慢性腎炎。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1膠囊提取藥物活性成分按以下重量配比稱取原藥材積雪草100kg，黃芪96kg，川芎40kg；將上述藥材加入8倍的40％濃度的乙醇，回流提取，合并提取液，回收乙醇；回收乙醇后的提取液加入3倍的去離子水，煮沸，放冷，靜置24小時(shí)；取上清液經(jīng)弱極性大孔吸附樹脂處理，先用3倍柱體積的去離子水洗脫，再以3倍柱體積的20％乙醇洗脫，再以1倍柱體積的40％的乙醇洗脫，最后以3倍柱體積的95％乙醇洗脫，收集95％乙醇洗脫的流份，減壓條件下回收乙醇，蒸干，得原料藥的活性成分干浸膏；將干浸膏粉碎成細(xì)粉，裝入明膠硬膠囊，0.25克/粒，每日三次，每次4-6粒。
實(shí)施例2片劑提取藥物活性成分按以下重量配比稱取原藥材積雪草20kg，黃芪24kg，川芎10kg；將上述藥材加入10倍60％濃度的乙醇，回流提取，合并提取液，回收乙醇；回收乙醇后的提取液加入5倍的去離子水，煮沸，放冷，靜置10小時(shí)；取上清液經(jīng)弱極性大孔吸附樹脂處理，先用2倍柱體積的去離子水洗脫，再以2倍柱體積的30％乙醇洗脫，再以1倍柱體積的40％％的乙醇洗脫，最后以2倍柱體積的80％乙醇洗脫，收集80％乙醇洗脫的流份，減壓條件下回收乙醇，蒸干，得含有原料藥活性成分的干浸膏；將干浸膏粉碎成細(xì)粉，加入輔料，壓制成片，0.5克/片。每日三次，每次2-5片。
實(shí)施例3～6中藥物活性成分的提取是按照實(shí)施例1所述方法進(jìn)行的，只是原料的用量配比有所不同，并按照相應(yīng)的制劑常規(guī)制成不同的劑型，但均可達(dá)到本發(fā)明所述效果。

權(quán)利要求
1.一種用于治療慢性腎炎的藥物，其特征在于它的活性成份是由下述重量份比的原料制成的積雪草20-100份，黃芪24-96份，川芎10-40份。
2.權(quán)利要求1所述的用于治療慢性腎炎的藥物，其特征在于它的活性成份是由下述重量份比的原料制成的積雪草30-60份，黃芪24-48份，川芎20-30份。
3.一種權(quán)利要求1所述的用于治療慢性腎炎的藥物的制備方法其特征在于它包括以下步驟(1)提取藥物活性成分a)按以下重量配比稱取原藥材積雪草20-100份，黃芪24-96份，川芎10-40份；b)將上述藥材加入8-10倍的40％--60％濃度的乙醇，回流提取，合并提取液，回收乙醇；c)回收乙醇后的提取液加入3-5倍的去離子水，煮沸，放冷，靜置10-24小時(shí)；d)取上清液經(jīng)弱極性大孔吸附樹脂處理，先用2--3倍柱體積的去離子水洗脫，再以2--3倍柱體積的20％--30％乙醇洗脫，再以1倍柱體積的40％--50％的乙醇洗脫，最后以2-3倍柱體積的80％-95％乙醇洗脫，收集80％以上乙醇洗脫的流份，減壓條件下回收乙醇，蒸干，得原料藥的活性成分；(2)將上述活性成分加入常規(guī)輔料，制備成藥物制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物制備方法，其特征在于所述的d步驟為取上清液經(jīng)弱極性大孔吸附樹脂處理，先用3倍柱體積的去離子水洗脫，再以3倍柱體積的20％乙醇洗脫，再以1倍柱體積的40％的乙醇洗脫，最后以3倍柱體積的95％乙醇洗脫，收集80％以上乙醇洗脫的流份，減壓條件下回收乙醇，蒸干，得原料藥的活性成分.
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于治療慢性腎炎的藥物及其制備方法。它由下述重量份比的原料制成的積雪草20－100份，黃芪24－96份，川芎10－40份。其方法包括以下步驟a、按以下重量配比稱取原藥材積雪草20－100份，黃芪24－96份，川芎10－40份；b、將上述藥材加入8－10倍量的40％－60％濃度的乙醇，回流提取，合并提取液，回收乙醇；c、回收乙醇后的提取液加入3－5倍量的去離子水，煮沸，放冷，靜置10－24小時(shí)。將上述活性成分加入常規(guī)輔料，制備成藥物制劑。本發(fā)明可有效降低尿蛋白、血肌酐、尿素氮，提高血漿蛋白，改善腎功能，故可用于治療慢性腎炎。
文檔編號(hào)A61P13/12GK1795890SQ200410092419
公開日2006年7月5日 申請(qǐng)日期2004年12月22日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月22日
發(fā)明者黃懷鵬, 張贊, 左文飛, 高國(guó)領(lǐng) 申請(qǐng)人:神威藥業(yè)有限公司