專利名稱：組胺治療肝疾病的用途的制作方法
背景技術：
發(fā)明領域下面的公開涉及治療和/或預防哺乳動物由反應性氧屬所致肝組織與細胞損傷的方法。更具體地，本文涉及通過組胺和組胺相關性化合物的給藥預防和/或減少和/或逆轉肝組織與細胞損傷。
相關技術的說明氧化性應激反應、也就是由反應性氧屬(ROS)所施加的毒性，被視為肝疾病中的全身現象，其程度似乎與疾病的嚴重性和階段有相互關系。與由氧化性應激反應所致細胞損傷有關的作用機理已經牽涉在大量疾病中，包括肝炎，涉及對肝細胞的直接損傷。有人已經檢查了氧化性應激反應在門靜脈高血壓肌力過度性循環(huán)形成中的角色。不過，Bomzon和Ljubuncic已經指出，得出氧化性應激反應本身在肝疾病中影響至少血管平滑肌細胞功能的結論為時尚早。Pharmacol Ther.，89(3)295-308(2001)。
氧化性應激反應可能在肝疾病中扮演角色的理論可能并不令人驚訝，因為有人已經提出氧化性應激反應有助于在惡性腫瘤部位和慢性病毒感染中的免疫抑制狀態(tài)(參見美國專利No.5,728,378、6,000,516和6,155,266)。居留在腫瘤內部或附近的淋巴細胞顯示氧化性損傷的跡象，包括更高程度的編程性細胞死亡和缺陷性跨膜信號轉導。腫瘤生長部位的氧化性應激反應大概是由鄰近的吞噬細胞(單核細胞/巨噬細胞(MO)或嗜中性粒細胞(GR))產生的ROS所傳送的。組胺是吞噬細胞中ROS產生的抑制劑，目前用作淋巴細胞激活性細胞因子(IL-2和IFN-α)的輔助用藥，目的是增強細胞因子效率。
Rubin等討論了組胺和其他充當“引物”的化合物治療癌癥、包括肝癌的用途(參見美國專利No.6,303,660)。引物化合物被認為通過增加實體腫瘤內正常結締組織細胞中環(huán)腺苷一磷酸(cAMP)的細胞內水平而發(fā)揮作用。引物對含有腫瘤的區(qū)域的局部給藥被認為導致胞間壓力的下降。這種胞間壓力的減少也被認為有利于抗癌劑的攝取。
鑒于肝疾病的破壞性后果和當今只有部分成功的治療方法可用，一直需要治療肝疾病和減少肝細胞損傷的改進方法。
發(fā)明概述本文涉及治療和/或預防哺乳動物由反應性氧屬所致肝組織與細胞損傷的方法。更具體地，本文涉及通過組胺和組胺激動劑的給藥預防和/或減少肝組織與細胞損傷。在一種實施方式中，提供了抑制和減少反應性氧屬(ROS)-介導的、患者肝細胞與組織的氧化性損傷。該方法在一方面包含將有效抑制酶產生性ROS的產生或釋放的化合物對患有由ROS-介導的氧化性損傷所導致或惡化的肝疾病的患者給藥的步驟。盡管組合物和方法適用于任意肝疾病，不過這些方法特別適應于治療選自下組的肝疾病門靜脈高血壓、阿拉惹綜合征、α-1-抗胰蛋白酶缺陷、自體免疫性肝炎、膽閉鎖、慢性肝炎、肝臟癌癥、轉移至肝臟的癌癥、肝硬化、肝內膽汁郁積、肝靜脈血栓形成、肝靜脈阻塞性疾病、肝豆狀核變性、肝腫大、肝肺綜合征、肝腎綜合征、肝囊腫、肝膿腫、脂肪肝、半乳糖血癥、吉爾伯特綜合征、門靜脈高血壓、酒精性肝疾病(ALD)、寄生蟲性肝疾病、紫癜性肝炎、紅細胞肝卟啉癥、肝卟啉癥、肝結核、原發(fā)性膽硬化、原發(fā)性硬化性膽管炎、雷亥綜合征、結節(jié)病、酪氨酸血癥、I型糖原貯存性疾病、威爾遜氏病、新生兒肝炎、非酒精性脂肝炎、血色素沉著和澤爾韋格綜合征。
本發(fā)明的另一種實施方式涉及治療患有疾病狀態(tài)的患者的方法，其中可能存在吞噬細胞產生的、反應性氧屬(ROS)-介導的氧化性損傷。方法方面包含鑒別其中ROS導致ROS-介導的氧化性損傷的肝疾病患者，和給以有效抑制ROS產生或釋放的化合物。
本發(fā)明在另一方面提供組合物，包括有效抑制反應性氧屬產生或釋放的化合物和肝毒性藥物。肝毒性藥物可以是硫唑嘌呤、甲基多巴、硝呋妥因、氯貝特、曲格列酮、布洛芬、別嘌呤醇、消炎痛、來氟米特、對乙酰氨基酚、雙氯芬酸、異煙肼、四環(huán)素、紅霉素、硝呋妥因、阿莫西林、利福平、酮康唑、氟氯噁西林、曲伐沙星、磺胺類、雌二醇、鐵、谷胱甘肽、氟烷、異氟烷、卡托普利、地爾硫、苯妥英、丙戊酸、卡馬西平、苯巴比妥、撲米酮、曲唑酮、氯丙嗪、奎尼丁、普魯卡因酰胺、胺碘酮、甲氨蝶呤、環(huán)磷酰胺、皮質類固醇、同化性類固醇、糖皮質激素類、吡嗪酰胺、對-氨基水楊酸、乙硫異煙胺、甲氧芐啶-磺胺甲噁唑、戊雙脒、齊多夫定、二脫氧肌苷、青霉素類或頭孢菌素類。
本發(fā)明在另一方面利用有效抑制反應性氧屬產生或釋放的化合物配制草藥制備物，以最小化這些草藥制備物的肝毒性后果。適合的草藥的實例包括小槲樹(Larrea tridentata)、石蠶(Teucrium chamaedrys)、金不換、麻黃、纈草根(Valeriana officinalis)、黃芩(Scutellariagalericulata)、槲寄生(Viscum species)、Jamaican bush tea、番瀉葉(Cassia angustfolia)、雛菊(Symphytum officinale)和醉椒根提取物。
有利地，有效抑制反應性氧屬產生或釋放的化合物是組胺、組胺受體激動劑、NADPH氧化酶抑制劑、血清素或血清素激動劑?？蛇x地，組合物進一步包括有效量的ROS清除劑。ROS清除劑可以是過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶或抗壞血酸鹽過氧化物酶。
本發(fā)明在另一方面提供減少藥物肝毒性的方法，該方法對服用肝毒性藥物的個體給以有效劑量的有效抑制ROS產生或釋放的化合物。有效抑制ROS產生或釋放的化合物可以包括組胺、組胺受體激動劑、NADPH氧化酶抑制劑、血清素或血清素激動劑。
可選地，該方法進一步包括給以有效量ROS清除劑的步驟。有利地，給以所述ROS清除劑的步驟導致ROS清除劑催化的ROS分解。清除劑可以包括過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶、抗壞血酸鹽過氧化物酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、抗壞血酸鹽過氧化物酶、維生素A、維生素E或維生素C。
肝毒性藥物可以是硫唑嘌呤、甲基多巴、硝呋妥因、氯貝特或曲格列酮。在本發(fā)明的一個方面中，肝毒性藥物是抗關節(jié)炎藥，例如布洛芬、別嘌呤醇、消炎痛、來氟米特、對乙酰氨基酚或雙氯芬酸。在另一方面，肝毒性藥物是抗生素，例如異煙肼、四環(huán)素、紅霉素、硝呋妥因、阿莫西林、利福平、酮康唑、氟氯噁西林、曲伐沙星或磺胺類。肝毒性藥物可以是雌二醇、鐵、谷胱甘肽、氟烷、異氟烷、卡托普利、地爾硫、苯妥英、丙戊酸、卡馬西平、苯巴比妥、撲米酮、曲唑酮、氯丙嗪、奎尼丁、普魯卡因酰胺或胺碘酮。肝毒性藥物可以類似地包括化療劑、皮質類固醇、同化性類固醇或糖皮質激素類。
在本發(fā)明的另一方面，肝毒性藥物是用于治療HIV/AIDS患者的藥物，例如吡嗪酰胺、對-氨基水楊酸、乙硫異煙胺、甲氧芐啶-磺胺甲噁唑、戊雙脒、齊多夫定、二脫氧肌苷、青霉素類和頭孢菌素類。
同樣提供了減少某些草藥制備物肝毒性的方法。將有效抑制反應性氧屬產生或釋放的化合物對例如服用下列草藥的個體給藥小槲樹(Larrea tridentata)、石蠶(Teucrium chamaedrys)、金不換、麻黃、纈草根(Valeriana officinalis)、黃芩(Scutellaria galericulata)、槲寄生(Viscum species)、Jamaican bush tea、番瀉葉(Cassiaangustfolia)、雛菊(Symphytum officinale)和/或醉椒根提取物。
本發(fā)明在另一方面提供減少與暴露于環(huán)境或工業(yè)毒素有關的肝組織損傷的方法。該方法包括對需要的患者給以有效量的有效抑制ROS產生或釋放的化合物。有利地，有效抑制ROS產生或釋放的化合物包括組胺、組胺受體激動劑、NADPH氧化酶抑制劑、血清素和血清素激動劑。可選地，該方法可以包括另外給以有效量ROS清除劑的步驟。優(yōu)選地，給以ROS清除劑的步驟導致ROS清除劑催化的ROS分解。清除劑可以是過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶、抗壞血酸鹽過氧化物酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、抗壞血酸鹽過氧化物酶、維生素A、維生素E或維生素C。環(huán)境毒素可以包括來自捕蠅蕈屬、Galerina或鹿花菌屬的有毒蘑菇。另外，環(huán)境或工業(yè)毒素可以包括吸煙、農藥、食品添加劑和/或防腐劑、重金屬、有機溶劑或工業(yè)清潔劑，特別是含有氯化溶劑的那些。
優(yōu)選實施方式的詳細說明下面的公開涉及預防和減少由反應性氧屬(ROS)所致肝細胞與組織損傷的組合物和方法。
肝臟在多種代謝功能中扮演必要角色。肝臟疾病通常對患病個人產生嚴重后果，從發(fā)病到死亡。肝疾病的實例包括門靜脈高血壓、阿拉惹綜合征、α-1-抗胰蛋白酶缺陷、自體免疫性肝炎、膽閉鎖、慢性肝炎、肝臟癌癥、轉移至肝臟的癌癥、肝硬化、肝內膽汁郁積、肝靜脈血栓形成、肝靜脈阻塞性疾病、肝豆狀核變性、肝腫大、肝肺綜合征、肝腎綜合征、肝囊腫、肝膿腫、脂肪肝、半乳糖血癥、吉爾伯特綜合征、門靜脈高血壓、酒精性肝疾病(ALD)、寄生蟲性肝疾病、紫癜性肝炎、紅細胞肝卟啉癥、肝卟啉癥、肝結核、原發(fā)性膽硬化、原發(fā)性硬化性膽管炎、雷亥綜合征、結節(jié)病、酪氨酸血癥、I型糖原貯存性疾病、威爾遜氏病、新生兒肝炎、非酒精性脂肝炎、血色素沉著和澤爾韋格綜合征。本文所用的“酒精性肝疾病(ALD)”非限制性地包括酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝硬化和纖維變性。
最近的工作已經表明，這些和其他肝疾病可以由ROS所導致或惡化。ROS能夠對肝實質內多種細胞具有直接影響，引起編程性細胞死亡。這些分子能夠破壞肝細胞與組織的另一種機理可能涉及ROS對免疫系統(tǒng)驅動細胞所具有的影響。例如，從單核細胞和其他來源放出的ROS已經顯示有效抑制NK細胞和T細胞的活化和活性。
ROS產生的影響是多方面的。ROS已知導致NK細胞的編程性細胞死亡。ROS還已知導致T細胞的無反應性和/或編程性細胞死亡。ROS導致這些后果的機理尚不完全清楚。盡管如此，有些評論人員相信ROS通過破壞細胞膜和改變決定細胞存活的細胞途徑pH以及對DNA的直接損傷而導致細胞死亡。
下面公開的減少ROS產生與釋放量的化合物和方法涉及減少和預防ROS-介導的肝細胞與組織損傷。在優(yōu)選的實施方式中，使用多種組胺和組胺相關性化合物來實現有益的酶性ROS產生與釋放或其凈濃度的減少或抑制。本文所用的術語“組胺”表示多種組胺和組胺相關性化合物。例如包括組胺、組胺的二鹽酸鹽形式(組胺二鹽酸鹽)、組胺二磷酸鹽、其他組胺鹽、酯或前體藥物，和組胺受體激動劑。在術語“組胺”的含義內還包括組胺結合性模擬物和NADPH氧化酶抑制劑。
在本文公開的范圍內還包括誘導內源性組胺從患者自身組織貯存中釋放的化合物的給藥。這類化合物包括IL-3、類視黃醇和變應原。其他ROS產生與釋放抑制性化合物、例如NADPH氧化酶抑制劑、象二亞苯基碘鎓，以及血清素和5HT受體激動劑，也可以用于所公開的方法。
本文所公開的組合物和方法還涵蓋多種ROS清除劑的給藥。已知的ROS清除劑包括過氧化氫酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶和抗壞血酸鹽過氧化物酶。另外，維生素A、E和C已知也具有清除活性。礦物質、例如硒和錳，也能有效對抗ROS-介導的損傷。本文所公開的方法的范圍包括上列化合物和具有相似ROS抑制活性的那些化合物的給藥。本文所公開的組合物和方法還提供預防和/或抑制酶生成性ROS過量或者在不適當時間或位置釋放的有效手段。
提供了治療伴有宿主或患者內有害ROS釋放的肝疾病狀態(tài)的化合物和方法。肝臟負責體內很多必需功能。由于這些活性，肝臟暴露于多種侵害，因此是體內最頻繁受傷的器官之一。這些生命功能因肝疾病而減損能夠引起非常嚴重的后果。肝損傷已經與大量來源有關。肝炎或肝臟炎癥可以由病毒、細菌、真菌或原生動物感染所致，或者可以由暴露于毒素所致，例如酒精、藥物、化學毒素或其他環(huán)境毒素。血管與代謝障礙、瘤形成疾病和/或肝臟在肝外障礙(例如自體免疫疾病)中的牽連也已類似地與肝組織損傷有關。其中變?yōu)榘谓M織的自體免疫疾病的實例包括紅斑狼瘡和類風濕性關節(jié)炎。另外，在患有心力衰竭的患者中，肝臟經常受到充血、瘢痕形成和腹水形成的損傷。
在工業(yè)和環(huán)境毒素的情況下，原發(fā)性疾病由毒性物質的攝入、注入或吸入所致，它對肝臟產生不利影響。例如，農藥、例如對草快與肝損傷增加有關。類似地，某些屬蘑菇的攝入能夠導致嚴重的肝細胞損傷甚至死亡。這類蘑菇包括捕蠅蕈屬和Galerina，它們含有amatoxin，該物質負責肝和腎的破壞。肝壞死類似于由大劑量對乙酰氨基酚所產生的，是主要的中毒表現。來自鹿花菌屬的蘑菇同樣已經與肝毒性和肝腎綜合征的嚴重情形有關。導致肝組織損傷的環(huán)境和工業(yè)毒素的實例非限制性地包括吸煙、工業(yè)清潔劑、二乙醇胺、月桂基硫酸鈉、丙二醇、農藥(例如DDT和滅蟻靈)、食品添加劑與防腐劑、重金屬、有機溶劑(例如甲醛和溴苯)和氯化溶劑(例如二噁英、fluran、TCE、PCE、DCE、四氯乙烯、四氯化碳和乙烯氯)。
正如下面將要詳細描述的，肝毒素還包括很多常見的藥物，例如對乙酰氨基酚、同化性類固醇、化療藥、一些抗生素、糖皮質激素類、麻醉劑、寄生蟲控制藥和保泰松。某些抗驚厥劑與肝病有關，例如苯巴比妥、撲米酮和苯妥英。肝組織損傷至少在部分程度上由宿主或患者內響應于這類侵害的有害ROS釋放所致。因此，提供了治療由暴露于毒性物質所致肝組織損傷的組合物和方法。具體而言，ROS產生與釋放抑制性化合物的給藥可用于減少暴露于工業(yè)和/或環(huán)境毒素之后的肝細胞與組織創(chuàng)傷。
大量藥物治療已經與肝損傷有關。所有青年人肝炎病例的大約10％和50歲以上患者病例的40％是由藥物治療所導致的。本文所用的“肝毒性藥物”包括任意作用于肝臟、導致組織損傷的物質。肝毒性藥物的實例非限制性地包括抗糖尿病和免疫抑制藥，例如硫唑嘌呤、甲基多巴、硝呋妥因、氯貝特和曲格列酮；抗關節(jié)炎藥，例如布洛芬、別嘌呤醇、消炎痛、來氟米特、對乙酰氨基酚、雙氯芬酸；抗生素，例如異煙肼、四環(huán)素、紅霉素、硝呋妥因、阿莫西林、利福平、酮康唑、氟氯噁西林、曲伐沙星和磺胺類；雌二醇；鐵；維生素A；谷胱甘肽；某些麻醉劑，例如氟烷和異氟烷；抗高血壓藥，包括卡托普利和地爾硫；抗驚厥劑和抗抑郁劑，例如苯妥英、丙戊酸、卡馬西平、苯巴比妥、撲米酮和曲唑酮；抗精神病藥，例如氯丙嗪；抗心律失常劑，象奎尼丁、普魯卡因酰胺和胺碘酮；化療劑，例如甲氨蝶呤和環(huán)磷酰胺；類固醇，包括皮質類固醇、同化性類固醇和糖皮質激素類；和常用在HIV/AIDS患者中的藥物，例如吡嗪酰胺、對-氨基水楊酸、乙硫異煙胺、甲氧芐啶-磺胺甲噁唑、戊雙脒、齊多夫定、二脫氧肌苷、青霉素類和頭孢菌素類。另外，一些草藥制備物也是已知的肝毒素，例如小槲樹(Larrea tridentata)；石蠶(Teucrium chamaedrys)；某些中草藥，包括金不換和麻黃；纈草根(Valeriana officinalis)；黃芩(Scutellaria galericulata)；槲寄生(Viscum species)；藥茶，例如Jamaican bush tea；番瀉葉(Cassiaangustfolia)；雛菊(Symphytum officinale)；和醉椒根提取物。
提供了最小化某些藥物肝毒性的組合物和方法。很多疾病、例如HIV/AIDS，其治療可能與疾病一樣繁瑣。在HIV感染的情況下，被設計用來減少病毒負載的藥物經常危害肝細胞，能夠導致嚴重的后果。因此，可以將ROS抑制性或清除性化合物對同時服用導致肝毒副作用的藥物的個體給藥，以緩和由肝毒性藥物所致肝細胞損傷。在一種實施方式中，對服用肝毒性藥物的個體給以有效量的ROS抑制性化合物或清除劑，單獨或者作為與肝毒性藥物的單一制劑給藥。ROS抑制性化合物或清除劑和肝毒性藥物可以基本上同時給藥，或者在彼此的不同持續(xù)時間內。給藥可以借助局部或者全身注射或輸注。其他給藥方法也可以是適合的，例如口服途徑。
ROS抑制劑或清除劑的給藥同樣可用于改善由細菌、真菌、病毒或原生動物感染所導致或惡化的肝組織損傷。螺桿菌和鉤端螺旋體是兩種病原性細菌的實例，它們侵入肝臟，導致組織損傷。芽生菌病、組織胞漿菌病和球孢子菌病是真菌感染的實例，它們攻擊肝組織。全身性感染、例如結核、念珠菌病和弓形體病，經常延及肝臟，能夠導致肝組織損傷。而且，幾乎所有的血液感染都將不可避免地累及肝臟。
因此，本發(fā)明在一方面提供最小化與細菌、真菌、病毒或原生動物感染有關的肝組織損傷的化合物和方法。將ROS產生與釋放抑制性化合物單獨或者與抗生素聯合給藥。本文所用的術語“抗生素”包括任意抗細菌、抗真菌或抗原生動物化合物。在與抗生素聯合給藥時，本發(fā)明的ROS產生與釋放抑制性化合物可以單獨或者作為與抗生素的單一制劑給藥。如果單獨給藥，ROS產生與釋放抑制性化合物應當以時間上鄰近的方式給藥，以便增強肝組織損傷的改善效果。在一種實施方式中，ROS產生與釋放抑制性化合物和抗生素是在彼此間隔一周內給藥的。在另一種實施方式中，ROS產生與釋放抑制性化合物和抗生素是在彼此間隔24小時內給藥的。在另一種實施方式中，ROS產生與釋放抑制性化合物和抗生素是在彼此間隔1小時內給藥的。給藥可以借助局部或者全身注射或輸注。其他給藥方法也可以是適合的，例如口服給藥。
在另一種實施方式中提供治療繼發(fā)于其他疾病病因的肝疾病的組合物和方法。由于胰腺緊鄰肝臟和膽管，急性胰腺炎經常引起肝炎。類似地，腸的慢性炎癥允許毒性腸產物和細菌的門靜脈吸收，這能危害肝組織。休克、貧血和充血性心力衰竭導致肝臟血液循環(huán)嚴重不足和缺氧，同樣能夠引起肝組織損傷。類似地，盡管原發(fā)性肝臟癌癥是罕見的，不過常見的是癌癥作為繼發(fā)性轉移癌從結腸、肺、乳腺或身體其他部分蔓延至肝臟。因此，包含ROS抑制性化合物或清除劑的組合物可用于治療繼發(fā)于其他疾病的肝疾病。在一種實施方式中，對患有急性胰腺炎的患者給以有效劑量的ROS抑制性化合物或清除劑，以預防肝細胞損傷。在另一種實施方式中，對肝轉移癌個體給以有效劑量的ROS抑制性化合物或清除劑以及或者沒有化療劑，以最小化肝損傷。
所公開的化合物的給藥可以是單獨的或者與其他有效治療多種肝疾病狀態(tài)的化合物聯合。例如，組胺能夠用于治療患有非酒精性脂肝炎(NASH)的患者。進而，所公開的方法和化合物能夠與標準NASH治療制度一起使用，該制度通常包含低脂肪、低熱量飲食以及胰島素或藥物治療，以降低肥胖患者的血糖。就不超重且無糖尿病的NASH患者而言，經常推薦低脂肪飲食。而且，正如上面所討論的，對表現有肝轉移癌的個體給以有效劑量的ROS抑制性化合物或清除劑以及標準化療和/或放射方案。在肝臟病毒感染的情況下，可以對患者給以抗病毒療法伴以ROS抑制性化合物或清除劑的給藥，以最小化肝細胞損傷。例如，ROS抑制性化合物或清除劑能夠用于治療表現由丙型肝炎的個體，聯合標準的肝炎治療制度，包括利巴韋林或聚乙二醇化INF-α的給藥。
類似地，所公開的方法和化合物可用于治療酒精性肝疾病。酒精濫用是世界范圍內發(fā)病和死亡的首要原因。據估計，美國多達10％的男性和3％的女性可能面臨涉及酒精使用的持續(xù)性問題。酒精影響身體的多個器官系統(tǒng)，但是也許最受影響的是肝臟，因為幾乎所有所攝入的酒精都必須在肝臟中代謝。酒精濫用一半引起三種不同病理的肝疾病脂肪肝(脂肪變性)、酒精性肝炎和肝硬化。脂肪肝是以脂肪在肝細胞內的蓄積為特征的，肝細胞是肝臟中占主導地位的細胞類型。酒精還能導致急性與慢性肝炎。酒精性肝炎能夠引起肝臟瘢痕形成和肝硬化，非常頻繁地發(fā)生在已經患有肝硬化的酗酒者中。最后，由酒精濫用所致肝硬化是以肝臟中廣泛性結節(jié)的形成聯合纖維變性為特征的，能夠引起晚期肝疾病。酒精相關性肝硬化是美國十大死亡原因之一。肝硬化的一些并發(fā)癥有黃疸、腹水、水腫、出血性食管靜脈曲張、血液凝固異常、昏迷和死亡。因而在一種實施方式中，對患有酒精性肝疾病(ALD)的患者給以所公開的方法和組合物。鑒別患有ALD的患者，給以有效劑量的ROS抑制性或清除性化合物。
ROS抑制性或清除性化合物的使用可以借助本領域技術人員熟知的任意大量方法。就口服給藥而言，可以將ROS抑制性或清除性化合物摻入片劑、水或油懸液、可分散性粉劑或顆粒劑、微珠粒、乳劑、硬或軟膠囊劑、糖漿劑或酏劑。組合物可以按照本領域關于藥學上可接受的組合物制造所已知的任意方法加以制備，這類組合物可以含有一種或多種下列試劑甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑。片劑是可接受的，其中含有活性成分與無毒的藥學上可接受的適合于片劑制造的賦形劑的混合物。“藥學上可接受的”意味著該試劑應當在與制劑其他成分相容(以及對個體無害)的意義上是可接受的。這類賦形劑包括惰性稀釋劑，例如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；造粒與崩解劑，例如玉米淀粉和藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠或阿拉伯膠；和潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。片劑可以是未包衣的，或者可以利用已知技術包衣，以延緩在胃腸道中的崩解和吸收，從而提供長時間的持續(xù)作用。例如，可以采用延時材料，例如單獨的甘油單硬脂酸酯或甘油硬脂酸酯或者與一種蠟。
在另一種實施方式中，將片劑、膠囊劑或微珠粒用腸溶衣包衣，防止在胃的酸性環(huán)境中溶解。反之，這種包衣在pH更接近中性的小腸中溶解。這類腸衣組合物描述于Bauer et al.，Coated PharmaceuticalDosage FormsFundamentals，Manufacturing Techniques，Biopharmaceutical Aspects，Test Methods and Raw Materials，CRCPress，Washington，DC，1998。
口用制劑還可以呈現硬明膠膠囊劑，其中活性成分是與惰性固體稀釋劑混合的，例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土，或者軟明膠膠囊劑，其中活性成分是與水或油介質混合的，例如花生油、液體石蠟或橄欖油。
水懸液可以含有本發(fā)明的ROS抑制性或清除性化合物與水懸液制造用賦形劑的混合物。這類賦形劑包括懸浮劑、分散或濕潤劑、一種或多種防腐劑、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑和一種或多種甜味劑(例如蔗糖或糖精)。
油懸液可以這樣配制，將活性成分懸浮在植物油中，例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油，或者礦物油，例如液體石蠟。油懸液可以含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇?？梢约尤胩鹞秳?，例如上述那些，和矯味劑，以提供可口的口服制備物?？梢韵蜻@些組合物加入抗氧化劑進行防腐，例如抗壞血酸。本發(fā)明化合物的可分散性粉劑和顆粒劑適合于借助水的加入而制備水懸液，提供活性成分與分散或濕潤劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑的混合物。還可以存在另外的賦形劑，例如甜味劑、矯味劑和著色劑。
糖漿劑和酏劑可以利用甜味劑加以配制，例如甘油、山梨糖醇或蔗糖。這類制劑還可以含有緩和劑、防腐劑、矯味劑或著色劑。
ROS抑制性或清除性化合物的使用還可以通過皮下、靜脈內、腹膜內或肌內注射經由腸胃外釋放來完成?？梢栽谒芤褐薪o以化合物，其中含有或者沒有表面活性劑，例如羥丙基纖維素。分散體也涵蓋在內，例如采用甘油、液體聚乙二醇和油的那些?？勺⑸渲苽湮锟梢园o菌的水溶液或分散體和粉劑，在使用前可以將粉劑稀釋或懸浮在無菌環(huán)境中。還可以向所公開的化合物加入載體，例如溶劑或分散介質，其中含有水、乙醇、多元醇、植物油等?？梢允褂冒拢缏蚜字捅砻婊钚詣?，以保持組合物的適當流動性?？梢约尤氲葷B劑，例如糖或氯化鈉，以及打算延緩活性化合物吸收的產物，例如一硬脂酸鋁和明膠。無菌的可注射溶液是按照本領域技術人員熟知的方法制備的，可以在貯存和/或使用前過濾。從溶液或懸液中真空或冷凍干燥，可以得到無菌粉劑。持續(xù)或控制釋放的制備物和制劑也能夠用于所公開的方法。通常，用于所公開的方法和組合物的材料是藥學上可接受的，在所采用的劑量下是基本上無毒的。
所公開的化合物還可以借助吸入給藥。在這種給藥途徑中，可以將組胺溶于水或一些其他藥學上可接受的吸入用液體載體，或者呈干粉的形式，然后引入氣體或粉末，然后由患者吸入適當的體積，以為該患者提供一定劑量的組胺。治療組合物經由吸入給藥的實例描述于美國專利No.6,418,926；6,387,394；6,298,847；6,182,655；6,132,394和6,123,936。
輸注藥具可以用于釋放所公開的化合物。適合的藥具包括注射泵、自動注射系統(tǒng)、可植入泵、可植入藥具和微型泵。示范性藥具包括Ambulatory Infusion Pump Drive，30型，可從Microject Corp.，SaltLake City，Utah獲得，和Baxa Syringe Infuser，可從Baxa Corporation，Englewood，Colorado獲得?？梢允褂萌我饽軌虬凑毡疚墓_的方法釋放所公開的化合物的藥具。
適合的輸注藥具優(yōu)選地具有有效量的組胺、組胺激動劑、組胺鹽、組胺前體藥物、NADPH-氧化酶抑制劑、組胺二鹽酸鹽、組胺磷酸鹽、血清素、5-HT激動劑、組胺受體激動劑、組胺受體結合模擬物、或者誘導其中所含有的有效治療量內源性組胺釋放的物質。藥具可以在制造期間預先負載有所需物質，或者僅在使用前填充該物質。預填充的輸注泵和注射泵是本領域技術人員熟知的。活性物質可以是制劑的一部分，如果需要的話，制劑包括控制釋放載體。藥具采用控制器，以控制物質的給藥速率和給藥量?？刂破骺梢允撬幘咚逃械?，或者可以是單獨的實體。它可以在制造期間預先設置，或者僅在使用前由用戶設置。這類控制器和它們用于輸注藥具都是本領域技術人員熟知的。
控制釋放載體是藥物科學領域技術人員熟知的。這方面技術和產物稱謂各異，有控制釋放、持續(xù)釋放、長效、藥庫、貯器、緩效、延遲釋放和定時釋放；本文所用的詞語“控制釋放”打算體現每種前述技術。
大量控制釋放載體是已知的，包括生物可降解或生物可侵蝕的聚合物，例如聚乳酸、聚乙醇酸和再生膠原。已知的控制釋放藥物釋放藥具包括霜劑、洗劑、片劑、膠囊劑、凝膠劑、微球體、脂質體、眼插入物、微型泵和其他輸注藥具，例如泵和注射器。活性成分從中緩慢釋放的、可植入或可注射的聚合物基質和透皮制劑也是熟知的，能夠用在所公開的方法中。
在一種實施方式中，將所公開的化合物通過局部釋放系統(tǒng)給藥?？梢允褂蒙鲜隹刂漆尫沤M分作為釋放所公開的化合物的工具。適合的局部釋放系統(tǒng)包含濃度如本文所教導的所公開的化合物、溶劑、乳化劑、藥學上可接受的載體材料、滲透增強性化合物和防腐劑。局部施用的組合物的實例包括美國專利No.5,716,610和5,804,203。組合物可以進一步包括適合于提高所施用的制劑的穩(wěn)定性或有效性的組分，例如防腐劑、抗氧化劑、皮膚滲透增強劑和持續(xù)釋放材料。這類組分的實例描述在下列參考文獻中Martindale-The Extra Pharmacopoeia(Pharmaceutical Press，London 1993)and Martin(ed.)，Remington′s Pharmaceutical Sciences。
利用聚合物配位化合或者吸收ROS抑制性或清除性化合物，可以實現控制釋放制備物。控制釋放可以選擇適當的大分子進行，例如聚酯、聚氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、乙烯-乙酸乙烯酯、甲基纖維素、羧甲基纖維素和硫酸魚精蛋白，對這些大分子的濃度以及摻入的方法加以選擇，目的是控制活性化合物的釋放。
在水凝膠劑中，ROS抑制性或清除性化合物是溶解在水性成分中的，以隨著時間逐漸釋放，可以借助親水性單烯單體的共聚作用加以制備，例如異丁烯酸乙二醇酯?？梢允褂没|藥具，其中ROS抑制性或清除性化合物是分散在載體材料的基質中的。載體可以是多孔的、非多孔的、固體的、半固體的、可滲透的或不可滲透的。作為替代選擇，可以使用ROS抑制性或清除性化合物的中心藥庫被速率控制性膜圍繞的藥具，以控制ROS抑制性或清除性化合物的釋放。速率控制性膜包括乙烯-乙酸乙烯酯共聚物或對苯二甲酸丁烯酯/聚亞丁基醚對苯二甲酸鹽。硅酮橡膠藥庫的使用也涵蓋其中。
控制釋放口服制劑也是熟知的。在一種實施方式中，將活性化合物摻入到可溶性或可侵蝕性基質中，例如丸劑或錠劑。這類制劑是本領域熟知的。用于給以藥學活性化合物的錠劑的實例是美國專利No.5,662,920。在另一種實例中，口服制劑可以是液體，用于舌下給藥。美國專利No.5,284,657教導了用于所公開的化合物的液體舌下給藥的藥物組合物實例。這些液體組合物還可以是凝膠劑或糊劑的形式。常用親水性膠，例如羥甲基纖維素。可以使用潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或硬脂酸鈣，以有助于壓片過程。
出于腸胃外給藥的目的，可以將ROS抑制性或清除性化合物與蒸餾水混合，優(yōu)選地緩沖至適當的pH和具有適當的(例如等滲的)鹽濃度。本發(fā)明化合物還可以是液體或粉末的形式，在使用前再生。它們可以被預先包裝在小瓶、注射器或注射系統(tǒng)中。
還可以在隔片密封的小瓶中提供所公開的化合物、例如組胺，容量從約0.5至100ml，對個體給藥。在優(yōu)選的實施方式中，小瓶含有0.5、1、3、5、6、8、10、20、50和100ml的容量。小瓶優(yōu)選地是無菌的。小瓶可選地含有等滲的載體介質和/或防腐劑。可以使用任意所需量的組胺，得到所需的最終組胺濃度。在優(yōu)選的實施方式中，ROS抑制性或清除性化合物濃度在約0.01mg/ml與100mg/ml之間。更優(yōu)選地，ROS抑制性或清除性化合物濃度在約0.1與50mg/ml之間。最優(yōu)選地，ROS抑制性或清除性化合物濃度在約1mg/ml與10mg/ml之間。在容量范圍的下限，優(yōu)選的是給以單個劑量，而在上限，優(yōu)選的是給以多個劑量。
在優(yōu)選的實施方式在紅，還可以使用透皮貼劑、夾在不透性背層與膜表面之間的穩(wěn)態(tài)藥庫和透皮制劑，以釋放ROS抑制性或清除性化合物。透皮給藥系統(tǒng)是本領域熟知的。用于活性成分對皮膚或黏膜給藥的閉合性透皮貼劑描述于美國專利No.4,573,996、4,597,961和4,839,174。一種類型的透皮貼劑是聚合物基質，其中活性成分是溶解在聚合物基質中的，活性成分通過該基質擴散至皮膚。這類透皮貼劑公開于美國專利No.4,839,174、4,908,213和4,943,435。在一種實施方式中，穩(wěn)態(tài)藥庫攜帶組胺和其他ROM產生與釋放抑制性化合物的劑量從約0.2至5mg每天。
目前的透皮貼劑系統(tǒng)被設計成釋放歷經更長的時間更小的劑量，長達數天和數周。所公開的化合物的優(yōu)選釋放系統(tǒng)將具體在約2與60分鐘之間釋放有效劑量的組胺，因劑量而異，優(yōu)選的劑量將在約20-30分鐘內釋放。這些貼劑允許迅速與控制釋放抑制或清除ROS的化合物。可以使用分散在硅酮聚合物基質中的所公開的化合物的速率控制性微孔性外膜或微袋，以控制釋放速率。這類速率控制性工具描述在美國專利No.5,676,969中。在另一種優(yōu)選的實施方式中，組胺或其他ROM抑制性或清除性化合物在約20-30分鐘內或以下從貼劑釋放到患者皮膚內。在優(yōu)選的實施方式中，化合物從貼劑中釋放的速率在約0.025mg至0.5mg每分鐘之間，劑量在約0.2mg與5mg每貼之間。
這些透皮貼劑和制劑可以采用或者不采用滲透增強劑，例如二甲基亞砜(DMSO)、蔗糖脂肪酸酯與亞砜或磷酸酐的組合、或丁香酚。電解透皮貼劑的使用也在本文所公開的方法范圍內。電解透皮貼劑描述于美國專利No.5,474,527、5,336,168和5,328,454。
在另一種實施方式中，可以使用透黏膜貼劑釋放所公開的化合物。這樣一種貼劑的實例參見美國專利No.5,122,127。所述貼劑包含能夠包封一定量治療劑的容器，其中該容器能夠黏附于黏膜組織，例如在口腔中。該藥具的藥物表面積供接觸宿主的黏膜組織。該藥具被設計成與藥物/黏膜界面大小成比例地釋放藥物。因此，通過改變接觸面積的大小可以調節(jié)藥物釋放速率。
容器優(yōu)選地由這樣一種材料構成，它是無毒的、化學上穩(wěn)定的、與所公開的化合物無反應性的?？赡艿臉嫵刹牧习ň垡蚁⒕巯N、聚酰胺、聚碳酸酯、乙烯基聚合物和本領域已知的其他相似材料。容器可以含有保持容器固定于黏膜的工具。容器可以含有穩(wěn)態(tài)藥庫，固定在與黏膜組織接觸的流體中。
用于所公開的化合物的穩(wěn)態(tài)藥庫歷經預定時間釋放適合劑量的化合物。美國專利No.5,288,497教導了制造能夠通過黏膜組織吸收的組合物的組合物和方法。本領域技術人員能夠容易地包括所公開的化合物和相關組合物。
用于所公開的化合物的穩(wěn)態(tài)藥庫是由本領域已知控制藥物釋放速率的化合物組成的。在一種實施方式中，透黏膜貼劑歷經約2至60分鐘釋放一定劑量的ROS抑制性或清除性化合物。包含在容器內的穩(wěn)態(tài)藥庫攜帶組胺和其他ROS產生與釋放抑制性或清除性化合物，劑量從約0.2至100mg每貼。能夠使用若干天并且歷經這段時間釋放所公開的化合物的透皮貼劑也涵蓋其中。藥庫還可以含有滲透或穿透增強劑，如上所述，以提高所公開的化合物跨越黏膜組織的滲透性。
另一種控制所公開的化合物釋放的方法是將ROS抑制性或清除性化合物摻入聚合材料的顆粒中，例如聚酯、聚氨基酸、水凝膠、聚乳酸或乙烯-乙酸乙烯酯共聚物。
作為替代選擇，不將ROS抑制性或清除性化合物摻入這些聚合顆粒中，而將所公開的化合物包埋在微膠囊中，微膠囊是這樣制備的，例如借助凝聚技術，或者借助界面聚合作用，例如分別使用羥甲基纖維素或明膠微膠囊，或者包埋在膠體藥物釋放系統(tǒng)中，例如脂質體、白蛋白微球體、微乳劑、納米粒和納米膠囊，或者包埋在巨乳劑中。這類技術是藥物科學領域普通技術人員所熟知的。
優(yōu)選地，將抑制或清除ROS的化合物注射、輸注或釋放到患者體內的速率從約0.025至1.0mg/min。約0.1mg/min的速率是優(yōu)選的。將所公開的化合物優(yōu)選地歷經約1、3或5分鐘至約30分鐘給藥，上限約20分鐘是優(yōu)選的，以便總的ROS抑制性或清除性化合物的每日成人劑量在約0.4至約100.0mg之間，約0.5至約20.0mg是優(yōu)選的。將本發(fā)明化合物、例如組胺歷經更長的時間給藥，例如長于約30分鐘，已經發(fā)現導致功效的下降或缺乏，而在不到1-3分鐘內迅速給藥能夠導致更明顯的和嚴重的副作用，包括過敏、心力衰竭、支氣管痙攣、明顯的面紅、不適、增加了的心律與呼吸頻率、低血壓和嚴重的頭痛。
在另一種實施方式中，可以在藥學上可接受的劑型中給以大約0.2至2.0mg或3-200μg/kg的ROS抑制性化合物。還可以將ROS清除性化合物與上述ROS產生與釋放抑制性化合物聯合給藥。當口服給以ROS抑制性或清除性化合物時，可以將組合物配制成片劑，包含10mg至2g活性成分。片劑可以包括10、20、50、100、200、500、1000或2000毫克的ROS抑制性或清除性化合物。優(yōu)選地，片劑中ROS抑制性或清除性化合物的含量為100mg。在有些實施方式中，組合物包括組胺保護劑，例如二胺氧化酶抑制劑、單胺氧化酶抑制劑和n-甲基轉移酶。
治療還可以包括定期提高患者血液的ROS抑制性或清除性化合物水平，每天注射或攝入1次、2次或多次0.2至2.0mg或3-200μg/kg所公開的化合物，歷經一至二周，間隔是有規(guī)律的，例如每天、每兩周或每周，目的是建立ROS抑制性或清除性化合物在有益濃度下的血液水平，以便抑制ROS的產生和釋放。繼續(xù)治療，直至控制或消除引起患者疾病狀態(tài)的原因。
每劑ROS抑制性或清除性化合物的給藥可以是一天一次至一天約四次，一天兩次是優(yōu)選的。給藥可以是皮下、靜脈內、肌內、眼內、口服、透皮、鼻內或直腸方式，可以采用直接的皮下或其他注射或輸注手段，或者可以借助上述類型的控制釋放機構?？梢允褂萌我獾目刂漆尫泡d體或輸注藥具，能夠歷經約1至約90分鐘給以治療有效量所公開的化合物。在優(yōu)選的實施方式中，鼻內釋放是這樣實現的，在霧化器或噴霧器中使用ROS抑制性或清除性化合物的溶液，產生細霧，引入到鼻孔內。就直腸釋放而言，利用本領域熟知的方法將ROS抑制性或清除性化合物配制成栓劑。
清除ROS的化合物的給藥量可以從約0.1至約20mg/天；更優(yōu)選地，劑量從約0.5至約8mg/天；更優(yōu)選地，劑量從約0.5至約8mg/天；進而更優(yōu)選地，劑量從約1至約5mg/天。盡管如此，在每種情況下，劑量依賴于所給藥的化合物的活性。上述劑量適合于上面所列舉的酶，包括過氧化氫酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶和抗壞血酸鹽過氧化物酶。借助本領域普通技術人員熟知的經驗技術，容易確定適合于任意特定宿主的劑量。
本領域普通技術人員可以憑經驗確定非酶性ROS清除劑的給藥量。例如，維生素A和E的給藥劑量可以從約1至5000IU每天。維生素C的給藥劑量可以從約1μg至10mg每天。礦物質、例如硒和錳的給藥量可以從約1微微克至1毫克每天。還可以保護性或預防性地給以這些化合物，用于ROS介導的疾病狀態(tài)。
除了組胺、組胺二鹽酸鹽、組胺磷酸鹽、其他組胺鹽、酯、同種物、前體藥物和H2受體激動劑以外，血清素、5HT激動劑和誘導組胺從患者自身組織釋放的化合物也包括在所公開的方法內。視黃酸、其他類視黃醇(例如9-順式-視黃酸和全反式-視黃酸)、IL-3和克攝取的變應原是已知誘導內源性組胺釋放的化合物。這些化合物可以借助口服、靜脈內、肌內、皮下和其他公認途徑對患者給藥。給藥速率應當導致內源性組胺的釋放引起組胺血漿水平為約20nmol/dl。
每劑誘導組胺釋放的化合物的給藥可以是每天一次至一天約四次，每天兩次是優(yōu)選的。給藥可以是皮下、靜脈內、肌內、眼內、口服或透皮方式，可以摻入上述類型的控制釋放機構中?？梢允褂萌我獾目刂漆尫泡d體，能夠歷經約1至約30分鐘的時間給以治療有效量的誘導組胺釋放的化合物。另外，可以將本發(fā)明的化合物、組合物和制劑足量給藥。
下列實施例教導多種利用所公開的ROS產生與釋放抑制性化合物治療肝疾病的方法。這些實施例僅供例證，不打算限制權利要求的范圍。下述治療方法可以利用本領域普通技術人員熟知的經驗技術加以優(yōu)化。而且，普通技術人員將能夠利用下列實施例所述教導實施完整的權利要求范圍。盡管在實施例中規(guī)定了ROS抑制性或清除性化合物可以按單一劑量給藥，不過顯然這些化合物分布在更長的時間階段。而且，每日劑量可以是單一劑量，或者可以分為若干劑量。
實施例實施例1組胺二鹽酸鹽對早期酒精誘導肝損傷大鼠模型的保護效果分析引起肝炎或肝臟炎癥的肝疾病可以由多種因素所致，包括感染原和毒素。兩種最常見的原因是病毒感染和慢性酒精濫用，在兩種情況下，疾病表現為相似的方式。下列數據強烈地支持這樣的假設，由肝枯否氏細胞和浸潤性白細胞中NADPH氧化酶產生的自由基在早期酒精誘發(fā)的肝炎發(fā)病機理中扮演占主導地位的角色。在本研究中，我們調查了早期酒精誘導肝損傷大鼠模型的組胺治療效果。
材料和方法動物和處置。體重在200與275g之間的雌性Wistar大鼠連續(xù)4周隨意獲取液體飼料(Dyets，Bethlehem，PA#710034)，其中熱量的35％來自玉米油，23％來自蛋白質，5％來自維生素和礦物質，11％來自麥芽糖-糊精，36％來自乙醇。使用等熱量麥芽糖-糊精飼料(Dyets，#710270)供對照。每24小時對大鼠給以單一劑量乙醇(5g/kg體重，胃內)，使用18-度量口服生物醫(yī)學藥具(Popper & Sons，Inc.，New Hyde Park，NY)，稀釋在PBS中(pH 7.2；GIBCO Laboratories Life TechnologiesInc.，Grand Island，NY)。向對照動物管飼單獨的PBS。借助皮下注射給以組胺二鹽酸鹽(0.5mg/kg或5.0mg/kg；Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO)或載體(PBS，pH 7.4；GIBCO Laboratories LifeTechnologies Inc.，Grand Island，NY)，每日兩次達4周。每日測量每只大鼠的體重。大鼠住在無病原設施中，用在本研究中的手術操作得到公共動物護理與使用委員會的批準。
血液收集和酶測定。在乙醇處置2與4周后尸檢，借助心穿刺收集血液，離心。將血清貯存在-20℃下，直至利用Sigma診斷試劑盒(SigmaChemical Co.，St.Louis，MO)測定丙氨酸轉氨酶(ALT)和天冬氨酸轉氨酶(AST)。
病理學評價。乙醇處置后2與4周，將肝臟用福爾馬林固定，包埋在石蠟中，用蘇木精和曙紅染色，以評估脂肪變性、炎癥和壞死。由外部專家以雙盲方式為肝病變打分如下1、脂肪變性的程度，0-4分(基于含有脂質的肝細胞％)0無1極少(0-24％)2輕微(25-49％)
3中等(50-74％)4嚴重(＞＝75％)2、炎性細胞浸潤的程度0-4分0無1極少2輕微3中等4嚴重3、變性和壞死的程度，0-4分0無1肝細胞變性，沒有壞死2極少至輕微的肝細胞壞死(伴有或者沒有變性)3中等的肝細胞壞死(伴有或者沒有變性)4嚴重壞死(伴有或者沒有變性)每級組織學評價分數計入每例肝臟的總分。
結果組胺二鹽酸鹽對早期酒精誘導肝損傷大鼠模型的保護效果研究的結果總結在下表1中。
表1肝的組織學發(fā)現，平均組嚴重性得分
每組中每項發(fā)現的嚴重性得分求和，然后除以每組所評價的動物數。評分標準如下無＝0；極少＝3；輕微＝6；中等＝9；嚴重＝12。利用這種方法，證明了組間的趨勢。依賴正常食物的未處置大鼠得分將是1.00。
飼喂高脂肪液體飼料和乙醇的動物發(fā)展為酒精性肝損傷的典型肝組織學，包括脂肪變性、炎癥、壞死和增加了的浸潤性白細胞數量，主要為嗜中性白細胞和單核細胞。在乙醇處置的動物中，丙氨酸和天冬氨酸轉氨酶(ALT/AST)的血清水平升高大約二至四倍。
每日兩次皮下注射組胺(0.5mg/kg或5mg/kg)的動物以劑量依賴性方式緩解肝損傷，最高的劑量是最有效的。病理得分和血清轉氨酶水平的正?；舱f明了這一點。另外，從組胺處置動物上切除的肝臟在外觀上相當于無乙醇處置組的肝臟。來自乙醇處置動物的肝臟一般更暗淡，小葉更大、更突出。
組胺處置動物具有正常的肝臟外觀，更容易耐受乙醇給藥。最初，與依賴對照飼料的動物相比，所有接受乙醇的動物都減輕了體重。不過，兩個組胺處置組都比單獨乙醇處置組更加迅速地恢復體重。另外，在研究結束時這些組具有與無乙醇處置的對照組相似的體重。
結論初步結果表明對照組和組胺處置組多少有正常ALT活性的趨勢，乙醇對照組顯示ALT活性增加2-3倍。這些結果顯示，組胺顯著減輕由慢性乙醇給藥和高脂肪飼料所致肝損傷。而且，本研究的結果提示，組胺和組胺受體激動劑保護早期酒精誘導的大鼠肝損傷。
實施例2肝NK細胞和T細胞活性的體外研究本例闡述組胺對從人肝臟分離的淋巴細胞的影響。體外研究了三種類型人淋巴細胞CD3+T-細胞、CD3-/56+NK-細胞和CD3+/56+NK/T-細胞在氧化性誘導的編程性細胞死亡中的角色。所有三種細胞類型在用自體固有的單核細胞(MO)或粒細胞(GR)培育之后或者在用過氧化氫(一種反應性氧屬)處理之后變?yōu)榫幊绦约毎劳?。因而，在淋巴細胞與MO之比為1∶1時，35±5％的T-細胞、55±5％的NK-細胞和76±7％的NK/T-細胞變?yōu)榫幊绦约毎劳?。在淋巴細胞與GR之比為1∶1時，對應的編程性細胞死亡頻率為21±4％(T-細胞)、30±7％(NK-細胞)和66±8％(NK/T-細胞)。所有數據均為平均±s.e.m.(n＝15-30名血液供體)。組胺顯著預防所有細胞類型的編程性細胞死亡(p＜0.001)。在由外源性過氧化氫誘導編程性細胞死亡的實驗中確認，對氧化性誘導的NK/T-細胞和NK-細胞編程性細胞死亡的敏感性更高；在25μM過氧化氫下，35±5％的T-細胞、65±7％的NK-細胞和78±7％的NK/T-細胞(n＝8)變?yōu)榫幊绦约毎劳?。我們得出結論，肝型淋巴細胞、特別是NK/T-細胞對氧化性應激反應的敏感性不同尋常。因而，抗氧化劑、例如組胺在肝臟瘤形成或慢性感染中可能是更有效的，這是由于對氧化性誘導的肝浸潤性淋巴細胞編程性細胞死亡的敏感性更高。
實施例3組胺與肝毒性藥物作為單一制劑給藥藥物誘導的肝疾病代表了對健康護理、藥學工業(yè)和調節(jié)性體制的重要挑戰(zhàn)。根據美國大部分醫(yī)療中心的調查，藥物肝毒性是急性肝衰竭的唯一主導性原因Kaplowitz，N.，Hepatology 33(1)308-310(2001)。
大部分不利的藥物事件都是急性的，呈現細胞毒性肝炎樣疾病或膽汁郁積疾病。其他對肝細胞毒性藥物的反應包括慢性肝炎、消失性導管疾病、脂肪肝、非酒精性脂肝炎、纖維性、肝硬化、肉芽腫樣病、靜脈阻塞性疾病、紫癜性肝炎和良性與惡性瘤形成。肝損傷可以由于所消耗的藥物劑量、明顯的過敏反應或代謝性特應性反應而發(fā)生。
不受特定理論所限的是，據信響應于肝毒性藥物侵害的肝細胞創(chuàng)傷可以由ROS所導致或惡化。正如上面所討論的，ROS能夠對肝實質內多種細胞具有直接的影響，引起編程性細胞死亡。這些分子能夠破壞肝細胞與組織的另一種機理可能涉及ROS對免疫系統(tǒng)驅動細胞所具有的影響。ROS產生與釋放抑制性化合物減少和/或預防ROS介導的由暴露于肝毒性藥物所致肝細胞與組織損傷。
囑咐表現有結核的個體服用口服片劑達6至12個月，其中包含異煙肼和有效劑量的組胺。在治療期間，由醫(yī)師監(jiān)測患者，進行實驗室試驗，以檢查患者肝臟響應于藥物治療的狀態(tài)。實驗室結果確認與服用單獨的異煙肼的患者相比，服用包含異煙肼和有效劑量組胺的組合物的患者肝臟沒有損傷，前者可能導致嚴重的、有時致命的肝損傷。
實施例4組胺二鹽酸鹽與肝毒性藥物的共同給藥一天三次服用苯妥英以控制癲癇發(fā)作的癲癇患者補充10mg每日口服劑量的組胺二鹽酸鹽。在補充組胺二鹽酸鹽之前，肝臟活組織檢查確認作為服用苯妥英的后果，癲癇患者出現肝損傷。補充組胺二鹽酸鹽之后，預防了進一步的肝組織損傷。
實施例5包含ROS清除劑的草藥制備物過去數十年來，草藥、維生素和草藥添加劑日益盛行。雛菊成功地用于傷口愈合和促進骨健康已有數百年。雛菊作為咳嗽、黏膜炎、胃腸潰瘍的強有力藥物也已受到歡迎。
常用草藥雛菊能夠作為泥罨劑或茶飲劑給藥，用作祛痰藥、緩和藥和/或補藥。不過，雛菊的消耗已經與肝損傷有關。為了最小化雛菊的肝毒性作用，消耗草藥雛菊的個體補充8mg/天的過氧化氫酶。觀察到沒有肝損傷。
實施例6繼發(fā)于胰腺炎的肝組織損傷的預防除了肝炎以外，本發(fā)明涵蓋胰腺炎和其他炎性疾病的治療。由作為個體免疫應答一部分的TNF-α和白介素所致炎癥也能導致組織損傷。組胺和組胺相關性化合物阻滯這些前炎性細胞因子，從而改善一些由炎癥所致細胞損傷。關于組胺和組胺相關性化合物緩和由前炎性細胞因子所致組織損傷的作用的詳細討論，參見美國專利No.6,242,473和美國專利申請No.09/139,281。
鑒別表現有急性胰腺炎的患者。對患者每天給以100μg/kg組胺二磷酸鹽，歷經一至二周。一旦胰腺炎消退，進行肝臟活組織檢查。組胺二磷酸鹽的給藥預防肝組織損傷，降低與胰腺炎有關的感染的發(fā)生率。
實施例7肝細菌感染的治療鑒別表現有由一種螺桿菌所致細菌感染的個體。對個體給以抗生素，與有效劑量的組胺前體藥物一致。感染的周期減少了，肝細胞創(chuàng)傷最小化了。
上述說明詳細描述了某些發(fā)明實施方式。不過將被領會到的是無論上述文本有多詳細，本發(fā)明也能以很多方式實施。正如上面所規(guī)定的，應當注意在描述某些發(fā)明特征或方面時，特定術語的使用不應意味著該術語僅限于包括與該術語有關的發(fā)明特征或方面的任意特定特性。因此應當按照所附權利要求及其任意等價方式解釋發(fā)明范圍。
權利要求
1.組合物在藥物制造中的用途，該組合物包含有效減少個體反應性氧屬(ROS)量的化合物，該藥物用于治療ROS-介導的肝細胞與組織的氧化性損傷。
2.權利要求1的用途，其中所述化合物選自由有效抑制酶生成性ROS產生或釋放的化合物、ROS清除劑及其組合組成的組。
3.權利要求2的用途，其中ROS是被組成釋放的。
4.權利要求1的用途，其中所述損傷與肝疾病有關，肝疾病選自由門靜脈高血壓、阿拉惹綜合征、α-1-抗胰蛋白酶缺陷、自體免疫性肝炎、膽閉鎖、慢性肝炎、肝臟癌癥、轉移至肝臟的癌癥、肝硬化、肝內膽汁郁積、肝靜脈血栓形成、肝靜脈阻塞性疾病、肝豆狀核變性、肝腫大、肝肺綜合征、肝腎綜合征、肝囊腫、肝膿腫、脂肪肝、半乳糖血癥、吉爾伯特綜合征、門靜脈高血壓、酒精性肝疾病(ALD)、寄生蟲性肝疾病、紫癜性肝炎、紅細胞肝卟啉癥、肝卟啉癥、肝結核、原發(fā)性膽硬化、原發(fā)性硬化性膽管炎、雷亥綜合征、結節(jié)病、酪氨酸血癥、I型糖原貯存性疾病、威爾遜氏病、新生兒肝炎、非酒精性脂肝炎、血色素沉著和澤爾韋格綜合征組成的組。
5.權利要求2的用途，其中該有效抑制酶生成性ROS產生或釋放的化合物選自由組胺、組胺受體激動劑、NADPH氧化酶抑制劑、血清素和血清素激動劑組成的組。
6.權利要求2的用途，其中該清除劑選自由過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶、抗壞血酸鹽過氧化物酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、抗壞血酸鹽過氧化物酶、維生素A、維生素E和維生素C組成的組。
7.權利要求1的用途，其中所述損傷與肝疾病有關，肝疾病選自由細菌感染、真菌感染和原生動物感染組成的組。
8.權利要求7的用途，其中所述組合物進一步包含抗生素。
9.權利要求8的用途，其中所述抗生素與所述有效抑制酶生成性ROS產生或釋放的化合物是基本上同時給藥的。
10.權利要求8的用途，其中所述抗生素是在所述有效抑制酶生成性ROS產生或釋放的化合物給藥24小時內給藥的。
11.組合物在藥物制造中的用途，該組合物包含有效減少個體ROS量的化合物，該藥物用于治療患有肝疾病的患者。
12.權利要求11的用途，其中所述肝疾病選自由門靜脈高血壓、阿拉惹綜合征、α-1-抗胰蛋白酶缺陷、自體免疫性肝炎、膽閉鎖、慢性肝炎、肝臟癌癥、轉移至肝臟的癌癥、肝硬化、肝內膽汁郁積、肝靜脈血栓形成、肝靜脈阻塞性疾病、肝豆狀核變性、肝腫大、肝肺綜合征、肝腎綜合征、肝囊腫、肝膿腫、脂肪肝、半乳糖血癥、吉爾伯特綜合征、門靜脈高血壓、酒精性肝疾病(ALD)、寄生蟲性肝疾病、紫癜性肝炎、紅細胞肝卟啉癥、肝卟啉癥、肝結核、原發(fā)性膽硬化、原發(fā)性硬化性膽管炎、雷亥綜合征、結節(jié)病、酪氨酸血癥、I型糖原貯存性疾病、威爾遜氏病、新生兒肝炎、非酒精性脂肝炎、血色素沉著和澤爾韋格綜合征組成的組。
13.權利要求11的用途，其中所述有效減少個體ROS量的化合物選自由有效抑制ROS產生或釋放的化合物、ROS清除劑及其組合組成的組。
14.權利要求13的用途，其中所述有效抑制ROS產生或釋放的化合物選自由組胺、組胺受體激動劑、血清素、血清素激動劑和NADPH氧化酶抑制劑組成的組。
15.權利要求13的用途，其中所述清除劑選自由過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶和抗壞血酸鹽過氧化物酶組成的組。
16.組合物，包含有效減少個體ROS量的化合物和肝毒性藥物。
17.權利要求16的組合物，其中所述肝毒性藥物選自由硫唑嘌呤、甲基多巴、硝呋妥因、氯貝特、曲格列酮、布洛芬、別嘌呤醇、消炎痛、來氟米特、對乙酰氨基酚、雙氯芬酸、異煙肼、四環(huán)素、紅霉素、硝呋妥因、阿莫西林、利福平、酮康唑、氟氯噁西林、曲伐沙星、磺胺類、雌二醇、鐵、谷胱甘肽、氟烷、異氟烷、卡托普利、地爾硫、苯妥英、丙戊酸、卡馬西平、苯巴比妥、撲米酮、曲唑酮、氯丙嗪、奎尼丁、普魯卡因酰胺、胺碘酮、甲氨蝶呤、環(huán)磷酰胺、皮質類固醇、同化性類固醇、糖皮質激素類、吡嗪酰胺、對-氨基水楊酸、乙硫異煙胺、甲氧芐啶-磺胺甲噁唑、戊雙脒、齊多夫定、二脫氧肌苷、青霉素類和頭孢菌素類組成的組。
18.權利要求16的組合物，其中所述肝毒性藥物是一種草藥制備物，選自由小槲樹(Larrea tridentata)、石蠶(Teucrium chamaedrys)、金不換、麻黃、纈草根(Valeriana officinalis)、黃芩(Scutellariagalericulata)、槲寄生(Viscum species)、Jamaican bush tea、番瀉葉(Cassia angustfolia)、雛菊(Symphytum officinale)和醉椒根提取物組成的組。
19.權利要求16的組合物，其中所述化合物選自由有效抑制反應性氧屬產生或釋放的化合物、ROS清除劑及其組合組成的組。
20.權利要求19的組合物，其中所述有效抑制反應性氧屬產生或釋放的化合物選自由組胺、組胺受體激動劑、NADPH氧化酶抑制劑、血清素和血清素激動劑組成的組。
21.權利要求19的組合物，其中所述ROS清除劑選自由過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶和抗壞血酸鹽過氧化物酶組成的組。
22.組合物在藥物制造中的用途，該組合物包含有效劑量的有效減少個體ROS量的化合物，該藥物用于減少藥物的肝毒性。
23.權利要求22的用途，其中所述化合物選自由有效抑制ROS產生與釋放的化合物、ROS清除劑及其組合組成的組。
24.權利要求23的用途，其中所述有效抑制ROS產生或釋放的化合物選自由組胺、組胺受體激動劑、NADPH氧化酶抑制劑、血清素和血清素激動劑組成的組。
25.權利要求23的用途，其中該清除劑選自由過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶、抗壞血酸鹽過氧化物酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、抗壞血酸鹽過氧化物酶、維生素A、維生素E和維生素C組成的組。
26.權利要求22的用途，其中所述肝毒性藥物選自由硫唑嘌呤、甲基多巴、硝呋妥因、氯貝特和曲格列酮組成的組。
27.權利要求22的用途，其中所述肝毒性藥物選自由布洛芬、別嘌呤醇、消炎痛、來氟米特、對乙酰氨基酚和雙氯芬酸組成的組。
28.權利要求22的用途，其中所述肝毒性藥物選自由異煙肼、四環(huán)素、紅霉素、硝呋妥因、阿莫西林、利福平、酮康唑、氟氯噁西林、曲伐沙星和磺胺類組成的組。
29.權利要求22的用途，其中所述肝毒性藥物選自由雌二醇、鐵和谷胱甘肽組成的組。
30.權利要求22的用途，其中所述肝毒性藥物選自由氟烷和異氟烷組成的組。
31.權利要求22的用途，其中所述肝毒性藥物選自由卡托普利、地爾硫、苯妥英、丙戊酸、卡馬西平、苯巴比妥、撲米酮、曲唑酮、氯丙嗪、奎尼丁、普魯卡因酰胺和胺碘酮組成的組。
32.權利要求22的用途，其中所述肝毒性藥物是一種化療劑。
33.權利要求22的用途，其中所述肝毒性藥物選自由皮質類固醇、同化性類固醇和糖皮質激素類組成的組。
34.權利要求22的用途，其中所述肝毒性藥物用于治療HIV/AIDS患者。
35.權利要求34的用途，其中所述藥物選自由吡嗪酰胺、對-氨基水楊酸、乙硫異煙胺、甲氧芐啶-磺胺甲噁唑、戊雙脒、齊多夫定、二脫氧肌苷、青霉素類和頭孢菌素類組成的組。
36.權利要求22的用途，其中所述藥物是一種草藥制備物，選自由小槲樹(Larrea tridentata)、石蠶(Teucrium chamaedrys)、金不換、麻黃、纈草根(Valeriana officinalis)、黃芩(Scutellariagalericulata)、槲寄生(Viscum species)、Jamaican bush tea、番瀉葉(Cassia angustfolia)、雛菊(Symphytum officinale)和醉椒根提取物組成的組。
37.組合物在藥物制造中的用途，該組合物包含有效劑量的有效減少個體ROS量的化合物，該藥物用于減少與暴露于環(huán)境或工業(yè)毒素有關的肝組織損傷。
38.權利要求37的用途，其中所述化合物選自由有效抑制ROS產生或釋放的化合物、ROS清除劑及其組合組成的組。
39.權利要求38的用途，其中所述有效抑制ROS產生或釋放的化合物選自由組胺、組胺受體激動劑、NADPH氧化酶抑制劑、血清素和血清素激動劑組成的組。
40.權利要求38的用途，其中該清除劑選自由過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶、抗壞血酸鹽過氧化物酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、抗壞血酸鹽過氧化物酶、維生素A、維生素E和維生素C組成的組。
41.權利要求37的用途，其中所述毒素是一屬有毒蘑菇，選自由捕蠅蕈屬、Galerina和鹿花菌屬組成的組。
42.權利要求37的用途，其中所述毒素選自由吸煙、二乙醇胺、月桂基硫酸鈉、丙二醇、農藥、食品添加劑、食品防腐劑、重金屬、甲醛、溴苯和氯化溶劑組成的組。
43.權利要求42的用途，其中所述氯化溶劑選自由二噁英、fluran、TCE、PCE、DCE、四氯乙烯、四氯化碳和乙烯氯組成的組。
全文摘要
本文涉及治療和/或預防哺乳動物由反應性氧屬所致肝組織與細胞損傷的方法。更具體地，本文涉及通過組胺和組胺激動劑的給藥預防和/或減少肝組織與細胞損傷。
文檔編號A61K31/375GK1571674SQ02820709
公開日2005年1月26日 申請日期2002年10月11日 優(yōu)先權日2001年10月19日
發(fā)明者K·R·格爾森, T·S·K·哈帕蘭塔, S·C·霍恩雅克 申請人:馬克西姆醫(yī)藥公司