專利名稱：用于炎性疾病治療的聯(lián)合形式的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及炎性疾病的治療。
當(dāng)組織被病毒、細(xì)菌、創(chuàng)傷、化學(xué)品、熱、冷或任何有害刺激損傷時(shí)會(huì)出現(xiàn)炎癥?；瘜W(xué)品包括舒緩激肽，組胺，5-羥色胺和其他物質(zhì)被釋放，吸引組織巨噬細(xì)胞和白細(xì)胞定位在一定區(qū)域內(nèi)來(lái)吞噬和破壞外來(lái)物質(zhì)。在此過(guò)程中，釋放化學(xué)介質(zhì)例如TNFα，導(dǎo)致炎癥。炎性疾病是其中炎癥持續(xù)或慢性的那些。炎性疾病的一個(gè)實(shí)例是骨關(guān)節(jié)炎。
免疫炎性疾病(例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，牛皮癬，潰瘍性結(jié)腸炎，克羅恩氏病，中風(fēng)誘發(fā)的腦細(xì)胞死亡，關(guān)節(jié)僵直性脊椎炎，纖維肌痛，和自身免疫性疾病例如哮喘，多發(fā)性硬化，I型糖尿病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，硬皮病，系統(tǒng)性硬化，和斯耶格倫氏疾病綜合征)是特征為免疫系統(tǒng)調(diào)控障礙且機(jī)體防御對(duì)其自身健康組織的不適當(dāng)動(dòng)員的炎性疾病。
全球百分之一的人患有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，一種使關(guān)節(jié)炎癥腫脹、疼痛和最后變形的不間斷的、進(jìn)行性疾病。根據(jù)關(guān)節(jié)炎基金會(huì)所說(shuō)，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎當(dāng)前影響著2百萬(wàn)以上的美國(guó)人，其中婦女患該疾病的人可能高三倍。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎特征在于關(guān)節(jié)內(nèi)層和/或其他內(nèi)部器官的炎癥，并且存在升高數(shù)量的淋巴細(xì)胞和高水平的促炎細(xì)胞因子。
類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療通常包括給予(i)非甾類抗炎藥物(NSAID類；例如，detoprofen，雙氯酚酸鈉，二氟尼柳，依托度酸，非諾洛芬，氟比洛芬，布洛芬，消炎痛，酮洛芬，甲氯滅酸鹽，甲氯滅酸，meloxicam，nabumeone，萘普生鈉，噁丙嗪，吡羅昔康，舒林酸，托美丁，celecoxib，rofecoxib，阿斯匹林，水楊酸膽堿，雙水楊酸酯，和水楊酸鈉和水楊酸鎂)；(ii)甾類化合物(例如，可的松，地塞米松，氫化可的松，甲潑尼龍，強(qiáng)的松龍，強(qiáng)的松，去炎松)；(iii)DMARD類，即，疾病修飾的抗風(fēng)濕藥物(例如，環(huán)孢菌素，硫唑嘌呤，氨甲蝶呤，leflunomide，環(huán)磷酰胺，羥氯喹，柳氮磺胺吡啶，D-青霉胺，米諾環(huán)素，和金)；或(iv)重組蛋白質(zhì)(例如，ENBREL)(etanercept，一種可溶性TNF受體)和REMICADE(infliximab)一種嵌合單克隆抗-TNF抗體)。
需要開(kāi)發(fā)出治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和其他炎性疾病的新方案。
發(fā)明概述我們發(fā)現(xiàn)阿莫沙平(2-氯-11(1-哌嗪基)二苯并[b，f][1，4]氧雜)和強(qiáng)的松龍(也稱作1-脫氫皮質(zhì)醇；1-脫氫氫化可的松；1，4-孕二烯-11β，17α，21-三醇-3，20-二酮；和11β，17α，21-三羥基-1，4-孕二烯-3，20-二酮)的聯(lián)合形式能夠?qū)ν庵苎獑魏思?xì)胞(PBMCs)中引起的TNFα水平產(chǎn)生巨大抑制作用。
阿莫沙平是三環(huán)類抗抑郁藥(TCA)?；诎⒛称脚c強(qiáng)的松龍一致抑制TNFα水平的能力，所屬領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)懂得其他TCAs也可以用于本發(fā)明中。也可以使用不是三環(huán)類抗抑郁藥的阿莫沙平的結(jié)構(gòu)類似物。示例結(jié)構(gòu)類似物包括，例如，氯噻平，哌拉平，氟哌拉平，和二苯并(b，f)(1，4)氧雜氮雜，2-氯-11-(4-甲基-1-哌嗪基)-，一氫氯化物。
強(qiáng)的松龍是一種皮質(zhì)甾類?；谄べ|(zhì)甾類族的共同結(jié)構(gòu)特征和明確作用機(jī)理，所屬領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解其他皮質(zhì)甾類可以與阿莫沙平或其他TCA類聯(lián)合用于治療炎性疾病。
所以，本發(fā)明特征在于一種治療患有炎性疾病的患者的方法，該方法通過(guò)同時(shí)或各自在14天內(nèi)給予該患者足以抑制TNFα水平足夠給該患者帶來(lái)治療益處量的(i)TCA(例如，阿莫沙平)；和(ii)皮質(zhì)甾類(例如，強(qiáng)的松龍)。在一個(gè)實(shí)施方式中，兩種化合物是阿莫沙平和強(qiáng)的松龍。
本發(fā)明特征還在于一種治療患有炎性疾病的患者的方法，該方法通過(guò)同時(shí)或各自在14天內(nèi)給予該患者足以抑制TNFα水平足夠給該患者帶來(lái)治療益處量的(i)氯噻平，哌拉平，氟哌拉平，或二苯并(b，f)(1，4)氧雜氮雜，2-氯-11-(4-甲基-1-哌嗪基)-，一氫氯化物；和(ii)皮質(zhì)甾類(例如，強(qiáng)的松龍)。
優(yōu)選地，本發(fā)明的兩種化合物各自在10天內(nèi)給藥，更優(yōu)選各自在5天內(nèi)給藥，和首選各自在24小時(shí)內(nèi)給藥或同時(shí)給藥。
按照本發(fā)明被治療的疾病可以是，例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，牛皮癬，潰瘍性結(jié)腸炎，克羅恩氏病，中風(fēng)誘發(fā)的腦細(xì)胞死亡，關(guān)節(jié)僵直性脊椎炎，和纖維肌痛，哮喘，多發(fā)性硬化，I型糖尿病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，硬皮病，系統(tǒng)性硬化癥，和斯耶格倫氏疾病綜合征。
在上述治療方法中，優(yōu)選將兩種化合物在還含有藥學(xué)可接受載體的一種藥用組合物中一起提供。
本發(fā)明特征還在于一種藥用組合物包括(i)TCA(例如，阿莫沙平)；和(ii)皮質(zhì)甾類(例如，強(qiáng)的松龍)，以及藥學(xué)可接受載體，稀釋劑或賦形劑。
本發(fā)明特征還在于一種鑒定用于治療患有炎性疾病的患者的化合物的方法。該方法包括步驟在試管內(nèi)使免疫細(xì)胞與(i)TCA或皮質(zhì)甾類；和(ii)候選化合物接觸，并且相對(duì)于(a)與TCA或皮質(zhì)甾類接觸但沒(méi)有與候選化合物接觸的免疫細(xì)胞，和(b)與候選化合物接觸但沒(méi)有與TCA或皮質(zhì)甾類接觸的免疫細(xì)胞測(cè)定該免疫反應(yīng)是否被調(diào)制。當(dāng)與所述的TCA或皮質(zhì)甾類聯(lián)合時(shí)，那些與對(duì)照相比調(diào)制該免疫反應(yīng)達(dá)到更高程度的候選化合物是潛在的有效治療患有炎性疾病患者的化合物。
本發(fā)明中所用的化合物包括在此所述的以其任意藥學(xué)可接受形式的那些，包括異構(gòu)體例如非對(duì)映異構(gòu)體和對(duì)映異構(gòu)體，鹽、溶劑化物和其多晶型物，以及在此所述化合物的外消旋混合物。
所謂＂三環(huán)類抗抑郁藥＂或＂TCA＂是指具有式(I)、(II)或(III)之一的化合物
其中各X獨(dú)立地是，H，Cl，F(xiàn)，Br，I，CH3，CF3，OH，OCH3，CH2CH3，或OCH2CH3；Y是CH2，O，NH，S(O)0-2，(CH2)3，(CH)2，CH2O，CH2NH，CHN，或CH2S；Z是C或S；A是支鏈或直鏈、飽和或不飽和的具有3-6個(gè)碳的烴鏈；各B獨(dú)立地是H，Cl，F(xiàn)，Br，I，CX3，CH2CH3，OCX3或OCX2CX3；和D是CH2，O，NH，S(O)0-2。
在優(yōu)選實(shí)施方式中，各X獨(dú)立地是H，Cl或F；Y是(CH2)2，Z是C；A是(CH2)3；和各B獨(dú)立地是H，Cl或F。
示例三環(huán)類抗抑郁藥包括，例如，阿莫沙平，8-羥基阿莫沙平，7-羥基阿莫沙平，克塞平，琥珀酸克塞平，鹽酸克塞平，8-羥基克塞平，阿米替林，clopramine，多塞平，丙咪嗪，三甲丙咪嗪，去甲丙米嗪，去甲替林，和普羅替林。
所謂＂皮質(zhì)甾類＂是指天然或合成的甾類激素，其可以衍生自膽甾醇且特征在于氫化的環(huán)戊烷并全氫菲環(huán)系。天然皮質(zhì)甾類一般是由腎上腺皮質(zhì)產(chǎn)生的。合成的皮質(zhì)甾類可以鹵化?；钚运璧墓倌軋F(tuán)是在Δ4位的雙鍵，C3酮和C20酮。
皮質(zhì)甾類可以具有糖皮質(zhì)激素和/或鹽皮質(zhì)激素活性。
示例皮質(zhì)甾類包括，例如，地塞米松，丙酸氯地米松，確炎舒松，醋酸確炎舒松，去炎松，己酸丙炎松，氯地米松雙丙酸酯，氯地米松雙丙酸酯一水合物，特戊酸氟地塞米松，雙醋二氟松，醋酸氟輕松，氟氫縮松，氟甲孕松醋酸酯，丙酸倍氯他索，去羥米松，氟甲睪酮，氟強(qiáng)的松龍，氫化可的松，醋酸氫化可的松，氫化可的松丁酸酯，氫化可的松磷酸鈉，氫化可的松琥珀酸鈉，氫化可的松環(huán)戊丙酸酯，氫化可的松probutate，戊酸氫化可的松，醋酸可的松，醋酸對(duì)氟米松，甲基強(qiáng)的松龍，甲基強(qiáng)的松龍醋酸酯，甲基強(qiáng)的松龍琥珀酸鈉，強(qiáng)的松龍，強(qiáng)的松龍醋酸酯，強(qiáng)的松龍磷酸鈉，強(qiáng)的松龍叔丁乙醇酸酯，氯氟土龍?zhí)匚焖狨?，flucinolone，地塞米松21-醋酸酯，丙酸氯地米松17-特戊酸酯，異氟龍，9-氟可的松，6-羥基地塞米松，二氯松，甲二氯松，flupredidene，去氧倍他米松，溴氟龍，氯二氟美松，去氫氯氟美松，二氟米松，醋酸異氟龍，氟羥基雄甾烯二酮，丙酸倍氯米松，氟地塞米松，二氟松，氟輕松，氯氟美松，可的松，對(duì)氟米松，氯氟土龍，強(qiáng)的松龍21-半琥珀酸酯游離酸，強(qiáng)的松龍間磺苯甲酸酯，強(qiáng)的松龍叔丁乙醇酸酯，和醋酸確炎舒松21-棕櫚酸酯。
所謂＂低劑量皮質(zhì)甾類＂是指小于為治療炎癥給予患者的典型劑量的劑量。皮質(zhì)甾類的低劑量實(shí)例如下皮質(zhì)醇12mg/天；可的松15mg/天；強(qiáng)的松3mg/天；甲基強(qiáng)的松龍2.5mg/天；確炎舒松2.5mg/天；丙酸氯地米松250μg/天；地塞米松450μg/天；氫化可的松9mg/天。
所謂的＂阿莫沙平劑量的等效劑量＂是指TCA的劑量，該劑量與指定劑量的強(qiáng)的松龍合用時(shí)在患者中產(chǎn)生等同于一定劑量的阿莫沙平與該劑量的強(qiáng)的松龍合用所具有的抗炎作用。
所謂＂強(qiáng)的松龍劑量的等效劑量＂是指皮質(zhì)甾類的劑量，該劑量與指定劑量的阿莫沙平合用產(chǎn)生等同于一定劑量的強(qiáng)的松龍與該劑量阿莫沙平合用所具有的抗炎作用。
本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)可以從下面的詳述和權(quán)利要求中清楚地看出。
詳述我們發(fā)現(xiàn)阿莫沙平和強(qiáng)的松龍的聯(lián)合對(duì)PBMCs具有巨大的TNFα抑制活性。顯示有效TNFα抑制活性的濃度對(duì)于正常細(xì)胞沒(méi)有不可接受的毒性。所以，這種藥物聯(lián)合有效治療炎性疾病。
阿莫沙平阿莫沙平是二苯并氧雜氮雜類的三環(huán)抗抑郁藥(TCA)。結(jié)構(gòu)上類似于早期的TCA類藥物且也與吩噻嗪類具有相似處。
人們還不完全了解TCA類的準(zhǔn)確作用，但可以肯定的是其重要作用之一是通過(guò)阻斷多種神經(jīng)遞質(zhì)在神經(jīng)元膜的再吸收來(lái)增強(qiáng)去甲腎上腺素和5-羥色胺的作用。阿莫沙平也與抗精神病藥物具有相同之處，其中它阻斷多巴胺受體且可以引起運(yùn)動(dòng)障礙。阿莫沙平還阻斷去甲腎上腺素的再吸收，類似于去甲丙米嗪和馬普替林的作用。
基于阿莫沙平與強(qiáng)的松龍一致抑制TNFα水平的能力，所屬領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解其他TCAs，以及阿莫沙平的結(jié)構(gòu)和功能類似物，也可以與強(qiáng)的松龍(或另一種皮質(zhì)甾類——如下所述)聯(lián)合使用。
阿莫沙平類似物包括，例如，8-羥基阿莫沙平，7-羥基阿莫沙平，克塞平，琥珀酸克塞平，鹽酸克塞平，8-羥基克塞平，氯噻平，哌拉平，氟哌拉平和二苯并(b，f)(1，4)氧雜氮雜，2-氯-11-(4-甲基-1-哌嗪基)-，一氫氯化物。
強(qiáng)的松龍強(qiáng)的松龍，一種合成的腎上腺皮質(zhì)激素，具有抗炎作用，并且應(yīng)用于多種炎性疾病中。人們希望減小強(qiáng)的松龍的給藥量，因?yàn)殓拮逦镔|(zhì)的長(zhǎng)期給藥可能產(chǎn)生嚴(yán)重副作用。
強(qiáng)的松龍是甾類的皮質(zhì)甾類族的一員?；谄べ|(zhì)甾類族共有的結(jié)構(gòu)特征和明確作用機(jī)理，所屬領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解其他皮質(zhì)甾類可與阿莫沙平或阿莫沙平類似物聯(lián)合使用來(lái)治療炎性疾病。所述皮質(zhì)甾類包括，例如，地塞米松，丙酸氯地米松，確炎舒松，醋酸確炎舒松，去炎松，己酸丙炎松，氯地米松雙丙酸酯，氯地米松雙丙酸酯一水合物，特戊酸氟地塞米松，雙醋二氟松，醋酸氟輕松，氟氫縮松，氟甲孕松醋酸酯，丙酸倍氯他索，去羥米松，氟甲睪酮，氟強(qiáng)的松龍，氫化可的松，醋酸氫化可的松，氫化可的松丁酸酯，氫化可的松磷酸鈉，氫化可的松琥珀酸鈉，氫化可的松環(huán)戊丙酸酯，氫化可的松probutate，戊酸氫化可的松，醋酸可的松，醋酸對(duì)氟米松，甲基強(qiáng)的松龍，甲基強(qiáng)的松龍醋酸酯，甲基強(qiáng)的松龍琥珀酸鈉，強(qiáng)的松龍，強(qiáng)的松龍醋酸酯，強(qiáng)的松龍磷酸鈉，強(qiáng)的松龍叔丁乙醇酸酯，氯氟土龍?zhí)匚焖狨?，flucinolone，地塞米松21-醋酸酯，丙酸氯地米松17-特戊酸酯，異氟龍，9-氟可的松，6-羥基地塞米松，二氯松，甲二氯松，flupredidene，去氧倍他米松，溴氟龍，氯二氟美松，去氫氯氟美松，二氟米松，醋酸異氟龍，氟羥基雄甾烯二酮，丙酸倍氯米松，氟地塞米松，二氟松，氟輕松，氯氟美松，可的松，對(duì)氟米松，氯氟土龍，強(qiáng)的松龍21-半琥珀酸酯游離酸，強(qiáng)的松龍間磺苯甲酸酯，強(qiáng)的松龍叔丁乙醇酸酯，和醋酸確炎舒松21-棕櫚酸酯。
治療按照本發(fā)明聯(lián)合治療可以單獨(dú)進(jìn)行或與另一種治療相結(jié)合并且可以在家、醫(yī)生辦公室、診所、醫(yī)院門診科或醫(yī)院提供。治療一般是在醫(yī)院開(kāi)始以使醫(yī)生可以密切觀察到該療法的效果且作出必要的調(diào)整。聯(lián)合治療的持續(xù)時(shí)間取決于要治療炎性疾病的類型、患者的年齡和情況、患者疾病的階段和類型，以及患者對(duì)該治療的反應(yīng)如何。此外，具有發(fā)展為炎性疾病的較高危險(xiǎn)性的人(例如，遺傳因素造成或先已患有炎性疾病的人)可以接受預(yù)防性治療來(lái)阻止或延遲炎性反應(yīng)。
所述聯(lián)合的各組分的給藥劑量、頻率和方式可以獨(dú)立地進(jìn)行控制。例如，一種化合物可以每天經(jīng)口服給藥3次，而第二種化合物可以每天經(jīng)肌肉內(nèi)給藥1次。聯(lián)合療法可以以包括靜止期在內(nèi)的斷續(xù)周期。所述的化合物也可以一起配制使一次給藥提供兩種化合物。
藥組合物的配制適當(dāng)?shù)慕o藥方式包括口服、直腸、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮下、吸入、局部或透皮、陰道和眼部。
本發(fā)明的聯(lián)合形式也可以提供為藥用包裝的各組分。兩種藥物可以一起或單獨(dú)且以各自的劑量配制。
本發(fā)明的化合物在配制時(shí)也作為鹽使用。例如，amytriptiline，另一種三環(huán)抗抑郁藥，被配制為鹽酸鹽，表明同樣可以這樣配制阿莫沙平。強(qiáng)的松龍鹽包括，例如，強(qiáng)的松龍21-半琥珀酸鈉鹽和強(qiáng)的松龍21-磷酸二鈉鹽。
所述聯(lián)合形式的各個(gè)化合物的給藥可以采取任何使該化合物在與其他化合物合用時(shí)達(dá)到抗炎濃度的適當(dāng)方式。各化合物與適當(dāng)載體物質(zhì)混合，并且一般占該組合物總重量的1-95％(重量)。該組合物可以以適合口服、非腸道(例如，靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)，皮下)、直腸、透皮、經(jīng)鼻、陰道、吸入或眼部給藥的劑型提供。所以，所述的組合物可以是例如片劑、膠囊、丸劑、散劑、顆粒劑、混懸劑、乳劑、溶液劑、凝膠(包括水凝膠)、糊劑、軟膏、霜?jiǎng)?、膏藥、灌服藥、分送裝置、栓劑、灌腸劑、注射劑、植入劑、噴霧劑或氣霧劑的形式。所述的藥物組合物可以按照常規(guī)藥學(xué)實(shí)踐(參見(jiàn)，例如，RemingtonTheScience and Practice of Pharmacy，(19th ed.)ed.A.R.Gennaro，1995，Mack Publishing Company，Easton，PA.和Encyclopedia ofPharmaceutical Technology，J.Swarbrick和J.C.Boylan編輯，1988-1999，Marcel Dekker，New York.)配制。
本發(fā)明的藥物組合物可以配制為基本上在給藥后即刻釋放活性成分或者利用控釋制劑，在給藥后的任何預(yù)定時(shí)間內(nèi)釋放活性成分。
控釋制劑中化合物的給藥適用于當(dāng)單用或合用的化合物具有(i)窄治療指數(shù)(例如，產(chǎn)生有害副作用或毒性反應(yīng)的血漿濃度與產(chǎn)生治療效果的血漿濃度之間的差異小；一般地，治療指數(shù)，TI，被定義為中間致死劑量(LD50)與中間有效劑量(ED50)之比)；(ii)在胃腸道中的吸收窗窄；或(iii)短的生物半壽期，由此需要在一天內(nèi)多次給藥從而維持血漿水平在治療水平。
可以推薦許多策略來(lái)控釋，其中治療化合物的釋放速率超過(guò)代謝速率。例如，通過(guò)適當(dāng)選擇制劑參數(shù)和組分可以獲得控釋，包括，例如，適當(dāng)?shù)目蒯尳M合物和包衣。實(shí)例包括單或多單元片劑或膠囊組合物，油溶液，混懸劑，乳劑，微囊，微球，毫微顆粒，貼劑和脂質(zhì)體。
口服使用的固體劑型用于口服的制劑包括在具有無(wú)毒藥學(xué)可接受賦形劑的混合物中含有活性成分的片劑。這些賦形劑可以是，例如，惰性稀釋劑或填充劑(例如，蔗糖和山梨糖醇)，潤(rùn)滑劑，助流劑和抗粘劑(例如，硬脂酸鎂，硬脂酸鋅，硬脂酸，硅石，氫化植物油或滑石粉)。
所述的兩種化合物可以一起混合在片劑或其他載體中，或者可以分開(kāi)。在一個(gè)實(shí)例中，第一化合物含在片劑的內(nèi)部，并且第二化合物含在外部，從而第二種化合物的絕大部分是在第一化合物的釋放之前釋放。
口服用制劑還可以提供為咀嚼片，或者作為硬明膠膠囊其中所述的活性成分與惰性固體稀釋劑混合，或者成為軟明膠膠囊其中所述的活性成分與水或油介質(zhì)混合。
劑量所述聯(lián)合形式的各化合物的劑量取決于幾種因素，包括給藥方法，要治療的疾病，疾病的嚴(yán)重程度，是治療還是預(yù)防疾病，被治療者的年齡、體重和健康。此外，有關(guān)特定患者的遺傳藥理學(xué)(遺傳型對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)、藥效學(xué)和治療的功效性能的影響)信息可以影響所用的劑量。
連續(xù)每天用本發(fā)明的聯(lián)合形式給藥可能不需要。一種治療方案可能需要多個(gè)周期，期間不是施用一種藥物，或者治療可以在必要的基礎(chǔ)上在急性炎癥期間提供。
如上所述，所述的化合物可以經(jīng)口服以片劑、膠囊、酏劑或糖漿的形式給藥，或者經(jīng)直腸以栓劑的形式給藥。化合物的非腸道給藥適合以例如鹽水溶液或摻混在脂質(zhì)體中的化合物的形式進(jìn)行。在其中化合物本身不足以溶解的情形下，可以使用增溶劑例如乙醇。
下面，出于舉例說(shuō)明的目的，說(shuō)明阿莫沙平和強(qiáng)的松龍的劑量。所屬領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)能夠很容易地確定其他TCA類和皮質(zhì)甾類類的劑量。例如，TCA可以以下面所述的阿莫沙平劑量的等效劑量給藥，并且皮質(zhì)甾類可以以下面所述的強(qiáng)的松龍劑量的等效劑量給藥。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述的皮質(zhì)甾類是低劑量皮質(zhì)甾類。
口服給藥對(duì)于適合系統(tǒng)性使用的口服給藥的阿莫沙平，總的日劑量一般是約1-600mg(0.01-8.5mg/kg)，優(yōu)選約25-400mg(0.35-5.7mg/kg)，和更優(yōu)選約100-300mg(1.4-4.2mg/kg)總?cè)談┝俊＝o藥可以是每天1-3次達(dá)1天至1年，并且甚至可以是在患者的生存期間給藥。在許多情況中將表明持續(xù)、長(zhǎng)時(shí)間的給藥?？赡苄枰哌_(dá)600mg的日劑量。
對(duì)于適合系統(tǒng)性使用的口服給藥的強(qiáng)的松龍，日劑量一般是約0.05-200mg(0.7-2800mcg/kg)，優(yōu)選約0.1-60mg(1-850mcg/kg)，和更優(yōu)選約0.1-5mg(4-70mcg/kg)。由于阿莫沙平對(duì)強(qiáng)的松龍抗炎活性表現(xiàn)出增強(qiáng)作用，當(dāng)與TCA聯(lián)合使用時(shí)，低劑量的強(qiáng)的松龍(例如，0.2，0.4，0.6，0.8，1，2，或3mg/天)可以有效治療炎癥。理想的是每天給藥1-4次。如同阿莫沙平，潑尼松龍(prednisilone)可以給藥1天至1年，并且可能甚至在患者的生命期間給藥?？赡苄枰哌_(dá)200mg/天的劑量。
直腸給藥對(duì)于適合直腸給藥用于預(yù)防疾病的組合物，通常優(yōu)選略高量的化合物。所以阿莫沙平的總?cè)談┝恳话銥榧s1-600mg(0.01-8.5mg/kg)。阿莫沙平的直腸給藥一般是每天1-3次。強(qiáng)的松龍的總?cè)談┝恳话闶羌s0.1-100mg(1-1420mcg/kg)。強(qiáng)的松龍的直腸給藥一般是每天1-4次。
靜脈內(nèi)給藥對(duì)于阿莫沙平的靜脈內(nèi)給藥，總的日劑量是約1-400mg(0.014-5.7mg/kg)，優(yōu)選約10-200mg(0.14-2.8mg/kg)并且更優(yōu)選約25-100mg(0.35-1.4mg/kg)。阿莫沙平的靜脈內(nèi)給藥一般每天1-4次，但可以連續(xù)輸注。
對(duì)于強(qiáng)的松龍的靜脈內(nèi)給藥，總的日劑量是約0.05-200mg(0.0007-2.8mg/kg)，優(yōu)選約0.1-60mg(0.001-0.85mg/kg)，和更優(yōu)選約0.1-5mg(4-70mcg/kg)。最優(yōu)選上述低劑量的強(qiáng)的松龍。強(qiáng)的松龍的靜脈內(nèi)給藥一般每天1-4次，但如同阿莫沙平，可以連續(xù)輸注。
其他給藥途徑對(duì)于阿莫沙平的肌肉內(nèi)、皮下、吸入、局部、陰道或眼部給藥，總的日劑量是約1-400mg(0.014-5.7mg/kg)，優(yōu)選約10-200mg(0.14-2.8mg/kg)，和更優(yōu)選約25-100mg(0.35-1.4mg/kg)，和強(qiáng)的松龍的總?cè)談┝渴羌s0.1-100mg(0.0014-1.42mg/kg)。通過(guò)這些途徑，阿莫沙平和強(qiáng)的松龍各自的給藥獨(dú)立地是每天1-4次。
下列實(shí)施例舉例說(shuō)明本發(fā)明。它們不以任何方式限定本發(fā)明。
實(shí)施例1成對(duì)化合物混合的聯(lián)合連續(xù)稀釋基質(zhì)的制備在二甲基亞砜(DMSO)中制備阿莫沙平(16mg/ml)(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO；目錄號(hào)A129)和強(qiáng)的松龍(1.6mg/ml)(Sigma-Aldrich，目錄號(hào)P6004)的儲(chǔ)備液。阿莫沙平主平板的制備是通過(guò)將25μl的濃儲(chǔ)備液加入到聚丙烯384孔儲(chǔ)備平板的3、9和15(C-N行)欄，該平板已經(jīng)預(yù)填充了75μl的無(wú)水DMSO。利用TomTecQuadra Plus液體處理器，將25μl的阿莫沙平儲(chǔ)備液稀釋2倍共連續(xù)4次到相鄰欄(第4-7、10-13、16-19欄)內(nèi)。第6欄(8、14和20)不接受任何化合物并充當(dāng)賦形劑對(duì)照。強(qiáng)的松龍主平板的制備是通過(guò)將25μl的濃強(qiáng)的松龍儲(chǔ)備液加入到適當(dāng)強(qiáng)的松龍主聚丙烯384孔儲(chǔ)備平板的適當(dāng)孔(C行，3-8欄；C行，9-14欄；C行，15-20欄；I行，3-8欄；I行，9-14欄；I行，15-20欄)中。這些主平板已經(jīng)預(yù)填充有75μl的無(wú)水DMSO。利用TomTec Quadra Plus液體處理器，將25μl稀釋2倍連續(xù)4次到相鄰行(D-G，和J-M行)。第6行(H和N)不接受任何化合物用作賦形劑對(duì)照。將主平板密封并儲(chǔ)存在-20℃直至準(zhǔn)備使用。
最終的阿莫沙平/強(qiáng)的松龍聯(lián)合平板是用TomTec Quadra Plus液體處理器分別從阿莫沙平和強(qiáng)的松龍主平板取1μl到含100μl培養(yǎng)基(RPMI；Gibco BRL，#11875-085)、10％胎牛血清(GibcoBRL，#25140-097)，2％青霉素/鏈霉素(Gibco BRL，#15140-122))的稀釋平板中來(lái)制備。該稀釋平板隨后混合并將10μl等分試樣轉(zhuǎn)移到最終試驗(yàn)平板中，其中已經(jīng)預(yù)填充有含適當(dāng)激活TNFα分泌的刺激物的40μl/孔R(shí)PMI培養(yǎng)基(參見(jiàn)下文)。
實(shí)施例2對(duì)于阿莫沙平和強(qiáng)的松龍的TNFα抑制活性的試驗(yàn)所述的化合物稀釋基質(zhì)用TNFαELISA法分析。簡(jiǎn)單而言，含在聚丙烯384孔平板(NalgeNunc)的各孔內(nèi)的稀釋人外周血單核細(xì)胞(PBMCs)的100μl混懸液通過(guò)用終濃度為10ng/ml佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-醋酸酯(Sigma)和750ng/μl伊屋諾霉素(Sigma)處理來(lái)刺激分泌TNFα。在刺激時(shí)加入不同濃度的各試驗(yàn)化合物。37℃下在加濕培養(yǎng)箱中溫育16-18小時(shí)后，離心該平板且將上清液轉(zhuǎn)移到涂布有抗TNF抗體(PharMingen，#18631D)的白色不透明聚苯乙烯384孔平板(NalgeNunc，Maxisorb)。溫育2小時(shí)后，用含0.1％吐溫20(聚氧化乙烯脫水山梨糖醇一月桂酸酯)的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)洗滌該平板(Tecan PowerWasher 384)且繼續(xù)與另一生物素標(biāo)記的抗-TNF抗體(PharMingen，18642D)和偶聯(lián)于strepavidin的辣根過(guò)氧化物酶(HRP)(PharMingen，#13047E)一起溫育另一小時(shí)。平板用0.1％吐溫20/PBS洗滌后，將HRP底物(其含有魯米諾，過(guò)氧化氫，和增強(qiáng)劑例如對(duì)碘苯酚)加入到各孔并用LJL分析照度計(jì)測(cè)量光強(qiáng)度。對(duì)照孔含有1μg/ml環(huán)孢菌素A(Sigma)的終濃度。
實(shí)施例3阿莫沙平和強(qiáng)的松龍的聯(lián)合形式對(duì)于佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-醋酸酯和伊屋霉素處理的血液的TNFα分泌的抑制作用阿莫沙平和強(qiáng)的松龍能夠共同抑制佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-醋酸酯和伊屋諾霉素在血液中誘發(fā)的TNFα分泌。如表1和2所示，阿莫沙平能夠使強(qiáng)的松龍的劑量反應(yīng)提供近2倍。在1.11μM的濃度下，強(qiáng)的松龍單用能夠抑制28％的TNFα分泌。加入0.2μM阿莫沙平使1.11μM強(qiáng)的松龍的TNFα抑制作用提高至51％。在82％的活性上的巨大增加是通過(guò)僅為18的較小增加的總藥物種類就可達(dá)到。
表1 表2 阿莫沙平增強(qiáng)強(qiáng)的松龍活性也可以在跟蹤二級(jí)篩選中觀察到。在400nM阿莫沙平的存在下強(qiáng)的松龍?jiān)?nM的濃度下的TNFα抑制作用提高了2.9倍達(dá)到40％。強(qiáng)的松龍和阿莫沙平在此濃度下單用的TNFα抑制活性分別只有14和16％。此外，9nM強(qiáng)的松龍與398nM阿莫沙平(40％)合用下獲得的TNFα抑制的水平不小于1110nM強(qiáng)的松龍單用(35％)。與強(qiáng)的松龍單用相比，所述的聯(lián)合形式在TNFα抑制作用上的增強(qiáng)使效價(jià)移動(dòng)了約100倍。
阿莫沙平和強(qiáng)的松龍抑制被LPS刺激血液的TNFα分泌的能力如表3所示。
表3 其他實(shí)施方式說(shuō)明書(shū)上文中提及的所有出版物和轉(zhuǎn)錄在此引入作為參考。本發(fā)明所述的方法和體系的多種改進(jìn)和變化對(duì)于所屬領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的，不脫離本發(fā)明的范圍和實(shí)質(zhì)。雖然本發(fā)明結(jié)合具體優(yōu)選實(shí)施方式進(jìn)行了說(shuō)明，應(yīng)懂得本發(fā)明不應(yīng)受到這些具體實(shí)施方式
的不適當(dāng)限制。事實(shí)上，所述的實(shí)施本發(fā)明的方式的多種改進(jìn)對(duì)于分子生物學(xué)或有關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)顯然是在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種治療患有炎性疾病的患者或具有發(fā)展為炎性疾病危險(xiǎn)性的患者的方法，該方法包括給予該患者(i)三環(huán)抗抑郁藥；和(ii)皮質(zhì)甾類，其中所述的藥物(i)和(ii)同時(shí)或各自在14天內(nèi)以足以減輕或抑制該患者中的炎癥的量施用。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述的三環(huán)抗抑郁藥是阿莫沙平，8-羥基阿莫沙平，7-羥基阿莫沙平，克塞平，琥珀酸克塞平，鹽酸克塞平，8-羥基克塞平，阿米替林，clopramine，多塞平，丙咪嗪，三甲丙咪嗪，去甲丙米嗪，去甲替林，或普羅替林。
3.權(quán)利要求2的方法，其中該三環(huán)抗抑郁藥是阿莫沙平。
4.權(quán)利要求1的方法，其中該皮質(zhì)甾類是地塞米松，丙酸氯地米松，確炎舒松，醋酸確炎舒松，去炎松，己酸丙炎松，氯地米松雙丙酸酯，氯地米松雙丙酸酯一水合物，特戊酸氟地塞米松，雙醋二氟松，醋酸氟輕松，氟氫縮松，氟甲孕松醋酸酯，丙酸倍氯他索，去羥米松，氟甲睪酮，氟強(qiáng)的松龍，氫化可的松，醋酸氫化可的松，氫化可的松丁酸酯，氫化可的松磷酸鈉，氫化可的松琥珀酸鈉，氫化可的松環(huán)戊丙酸酯，氫化可的松probutate，戊酸氫化可的松，醋酸可的松，醋酸對(duì)氟米松，甲基強(qiáng)的松龍，甲基強(qiáng)的松龍醋酸酯，甲基強(qiáng)的松龍琥珀酸鈉，強(qiáng)的松龍，強(qiáng)的松龍醋酸酯，強(qiáng)的松龍磷酸鈉，強(qiáng)的松龍叔丁乙醇酸酯，氯氟土龍?zhí)匚焖狨?，flucinolone，地塞米松21-醋酸酯，丙酸氯地米松17-特戊酸酯，異氟龍，9-氟可的松，6-羥基地塞米松，二氯松，甲二氯松，flupredidene，去氧倍他米松，溴氟龍，氯二氟美松，去氫氯氟美松，二氟米松，醋酸異氟龍，氟羥基雄甾烯二酮，丙酸倍氯米松，氟地塞米松，二氟松，氟輕松，氯氟美松，可的松，對(duì)氟米松，氯氟土龍，強(qiáng)的松龍21-半琥珀酸酯游離酸，強(qiáng)的松龍間磺苯甲酸酯，強(qiáng)的松龍叔丁乙醇酸酯，或醋酸確炎舒松21-棕櫚酸酯。
5.權(quán)利要求4的方法，其中所述的皮質(zhì)甾類是強(qiáng)的松龍。
6.權(quán)利要求1的方法，其中所述的三環(huán)抗抑郁藥是以與1-600毫克阿莫沙平等效的劑量給藥。
7.權(quán)利要求6的方法，其中所述的三環(huán)抗抑郁藥是以與100-300毫克阿莫沙平等效的劑量給藥。
8.權(quán)利要求1的方法，其中所述的皮質(zhì)甾類是以與0.05-200毫克強(qiáng)的松龍等效的劑量給藥。
9.權(quán)利要求8的方法，其中所述的皮質(zhì)甾類是以與0.05-5毫克強(qiáng)的松龍等效的劑量給藥。
10.權(quán)利要求9的方法，其中所述的皮質(zhì)甾類是以與0.1-3毫克強(qiáng)的松龍等效的劑量給藥。
11.權(quán)利要求1的方法，其中所述的三環(huán)抗抑郁藥和所述的皮質(zhì)甾類各自是在10天內(nèi)給藥。
12.權(quán)利要求11的方法，其中所述的三環(huán)抗抑郁藥和所述的皮質(zhì)甾類各自在5天內(nèi)給藥。
13.權(quán)利要求12的方法，其中所述的三環(huán)抗抑郁藥和所述的皮質(zhì)甾類各自在24小時(shí)內(nèi)給藥。
14.權(quán)利要求13的方法，其中所述的三環(huán)抗抑郁藥和所述的皮質(zhì)甾類是同時(shí)給藥。
15.權(quán)利要求1的方法，其中所述的炎性疾病是免疫炎性疾病。
16.權(quán)利要求15的方法，其中所述的免疫炎性疾病是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，牛皮癬，潰瘍性結(jié)腸炎，克羅恩氏病或中風(fēng)誘發(fā)的腦細(xì)胞死亡。
17.權(quán)利要求16的方法，其中所述的免疫炎性疾病是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
18.權(quán)利要求1的方法，其中所述的炎性疾病是自體免疫疾病。
19.權(quán)利要求18的方法，其中所述的自體免疫疾病是哮喘，多發(fā)性硬化，I型糖尿病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，硬皮病，系統(tǒng)性硬化，和斯耶格倫氏疾病綜合征。
20.權(quán)利要求1的方法，其中所述的三環(huán)抗抑郁藥和所述的皮質(zhì)甾類經(jīng)口服、直腸、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮下、吸入、局部、陰道或眼部給藥施用給該患者。
21.一種治療患有炎性疾病的患者或具有發(fā)展為炎性疾病危險(xiǎn)性的患者的方法，該方法包括給所述患者施用藥物(i)氯噻平，哌拉平，氟哌拉平，或二苯并(b，f)(1，4)氧雜氮雜，2-氯-11-(4-甲基-1-哌嗪基)-，一氫氯化物；和(ii)皮質(zhì)甾類，其中所述藥物(i)和(ii)同時(shí)或各自在14天內(nèi)以足以減輕或抑制該患者中的炎癥的量給藥。
22.一種治療患有炎性疾病的患者或具有發(fā)展為炎性疾病危險(xiǎn)性的患者的方法，所述方法包括給該患者施用一種藥物組合物，該組合物含有藥學(xué)可接受載體和共同減輕或抑制該患者炎癥的劑量的藥物(i)阿莫沙平和(ii)強(qiáng)的松龍。
23.權(quán)利要求22的方法，其中藥物(i)在該組合物中是以1-600毫克的量存在。
24.權(quán)利要求23的方法，其中藥物(i)在該組合物中是以100-300毫克的量存在。
25.權(quán)利要求22的方法，其中藥物(ii)在該組合物中是以0.05-200毫克的量存在。
26.權(quán)利要求25的方法，其中藥物(ii)在該組合物中是以0.05-5毫克的量存在。
27.權(quán)利要求26的方法，其中藥物(ii)在該組合物中是以0.1-3毫克的量存在。
28.權(quán)利要求22的方法，其中所述的組合物是經(jīng)口服、直腸、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮下、吸入、局部、陰道或眼部給藥施用給該患者。
29.一種含有藥學(xué)可接受載體和藥物(i)阿莫沙平和(ii)強(qiáng)的松龍的藥物組合物，其中藥物(i)和(ii)分別以當(dāng)共同施用給患有炎性疾病的患者時(shí)抑制或減輕炎癥的量存在。
30.權(quán)利要求29的組合物，其中藥物(i)在該組合物中是以1-600毫克的量存在。
31.權(quán)利要求30的組合物，其中藥物(i)在該組合物中是以100-300毫克的量存在。
32.權(quán)利要求29的組合物，其中藥物(ii)在該組合物中是以0.05-200毫克的量存在。
33.權(quán)利要求32的組合物，其中藥物(ii)在該組合物中是以0.05-5毫克的量存在。
34.權(quán)利要求33的組合物，其中藥物(ii)在該組合物中是以0.1-3毫克的量存在。
35.權(quán)利要求29的組合物，其中所述的組合物配制用于口服、直腸、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮下、吸入、局部、陰道或眼部給藥。
36.一種含有藥物(i)阿莫沙平和(ii)強(qiáng)的松龍的藥物包裝。
37.權(quán)利要求36的藥物包裝，其中藥物(i)和(ii)分開(kāi)且以獨(dú)立劑量配制。
38.權(quán)利要求36的藥物包裝，其中藥物(i)和(ii)一起并以獨(dú)立劑量配制。
39.一種鑒定適用于治療患有炎性疾病的患者的化合物的聯(lián)合形式的方法，該方法包括步驟(a)在試管內(nèi)使免疫細(xì)胞與(i)三環(huán)抗抑郁藥或皮質(zhì)甾類；和(ii)候選化合物接觸，和(b)相對(duì)于與三環(huán)抗抑郁藥或皮質(zhì)甾類接觸但沒(méi)有與候選化合物接觸的細(xì)胞，或與候選化合物接觸但沒(méi)有與三環(huán)抗抑郁藥或皮質(zhì)甾類接觸的細(xì)胞而言測(cè)定該三環(huán)抗抑郁藥或皮質(zhì)甾類和候選化合物的聯(lián)合形式是否降低了該外周血單核細(xì)胞的細(xì)胞因子水平，其中所述細(xì)胞因子水平的降低確定該聯(lián)合形式是適用于治療患有炎性疾病的患者的聯(lián)合形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療患有炎性疾病的患者的方法，該方法通過(guò)同時(shí)或各自在14天內(nèi)以足以減輕或抑制炎癥的量給該患者施用(i)三環(huán)抗抑郁藥(例如阿莫沙平)；和(ii)皮質(zhì)甾類(例如強(qiáng)的松龍)。
文檔編號(hào)A61K31/553GK1553804SQ02817638
公開(kāi)日2004年12月8日 申請(qǐng)日期2002年6月26日 優(yōu)先權(quán)日2001年7月9日
發(fā)明者R·薩基菲奧, R 薩基菲奧, J·馮, 固, N·胡爾斯特, 嵬呷 , P·曼尼瓦薩卡姆, 喬斯特-普里斯, E·R·喬斯特－普里斯, 鎪, G·齊默曼, C·凱斯, A·博里斯 申請(qǐng)人:康賓納特克斯公司