專利名稱：用于治療外陰陰道炎和陰道病的含有抗真菌劑組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及以緩沖的、適合藥用的組合物使用抗真菌劑來治療外陰陰道炎和陰道病的組合物和方法。這些抗真菌劑可由外陰陰道炎患者涂敷于陰道和外陰部，或涂敷在陰道內(nèi)以緩解癥狀，并達到在最佳狀態(tài)下治療外陰陰道炎、陰道念珠菌病和/或細菌陰道病的目的。
背景技術(shù)：
細菌陰道病是菌群發(fā)生了變化，導致菌群改變的原因在大多數(shù)情況下仍不清楚。通常細菌陰道病表示導致乳桿菌減少規(guī)定量的陰道菌群的變化。然而，這些菌群是否代表著所有女子的陰道的正常的遺傳狀態(tài)，這一點難以確定。在非孕婦中治療細菌陰道病時采用的大多數(shù)療法通常短期內(nèi)會有效，但如果進行長期隨訪，則往往是失敗的。盡管人們普遍認為細菌陰道病是一種內(nèi)源性疾病，但也可能是由許多行為因素引起的，例如使用避孕用品和個人衛(wèi)生物品以及生活方式習慣。盡管細菌陰道病不被視為真正的性傳播疾病，但它與有多個性伙伴有關(guān)。因此，越來越需要開發(fā)一種能有效治療細菌陰道病和其它陰道炎的產(chǎn)品。
通常，患者錯誤地認為她們的陰道感染是某種類型的真菌感染，如白色念珠菌，可以使用不需處方但可合法出售的抗真菌藥品來治療。但是，這些不需處方但可合法出售的抗真菌藥品不能有效治療細菌陰道病。細菌陰道病被認為是比念珠菌病更加普遍的慢性病。
因真菌感染而得的外陰陰道炎(外陰陰道念珠菌病或VVC)通常使用將唑類抗真菌劑涂敷在陰道內(nèi)或口服的方法來治療。在陰道內(nèi)涂敷半固體或固體劑型的唑類抗真菌藥物，通常在數(shù)天內(nèi)保持它們在陰道內(nèi)的有效濃度。例如，Odds，F(xiàn).C.和MacDonld，F(xiàn).(英國性病雜志，第57卷第6期，400-401頁，1981年12月)指出，16名年齡在20至27歲之間的健康女性在插入一劑咪康唑陰道藥栓后，其陰道分泌物中的咪康唑能在至少48小時內(nèi)維持可生物檢出的濃度。Daneshmend，T.K.(抗微生物化學療法雜志，第18卷第4期，507-511頁，1986年10月)測量了11名健康女性在使用一劑1200毫克陰道藥栓后72小時內(nèi)血清中咪康唑的濃度。研究發(fā)現(xiàn)，其平均消除半衰期為57小時。因為靜脈內(nèi)給藥后咪康唑的半衰期只有24小時(Janssen，F(xiàn).A.J.和Van Bever，W.F.M.，藥物的藥理學特性和生物化學特性，第2卷，由Goldberg，M.E.主編，美國藥學協(xié)會和藥物科學院出版，336-337頁)，Denshmend通過陰道內(nèi)施藥得到的結(jié)果顯示，陰道內(nèi)涂敷后陰道中余留的咪康唑濃度可持續(xù)5天以上。
唑類抗真菌劑能有效治療白色念珠菌引起的外陰陰道炎，并不需醫(yī)生開處方即可合法購買，因此是配制治療細菌陰道病的產(chǎn)品的良好候選者，特別是咪康唑等在陰道pH環(huán)境下具有活性的化合物。通過增加所選用的唑類化合物的藥效和調(diào)節(jié)環(huán)境至良好狀態(tài)而減緩微生物的生長，本發(fā)明記述了含有緩沖的硝酸咪康唑體系的配方，以治療外陰陰道念珠菌病、細菌陰道病或外陰陰道念珠菌病/細菌陰道病混合感染。
穩(wěn)定狀態(tài)時，在正常陰道中占優(yōu)勢的微生物乳桿菌，通過由陰道糖原生成過氧化氫和乳酸的方式來維持陰道的酸度，從而控制厭氧菌和其它細菌的生長。對于女性，陰道pH值在4-5之間，并伴隨有規(guī)律的月經(jīng)周期，被認為是正常的。細菌陰道病是影響女性的最常見的感染性疾病之一，占癥狀性病例的45％，估計占無癥狀的性活躍的女性的15％。
在臨床上，細菌陰道病是由陰道內(nèi)厭氧微生物數(shù)量的增長，并伴隨乳桿菌數(shù)量的減少而產(chǎn)生的多種微生物的陰道感染。細菌陰道病的診斷是以一些明顯的癥狀為根據(jù)的i)稀薄而均勻的排出物，ii)陰道的pH值升高(＞4.5)，iii)陰道排出物有腥臭氣味，和iv)一些特異的指標a)10％氫氧化鈉(胺)試驗，b)存在線索細胞(clue cells)。目前，只有兩種化合物被用來局部治療細菌陰道病，即含有滅滴靈(MetroGel-Vaginal)或氯潔霉素(Cleocin)的藥品。這兩種化合物被歸為抗菌劑類，滅滴靈同時是一種抗原生動物劑。它們只能通過醫(yī)生處方而得到。因為細菌陰道病不威脅生命，而且難以通過自我診斷作明確判斷，所以患者在治療她們的細菌陰道病時有兩種選擇i)等待數(shù)日，甚至幾個星期，然后去看醫(yī)生，或ii)試用不需醫(yī)生處方即可買到的藥品來自我治療該感染。
女性的自我診斷，甚至醫(yī)生的誤診概率都相當高。盡管使用不需醫(yī)生處方即可買到的抗真菌藥品進行自我治療通常能治愈外陰陰道念珠菌病，但對于患混合性感染的女性，可能會繼續(xù)有癥狀出現(xiàn)。而且，這種并存的感染需要臨床和實驗室測定，并通過了解該病癥的全面情況來進行治療。
此外，研究發(fā)現(xiàn)，大約15-30％感染細菌陰道病的病人會因正常陰道菌群的改變而在治療后患上外陰陰道念珠菌病。因此，人們非常希望能采用一種藥品或治療方法來治愈細菌陰道病，并能防止隨后的真菌過度生長。
例如，在美國5,536,743號專利中描述了緩沖的、含有滅滴靈的組合物。然而，這種組合物只能治療細菌陰道病，因為滅滴靈只能有效地抗細菌，而不能抗真菌。
己知陰道的pH是維持健康的陰道生態(tài)系統(tǒng)的一個重要因素。意大利米蘭Mipharm S.p.A.公司的Milani等進行了研究，比較聚卡波非(一種凝膠形態(tài)的生物粘合聚合物)和一種酸性陰道灌洗液對那些陰道pH值大于4.5和疑有細菌陰道病的女性恢復生理性陰道pH的效果。在聚卡波非這組實驗中，細菌陰道病的物理和微生物學體征都得到改善。與酸性陰道灌洗液相比，聚卡波非陰道凝膠能使升高的陰道pH值降低至生理水平達80小時，并能降低那些疑有細菌陰道病的女性的陰道pH值。然而，上述研究沒有提出任何治療混合性感染的方法。
在墨西哥出售的用來治療外陰陰道念珠菌病和細菌陰道病的藥品含有兩種活性成分，即伊曲康唑和塞克硝唑。這種藥品因此含有一種治療真菌感染的活性成分和一種治療細菌感染的活性成分。復方抗菌藥品不適合治療序貫感染，即細菌感染后的真菌感染或在治療陰道感染時暴露的混合感染中的真菌感染。這種治療方法也需要使用含有兩種活性組分的藥品，用來治療上述兩種感染。
因此，現(xiàn)在需要一種不需醫(yī)生處方即可合法購買的，能有效治療外陰陰道炎和細菌陰道病的并存感染或序貫感染的藥品。
發(fā)明概要本發(fā)明的組合物和方法涉及含有抗真菌化合物、活性緩沖化合物和一種藥用的合適載體的藥品。本發(fā)明所述的緩沖的組合物預期在治療真菌感染和細菌陰道病時都有驚人的療效。在本發(fā)明中，組合物的pH值宜維持在大約2.5-5.5之間。該pH值維持在大約3-5之間更好，最好是在大約3-4.5之間。在這個pH值范圍里，抗真菌化合物和陰道環(huán)境都有助于治療并預防真菌和細菌陰道病感染。
可在使用陰道內(nèi)抗真菌藥進行治療之前、期間或之后將本發(fā)明所述的緩沖劑涂敷在陰道內(nèi)。該緩沖劑可與抗真菌的唑類在同一組合物中同時施藥，也可作為兩種不同的組合物進行施藥，但基本上同時使用。此外，分離的抗真菌唑類組合物和緩沖組合物也可先后施藥，且中間間隔一段時間。
因此，本發(fā)明所述的組合物和方法涉及用來治療外陰陰道炎和陰道病的組合物，它含有a)抗真菌劑；和b)緩沖體系。在更好的情況下，本發(fā)明涉及用來治療外陰陰道炎和陰道病的組合物，它含有a)唑類抗真菌劑；和b)由葡糖酸δ內(nèi)酯組成的緩沖系統(tǒng)。本發(fā)明還涉及用來治療外陰陰道炎和陰道病的組合物，它含有a)唑類抗真菌劑；b)緩沖體系；c)藥用的合適載體。本發(fā)明所述的組合物涉及用來治療外陰陰道炎和陰道病的乳液狀組合物，它含有a)唑類抗真菌劑；b)由葡糖酸δ內(nèi)酯組成的緩沖系統(tǒng)；c)卡波姆；和d)藥用的合適載體；還涉及用來治療外陰陰道炎和陰道病的凝膠狀組合物，它含有a)唑類抗真菌劑；b)緩沖體系；c)聚乙二醇；和d)藥用的合適載體。本發(fā)明的組合物和方法也涉及用來治療外陰陰道炎和陰道病的兩相組合物，它包括a)由唑類抗真菌劑和親脂性藥用的合適載體組成的親脂相或油相；和b)由緩沖體系和親水性藥用的合適載體組成的親水相或水相。本發(fā)明所述的方法是將含有唑類抗真菌劑和緩沖體系的組合物涂敷于陰道黏膜上，用來治療外陰陰道炎和陰道病。根據(jù)上文所述的組合物和方法，本發(fā)明的組合物和方法也可用于防止，即預防陰道感染。本發(fā)明所述的組合物也可包裝成含本發(fā)明組合物的藥盒，或包裝成含有抗刺激、消炎、潤滑、抗真菌、防腐之類成分的緩和病痛的組合物的藥盒，將組合物涂敷在外陰皮膚上，起到減輕剌激、保護皮膚和促進其愈合的目的。
令人驚訝的是，盡管硝酸咪康唑通常不能有效地抗細菌感染，但我們發(fā)現(xiàn)經(jīng)緩沖劑處理后，它的抗細菌活性明顯增強。
最佳實施方案的詳細敘述需要以藥劑的形式使用活性抗真菌化合物來治療念珠菌病之類的陰道感染。已知唑類類抗真菌劑能有效治療陰道真菌感染，而不會破壞陰道菌群。許多被證實具有治療真菌感染性能的唑類化合物已被批準作為不需醫(yī)生處方即可合法購買的藥品使用，其中包括含有硝酸咪康唑、噻康唑或克霉唑之類的陰道用藥品。因此，上述唑類藥品的安全性已得到確認。
這些唑類藥品能有效治療外陰陰道念珠菌病，它們在治療細菌陰道病相關(guān)的感染時的藥效未得到證實，但通過使用本發(fā)明所述的組合物，可從這些安全有效的抗真菌化合物研發(fā)一種能治療諸如念珠菌病、細菌陰道病和混合感染的陰道感染的有效藥劑。
本發(fā)明所述的新組合物將具有抗真菌效能的抗真菌成分與緩沖載體組合物相結(jié)合，維持或調(diào)節(jié)陰道的pH值至健康水平，并可治療和預防外陰陰道炎和細菌陰道病。
用來治療外陰陰道炎和細菌陰道病的抗真菌劑的劑量取決于使用的抗真菌活性成分和它的藥效。能有效治療感染的抗真菌成分的用量稱為“治療有效量”。在本發(fā)明的組合物中的抗真菌劑應(yīng)以治療有效量存在。較好是上述抗真菌劑的量與組合物的重量之比大約為0.01％～90％。更好的情況是，它們的用量與組合物的重量之比約為0.1％～50％，重量之比約在0.4％～10％的范圍內(nèi)最好。緩沖劑在組合物中的重量比應(yīng)在約0.01％～50％的范圍內(nèi)，其重量比在約0.1％～20％之間更好，最好在約1％～5％的重量比范圍內(nèi)。
在本發(fā)明所述的組合物中可含有其它化合物，例如水、抗氧化劑、螯合劑、防腐劑、油、蠟、表面活性劑、乳化劑、粘度增強劑、溶劑、增濕劑、增溶劑和生物粘合劑/粘膜粘合劑等。上述組分的相對含量可根據(jù)組合物(包括霜劑、軟膏劑、蠟狀栓劑、明膠膠囊、無水聚合物栓劑等)所需的特性和稠度來改變。
在本發(fā)明的組合物中，緩沖的劑型較好是乳劑、凝膠劑或兩相劑型。在本發(fā)明的組合物中最好存在親水相，它作為組合物中可被緩沖的部分。含有活性抗真菌化合物的三種首選的緩沖劑型設(shè)計如下i)親水霜劑，ii)親水凝膠，和iii)用來治療上文所述的陰道感染的兩相劑型設(shè)計。這將使患者想要直接并有效治療陰道感染的愿望容易實現(xiàn)。每種配方的緩沖容量設(shè)計為能將pH值維持在大約3至5.5的水平上，最好是在大約3至4.5之間。
可在陰道內(nèi)使用抗真菌藥進行治療之前、期間或之后將本發(fā)明所述的緩沖劑涂敷在陰道內(nèi)。該緩沖劑可與抗真菌唑類放在同一組合物中同時施藥，也可制作成兩種不同的獨立組合物，但同時或基本上同時施藥。例如，緩沖劑可直接混合在含有抗真菌唑類化合物的組合物中。在這種情況下，緩沖劑和唑類化合物適于在涂敷過程中對病人同時施藥。上述緩沖劑可包裹在陰道栓劑(例如蠟狀或脂肪酸基質(zhì)抗真菌陰道栓劑)的外表面，或?qū)⑵浒诤锌拐婢幍拿髂z膠囊栓劑的外表面。該緩沖劑也可混合到抗真菌明膠膠囊的壁中。
或者，抗真菌唑類組合物和緩沖組合物可分別選后施藥，中間間隔一段時間。例如，用于陰道內(nèi)涂敷的組合物可只含有緩沖劑，而不含任何抗真菌唑類。當在陰道內(nèi)存在抗真菌唑類時，可將上述緩沖組合物在陰道內(nèi)給藥。陰道內(nèi)已有的唑類來自較早進行的陰道內(nèi)或口服抗真菌治療，緩沖劑的作用是延長預期的療效，以治療或預防細菌陰道病的發(fā)生。因為在陰道內(nèi)或口服給予抗真菌唑類后，它在陰道組織和粘液中通常持續(xù)數(shù)天，所以較好在使用抗真菌藥后的不到一小時至大約10天之內(nèi)使用上述緩沖組合物，在大約8小時至7天之內(nèi)施藥更好，最好是在大約12小時到5天之內(nèi)給予。
給藥方案需根據(jù)在本發(fā)明的產(chǎn)品中使用的特殊抗真菌劑而變化。需要采用治療有效量或預防有效量。
或者，可在陰道內(nèi)給予抗真菌治療之前和/或之后使用上述緩沖劑。緩沖劑最好與某些聚合物或生物聚合物粘膜粘合材料相混合，例如明膠、脫乙酰殼多糖及其衍生物、親水纖維素(適宜采用羥烷基纖維素，最好采用羥甲基纖維素、羥乙基纖維素等，或上述物質(zhì)的混合物)和聚丙烯酸酯-聚丙烯酸聚合物(例如卡波姆等)。含有緩沖劑的親水聚合物可作為凝膠狀組合物中的膠凝劑使用，或作為乳劑型組合物中的粘度增強劑使用，例如在水包油霜劑中。
或者，含有緩沖劑的親水聚合物可在含有抗真菌藥的親脂組合物(例如，軟膏劑，蠟/脂肪酸栓劑或油包水乳劑)中懸浮。向陰道內(nèi)涂敷時，親水聚合物會附著在陰道粘膜上，從而將陰道pH值長時間維持在適宜的pH范圍內(nèi)，甚至維持到抗真菌藥從陰道中消除或排出后很久。長時期維持陰道酸度可確?；謴徒】档奈⑸锞?如乳桿菌)，并抑制陰道內(nèi)的機會性致病酵母(如白色念珠菌)。
本發(fā)明的組合物應(yīng)含有至少一種活性抗真菌成分，宜采用唑類抗真菌成分，使用諸如硝酸咪康唑、特康唑、布康唑、伊曲康唑、伏立康唑、酮康唑、益康唑、噻康唑、氟康唑、波康唑(posconazole)、利氟康唑(ravuconazole)、克霉唑之類的化合物更好。
本發(fā)明的組合物也應(yīng)包含至少一種緩沖體系或緩沖劑。該緩沖劑最好是葡糖酸δ內(nèi)酯(“GDL”)。GDL是葡糖酸的中性環(huán)狀酯。當將其加入到水溶液中時，GDL會迅速溶解，接著緩慢水解為葡糖酸。其它緩沖體系或緩沖劑也可用于本發(fā)明的組合物和方法中。本文中使用的術(shù)語“緩沖體系”或“緩沖劑”是指在水溶液中，當向其中加入酸或堿時，能防止該溶液發(fā)生pH值(或氫離子濃度)較大變化的溶質(zhì)。在本發(fā)明的組合物和方法中使用的溶質(zhì)最好是維持溶液的pH值在大約pH＝4的初始緩沖pH值附近。一般而言，本發(fā)明的組合物中使用的緩沖劑包括任何一種生理上合適的有機酸及其相應(yīng)的鹽，可為液體或固體形態(tài)(取決于藥物使用形式)。這些緩沖劑的pKa值最好在大約pH3至pH5之間。在本發(fā)明所述的組合物和方法中使用的緩沖劑最好是，但不限于乙酸、富馬酸、乳酸、檸檬酸、丙酸、蘋果酸、琥珀酸、葡糖酸、抗壞血酸、酒石酸等。根據(jù)本發(fā)明，含有諸如羧酸或氨基等可電離的官能團，并具有緩沖容量的聚合物也可用作聚合物緩沖劑。在本發(fā)明的組合物和方法中使用的聚合物緩沖劑最好是卡波姆或卡波泊(美國俄亥俄州阿克倫城B.F.Goodrich公司出品)和羧甲基纖維素。實際上，在本發(fā)明的組合物和方法中，在局部敷藥處能達到最佳pH值范圍的任何藥用緩沖體系都可使用。
根據(jù)本發(fā)明所述，適合陰道應(yīng)用的、能得到預期治療效果，并達到陰道的生理pH值大約4的唑類的緩沖配方可配制成任何方便使用的不流動的劑型，它包括，但不止是懸浮劑，乳劑，透明的和不透明的凝膠劑，諸如軟膏、糊劑、水包油乳劑、含有固體內(nèi)相的半固體乳劑、含有液體內(nèi)相的半固體乳劑、陰道藥栓、插入片、軟或硬明膠膠囊等半固體體系。
令人吃驚地是，研究發(fā)現(xiàn)，含有唑類抗真菌劑硝酸咪康唑的緩沖凝膠，比不含有硝酸咪康唑的緩沖凝膠，其在大約3至5.5的pH范圍內(nèi)具有更好的緩沖容量。
本發(fā)明的組合物也可含有其它成分，以便在乳劑、凝膠或兩相系統(tǒng)中使用。例如，乳劑中可含有表面活性劑、油類、濕潤劑、pH調(diào)節(jié)劑、蠟、聚合物載體、生物粘合劑和水。除活性成分和緩沖體系以外，凝膠配方中可包含油類、濕潤劑、卡波姆、纖維素、聚二醇和水。組合物可制成霜劑、栓劑、凝膠或兩相組合物。
本發(fā)明所述的兩相劑型不限于用作藥用的合適載體的物質(zhì)的特性或物態(tài)。例如，含有抗真菌唑類的一相可以是固體(例如由蠟基質(zhì)、脂肪基質(zhì)、聚合物基質(zhì)組成的或凍干的栓劑)或半固體(例如乳劑、水包油霜劑、油包水霜劑、軟膏或含水凝膠)。同樣地，含有緩沖劑的一相也可以是不同藥物劑型的固體或半固體。上述兩相劑型的例子是在給藥系統(tǒng)中最好含有緩沖凝膠和疏水性抗真菌成分。該組合物的疏水相在給藥系統(tǒng)中是穩(wěn)定的，并設(shè)計成在人的體溫時會熔融。使用能夠插入陰道腔內(nèi)的涂藥器，將上述劑型的兩相一起給藥。其優(yōu)點是兩相劑型可使抗真菌藥物和緩沖凝膠同時輸送進陰道，從而能治療真菌和細菌感染。該抗真菌藥物可治療真菌感染，而緩沖凝膠可降低并維持陰道的pH值在健康范圍內(nèi)。
使用本發(fā)明所述的組合物的方法能治療真菌性外陰陰道炎和細菌陰道病。通過插入陰道腔的方式可給予上述組合物。在本發(fā)明的組合物中最好含有生物粘合劑成分，以使活性成分和緩沖體系保持在陰道的粘膜上。可每日一次反復涂敷上述組合物，直到任何反常菌群(包括真菌和/或細菌)被破壞，且感染痊愈。
以下實施例僅對本發(fā)明的幾個可能的組合物作說明。盡管在以下實施例中所有的組合物都含有能在陰道內(nèi)共同施藥的抗真菌唑類和緩沖劑，但可用純凈水代替上述組合物中的抗真菌唑類，從而象前文所述的那樣，形成緩沖的組合物進行序貫給藥。以下實施例僅是舉例說明，而不限定本發(fā)明的組合物和方法。
實施例#1親水霜劑
可采用以下步驟制備本實施例所述的組合物1.向容器內(nèi)加入水和丙二醇。在使用槳式攪拌機進行低速混合的情況下，將該容器加熱到大約70-75℃。當該混合液達到上述所需溫度時，在連續(xù)攪拌的條件下加入苯甲酸。苯甲酸一溶解，就向其中加入氫氧化鉀，并混合至溶解。
2.氫氧化鉀溶解后，在混合物溫度維持在70-75℃的條件下，加入聚山梨酯60，并攪拌大約1分鐘。然后停止攪拌，加入肉豆蔻酸異丙酯、十六烷醇和十八烷醇。在大約70-75℃的溫度下再次攪拌上述混合物，直到容器中所有的成分完全分散。
3.將上述容器撤離熱源，使用均化器繼續(xù)混合大約2分鐘。均化后，使用槳式攪拌機攪拌上述混合物，同時將該混合物冷卻至大約40℃。
4.當混合物的溫度到達大約40℃時，混合下向容器中加入硝酸咪康唑。加入硝酸咪康唑后，向容器中加入葡糖酸δ內(nèi)酯，并將該混合物均質(zhì)化處理大約4分鐘，或直到硝酸咪康唑完全分散為止。均化后，使用槳式攪拌機連續(xù)攪拌大約5分鐘。
實施例#2緩沖霜劑安慰劑
可采用以下步驟制備本實施例所述的組合物1.向容器內(nèi)加入水和丙二醇。在使用槳式攪拌機進行低速混合的情況下，將該容器加熱到大約70-75℃。當該混合液達到上述所需溫度時，在連續(xù)攪拌的條件下加入苯甲酸。苯甲酸一溶解，就向其中加入氫氧化鉀，并混合至溶解。
2.氫氧化鉀溶解后，在混合物溫度維持在70-75℃的條件下，加入聚山梨酯60，并攪拌大約1分鐘。然后停止攪拌，加入肉豆蔻酸異丙酯、十六烷醇和十八烷醇。在大約70-75℃的溫度下再次攪拌上述混合物，直到容器中所有的成分完全分散。
3.將上述容器撤離熱源，使用均化器繼續(xù)混合大約2分鐘。均化后，使用槳式攪拌機攪拌上述混合物，同時將該混合物冷卻至大約40℃。
4.當混合物的溫度到達約40℃時，如果需要，向容器內(nèi)加入葡糖酸δ內(nèi)酯，并將上述混合物均質(zhì)化處理大約4分鐘，或直到硝酸咪康唑完全分散為止。均化后，使用槳式攪拌機連續(xù)攪拌大約5分鐘。
實施例#3僅含單一卡波姆的凝膠
可采用以下步驟制備本實施例所述的組合物1.將卡波姆974P加入到水中，在室溫下，使用諸如均化器的高速攪拌器進行攪拌。
2.然后加入氯化鉀、EDTA和氫氧化鈉，并使用諸如槳式攪拌機的低速攪拌器進行攪拌。
3.為制備含有唑類化合物的藥劑，可向上述混合物中加入硝酸咪康唑，并使用均化器和攪拌槳進行攪拌，從而使硝酸咪康唑在藥劑中均勻分散。
實施例#4含有多種卡波姆的凝膠
可采用以下步驟制備本實施例所述的組合物1.向合適的容器內(nèi)加入甘油、礦物油(或聚乙二醇400)、蒸餾的甘油單酸酯(例如Myverol)和山梨酸，并加熱到65-70℃。然后向上述容器中加入卡波姆971和974，并混合。
2.單獨將水加熱至55-60℃，然后加入到步驟(1)的混合物中。攪拌大約3分鐘，然后向上述容器中加入硝酸咪康唑。
3.使用槳式攪拌機對混合物進行攪拌，同時將混合物的溫度冷卻至大約45℃。當該溫度達到大約45℃時，使用均化器對上述混合物進行大約2分鐘的混合。
4.將混合方式轉(zhuǎn)換回槳式攪拌機攪拌，同時將混合物的溫度冷卻至室溫。
實施例#5羧甲基纖維素凝膠
可采用以下步驟制備本實施例所述的組合物
1.將羥乙基纖維素加入到水中，在室溫下，使用諸如均化器的高速攪拌器進行攪拌。
2.然后加入甘油、羥苯甲酸甲酯、氫氧化鈉和葡糖酸δ內(nèi)酯，使用諸如槳式攪拌機的低速攪拌器進行攪拌。
3.向上述混合物中加入硝酸咪康唑，并使用均化器和攪拌槳進行攪拌，從而使硝酸咪康唑在藥劑中均勻分散。
實施例#6粘合劑/疏水栓劑
可采用以下步驟制備本實施例所述的組合物1.在合適的容器內(nèi)，使Wecobee M和Wecobee FS(均為硬脂基質(zhì)，主要由高級飽和脂肪酸的甘油三酯和不同比例的甘油單酯和甘油二酯的混合物組成)在50-60℃的溫度下熔化。在適當混合的條件下，向上述容器中加入黃原膠、膠態(tài)二氧化硅和羧基甲基纖維素鈉7HF。使用均化器連續(xù)攪拌大約2分鐘，或直到添加物完全分散。
2.用均化器進行混合，同時向上述混合物中加入硝酸咪康唑。然后用低速攪拌器進行混合，同時將混合物的溫度冷卻至室溫。該混合物在小于35℃的溫度下固化。
實施例#7緩沖容量為測定本發(fā)明組合物的緩沖容量，可采用以下步驟。
在實施例1-5中，用于改變樣品pH值的0.1N氫氧化鈉的量采用滴定方法進行測定。在下列圖表中，以摩爾當量為單位來表示加入到樣品中的氫氧化鈉溶液的量。
在實施例6中制得的樣品在3.0-5.5的pH范圍內(nèi)沒有緩沖容量，其設(shè)計是用于安慰劑緩沖凝膠(實施例5)以一個涂藥器一起給藥。這是上文所述兩相給藥系統(tǒng)的一個例子。將使用緩沖的Metrogel-Vaginal(由明尼蘇達州明尼阿波利斯3M公司制)治療細菌陰道病得到的數(shù)據(jù)供與圖中的數(shù)據(jù)作比較。


圖1和2顯示上文實施例1和2中所述的霜劑配方的緩沖容量。使用Monistat 3陰道霜劑作為對照。如圖所示，實施例1A、1B、1C、1D和2B具有較好的緩沖容量，而比較例2A和Monistat 3陰道霜劑則沒有緩沖容量。實施例2A中既不含有緩沖劑，也不含有卡波姆。通過添加1.8％或更高濃度的葡糖酸δ內(nèi)酯，或添加葡糖酸δ內(nèi)酯和卡波姆的混合物，可顯著提高霜劑基質(zhì)的緩沖容量。與安慰劑相比較(實施例1C與實施例2B相比較)，可發(fā)現(xiàn)含有硝酸咪康唑的配方也具有較好的緩沖容量。該結(jié)果令人驚奇地顯示出硝酸咪康唑能增強上文所述霜劑配方的緩沖容量。
圖3和4顯示的是實施例3和4的緩沖凝膠配方，并與治療細菌陰道病的商用配方——Metrogel-Vaginal作比較。配方3A、4B和4D中不含有硝酸咪康唑，其緩沖容量與其它含有硝酸咪康唑的配方(3B、4A和4C)相比較小。
圖5為實施例5中的緩沖凝膠配方。配方5B中不含有硝酸咪康唑，其緩沖容量與其它實施例相比較小。
將本發(fā)明中所述的最佳緩沖配方——配方1C和4C進行比較，并與用于局部治療細菌陰道病的，含有滅滴靈的商用配方——Metrogel-Vaginal和用于局部治療外陰陰道念珠菌病的，含有硝酸咪康唑的商用配方——Monistat 3霜進行對比，其結(jié)果顯示在圖6中。如圖所示，本發(fā)明所述的組合物比商用藥劑具有更大的緩沖容量，從而能更好地維持健康的pH值。
實施例#8對陰道病微生物抗細菌活性的體外評估本發(fā)明還研究了選用的陰道病厭氧菌在上文所述配方和經(jīng)補充的布魯氏菌培養(yǎng)液的混合物中的存活能力。補充維生素K和氯高鐵血紅素的布魯氏菌培養(yǎng)液可制備成兩倍濃度，以便采用本發(fā)明所述的制劑對其進行稀釋。從冰箱中取出待研究的微生物，至少進行兩次傳代培養(yǎng)，以確保其純度和良好的生長。采用以下步驟來進行體外評估方法Steer復制基因(replicator)測定法(存活時間以小時為單位)1.將1克試樣與9毫升二甲基亞砜(“DMSO”)相混合。先將一種制劑在40-46℃下熔解，完全混勻，然后溶解在DMSO中。制備18毫升上述混合液，從中取出少量液體，測定并紀錄其pH值。將該混合液放入一箱內(nèi)，并讓其在厭氧的條件下放置至少2個小時。
2.在上述箱內(nèi)，在兩倍濃度經(jīng)補充的布魯氏菌培養(yǎng)液中配制每種厭氧微生物懸浮液使其濁度與1號麥克法蘭當量濁度標準品相當(～3×108菌落形成單位/毫升)。向Steer復制基因加樣孔中加入0.5毫升上述懸液。壓制一份BBA(布魯氏菌血瓊脂)平板作為生長前的對照。
3.采用多道移液器，向每一加樣孔中的培養(yǎng)液添加0.5毫升的上述霜劑溶液。通過上下吸移使其完全混合。當完成上述步驟時，記錄形成完整的復制基因頭(head)需要多長時間。(最初的加樣孔比最后的加樣孔將有更長的接觸時間)。壓制的BBA平板作為“0”時刻。對每一份霜劑使用一份Steer復制基因頭。在該試驗進程的每一天，都要采用微生物懸液、布魯氏菌培養(yǎng)液和DMSO(1+9)(不加霜劑)來配制一份復制基因的對照。
4.在加樣孔中用尖頭物(Prong)培養(yǎng)細菌。
5.每一小時壓制一份BBA，并在平板上標明以小時為單位計量的時間。細菌培養(yǎng)溫度在36℃。
6.繼續(xù)培養(yǎng)至24小時。
7.在細菌培養(yǎng)72小時之后檢查已壓制的平板，并記錄是否有細菌生長，或無生長，或記述生長的類型，即幾乎無菌落、模糊生長(可能表明有受損傷的細胞)等。
8.最終報告是以小時為單位記錄的有機體在下表I中所示的每種制劑樣品中的存活時間。
對于所研究的唑類化合物，咪康唑、特康唑和氟康唑是治療外陰陰道念珠菌病的被認可的唑類類藥物。滅滴靈和替硝唑是人們已知的，能有效治療細菌陰道病的化合物。然而，令人意想不到的是，從本次唑類化合物的體外評估結(jié)果可以看出，咪康唑在抗細菌陰道病微生物方面，實際比特康唑和氟康唑具有更好的活性。體外評估結(jié)果唑類化合物的活性——表I表中顯示的最小抑菌濃度的范圍是針對每一生物體，而不是每列。
下表II中顯示上文提及的抗細菌陰道病生物體的藥劑的活性。在所研究的配方中，實施例2A、2B、4B和4D中不含有硝酸咪康唑。實施例2A的緩沖容量最低，其抗所研究的生物體的藥效最差。實施例2B是實施例1C的緩沖安慰劑，實施例4D是實施例4C的緩沖安慰劑。通過向?qū)嵤├?C中添加硝酸咪康唑，可顯著提高抗所研究的生物體的活性。通過向?qū)嵤├?D中添加硝酸咪康唑可得到同樣的效果。
體外評估結(jié)果本發(fā)明的藥劑的活性——表II
實施例#9對兩種緩沖咪康唑陰道藥劑的初步臨床研究結(jié)果進行II斯體內(nèi)初步研究，是為了估測兩種首選的緩沖(4％)硝酸咪康唑配方(原型試樣1#和2#)，與MetroGel-Vaginal凝膠相比較經(jīng)陰道內(nèi)施藥治療細菌陰道病的治療效果。所有藥品均每日敷用一次，共持續(xù)5天。該初步研究的藥效參數(shù)是治療治愈率(包括臨床和微生物學治愈)，臨床治愈(癥狀和體征緩解)和微生物學治愈(Nugent評分等于3或更小)。在使用初次劑量后，于預定的21-30天內(nèi)門診觀察到的治療、臨床和微生物學治愈率，硝酸咪康唑緩沖霜劑和MetroGel-Vaginal相似。因此連續(xù)敷用5天緩沖咪康唑霜產(chǎn)品，能有效治療細菌陰道病。50-60％的咪康唑治療病例和21％的滅滴靈治療病例會引發(fā)外陰陰道的不良反應(yīng)，大多數(shù)不良反應(yīng)屬輕度或中度。
原型試樣1#緩沖硝酸咪康唑陰道霜劑
原型試樣2#緩沖硝酸咪康唑陰道凝膠
權(quán)利要求
1.可同時治療外陰陰道炎和陰道病的組合物，它含有a)治療有效量的抗真菌劑；和b)緩沖體系，它能將涂敷了所述組合物的受感染部位的pH值維持在大約2.5-5.5之間。
2.可同時治療外陰陰道炎和陰道病的組合物，它含有a)唑類抗真菌劑；和b)緩沖體系，它包含選自葡糖酸δ內(nèi)酯、乙酸、富馬酸、乳酸、檸檬酸、丙酸、蘋果酸、琥珀酸、葡糖酸、抗壞血酸和酒石酸的緩沖劑。
3.用于治療外陰陰道炎和陰道病的組合物，它含有a)治療有效量的唑類抗真菌劑；b)緩沖體系；c)藥用的合適載體。
4.用于治療外陰陰道炎和陰道病的乳液狀組合物，它含有a)治療有效量的唑類抗真菌劑；b)由葡糖酸δ內(nèi)酯組成的緩沖體系；c)卡波姆；和d)藥用的合適載體。
5.用于治療外陰陰道炎和陰道病的凝膠狀組合物，它含有a)治療有效量的唑類抗真菌劑；b)緩沖體系；c)聚乙二醇；和d)藥用的合適載體。
6.用于治療外陰陰道炎和陰道病的兩相組合物，它含有a)由唑類抗真菌劑和油組成的油相；和b)由緩沖體系和水組成的水相；和c)藥用的合適載體。
7.治療外陰陰道炎和陰道病的方法，所述方法包括將由唑類抗真菌劑和緩沖體系組成的組合物施加到粘膜。
8.權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述緩沖體系能維持pH值在大約3-5之間。
9.權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述緩沖體系能維持pH值在大約3-4.5之間。
10.權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述粘膜為陰道粘膜。
11.權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述粘膜為頰粘膜。
12.用于預防外陰陰道炎和陰道病的組合物，它含有a)治療有效量的抗真菌劑；和b)緩沖體系，它能將涂敷了所述組合物的受感染部位的pH值維持在大約2.5-5.5之間。
13.用于預防外陰陰道炎和陰道病的組合物，它含有a)唑類抗真菌劑；和b)緩沖體系，它包含選自葡糖酸δ內(nèi)酯、乙酸、富馬酸、乳酸、檸檬酸、丙酸、蘋果酸、琥珀酸、葡糖酸、抗壞血酸和酒石酸的緩沖劑。
14.用于治療外陰陰道炎和陰道病的組合物，它含有a)治療有效量的唑類抗真菌劑；b)緩沖體系；c)藥用的合適載體。
15.用于預防外陰陰道炎和陰道病的乳液狀組合物，它含有a)治療有效量的唑類抗真菌劑；b)由葡糖酸δ內(nèi)酯組成的緩沖體系；c)卡波姆；和d)藥用的合適載體。
16.用于預防外陰陰道炎和陰道病的凝膠狀組合物，它含有a)治療有效量的唑類抗真菌劑；b)緩沖體系；c)聚乙二醇；和d)藥用的合適載體。
17.用來預防外陰陰道炎和陰道病的方法，所述方法包括將權(quán)利要求1所述具有預防有效量的組合物涂敷于外陰或陰道。
18.權(quán)利要求17所述的方法，其特征在于，將權(quán)利要求5所述的組合物涂敷于陰道或外陰。
19.用于治療外陰陰道炎和陰道病的藥盒，它包含權(quán)利要求1所述的組合物和用于緩解受刺激的皮膚的組合物。
20.用于治療或預防外陰陰道炎或陰道病的方法，所述方法包括將有預防或抗微生物有效量的權(quán)利要求1所述包含至少一種抗微生物活性成分的組合物涂敷在外陰或陰道處，隨后，進行第二次敷藥，即涂敷包含一種或多種緩沖劑的第二種組合物。
21.權(quán)利要求20所述的方法，其特征在于，所述第二種組合物可進一步包括一種或多種抗微生物活性成分。
全文摘要
本發(fā)明涉及治療外陰陰道炎和陰道病的組合物和方法。本發(fā)明的組合物含有抗真菌劑和緩沖體系。當在病人的陰道施用該緩沖體系時，可維持陰道的pH值，從而得到促進合適菌群生長的有益環(huán)境。在本發(fā)明的組合物中使用的抗真菌劑包括唑類抗真菌劑。緩沖體系包括葡糖酸δ內(nèi)酯。
文檔編號A61P31/10GK1522145SQ02813086
公開日2004年8月18日 申請日期2002年4月24日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月1日
發(fā)明者S·Y·林, L·L·維爾利, H·泰休, S·應(yīng), S Y 林, 維爾利 申請人:麥克內(nèi)爾-Ppc股份有限公司