專利名稱：含有青蒿提取物的醫(yī)療外用制品的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及到由天然植物青蒿(Artemisia anua L.)的提取物為組成成分的外用制品的新用途，具體地說，是用于治療痤瘡(粉刺)的新醫(yī)藥用途及對面部皮膚的新保健功效。
背景技術：
痤瘡(青春痘)為常見的慢性皮囊皮脂腺炎癥性皮膚病，發(fā)病率高，90％以上青春期男女可有不同程度的皮損，15％病情較重需要治療，嚴重者可引起毀容。所以痤瘡治療一直是皮膚醫(yī)療與保健的熱門課題之一。目前認為痤瘡的發(fā)生和皮膚內的雄激素代謝亢進有關，國外用雄激素拮抗劑治療痤瘡的報道不斷增多，國內也有類似報道，但效果尚不滿意；第二，痤瘡丙酸桿菌等微生物的侵入，使皮脂分解形成脂酸，刺激皮膚產(chǎn)生各種皮疹，微生物刺激毛囊上皮增生及角化過度，并堵塞毛囊口形成痤瘡；另外，痤瘡是患者對真皮內異物的一種排斥反應，T淋巴細胞介導的遲發(fā)型過敏反應可能參與痤瘡的致炎，也有報道螨蟲對痤瘡有一定相關性，但并非主要因素。
因此治療痤瘡的藥物應該具有抑制皮脂腺，抑制以痤瘡丙酸桿菌、金黃色葡萄球菌等致炎微生物的生長，減少皮脂的分泌，減少毛囊管腔的角化堆積以及消散炎癥作用。
目前常用治療方法有(1)局部治療，如搽5％的硫磺白色洗劑、四環(huán)素軟膏、或10％過氧化二苯甲酰凝膠等，(2)口服抗生素類(如紅霉素、甲硝唑等)、抗雄激素類藥(復方炔諾酮等)和維生素B族。療效均不夠理想。

發(fā)明內容
將本發(fā)明所述的青蒿提取物用于痤瘡的治療、用于抑制痤瘡丙酸桿菌等相關致炎微生物，有針對性地開展治療痤瘡的新醫(yī)藥用途及對面部護膚的新保健功效的開發(fā)，本次公開的本發(fā)明屬于首次。本發(fā)明的從青蒿提取物新外用制品的制造到藥理毒理和臨床研究均由發(fā)明人完成。文獻和市場尚未見有利用青蒿提取物作為活性成分開發(fā)治療痤瘡的中藥制劑和護膚化妝品。
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有的藥品或化妝品存在的局限性(如使用激素、化學藥物帶來的副作用)和療效欠佳，為社會提供一種具有清熱解毒、消癤止痛功效，療程短、療效好、無毒副作用、經(jīng)濟實惠的含有青蒿提取物的醫(yī)療外用制品。
本發(fā)明的目的是通過制造含有青蒿提取物的具有醫(yī)藥功效的外用制品來實現(xiàn)的本發(fā)明所述的青蒿的提取物是青蒿地上部分提取的揮發(fā)油與青蒿地上部分的有機溶劑提取物或二氧化碳超臨界提取物以任意重量比例構成。本發(fā)明所述的外用制品是指青蒿的提取物加入輔料，按照常規(guī)或特殊工藝制成的符合制劑要求的外用藥物劑型，以及護膚化妝品。包括搽劑、乳劑、凝膠劑、乳膏劑、貼劑、膜劑、霜劑等。本發(fā)明所述的常規(guī)工藝是指制備上述藥物劑型或化妝品的常規(guī)工藝；本發(fā)明所述的特殊工藝是指用于制備具有納米尺寸(10～200nm)和200～1000nm以下尺寸微粒的的上述藥物劑型或化妝品的特殊工藝。本外用制劑具有清熱解毒、消癤止痛功效。經(jīng)藥理試驗發(fā)現(xiàn)具有顯著的抑制細菌(尤其是引起痤瘡的致病菌痤瘡丙酸桿菌、金黃色葡萄球菌和糠秕孢子菌)生長的作用；經(jīng)臨床驗證可用于痤瘡、癤腫(化膿性皮炎)的治療，同時可用于面部皮膚的護膚保健，療效確切，無毒副作用。
本發(fā)明涉及一種用于治療痤瘡或用于護膚化妝品的含有青蒿提取物的外用制品，其特征在于青蒿提取物是青蒿(Artemisia annuaL.)地上部分提取的揮發(fā)油與青蒿地上部分的有機溶劑提取物或二氧化碳超臨界提取物以任意重量比例構成。所述的青蒿地上部分提取的揮發(fā)油，為淡黃色或黃色或棕黃色澄清透明液體，難溶解于水，相對密度0.94～0.96(比水輕)，有芳香氣味，有特定的化學組成，特點在于含有不少于80余種可用氣相色譜或氣相色譜/質譜聯(lián)機檢測的化學成分。其中的主要化學成分是左旋樟腦(1-Camphor)、莰烯(Camphene)、異蒿酮(Isoartemisia Ketone)、β-丁香烯(β-Caryophyllene)、龍腦(Borneol)等，這些物質占揮發(fā)油總量的60％-70％。所述的青蒿地上部分的有機溶劑提取物，為棕黃色或深棕綠色油膏狀固體，難溶解于水，有特殊氣味。有特定的化學組成，特點在于含有的主要化學成分有倍半萜、黃酮、香豆素、甾醇等類型，具體的特征化學成分有青蒿酸(Artemisinic Acid)、青蒿素(Artemisinin，Arteannuin，Qinghaosu)、青蒿甲素(ArteamisinineI，Qinghaosu I)、青蒿乙素(Arteamisinine II，Qinghaosu II)、青蒿丙素(Arteamisinine III，Qinghaosu III)、青蒿丁素(Arteamisinine IV，Qinghaosu IV)、次甲基青蒿素(MethyleneQinghaosu)等倍半萜；檉柳黃素(Tamarixetin)、鼠李黃素(Rhamnetin)、金圣草黃素(Chrysoeriol)、貓眼草黃素(Chrysosplenetin)、澤蘭黃素(Eupatorin)等黃酮；東莨菪內酯(Scopoletin)、東莨菪甙(Scopolin)等香豆素；β-谷甾醇(β-Sitosterol)、胡羅卜甙(Daucosterol)、豆甾醇(Stigmasterol)等甾醇。
本發(fā)明所述的有機溶劑是指汽油(6號溶劑汽油)或工業(yè)酒精(含乙醇的體積百分濃度為50％至99％)。所述的青蒿地上部分的二氧化碳超臨界提取物，為淡黃色或黃色或棕色油膏狀固體，難溶解于水，有特定氣味和有特定的化學組成，含有的主要化學成分有倍半萜、黃酮、香豆素、甾醇等類型，具體的特征化學成分有青蒿酸(Artemisinic Acid)、青蒿素(Artemisinin，Arteannuin，Qinghaosu)、青蒿甲素(Arteamisinine I，Qinghaosu I)、青蒿乙素(Arteamisinine II，Qinghaosu II)、青蒿丙素(Arteamisinine III，Qinghaosu III)、青蒿丁素(Arteamisinine IV，Qinghaosu IV)、次甲基青蒿素(Methylene Qinghaosu)等倍半萜；檉柳黃素(Tamarixetin)、鼠李黃素(Rhamnetin)、金圣草黃素(Chrysoeriol)、貓眼草黃素(Chrysosplenetin)、澤蘭黃素(Eupatorin)等黃酮；東莨菪內酯(Scopoletin)、東莨菪甙(Scopolin)等香豆素；β-谷甾醇(β-Sitosterol)、胡羅卜甙(Daucosterol)、豆甾醇(Stigmasterol)等甾醇。
本發(fā)明所述的外用制品，是指青蒿的提取物加入輔料，按照常規(guī)工藝制成的符合制劑要求的外用藥物劑型或護膚化妝品，做成搽劑、乳劑、凝膠劑、乳膏劑、貼劑、膜劑或霜劑。
本發(fā)明所述的外用制品，是指青蒿的提取物加入輔料，按照特殊工藝制成的具有納米尺寸(10～200nm)和200～1000nm以下尺寸微粒的外用藥物劑型或護膚化妝品，做成搽劑搽劑、乳劑、凝膠劑、乳膏劑、貼劑、膜劑或霜劑。
本發(fā)明所述的常規(guī)工藝包括在提取罐中，加酒精或汽油，冷浸或加熱回流提取，脫色和濃縮；或在超臨界CO2萃取釜中萃取。
本發(fā)明所述的特殊工藝包括將青蒿提取物與PEG等乳化劑一同混和、溶解和用150W以上功率超聲處理。
本發(fā)明所述的醫(yī)療外用制品，其特征在于納米霜劑的配方(重量百分比)為硬脂酸2％～40％ 甘油0～7.5％PEG 5％～50％單硬脂酸甘油酯2.5％～40％ 液體石蠟2.5％～40％青蒿提取物0.1％～10％精制水(余量)本發(fā)明所述的所述的醫(yī)療外用制品，其特征在于納米搽劑的配方(重量百分比)為大豆卵磷脂0.5％～10％脫氧膽酸鈉0.05％～10％青蒿提取物0.05％～10％ 精制水(余量)本發(fā)明所述的所述的醫(yī)療外用制品，其特征在于復方納米搽劑的配方(重量百分比)為大豆卵磷脂0.5％～10％脫氧膽酸鈉0.5％～10％青蒿提取物0.05％～10％ 甘油0.5％～10％ 吐溫-800～10％異丙醇2.5％～50％ 三七總皂苷0～5％精制水(余量)具體實施方式
下面用實施例來詳細描述本發(fā)明，但這些實施例不得理解為任何意義上的對本發(fā)明權利要求的限制。
實施例1青蒿揮發(fā)油(簡稱青蒿油)的制備將青蒿葉和小枝剪切成3-5cm碎段，置多能提取罐中，加水至藥材面，加熱煎煮，自揮發(fā)油收集器收集芳香水，分液；或用石油醚(bp 30-60℃)萃取，分取油層或蒸除石油醚，得到的油層經(jīng)無水硫酸鈉脫水，即為青蒿油。
實施例2青蒿乙醇提取物的制備取青蒿葉粉，置多能提取罐中，加酒精(含50％～99％乙醇)冷浸或加熱回流提取，提取液加活性炭脫色，減壓回收乙醇，濃縮至1/4～1/8體積，靜置1/2～1天，傾出上清液，取浸膏，即得。
實施例3青蒿汽油提取物的制備取青蒿葉粉，置多能提取罐中，加6號溶劑汽油酒精于60℃加熱回流提取3-5次(4，4，3，2～0小時)，提取液減壓回收溶劑至無汽油味，加乙醇溶解，乙醇溶液經(jīng)活性炭脫色，過濾，取濾液減壓蒸餾回收溶劑，制成浸膏，即得。
實施例4青蒿超臨界二氧化碳流體提取物的制備取青蒿葉粉，置超臨界CO2萃取釜中，循環(huán)萃取0.5～10小時，壓力為5～12Mpa，解析釜溫度25℃～65℃，壓力1～5Mpa，冷卻釜溫度4～10℃。所得浸膏即為青蒿的超臨界二氧化碳流體萃取提取物(簡稱青蒿超臨界提取物)。
實施例5青蒿提取物納米霜劑的制備取硬脂酸、甘油、單硬脂酸甘油酯、PEG、液體石蠟加熱溶解，加入青蒿提取物，攪拌使混合均勻；另取泊洛沙、海藻膠溶解于計算量水，加到上述混合物中，攪拌使混合均勻。超聲處理10～60分鐘，使用的功率是150W-3000W。這樣得到的即為青蒿提取物的納米霜劑。本發(fā)明實例各組分的配比(重量百分比)為硬脂酸20％甘油0.5％ PEG30％單硬脂酸甘油酯15％液體石蠟20％青蒿提取物3％精制水(余量)實施例6青蒿提取物納米搽劑的制備稱取大豆卵磷脂、脫氧膽酸鈉、青蒿提取物，置圓底燒瓶中，加入氯仿-甲醇(1∶1，v/v)使溶解。減壓旋轉蒸發(fā)除去溶劑，使殘留物在燒瓶壁形成均勻薄膜。加入0.9％氯化鈉水溶液適量，振搖后得柔性脂質體混懸液，超聲處理10～60分鐘，使用的功率是150W-3000W。加水至適宜體積，搖勻。這樣得到的即為青蒿提取物的納米脂質體膠體溶液。本發(fā)明實例各組分的配比(重量百分比)為大豆卵磷脂5％脫氧膽酸鈉6％青蒿提取物4％ 精制水(余量)實施例7復方青蒿提取物的納米搽劑的制備稱取大豆卵磷脂、脫氧膽酸鈉、三七總皂苷、青蒿提取物，置圓底燒瓶中，加入氯仿-甲醇(1∶1，v/v)使溶解。減壓旋轉蒸發(fā)除去溶劑，使殘留物在燒瓶壁形成均勻薄膜。加入甘油、異丙醇、吐溫-80和0.9％氯化鈉水溶液適量，振搖后得柔性脂質體混懸液，超聲處理5～60分鐘，使用的功率是150W-3000W。加水至適宜體積，搖勻。這樣得到的即為青蒿提取物的納米脂質體膠體溶液。本發(fā)明實例各組分的配比(重量百分比)為大豆卵磷脂5％ 脫氧膽酸鈉4％青蒿提取物3％ 甘油5％ 吐溫6％異丙醇10％三七總皂苷3％精制水(余量)實施例8青蒿提取物抗痤瘡丙酸桿菌的作用本研究目的在于實驗青蒿油對引起痤瘡的三種主要致病菌金黃色葡萄球菌、糠秕孢子菌、痤瘡丙酸桿菌的抑制作用并確定最低有效濃度。青蒿油對痤瘡丙酸桿菌的抑制作用過去尚無報道。
實驗材料藥物青蒿提取物；菌種痤瘡丙酸桿菌(由中國藥品生物制品檢定所提供)金黃色葡萄球菌(由中國藥品生物制品檢定所提供)糠秕孢子菌(由廣東省皮膚病防治研究所提供)培養(yǎng)基普通瓊脂培養(yǎng)基沙氏培養(yǎng)基實驗方法采用試管藥基法。為測定青蒿油對三種菌的最低抑菌濃度，以100％濃度為起點，以10倍遞減稀釋。
實驗程序及操作藥基制備取營養(yǎng)瓊脂3.3克，酵母水解物0.5克，置三角瓶中，加蒸餾水100ml，充分混勻，加熱至瓊脂完全融化后分裝，每只試管分裝1.8ml，加入各濃度青蒿提取物0.2g，加塞、標記。按一種菌種一個濃度藥基兩管計算，3個菌種4個濃度，共用3×4×2只藥基管。
對照設置設普通培養(yǎng)基加菌作對照。
高壓滅菌藥基管和對照管在接種前均高壓滅菌10.5kg/cm215分鐘，擺放斜面。
菌液制備將提前轉種培養(yǎng)的菌種，先用LB肉湯沖洗成菌懸液。
接種每只藥基管加菌液1滴約0.5ml，以巴氏管滴入。其中痤瘡丙酸桿菌接種后，以無菌棉球塞入試管中部，再加焦性沒食子酸約10mg，以另一棉球覆蓋，再滴入50％ Na2CO3，約0.4ml使之形成厭氧環(huán)境，加不透氣橡皮塞，倒置。
培養(yǎng)痤瘡丙酸桿菌和金黃色葡萄球菌置37℃孵箱，糠秕孢子菌置26℃孵箱，每天觀察一次，連續(xù)2周.
結果判定培養(yǎng)至第6天，以不加菌的空白對照管為標準，最低一管無培養(yǎng)物生長的藥基管濃度，即為對該種菌的最低菌濃度，抑菌實驗重復3次，最終結果取其重現(xiàn)值或中間值。結果如下(1)青蒿提取物的作用藥物濃度痤瘡丙酸桿菌 金黃色葡萄球菌葡菌 糠秕孢子菌10％- - -1％ - - -0.1％ + - +0.01％ + + +0.001％ ++++ ++說明藥物為青蒿提取物；“-”表示細菌無生長，“+”表示細菌有生長，但其生長的程度受到抑制，“++”表示細菌生長的程度與未受藥物影響時一致。
結論10.1％青蒿提取物對金黃色葡葡球菌有抑制作用；1％青蒿提取物對痤瘡丙酸桿菌和糠秕孢子菌有抑制作用。
(2)青蒿提取物納米制劑的作用藥物濃度 痤瘡丙酸桿菌 金黃色葡萄球菌葡菌 糠秕孢子菌10％ - --1％ - --0.1％- --0.01％ + ++0.001％ ++++ ++說明藥物為青蒿提取物的納米制劑；“-”表示細菌無生長，“+”表示細菌有生長，但其生長的程度受到抑制，“++”表示細菌生長的程度與未受藥物影響時一致。
結論20.1％青蒿提取物的納米制劑對痤瘡丙酸桿菌、金黃色葡葡球菌和糠秕孢子菌均有抑制作用。
實驗結果表明，青蒿提取物對導致痤瘡的三種主要病原菌痤瘡丙酸桿菌，金黃色葡萄球菌，糠秕孢子菌均有不同程度的抑制作用；青蒿提取物的納米制劑抑菌效果更強。
實施例9青蒿提取物外用制品治療痤瘡的臨床效果觀察了126例痤瘡患者，年齡15～35歲，其中18～28歲者97例；重度痤瘡(膿包瘡)者14例。讓患者在面部患處每日涂搽霜劑或搽劑8～12次。以皮損和炎癥消退、僅留有細小色素沉著為治愈；以皮損70％以上消退、無新皮損出現(xiàn)為顯效；以皮損消退30％以上為有效。調查結果，治愈率達60％～85％，有效率達78％～96％。并且適用于中性、油性皮膚。因此，本發(fā)明所述的含青蒿提取物的外用制品在開發(fā)治療痤瘡的化妝品或外用藥物，用于因痤瘡(青春痘)、粉刺困擾的患者的面部護膚保健具有廣闊的前景。
權利要求
1.一種含有青蒿提取物的醫(yī)療外用制品，其特征在于青蒿提取物是青蒿(Artemisia annua L.)地上部分提取的揮發(fā)油與青蒿地上部分的有機溶劑提取物或二氧化碳超臨界提取物以任意重量比例構成，加入輔料制成護膚化妝品或外用藥劑。
2.根據(jù)權利要求1所述的醫(yī)療外用制品，其特征在于所述的有機溶劑是指汽油(6號溶劑汽油)或藥用酒精(含乙醇的體積百分濃度為50％至99％)。
3.根據(jù)權利要求1所述的醫(yī)療外用制品，其特征在于所述的外用制品，是指青蒿的提取物加入輔料，按照常規(guī)工藝制成的符合制劑要求的外用藥物劑型或護膚化妝品，做成搽劑、乳劑、凝膠劑、乳膏劑、貼劑、膜劑或霜劑。
4.根據(jù)權利要求1所述的醫(yī)療外用制品，其特征在于所述的外用制品，是指青蒿的提取物加入輔料，按照特殊工藝制成的具有納米尺寸(10～200nm)和200～1000nm以下尺寸微粒的外用藥物劑型或護膚化妝品，做成搽劑、乳劑、凝膠劑、乳膏劑、貼劑、膜劑或霜劑。
5.根據(jù)權利要求1所述的醫(yī)療外用制品，其特征在于所述的常規(guī)工藝包括在提取罐中，加酒精或汽油，冷浸或加熱回流提取，脫色和濃縮；或在超臨界CO2萃取釜中萃取。
6.根據(jù)權利要求1所述的醫(yī)療外用制品，其特征在于所述的特殊工藝包括將青蒿提取物與PEG等乳化劑一同混和、溶解和用150W以上功率超聲處理。
7.根據(jù)權利要求4所述的醫(yī)療外用制品，其特征在于納米霜劑的配方(重量百分比)為硬脂酸2％～40％甘油0～7.5％PEG 5％～50％單硬脂酸甘油酯2.5％～40％液體石蠟2.5％～40％青蒿提取物0.1％～10％ 精制水(余量)
8.根據(jù)權利要求4所述的醫(yī)療外用制品，其特征在于納米搽劑的配方(重量百分比)為大豆卵磷脂0.5％～10％ 脫氧膽酸鈉0.05％～10％青蒿提取物0.05％～10％ 精制水(余量)
9.根據(jù)權利要求4所述的醫(yī)療外用制品，其特征在于復方納米搽劑的配方(重量百分比)為大豆卵磷脂0.5％～10％ 脫氧膽酸鈉0.5％～10％青蒿提取物0.05％～10％甘油0.5％～10％ 吐溫-800～10％異丙醇2.5％～50％ 三七總皂苷0～5％精制水(余量)
全文摘要
本發(fā)明涉及到含有青蒿提取物的醫(yī)療外用制品。所述的青蒿的提取物是青蒿地上部分提取的揮發(fā)油與青蒿地上部分的有機溶劑提取物或二氧化碳超臨界提取物以任意重量比例構成。所述的藥物或化妝品是指青蒿的提取物加入輔料，按照常規(guī)或特殊工藝制成的符合制劑要求的護膚化妝品，或外用藥劑。該外用制品包括搽劑、乳劑、凝膠劑、乳膏劑、貼劑、膜劑、霜劑等。本發(fā)明所述的外用制劑對皮膚無刺激性，經(jīng)濟實用，具有清熱解毒、消癤止痛功效，可用于痤瘡(青春痘)、粉刺的治療。藥理試驗證明，對產(chǎn)生痤瘡相關細菌的生長具有顯著的抑制作用；經(jīng)臨床驗證還有消炎、脫敏的作用，可用于面部的皮膚保健。治愈率高，療效好，療程短，無刺激性，無毒副作用，具有廣闊的應用前景。
文檔編號A61P17/00GK1465383SQ0213427
公開日2004年1月7日 申請日期2002年6月28日 優(yōu)先權日2002年6月28日
發(fā)明者朱宇同, 胡英杰, 符林春 申請人:廣州市華立健藥業(yè)有限公司