專利名稱：非腸道的疫苗制劑及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及包含某些作為佐劑的鹽的非腸道疫苗制劑和佐劑組合物的領(lǐng)域。該類新型的非腸道疫苗制劑被用于在個體中產(chǎn)生免疫反應(yīng)。本發(fā)明還涉及這些用作佐劑的鹽在非腸道的疫苗制劑和佐劑組合物中的應(yīng)用以及包含該類鹽的疫苗佐劑。
本發(fā)明的背景技術(shù)免疫學(xué)佐劑是當(dāng)與抗原共同給藥時具有增加對抗原的免疫反應(yīng)能力的物質(zhì)。當(dāng)用作疫苗制劑中的一種組分時，該佐劑能改善該疫苗在反應(yīng)中的免疫原性，這會增強(qiáng)進(jìn)行了預(yù)防接種的個體的免疫反應(yīng)，因此可以減少該疫苗組分的數(shù)量或減少誘導(dǎo)所需免疫反應(yīng)時所需的給藥次數(shù)。
所誘導(dǎo)的效應(yīng)物免疫反應(yīng)可以是體液性質(zhì)，即抗體反應(yīng)，或者可以是細(xì)胞性質(zhì)，即細(xì)胞毒性T細(xì)胞反應(yīng)，或者該效應(yīng)物反應(yīng)可以是兩種反應(yīng)的混合體。細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)都需要輔助淋巴細(xì)胞的幫助。能引起炎癥或能誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子的輔藥將能誘導(dǎo)包括產(chǎn)生IL-12、IL-2和INFγ在內(nèi)的1-型T輔助細(xì)胞(Th1)反應(yīng)。這些細(xì)胞因子支持誘導(dǎo)了細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞(CTL)響應(yīng)、嗜中性細(xì)胞炎癥和Th1抗體反應(yīng)，如IgG1和IgG3。非炎癥性佐劑更易于誘導(dǎo)2-型輔助細(xì)胞(Th2)，包括產(chǎn)生細(xì)胞因子IL-4、IL-5和IL-10。這些細(xì)胞因子可減量調(diào)節(jié)Th1反應(yīng)，并能促進(jìn)誘導(dǎo)Th2抗體如IgE和IgG4以及一些細(xì)胞響應(yīng)如嗜曙紅細(xì)胞增多(eosiniphilia)。
雖然多年以來，佐劑在已經(jīng)被應(yīng)用于免疫學(xué)和疫苗技術(shù)領(lǐng)域中，但是下面的作用機(jī)理并沒有完全被人們所認(rèn)識。這是用于鑒定新的佐劑候選物的具有一定復(fù)雜性的有目的的研究。
目前對一些物質(zhì)就其佐劑的性質(zhì)進(jìn)行了研究。一些實(shí)例是鋁鹽、PLG(聚交酯共乙交酯)、水包油乳劑如MF59(一種在水中的角鯊烯乳劑)、Quil A、Qs-21和ISCOMs。但是，許多進(jìn)行試驗(yàn)的佐劑都具有一些缺點(diǎn)，包括對某些抗原無效、接觸過敏、皮下小結(jié)、以及肉芽腫性炎癥。其它的佐劑仍然有待于在臨床試驗(yàn)中進(jìn)行決定性的評估。
因此，仍然十分需要改良用于人類疫苗的佐劑或使用一些能用于人類疫苗的安全的佐劑。
本發(fā)明的概述已經(jīng)令人吃驚的發(fā)現(xiàn)，某些鹽類在用于非腸道給藥的疫苗制劑中特別適宜用作佐劑。該類鹽類還特別適合用作佐劑組合物的組分。
因此，本發(fā)明涉及包括至少一種致免疫的物質(zhì)和作為佐劑的一種或多種鹽以及其水合物的非腸道的疫苗制劑，其中所說的鹽由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所形成，或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、以及Rf的第4族元素所形成，前提條件是該鹽不是磷酸鈣，不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂，并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣。
本發(fā)明還涉及一些包含一種或多種鹽以及其水合物的佐劑組合物，其中所說的鹽由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所形成，或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所形成，前提條件是該鹽不是磷酸鈣，不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂，并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣。
本發(fā)明還涉及一些包含該類鹽的佐劑。
另一方面，本發(fā)明還涉及該佐劑和佐劑組合物用作用于非腸道給藥的疫苗制劑的組分的應(yīng)用、該類鹽在用于非腸道給藥的疫苗制劑中用作佐劑的應(yīng)用、以及該類鹽用作佐劑組合物的組分的應(yīng)用。
本發(fā)明還涉及一些產(chǎn)生免疫反應(yīng)的方法，該方法包括通過非腸道的途徑將該疫苗制劑進(jìn)行給藥。
本發(fā)明還涉及通過將本發(fā)明的疫苗制劑進(jìn)行給藥來進(jìn)行的接種或治療。
此外，本發(fā)明還涉及一種制備本發(fā)明的佐劑組合物和非腸道的疫苗制劑的方法。
附圖的簡要說明

圖1表示在實(shí)施例1中用本發(fā)明的非腸道的疫苗制劑所獲得的結(jié)果。其中的佐劑用的是氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、或二氧化鈦。其中致免疫的物質(zhì)用的是破傷風(fēng)類毒素。將該結(jié)果與包含氫氧化鋁作為佐劑或不包含佐劑并包含作為致免疫物質(zhì)的破傷風(fēng)類毒素的疫苗制劑進(jìn)行了比較。
圖2A和2B表示在實(shí)施例2中用本發(fā)明的非腸道的疫苗制劑所獲得的結(jié)果。其中的佐劑用的是氫氧化鎂、堿式碳酸鎂無水合物、或二氧化鈦。其中致免疫的物質(zhì)用的是破傷風(fēng)類毒素。將該結(jié)果與包含氫氧化鋁作為佐劑或不包含佐劑并包含作為致免疫物質(zhì)的破傷風(fēng)類毒素的疫苗制劑進(jìn)行了比較。
本發(fā)明的詳細(xì)說明如上所述的，人們并不能完全明了佐劑的作用機(jī)理。但是，有一些佐劑通過一些一般的理論原理其來發(fā)揮其效能，即(1)該佐劑可創(chuàng)造出一個抗原的儲庫，從而產(chǎn)生超時的持續(xù)緩慢釋放，因此可以減少加強(qiáng)接種的需要，(2)該佐劑可通過抗原呈遞細(xì)胞(APCs)來增強(qiáng)抗原攝取，使得該抗原能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的抗原加工過程，和(3)該佐劑可是促炎性的，即吸引或激活巨嗜細(xì)胞、單核細(xì)胞、以及免疫系統(tǒng)的其它細(xì)胞，或刺激細(xì)胞因子的產(chǎn)生。
此外，還認(rèn)為與佐劑活性有關(guān)的一些其它因素可促進(jìn)抗原的免疫原性。這些因素包括(1)提供抗原微粒，例如鋁鹽，(2)抗原的聚合物或聚合反應(yīng)，(3)減緩抗原釋放，例如乳劑或微囊包封，(4)細(xì)菌和細(xì)菌產(chǎn)物，例如CFA，(5)其它化學(xué)佐劑，例如聚-IC、葡萄糖磷酸酯和菊粉，(6)細(xì)胞因子，和(7)靶向于APC的抗原。
雖然大量的佐劑(例如鋁鹽、PLG、ISCOMs、MF59、MPL、IFA(弗氏不完全佐劑)、CFA(弗氏完全佐劑)、Quil A、以及Qs-21)已經(jīng)被用于實(shí)驗(yàn)和獸醫(yī)藥，但是鋁鹽(氫氧化鋁和磷酸鋁)是目前常規(guī)使用的用于人類的唯一佐劑。
以鋁為基礎(chǔ)的疫苗在多數(shù)情況中是通過將預(yù)先形成的磷酸鋁或氫氧化鋁凝膠與抗原進(jìn)行混合，使得該抗原吸附到凝膠上來進(jìn)行制造的。認(rèn)為鋁鹽可通過幾種機(jī)理來發(fā)揮其作為佐劑的作用。認(rèn)為鋁鹽能在注射部位創(chuàng)造一個抗原的儲庫，并能吸引該免疫體系的各種細(xì)胞，從而能造成一種局部炎性環(huán)境。鋁鹽最易于被抗原呈遞細(xì)胞吸收。粒度等于或小于10μm的顆粒可有效的被抗原呈遞細(xì)胞所吸收。鋁凝膠的粒度為0.5-10μm，這使得其似乎合理(參見參考資料6)。
雖然鋁鹽相對而言較廉價并且易于制造，還具有極佳的安全性和佐劑活性的追蹤記錄，但是在應(yīng)用鋁化合物時仍然存在一定的問題。這些問題包括局部反應(yīng)如紅斑、接觸過敏、皮下小結(jié)、以及肉芽腫性炎癥、在實(shí)驗(yàn)動物和人類中特定的和總的IgE抗體反應(yīng)增加(在某些病源情況如過敏反應(yīng)中出現(xiàn)不希望出現(xiàn)的抗體類型)。此外，已經(jīng)報道了鋁鹽作為佐劑時對某些抗原無效，參見Gupta等人(參考資料1)。
還有一種令人不安的觀測報道。在一些研究中已表明鋁能引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)性的變性病癥，參見Rao等人(參考資料2)。雖然仍然沒有關(guān)于包含鋁的疫苗與人類的神經(jīng)變性病癥如阿耳茨海默氏疾病的發(fā)展有關(guān)的臨床證據(jù)，但是已經(jīng)推定它們之間有聯(lián)系并且由此引發(fā)了廣泛的爭論，參見Savory等人(參考資料3)。這在將包含鋁的佐劑連續(xù)應(yīng)用于人的應(yīng)用方面就引發(fā)了一些令人憂慮的顧慮，因此，需要尋找一種供替代的選擇，需要一種不含鋁的佐劑。
還對氫氧化鎂與氫氧化鋁的聯(lián)合應(yīng)用進(jìn)行了研究。雖然氫氧化鎂單獨(dú)應(yīng)用時具有低的吸附活性，但是其可以增強(qiáng)氫氧化鋁作為佐劑的活性，參見Stas等人(參考資料8)。
已經(jīng)知道原子量為4并且分子量為9的最輕的金屬—鈹可作為抗原，并且在用受利什曼原蟲屬影響的小鼠進(jìn)行的研究中，其還可作為佐劑來促進(jìn)IFN-γ的生成并能增強(qiáng)IL-12的性質(zhì)，其中所說的小鼠被用可溶性的利什曼抗原進(jìn)行了免疫。鈹對IL-12的協(xié)同能力在佐劑的研制中可能是一種重要的因素。因此，已經(jīng)暗示了鈹具有研制疫苗佐劑的可能性，參見Lee等人(參考資料7)。
因此，已經(jīng)提出了許多佐劑的候選物。但是，這些新的有希望的佐劑候選物中許多在研發(fā)階段已經(jīng)宣告失敗，這是因?yàn)楫?dāng)在臨床前實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行測試時，它們?nèi)狈σ环N或多種佐劑所需的特性，參見Newman(參考資料4)。許多佐劑候選物已經(jīng)表現(xiàn)出不可接受的毒性水平，因此它們的應(yīng)用被限制到僅用于非常嚴(yán)重的情況如慢性病毒感染、癌癥或HIV治療中，其中誘導(dǎo)較高水平的局部或全身副作用的佐劑的應(yīng)用可能更容易被接受些。已經(jīng)證明這些候選物中的一些太昂貴以至于不能進(jìn)行制造，或其制造和純化過程太復(fù)雜而使得其不可行。此外，應(yīng)用于人類的良好佐劑應(yīng)當(dāng)表現(xiàn)出長期的物理化學(xué)穩(wěn)定性，優(yōu)選一年，但是已經(jīng)證明一些佐劑候選物具有有限的儲存期。
PLG聚合物在研制的最初被用作可生物降解的手術(shù)縫合線，以及各種激素的儲庫制劑。PLG的性質(zhì)(可生物降解性、已經(jīng)經(jīng)過證明的用于人類時的安全性、以及相對而言比較容易進(jìn)行制造)明顯使其成為一種傳遞疫苗的候選物。該體系是以將抗原包封于1-100μm的微球內(nèi)為基礎(chǔ)的，并且如果需要的話，其中還可以含有其它組分。當(dāng)該微粒降解時，該抗原被釋放出來。該釋放動力學(xué)可以通過改變聚合物的組成來進(jìn)行調(diào)整。較小的微球(≤10μm)會被抗原呈遞細(xì)胞所吸收，從而可以將該抗原靶向于具有免疫能力的組織。該P(yáng)LG技術(shù)的主要缺點(diǎn)在于在制造過程中所需的苛刻的物理和化學(xué)條件，這種需要可能使得這種技術(shù)不能被用于某些不穩(wěn)定的抗原。
雖然已經(jīng)建立了良好的PLG安全性曲線，但是PLG疫苗的佐劑活性仍然有待于在臨床試驗(yàn)中進(jìn)行決定性的評估，參見Newman(參考資料4)。
水包油乳劑如MF59(角鯊烯在水中的乳劑)比油包水乳劑的流動性更高，因此一般不會用其來形成注射部位的抗原儲庫。更傾向于認(rèn)為當(dāng)小滴被抗原呈遞細(xì)胞所吸收時水包油乳劑發(fā)揮其佐劑作用，參見O’Hagan等人(參考資料5)。對該乳劑進(jìn)行制備，隨后向其中加入抗原，這使得這種技術(shù)適用于易碎的或不穩(wěn)定的抗原，或適用于必須對抗原的三維結(jié)構(gòu)進(jìn)行潴留的用途中，參見Newman(參考資料4)。據(jù)報道，在大量的動物模型中，MF59疫苗的效力比用鋁鹽制劑傳遞的疫苗的效力高50倍，參見O’Hagan等人(參考資料5)。據(jù)報道，與其說MF59佐劑可誘導(dǎo)免疫反應(yīng)還不如說其可誘導(dǎo)抗體反應(yīng)，因此，其更適用于用來增加或誘導(dǎo)抗體反應(yīng)的疫苗，參見Newman(參考資料4)。
其它的佐劑體系如Quil A、Qs-21和ISCOMs是以天然產(chǎn)物為基礎(chǔ)的，即皂甙(甾醇和三萜苷，得自Quilaja saponiaria樹的樹皮)。Quil A是多于20種Quilaja皂甙的粗制品，目前被用于獸醫(yī)的疫苗技術(shù)。但是，由于該產(chǎn)品的異質(zhì)性和毒性，Quil A不適合用作用于人的疫苗。這使得還需要對Quil A中的各皂甙進(jìn)行進(jìn)一步的純化。實(shí)驗(yàn)疫苗和毒理學(xué)研究證實(shí)作為皂甙的Qs-21最適合用作用于人類的疫苗，參見Newman(參考資料4)。在實(shí)驗(yàn)動物中，Quil A和Qs-21都能引起細(xì)胞的免疫反應(yīng)和抗原反應(yīng)。Qs-21目前正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。ISCOMs(免疫刺激復(fù)合物)是由膽固醇、皂甙和磷脂所組成的球形的中空顆粒。用動物進(jìn)行的疫苗研究已經(jīng)表面當(dāng)使用ISCOMs制劑時，低劑量的皂甙就能誘導(dǎo)類似的免疫反應(yīng)。但是，ISCOMs的制造相對而言較為復(fù)雜，并且關(guān)于Qs-21的優(yōu)點(diǎn)仍存在爭論，參見Newman(參考資料4)。
由上面所述的情況可以很明顯的看出需要一些適宜的佐劑，尤其是適用于人類的佐劑。一種理想的佐劑候選物應(yīng)當(dāng)優(yōu)選的表現(xiàn)出來一些關(guān)鍵特性，即(1)安全性。該佐劑優(yōu)選地應(yīng)當(dāng)具有足夠低的毒性和可生物降解性，并且優(yōu)選地誘發(fā)最低程度的局部和全身反應(yīng)。
(2)效能。該佐劑優(yōu)選地應(yīng)當(dāng)能減少抗原的數(shù)量和/或?yàn)榱苏T導(dǎo)長期免疫反應(yīng)(其是一種抗體或細(xì)胞反應(yīng))所需的使用的數(shù)量。
(3)穩(wěn)定性。該佐劑優(yōu)選地在4℃或室溫下能長期穩(wěn)定，優(yōu)選地在高于一年的時間內(nèi)穩(wěn)定。該制造方法還不能對該抗原有任何有害的作用(4)制造和成本。該佐劑優(yōu)選地應(yīng)易于制造并且制造費(fèi)用低廉以不大量增加該疫苗的制造成本。
本發(fā)明提供了符合上述所有標(biāo)準(zhǔn)或一些標(biāo)準(zhǔn)的佐劑。已經(jīng)令人吃驚的發(fā)現(xiàn)，某些鹽在非腸道的疫苗制劑中能作為佐劑。
因此，本發(fā)明首先涉及一種包含至少一種致免疫的物質(zhì)和一種或多種作為佐劑的鹽及其水合物的非腸道疫苗制劑，其中所說的鹽選自由元素周期表中的第2族元素或元素周期表的第4族元素所形成的鹽，前提條件是該鹽不是磷酸鈣。
佐劑鹽的優(yōu)點(diǎn)是眾多的。已經(jīng)令人吃驚的發(fā)現(xiàn)當(dāng)被包含在非腸道的疫苗制劑中時，這些鹽能作為佐劑，即在許多情況中其可以減少誘導(dǎo)免疫反應(yīng)所需的致免疫物質(zhì)的量。此外，在一些情況中，當(dāng)與所用的常規(guī)佐劑進(jìn)行比較時，這些鹽的佐劑活性能更早的誘發(fā)免疫反應(yīng)的發(fā)生和/或使其長期持續(xù)。因此，可以減少獲得及維持所需免疫水平所需的加強(qiáng)接種的數(shù)目。此外，研究表明，在非腸道用的疫苗制劑中使用這里所描述的鹽在一些情況中可以增加免疫反應(yīng)的強(qiáng)度，其程度甚至高于一般用氫氧化鋁所觀察到的結(jié)果。
其中的一個原因可能是該佐劑鹽是通過創(chuàng)建了一個致免疫物質(zhì)的儲庫而來發(fā)揮其作為佐劑的作用的，從而超時減緩并延長了該致免疫物質(zhì)的釋放。另一方面，該鹽還可以促進(jìn)抗原呈遞細(xì)胞對該致免疫物質(zhì)的攝取。但是，應(yīng)當(dāng)強(qiáng)調(diào)的是這僅僅是一種假設(shè)，因此并不具有任何限定作用。
該鹽用大量的物理化學(xué)性質(zhì)來進(jìn)行定性。據(jù)信這些性質(zhì)或多或少的能影響該鹽作為佐劑的能力。例如，溶解度常數(shù)、晶格能、結(jié)合性質(zhì)(與離子結(jié)合相反的共價結(jié)合)、pH、氧化階段、粒徑、以及吸收致免疫物質(zhì)的能力，這些可能都會影響其作為佐劑的能力。在實(shí)施例中所列的化合物具有低的溶解度和高的晶格能。此外，實(shí)施例的疫苗制劑是微堿性的。因此，這些特性中的一些與佐劑活性緊密相關(guān)。但是，應(yīng)當(dāng)明白，這些只是假設(shè)，因此不會對本發(fā)明的范圍有任何的限制作用。
符合上述定義的鹽是已知的化學(xué)化合物，并且其中的一些目前在獸醫(yī)或人類醫(yī)學(xué)中被用作瀉藥、抗酸劑或在被用于化妝品應(yīng)用中，參見下表所列的實(shí)例。之前，這些鹽中的任何一種都沒有在非腸道的疫苗制劑中被用作佐劑。
1在水中的溶解度，與制造商有關(guān)2推薦使用的最大劑量(g/kg體重)h表示已批準(zhǔn)用于人類v表示已批準(zhǔn)獸用這里所用的“佐劑”的定義指的是免疫學(xué)佐劑。即指的是能增強(qiáng)免疫系統(tǒng)對致免疫物質(zhì)的反應(yīng)的化合物。“致免疫”的定義指的是當(dāng)對個體進(jìn)行給藥時，一種物質(zhì)或活性成分能單獨(dú)或與佐劑一起來在個體中誘導(dǎo)免疫反應(yīng)?！懊庖叻磻?yīng)”的定義包括特定的體液，即抗體，以及細(xì)胞免疫反應(yīng)，該抗體是血清的和分泌腺性的，并且屬于IgM、IgD、IgG、IgA和IgE亞綱以及所有的同位型、同種異型、以及它們的亞綱。該定義還進(jìn)一步傾向于包括其它的血清和組織組分。該細(xì)胞反應(yīng)包括1-型和2-型T-輔助淋巴細(xì)胞、細(xì)胞毒性T-細(xì)胞以及天然殺傷(NK)細(xì)胞。
接種/免疫的概念是以免疫系統(tǒng)的兩個基本特征為基礎(chǔ)的，即特異性和記憶能力。第一次接種/免疫引發(fā)與抗原有關(guān)的特定反應(yīng)，通過這種抗原來對個體進(jìn)行攻擊。此外，其還將會誘導(dǎo)所有的記憶B細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞。在重新與該抗原或該病原體進(jìn)行接觸時，免疫系統(tǒng)會盡量作出更快更有力的反應(yīng)，因此使得進(jìn)行了預(yù)防接種/使獲得了免疫的個體在對抗該病原體時得到了免疫學(xué)保護(hù)。
在該疫苗制劑中使用一種或多種致免疫物質(zhì)都屬于本發(fā)明的范圍。其中該疫苗制劑包含多于一種致免疫物質(zhì)的情況就是所謂的組合疫苗。
致免疫物質(zhì)的實(shí)例包括抗原、變應(yīng)原、類變應(yīng)原、肽、蛋白質(zhì)、半抗原、碳水化合物、肽核酸(PNAs，一種合成的遺傳學(xué)擬似物)、和病毒或細(xì)菌物質(zhì)以及其類似物或衍生物。在本發(fā)明的上下文中，“類似物或衍生物”的定義傾向于包括該致免疫物質(zhì)的進(jìn)行了修飾的形式。這種修飾可以通過化學(xué)修飾或合成修飾來進(jìn)行，例如通過PEG化(PEG＝聚乙二醇)、生物素化、脫氨基作用、馬來酸化(maleination)、取代一個或多個氨基酸來進(jìn)行，通過交聯(lián)、通過糖基化、或通過其它的重組或合成技術(shù)來進(jìn)行。該定義還傾向于包括自然發(fā)生的突變、異構(gòu)重整以及逆向類似物。
該類致免疫物質(zhì)特別可以是天然的、重組的或進(jìn)行了修飾的蛋白質(zhì)或其片段、抗原、變應(yīng)原、類變應(yīng)原、肽、與適宜的載體如KLH(黑氏洞糾纏的血藍(lán)蛋白)配合的半抗原或破傷風(fēng)類毒素、碳水化合物、被滅活或未被滅活或進(jìn)行了稀釋或未進(jìn)行稀釋的細(xì)菌或病毒以及其組分、RNA、DNA、PNA、寄生蟲或逆轉(zhuǎn)錄病毒、寄生物質(zhì)、支原體屬、或毒素，例如可得自破傷風(fēng)類毒素、白喉類毒素、霍亂毒素A和B亞基、風(fēng)疹、彈狀病毒(狂犬病)、Myoxoviruses、副流感病毒(Paramyoxyviruses)如類流感病毒、流行性腮腺炎和麻疹、細(xì)小核糖核酸病毒如脊髓灰質(zhì)炎病毒、柯薩奇病毒、艾可病毒群和鼻病毒、呼腸孤病毒、痘病毒如天花病毒、痘苗病毒和牛痘病毒、乳多空病毒如多瘤病毒、乳頭狀瘤病毒和SV-40、腺病毒、EBV如單核細(xì)胞增多病毒、細(xì)小病毒如HPV B19、皰疹病毒如單純皰疹病毒、以及帶狀皰疹病毒(水痘病毒)、巨細(xì)胞病毒(CMV)、蟲媒病毒如黃熱病病毒和登革熱病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒如HIV、肝炎病毒如A型肝炎、B型肝炎和C型肝炎病毒、B型流感嗜血桿菌、分枝桿菌屬如M.tuberculosis、牛分枝桿菌、非洲分枝桿菌、田鼠分枝桿菌、鳥分枝桿菌、胞內(nèi)分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌、戈登氏分枝桿菌、M.paratuberculosis、和鼠麻風(fēng)分枝桿菌、疏螺旋體屬如布氏疏螺旋體、特別是廣義布氏疏螺旋體和狹義布氏疏螺旋體、嘎氏疏螺旋體、阿氏疏螺旋體、達(dá)氏疏螺旋體和回歸熱疏螺旋體、百日咳桿菌(百日咳)、沙門氏菌屬如鼠傷寒沙門氏菌和傷寒沙門氏菌、密螺旋體屬如T.Pallidum、鉤端螺旋體屬、彎曲桿菌屬如空腸彎曲桿菌、螺旋桿菌屬如H.pylori、假單胞菌屬、軍團(tuán)菌屬、奈瑟氏菌屬如N.gonorrhoea和腦膜炎奈瑟氏菌屬、衣原體屬如沙眼衣原體、肺炎衣原體和鸚鵡熱衣原體、腸桿菌屬、克雷白氏桿菌屬、耶爾森菌屬、弧菌屬如霍亂弧菌、加德鈉氏菌屬、立克次氏體屬、梭狀芽孢桿菌屬如艱難梭菌、肉毒梭菌和破傷風(fēng)梭菌、乳酸桿菌屬、李斯忒氏菌屬、和枝原體屬如肺炎枝原體、人枝原體、惡性瘧原蟲屬、以及杜諾凡氏利什曼原蟲屬、霉菌和真菌如Clahdosporium、鏈格孢屬、曲霉屬、Besidiomycetes、白色念珠菌屬、以及青霉屬、類變應(yīng)原如戊二醛或用PEG進(jìn)行了修飾的變應(yīng)原復(fù)合體。
在組合疫苗中所用的致免疫物質(zhì)的實(shí)例是與白喉-破傷風(fēng)-百日咳-脊髓灰質(zhì)炎、麻疹-腮腺炎-風(fēng)疹、以及A型和B型肝炎有關(guān)的致免疫物質(zhì)。
用于本發(fā)明的非腸道的疫苗制劑中的變應(yīng)原的非限制性的實(shí)例包括來源于例如樹、草、草藥、真菌、住屋塵埃螨、倉庫螨、蟑螂以及動物毛發(fā)、羽毛、和頭皮屑的吸入性變應(yīng)原。重要的得自樹、草和草藥的花粉變應(yīng)原是這些來源于山毛櫸目、木犀目和松目的分類學(xué)目的物質(zhì)，包括例如樺樹(樺屬)、赤揚(yáng)木(赤揚(yáng)屬)、榛樹(榛屬)、鵝耳櫪(鵝耳櫪屬)和橄欖(齊墩果)、Poales目，包括例如毒麥屬、梯牧草屬、早熟禾屬、狗牙根屬、鴨茅屬和黑麥屬的草、Asterales和蕁麻目，包括例如豚草屬和蒿屬的草藥。得自真菌的重要的吸入變應(yīng)原是例如來源于鏈格孢屬和分子孢子菌屬。其它重要的吸入變應(yīng)原是這些得自表皮螨屬的住屋塵埃螨、得自害嗜鱗螨屬的倉庫螨、得自蟑螂的這些變應(yīng)原和得自哺乳動物如貓、狗、馬、牛和鳥的這些變應(yīng)原。此外，所用變應(yīng)原可得自有毒的變應(yīng)原，包括這些來源于刺入或咬人昆蟲的變應(yīng)原如這些由膜翅目分類學(xué)目中的昆蟲得到的變應(yīng)原，包括蜜蜂、黃蜂、以及螞蟻。
應(yīng)當(dāng)明白，“得自”的定義包括天然存在的物質(zhì)以及其異構(gòu)重組體。此外，該物質(zhì)可以通過重組或合成技術(shù)來進(jìn)行制備。
特定的變應(yīng)原組分對于現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)人員而言是公知的，包括例如Bet v 1(疣皮樺，樺木)、Aln g 1(歐洲榿木，赤揚(yáng)木)、Cor a1(Corylus avelana，榛樹)和山毛櫸目目的Car b 1(歐洲鵝耳櫪，鵝耳櫪)。其它的有Cry j 1(松目)、Amb a 1和2、Art v 1(菊目)、Par j 1(蕁麻目)、Ole e 1(木犀目)、Ave e 1、Cyn d 1、Dac g1、Fes p 1、Hol l 1、Lol p 1和5、Pas n 1、Phl p 1和5、Poap 1、2和5、Sec c 1和5、以及Sor h 1(各種草的花粉)、Alt a 1和Cla h 1(真菌)、Der f 1和2、Der p 1和2(住屋塵埃螨，分別為D.farinae和D.pteronyssinus)、Lep d 1、Bla g 1和2、Pera 1(蟑螂，分別為Blatella germanica和美洲大蠊)、Fel d1(貓)、Can f 1(狗)、Equ c 1、2和3(馬)、Apis m 1和2(蜜蜂)、Ves g 1、2和5、Pol a 1、2和5(所有的黃蜂)和Sol i 1、2、3以及4(火螞蟻)。
正如上面所說明的那樣，可在非腸道用的疫苗制劑中用作佐劑的鹽是由元素周期表中的第2族或第4族元素所組成的鹽，即由Mg、Ca、Sr、Ba、Ra、Ti、Zr、Hf、或Rf所形成的鹽。應(yīng)當(dāng)明白，該鹽由陽離子部分和陰離子部分所組成。第2族和第4族元素組成了該陽離子部分。
所用的鹽可以是所謂的復(fù)鹽。該鹽的水合物，例如單-、雙-、三-、四-和五水合物，也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。雙-或三陽離子(例如三鈣)也屬于本發(fā)明的范圍。雙-或三陰離子(例如硫酸氫鹽)也屬于本發(fā)明的范圍。
該鹽可以是有機(jī)鹽或無機(jī)鹽。
當(dāng)該鹽是無機(jī)鹽時，陰離子部分的實(shí)例有醋酸鹽、草酸鹽、檸檬酸鹽、以及酒石酸鹽。
用于本發(fā)明的鹽優(yōu)選的是無機(jī)鹽。
在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明的非腸道疫苗制劑是這些，其中的佐劑是選自與氧化物、過氧化物、氫氧化物、碳酸鹽、磷酸鹽、焦磷酸鹽、磷酸氫鹽、二磷酸氫鹽、硫酸鹽、以及硅酸鹽形成的鹽，以及它們的水合物的這些疫苗制劑，但是要考慮上述的前提條件。
在另一個實(shí)施方案，該非腸道的疫苗制劑是其中的佐劑是選自Mg、Ca、Ba、Ti、或Zr和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及其水合物的疫苗制劑。
在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明非腸道的疫苗制劑是這些，其中的佐劑是選自由鎂和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈣和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鋇和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈦和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及鋯和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及這些鹽的水合物的疫苗制劑。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明非腸道的疫苗制劑是這些其中的佐劑是選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、二氧化鈦、碳酸鈣、氫氧化鋇、過氧化鋇、碳酸鋇、硫酸鋇、氧化鈹、硫酸鈣、硅酸鈣、硅酸二鈣、硅酸三鈣、焦磷酸鈣、過氧化鈣、氫氧化鈣、磷酸三鈣、磷酸氫鈣、磷酸二氫鈣、硫酸鈣二水合物、碳酸鎂、氧化鎂、二氧化鎂、硫酸鎂、磷酸三鎂、硅酸鎂、三硅酸二鎂、三硅酸鎂、焦硫酸鈦(titantium disulphate)、二氧化鋯、氫氧化鋯、硫酸鋯、過氧化鍶、以及碳酸鍶。
本發(fā)明的非腸道疫苗制劑優(yōu)選其中的佐劑是選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、和二氧化鈦的這些疫苗制劑。
在一個實(shí)施方案中，所選擇的佐劑包含一種或多種具有低溶解度和/或高晶格能的鹽。
在一些情況中，本發(fā)明的非腸道疫苗制劑還包含附加的佐劑。該類附加的佐劑選自常規(guī)所用的佐劑。該類附加佐劑的實(shí)例包括皂甙如Quil A和Qs-21、水包油乳劑如MF59、MPL、PLG、PLGA、鋁鹽、磷酸鈣、油包水乳劑如IFA(弗氏不完全佐劑)和CFA(弗氏完全佐劑)、白介素如IL-1β、IL-2、IL-7、IL-12、和INFy、Adju-Phos、葡聚糖、抗原制劑、霍亂全毒素、脂質(zhì)體、DDE、DHEA、DMPC、DMPG、DOC/Alum復(fù)合物、ISCOMs、胞壁酰二肽、單磷?；愔珹、胞壁酰三肽、和磷脂酰乙醇胺(phospatidylethanolamine)(還可參見“疫苗設(shè)計.亞基和佐劑法”，第7章(參考資料6))。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，該附加的佐劑選自皂甙如Quil A和Qs-21、MF59、MPL、PLG、PLGA、磷酸鈣、以及鋁鹽。
此外，本發(fā)明的非腸道疫苗制劑可適當(dāng)包含一種或多種可藥用的賦形劑和載體。其實(shí)例有稀釋劑、緩沖劑、混懸劑、潤濕劑、增溶劑、pH-調(diào)節(jié)劑、分散劑、防腐劑、和/或著色劑。
本發(fā)明的疫苗制劑是通過非腸道的途徑來進(jìn)行給藥的。該非腸道的途徑包括靜脈給藥、肌肉給藥、動脈給藥、皮下給藥、真皮給藥、表皮給藥/經(jīng)皮給藥、以及腹膜內(nèi)給藥。
佐劑鹽的陽離子優(yōu)選的以約0.0004至約120M的量存在于該疫苗制劑中，如約0.004至約12M，優(yōu)選約0.008至約6M。
附加的佐劑的量取決于所討論的佐劑和致免疫物質(zhì)，一般要進(jìn)行優(yōu)化。但是，現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)人員在考慮了制劑中所包含的其它成分后，很容易知道如何對該類附加的佐劑進(jìn)行優(yōu)化。
在該非腸道疫苗制劑的一個實(shí)施方案中，該佐劑是氫氧化鎂。在該非腸道疫苗制劑的另一個實(shí)施方案中，該佐劑是堿式碳酸鎂五水合物。在該非腸道疫苗制劑的第三個實(shí)施方案中，該佐劑是二氧化鈦。在該非腸道疫苗制劑的第四個實(shí)施方案中，該佐劑是氫氧化鎂和堿式碳酸鎂五水合物的組合物、氫氧化鎂和二氧化鈦的組合物、或堿式碳酸鎂五水合物和二氧化鈦的組合物。在第五個實(shí)施方案中，該佐劑是氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、和二氧化鈦的組合物。該類非腸道的疫苗制劑還可適當(dāng)?shù)陌郊拥淖魟?。該類附加的佐劑選自這些上述的物質(zhì)。但是，該附加的佐劑優(yōu)選的選自皂甙如Quil A和Qs-21、MF59、MPL、PLG、PLG A、磷酸鈣、和鋁鹽。
此外，還可以制造具有綜合特性如起效早、長期存留、效力增加的疫苗制劑，Th1、Th2和/或細(xì)胞毒素反應(yīng)取決于佐劑或佐劑組合物的選擇。因此，根據(jù)不同類型的接種使用不同的佐劑組合是有益的。例如，起效早的佐劑可用于初期接種，增強(qiáng)功效的佐劑可用于激發(fā)。為此，這里的佐劑組合物是非常適宜的。
通過加入附加的佐劑，可制備具有特定性質(zhì)或性質(zhì)增強(qiáng)的疫苗制劑。例如，加入MPL得到一種能顯著誘導(dǎo)Th1型免疫反應(yīng)的制劑，而加入皂甙可以得到一種能誘導(dǎo)Th1型免疫反應(yīng)和細(xì)胞毒素反應(yīng)的制劑。此外，在本發(fā)明的非腸道疫苗制劑中一種或多種佐劑鹽的組合物和一種或多種附加的佐劑可使佐劑效果有利的結(jié)合起來，可能可調(diào)節(jié)Th1、Th2和/或細(xì)胞毒素反應(yīng)。
另一方面，本發(fā)明涉及一些包含一種或多種鹽及其水合物的非腸道應(yīng)用的佐劑組合物，其中所說的鹽選自由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所組成鹽、或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所組成鹽，前提條件是該鹽不是磷酸鈣、不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂、并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣。
如上所述，雖然該鹽可以是無機(jī)或有機(jī)鹽，但本發(fā)明的佐劑組合物優(yōu)選地是其中的鹽是選自無機(jī)鹽的這些佐劑組合物。
在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，該佐劑組合物是其中的鹽是選自與氧化物、過氧化物、氫氧化物、碳酸鹽、磷酸鹽、焦磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、硫酸鹽、和/或硅酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物的這些佐劑組合物，但是要注意上述的前提條件。
如上所述，復(fù)鹽也是本發(fā)明的一部分。具有雙-或三-陽離子或-陰離子的鹽也是本發(fā)明的一部分。
該佐劑組合物特別是其中的鹽是選自由Mg、Ca、Ba、Ti、或Zr和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽所形成的鹽、以及這些鹽的水合物的這些組合物，但是要注意上述的前提條件。
該佐劑組合物特別可以是其中的鹽是選自鎂和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈣和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鋇和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈦和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及鋯和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽以及它們的水合物的這些組合物。
在一個特別的實(shí)施方案中，該佐劑組合物是其中的鹽是選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、二氧化鈦、碳酸鈣、氫氧化鋇、過氧化鋇、碳酸鋇、硫酸鋇、氧化鈹、硫酸鈣、硅酸鈣、硅酸二鈣、硅酸三鈣、焦磷酸鈣、過氧化鈣、氫氧化鈣、磷酸三鈣、磷酸氫鈣、磷酸二氫鈣、硫酸鈣二水合物、碳酸鎂、氧化鎂、二氧化鎂、硫酸鎂、磷酸三鎂、硅酸鎂、三硅酸二鎂、三硅酸鎂、焦硫酸鈦、二氧化鋯、氫氧化鋯、硫酸鋯、過氧化鍶、以及碳酸鍶的這些組合物。優(yōu)選地，該佐劑組合物是其中的鹽是選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、以及二氧化鈦的這些組合物。
在一些情況中，在該佐劑組合物中可有利的包含一種附加的佐劑。因此，在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明的佐劑組合物還包含一種附加的佐劑。該附加的佐劑可適宜的選自上面所提及的這些物質(zhì)。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，該附加的佐劑選自皂甙如Quil A和Qs-21、MF59、MPL、PLG、PLG A、磷酸鈣、以及鋁鹽。
本發(fā)明的佐劑組合物還可包含可藥用的賦形劑和/或載體。
此外，該佐劑組合物還可以包含稀釋劑、緩沖劑、混懸劑、增溶劑、pH-調(diào)節(jié)劑、分散劑、和/或著色劑。
在可以以粉末或凝膠或混懸液的形式獲得的本發(fā)明的佐劑組合物中，該鹽的陽離子可以適當(dāng)?shù)囊约s0.0004至約120M的量存在于其中，如約0.004至約12M，優(yōu)選地是約0.008至約6M。
在該佐劑組合物的一個實(shí)施方案中，該鹽是氫氧化鎂。在該佐劑組合物的另一個實(shí)施方案中，該鹽是堿式碳酸鎂五水合物。在該佐劑組合物的第三個實(shí)施方案中，該鹽是二氧化鈦。在該佐劑組合物的第四個實(shí)施方案中，該鹽是氫氧化鎂和堿式碳酸鎂五水合物的組合物、氫氧化鎂和二氧化鈦的組合物、或堿式碳酸鎂五水合物和二氧化鈦的組合物。在第五個實(shí)施方案中，該鹽是氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物和二氧化鈦的組合物。該類佐劑組合物可適當(dāng)?shù)陌环N附加的佐劑。該類附加的佐劑可適宜的從上述所述的這些物質(zhì)中進(jìn)行選擇。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，該附加的佐劑選自皂甙如Quil A和Qs-21、MF59、MPL、PLG、PLG A、磷酸鈣和鋁鹽。
在另一個實(shí)施方案中，所選擇的這種鹽(這些鹽)具有低的溶解度和/或高晶格能。
第三方面，本發(fā)明涉及一些包含一種或多種鹽、以及其水合物的佐劑，其中所說的鹽由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所組成、或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所組成，前提條件是該鹽不是磷酸鈣、不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣。
本發(fā)明的佐劑可以包含有機(jī)和/或無機(jī)鹽。
在本發(fā)明的佐劑的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，該鹽是選自無機(jī)鹽的鹽。
本發(fā)明的佐劑可以適宜的是其中的鹽是選自與氧化物、過氧化物、氫氧化物、碳酸鹽、磷酸鹽、焦磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、硫酸鹽、以及硅酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物的這些佐劑，但是要考慮上述的前提條件。
該佐劑特別是其中的鹽是選自Mg、Ca、Ba、Ti、或Zr與氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物的這些佐劑。
特別令人感興趣的佐劑是這些其中的鹽是選自鎂和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈣和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鋇和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈦和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及鋯和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物的這些佐劑。
在本發(fā)明佐劑的一個實(shí)施方案中，該鹽選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、二氧化鈦、碳酸鈣、氫氧化鋇、過氧化鋇、碳酸鋇、硫酸鋇、氧化鈹、硫酸鈣、硅酸鈣、硅酸二鈣、硅酸三鈣、焦磷酸鈣、過氧化鈣、氫氧化鈣、磷酸三鈣、磷酸氫鈣、磷酸二氫鈣、硫酸鈣二水合物、碳酸鎂、氧化鎂、二氧化鎂、硫酸鎂、磷酸三鎂、硅酸鎂、三硅酸二鎂、三硅酸鎂、焦硫酸鈦、二氧化鋯、氫氧化鋯、硫酸鋯、過氧化鍶、以及碳酸鍶。
在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，該佐劑是其中的鹽是選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、或二氧化鈦的佐劑，或是其中的鹽是選自氫氧化鎂和堿式碳酸鎂五水合物的組合物、氫氧化鎂和二氧化鈦的組合物、堿式碳酸鎂五水合物和二氧化鈦的組合物、或氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、和二氧化鈦的組合物的佐劑。
在第四方面，本發(fā)明涉及由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所組成的鹽、或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所組成的鹽、以及它們的水合物在用于非腸道給藥的疫苗制劑中作為佐劑的應(yīng)用，前提條件是該鹽不是磷酸鈣、不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣，還涉及由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所組成的鹽、或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所組成的鹽、以及它們的水合物作為一種佐劑組合物的組分的應(yīng)用，前提條件是該鹽不是磷酸鈣、不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣。
單獨(dú)或聯(lián)合使用這些鹽也屬于本發(fā)明的范圍。復(fù)鹽如雙-和三-陽離子或陰離子的鹽的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的范圍。
該鹽可以是有機(jī)或無機(jī)鹽，但優(yōu)選地使用由無機(jī)鹽所組成的鹽。
所用的鹽特別是選自與氧化物、過氧化物、氫氧化物、碳酸鹽、磷酸鹽、焦磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、硫酸鹽、以及硅酸鹽形成的鹽、和它們的水合物。
在一個實(shí)施方案中，所用的鹽選自Mg、Ca、Ba、Ti、或Zr與氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及這些鹽的水合物。
在另一個實(shí)施方案中，所用的鹽選自鎂和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈣和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鋇和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈦和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及鋯和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物。
在特定的實(shí)施方案中，所用的鹽選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、二氧化鈦、碳酸鈣、氫氧化鋇、過氧化鋇、碳酸鋇、硫酸鋇、硫酸鈣、硅酸三鈣、焦磷酸鈣、過氧化鈣、氫氧化鈣、磷酸三鈣、磷酸氫鈣、磷酸二氫鈣、硫酸鈣二水合物、碳酸鎂、硫酸鎂、磷酸三鎂、硅酸鎂、三硅酸鎂、焦硫酸鈦、硫酸鋯、過氧化鍶、以及碳酸鍶。
在目前優(yōu)選的實(shí)施方案中，所用的鹽選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、以及二氧化鈦、或氫氧化鎂和堿式碳酸鎂五水合物的組合物、氫氧化鎂和二氧化鈦的組合物、堿式碳酸鎂五水合物和二氧化鈦的組合物、或氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、和二氧化鈦的組合物。
在第五方面，本發(fā)明涉及一些在個體中產(chǎn)生免疫反應(yīng)的方法，該方法包括給該個體服用本發(fā)明的非腸道的疫苗制劑。
在第六方面，本發(fā)明確保了能對包括人在內(nèi)的脊椎動物進(jìn)行接種或治療，所說的接種或治療包括給該個體服用本發(fā)明的疫苗制劑。
如上所述，本發(fā)明的非腸道的疫苗組合物包含至少一種致免疫物質(zhì)。因此，對包含二、三、四、五、六或更多種免疫物質(zhì)的情況進(jìn)行了考察，相信這種聯(lián)合在一些情況種是有利的。致免疫物質(zhì)的數(shù)量取決于所討論的致免疫物質(zhì)或致免疫物質(zhì)的組合物。但是，在一些情況中，由于該佐劑鹽的有益作用，可以考慮減少所需的該致免疫物質(zhì)的數(shù)量。因此，各種致免疫物質(zhì)的數(shù)量一般在0.0001至100000μg/劑量的范圍內(nèi)，如0.01至10000μg/劑量、0.1至1000μg/劑量、或1至100μg/劑量。
本發(fā)明的疫苗制劑的給藥可以通過單次給藥或分成幾次給藥來進(jìn)行。在某些情況中，只給藥一次就足夠了。一般而言，幾次給藥之間應(yīng)該有一天、一周、兩周、一個月、或幾個月等等的間隔。例如，可以給予一次單劑量，或可以給予一個首劑量，然后再進(jìn)行一次或多次加強(qiáng)接種，或可以以例如高至一周四次的方案來進(jìn)行連續(xù)接種，然后在接下來的一個月不進(jìn)行接種，然后再以高至一周四次的頻率來進(jìn)行接種(可增加或不增加免疫原的數(shù)量)，等等。在不同的接種中可以使用相同或不相同的佐劑或佐劑組合物。這些是全部的實(shí)例，最佳的接種方案取決于所討論的致免疫物質(zhì)和一些其它的因素。現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)人員很清楚應(yīng)該如何對其進(jìn)行優(yōu)化。
本發(fā)明的佐劑組合物可以通過向干態(tài)的鹽中加入液體來形成該佐劑鹽的混懸液或凝膠來進(jìn)行制備，其中所說的液體中可以包含或不包含緩沖劑、其它的鹽、溶劑或賦形劑，或者可以通過向預(yù)先制成的已經(jīng)進(jìn)行了預(yù)平衡的該佐劑鹽的凝膠中加入包含或不包含緩沖劑、其它的鹽、賦形劑的液體來進(jìn)行制備。然后用所需的致免疫物質(zhì)，通過將該佐劑組合物與該致免疫物質(zhì)進(jìn)行混合而將該佐劑組合物制成疫苗制劑，并且，如果需要的話，在灌裝之前使之進(jìn)行平衡。另一種選擇是將該佐劑組合物和該致免疫物質(zhì)以更濃縮的形式進(jìn)行混合，因此要在以后進(jìn)行稀釋。
因此，在第七方面，本發(fā)明涉及一種制備本發(fā)明非腸道的疫苗制劑的方法，該方法包括向干態(tài)或預(yù)先制備成凝膠態(tài)的由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所形成的鹽、或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所形成的鹽中加入液體，其中所說的鹽不是磷酸鈣、不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣，從而獲得一種佐劑組合物，然后將所說的佐劑組合物與一種或多種致免疫物質(zhì)和任選的可藥用載體和/或賦形劑進(jìn)行混合，從而獲得非腸道的疫苗制劑。
在第八方面，本發(fā)明涉及通過上面所定義的方法而獲得的非腸道的疫苗制劑。
用于混合及儲存本發(fā)明的佐劑組合物和疫苗制劑的容器可以是由玻璃或各種聚合物材料組成的。所選擇的容器不吸附所存儲的產(chǎn)品。該容器可以適宜的是用于單-或多劑量的安瓿或蓋有蓋子的小瓶。
用如下的實(shí)施例來對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的說明。
實(shí)施例在下面，將對用于完成實(shí)施例1和2的多數(shù)過程和方案進(jìn)行描述。
致免疫物質(zhì)包含3.0mg蛋白質(zhì)/ml的破傷風(fēng)類毒素(TT)，(從StatensSerum Institut獲得，DK-2300 Copenhagen S，丹麥)。包含作為佐劑的氫氧化鋁的疫苗制劑，每個劑量包含30μg、10μg或1μgTT(分別為300μg/ml、100μg/ml、和10μg/ml)，和包含作為本發(fā)明的佐劑的氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物或二氧化鈦的本發(fā)明的疫苗制劑，以及不包含佐劑的疫苗制劑(被定義為“無佐劑”)，所有的疫苗制劑在每個劑量中都包含1μg TT(10μg/ml)。
佐劑下面所表示的克分子濃度是對最終的疫苗制劑而言的氫氧化鋁，Al(OH)30.045-0.05M Al3+(1.25mg Al3+/ml)。是用Alhydrogel1.3％(Superfos，DK-2950 Vedbk，丹麥)進(jìn)行制備的。
氫氧化鎂，Mg(OH)20.05M Mg2+。是用Mg(OH)2凝膠(Reheis，USA)進(jìn)行制備的。
堿式碳酸鎂五水合物，(MgCO3)4Mg(OH)25H2O，0.05M Mg2+。是用堿式碳酸鎂五水合物(Sigma USA)進(jìn)行制備的。
二氧化鈦，TiO2，0.05M Ti4+。是用二氧化鈦顏料(Kemira，芬蘭)進(jìn)行制備的。
疫苗制劑的制備該疫苗制劑的制備如下將TT溶解或稀釋至最終的疫苗制劑的濃度的10倍。根據(jù)陽離子，將該佐劑溶解或稀釋至最終的疫苗制劑的濃度的5倍。將1體積的TT溶液緩慢的與2體積的佐劑進(jìn)行混合，然后使其在4℃下攪拌過夜。在接下來的一天中將7體積的Coca0.0緩沖劑(0.25％的碳酸氫鈉和0.5％的氯化鈉)緩慢的加入到其中。不含佐劑的疫苗的制備如上所述，不同之處只是用Coca0.0緩沖劑取代該佐劑來進(jìn)行。
免疫法對于各疫苗制劑而言，將6-8周大的8只雌性BALB/Ca小鼠的一些組在0天和14天在腹股溝處通過皮下處理進(jìn)行免疫。各免疫法由100μl疫苗所組成。
從0天開始，每隔7天從眼眶后的靜脈采集血樣。從該血樣中分離出血清，并將其存放于-20℃下，直至進(jìn)行分析。
分析血清樣品依靠直接酶連免疫吸著測定法(ELISA)，通過測定IgC綱的TT-特定抗體來分析血清樣品中存在的TT-特種免疫反應(yīng)。簡要地說，將免疫吸附劑板(Nunc Maxisorp，Nunc，丹麥)以公知的方法用TT進(jìn)行涂布，用牛血清白蛋白對游離的結(jié)合部位進(jìn)行阻斷。然后，將從用免疫法進(jìn)行了處理的小鼠所得的血清樣品的一系列稀釋物加入到該板上，同時用從未進(jìn)行免疫處理的BALB/Ca小時所獲得的陰性對照血清庫的一系列稀釋物進(jìn)行同樣的操作。向系列稀釋物中加入單克隆的TT-特種抗體(得自Statens Serum Institut，Copenhagen，丹麥)作為陽性對照以及內(nèi)標(biāo)，用于測定該效價。所有的樣品都是一式兩份的進(jìn)行加入。
通過先用生物素化的、用于小鼠IgG的多克隆的抗血清(得自Jackson Laboratories，Bar Harbour，ME，USA)進(jìn)行培養(yǎng)，然后再用鏈霉抗生物素-辣根過氧化物酶共軛物(得自DAKO A/S，Glostrup，丹麥)進(jìn)行了培養(yǎng)的板的系列培養(yǎng)物來測定結(jié)合的抗體。將這些板用每孔100μl的預(yù)先制備好的TMB底物(Kem-En-Tech，丹麥)來顯影(develop)20分鐘，然后用等體積的1 M的H2SO4來終止該反應(yīng)。將出現(xiàn)了顏色的反應(yīng)在450nm下測定吸收作用。
數(shù)據(jù)分析
用各小鼠個體在450nm下的吸收度及各組的幾何均值對血清的稀釋物作圖。
將測得的各血清樣品的TT-特種抗體反應(yīng)的強(qiáng)度作為相對效價，按血清稀釋物給出的信號相當(dāng)于用TT-特種單克隆抗體的3000倍稀釋物獲得的吸收信號的50％來確定。將沒有反應(yīng)的小鼠定義為效價為10，其中所說的沒有反應(yīng)的小鼠指的是其反應(yīng)與用從未進(jìn)行免疫處理的對照小鼠所獲得的血清庫所得的結(jié)果沒有區(qū)別。將有反應(yīng)，但反應(yīng)低于測定效價所需的值的小鼠定義為效價為100。
實(shí)施例1用包含作為佐劑的氫氧化鎂、碳酸鎂五水合物、或二氧化鈦的本發(fā)明的疫苗制劑所進(jìn)行的一種免疫法用如上所述的方法來制備該疫苗，在0天用如上所述的方法對小鼠進(jìn)行一次免疫。在第7天采集血樣，用如上所述的方法制備血清并對其進(jìn)行分析。
在圖1中，該結(jié)果被表示為各個小鼠的效價及各組的平均效價。所使用的佐劑被標(biāo)示在各組下面。圓括號內(nèi)的數(shù)字表示了所用免疫原(TT)的數(shù)量(μg)。
正如可以從圖1中看到的那樣，包含氫氧化鎂、碳酸鎂五水合物、或二氧化鈦?zhàn)鳛樽魟┑囊呙缰苿┰谡T導(dǎo)TT-特種抗體方面比包含Al(OH)3作為佐劑的疫苗制劑更為有效。進(jìn)行TT-特種抗體的誘導(dǎo)時，使用包含Al(OH)3的疫苗制劑時，要比使用包含氫氧化鎂、碳酸鎂五水合物、或二氧化鈦?zhàn)鳛樽魟┑囊呙缰苿┒嘤?0-30倍才能產(chǎn)生同樣多的免疫原(TT)。因此，該實(shí)驗(yàn)清楚的表明，當(dāng)在非腸道的疫苗制劑中包含本發(fā)明的佐劑時，在一次免疫后，誘導(dǎo)一種免疫反應(yīng)所需的抗原的數(shù)量下降。
實(shí)施例2用包含氫氧化鎂、碳酸鎂五水合物、或二氧化鈦?zhàn)鳛樽魟┑谋景l(fā)明的疫苗制劑所進(jìn)行的免疫用如上所述的方法來制備該疫苗制劑，在0天和第14天時用如上所述的方法，用1μg的TT來對小鼠進(jìn)行免疫。從0天至第42天，每個7天采集一次血樣，用如上所述的方法制備血清并對其進(jìn)行分析。
在圖2A和2B中表示了第7天和28天時用整個組的幾何平均效價所表示的結(jié)果。所用的佐劑被標(biāo)示在各組下面。正如可以從圖2A中所看到的那樣，包含氫氧化鎂、碳酸鎂五水合物、或二氧化鈦?zhàn)鳛樽魟┑囊呙缰苿┍劝珹l(OH)3作為佐劑的疫苗制劑能更早的誘發(fā)免疫反應(yīng)。此外，正如從圖2B中所看到的那樣，在第14天對所有的小鼠進(jìn)行第二次接種后，用包含氫氧化鎂、碳酸鎂五水合物、或二氧化鈦?zhàn)鳛樽魟┑囊呙缰苿┧T導(dǎo)的免疫反應(yīng)能誘導(dǎo)與包含Al(OH)3作為佐劑的疫苗制劑所誘導(dǎo)的特定免疫反應(yīng)強(qiáng)度相似的特定免疫反應(yīng)。
因此，當(dāng)在非腸道的疫苗制劑中包含該佐劑鹽時，可誘導(dǎo)一種作用持久的、特定的免疫反應(yīng)。此外，可以觀察到其起效更早，并且該免疫反應(yīng)的程度可以與用包含Al(OH)3作為佐劑的疫苗制劑所觀察到的結(jié)果相提并論。
參考資料1.R.K.Gupta，B.E.Rost，E.Relyveld，和G.R.Siber，鋁和鈣化合物的佐劑性質(zhì)。M.F.Powell和M.J.Newman(Eds.)，疫苗設(shè)計.亞基和佐劑法.1995Plenum Press，紐約，N.Y.，第229-248頁2.J.K.Rao，C.D.Katsetos，M.M.Herman和J.Savory，實(shí)驗(yàn)性的鋁腦脊髓病.與人類的神經(jīng)變性疾病的關(guān)系.Clin.Lab.Med.18(4)，687-698 viii(1998年12月)3.J.Savory，C.Exley，W.F.Forbes，Y.Huang，J.G.Joshi，T.Kruck.D.R.McLachlan，和I.Wakayama，J.Toxicol.Environ.Health 48(6)，615-635(1996年8月30日)4.M.J.Newman，疫苗佐劑，Exp.Opin.Ther.Patents10(3)，1-18(2000)5.D.T.O’Hagan，G.S.Ott，和G.Van Nest，在疫苗佐劑方面的最新進(jìn)展MF59乳劑和聚合物顆粒的研制，Mol.Med.Today 3(2)，69-75(1997年2月)6.“疫苗設(shè)計.亞基和佐劑法”，第7章7.J.Y.Lee等人“鈹，一種能促進(jìn)γ干擾素產(chǎn)生的佐劑”，Infection and Immunity，vol.第68卷，第7期，4032-4039XP002169720(2000年7月)8.Stas’N.F.等人“用作佐劑的氫氧化鋁的變型”，Database Biosis，Khimiko-Farmatsevticheskii Zhurnal，Vol.第24卷，第7期，65-66(1990)
權(quán)利要求
1.一種包含至少一種致免疫物質(zhì)和作為佐劑的一種或多種鹽及其水合物的非腸道的疫苗制劑，其中所說的鹽選自由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所組成的鹽、或選自由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所組成的鹽，前提條件是該鹽不是磷酸鈣、不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣。
2.如權(quán)利要求1所述非腸道的疫苗制劑，其中所說的佐劑選自無機(jī)鹽。
3.如權(quán)利要求1所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說的佐劑選自有機(jī)鹽。
4.如權(quán)利要求1-2所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說的佐劑選自與氧化物、過氧化物、氫氧化物、碳酸鹽、磷酸鹽、焦磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、硫酸鹽、和/或硅酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物。
5.如權(quán)利要求1-2、以及4所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說的佐劑選自Mg、Ca、Ba、Ti、或Zr與氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物。
6.如權(quán)利要求1-2、以及4-5所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說的佐劑選自鎂和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸形成的鹽、鈣和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鋇和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈦和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及鋯和氧化氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及這些鹽的水合物。
7.如權(quán)利要求1-2、以及4-6所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說的佐劑選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、二氧化鈦、碳酸鈣、氫氧化鋇、過氧化鋇、碳酸鋇、硫酸鋇、氧化鈹、硫酸鈣、硅酸鈣、硅酸二鈣、硅酸三鈣、焦磷酸鈣、過氧化鈣、氫氧化鈣、磷酸三鈣、磷酸氫鈣、磷酸二氫鈣、硫酸鈣二水合物、碳酸鎂、氧化鎂、二氧化鎂、硫酸鎂、磷酸三鎂、硅酸鎂、三硅酸二鎂、三硅酸鎂、焦硫酸鈦、二氧化鋯、氫氧化鋯、硫酸鋯、過氧化鍶、以及碳酸鍶。
8.如權(quán)利要求1-2、以及4-7所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說的佐劑選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、和二氧化鈦。
9.如權(quán)利要求1-8所述的非腸道的疫苗制劑，其還包含一種附加的佐劑。
10.如權(quán)利要求9所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說的附加的佐劑選自皂甙如Quil A和Qs-21、MF59、MPL、PLG、PLGA、磷酸鈣、以及鋁鹽。
11.如權(quán)利要求1-10所述的非腸道的疫苗制劑，其還包含可藥用的賦形劑和/或載體。
12.如權(quán)利要求1-11所述的非腸道的疫苗制劑，其還進(jìn)一步包含稀釋劑、緩沖劑、混懸劑、增溶劑、pH-調(diào)節(jié)劑、分散劑、和/或著色劑。
13.如權(quán)利要求1-12所述的非腸道的疫苗制劑，其用于靜脈給藥、肌肉給藥、動脈給藥、皮下給藥、真皮給藥、表皮給藥、以及腹膜內(nèi)給藥。
14.如權(quán)利要求1-13所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說佐劑的陽離子是以約0.0004至約120M的量存在的，如約0.004至約12M。
15.如權(quán)利要求14所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說佐劑的陽離子是以約0.008至約6M的量存在的。
16.如權(quán)利要求1-15所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說的佐劑是氫氧化鎂。
17.如權(quán)利要求1-15所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說的佐劑是堿式碳酸鎂五水合物。
18.如權(quán)利要求1-15所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說的佐劑是二氧化鈦。
19.如權(quán)利要求1-15所述的非腸道的疫苗制劑，其中所說的佐劑氫氧化鎂和堿式碳酸鎂五水合物的組合物、氫氧化鎂和二氧化鈦的組合物、堿式碳酸鎂五水合物和二氧化鈦的組合物、或氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、以及二氧化鈦的組合物。
20.如權(quán)利要求16-19所述的非腸道的疫苗制劑，其還進(jìn)一步包含一種附加的佐劑，該佐劑選自皂甙皂甙如Quil A和Qs-21、MF59、MPL、PLG、PLGA、磷酸鈣、以及鋁鹽。
21.用于非腸道應(yīng)用的佐劑組合物，其包含一種或多種鹽、以及其水合物，其中所說的鹽由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所形成、或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所形成的，前提條件是該鹽不是磷酸鈣、不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣。
22.如權(quán)利要求21所述的佐劑組合物，其中所說的鹽選自無機(jī)鹽。
23.如權(quán)利要求21所述的佐劑組合物，其中所說的鹽選自有機(jī)鹽。
24.如權(quán)利要求21-22所述的佐劑組合物，其中所說的鹽選自與氧化物、過氧化物、氫氧化物、碳酸鹽、磷酸鹽、焦磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、硫酸鹽、和/或硅酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物。
25.如權(quán)利要求21-22所述的佐劑組合物，其中所說的鹽選自Mg、Ca、Ba、Ti或Zr與氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物。
26.如權(quán)利要求21-22、以及24-25所述的佐劑組合物，其中所說的鹽選自鎂和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈣和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鋇和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈦和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及鋯和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物。
27.如權(quán)利要求21-22、以及24-26所述的佐劑組合物，其中所說的鹽選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、二氧化鈦、碳酸鈣、氫氧化鋇、過氧化鋇、碳酸鋇、硫酸鋇、氧化鈹、硫酸鈣、硅酸鈣、硅酸二鈣、硅酸三鈣、焦磷酸鈣、過氧化鈣、氫氧化鈣、磷酸三鈣、磷酸氫鈣、磷酸二氫鈣、硫酸鈣二水合物、碳酸鎂、氧化鎂、二氧化鎂、硫酸鎂、磷酸三鎂、硅酸鎂、三硅酸二鎂、三硅酸鎂、焦硫酸鈦、二氧化鋯、氫氧化鋯、硫酸鋯、過氧化鍶、以及碳酸鍶。
28.如權(quán)利要求21-22、以及24-27所述的佐劑組合物，其中所說的鹽選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、和二氧化鈦。
29.如權(quán)利要求21-28所述的佐劑組合物，其還進(jìn)一步包含一種附加的佐劑。
30.如權(quán)利要求29所述的佐劑組合物，其中所說的附加的佐劑選自皂甙如Quil A和Qs-21、MF59、MPL、PLG、PLGA、磷酸鈣、以及鋁鹽。
31.如權(quán)利要求21-30所述的佐劑組合物，其還進(jìn)一步包含可藥用的賦形劑和/或載體。
32.如權(quán)利要求21-31所述的佐劑組合物，其還進(jìn)一步包含稀釋劑、緩沖劑、混懸劑、增溶劑、pH-調(diào)節(jié)劑、分散劑、和/或著色劑。
33.如權(quán)利要求21-32所述的佐劑組合物，其中所說鹽的陽離子是以約0.0004至約120M的量存在的，如約0.004至約12M。
34.如權(quán)利要求33所述的佐劑組合物，其中所說鹽的陽離子是以約0.008至約6M的量存在的。
35.如權(quán)利要求21-34所述的佐劑組合物，其中所說的鹽是氫氧化鎂。
36.如權(quán)利要求21-34所述的佐劑組合物，其中所說的鹽是堿式碳酸鎂五水合物。
37.如權(quán)利要求21-34所述的組合物，其中所說的鹽是二氧化鈦。
38.如權(quán)利要求21-34所述的佐劑組合物，其中所說的鹽是氫氧化鎂和堿式碳酸鎂五水合物的組合物、氫氧化鎂和二氧化鈦的組合物、堿式碳酸鎂五水合物和二氧化鈦的組合物、或氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、以及二氧化鈦的組合物。
39.如權(quán)利要求35-38所述的佐劑組合物，其還進(jìn)一步包含一種附加的佐劑組合物，該附加的佐劑組合物選自皂甙如Quil A和Qs-21、MF59、MPL、PLG、PLGA、磷酸鈣、以及鋁鹽。
40.一種包含一種或多種鹽、以及其水合物的佐劑，其中所說的鹽由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所組成、或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所組成，前提條件是該鹽不是磷酸鈣、不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣。
41.如權(quán)利要求40所述的佐劑，其中所說的鹽選自無機(jī)鹽。
42.如權(quán)利要求40所述的佐劑，其中所說的鹽選自有機(jī)鹽。
43.如權(quán)利要求40-41所述的佐劑，其中所說的鹽選自與氧化物、過氧化物、氫氧化物、碳酸鹽、磷酸鹽、焦磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、硫酸鹽、和/或硅酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物。
44.如權(quán)利要求40-41、以及43所述的佐劑，其總所說的鹽選自Mg、Ca、Ba、Ti或Zr與氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及它們的水合物。
45.如權(quán)利要求40-41、以及43-44所述的佐劑，其中所說的鹽選自鎂和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈣和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鋇和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈦和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及鋯和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及這些鹽的水合物。
46.如權(quán)利要求40-41、以及43-45所述的佐劑，其中所說的佐劑選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、二氧化鈦、碳酸鈣、氫氧化鋇、過氧化鋇、碳酸鋇、硫酸鋇、硫酸鈣、硅酸三鈣、焦磷酸鈣、過氧化鈣、氫氧化鈣、磷酸三鈣、磷酸氫鈣、磷酸二氫鈣、硫酸鈣二水合物、碳酸鎂、硫酸鎂、磷酸三鎂、硅酸鎂、三硅酸鎂、焦硫酸鈦、硫酸鋯、過氧化鍶、以及碳酸鍶。
47.如權(quán)利要求40-41、以及43-46所述的佐劑，其中所說的鹽選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、以及二氧化鈦，或者所說的鹽選自氫氧化鎂和堿式碳酸鎂五水合物的組合物、氫氧化鎂和二氧化鈦的組合物、堿式碳酸鎂五水合物和二氧化鈦的組合物、或氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、以及二氧化鈦的組合物。
48.如權(quán)利要求40-47所述的佐劑或如權(quán)利要求21-39所述的佐劑組合物用作非腸道的疫苗制劑的組分的應(yīng)用。
49.由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所組成的鹽、或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所組成的鹽、以及這些鹽的水合物在用于非腸道給藥的疫苗制劑中用作佐劑的應(yīng)用，前提條件是所說的鹽不是磷酸鈣、不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣。
50.由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所組成的鹽、或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所組成的鹽、以及這些鹽的水合物用作佐劑組合物中的組分的應(yīng)用，前提條件是所說的鹽不是磷酸鈣、不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣。
51.如權(quán)利要求49-50所述的應(yīng)用，其中所說的鹽選自無機(jī)鹽。
52.如權(quán)利要求49-50所述的應(yīng)用，其中所說的鹽選自有機(jī)鹽。
53.如權(quán)利要求49-51所述的應(yīng)用，其中所說的鹽選自與氧化物、過氧化物、氫氧化物、碳酸鹽、磷酸鹽、焦磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、硫酸鹽、和/或硅酸鹽形成的鹽、以及這些鹽的水合物。
54.如權(quán)利要求49-51、以及53所述的應(yīng)用，其中所說的鹽選自Mg、Ca、Ba、Ti、或Zr與氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及這些鹽的水合物。
55.如權(quán)利要求49-51、以及53-54所述的應(yīng)用，其中所說的鹽選自鎂和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈣和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鋇和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、鈦和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及鋯和氧化物、過氧化物、氫氧化物、和/或碳酸鹽形成的鹽、以及這些鹽的水合物。
56.如權(quán)利要求49-51、以及53-55所述的應(yīng)用，其中所說的鹽選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、二氧化鈦、碳酸鈣、氫氧化鋇、過氧化鋇、碳酸鋇、硫酸鋇、氧化鈹、硫酸鈣、硅酸鈣、硅酸二鈣、硅酸三鈣、焦磷酸鈣、過氧化鈣、氫氧化鈣、磷酸三鈣、磷酸氫鈣、磷酸二氫鈣、硫酸鈣二水合物、碳酸鎂、氧化鎂、二氧化鎂、硫酸鎂、磷酸三鎂、硅酸鎂、三硅酸二鎂、三硅酸鎂、焦硫酸鈦、二氧化鋯、氫氧化鋯、硫酸鋯、過氧化鍶、以及碳酸鍶。
57.如權(quán)利要求49-51、以及53-56所述的應(yīng)用，其中所說的鹽選自氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、以及二氧化鈦，或者所說的鹽選自氫氧化鎂和堿式碳酸鎂五水合物的組合物、氫氧化鎂和二氧化鈦的組合物、堿式碳酸鎂五水合物和二氧化鈦的組合物、或氫氧化鎂、堿式碳酸鎂五水合物、以及二氧化鈦的組合物。
58.一種在個體中產(chǎn)生免疫反應(yīng)的方法，該方法包括給該個體使用如權(quán)利要求1-20所述的非腸道的疫苗制劑。
59.包括人類在內(nèi)的脊椎動物的接種或治療，其包括使用如權(quán)利要求1-20所述的疫苗制劑。
60.一種制備如權(quán)利要求1-20所述的非腸道的疫苗制劑的方法，該方法包括向一種干態(tài)的鹽或預(yù)先制得的鹽的凝膠中加入液體，其中所說的鹽由元素周期表中選自Mg、Ca、Sr、Ba和Ra的第2族元素所組成、或由元素周期表中選自Ti、Zr、Hf、和Rf的第4族元素所組成，該鹽不是磷酸鈣、不是與氫氧化鋁或氧化鋁結(jié)合的氫氧化鎂并且不是與氫氧化鋅、卵磷脂和聚α鏈烯結(jié)合的凝膠形式的氫氧化鈣，從而獲得一種佐劑組合物，然后將所說的佐劑組合物與一種或多種致免疫物質(zhì)以及可任選的可藥用的載體和/或賦形劑進(jìn)行混合，從而獲得該非腸道的疫苗制劑。
61.用如權(quán)利要求60所述的方法所獲得的非腸道的疫苗制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一些包含作為佐劑的某些鹽的非腸道的疫苗制劑和佐劑組合物。在使用該疫苗制劑或該佐劑組合物后，該類非腸道的疫苗制劑可用于在個體中產(chǎn)生免疫反應(yīng)。本發(fā)明還公開了這些鹽在非腸道的疫苗制劑和佐劑組合物中用作佐劑的應(yīng)用、以及包含該類鹽的疫苗組合物。
文檔編號A61P43/00GK1449294SQ01814974
公開日2003年10月15日 申請日期2001年8月9日 優(yōu)先權(quán)日2000年8月9日
發(fā)明者N·K·索尼, J·U·拉比克, S·阿斯穆爾－奧爾森, L·倫德 申請人:阿爾克-阿貝洛有限公司