專利名稱：冬蟲夏草菌(Cordy ceps sinensis Sacc)及其培養(yǎng)方法
技術領域：
本發(fā)明是用人工培養(yǎng)方法得到的一種名貴中藥材-冬蟲夏草菌，特別是具有治療有關疾病和滋補功能。
現(xiàn)有的冬蟲夏草天然資源缺乏，僅產(chǎn)于我國，生長條件苛刻，僅限于3500米以上的高原地帶，再加上生態(tài)破壞嚴重，國內(nèi)外市場貨源十分緊缺，價格昂貴，我國每公斤約2400元左右，出口每噸達到百萬美元。蟲草屬的模式種-蛹草(Cordycepsmilitalis)在溫帶地區(qū)均有分布，日本西歐等學者經(jīng)過研究，可以在人工培養(yǎng)基上完成整個世代，除蛹草以外，所有其他蟲草在人工培養(yǎng)基上或寄主上完成整個世代國際上均未報道。
本發(fā)明的目的在于用生物工程的技術來進行人工培養(yǎng)，工廠化生產(chǎn)，以解決天然冬蟲夏草資源之不足，滿足市場和醫(yī)藥衛(wèi)生事業(yè)的需要，同時也可為我國出口創(chuàng)匯作貢獻。
本發(fā)明的冬蟲夏草菌，是蟲草中分離得到，在人為的條件下進行培養(yǎng)生長，并且進行無性和有性繁殖。
1、分離(1)組織分離法取菌核、子座頭部、子座柄部三個部份進行培養(yǎng)。A、菌核分離需去掉包裹在菌核外面的幼蟲外皮，避開幼蟲的腸道，取其純白的部份切成薄片，置于培養(yǎng)基上培養(yǎng)。B、子座頭部，子座柄分離，先將它們切成薄片置培養(yǎng)基上，也可取其髓部進行培養(yǎng)。
(2)子囊孢子培養(yǎng)取冬蟲夏草子囊孢子置于土壤浸出液或紅糖水中，經(jīng)離心后，挑取子囊孢子進行培養(yǎng)。
2、蟲草菌的培養(yǎng)冬蟲夏草菌采用蔗糖，蛋白胨，牛肉膏，土壤浸出液，瓊脂，MgSO4，KH2PO4組成的培養(yǎng)基，經(jīng)過幾個月的培養(yǎng)，形成圓形，近圓形的菌落，菌落凸起，表面生長氣生菌絲，氣生菌絲不發(fā)達，呈黃褐色或白色，能形成無性孢子梗，并產(chǎn)生無性孢子，無性孢子橢圓形至腎形，后期菌落成菌核，堅實，中央可以抽出子座，產(chǎn)生有性階段。
3、侵染寄主，產(chǎn)生有性階段。
冬蟲夏草菌產(chǎn)生孢子后，將孢子洗下制成孢子懸液，接種于寄主昆蟲-蟲草蝙蝠蛾幼蟲，經(jīng)過20天左右，幼蟲體內(nèi)充滿蟲草菌而死亡成僵蟲，僵蟲經(jīng)2個月左右的時間從蟲體頭部抽出子座，用散射光照射后，子座成熟，即為冬蟲夏草。
本發(fā)明用人工培養(yǎng)方法得到的冬蟲夏草，與天然野生的冬蟲夏草比較起來，具有成本低，設備簡單，并可以工廠化生產(chǎn)，能有效地解決天然冬蟲夏草原料來源不足的問題，為我國醫(yī)藥衛(wèi)生事業(yè)的發(fā)展，出口創(chuàng)匯作貢獻。
實施例冬蟲夏草菌的培養(yǎng)基配方蔗糖15g，蛋白胨5g，牛肉膏5g，土壤浸出液，瓊脂18g，MgSO40.5g，KH2PO41g，水1000ml，生長三個月，菌落直徑約1.5cm左右，菌落凸起，邊緣光滑，有時菌落表面有輪狀紋，其上生長的氣生菌絲呈黃褐色，并能產(chǎn)生深褐色素，使培養(yǎng)基呈褐色。孢梗上下一樣粗細，或基部略粗，無性孢子呈橢圓形或腎形，有時幾個孢子可以結合在一起。菌落在培養(yǎng)基上逐漸凸起，形成堅硬的菌核，在其中間部可長出深褐的子座，子座向上伸長呈牛角狀。后分化為子座柄部、頭部，柄部略細，頭部呈棒狀。取人工培養(yǎng)的孢子制成懸液，接種于人工飼養(yǎng)的寄主昆蟲上，在10℃左右的條件下繼續(xù)飼養(yǎng)，并保持一定的溫度，當孢子萌發(fā)并侵入蟲體，在蟲體內(nèi)經(jīng)過20天左右的繁殖，蟲體僵死，僵蟲經(jīng)低溫處理后在18℃左右的溫度條件下，經(jīng)散射光的照射，就在蟲體頭部長出子座，子座成熟，即為冬蟲夏草。
權利要求
1.冬蟲夏草菌(Cordyceps sinensis Sacc)(其樣品已經(jīng)送保藏中心保存，保存號為CCTC NoM87101)的特征是從新鮮蟲草中分離，經(jīng)人工培養(yǎng)，取其孢子接種于人工飼養(yǎng)的寄主昆蟲，產(chǎn)生子座，形成菌蟲結合的復合體。
2.根據(jù)權利要求1所述的冬蟲夏草菌，其特征是培養(yǎng)基配方為蔗糖15g，蛋白胨5g，牛肉膏5g，土壤浸出液，瓊脂18g，MgSO40.5g，KH2PO41g，水1000ml。
3.根據(jù)權利要求2所述的冬蟲夏草菌，其特征是經(jīng)幾個月的培養(yǎng)，形成圓形的菌落，直徑1.5cm左右，菌落凸起，邊緣光滑，表面生長氣生菌絲，呈黃褐色或白色，無性孢子呈橢圓形或腎形，后期菌落形成堅硬的菌核，在其中間部可長出深褐的子座，子座向上伸長始，呈半角狀，后分柄部、頭部，頭部呈棒狀。
4.根據(jù)權利要求1所述的冬蟲夏草菌，其特征是接種于寄主昆蟲，在10℃左右的條件下繼續(xù)飼養(yǎng)。
5.根據(jù)權利要求4所述的冬蟲夏草菌，其特征是僵蟲經(jīng)低溫處理后在18℃左右的溫度下進行散射光照射。
全文摘要
冬蟲夏草菌是一種名貴的中藥材，(其樣品已經(jīng)送保藏中心保存，保存號為CCTCCNOM 87101)，用于治療疾病和做滋補品原料。采用生物工程技術，從天然的蟲草中分離得到，在人工培養(yǎng)基上，進行培養(yǎng)生長，并且進行無性和有性繁殖，取其孢子接種于寄主昆蟲，模擬天然環(huán)境條件，長出子座，培養(yǎng)出與天然完全相似的冬蟲夏草。有效地解決了天然資源不足，價格昂貴等問題。
文檔編號C12N5/00GK1031393SQ8810345
公開日1989年3月1日 申請日期1988年6月4日 優(yōu)先權日1988年6月4日
發(fā)明者俞永信, 許炫玉, 王文元, 方良珍, 華巍巍, 朱海影, 徐芬英 申請人:浙江省中藥研究所