本發(fā)明涉及食品、保健品領(lǐng)域，尤其涉及保肝祛酒的保健食品組合物及其制備方法。

背景技術(shù)：

中國是一個具有深厚酒文化的國家，酒早已成為國民進(jìn)行社會活動不可缺少的工具。酒精自胃腸道吸收迅速進(jìn)入血液，在兩小時內(nèi)可100％被吸收。肝臟是代謝酒精的主要器官，酒精經(jīng)過肝臟中的乙醇脫氫酶(adh)催化而生成乙醛，乙醛經(jīng)肝臟線粒體中的乙醛脫氫酶(aldh)進(jìn)一步氧化成無毒的乙酸，最終生成二氧化碳和能量。

然而，肝臟氧化代謝酒精的速度很慢，大量飲酒會造成血液中酒精的濃度急劇升高，導(dǎo)致急性酒精中毒即醉酒。急性酒精中毒后，可引起較長時間的不適，出現(xiàn)較長時間的頭痛、頭暈、失眠、乏力、震顫、胃部不適和惡心，甚至表現(xiàn)為精神遲鈍。長期過量飲酒，肝臟易發(fā)生蓄積中毒，造成干細(xì)胞酒精變性，進(jìn)而發(fā)展成為脂肪肝、肝硬化甚至肝癌。酒精性肝損害已經(jīng)成為化學(xué)性肝損傷最主要原因之一。

目前，市面上的醒酒產(chǎn)品大多是以天然蜂蜜主要材料。然而，蜂蜜本身醒酒效果有限，效果不夠好，加之天然蜂蜜供不應(yīng)求，價格昂貴，不適合產(chǎn)業(yè)化的需求。另外其他一些解酒護(hù)肝的藥物，主要成分以葛根花、甘草、淡竹葉、苦參為主，療效并不確切。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種用于保肝祛酒的保健食品組合物，包括下列重量份的原料：牡蠣：25-40份、沙棘：40-60份、維生素c：20-30份、維生素b6：0.01-1.5份。

優(yōu)選地，所述牡蠣為30-35份；所述沙棘為42-58份；所述維生素c為22-28份、維生素b6為0.01-1.5份。

優(yōu)選地，所述牡蠣為32份；所述沙棘為45份；所述維生素c為22.8份；維生素b6為0.2份。

本發(fā)明的目的在于提供一種用于保肝祛酒的保健食品組合物的制備方法，包括下列步驟：

(1)將沙棘果去除雜質(zhì)，清洗干凈，去除其果?；ǖ伲尤胨?，破碎打漿，將所得沙棘果漿擠壓取汁并將殘渣濾去，所得汁液經(jīng)過濾濃縮后干燥，制成沙棘粉；

(2)取鮮活牡蠣，破殼取全牡蠣肉，直接或水洗后放入高壓鍋中煮沸，過濾，得乳白色提取液，然后，向殘渣中再加等量純水，煮沸約30min，進(jìn)行過濾后，將此濾液與原來的提取液混合，再將提取液進(jìn)行真空蒸餾，得水分為67.34％的粘稠赤褐色流動液，將該濃縮液進(jìn)行瞬間干燥，得均勻的淺黃色微粉；

(3)取維生素c；

(4)取維生素b6；

(5)將上述四種原料按上述比例裝入混料筒內(nèi)，充分混勻，裝袋后鈷一60輻照滅菌，干燥保存。

(6)成品制備：

選擇1號機灌制劑外殼，用制劑灌裝機灌裝，0.3克/粒再采用鋁塑包裝，鋁塑包裝板與小干燥劑袋同裝入塑料袋中，最后加外包裝，制成成品。

優(yōu)選地，所述步驟(1)中所述水為凈化水，所述凈化水的重量為沙棘果的2-5倍；所述凈化水的溫度為50-70℃。

優(yōu)選地，所述步驟(1)中所述水為凈化水，所述凈化水的重量為沙棘果的3倍；所述凈化水的溫度為60℃。

優(yōu)選地，所述步驟(1)中所述破碎打漿使用篩孔孔徑為0.6-1.0毫米的打漿機；所述步驟(3)中的維生素c為粉末狀。

優(yōu)選地，所述步驟(2)中所用濾膜為0.1-0.5μm的濾膜；所用超濾膜為截止量為3500-6500的超濾膜。

優(yōu)選地，所述步驟(2)中所用濾膜為0.2μm的濾膜；所用超濾膜為截止量為5000的超濾膜。

優(yōu)選地，所述步驟(1)中所述破碎打漿使用篩孔孔徑為0.8毫米的打漿機；所述步驟(2)中過篩所用的篩子為200目。

應(yīng)當(dāng)理解，前述大體的描述和后續(xù)詳盡的描述均為示例性說明和解釋，并不應(yīng)當(dāng)用作對本發(fā)明所要求保護(hù)內(nèi)容的限制。

附圖說明

參考隨附的附圖，本發(fā)明更多的目的、功能和優(yōu)點將通過本發(fā)明實施方式的如下描述得以闡明，其中：

圖1示出了空白對照組小鼠肝臟組織圖；

圖2示出了陽性對照組小鼠肝臟組織圖；

圖3示出了保肝祛酒低劑量組小鼠肝臟組織圖；

圖4示出了保肝祛酒中劑量組小鼠肝臟組織圖；

圖5示出了保肝祛酒高劑量組小鼠肝臟組織圖。

具體實施方式

通過參考示范性實施例，本發(fā)明的目的和功能以及用于實現(xiàn)這些目的和功能的方法將得以闡明。然而，本發(fā)明并不受限于以下所公開的示范性實施例；可以通過不同形式來對其加以實現(xiàn)。說明書的實質(zhì)僅僅是幫助相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)人員綜合理解本發(fā)明的具體細(xì)節(jié)。

在下文中，將參考附圖描述本發(fā)明的實施例。在附圖中，相同的附圖標(biāo)記代表相同或類似的部件，或者相同或類似的步驟。

本發(fā)明提供了一種保肝祛酒的保健食品組合物，所屬制劑包括下述組合物：牡蠣25—40份、沙棘40-60份、維生素c20-30份、維生素b60.01—1.5份(使用量微量，每100克總藥粉中維生素b6的含量為200毫克)。將這些藥物組合是的各藥物功效產(chǎn)生協(xié)同作用，達(dá)到解酒護(hù)肝的目的。

其中沙棘由沙棘果實制粉，沙棘果實含黃酮類化合槲皮素、異鼠李素、四羥基黃酮及其苷，并含大量維生素c、維生素e、胡蘿卜素、維生素b1、維生素b2、維生素b6、維生素b12和葉酸；所含脂肪酸有肉豆蔻酸、棕櫚烯酸、棕櫚酸、硬脂酸和油酸、亞油酸、反油酸、反亞油酸、花生四烯酸、月桂酸等；此外還含有多種有機酸、皂苷、甾醇、糖類及15種微量元素。

沙棘具有以下生理功能：

(1)保護(hù)肝臟和消化系統(tǒng)

20％的沙棘果汁0.84克/千克和1.68克/千克體重對ccl4、撲熱息痛所致小鼠損傷肝中丙二醛(mda)的增高有明顯抑制作用，并能顯著降低ccl4中毒小鼠的sgpt活力，對抗撲熱息痛中毒小鼠肝谷胱甘肽(gsh)的耗竭。沙棘籽油0.25克/千克和0.5克/千克重灌胃，可明顯減少ccl4造成的肝內(nèi)壞死灶。電鏡觀察，ccl4組粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)生變化，即肝細(xì)胞漿內(nèi)小片狀嗜堿性物質(zhì)大部分消失，沙棘油可使該物質(zhì)恢復(fù)至正常水平。沙棘油還可對抗由ccl4引起的肝細(xì)胞的新陳代謝、糖合成、糖原凝固、蛋白質(zhì)合成等代謝障礙。沙棘油可防止肝細(xì)胞p450的減少，也可防止肝臟中總蛋白和水溶性蛋白的減少，以及由乙醇和ccl4起的細(xì)胞質(zhì)和微粒體、肝臟蛋白質(zhì)的減少。另外，沙棘油腹腔注射有防治脂肪肝的作用，并對3，4-氯-1-丁烯慢性中毒大鼠的肝細(xì)胞膜具有穩(wěn)定作用。

沙棘油和沙棘粉中的中性脂質(zhì)成分有很強的抗?jié)冏饔?，對利血平所致胃潰瘍有顯著對抗作用?？杉铀傥笣兒湍c損傷的愈合，降低胃黏膜脂質(zhì)過氧化物并提高中性氨基酸的濃度。另外，沙棘油和沙棘粉可使動物唾液和胃腸腺體分泌增加，胃蛋白酶含量升高。同時對胃腸運動機能有刺激作用，節(jié)律性收縮周期延長，振幅增大。

(2)清除自由基

當(dāng)每毫升沙棘溶液中含1.7毫克沙棘總黃酮時對pma刺激多形核人白細(xì)胞(pmn)生成的活性氧自由基有明顯清除作用，當(dāng)每升沙棘溶液中含0.03-3毫克沙棘總黃酮時對黃嘌呤/黃嘌昤氧化酶系統(tǒng)的活性氧自由基有顯著劑量依賴性的清除作用，但對光照核黃素產(chǎn)生活性氧自由基的清除作用較弱。當(dāng)每升沙棘溶液中含沙棘總黃酮3毫克時對fenton反應(yīng)生成的ho·有明顯清除作用，當(dāng)每升沙棘溶液中含1毫克沙棘總黃酮還能顯著抑制多核人白細(xì)胞產(chǎn)生的活性發(fā)光。

沙棘油2.5毫克/千克體重對小鼠進(jìn)行腹腔注射，有抗氧化作用及防止脂肪肝作用，并能調(diào)節(jié)組織中脂質(zhì)過氧化速度及維生素e水平。沙棘油與維生素e相似，對高脂血清損傷的血管平滑肌細(xì)胞有保護(hù)作用，能明顯降低高脂損傷平滑肌細(xì)胞內(nèi)升高的脂質(zhì)過氧化物(lop)的含量，并能明顯提高sod的活性，從而減輕高脂血清對細(xì)胞膜的損傷，保護(hù)并促進(jìn)細(xì)胞的健康生長。

(3)抗疲勞及其他

沙棘粉富含維生素c及多種微量元素，對消除疲勞及增強運動能力有良好的影響，還可明顯地改善心臟功能。小鼠腹腔注射沙棘總黃酮2毫克/千克體重，連續(xù)6天，體重凈增加明顯高于對照組。

大劑量的沙棘濃縮液可明顯延長戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠的時間。沙棘籽油能顯著抑制小鼠腦內(nèi)單胺氧化酶的活性。

另外沙棘還具有增強免疫，改善心血管系統(tǒng)和造血系統(tǒng)功能，以及抗腫瘤抗輻射和抗炎癥等功能。本發(fā)明使用的沙棘粉是釆用先進(jìn)生產(chǎn)工藝進(jìn)行制備，有效地保存了沙棘果中所含有的所有功能成分，因此具備上述所述的各項功能。

牡蠣的生理功能：

牡蠣是名貴海珍，它不僅味道鮮美，滋補保健作用也為古今中外所稱道。牡蠣富含維生素b群、肌醇、膽堿和鋅、鐵等礦物質(zhì)。

牡蠣對人體的益處是很多的：

(1)牡蠣富含的礦物質(zhì)硒、鋅等微量元素可促進(jìn)身體的免疫功能，預(yù)防感冒，另外鋅可促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成，因而具有增強體力，恢復(fù)精神的效果。

(2)牡蠣含20％以上的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，其氨基酸組成完善，超過牛乳和人乳。

(3)牡蠣含脂類雖少，但多為具有生理活性的復(fù)合磷脂、磷酸肌醇、廿碳五烯酸(epa)、廿二碳六烯酸(dha)等。這些成分都有防止動脈硬化、抗血栓以及抗衰老作用。

(4)牡蠣富含天然?；撬?。?；撬嵊邢捉舛?、保肝利膽、降血脂、促進(jìn)幼兒大腦發(fā)育及安神健腦等作用，其效果體現(xiàn)在：

1)保肝利膽，增進(jìn)肝臟機能，提高肝臟的解毒功能；

2)促進(jìn)乳酸分解，松弛平滑肌，消除疲勞；

3)促進(jìn)膽汁分泌、脂肪的乳化，降血脂；

4)消炎、解熱止痛；

5)抑制酒精毒力。

6)牡蠣所含糖份為糖元，其提取物中糖元占20-40％。糖元是組織能源物質(zhì)的儲備形式，是體力腦力活動效率及持久力的物質(zhì)保證。

維生素c的生理功能：

(1)氧化還原作用

在生物體內(nèi)，維生素c/dhvc的氧化還原反應(yīng)與巰基(—sh)/雙硫鍵(—s—s)系統(tǒng)相聯(lián)系。因此維生素c可使體內(nèi)—sh水平提高。維生素c在體內(nèi)可能有清除自由基的作用，有些化學(xué)物質(zhì)對機體的損害，都涉及到自由基的作用，如氧、臭氧、二氧化氮、酒精、四氯化碳及抗癌藥中的阿拉霉素對心臟的損傷。維生素c作為體內(nèi)水溶性的抗氧化劑，可與脂溶性抗氧化劑有協(xié)同作用，可能在防止脂類過氧化作用上起一定的作用、人眼晶體在光的作用下，也可產(chǎn)生o2的自由基，可能為白內(nèi)障產(chǎn)生的原因。這些自由基在正常情況下為體內(nèi)抗氧化劑如維生素c、麥胱甘肽所清除、所以大量的維生素c可以阻止這種過氧化作用的破壞。

(2)維生素c影響某些藥物代謝

①維生素c對肝微粒體酶系統(tǒng)的影響；一些脂溶性藥物在肝微粒體酶系統(tǒng)作用下，進(jìn)行羧基化及去四基化，成為極性化合物后，易于從膽汁及尿中排出解毒。有機氯殺蟲劑能透發(fā)微粒體酶活力。但此酶系統(tǒng)對維生素營養(yǎng)情況反應(yīng)比較敏銳。維生素c缺乏的程度尚未達(dá)到體重下降時，微粒體中羥基化酶系統(tǒng)的活力已下降，其中以細(xì)胞色素還原酶的減少最多，約減85％，補充維生素c后，組織中維生素c量在較短時間內(nèi)恢復(fù)正常，但酶活力恢復(fù)較慢。

②維生素c還具有去組胺作用以及防止聯(lián)苯胺、萘胺及亞硝鹽的致癌作用。

維生素b6的生理功能：

主要以磷酸吡多醛(plp)形式參與近百種酶反應(yīng)。多數(shù)與氨基酸代謝有關(guān)：包括轉(zhuǎn)氨基、脫羧、側(cè)鏈裂解、脫水及轉(zhuǎn)硫化作用。這些生化功能涉及多方面。

1、參與蛋白質(zhì)合成與分解代謝，參與所有氨基酸代謝，如與血紅素的代謝有關(guān)，與色氨酸合成煙酸有關(guān)。

2、參與糖異生、ufa代謝。與糖原、神經(jīng)鞘磷脂和類固醇的代謝有關(guān)。

3、參與某些神經(jīng)介質(zhì)(5-羥色胺、?；撬?、多巴胺、去甲腎上腺素和γ-氨基丁酸)合成。

4、維生素b6與一碳單位、維生素b12和葉酸鹽的代謝，如果它們代謝障礙可造成巨幼紅細(xì)胞貧血。

5、參與核酸和dna合成，缺乏會損害dna的合成，這個過程對維持適宜的免疫功能是非常重要的。

6、維生素b6與維生素b2的關(guān)系十分密切，維生素b6缺乏常伴有維生素b2癥狀。

7、參與同型半胱氨酸向蛋氨酸的轉(zhuǎn)化，具有降低慢性病的作用，輕度高同型半胱氨酸血癥被認(rèn)為是血管疾病的一種可能危險因素，維生素b6的干預(yù)可降低血漿同型半胱氨酸含量。

本發(fā)明的解酒護(hù)肝制劑的制備過程如下：

(1)沙棘粉的制備：

選取新鮮、良好、完全成熟、呈橙黃色或桔紅色的沙棘果，人工去除其中夾雜的枝葉土石塊等雜質(zhì)，用清水清洗干凈，洗去其上所粘附的泥沙、蟲卵等，清洗干凈的沙棘經(jīng)修整去除其果?；ǖ俚?，加入2-5倍重量為50-70x的凈化水，均勻地送入打漿機進(jìn)行破碎打漿，打漿機的篩孔孔徑應(yīng)在0.6-1.0毫米左右，所得沙棘果漿用螺旋20榨汁機進(jìn)行擠壓取汁并將殘渣濾去，擠壓所得汁液經(jīng)過濾濃縮后，采用真空低溫噴霧干燥法，制成沙棘粉。

(2)牡蠣的制備：

取鮮活牡蠣，破殼取全牡蠣肉，直接或水洗后放入高壓鍋中(壓力為98kpa)，加等比例純水(重量比)，在98kpa的壓力下煮沸約30min，恢復(fù)常壓后，用濾紙減壓過濾，得乳白色提取液。

然后，向殘渣中再加等量純水，煮沸約30min，進(jìn)行過濾后，將此濾液與原來的提取液混合，再將提取液進(jìn)行真空(0.133-0.66kpa,溫度70-80℃)蒸餾，得水分為67.34％的粘稠赤褐色流動液，該液體與真空蒸餾前相比色淡。將該濃縮液利用普通的噴霧干燥方式(瞬間熱風(fēng)溫度為180℃，出口溫度為80℃，滴下速度為每分鐘30ml)進(jìn)行瞬間干燥，得均勻的淺黃色微粉待用。

(3)維生素c。

(4)維生素b6。

(5)半成品制備：

將上述四種原料藥按上述比例裝入混料筒內(nèi)，充分混勻，裝袋后鈷一60輻照滅菌(5kgy)，干燥保存。

(6)成品制備：

選擇1號機灌制劑外殼，用制劑灌裝機灌裝，0.3克/粒再采用鋁塑包裝，鋁塑包裝板與小干燥劑袋同裝入塑料袋中，最后加外包裝，制成成品。

根據(jù)制劑的需要，本發(fā)明保健食品組合物中可以含有藥劑字領(lǐng)域中常用的藥物賦形刑，例如，

溶劑、填充劑、調(diào)味劑、崩解劑、粘合劑、潤滑劑、潤濕劑、色素、增容劑、稀釋劑、增稠劑等，以常規(guī)的中藥制劑方法制備成任何一種常用口服劑型，如丸劑、散劑、片劑、膠囊劑、口服液等。本發(fā)明用于保肝祛酒的保健食品組合物的優(yōu)選劑型是膠囊劑(以下簡稱之為護(hù)肝膠囊)。

本發(fā)明用于保肝祛酒的保健食品組合物具有明顯的解酒護(hù)肝的功效，祛酒滋補的功效。

本發(fā)明用于保肝祛酒的保健食品組合物的服用方法為日常用量每日1次，每次3粒。

本發(fā)明用于保肝祛酒的保健食品組合物可以明顯增加體內(nèi)乙醇脫氫酶的活性，具有較好的解酒功能。藥理實驗表明，服用用于保肝祛酒的保健食品組合物的小鼠在連續(xù)給酒15天后，肝細(xì)胞較正常小鼠肝細(xì)胞無明顯變化，而未用用于保肝祛酒的保健食品組合物的小鼠連續(xù)給酒15天后，肝細(xì)胞則出現(xiàn)明顯的酒精樣病變，說明該用于保肝祛酒的保健食品組合物護(hù)肝作用明顯。該用于保肝祛酒的保健食品組合物在北京市疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行了毒理學(xué)安全性評價、保健功能評價、功效成份鑒定、穩(wěn)定性及衛(wèi)生學(xué)檢驗等實驗，所有指標(biāo)均達(dá)到檢驗要求。人體實驗亦表明，該藥物組合可以增加乙醇脫氫酶的活性對酒精性肝損傷有明顯的保護(hù)作用。

以下通過試驗例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述用于保肝祛酒的保健食品組合物(以下簡稱護(hù)肝膠囊)的有益效果，這些試驗例包括了本發(fā)明用于保肝祛酒的保健食品組合物的藥效學(xué)試驗和臨床療效試驗。

下面介紹功效成分、含量及功效成分的檢驗方法

1.功效成分

沙棘粉主要功效成分是總黃酮，牡蠣主要功效成分是微量元素，因此檢測產(chǎn)品中總黃酮、維生素c的含量，即可達(dá)到控制產(chǎn)品質(zhì)量的目的。

2.含量：

黃酮(毫克/100克)310

維生素c(克/100克)20

維生素b6(毫克/100克)10

3.檢驗方法：

3.1維生素c含量測定：

符合“中華人民共和國藥典”,2015年版的一般規(guī)定。

3.2總黃酮的測定方法

3.2.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取0.0210g蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品于100ml容量瓶中加甲醇溶解并定容至刻度搖勻再準(zhǔn)確分取5ml該溶液于50ml容量瓶中用甲醇稀釋至刻度搖勻。

3.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

準(zhǔn)確吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0.00ml、1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00ml、5.00ml、6.00ml、7.00ml于磁蒸發(fā)皿中加1g聚酰胺粉吸附于85℃水浴上揮去甲醇，然后轉(zhuǎn)入層析柱用甲醇洗脫黃酮至25ml比色管中之后加甲醇定容至刻度搖勻在360nm波長處測定吸光值以蘆丁的微克量為橫坐標(biāo)吸光值為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

回歸方程y＝5.841667e－04+7.889331e－04*x，相關(guān)系數(shù)r＝0.999246。

3.2.3測定方法

準(zhǔn)確移取5ml保健茶飲料于磁蒸發(fā)皿中加1g聚酰胺粉吸附于85℃水浴上揮去水分然后轉(zhuǎn)入層析柱上用甲醇洗脫黃酮至25ml比色管中之后用甲醇定容至刻度搖勻此液于360nm處測定吸光值根據(jù)從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的蘆丁微克量計算樣品中總黃酮的含量(以蘆丁計)。

3.3維生素b6的測定：

維生素b6標(biāo)準(zhǔn)：遵從“中華人民共和國藥典”,2015年版，適用于藥物、食物及飼料的檢測的規(guī)定。

實施例1激活乙醇脫氫酶的體外實驗：

乙醇脫氫酶活性測定方法：采用瓦勒一霍赫(vaell&hoch)法，并稍加改良后檢測乙醇脫氫酶活性。在測定管中加入焦磷酸鈉緩沖液1.5ml，混合后在25℃下，加蓋溫育5mn。溫育后的測定管立即加入乙醇脫氫酶0.lml，搖勻后立即用分光光度計測定吸光度(a340)值，以后每隔10s讀數(shù)一次，連續(xù)測定5mn。以對照管調(diào)定零點，不加保健食品組合物的反應(yīng)組為測定乙醇脫氫酶活性的空白對照組。

乙醇脫氫酶活性計算方法：以a對時間作圖，取反應(yīng)最初線性部分，計算a340nm/10s的增加值，根據(jù)nadh在340nm處的摩爾消光系數(shù)為6.2，計算酶的活力單位。adh的活性以每分鐘nadh生成的納摩爾數(shù)表示。

抑制(激活)率計算：

抑制(激活)率(％)＝{酶活性無藥對照組一酶活性加藥測定組}/酶活性無藥對照組x100％

上述每種中藥實驗均重復(fù)3次，所測實驗數(shù)據(jù)以x士s表示，采用t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析

結(jié)果：

表1結(jié)果表明低劑量保肝祛酒膠囊、中劑量保肝祛酒膠囊、高劑量保肝祛酒膠囊均使乙醇脫氫酶活性提高，激活率分別為12.75％、15.12％、16.33％，說明保肝祛酒膠囊具有激活乙醇脫氫酶活性的作用，而且劑量越高乙醇脫氫酶激活率越高。

實施例2保肝祛酒動物實驗

動物分組：將小鼠隨機分成六組，每組8只，雌雄各半，其中5組造急性酒精性肝損傷模型：即陽性對照組，解酒護(hù)肝膠囊組，給藥低劑量組，中劑量組，高劑量組；另設(shè)空白對照組。造模及給藥劑量，除空白對照組外的5組動物灌胃前禁食不禁水6h，小鼠按0.14m/10g灌胃二鍋頭；20min后，給藥組小鼠按低、中、高劑量(0.15g/kg、0.3g/kg、0.45g/kg，分別為成人每天用量5、10、15倍)灌服解酒護(hù)肝膠囊；陽性對照組灌服同體積生理鹽水；空白對照組正常飼養(yǎng)；連續(xù)給藥30d。

實驗操作：實驗每天于第一次灌酒后開始計時，記錄醉酒和醒酒動物數(shù)(在同一時間內(nèi))，計算醒酒率和醒醉比；出現(xiàn)翻正反射陽性視為醉酒(將動物四肢向上仰臥于平臺，30s不能自行翻過身體者為陽性，反之為陰性)，翻正反射陰性視為醒酒。醉酒時間和醒酒時間分別記為耐受時間和恢復(fù)時間，每周記錄一次各組小鼠體重的變化情況，30d后測小鼠的lpo值和全血的sod值；實驗前，禁食12小時，摘除眼球采血，檢測血清的lpo值和全血的sod值，采血后處死小鼠，取小鼠肝臟做病理切片。

小鼠血清的lpo、全血的sod值的測定方法：脂質(zhì)過氧化物酶(lpo)、超氧化物歧化酶(sod)按其試劑盒規(guī)定的方法操作。

肝組織病理切片觀察：肝組織通過切片后做顯微鏡檢觀察，拍照。

結(jié)果表示及數(shù)據(jù)分析：采用spss11.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

結(jié)果如下：

1.保肝祛酒膠囊對小鼠體重的影響

表2各實驗組小鼠1-2周體重變化結(jié)果

注：與空白對照組比較**表示p<0.01*表示p<0.05

表3各實驗組小鼠3-4周體重變化結(jié)果

注：與空白對照組比較**表示p<0.01*表示p<0.05

表2、表3的各實驗組小鼠體重變化的結(jié)果表明，與空白對照組小鼠的體重變化相比，在飼養(yǎng)30天期間，其它組小鼠變化偏小，與陽性對照組小鼠相比，服用保肝祛酒膠囊的小鼠體重趨于正常。

2.保肝祛酒膠囊對小鼠酒精耐受時間和恢復(fù)時間的影響

表4各模型組小鼠酒精耐受時間和恢復(fù)時間結(jié)果

注：與陽性對照組比較**表示p<0.01

從上表4可見，與陽性對照組相比，服用保肝祛酒膠囊組小鼠的酒精耐受時間明顯要加長，恢復(fù)時間明顯縮短，有顯著差異，其中中高劑量組的效果更好。

3.保肝祛酒膠囊對小鼠醉酒率的影響

表5各模型組小鼠在相同時間內(nèi)的醉酒結(jié)果

結(jié)果表明，在一定時間內(nèi)，陽性對照組小鼠醉倒率為100％，保肝祛酒膠囊組的醉倒率明顯降低，其中中高劑量組小鼠醉倒率更低，提示一定量的保肝祛酒膠囊可以有效降低小鼠的醉酒率。

4.保肝祛酒膠囊對小鼠肝臟lpo值的影響

表5各實驗組小鼠肝勻漿lpo值

注：與空白對照組比較，*表示p<0.05

結(jié)果表明，與空白對照組相比，其它各組小鼠肝lpo值升高，與陽性對照組相比，給藥各組的lpo值明顯降低，其中中高劑量組降低更為顯著，說明保肝祛酒膠囊能有效降低小鼠肝lpo值。

5.保肝祛酒膠囊對小鼠全血sod活性的影響

表6各實驗組小鼠全血sod值

注：與空白對照組比較，*表示p<0.05

實驗結(jié)果表明，與空白對照組相比，其余各實驗組小鼠全血sod值均降低，與陽性對照組相比，給藥組的sod值有顯著提高，說明保肝祛酒膠囊能夠有效提高小鼠全血的sod活性。

各實驗組小鼠肝臟組織病理分析

圖1為空白對照組小鼠肝臟組織圖；

圖2為陽性對照組小鼠肝臟組織圖；

圖3為保肝祛酒低劑量組小鼠肝臟組織圖；

圖4為保肝祛酒中劑量組小鼠肝臟組織圖；

圖5為保肝祛酒高劑量組小鼠肝臟組織圖。

參見圖1-圖5，以上結(jié)果表明，在飼養(yǎng)30d后，空白對照組小鼠，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝索以中央靜脈為中心呈放射狀排列，細(xì)胞呈多面體，單核，偶見雙核，核大且圓，位于細(xì)胞中央；陽性對照組小鼠，肝細(xì)胞明顯腫脹、壞死，胞質(zhì)疏松，彌漫性氣球樣變，胞質(zhì)可見數(shù)量不一，大小不等脂滴空泡：解酒護(hù)肝膠囊組小鼠，肝小葉結(jié)構(gòu)基本正常，肝索以中央靜脈為中心呈放射狀排列；高劑量組小鼠，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝索以中央靜脈為中心呈放射狀排列，細(xì)胞呈多面體，單核，偶見雙核，核大且圓，位于細(xì)胞中央；中劑量組和低劑量組小鼠，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常，有輕度渾濁、腫脹、脂變，以上表明保肝祛酒膠囊能夠有效的保護(hù)小鼠肝組織。

2.以下通過實施例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明用于保肝祛酒的保健食品組合物及其制備方法：

實施例1

本發(fā)明護(hù)肝膠囊原料組份的重量是：

沙棘45千克

牡蠣32千克

維生素c粉劑22.8千克

維生素b60.2千克

本發(fā)明護(hù)肝膠囊的制備過程如下：

(1)沙棘的制備：

選取新鮮、良好、完全成熟、呈橙黃色或桔紅色的沙棘果，人工去除其中夾雜的枝葉土石塊等雜質(zhì)，用清水清洗干凈，洗去其上所粘附的泥沙、蟲卵等，清洗干凈的沙棘經(jīng)修整去除其果?；ǖ俚龋尤?倍重量為60℃的凈化水，均勻地送入打漿機進(jìn)行破碎打漿，打架機的篩孔孔徑應(yīng)在0.8毫米左右，所得沙棘果漿用螺旋榨汁機進(jìn)行擠壓取汁并將殘渣濾去，擠壓所得汁液經(jīng)過濾濃縮后，采用真空低溫噴霧千燥法，制成沙棘粉。

(2)牡蠣的制備：

取鮮活牡蠣，破殼取全牡蠣肉,直接或水洗后放入高壓鍋中(壓力為98kpa)，加等比例純水(重量比)，在98kpa的壓力下煮沸約30min，恢復(fù)常壓后，用濾紙減壓過濾，得乳白色提取液。

然后，向殘渣中再加等量純水，煮沸約30min，進(jìn)行過濾后，將此濾液與原來的提取液混合，再將提取液進(jìn)行真空(0.133-0.66kpa,溫度70-80℃)蒸餾，得水分為67.34％的粘稠赤褐色流動液，該液體與真空蒸餾前相比色淡。將該濃縮液利用普通的噴霧干燥方式(瞬間熱風(fēng)溫度為180℃，出口溫度為80℃，滴下速度為每分鐘30ml)進(jìn)行瞬間干燥，得均勻的淺黃色微粉待用。

(3)維生素c粉劑：市售的藥品級維生素c粉；

(4)維生素b6粉劑：市售的藥品級維生素b6粉

(5)半成品制備：

取沙棘粉45千克、牡蠣32千克、維生素c22.8千克、維生素b60.2千克裝入混料筒內(nèi)，充分混勻，裝袋后鈷一60輻照滅菌(5kgy)，千燥保存。

(6)成品制備：

選擇1號機灌膠囊外殼，用膠囊灌裝機灌裝，0.3克/粒，再采用鋁塑包裝，鋁塑包裝板與小干燥劑袋同裝入塑料袋中，最后加外包裝，制成成品。

結(jié)合這里披露的本發(fā)明的說明和實踐，本發(fā)明的其他實施例對于本領(lǐng)域技術(shù)人員都是易于想到和理解的。說明和實施例僅被認(rèn)為是示例性的，本發(fā)明的真正范圍和主旨均由權(quán)利要求所限定。