本發(fā)明屬于實驗動物營養(yǎng)學(xué)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種基因編輯實驗鼠飼料。

背景技術(shù)：

基因編輯技術(shù)指能夠讓人類對目標(biāo)基因進(jìn)行編輯，實現(xiàn)對特定dna片段的敲除、加入等。主要有以下三個執(zhí)行手段：（1）基因敲除：如果想使某個基因的功能喪失，可以在這個基因上產(chǎn)生雙鏈dna斷裂（dsb），非同源末端連接修復(fù)的過程中往往會產(chǎn)生dna的插入或刪除，造成移碼突變，從而實現(xiàn)基因敲除；（2）特異突變引入：如果想把某個特異的突變引入到基因組上，需要通過同源重組來實現(xiàn)，這時提供一個含有特異突變同源模板。正常情況下同源重組效率非常低，而在這個位點產(chǎn)生dsb會極大的提高重組效率，從而實現(xiàn)特異突變的引入；（3）定點轉(zhuǎn)基因：與特異突變引入的原理一樣，在同源模板中間加入一個轉(zhuǎn)基因，這個轉(zhuǎn)基因在dsb修復(fù)過程中會被拷貝到基因組中，從而實現(xiàn)定點轉(zhuǎn)基因。通過定點轉(zhuǎn)基因的方法可以把基因插入到人的基因組aavs1位點，這個位點是一個開放位點，支持轉(zhuǎn)基因長期穩(wěn)定的表達(dá)，破壞這個位點對細(xì)胞沒有不良影響，因此被廣泛利用。

目前，隨著基因編輯技術(shù)的成熟，通過基因編輯技術(shù)處理的實驗鼠動物模型在人類疾病的研究領(lǐng)域的地位日漸重要。特別是實驗鼠與人類基因組高度同源，對于人類疾病特點和藥物效果反應(yīng)高度一致，因此實驗鼠已經(jīng)是人類疾病研究中最重要的實驗動物。

由于通過基因編輯后的實驗鼠免疫系統(tǒng)功能明顯弱于常規(guī)實驗鼠，因此其具有生長緩慢、繁育能力低下等特點，使用常規(guī)的實驗鼠飼料飼喂基因編輯后的實驗鼠會引起營養(yǎng)不良、生育能力退化以及導(dǎo)致實驗鼠死亡，因此需要針對基因編輯實驗鼠研發(fā)專用飼料。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足，發(fā)明人經(jīng)過科學(xué)設(shè)計、實驗觀察，研制了一種基因編輯實驗鼠飼料，用于通過基因編輯技術(shù)處理后的模式實驗鼠的生長繁殖。

本發(fā)明的上述目的是通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)的。

一種基因編輯實驗鼠飼料，包括如下重量份數(shù)的各組分：玉米30-35份、小麥10-15份、豆粕15-20份、碎米5-12份、魚粉3-10份、油1-5份、酵母水解物2-9份、石粉0.8-1.2份、磷酸氫鈣1-2份、復(fù)合礦物質(zhì)0.5-1份、復(fù)合維生素0.1-0.5份、蛋氨酸0.1-0.2份、賴氨酸0.1-0.2份。

由于基因編輯實驗鼠自身的生理特性，如果用常規(guī)的實驗鼠飼料飼喂后極易導(dǎo)致實驗鼠生長緩慢、繁育性能低下甚至死亡，本發(fā)明通過使用玉米、小麥、豆粕、碎米、魚粉、油、酵母水解物、石粉、碳酸氫鈣、復(fù)合礦物質(zhì)、復(fù)合維生素、蛋氨酸、賴氨酸為原料制成實驗鼠飼料，具有適口性好、營養(yǎng)均衡、促進(jìn)生長繁育效果明顯，能夠增加采食量和成活率的功效。具體而言，所述豆粕作為大豆提取豆油后的一種副產(chǎn)品，有豆粕的特殊香味，是實驗鼠飼料的主食之一。所述酵母水解物為酵母細(xì)胞的水解產(chǎn)物，通過自溶或通過外加酶水解得到，富含氨基酸、小肽、谷胱甘肽及核酸類物質(zhì)。本配方中豆粕、酵母水解物一方面具有豐富的營養(yǎng)，可以與所述蛋氨酸、賴氨酸相互配合，及與所述復(fù)合維生素配合，為基因編輯實驗鼠提供所需的氨基酸、酶類、多肽、乳酸、維生素、促生長因子等；另一方面，酵母水解物中的核苷酸物質(zhì)，以及豆粕經(jīng)益生菌發(fā)酵水解過程會產(chǎn)生大量具有獨特生理活性功能的小肽混合物，易于消化吸收，有效刺激腸道內(nèi)有益菌的增殖，調(diào)節(jié)體內(nèi)微生態(tài)菌群的結(jié)構(gòu)，增加整個消化道對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的分解、合成、吸收和利用，對基因編輯實驗鼠具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、促進(jìn)細(xì)胞再生和修復(fù)、促進(jìn)腸道發(fā)育、抗氧化及維持腸道正常菌群的作用，避免腸道疾病的發(fā)生，提高實驗鼠對飼料蛋白質(zhì)和能量的利用率；再者酵母水解物中的肌苷酸和鳥苷酸，結(jié)合特有的發(fā)酵香味，可作為增鮮呈味劑，適口性好，增加動物的采食量。此外，所述石粉、磷酸氫鈣和符合礦物質(zhì)相互配合提供實驗鼠所需的礦物質(zhì)營養(yǎng)元素，能促使飼料消化，使實驗鼠體重增加。

綜上，發(fā)明人經(jīng)過大量科學(xué)設(shè)計、實驗觀察研究配制出本飼料配方，各組分優(yōu)化配比，有效解決了現(xiàn)有基因編輯實驗鼠生長緩慢、繁育性能低及死亡率低的情況；針對基因編輯實驗鼠的生理特征，制作適口性好、營養(yǎng)均衡的飼料，滿足基因編輯實驗鼠生產(chǎn)繁育的需求，飼料增加酵母水解物促進(jìn)實驗鼠消化吸收能力，提升實驗鼠采食量。飼料所有營養(yǎng)指標(biāo)均滿足國家標(biāo)準(zhǔn)要求，微生物和衛(wèi)生指標(biāo)均控制字國標(biāo)允許范圍內(nèi)。本發(fā)明營養(yǎng)均衡、促進(jìn)生長繁育效果明顯、質(zhì)量穩(wěn)定可靠。

優(yōu)選地，由如下重量份數(shù)的各組分組成：玉米30-33份、小麥13-15份、豆粕19.5-20份、碎米10-12份、魚粉8-8.5份、油2.5-3份、酵母水解物7.4-8.5份、石粉1.1-1.2份、磷酸氫鈣1.0份、復(fù)合礦物質(zhì)0.6份、復(fù)合維生素0.4份、蛋氨酸0.2份、賴氨酸0.2份。

優(yōu)選地，由如下重量份數(shù)的各組分組成：玉米30份、小麥15份、豆粕20份、碎米12份、魚粉8份、油3份、酵母水解物8.4份、石粉1.2份、磷酸氫鈣1份、復(fù)合礦物質(zhì)0.6份、復(fù)合維生素0.4份、蛋氨酸0.2份、賴氨酸0.2份。

優(yōu)選地，所述酵母水解物的制備方法如下：以新鮮釀酒酵母為原料，經(jīng)自溶、酶解、濃縮、干燥精制而成。該方法制得的酵母水解物能夠顯著提高實驗鼠的采食量，與其他酵母水解物相比，口感醇厚適中、無苦澀感。

優(yōu)選地，所述復(fù)合礦物質(zhì)中各元素所占的質(zhì)量百分比為：銅6%、鐵6%、錳1.3%、鋅4.2%、硒0.3%、鎂1.5%、碘0.13%、鈷0.02%，余量為載體沸石粉。

優(yōu)選地，所述復(fù)合維生素為維生素a、維生素c、維生素d、維生素e、維生素k、泛酸鈣、煙酸、生物素或葉酸中的兩種以上的混合物。

優(yōu)選地，所述油為植物油；所述豆粕為黃豆粕，其粗蛋白質(zhì)的含量達(dá)到40~50%；所述玉米為東北玉米。

本發(fā)明還提供所述基因編輯實驗鼠飼料的制備方法，包括如下步驟：s1.原料配制：將玉米、小麥、黃豆粕和碎米粉碎后，與剩余原料進(jìn)行充分混合；s2.調(diào)制制粒：將混合好的原料投入顆粒制粒機(jī)，在80-120℃的蒸汽下制成顆粒飼料；s3.飼料篩選：將制作好的顆粒飼料進(jìn)行篩選，保留粒徑11-13mm，長度為30-40mm的顆粒飼料；s4.營養(yǎng)監(jiān)測及包裝：對篩選好的飼料進(jìn)行營養(yǎng)指標(biāo)、衛(wèi)生指標(biāo)、微生物指標(biāo)檢測，對于符合標(biāo)準(zhǔn)的飼料進(jìn)行包裝、儲存。

更優(yōu)選地，所述顆粒飼料的粒徑12mm。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明有益效果在于：本發(fā)明營養(yǎng)均衡、促進(jìn)生長繁育效果明顯；適口性好，能夠增加基因編輯實驗鼠采食量；本發(fā)明可有效降低基因編輯實驗鼠的的死淘率，明顯提高生長速度，促進(jìn)腸道健康，降低胃腸道疾病發(fā)生率；富含功能性小肽及多種酵素，消化吸收率高，可有效提高飼料利用率，富含核苷酸、活性肽及免疫多糖等活性成分，可顯著提高動物的非特異性免疫力，增強(qiáng)抗病力；營養(yǎng)指標(biāo)符合《實驗動物全價營養(yǎng)飼料》國家標(biāo)準(zhǔn)gb14924.3-2010中營養(yǎng)指標(biāo)的要求，衛(wèi)生指標(biāo)符合《實驗動物全價營養(yǎng)飼料》國家標(biāo)準(zhǔn)gb14924.1-2010中衛(wèi)生指標(biāo)的要求，在促進(jìn)實驗鼠進(jìn)食方面具有較好的應(yīng)用前景。

具體實施方式

為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合實施例，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。除非特別說明，本發(fā)明采用的試劑、方法和設(shè)備為本技術(shù)領(lǐng)域常規(guī)試劑、方法和設(shè)備。

經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明飼料按照以下制備方法相較于常規(guī)方法制成的飼料功效較優(yōu)，具體包括如下步驟：s1.原料配制：將玉米、小麥、豆粕和碎米粉碎后，與剩余原料進(jìn)行充分混合；s2.調(diào)制制粒：將混合好的原料投入顆粒制粒機(jī)，在80-120℃的蒸汽下制成顆粒飼料；s3.飼料篩選：將制作好的顆粒飼料進(jìn)行篩選，保留粒徑11-13mm，長度為30-40mm的顆粒飼料；s4.營養(yǎng)監(jiān)測及包裝：對篩選好的飼料殺菌，并進(jìn)行營養(yǎng)指標(biāo)、衛(wèi)生指標(biāo)、微生物指標(biāo)檢測，對于符合標(biāo)準(zhǔn)的飼料進(jìn)行包裝、儲存。

若無特殊說明，所述原料均采用市售材料。

以下以具體實施條件為例對本發(fā)明方法進(jìn)行進(jìn)一步說明。

實施例1

一種基因編輯實驗鼠飼料，由如下重量份數(shù)的各組分組成：玉米30份、小麥15份、豆粕20份、碎米12份、魚粉8份、油3份、酵母水解物8.4份、石粉1.2份、磷酸氫鈣1份、復(fù)合礦物質(zhì)0.6份、復(fù)合維生素0.4份、蛋氨酸0.2份、賴氨酸0.2份。

上述飼料的制備方法包括如下步驟：s1.原料配制：將玉米、小麥、豆粕和碎米粉碎后，與剩余原料進(jìn)行充分混合；s2.調(diào)制制粒：將混合好的原料投入顆粒制粒機(jī)，在100-120℃的蒸汽下制成顆粒飼料；s3.飼料篩選：將制作好的顆粒飼料進(jìn)行篩選，保留粒徑12mm，長度為30-40mm的顆粒飼料；s4.營養(yǎng)監(jiān)測及包裝：對篩選好的飼料進(jìn)行營養(yǎng)指標(biāo)、衛(wèi)生指標(biāo)、微生物指標(biāo)檢測，對于符合標(biāo)準(zhǔn)的飼料進(jìn)行包裝、儲存。

實施例2

一種基因編輯實驗鼠飼料，由如下重量份數(shù)的各組分組成：玉米32.4份、小麥13份、豆粕19.6份、碎米12份、魚粉8.5份、油2.5份、酵母水解物8.5份、石粉1.1份、磷酸氫鈣1份、復(fù)合礦物質(zhì)0.6份、復(fù)合維生素0.4份、蛋氨酸0.2份、賴氨酸0.2份。

上述飼料的制備方法與實施例1相同。

實施例3

一種基因編輯實驗鼠飼料，由如下重量份數(shù)的各組分組成：玉米33份、小麥15份、豆粕20份、碎米10份、魚粉8份、油3份、酵母水解物7.4份、石粉1.2份、磷酸氫鈣1份、復(fù)合礦物質(zhì)0.6份、復(fù)合維生素0.4份、蛋氨酸0.2份、賴氨酸0.2份。

上述飼料的制備方法與實施例1相同。

實施例4

一種基因編輯實驗鼠飼料，由如下重量份數(shù)的各組分組成：玉米35份、小麥12.5份、豆粕18.8份、碎米5份、魚粉10份、油5份、酵母水解物9份、石粉0.8份、磷酸氫鈣2份、復(fù)合礦物質(zhì)1份、復(fù)合維生素0.5份、蛋氨酸0.2份、賴氨酸0.2份。

上述飼料的制備方法與實施例1相同。

實施例5

一種基因編輯實驗鼠飼料，由如下重量份數(shù)的各組分組成：玉米33.9份、小麥10份、豆粕15份、碎米12份、魚粉10份、油5份、酵母水解物9份、石粉1.2份、磷酸氫鈣2份、復(fù)合礦物質(zhì)1份、復(fù)合維生素0.5份、蛋氨酸0.2份、賴氨酸0.2份。

上述飼料的制備方法與實施例1相同。

實施例6

一種基因編輯實驗鼠飼料，由如下重量份數(shù)的各組分組成：玉米35份、小麥15份、豆粕20份、碎米5份、魚粉10份、油5份、酵母水解物6份、石粉1.2份、磷酸氫鈣2份、復(fù)合礦物質(zhì)0.5份、復(fù)合維生素0.1份、蛋氨酸0.1份、賴氨酸0.1份。

上述飼料的制備方法與實施例1相同。

實施例7

一種基因編輯實驗鼠飼料，由如下重量份數(shù)的各組分組成：玉米35份、小麥15份、豆粕20份、碎米7.9份、魚粉3份、油5份、酵母水解物9份、石粉1.2份、磷酸氫鈣2份、復(fù)合礦物質(zhì)1份、復(fù)合維生素0.5份、蛋氨酸0.2份、賴氨酸0.2份。

上述飼料的制備方法基本與實施例1相同，不同之處在于，制備方法中步驟上s2所述蒸汽的調(diào)制溫度為80-100℃。

對比例1

本對比例與實施例1一種基因編輯實驗鼠飼料基本相同，具體由如下重量份數(shù)的各組分組成：玉米32.4份、小麥13份、豆粕14份、碎米12份、魚粉8.5份、油2.5份、酵母水解物12份、石粉1.1份、磷酸氫鈣1份、復(fù)合礦物質(zhì)0.6份、復(fù)合維生素2.5份、蛋氨酸0.2份、賴氨酸0.2份。

對比例2

本對比例與實施例1一種基因編輯實驗鼠飼料基本相同，不同之處在于將所述酵母水解物替換為飼料酵母，其組分含量不變。

對比例3

本對比例一種基因編輯實驗鼠飼料基本相同，具體由如下重量份數(shù)的各組分組成：玉米35份、小麥13份、豆粕20份、碎米8份、魚粉5.6份、油2.5份、酵母水解物5份、石粉1.1份、磷酸氫鈣3份、復(fù)合礦物質(zhì)2份、復(fù)合維生素3份、蛋氨酸0.9份、賴氨酸0.9份。

對比例4

本對比例與實施例1一種基因編輯實驗鼠飼料基本相同，不同之處在于，制備方法中步驟上s2所述蒸汽的調(diào)制溫度為140-150℃，其他方法相同。

應(yīng)用例動物實驗

將基因編輯后的實驗鼠按照日齡、體重、健康狀況等情況均勻分組，分為7個實驗組和4個對照組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)包括10只基因編輯后的實驗鼠，實驗在恒溫、恒濕的實驗室內(nèi)統(tǒng)一進(jìn)行，實驗期間定時喂水、喂食（各組分別喂食對應(yīng)配方飼料），得到各組實驗鼠的死亡率和繁殖成活率如下表所示。

本發(fā)明實施例與對比例相比，喂養(yǎng)實驗鼠的死亡率降低約20-40%，繁殖率提高約20-30%。對比例1改變了豆粕、酵母水解物、復(fù)合維生素的配比，對比例2將酵母水解物替換，營養(yǎng)物質(zhì)搭配不如本發(fā)明豐富、合理，還顯著影響實驗鼠對于飼料的消化吸收效果；對比例3所述復(fù)合礦物質(zhì)、復(fù)合維生素、蛋氨酸和賴氨酸等配比不在本發(fā)明范圍內(nèi)，無法實現(xiàn)本發(fā)明各組分之間的協(xié)同作用效果，飼料利用率低；對比例4的制備方法的改變將影響所述飼料的性質(zhì)，影響其內(nèi)活性物質(zhì)的形態(tài)，對提高實驗鼠非特異性免疫力的效果甚微，對實驗鼠死亡率和繁殖率的改善較小。經(jīng)實驗對比發(fā)現(xiàn)，實施例1的配方為本發(fā)明的最優(yōu)配比，實施例2~3的配方為本發(fā)明的較優(yōu)配比；本發(fā)明基因編輯實驗鼠飼料的配方及制備方法相較于現(xiàn)有飼料以及對比飼料，對實驗鼠的采食量、成活率及生長繁育效果都有明顯提高，可推廣應(yīng)用。

以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的實施，但是，本發(fā)明并不限于上述實施方式中的具體細(xì)節(jié)，在本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi)，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡單變型，這些簡單變型均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。