本發(fā)明屬于食品領(lǐng)域，具體涉及一種具有抗過敏功效的保健組合物及其食品。
背景技術(shù)：
：過敏性疾病的主要特征是免疫球蛋白e(ige)抗體的產(chǎn)生、肥大細胞(mastcell，mc)、嗜堿性粒細胞的活化和介質(zhì)的釋放。世界變態(tài)反應(yīng)組織公布的30個國家流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示:在這些國家的12億總?cè)丝谥校?2％患有ige介導(dǎo)的過敏性疾病，如過敏性鼻炎、哮喘、結(jié)膜炎、濕疹、食物過敏、藥物過敏和嚴重過敏反應(yīng)等。目前，臨床上使用的抗過敏性疾病的藥物，存在著作用時間短、停藥后易復(fù)發(fā)、產(chǎn)生耐藥性，特別是可引起中樞抑制、抗膽堿作用甚至心臟毒性等不良反應(yīng)，中藥抗過敏研究已經(jīng)有一定的歷史，中藥在抗過敏反應(yīng)中的作用往往是多環(huán)節(jié)的，并且沒有現(xiàn)有西藥的中樞抑制等不良反應(yīng)，具有西藥不具備的優(yōu)勢，因此，從中藥中研究開發(fā)抗過敏食品具有很好的前景。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種具有抗過敏功效的保健組合物。本發(fā)明的另一個目的是提供該具有抗過敏功效的保健食品。本發(fā)明的目的是通過以下方式實現(xiàn)的：一種具有抗過敏功效的保健組合物，該組合物主要由以下重量份的活性物質(zhì)制成：紫草提取物100-350重量份，葡萄籽提取物50-200重量份，刺蒺藜提取物50-200重量份，還可加入其它具有抗過敏功效的活性成分。上述具有抗過敏功效的保健組合物，優(yōu)選該組合物主要由以下重量份的活性物質(zhì)制成：紫草提取物100-250重量份，葡萄籽提取物50-150重量份，刺蒺藜提取物50-150重量份。上述具有抗過敏功效的保健組合物，更優(yōu)選該組合物主要由以下重量份的活性物質(zhì)制成：紫草提取物200重量份，葡萄籽提取物100重量份，刺蒺藜提取物100重量份。上述具有抗過敏功效的保健組合物，將紫草提取物，葡萄籽提取物，刺蒺藜提取物按照比例直接混合制成散劑或加入藥學(xué)可接受的輔料制成口服制劑，所述口服制劑為丸劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑。上述具有抗過敏功效的保健組合物的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟：將紫草提取物，葡萄籽提取物，刺蒺藜提取物按照比例混合均勻。通過本發(fā)明方法可制備得到質(zhì)量穩(wěn)定，抗過敏效果顯著的制劑。本發(fā)明所述的具有抗過敏功效的保健組合物可在制備抗過敏的保健食品或藥品中應(yīng)用。上述保健食品為蜜膏、露劑、軟膠囊、硬膠囊、散劑、片劑、鮮汁、茶飲、口服液、酒劑、顆粒劑中任一種劑型，優(yōu)選劑型為顆粒劑。本發(fā)明所述原料功效：紫草：為紫草科植物新疆紫草(軟紫草)arnebiaeuchroma(royle)johnst.或內(nèi)蒙紫草arnebiaguttatabunge的干燥根,主要成分為萘醌類色素和多糖類化合物。葡萄：堪稱“水果之王”，在全世界種植面積很廣。其根、藤、葉皆可入藥，但葡萄籽常為葡萄鮮食、榨汁和葡萄釀酒業(yè)的廢棄部分。世界每年都有上百萬噸的葡萄籽產(chǎn)生。研究發(fā)現(xiàn)葡萄籽中含有大量的營養(yǎng)活性成分，如蛋白質(zhì)、微量元素、維生素、低聚原花青素、白藜蘆醇、黃酮、不飽和脂肪酸等，具有多種生物活性。蒺藜：tribulusterresthsl.又稱白蒺藜,系蒺藜科蒺藜屬草本植物,其果實、花、莖及根有著悠久的藥用歷史,具有平肝解郁、活血祛風(fēng)、明目、止癢、殺菌之效。蒺藜提取物是從植物蒺藜地上全草中提取的有效組分之一,是以甾體皂苷為主的多種有效成分的混合物,主要包括呋甾醇和螺甾醇兩類皂苷,為黃色凍干粉末,易溶于水。本發(fā)明的有益效果：1.本發(fā)明采用純天然原料加工制成，安全有效，服用方便。2.本發(fā)明采用的紫草提取物、蒺藜提取物、葡萄籽提取物三種提取物組方在一起有協(xié)同作用，既能增強抗過敏功效，同時也能發(fā)揮抗炎和止癢療效，減少了每種植物提取物的服用量，特別是刺蒺藜提取物長期大量服用會有肝腎損傷毒副作用，抗過敏組方在一起既能達到療效也能減少了毒副作用。具體實施方式以下通過具體實施例對本發(fā)明進行進一步闡述。本發(fā)明實施例所用原料的理化指標(biāo)：表1紫草提取物理化指標(biāo)項目指標(biāo)紫草素，％≥20.0水分，％≤10.0灰分，％≤10.0鉛(以pb計)，mg/kg≤1.5總砷(以as計)，mg/kg≤1.0總汞(以hg計)，mg/kg≤0.3菌落總數(shù)，cfu/g≤1000大腸菌群，mpn/100g≤40表2葡萄籽提取物理化指標(biāo)項目指標(biāo)原花青素，％≥95.0水分，％≤10.0灰分，％≤10.0鉛(以pb計)，mg/kg≤1.5總砷(以as計)，mg/kg≤1.0總汞(以hg計)，mg/kg≤0.3菌落總數(shù)，cfu/g≤1000大腸菌群，mpn/100g≤40表3刺蒺藜提取物理化指標(biāo)項目指標(biāo)水分，％≤10.0灰分，％≤10.0鉛(以pb計)，mg/kg≤1.5總砷(以as計)，mg/kg≤1.0總汞(以hg計)，mg/kg≤0.3菌落總數(shù)，cfu/g≤1000大腸菌群，mpn/100g≤40實施例1取紫草提取物200g，葡萄籽提取物100g，刺蒺藜提取物100g。將上述紫草提取物，葡萄籽提取物，刺蒺藜提取物按照比例混合均勻。實施例2取紫草提取物250g，葡萄籽提取物100g，刺蒺藜提取物50g。將上述紫草提取物，葡萄籽提取物，刺蒺藜提取物按照比例混合均勻，與片劑可接受的輔料壓制成片劑。實施例3取紫草提取物350g，葡萄籽提取物200g，刺蒺藜提取物100g。將上述紫草提取物，葡萄籽提取物，刺蒺藜提取物按照比例混合均勻，與顆粒劑可接受的輔料混合制成顆粒劑。實施例4將按照實施例3方法制備得到的顆粒劑灌裝膠囊。以下通過藥效試驗來證明本發(fā)明的技術(shù)效果，下述實驗用于進一步說明本發(fā)明的技術(shù)效果，但不限制本發(fā)明。一、抗過敏作用的實驗1.樣品：抗過敏組方，按照實施例1方法制備得到。息斯敏：西安楊森制藥有限公司阿司匹林：石藥集團歐意藥業(yè)有限公司試劑:硫化鈉、二甲苯、依文思藍、丙酮均為分析純樣品的制備和劑量:抗過敏組方的成人(按60kg體重計)每日推薦攝入量為1.6g，相當(dāng)于26.6mg/kgb.wt，實驗設(shè)人體推薦劑量26.6mg/kgb.wt為樣品組a，稱取樣品2660mg加入純凈水定容至200ml作為各組受試液。紫草提取物為樣品組b，劑量為26.6mg/kgb.wt；葡萄籽提取物為樣品組c，劑量為26.6mg/kgb.wt；刺蒺藜提取物為樣品組d，劑量為26.6mg/kgb.wt；空白對照組為等體積的純凈水，陽性對照組為息斯敏或阿司匹林。2.試驗步驟動物：選用北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司南京分公司提供的18-22g健康雌性spf級icr小鼠,和體重200-250g大鼠，分批按體重隨機各分為6組，每組10只，共分為5批進行實驗2.1肥大細胞脫顆粒實驗rbl-2h3細胞培養(yǎng)于含10％小牛血清的dmem中，37℃，5％co2。在底部鑲有電極的細胞培養(yǎng)板(e-plate)上種rbl-2h3細胞，每孔2×104個細胞，孵育5～24h貼壁后，換用無血清dmem培養(yǎng)基。實驗設(shè)空白對照組、陽性對照組、a、b、c、d劑量組，各組加100ngdnp-ige抗血清使mc致敏，空白對照組加同體積水，陽性對照組為息斯敏，其余組加a、b、c、d試樣，2h后，加入100ng·ml-1dnp-bsa激發(fā)mc瞬間活化，使細胞骨架發(fā)生重排，細胞形態(tài)隨之迅速增大，改變與e-plate底部電極接觸面積，從而改變細胞電阻值。利用實時細胞電感應(yīng)系統(tǒng)對因細胞形態(tài)變化而改變的電阻值進行實時、連續(xù)監(jiān)測，獲得直觀的mc活化后的脫顆粒過程。觀察試樣對mc脫顆粒過程的干預(yù)作用。2.2小鼠被動皮膚過敏反應(yīng)實驗取小鼠60只，雌雄各半，隨機分為6組:實驗設(shè)空白對照組、陽性對照組、a、b、c、d劑量組，每組10只?？瞻讓φ战M給予同體積純化水，陽性對照組為息斯敏，其余各組給予相應(yīng)劑量藥物，按20ml·kg-1ig給藥，連續(xù)7d。末次給藥前1d用8％硫化鈉酒精溶液法腹部脫毛(2cm×3cm)，于末次給藥30min后，按每只0.05ml腹部皮內(nèi)注射組胺(10g·ml)，形成一小皮丘，立即尾靜脈注射0.5％依文思藍(按體重0.01ml·g-1注射)，30min后頸椎脫臼處死小鼠，用直徑8mm的打孔器分別打下藍斑皮片，剪碎，加入丙酮0.9％nacl溶液(7：3)混合液5ml，浸泡，在37℃恒溫水浴鍋中放置過夜，3000r·min離心10min，取上清液于595nm處比色，測定光密度(a)。2.3小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)實驗取小鼠60只，雌雄各半，隨機分為6組:實驗設(shè)空白對照組、陽性對照組、a、b、c、d劑量組，每組10只。用8％硫化鈉酒精溶液法腹部脫毛(2cm×3cm)，24h后用5％dncb丙酮液(每只0.05ml)涂布于小鼠脫毛后的腹部皮膚致敏，次日強化1次。致敏前1d開始，空白對照組給予同體積純化水，陽性對照組為息斯敏，其余各組給予相應(yīng)劑量藥物，按20ml·kg-1ig給藥，連續(xù)7d。末次給藥40min后，用1％dncb丙酮液(每只0.02ml)涂右耳激發(fā)過敏反應(yīng)。24h后，頸椎脫臼處死小鼠，剪下雙耳，用8mm打孔器分別在左右耳相同部位打下圓耳片，在分析天平稱重，以兩耳片重量差計算腫脹度，作為dth強度指標(biāo)，比較組間差異。2.4小鼠耳廓腫脹試驗雄性小鼠按體重隨機分為6組:實驗設(shè)空白對照組、陽性對照組、a、b、c、d劑量組，每組10只?？瞻讓φ战M給予同體積純化水，陽性對照組為阿司匹林，其余各組給予相應(yīng)劑量藥物，連續(xù)灌胃給藥3日,每日1次。末次給藥后30min于小鼠右耳涂抹20μl二甲苯致炎,30min后處死小鼠,摘取左、右耳片,稱重,計算腫脹度(右耳重-左耳重,mg)2.5.對藥物所致小鼠全身性皮膚瘙癢的作用取小鼠60只,隨機分為6組:實驗設(shè)空白對照組、陽性對照組、a、b、c、d劑量組，每組10只。以上各組每日灌胃一次,空白對照組給予同體積水,陽性對照組為息斯敏，其余各組給予相應(yīng)劑量藥物，連續(xù)給藥5d,于末次給藥30min后尾靜脈注射右旋糖酐1.25mg·kg-1，以小鼠前爪搔抓頭部，后抓搔抓軀干，嘴咬全身各部位作為瘙癢指征，記錄30min內(nèi)瘙癢發(fā)作的總次數(shù)及持續(xù)總時間。3.試驗結(jié)果3.1對肥大細胞脫顆粒的影響過敏性反應(yīng)一般都是ige介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，肥大細胞是過敏性炎癥的主要效應(yīng)細胞。與空白對照組相比，陽性對照組、a、c組能顯著抑制肥大細胞脫顆粒作用，抑制率分別為100.0％、80.0％、58.2％、73.6％，而組別d的抑制率為0％。結(jié)果見表4。表4對肥大細胞脫顆粒的影響組別劑量mg/kgb.wt抑制率％空白對照組：水---陽性對照組：息斯敏10100.0**a組方26.680.0**b紫草提取物26.658.2c葡萄籽提取物26.673.6**d刺蒺藜提取物26.60與空白對照組比較：**p＜0.013.2對小鼠被動皮膚過敏反應(yīng)的影響小鼠被動皮膚過敏實驗，是小鼠致敏后用抗原攻擊，可引起肥大細胞脫顆粒，釋放過敏介質(zhì)(組胺、慢反應(yīng)物質(zhì)、5-羥色胺等)，使皮膚局部血管的通透性增加，在抗原攻擊的同時加入伊文思藍染料，根據(jù)局部皮膚染料滲出的多少，判斷血管通透性的變化，為篩選抗ⅰ型過敏反應(yīng)藥物的有效方法。連續(xù)給藥7d后，樣品的抑制作用通過伊文思藍的滲透量來評價，滲透出來的量在595nm處進行測量，發(fā)現(xiàn)a、d劑量組對被動皮膚過敏反應(yīng)具有明顯的抑制作用。a劑量組的抑制效果與陽性藥息斯敏效果接近。結(jié)果見表5。表5.對小鼠被動皮膚過敏反應(yīng)的影響與空白對照組比較：**p＜0.013.3對小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)的影響dncb是一種半抗原，將其涂抹在小鼠腹部皮膚后，與皮膚蛋白結(jié)合成完全抗原，由此刺激t淋巴細胞增殖成致敏淋巴細胞，小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)實驗可以反映藥物抗ⅳ型過敏反應(yīng)的作用。與空白對照組相比，息斯敏組、a、b、d組均能顯著抑制dncb致小鼠耳腫脹，具有抗過敏活性。a組方抑制效果與息斯敏組相當(dāng)。結(jié)果見表6。表6.對小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)的影響與空白對照組比較：**p＜0.013.4小鼠耳廓腫脹試驗免疫應(yīng)答過程中，補體的裂解產(chǎn)物激酶、5-羥色胺、組胺、慢反應(yīng)物質(zhì)、凝血系統(tǒng)的各種因子、一些細胞因子以及細胞所產(chǎn)生的溶酶體酶等都可誘發(fā)和加重炎癥反應(yīng),所以變態(tài)反應(yīng)的基本病理表現(xiàn)也以炎癥為主,抑制炎癥可以減輕過敏性變態(tài)反應(yīng)。結(jié)果表明與空白對照組相比，阿司匹林組、a、b、d組均能顯著抑制小鼠耳腫脹(p＜0.01)，有抗炎作用。a組方抑制效果與阿司匹林組相當(dāng)。結(jié)果見表7表7.對小鼠耳廓腫脹試驗的影響與空白對照組比較：**p＜0.013.5對藥物所致小鼠全身性皮膚瘙癢的作用瘙癢是皮膚過敏最常見的癥狀。與空白對照組相比，息斯敏組、a、d組均能顯著抑制藥物所致小鼠全身性皮膚瘙癢的作用(p＜0.01)，a組方抑制效果與息斯敏組相當(dāng)，b、c無明顯差異。結(jié)果見表8表8.對藥物所致小鼠全身性皮膚瘙癢的作用與空白對照組比較：**p＜0.01綜上動物實驗表明，本發(fā)明抗過敏組方在抗過敏、抗炎、止癢方面都有顯著療效，本發(fā)明三種提取物在一起有協(xié)同作用，既能增強抗過敏功效，同時也能發(fā)揮抗炎和止癢療效，還能減少服用量。二、安全性實驗1.1樣品抗過敏組方，按照實施例1方法制備得到。1.2試劑肝腎功能有關(guān)指標(biāo)測試試劑(南京建成生物工程研究所)1.3樣品的制備和劑量設(shè)計抗過敏組方的成人(按60kg體重計)每日推薦攝入量為1.6g，相當(dāng)于26.6mg/kgb.wt，實驗設(shè)人體推薦劑量26.6mg/kgb.wt為樣品組a，稱取樣品2660mg加入純凈水定容至200ml作為各組受試液。刺蒺藜提取物樣品組b，劑量為26.6mg/kgb.wt；1.4實驗方法1.4.1動物選用北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司南京分公司提供的18-22g健康大鼠體重200-250g，分批按體重隨機各分為3組，每組10只2.抗過敏動物試驗：2.1取大鼠30只，隨機分為3組，每組10只，即空白對照組、樣品組a、樣品組b，共分6籠飼養(yǎng)，每籠5只。每隔5d大鼠稱重一次，調(diào)整給藥劑量，如此連續(xù)給藥12周，將各組大鼠麻醉，下腔靜脈取血2.2血清肝腎功能指標(biāo)檢測取血后將血液靜置3h，4000r/min離心20min，分離血清，全自動生化分析儀檢測血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alt)、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ast)、肌酐(cr)、尿素氮(bun)含量。3.實驗結(jié)果各實驗組肝腎功能指標(biāo)含量比較測定結(jié)果見表9。表9.肝腎功能測定結(jié)果與空白對照組比較：*p＜0.05從肝腎功能指標(biāo)分析來看，b刺蒺藜提取物與空白對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)對肝、腎均有損傷，a組方與正常組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)，無肝腎損傷。當(dāng)前第1頁12