一種狗蟻草提取物的應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了狗蟻草提取物在制備保護(hù)肝損傷功能的藥物、食品和保健品中的應(yīng)用，具體為可以制備保護(hù)由于急慢性肝損傷功能的藥物、食品和保健品，狗蟻草優(yōu)選提取物為乙酸乙酯提取物，可以通過(guò)添加藥學(xué)和食品相關(guān)載體、輔料，制成多種劑型，通過(guò)對(duì)小鼠試驗(yàn)結(jié)果顯示，狗蟻草提取物可以明顯降低CCl4和D-GalN和所致急性肝損小鼠傷血清ALT、AST含量，并可明顯改善CCl4和D-GalN引起的肝組織病理改變，從而起到保護(hù)作用。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種狗蟻草提取物的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種狗蟻草提取物的應(yīng)用，具體涉及狗蟻草提取 物在制備保護(hù)肝損傷功能的藥物、食品和保健品中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 狗蟻草為豆科植物鏈莢豆（Alysicarpus vaginalis(L. )DC.)的全草，另Ij稱(chēng)山上 豆、山地豆、假花生、大葉青、廖藍(lán)豆、單葉草等。原產(chǎn)于南亞、東非。廣布于東半球熱帶地 區(qū)。喜熱帶潮濕干旱氣候。稍耐旱、耐酸，不耐漬。在砂壤土上生長(zhǎng)良好，但易感染線(xiàn)蟲(chóng)病， 故通常種于粘土上。狗蟻草具有諸多藥用功效，全草：甘、苦，平；活血通絡(luò)，清熱化濕，駁骨 消腫；用于跌打損傷，半身不遂，股骨酸痛，肝炎；蛇咬傷，骨折，外傷出血，瘡瘍潰爛久不收 口。《中華本草》傣藥卷中記載按如下附方可以清火解毒，利膽退黃，主治"攏牛"，即小便熱 澀疼痛等癥：狗蟻草30g，野蘆谷根20g。煎湯內(nèi)服(景洪市名傣醫(yī)康郎侖驗(yàn)方）；治"攏案答 勒"：狗蟻草30g，射干20g。煎湯內(nèi)服(景洪市傣醫(yī)波的應(yīng)驗(yàn)方）。
[0003] 肝臟作為人體腹腔內(nèi)最大的實(shí)質(zhì)性器官，擔(dān)負(fù)著重要的生理功能。肝細(xì)胞對(duì)缺氧 的耐受力較差，故有肝動(dòng)脈和門(mén)靜脈提供豐富的血液供應(yīng)，并有大小膽管與血管伴行輸送 膽汁。它位于右上腹的深部，有下胸壁和膈肌的保護(hù)。在人體受到外界環(huán)境刺激或影響時(shí)容 易造成肝損傷：1、病毒感染：由多種肝炎病毒引起，具有傳染性強(qiáng)，傳播途徑復(fù)雜，流行面 廣泛，發(fā)病率高等特點(diǎn)。2、藥物或化學(xué)毒物：許多藥物和化學(xué)毒物都可引起肝臟損傷，發(fā)生 藥物性肝炎或中毒性肝炎。3、酗酒：酒精對(duì)肝臟的損害是很?chē)?yán)重的，損害的后果包括酒精性 肝炎、酒精性脂肪肝、酒精性肝硬化，主要是由于酒精（乙醇）及其代謝產(chǎn)物乙醛的毒性對(duì) 肝細(xì)胞直接損害造成的。4、其他原因：原發(fā)和繼發(fā)的肝臟腫瘤、心功能不全導(dǎo)致肝臟淤血、 某些先天性肝臟疾病、靜脈高價(jià)營(yíng)養(yǎng)等，都可以造成不同程度的肝損害，這些肝損害的早期 表現(xiàn)往往是ALT(轉(zhuǎn)氨酶）或膽紅素的升高，不祛除病因，肝臟的損害會(huì)進(jìn)一步加重。5、很 多全身性傳染病都可侵犯肝臟，如EB病毒、細(xì)菌性傳染病中的傷寒等，都可以引起血清轉(zhuǎn) 氨酶的升高或其他肝功能異常。一旦遭受暴力容易損傷，發(fā)生腹腔內(nèi)出血或膽汁泄漏，引起 出血性休克或膽汁性腹膜炎，后果嚴(yán)重，必須及時(shí)診斷和正確處理。目前應(yīng)用于肝損傷病人 的常用藥品有聯(lián)苯雙酯、硫普羅寧、綠汀諾、辰吉格、海諾欣及諾百力等。
[0004] 發(fā)明人通過(guò)過(guò)年研究，通過(guò)科學(xué)的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，狗蟻草提取物在治療急性肝損傷方 面有較為突出的效果，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)了其治療的作用機(jī)理。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種狗蟻草提取物在制備保護(hù)肝損傷功能的藥物、食品和保 健品中的應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明的目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的： 狗蟻草提取物在制備保護(hù)肝損傷功能的藥物、食品和保健品中的應(yīng)用。
[0007] 所述肝損傷為急性肝損傷。
[0008] 所述狗蟻草提取物提取方法為：水提、醇提、酯提、酮提、層析、真空提取、超臨界流 體萃取法、超聲提取法、酶法提取、微波提取法。
[0009] 所述醇提溶劑為甲醇、乙醇、正丁醇；所述酯提溶劑為乙酸乙酯、醋酸丁酯、醋酸乙 酯；酮提溶劑為丙酮、環(huán)己酮。
[0010] 所述狗蟻草提取物優(yōu)選為乙酸乙酯提取物：提取具體步驟為： (1)將狗蟻草洗凈、在18-25°c室溫下通風(fēng)干燥、剪碎并稱(chēng)重，置于開(kāi)口反應(yīng)器中。
[0011] (2)在開(kāi)口反應(yīng)器中加入3-5倍95%乙醇（v/v)浸泡12-24h，再加入95%乙醇（v/ v)至藥材10-15倍量，進(jìn)行回流提取。
[0012] (3)保持微沸2h，過(guò)濾，得第一次提取液；藥材冷卻后，第二次加10-15倍量95%乙 醇（v/v)，保持微沸1. 5小時(shí)，得第二次濾液；藥材冷卻后，第三次加入10-15倍量95%乙醇 (v/v)，保持微沸1小時(shí)，得第三次濾液，合并3次提取液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，得到相對(duì)密度 為1. 25-1. 28的乙醇浸膏。
[0013] (4)將乙醇浸膏置于水浴鍋上，加熱至80_85°C，揮發(fā)，真空干燥，直至浸膏重量不 再減輕，得到相對(duì)密度為1. 30-1. 32的浸膏，稱(chēng)重。
[0014] (5)加入5-10倍純水將乙醇浸膏全部溶解，再加入2-3倍量石油醚進(jìn)行萃取，輕輕 震搖，靜置，直至出現(xiàn)清晰的分層界面，吸取上層石油醚溶液，重復(fù)石油醚萃取過(guò)程2-5次， 直至石油醚層顏色為淡黃色且不再變淡。
[0015] (6)按步驟（5)方法，用乙酸乙酯對(duì)浸膏進(jìn)行萃取，將乙酸乙酯萃取液用旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)儀進(jìn)行濃縮，得到相對(duì)密度為1.22-1. 24的狗蟻草乙酸乙酯浸膏，將乙酸乙酯浸膏置 于水浴鍋上，加熱至80-85 °C，揮發(fā)溶劑并轉(zhuǎn)移入真空干燥箱繼續(xù)干燥，得到相對(duì)密度為 1. 28-1. 30的狗蟻草乙酸乙酯提取物。
[0016] 保護(hù)肝損傷功能的藥物，是由以狗蟻草提取物為主要有效成分和藥學(xué)上可接受的 輔料組成，狗蟻草提取物在藥物配方中的重量百分比為0. 1-99%。同時(shí)加工為多種劑型，可 以為丸劑、顆粒劑、液劑、注射劑、膠囊劑、片劑。所述輔料可以為：甘露醇、山梨醇、山梨酸或 鉀鹽、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素 A、 維生素 C、維生素 E、維生素 D、氮酮、EDTA二鈉、EDTA鈣鈉，乳酸鈉、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、 果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚 乙烯吡咯烷酮、甘油、丙二醇、乙醇、蜂蠟、羊毛脂、液體石蠟、十六醇、沒(méi)食子酸酯類(lèi)、瓊脂、 三乙醇胺、堿性氨基酸、聚乙二醇、環(huán)糊精、β -環(huán)糊精、磷脂類(lèi)材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸 I丐、硬脂酸鎂，大豆油、橄欖油、茶油、棕櫚油、當(dāng)歸油、沙棘油、莪術(shù)油、川彎油、薏米仁油、紅 花油、花椒油、大蒜油、蛋黃卵磷脂、大豆磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、氫化大豆磷脂、人工合成磷 月旨、油酸或油酸鹽、維生素 E ;亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、維生素 C等。
[0017] 保護(hù)肝損傷功能的食品和保健品，是由以狗蟻草提取物為主要有效成分和食品添 加劑、食品原料組成，狗蟻草提取物在配方中的重量百分比為1-50%。可以加工為液劑、片 齊U、顆粒劑、膠囊劑或作為食品輔料加工為粗糧、糕點(diǎn)、飲料。加工為食品和保健品是因?yàn)榘l(fā) 明人發(fā)現(xiàn)：狗蟻草提取物不僅作為藥物可以直接作用于肝損傷部位起到保護(hù)效果，還可以 作為食品或保健品被病人服用后進(jìn)行調(diào)理身體，對(duì)于肝損傷病人的身體恢復(fù)也能起到良好 效果。
[0018] 本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明的狗蟻草提取物對(duì)急慢性肝損傷有良好的治療效果， 同時(shí)狗蟻草提取物在作為食品和保健品應(yīng)用方面，對(duì)于肝損傷病人也有較好的恢復(fù)效果， 這說(shuō)明本發(fā)明的狗蟻草提取物具有較好的保護(hù)肝損傷作用，可用于制備保護(hù)肝損傷功能的 藥物、食品和保健品，為狗蟻草提取物的應(yīng)用開(kāi)發(fā)了一種新用途。

【具體實(shí)施方式】
[0019] 實(shí)施例一狗蟻草乙酸乙酯提取物的制備 具體步驟為： (1) 將狗蟻草洗凈、在18-25°C室溫下通風(fēng)干燥、剪碎并稱(chēng)重，置于開(kāi)口反應(yīng)器中； (2) 在開(kāi)口反應(yīng)器中加入3-5倍95%乙醇（v/v)浸泡12-24h，再加入95%乙醇（v/v)至 藥材10-15倍量，進(jìn)行回流提取； (3) 保持微沸2h，過(guò)濾，得第一次提取液；藥材冷卻后，第二次加10-15倍量95%乙醇 (v/v)，保持微沸1. 5小時(shí)，得第二次濾液；藥材冷卻后，第三次加入10-15倍量95%乙醇（v/ v)，保持微沸1小時(shí)，得第三次濾液，合并3次提取液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，得到相對(duì)密度為 1. 25-1. 28的乙醇浸膏； (4) 將乙醇浸膏置于水浴鍋上，加熱至80-85°C，揮發(fā)，真空干燥，直至浸膏重量不再減 輕，得到相對(duì)密度為1. 30-1. 32的浸膏，稱(chēng)重； (5) 加入5-10倍純水將乙醇浸膏全部溶解，再加入2-3倍量石油醚進(jìn)行萃取，輕輕震 搖，靜置，直至出現(xiàn)清晰的分層界面，吸取上層石油醚溶液，重復(fù)石油醚萃取過(guò)程2-5次，直 至石油醚層顏色為淡黃色且不再變淡； (6) 按步驟（5)方法，用乙酸乙酯對(duì)浸膏進(jìn)行萃取，將乙酸乙酯萃取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn) 行濃縮，得到相對(duì)密度為1. 22-1. 24的狗蟻草乙酸乙酯浸膏，將乙酸乙酯浸膏置于水浴鍋 上，加熱至80-85°C，揮發(fā)溶劑并轉(zhuǎn)移入真空干燥箱繼續(xù)干燥，得到相對(duì)密度為1. 28-1. 30 的狗蟻草乙酸乙酯提取物。
[0020] 實(shí)施例二狗蟻草提取物加工為食品和保健品 1將狗蟻草乙醇提取物真空干燥，加入淀粉、葡萄糖、膳食纖維后，充分?jǐn)嚢?，粗粉碎?60-80目，真空包裝，按IOg/袋分裝，即得其速溶粉劑。
[0021] 2.將狗蟻草乙醇提取浸膏，再次蒸發(fā)乙醇至含量低于0. 1%，加入膳食纖維、麥乳 精、木糖醇、面粉，在粉碎機(jī)中粉碎至60-80目，加入5-10%純凈水，擠壓造粒，干燥，過(guò)篩，包 裝，即得其顆粒劑。
[0022] 3.將狗蟻草乙酸乙酯提取物浸膏，加純水?dāng)嚢枞芙猓尤敕栏瘎?、蜂蜜、紅豆汁，經(jīng) 滅菌、消毒后灌裝，得其液劑。
[0023] 4.將狗蟻草全株超臨界流體萃取法制得的提取物，烘干后，作為輔料加入粗糧制 品中，添加量為20%，最終制成各易被人體消化吸收的粗糧制品。
[0024] 5.將狗蟻草全株真空提取制得的提取物，烘干后，作為輔料加入小蘇打餅干原料 中，精加工制成狗蟻草蘇打餅干，其提取物添加量為5%。
[0025] 6.將狗蟻草乙酸乙酯提取物再次揮發(fā)溶劑，至溶劑含量不得高于0. 01%，加入蜂 蜜、維生素 E、維生素 B1、葉酸、葡萄糖酸亞鐵、葡萄糖酸鋅、大豆油和蜂蠟，制成保健品膠 囊，每粒含狗蟻草提取物50mg，每粒重500mg。
[0026] 7.將狗蟻草超聲提取物烘干后，加入亞硒酸鈉、蜂蠟、甘油、明膠、氧化鐵棕，制成 保健品膠囊，每粒含狗蟻草提取物80mg，每粒膠囊重500mg。
[0027] 效果實(shí)施例 1狗蟻草乙酸乙酯提取物對(duì)CCl4和D-DalN所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用 1. 1實(shí)驗(yàn)材料 1. 1. 1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重20±2g，由廣西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格 證號(hào)，桂醫(yī)動(dòng)字第11004號(hào)。
[0028] I. 1. 2實(shí)驗(yàn)試劑 聯(lián)苯雙酯滴丸：250丸/瓶浙江萬(wàn)邦藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：A02140101 四氯化碳（CCL4):(分析純500ml/瓶）廣東西隴化工廠(chǎng)產(chǎn)品，批號(hào)：20111130 ; D-半乳糖胺鹽酸鹽（D-GalN · HCL) :Sigma Batch No:080612 谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)測(cè)試盒，南京建成試劑有限公司，批號(hào)：20140410 谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST)測(cè)試盒，南京建成試劑有限公司，批號(hào)：20140303 I. 1. 3實(shí)驗(yàn)儀器

【權(quán)利要求】
1. 狗蟻草提取物在制備保護(hù)急性肝損傷功能的藥物、食品和保健品中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述肝損傷為急性肝損傷。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述狗蟻草提取物提取方法為：水提、醇 提、酯提、酮提、層析、真空提取、超臨界流體萃取法、超聲提取法、酶法提取、微波提取法。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：所述醇提溶劑為甲醇、乙醇、正丁醇；所述 酯提溶劑為乙酸乙酯、醋酸丁酯、醋酸乙酯；酮提溶劑為丙酮、環(huán)己酮。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：所述狗蟻草提取物為乙酸乙酯提取物：提 取具體步驟為：先將狗蟻草干燥粉碎后，用95%乙醇浸泡后，進(jìn)行回流提取，保持微沸2h，過(guò) 濾，得第一次提取液，藥材冷卻后，再加12倍量95%乙醇，保持微沸1. 5小時(shí)，得第二次濾 液； 藥材稍稍冷卻，加入12倍量95%乙醇，保持微沸1小時(shí)，得第三次濾液，合并3次提取 液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，先制得95%乙醇浸膏；干燥后用水溶解，然后依次用石油醚、氯仿、乙 酸乙酯進(jìn)行萃取，經(jīng)濃縮、揮發(fā)溶劑和真空干燥后，即得。
6. -種保護(hù)肝損傷功能的藥物，其特征在于：是由以狗蟻草提取物為主要有效成分和 藥學(xué)上可接受的輔料組成，狗蟻草提取物在藥物配方中的重量百分比為〇. 1-99%。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的保護(hù)肝損傷功能的藥物，其特征在于：可以加工為丸劑、顆粒 齊U、液劑、注射劑、膠囊劑、片劑。
8. -種保護(hù)肝損傷功能的食品和保健品，其特征在于：是由以狗蟻草提取物為主要有 效成分和食品添加劑、食品原料組成，狗蟻草提取物在配方中的重量百分比為1-50%。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的保護(hù)肝損傷功能的食品和保健品，其特征在于：可以加工為 液劑、片劑、顆粒劑、膠囊劑或作為食品輔料加工為粗糧、糕點(diǎn)、飲料。
【文檔編號(hào)】A23L2/52GK104367612SQ201410667200
【公開(kāi)日】2015年2月25日 申請(qǐng)日期:2014年11月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月20日
【發(fā)明者】鄭作文, 唐云麗, 黃麗貞 申請(qǐng)人:廣西中醫(yī)藥大學(xué)