丙酸桿菌菌株的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及新的丙酸桿菌(Propionibacterium)菌株以及制備物和組合物，諸如僅具有丙酸桿菌或與乳桿菌(Lactobacillus)屬的細菌組合的發(fā)酵培養(yǎng)液、保護性培養(yǎng)物、最終食物或飼料產(chǎn)品。本發(fā)明還涉及通過使用這些新的丙酸桿菌菌株來控制污染物諸如細菌、酵母或霉菌的生長的方法。DSM2584720120423DSM2584820120423DSM2584920120423DSM2583220120423DSM2583320120423DSM2583420120423DSM2583520120423DSM2583620120423DSM2583720120423DSM2584520120423DSM2584620120423
【專利說明】丙酸桿菌菌株
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及新的丙酸桿菌（Propionibacterium)菌株以及制備物和組合物，諸如 僅具有丙酸桿菌或與乳桿菌（Lactobacillus)屬的細菌組合的發(fā)酵培養(yǎng)液、保護性培養(yǎng) 物、最終食物或飼料產(chǎn)品。本發(fā)明還涉及通過使用這些新的丙酸桿菌菌株來控制污染物諸 如細菌、酵母或霉菌的生長的方法。
【背景技術】
[0002] 酵母和霉菌在不同的乳制品類型（比如酸奶、甜奶油和酸奶油以及新鮮干酪和熟 化干酪類型）的腐壞中起著重要作用，并因此可導致高昂的經(jīng)濟損失。比如有機酸及其鹽 (例如山梨酸鹽和丙酸鹽）的化學防腐劑用于保存乳制品，并保證和延長保質期。使用化學 防腐劑的缺點是需要在標簽上注明（通常作為E編號）以及對食品感官性質的潛在不良影 響。
[0003] 在1993年，維利奧公司（Valio)( -家芬蘭乳制品公司）在EP 0576780中描述 了保護性培養(yǎng)物在抑制真菌生長方面的用途。該培養(yǎng)物是鼠李糖乳桿菌（Lactobacillus rhamnosus)菌株（以保藏號DSM 7061保藏于德國微生物保藏中心（Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH，DSM))和費氏丙酸桿菌謝氏亞種 (Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii)菌株（DSM 7067)的混合物。該 共培養(yǎng)物的特定特征是乳桿菌和丙酸桿菌的組合具有比單獨的鼠李糖乳桿菌更佳的抗真 菌活性。該培養(yǎng)物由威爾斯比公司（Wiesby)以名稱"Bio Profit"商業(yè)化，并由丹尼斯克公 司（Danisco)重命名為 H0LDBAC?YM_B。
[0004] EP 0576780涉及具有酵母和霉菌控制效果的新微生物菌株干酪乳桿菌鼠李糖亞 種（Lactobacillus casei ssp. rhamnosus)LC_705(DSM 7061)，涉及僅包含該菌株或與丙 酸桿菌屬的細菌或細菌干酪乳桿菌（Lactobacillus casei)的另一菌株和/或與用于酵母 和霉菌控制的常規(guī)試劑組合的細菌制備物。
[0005] EP1308506 (瑞士 蘇黎世的瑞士聯(lián)邦理工學院（Swiss Federal Institute of Technology(ETH), Ziirich，Switzerland))還描述了乳桿菌和丙酸桿菌的組合。來自 ETH的類干酪乳桿菌類干酪亞種（Lactobacillus paracasei subsp. paracasei)菌株 (DSM 14514)作為與來自維利奧公司的費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 7067的共混物以名稱 H0LDBAC? YM-C 商業(yè)化。
[0006] 專利W0 03/040349涉及作為不含代謝物的非起子培養(yǎng)物并且包含詹氏丙酸桿菌 (Propionibacterium jensenii)種和選自乳桿菌屬的第二細菌的細菌混合物。
[0007] 專利US 4728516涉及在冷藏溫度下在奶油調味品（cream dressing)或奶油農(nóng) 家干釀（creamed Cottage cheese)中使用乳酸鏈球菌雙乙醜乳酸亞種（Streptococcus lactis subspecies diacetylactis)和謝氏丙酸桿菌（Propionibacterium shermanii)的 混合物來抑制奶油農(nóng)家干酪中的霉菌和嗜冷菌的方法。
[0008] DE202006014937涉及具有降低的脂肪含量的乳脂混合物，其包含黃油和來自乳酸 菌的生物保護性培養(yǎng)物，不含防腐劑。
[0009] US5096718A涉及丙酸桿菌的代謝物質以及其在抑制食物產(chǎn)品中的革蘭氏陰性嗜 冷菌、酵母、霉菌、革蘭氏陽性細菌或李斯特氏菌（Listeria)的生長方面的用途。
[0010] W09816124A1涉及包含抗霉菌有效量的丙酸桿菌代謝物的食物或飲料或動物飼料 組合物。
[0011] 本發(fā)明的目標
[0012] 本發(fā)明實施例的目標是提供改進的丙酸桿菌菌株以及制備物和組合物，諸如僅包 含這樣的改進丙酸桿菌或與乳桿菌屬細菌組合的發(fā)酵培養(yǎng)液、保護性培養(yǎng)物、最終食物或 飼料產(chǎn)品。
[0013] 本發(fā)明實施例的目標是提供通過使用這些新的丙酸桿菌菌株來控制污染物諸如 細菌、酵母或霉菌的生長的方法。
【發(fā)明內容】
[0014] 本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)，新的丙酸桿菌菌株在能夠控制諸如細菌、酵母或霉菌的污染物 的生長方面具有改進的性質。
[0015] 因此，在第一方面，本發(fā)明涉及選自以下列表的丙酸桿菌屬的細菌：
[0016] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌（Propionibacterium acidipropionici)DSM 25845;
[0017] b?費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846;
[0018] c.費氏丙酸桿菌（Propionibacterium freudenreichii)DSM 25847;
[0019] d.特氏丙酸桿菌（Propionibacterium thoenii) DSM 25848;和
[0020] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849或它們的功能等同物。
[0021] 在第二方面，本發(fā)明涉及細菌制備物，其特征在于包含單獨的或與乳桿菌屬的細 菌、與細菌丙酸桿菌的任何其他菌株或與這兩者組合的選自以下列表的丙酸桿菌：
[0022] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ;
[0023] b?費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846;
[0024] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847 ;
[0025] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848 ;和
[0026] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0027] 或它們的功能等同物。
[0028] 在第三方面，本發(fā)明涉及選自以下列表的丙酸桿菌屬的細菌在制備最終食物或飼 料產(chǎn)品中的用途：
[0029] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845;
[0030] b?費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846;
[0031] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847 ;
[0032] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848 ;和
[0033] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0034] 或它們的功能等同物。
[0035] 在另一個方面，本發(fā)明涉及諸如保護性培養(yǎng)物或最終食物或飼料產(chǎn)品的組合物， 其包含選自以下列表的丙酸桿菌屬的活細菌：
[0036] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ;
[0037] b?費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846 ;
[0038] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847 ;
[0039] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848 ;和
[0040] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0041] 或它們的功能等同物。
[0042] 在另一個方面，本發(fā)明涉及包含選自以下列表的丙酸桿菌的細菌制備物在控制污 染物諸如細菌、酵母或霉菌的生長方面的用途：
[0043] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ;
[0044] b?費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846 ;
[0045] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847 ;
[0046] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848 ;和
[0047] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0048] 或它們的功能等同物。
[0049] 在另一個方面，本發(fā)明涉及控制污染物諸如細菌、酵母或霉菌的生長的方法，其特 征在于使用包含單獨的或與乳桿菌屬的細菌、與細菌丙酸桿菌的任何其他菌株或與這兩者 組合的選自以下列表的丙酸桿菌的細菌制備物：
[0050] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ;
[0051] b.費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846 ;
[0052] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847 ;
[0053] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848 ;和
[0054] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0055] 或它們的功能等同物。
[0056] 在另一個方面，本發(fā)明涉及諸如保護性培養(yǎng)物或最終食物或飼料產(chǎn)品的組合物， 其包含與選自以下列表的丙酸桿菌組合的乳桿菌屬的活細菌：
[0057] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ;
[0058] b?費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846 ;
[0059] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847 ;
[0060] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848 ;和
[0061] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0062] 或它們的功能等同物。
[0063] 在一些實施例中，該方法還包括純化和/或濃縮所述乳桿菌屬細菌的步驟。
[0064] 在另一個方面，本發(fā)明涉及控制組合物中諸如細菌、酵母或霉菌的污染物生長的 方法，該方法的特征在于使該組合物中存在根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物。
[0065] 在另一個方面，本發(fā)明涉及儲藏食物或飼料產(chǎn)品的方法，所述食物或飼料產(chǎn)品包 含乳桿菌屬的活細菌，該方法包括通過向所述食物或飼料產(chǎn)品添加根據(jù)本發(fā)明的細菌或根 據(jù)本發(fā)明的細菌制備物來控制該食物或飼料產(chǎn)品中諸如細菌、酵母或霉菌的污染物生長的 步驟。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0066] 圖1至圖8是覆蓋層測定的結果。當由丙酸桿菌產(chǎn)生抗真菌代謝物時，在丙酸桿 菌菌落周圍可見到干凈的區(qū)域。
[0067] 圖1費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846及其對青霉菌種（Penicillium sp.)DCS 436的抑制效果。
[0068] 圖2費氏丙酸桿菌DSM 25847及其對青霉菌種DCS 436的抑制效果。
[0069] 圖3費氏丙酸桿菌DSM 25847及其對漢遜德巴利酵母（Debaryomyces hansenii) DCS 605的抑制效果。
[0070] 圖4費氏丙酸桿菌DSM 25847及其對青霉菌種DCS 1540的抑制效果。
[0071] 圖5產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845及其對清酒假絲酵母（Candida sake) DCS 1055 的抑制效果。
[0072] 圖6特氏丙酸桿菌DSM 25848及其對清酒假絲酵母DCS 1055的抑制效果。
[0073] 圖7特氏丙酸桿菌DSM 25848及其對清酒假絲酵母DCS 1057的抑制效果。
[0074] 圖8特氏丙酸桿菌DSM 25848及其對鐮刀菌種（Fusarium sp. )DCS 1105的抑制 效果。
[0075] 圖9:儲藏在6°C的具有和不具有抗真菌培養(yǎng)物的3個不同酸奶批次中的酵母（膠 紅酵母（Rhodotorula mucilaginosa)DCS 1087和漢遜德巴利酵母DCS 605)的水平。無保 護性培養(yǎng)物（?)、費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846和鼠李糖乳桿菌DSM 7061的冷凍干 燥共混物（)、費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846和類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514 的冷凍干燥共混物（▲)。
[0076] 圖10:儲藏在6°C的具有和不具有抗真菌培養(yǎng)物的3個不同酸奶批次中的酵母 (膠紅酵母DCS 1087和漢遜德巴利酵母DCS 605)的水平。無保護性培養(yǎng)物（?)、費氏丙 酸桿菌謝氏亞種DSM 25846和鼠李糖乳桿菌DSM 7061的冷凍干燥共混物（)、費氏丙酸 桿菌謝氏亞種DSM 25846和鼠李糖乳桿菌DSM 7061的冷凍共混物（<)、費氏丙酸桿菌謝 氏亞種DSM 25846和類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514的冷凍干燥共混物（▲)、費氏丙 酸桿菌謝氏亞種DSM 25846和類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514的冷凍共混物（A)。
【具體實施方式】
[0077] 市售的抗真菌培養(yǎng)物HOLDBAC? YM-B和HOLDBAC? YM-C (丹麥杜邦公司（DuPont， Denmark))的抗真菌效果已經(jīng)在比如酸奶、新鮮干酪、酸奶油和白鹵干酪的不同類型發(fā)酵乳 制品的各種挑戰(zhàn)性研究中得到證實。此外，在Gouda型干酪的內部試驗中評價了 HOLDBAC? YM-B和HOLDBAC? YM-C的應用。結果證實，用HOLDBAC? YM-B或HOLDBAC? YM-C制備的干 酪上的腐壞霉菌的長出比沒有添加保護性培養(yǎng)物的參照延遲。據(jù)設想，只需存在丙酸桿菌 菌株即可能誘導乳桿菌菌株形成抗真菌代謝物。本發(fā)明的發(fā)明人證實了抗真菌活性的主要 部分來自于乳桿菌以及活乳桿菌與也表達抗真菌活性的丙酸桿菌的組合。
[0078] 本發(fā)明涉及具有針對酵母和霉菌的抑制活性的改進丙酸桿菌。該細菌適用于商品 (例如食物或飼料）的保存。
[0079] 如在實例中所述，在瓊脂測定中篩選菌株。
[0080] 這些菌株可用于開發(fā)抗真菌培養(yǎng)物，特別是用于乳品應用的抗真菌培養(yǎng)物。使用 抗真菌乳桿菌，基于HOLDBAC? YM共培養(yǎng)概念的用于例如酸奶（包括酸奶飲品）、酸奶油、 半硬和硬干酪、白軟干酪、新鮮干酪、奶油干酪和白鹵干酪的抗真菌培養(yǎng)物將成為可能。比 如酸面團等其他食物應用以及飼料產(chǎn)品（諸如青貯飼料）的保護可以是潛在性應用。
[0081] 定義
[0082] 如本文所用，術語"活的"是指具有活性代謝、存活、生長或繁殖的潛力的細菌細 胞。
[0083]如本文所用，術語"乳桿菌的保護性培養(yǎng)物"是指包含活乳桿菌的組合物（純培養(yǎng) 物或培養(yǎng)物濃縮物），其不是適于食用的最終食物產(chǎn)品，但添加到食物產(chǎn)品中以期降低病原 性或產(chǎn)毒微生物導致的風險。該定義包括諸如發(fā)酵培養(yǎng)基及其濃縮制備物的組合物，其中 乳桿菌在合適的培養(yǎng)基中生長。
[0084]如本文所用，術語"丙酸桿菌的保護性培養(yǎng)物"是指包含活丙酸桿菌的組合物（純 培養(yǎng)物或培養(yǎng)濃縮物），其不是適于食用的最終食物產(chǎn)品，但添加到食物產(chǎn)品中以期降低病 原性或產(chǎn)毒微生物導致的風險。該定義包括諸如發(fā)酵培養(yǎng)基及其濃縮制備物的組合物，其 中丙酸桿菌在合適的培養(yǎng)基中生長。
[0085]歐洲食品與飼料培養(yǎng)物協(xié)會（EFFCA)將保護性培養(yǎng)物表征如下：術語"保護性培 養(yǎng)物"已應用于表現(xiàn)出有助于抑制或控制食物中不期望微生物生長的代謝活性的微生物食 物培養(yǎng)物（MFC)。這些不期望的微生物可以為病原性或產(chǎn)毒細菌和真菌，但是引起腐壞的物 種也可包括在內。
[0086] 保護性培養(yǎng)物被視為起子培養(yǎng)物不可分割的一部分，起子培養(yǎng)物是用于生產(chǎn)諸如 干酪、酸奶、某些臘腸、葡萄酒等發(fā)酵食物的傳統(tǒng)食品技術工具。發(fā)酵食物的一般性質是它 們具有比非發(fā)酵原料更長的保質期（例如干酪具有比奶長得多的保質期）。這種性質是發(fā) 酵性培養(yǎng)物的活性代謝的結果，通過競爭營養(yǎng)物和結合位點的復雜系統(tǒng)以及通過產(chǎn)生抑制 性代謝物（比如有機酸、過氧化氫、二乙酰、羅伊氏素和細菌素）來發(fā)揮其作用。
[0087]根據(jù)所用的特定培養(yǎng)物，培養(yǎng)物通常還形成對食物產(chǎn)品具有感官和營養(yǎng)價值的多 種性質。以此方式，還已向食物中施加了用于發(fā)酵過程的相同起子培養(yǎng)物物種，以便利用 "生物保護"潛能而對感官具有或不具有影響。術語保護性培養(yǎng)物已應用于這些起子培養(yǎng) 物。
[0088]它們的使用不限于"經(jīng)典"的發(fā)酵食物，當其代謝活性在具有中性pH和高水活性 (會使食物病原體生長的風險升高）的食物中發(fā)生時，它們也發(fā)揮著重要作用。"保護性培 養(yǎng)物"的應用構成了改善食物衛(wèi)生的額外措施，并且不應允許忽視確保高食物安全標準的 良好生產(chǎn)規(guī)范的任何措施。
[0089]保護性培養(yǎng)物是起子培養(yǎng)物不可分割的一部分，而不是添加劑。顯而易見的是，這 些培養(yǎng)物（比如所有起子培養(yǎng)物）因其在食物中或食物上的代謝活性而發(fā)揮其保護性和有 益的潛力。（EFFCA，2011年12月）。
[0090]在食物或飼料發(fā)酵前，將保護性培養(yǎng)物與起子培養(yǎng)物一起添加至食物或飼料基質 中。因此，保護性培養(yǎng)物經(jīng)歷了發(fā)酵步驟，并能夠生長和/或能夠具有代謝活性。需要起子 培養(yǎng)物來生產(chǎn)發(fā)酵食物，比如酸奶、干酪和酸奶油，并且起子培養(yǎng)物有助于在味道、質地和 風味形成方面實現(xiàn)期望的產(chǎn)品變化。除此之外，將保護性培養(yǎng)物添加到食物中以限制病原 性或腐壞細菌的生長，并因此降低食物中毒的風險且保證保質期。
[0091] 如本文所用，術語"最終食物或飼料產(chǎn)品"是指適于食用的組合物，諸如適于人類 或動物以食物或飼料的形式食用。
[0092] 如本文所用的術語"污染物"是指諸如細菌、真菌（諸如酵母或霉菌）的任何微生 物的任何不期望的和非故意的生長。在某些情況下，污染物可引起疾病。然而，通常來說污 染物僅降解和劣化產(chǎn)品，其中發(fā)現(xiàn)和/或產(chǎn)生令人不愉快和不期望的味道或口感。
[0093] 在一些實施例中，污染物是選自以下列表的真菌：青霉屬物種（Penicillium spp.)，短密青霉（Penicillium brevicompactum)、離生青霉（Penicillium solitum)、 光滑青霉（Penicillium glabrum)、丁頁青霉(Penicillium corylophilum)、婁地青霉 (Penicillium roqueforti);曲霉屬物種（Aspergillus sp.)，赫曲霉（Aspergillus ochraceus)、寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)、雜色曲霉(Aspergillus versicolor)、黑曲霉（Aspergillus niger);散囊菌屬物種（Eurotium spp.);鐮 刀菌屬物種（Fusarium spp.);假絲酵母屬物種（Candida spp.)，軟假絲酵母 (Candida colliculosa)、無名假絲酵母（Candida famata)、季也蒙假絲酵母（Candida guilliermondii)、乳酒假絲酵母（Candida kefyr)、郎比克假絲酵母（Candida lambica)、 解脂假絲酵母（Candida lipolytica)、葡萄牙假絲酵母（Candida lusitaniae)、清酒假絲 酵母、圓球形假絲酵母（Candida sphaerica)、近平滑假絲酵母（Candida parapsilosis)、 菌膜假絲酵母（Candida pelliculosa)、皺糟假絲酵母（Candida rugosa)、誕沫假絲酵母 (Candida zeylanoides);德巴利酵母屬物種（Debaryomyces spp.)，漢遜德巴利酵母；克魯 維酵母屬物種（Kluyveromyces spp.)，馬克斯克魯維酵母（Kluyveromyces marxianus);紅 酵母屬物種（Rhodotorula spp.)，膠紅酵母；酵母屬物種（Saccharomyces spp.)，釀酒酵 母（Saccharomyces cerevisiae)、賽瓦酵母（Saccharomyces servazzii);以及地霉屬物種 (Geotrichum spp.)，白地霉（Geotrichum candidum) 〇
[0094] 在一些實施例中，污染物是與根據(jù)本發(fā)明的方法所用的特定乳桿菌菌株不同的細 菌，其選自以下列表：單核細胞增多性李斯特菌（Listeria monocytogenes)、假單孢菌種 (Pseudomonas sp.)、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)、芽抱桿菌種（Bacillus sp.)、乳桿菌種、明串珠菌種（Leuconostoc sp.)、梭菌種（Clostridium sp.)、腸桿菌 (Enterobacteriaceae)如梓樣酸桿菌種（Citrobacter sp.)、腸桿菌種（Enterobacter sp.)、埃希氏菌種（Escherichia sp.)、克雷伯氏菌種（Klebsiella sp.)、沙門氏菌種 (Salmonella sp.)〇
[0095] 乳桿菌
[0096] 如本文所用，術語"乳桿菌屬的細菌"是指乳桿菌屬的任何菌株，諸如可用于生 產(chǎn)酸奶、干酪、酸白菜、咸菜、啤酒、葡萄酒、蘋果酒、朝鮮泡菜、可可和其他發(fā)酵食物以及動 物飼料（諸如青C：飼料）的乳桿菌菌株。術語乳桿菌旨在涵蓋（http://www. bacterio. cict. fr/l/Lactobacillus. html)中所述的生物體，并且具體地講包括：耐酸乳桿菌 (L. acetotolerans)、酸粉乳桿菌（L. acidifarinae)、馬里乳桿菌（L. acidipiscis)、 嗜酸乳桿菌（L. acidophilus)、敏捷乳桿菌（L. agilis)、阿氏乳桿菌（L. algidus)、 消化乳桿菌（L. alimentarius)、降解淀粉類乳桿菌（L. amylolyticus)、嗜淀粉乳桿 菌（L. amylophilus)、L. amylotrophicus、食淀粉乳桿菌（L. amylovorus)、動物乳桿菌 (L.animalis)、胃竇乳桿菌（L.antri)、姬鼠乳桿菌（L.apodemi)、鳥乳桿菌（L.aviarius)、 雙發(fā)酵乳桿菌（L. bifermentans)、短乳桿菌（L. brevis)、布氏乳桿菌（L. buchneri)、荼樹 乳桿菌（L. camelliae)、干釀乳桿菌 L(. casei)、鏈狀乳桿菌（L. catenaformis)、L. ceti、 L coleohominis、丘狀菌落乳桿菌（L. collinoides)、復合乳桿菌（L. composti)、弧形乳桿 菌（L. concavus)、棒狀乳桿菌（L. coryniformis)、卷曲乳桿菌（L. crispatus)、面包乳桿菌 (L. crustorum)、彎曲乳桿菌（L. curvatus)、德氏乳桿菌德氏亞種（L. delbrueckii subsp. delbrueckii)、德氏乳桿菌保加利亞亞種（L. delbrueckii subsp. bulgaricus)、德氏乳桿 菌乳酸亞種（L. delbrueckii subsp. lactis)、糊精乳桿菌（L.dextrinicus)、迪氏乳桿菌 (L. diolivorans)、L. equi、額氏乳桿菌（L. equigenerosi)、螺絲乳桿菌（L. farraginis)、 香腸乳桿菌（L. farciminis)、發(fā)酵乳桿菌（L. fermentum)、弓形乳桿菌（L. fornicalis)、食 果糖乳桿菌（L. fructivorans)、弗氏乳桿菌（L. frumenti)、果糖乳桿菌（L. fuchuensis)、 雞乳桿菌（L.gallinarum)、格氏乳桿菌（L.gasseri)、胃炎乳桿菌（L. gastricus)、甘氏乳 桿菌（L. ghanensis)、草乳桿菌（L. graminis)、L. hammesii、哈氏乳桿菌（L. hamsteri)、哈 爾濱乳桿菌（L. harbinensis)、L. hayakitensis、瑞士乳桿菌（L. helveticus)、希氏乳桿菌 (L. hilgardii)、同型腐酒乳桿菌（L. homohiochii)、惰性乳桿菌（L. iners)、L. ingluviei、 腸乳桿菌（L.intestinalis)、詹氏乳桿菌（L.jensenii)、約氏乳桿菌（L.johnsonii)、 L. kalixensis、馬乳酒樣乳桿菌（L. kefiranofaciens)、高加索酸奶乳桿菌（L. kefiri)、辣白 菜乳桿菌（L. kimchii)、肉湯乳桿菌（L. kitasatonis)、昆氏乳桿菌（L. kunkeei)、萊士曼氏 乳桿菌（L.leichmannii)、林氏乳桿菌（L.lindneri)、壞發(fā)酵乳桿菌（L.malefermentans)、 馬里乳桿菌（L.mali)、食木薯乳桿菌（L.manihotivorans)、明登乳桿菌（L.mindensis)、 黏膜乳桿菌（L.mucosae)、鼠乳桿菌（L.murinus)、納氏乳桿菌（L.nagelii)、 L. namurensis、L. nantensis、寡發(fā)乳桿菌（L. oligofermentans)、□乳桿菌（L. oris)、 面包乳桿菌（L.panis)、美洲虎乳桿菌（L. panther is)、類短乳桿菌（L.parabrevis)、 類布氏乳桿菌（L. parabuchneri)、類丘狀菌落乳桿菌（L. paracollinoides)、類螺絲 乳桿菌（L. parafarraginis)、類高加索酸奶乳桿菌（L. parakefiri)、類消化乳桿菌 (L. paralimentarius)、類植物乳桿菌（L. paraplantarum)、戊糖乳桿菌（L. pentosus)、 L.perolens、植物乳桿菌（L.plantarum)、橋乳桿菌（L.pontis)、嬰|鶴乳桿菌 (L. psittaci)、L. rennini、羅伊氏乳桿菌（L. reuteri)、鼠李糖乳桿菌（L. rhamnosus)、 銀溝乳桿菌（L.rimae)、羅氏乳桿菌（L.rogosae)、羅斯乳桿菌（L.rossiae)、瘤胃乳桿 菌（1^.!'11111；[1118)、1^8&61'；[1111161'；[、清酒乳桿菌（1^8&1^；0、唾液乳桿菌（1^8&1；[￥&1'；[118)、 舊金山乳桿菌（L. sanfranciscensis)、L. satsumensis、L. secaliphilus、沙氏乳桿 菌（L. sharpeae)、L. siliginis、L. spicheri、豬歡白乳桿菌（L. suebicus)、泰國乳桿 菌（L. thailandensis)、L. ultunensis、疫苗幾乳桿菌（L. vaccinostercus)、陰道乳桿菌 (L. vaginalis)、文氏乳桿菌（L. versmoldensis)、L. vini、接牛乳桿菌（L. vitulinus)、玉 米乳桿菌（L. zeae)和L. zymae，及其變體。
[0097]術語乳桿菌旨在涵蓋在 EP0576780、EP1308506、EP1796698、EP2245943、 EP1530642、EP1740726、W0 03/040349、TO/2006/032542、W0/2007/132359、W0/2004/013343 和W0/2010/081138中所述的任何特定的乳桿菌菌株。
[0098] 在一些實施例中，乳桿菌菌株選自類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM14514和植物乳 桿菌 DSM 25833。
[0099] 丙酸桿菌
[0100] 如本文所用，術語"細菌丙酸桿菌的任何其他菌株"是指丙酸桿菌屬的任何菌株， 包括以下種：產(chǎn)酸丙酸桿菌（Propionibacterium acidifaciens)、產(chǎn)丙酸丙酸桿菌、痤瘡丙 酸桿菌（Propionibacterium acnes)、澳樟丙酸桿菌（Propionibacterium australiense)、 貪婪丙酸桿菌（Propionibacterium avidum)、嗜環(huán)己燒丙酸桿菌（Propionibacterium cyclohexanicum)、費氏丙酸桿菌費氏亞種（Propionibacterium.freudenreichii subsp. freudenreichii)、費氏丙酸桿菌謝氏亞種、顆粒丙酸桿菌（Propionibacterium granulosum)、詹氏丙酸桿菌、微嗜氧丙酸桿菌（Propionibacterium microaerophilum)、丙 酸丙酸桿菌（Propionibacterium propionicum)和特氏丙酸桿菌及其變體。該術語旨在涵 蓋在本公開中以及在EP0576780、EP1308506、W003/040349和US4728516任一者中所述的特 定菌株，包括費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 7067。
[0101] 本發(fā)明的具體實施例
[0102] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物為單獨的或與乳桿菌屬的細菌或丙酸 桿菌的另一菌株組合的發(fā)酵培養(yǎng)液中的細胞懸液。
[0103] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物還包含選自以下的乳桿菌菌株：類干 酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514、類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 25832、植物乳桿菌DSM 25833、植物乳桿菌DSM 25834、植物乳桿菌DSM 25835、植物乳桿菌DSM 25836、植物乳桿菌 DSM 25837和鼠李糖乳桿菌DSM 7061。
[0104] 在一些實施例中，該細菌制備物包含選自以下的丙酸桿菌菌株：產(chǎn)丙酸丙酸桿菌 DSM 25845、費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846、費氏丙酸桿菌DSM 25847、特氏丙酸桿菌 DSM 25848、特氏丙酸桿菌DSM 25849和費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 7067或它們的任何組 合。
[0105] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物包含產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845和選 自以下的乳桿菌菌株：類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514、類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 25832、植物乳桿菌DSM 25833、植物乳桿菌DSM 25834、植物乳桿菌DSM 25835、植物乳桿菌 DSM 25836、植物乳桿菌DSM 25837和鼠李糖乳桿菌DSM 7061。
[0106] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物包含費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846和選自以下的乳桿菌菌株：類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514、類干酪乳桿菌類干 酪亞種DSM 25832、植物乳桿菌DSM 25833、植物乳桿菌DSM 25834、植物乳桿菌DSM 25835、 植物乳桿菌DSM25836、植物乳桿菌DSM 25837和鼠李糖乳桿菌DSM 7061。
[0107] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物包含費氏丙酸桿菌DSM 25847和選自 以下的乳桿菌菌株：類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514、類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 25832、植物乳桿菌DSM 25833、植物乳桿菌DSM 25834、植物乳桿菌DSM 25835、植物乳桿菌 DSM 25836、植物乳桿菌DSM 25837和鼠李糖乳桿菌DSM 7061。
[0108] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物包含特氏丙酸桿菌DSM25848和選自 以下的乳桿菌菌株：類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514、類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 25832、植物乳桿菌DSM 25833、植物乳桿菌DSM 25834、植物乳桿菌DSM 25835、植物乳桿菌 DSM 25836、植物乳桿菌DSM 25837和鼠李糖乳桿菌DSM 7061。
[0109] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物包含特氏丙酸桿菌DSM 25849和選自 以下的乳桿菌菌株：類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514、類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 25832、植物乳桿菌DSM 25833、植物乳桿菌DSM 25834、植物乳桿菌DSM 25835、植物乳桿菌 DSM 25836、植物乳桿菌DSM 25837和鼠李糖乳桿菌DSM 7061。
[0110] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物包含費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 7067 和選自以下的乳桿菌菌株：類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514、類干酪乳桿菌類干酪亞 種DSM 25832、植物乳桿菌DSM 25833、植物乳桿菌DSM 25834、植物乳桿菌DSM 25835、植物 乳桿菌DSM 25836、植物乳桿菌DSM 25837和鼠李糖乳桿菌DSM 7061。
[0111] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物是濃縮的。
[0112] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物是冷凍干燥的或冷凍的。
[0113] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的細菌制備物的特征在于其還包含用于酵母和霉菌 控制的常規(guī)試劑，諸如丙酸鹽或苯丙氨酸。
[0114] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物是乳桿菌的保護性培養(yǎng)物，并且乳桿菌屬 的所述活細菌以至少l〇 7CFU/g或ml，諸如至少5X107CFU/g或ml，諸如至少108CFU/g或 ml，諸如至少10 9CFU/g或ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5 X 101(lCFU/g或ml，諸 如至少10nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少 5X10 12CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X1013CFU/g或ml組合物的量存 在。
[0115] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物是丙酸桿菌的保護性培養(yǎng)物，并且丙酸桿 菌屬的所述活細菌以至少l〇 7CFU/g或ml，諸如至少5X107CFU/g或ml，諸如至少108CFU/g 或ml，諸如至少10 9CFU/g或ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5 X 101(lCFU/g或ml，諸 如至少10nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少 5X1012CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X10 13CFU/g或ml組合物的量存 在。
[0116] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物為最終食物或飼料產(chǎn)品，并且乳桿菌屬的 所述活細菌以至少l〇 5CFU/g或ml，諸如至少5 X 105CFU/g或ml，諸如至少106CFU/g或ml，諸 如至少5 X 106CFU/g或ml，諸如至少107CFU/g或ml，諸如至少5 X 107CFU/g或ml，諸如至少 108CFU/g或ml，諸如至少5 X 108CFU/g或ml，諸如至少109CFU/g或ml，諸如至少5 X 109CFU/ g或ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5 X 101(lCFU/g或ml，諸如至少10nCFU/g或ml， 諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少5 X 1012CFU/g或ml，諸如 至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X 1013CFU/g或ml組合物的量存在。
[0117] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物為最終食物或飼料產(chǎn)品，并且丙酸桿菌 屬的所述活細菌以至少l〇 5CFU/g或ml，諸如至少5 X 105CFU/g或ml，諸如至少106CFU/ g或ml，諸如至少5X106CFU/g或ml，諸如至少10 7CFU/g或ml，諸如至少5X107CFU/g或 ml，諸如至少108CFU/g或ml，諸如至少5 X 108CFU/g或ml，諸如至少109CFU/g或ml，諸 如至少5X 109CFU/g或ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5X 101(lCFU/g或ml，諸如 至少10nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少 5X1012CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X10 13CFU/g或ml組合物的量存 在。
[0118]在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物或制備物為乳桿菌的保護性培養(yǎng)物。
[0119] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物或制備物為丙酸桿菌的保護性培養(yǎng)物。
[0120] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物或制備物為最終食物或飼料產(chǎn)品。
[0121] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物具有或不具有丙酸桿菌屬的所述細菌的細 胞殘留物。
[0122] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物是乳桿菌的保護性培養(yǎng)物，并且乳桿菌屬 的所述活細菌以至少l〇 7CFU/g或ml，諸如至少5X107CFU/g或ml，諸如至少108CFU/g或 ml，諸如至少10 9CFU/g或ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5 X 101(lCFU/g或ml，諸 如至少10nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少 5X10 12CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X1013CFU/g或ml組合物的量存 在。
[0123] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物是丙酸桿菌的保護性培養(yǎng)物，并且丙酸桿 菌屬的所述活細菌以至少l〇 7CFU/g或ml，諸如至少5X107CFU/g或ml，諸如至少108CFU/g 或ml，諸如至少10 9CFU/g或ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5 X 101(lCFU/g或ml，諸 如至少10nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少 5X10 12CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X1013CFU/g或ml組合物的量存 在。
[0124] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物為最終產(chǎn)品，并且乳桿菌屬的所述活細菌 以至少10 5CFU/g或ml，諸如至少5X105CFU/g或ml，諸如至少106CFU/g或ml，諸如至少 5 X 106CFU/g或ml，諸如至少107CFU/g或ml，諸如至少5 X 107CFU/g或ml，諸如至少108CFU/ g或ml，諸如至少5X10 8CFU/g或ml，諸如至少109CFU/g或ml，諸如至少5X109CFU/g或 ml，諸如至少10 1(lCFU/g或ml，諸如至少5 X 101(lCFU/g或ml，諸如至少10nCFU/g或ml，諸如 至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少5 X 1012CFU/g或ml，諸如至少 1013CFU/g或ml，諸如至少5X 1013CFU/g或ml組合物的量存在。
[0125] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物是乳桿菌的保護性培養(yǎng)物，并且乳桿菌屬 的所述活細菌以至少l〇 7CFU/g或ml，諸如至少5X107CFU/g或ml，諸如至少108CFU/g或 ml，諸如至少10 9CFU/g或ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5 X 101(lCFU/g或ml，諸 如至少10nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少 5X10 12CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X1013CFU/g或ml組合物的量存 在。
[0126] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物是丙酸桿菌的保護性培養(yǎng)物，并且丙酸桿 菌屬的所述活細菌以至少l〇 7CFU/g或ml，諸如至少5X107CFU/g或ml，諸如至少108CFU/g 或ml，諸如至少10 9CFU/g或ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5 X 101(lCFU/g或ml，諸 如至少10nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少 5X10 12CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X1013CFU/g或ml組合物的量存 在。
[0127] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物為最終產(chǎn)品，并且乳桿菌屬的所述活細菌 以至少10 5CFU/g或ml，諸如至少5X105CFU/g或ml，諸如至少106CFU/g或ml，諸如至少 5 X 106CFU/g或ml，諸如至少107CFU/g或ml，諸如至少5 X 107CFU/g或ml，諸如至少108CFU/ g或ml，諸如至少5X10 8CFU/g或ml，諸如至少109CFU/g或ml，諸如至少5X109CFU/g或 ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5 X 101(lCFU/g或ml，諸如至少10nCFU/g或ml，諸如 至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少5 X 1012CFU/g或ml，諸如至少 1013CFU/g或ml，諸如至少5X 1013CFU/g或ml組合物的量存在。
[0128] 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的組合物或制備物用于制備食物產(chǎn)品或飼料產(chǎn)品， 諸如奶產(chǎn)品。在一些實施例中，食物產(chǎn)品選自乳制品、酸奶、酸奶飲品、干酪（諸如新鮮干 酪、奶油干酪、白軟干酪、半軟和軟干酪、半硬和硬干酪、白鹵干酪）、酸奶產(chǎn)品和酸奶油、德 國泡菜、咸菜、啤酒、葡萄酒、蘋果酒、朝鮮泡菜、可可、酸面團和其他發(fā)酵食物以及動物飼料 (諸如青C飼料）。
[0129] 在根據(jù)本發(fā)明的一些實施例中，乳桿菌屬的細菌選自以下列表：
[0130] 類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514;
[0131] 類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 25832;
[0132] 植物乳桿菌DSM 25833 ;
[0133] 植物乳桿菌DSM 25834 ;
[0134] 植物乳桿菌DSM 25835 ;
[0135] 植物乳桿菌DSM 25836 ;
[0136] 植物乳桿菌DSM 25837和
[0137] 鼠李糖乳桿菌DSM 7061。
[0138] 編號的根據(jù)本發(fā)明的實施例：
[0139] 1.選自以下列表的丙酸桿菌屬的細菌：
[0140] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845;
[0141] b.費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846;
[0142] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847 ;
[0143] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848;和
[0144] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849或它們的功能等同物。
[0145] 2. -種細菌制備物，其特征在于包含單獨的或與乳桿菌屬的細菌、與丙酸桿菌屬 的任何其他菌株或與這兩者組合的選自以下列表的丙酸桿菌：
[0146] a.產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845;
[0147] b.費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846;
[0148] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847 ;
[0149] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848和
[0150] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0151] 或它們的功能等同物。
[0152] 3.根據(jù)實施例2的細菌制備物，其為單獨的或與乳桿菌屬的細菌、與丙酸桿菌的 另一菌株或與這兩者組合的發(fā)酵培養(yǎng)液中的細胞懸液。
[0153] 4.根據(jù)實施例2-3中任一項的細菌制備物，其特征在于包含選自以下的乳桿菌菌 株：類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514、類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 25832、植物乳桿 菌DSM 25833、植物乳桿菌DSM 25834、植物乳桿菌DSM 25835、植物乳桿菌DSM 25836、植物 乳桿菌DSM 25837和鼠李糖乳桿菌DSM 7061。
[0154] 5.根據(jù)實施例2-4中任一項的細菌制備物，其中所述制備物是濃縮的。
[0155] 6.根據(jù)實施例2-4中任一項的細菌制備物，其中所述制備物是冷凍干燥的。
[0156] 7.根據(jù)實施例2-6中任一項的細菌制備物，其特征在于還包含用于酵母和霉菌控 制的常規(guī)試劑，諸如丙酸鹽或苯丙氨酸。
[0157] 8.選自以下列表的丙酸桿菌屬的細菌在制備最終食物或飼料產(chǎn)品中的用途：
[0158] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845;
[0159] b.費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846 ;
[0160] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847;
[0161] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848和
[0162] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0163] 或它們的功能等同物。
[0164] 9.包含選自以下列表的丙酸桿菌的細菌制備物在控制污染物諸如細菌、酵母或霉 菌的生長方面的用途：
[0165] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845;
[0166] b?費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846;
[0167] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847 ;
[0168] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848和
[0169] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0170] 或它們的功能等同物。
[0171] 10. -種控制諸如細菌、酵母或霉菌的污染物的生長的方法，其特征在于使用包含 單獨的或與乳桿菌屬的細菌、與丙酸桿菌屬的另一菌株或與這兩者組合的選自以下列表的 丙酸桿菌的細菌制備物：
[0172] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845;
[0173] b?費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846 ;
[0174] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847 ;
[0175] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848和
[0176] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0177] 或它們的功能等同物。
[0178]11.組合物，諸如保護性培養(yǎng)物或最終食物或飼料產(chǎn)品，其包含與選自以下列表的 丙酸桿菌組合的乳桿菌屬的活細菌：
[0179] a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ;
[0180] b.費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846;
[0181] c.費氏丙酸桿菌DSM 25847 ;
[0182] d.特氏丙酸桿菌DSM 25848和
[0183] e.特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0184] 或它們的功能等同物。
[0185]12.根據(jù)實施例11的組合物，其中所述組合物是乳桿菌的保護性培養(yǎng)物，并且乳 桿菌屬的所述活細菌以至少l〇 7CFU/g或ml，諸如至少5 X 107CFU/g或ml，諸如至少108CFU/ g或ml，諸如至少109CFU/g或ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5 X 101(lCFU/g或ml， 諸如至少l〇nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至 少5X1012CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X10 13CFU/g或ml組合物的量 存在。
[0186] 13.根據(jù)實施例11的組合物，其中所述組合物是最終食物或飼料產(chǎn)品，并且乳桿 菌屬的所述活細菌以至少l〇 5CFU/g或ml，諸如至少5X105CFU/g或ml，諸如至少106CFU/ g或ml，諸如至少5X10 6CFU/g或ml，諸如至少107CFU/g或ml，諸如至少5X107CFU/g或 ml，諸如至少10 8CFU/g或ml，諸如至少5 X 108CFU/g或ml，諸如至少109CFU/g或ml，諸 如至少5X 109CFU/g或ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5X 101(lCFU/g或ml，諸如 至少10nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少 5X10 12CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X1013CFU/g或ml組合物的量存 在。
[0187] 14.根據(jù)實施例11-13中任一項的組合物或根據(jù)實施例2-7的制備物，其為食物產(chǎn) 品或飼料產(chǎn)品或用于制備食物產(chǎn)品或飼料產(chǎn)品，諸如奶產(chǎn)品。
[0188] 15.根據(jù)實施例14的組合物，其中所述食物產(chǎn)品選自乳制品、酸奶、酸奶飲品、干 酪（諸如新鮮干酪、奶油干酪、白軟干酪、半軟和軟干酪、半硬和硬干酪、白鹵干酪）、酸奶產(chǎn) 品和酸奶油、酸白菜、咸菜、啤酒、葡萄酒、蘋果酒、朝鮮泡菜、可可、酸面團和其他發(fā)酵食物 以及動物飼料（諸如青貯飼料）。
[0189] 16.根據(jù)實施例11-13中任一項的組合物或根據(jù)實施例2-7的制備物，其中乳桿菌 屬的所述細菌選自以下列表：
[0190] 類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514 ;
[0191] 類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM25832 ;
[0192] 植物乳桿菌DSM 25833 ;
[0193] 植物乳桿菌DSM 25834 ;
[0194] 植物乳桿菌DSM 25835 ;
[0195] 植物乳桿菌DSM 25836 ;
[0196] 植物乳桿菌DSM 25837和
[0197] 鼠李糖乳桿菌DSM 7061或它們的任何組合。
[0198] 17.根據(jù)實施例11-16中任一項的組合物在控制污染物諸如細菌、酵母或霉菌的 生長方面的用途。
[0199]實例 1
[0200] 丙酸桿菌測試菌株
[0201] 使用以下丙酸桿菌菌株：
[0202] -產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845
[0203] -費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846
[0204] -費氏丙酸桿菌DSM 25847
[0205] -特氏丙酸桿菌DSM 25848
[0206] -特氏丙酸桿菌DSM 25849
[0207] 丙酸桿菌的培養(yǎng)
[0208] 使丙酸桿菌在30°C下在厭氧罐中在由以下物質組成的乳酸鈉培養(yǎng)液中繁殖：2% 得自酪蛋白的蛋白胨（德國達姆施塔特的默克公司（Merck KGaA，Darmstadt, Germany))、 1 %酵母提取物（默克公司）和1. 6 %乳酸鈉溶液50% (默克公司）。通過將得自預培養(yǎng)物 的0. lml加入10ml乳酸鈉培養(yǎng)液，如上所述進行培養(yǎng)而完成傳代。將培養(yǎng)物在使用前保持 在 4。。-6。。。
[0209]酵母和霉囷指7K囷株
[0210] 在下文中，酵母和霉菌菌株列于表1和表2中。
[0211] 表1 :用于篩詵抗直菌活件的酵母菌株的列表
【權利要求】
1. 一種選自以下列表的丙酸桿菌（Propionibacterium)屬的細菌： a?產(chǎn)丙酸丙酸桿菌（Propionibacterium acidipropionici)DSM 25845 ; b?費氏丙酸桿菌謝氏亞種（Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii) DSM 25846 ； c. 費氏丙酸桿菌（Propionibacterium freudenreichii)DSM 25847 ; d. 特氏丙酸桿菌（Propionibacterium thoenii)DSM 25848 和 e. 特氏丙酸桿菌DSM 25849;或它們的功能等同物。
2. -種細菌制備物，其特征在于包含單獨的或與乳桿菌（Lactobacillus)屬的細菌、 與丙酸桿菌屬的任何其他菌株或與這兩者組合的選自以下列表的丙酸桿菌： a. 產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ; b. 費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846; c. 費氏丙酸桿菌DSM 25847 ; d. 特氏丙酸桿菌DSM 25848 ;和 e. 特氏丙酸桿菌DSM 25849 ; 或它們的功能等同物。
3. 根據(jù)權利要求2所述的細菌制備物，所述細菌制備物為單獨的或與乳桿菌 (Lactobacillus)屬的細菌、與丙酸桿菌的另一菌株或與這兩者組合的發(fā)酵培養(yǎng)液中的細 菌懸液。
4. 根據(jù)權利要求2-3中任一項所述的細菌制備物，其特征在于包含選自以下的乳桿 菌菌株：類干酪乳桿菌類干酪亞種（Lactobacillus paracasei subsp. paracasei)DSM 14514、類干釀乳桿菌類干釀亞種DSM 25832、植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)DSM 25833、植物乳桿菌DSM 25834、植物乳桿菌DSM 25835、植物乳桿菌DSM25836、植物乳桿菌 DSM 25837 和鼠李糖乳桿菌（Lactobacillus rhamnosus)DSM 7061。
5. 根據(jù)權利要求2-4中任一項所述的細菌制備物，其中所述制備物是濃縮的。
6. 根據(jù)權利要求2-4中任一項所述的細菌制備物，其中所述制備物是冷凍干燥的。
7. 根據(jù)權利要求2-6中任一項所述的細菌制備物，其特征在于還包含用于酵母和霉菌 控制的常規(guī)試劑，諸如丙酸鹽或苯丙氨酸。
8. 選自以下列表的丙酸桿菌屬的細菌在制備最終食物或飼料產(chǎn)品中的用途： a. 產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ; b. 費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846; c. 費氏丙酸桿菌DSM 25847 ; d. 特氏丙酸桿菌DSM 25848 ;和 e. 特氏丙酸桿菌DSM 25849 ; 或它們的功能等同物。
9. 包含選自以下列表的丙酸桿菌的細菌制備物在控制污染物諸如細菌、酵母或霉菌的 生長方面的用途： a. 產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ; b. 費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846; c. 費氏丙酸桿菌DSM25847; d. 特氏丙酸桿菌DSM 25848 ;和 e. 特氏丙酸桿菌DSM 25849 ; 或它們的功能等同物。
10. -種控制污染物諸如細菌、酵母或霉菌的生長的方法，其特征在于使用根據(jù)權利要 求1所述的細菌或包含單獨的或與乳桿菌屬的細菌、與丙酸桿菌屬的另一菌株或與這兩者 組合的選自以下列表的丙酸桿菌的細菌制備物： a. 產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ; b. 費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846; c. 費氏丙酸桿菌DSM 25847; d. 特氏丙酸桿菌DSM 25848;和 e. 特氏丙酸桿菌DSM 25849; 或它們的功能等同物。
11. 組合物，諸如保護性培養(yǎng)物或最終食物或飼料產(chǎn)品，所述組合物包含選自以下列表 的丙酸桿菌屬的活細菌： a. 產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ; b. 費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846; c. 費氏丙酸桿菌DSM 25847; d. 特氏丙酸桿菌DSM 25848;和 e. 特氏丙酸桿菌DSM 25849 ; 或它們的功能等同物。
12. 根據(jù)權利要求11所述的組合物，其中所述組合物為丙酸桿菌的保護性培養(yǎng)物并 且所述丙酸桿菌屬的活細菌以至少l〇7CFU/g或ml，諸如至少5X 107CFU/g或ml，諸如至少 108CFU/g 或 ml，諸如至少 109CFU/g 或 ml，諸如至少 101(lCFU/g 或 ml，諸如至少 5 X 101(ICFU/ g或ml，諸如至少10nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml， 諸如至少5X1012CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X10 13CFU/g或ml組 合物的量存在，或者所述組合物為最終食物或飼料產(chǎn)品并且所述丙酸桿菌屬的所述活細菌 以至少105CFU/g或ml，諸如至少5X105CFU/g或ml，諸如至少106CFU/g或ml，諸如至少 5 X 106CFU/g或ml，諸如至少107CFU/g或ml，諸如至少5 X 107CFU/g或ml，諸如至少108CFU/ g或ml，諸如至少5X108CFU/g或ml，諸如至少109CFU/g或ml，諸如至少5X10 9CFU/g或 ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5 X 101(lCFU/g或ml，諸如至少10nCFU/g或ml，諸如 至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少5 X 1012CFU/g或ml，諸如至少 1013CFU/g或ml，諸如至少5X 1013CFU/g或ml組合物的量存在。
13. 組合物，諸如保護性培養(yǎng)物或最終食物或飼料產(chǎn)品，所述組合物包含與選自以下列 表的丙酸桿菌組合的乳桿菌屬的活細菌： a. 產(chǎn)丙酸丙酸桿菌DSM 25845 ; b. 費氏丙酸桿菌謝氏亞種DSM 25846; c. 費氏丙酸桿菌DSM 25847 ; d. 特氏丙酸桿菌DSM 25848 ;和 e. 特氏丙酸桿菌DSM 25849 ; 或它們的功能等同物。
14. 根據(jù)權利要求13所述的組合物，其中所述組合物為乳桿菌的保護性培養(yǎng)物并且 所述乳桿菌屬的所述活細菌以至少l〇7CFU/g或ml，諸如至少5X 107CFU/g或ml，諸如至少 108CFU/g 或 ml，諸如至少 109CFU/g 或 ml，諸如至少 101(lCFU/g 或 ml，諸如至少 5 X 101(ICFU/ g或ml，諸如至少10nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml， 諸如至少5 X 1012CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5 X 1013CFU/g或ml組合 物的量存在。
15. 根據(jù)權利要求13所述的組合物，其中所述組合物為最終食物或飼料產(chǎn)品，并且所 述乳桿菌屬的所述活細菌以至少1 〇5CFU/g或ml，諸如至少5 X 105CFU/g或ml，諸如至少 106CFU/g或ml，諸如至少5 X 106CFU/g或ml，諸如至少107CFU/g或ml，諸如至少5 X 107CFU/ g或ml,諸如至少108CFU/g或ml,諸如至少5X 108CFU/g或ml,諸如至少109CFU/g或ml, 諸如至少5X 109CFU/g或ml，諸如至少101(lCFU/g或ml，諸如至少5X 101(lCFU/g或ml，諸 如至少10nCFU/g或ml，諸如至少5 X 10nCFU/g或ml，諸如至少1012CFU/g或ml，諸如至少 5X1012CFU/g或ml，諸如至少1013CFU/g或ml，諸如至少5X1013CFU/g或ml組合物的量存 在。
16. 根據(jù)權利要求2-7所述的制備物，其為乳桿菌的保護性培養(yǎng)物。
17. 根據(jù)權利要求11-15所述的組合物或根據(jù)權利要求2-7所述的制備物，其為最終食 物或飼料產(chǎn)品。
18. 根據(jù)權利要求13-17中任一項所述的組合物或根據(jù)權利要求2-7所述的制備物，其 為食物產(chǎn)品或飼料產(chǎn)品或用于制備食物產(chǎn)品或飼料產(chǎn)品，諸如奶產(chǎn)品。
19. 根據(jù)權利要求18所述的組合物，其中所述食物產(chǎn)品選自乳制品，酸奶，酸奶飲品， 干酪諸如新鮮干酪、奶油干酪、白軟干酪、半軟和軟干酪、半硬和硬干酪、白齒干酪，酸奶產(chǎn) 品和酸奶油，酸白菜，咸菜，啤酒，葡萄酒，蘋果酒，朝鮮泡菜，可可，酸面團和其他發(fā)酵食物 以及動物飼料諸如青C飼料。
20. 根據(jù)權利要求13-17中任一項所述的組合物或根據(jù)權利要求2-7所述的制備物，其 中所述乳桿菌屬的所述細菌選自以下列表： 類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM 14514; 類干酪乳桿菌類干酪亞種DSM25832 ; 植物乳桿菌DSM 25833 ; 植物乳桿菌DSM 25834 ; 植物乳桿菌DSM 25835 ; 植物乳桿菌DSM 25836 ; 植物乳桿菌DSM 25837 ;和 鼠李糖乳桿菌DSM 7061或它們的任何組合。
21. 根據(jù)權利要求11-15中任一項所述的組合物或根據(jù)權利要求2-7所述的制備物在 控制污染物諸如細菌、酵母或霉菌的生長方面的用途。
22. -種用于控制組合物中污染物諸如細菌、酵母或霉菌的生長的方法，所述方法的特 征在于使所述組合物中存在根據(jù)權利要求2-7中任一項所述的細菌制備物。
23. -種儲藏食物或飼料產(chǎn)品的方法，所述食物或飼料產(chǎn)品包含乳桿菌屬的活細菌，所 述方法包括通過向所述食物或飼料產(chǎn)品添加根據(jù)權利要求1所述的細菌或根據(jù)權利要求 2-7中任一項所述的細菌制備物來控制所述食物或飼料產(chǎn)品中污染物諸如細菌、酵母或霉 菌的生長的步驟。
【文檔編號】A23C9/127GK104394701SQ201380032552
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2013年5月21日 優(yōu)先權日:2012年5月21日
【發(fā)明者】C.本菲德特, H.U.莫根斯特恩 申請人:杜邦營養(yǎng)生物科學有限公司