三株防治新疆紅棗樹(shù)黑斑病病害的生防細(xì)菌菌株的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了三株防治新疆紅棗樹(shù)黑斑病的拮抗細(xì)菌菌株，菌株為芽孢桿菌屬。所述芽孢桿菌經(jīng)平板對(duì)峙試驗(yàn)篩選所得，能夠有效抑制紅棗樹(shù)黑斑病病原菌的生長(zhǎng)。菌株來(lái)源于土壤中，012菌體形狀為桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陰性茵，單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、不易乳化；045-1菌體的形狀為短桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陽(yáng)性菌，單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、易乳化；063-1菌體的形狀為短桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陽(yáng)性菌。單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、不易乳化。菌株做為生物制劑，不含有化學(xué)農(nóng)藥的有害成分，具有無(wú)毒無(wú)污染、易生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，具有廣闊的應(yīng)用前景。
【專(zhuān)利說(shuō)明】三株防治新疆紅棗樹(shù)黑斑病病害的生防細(xì)菌菌株
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于森林保護(hù)領(lǐng)域，具體涉及三株防治新疆紅棗樹(shù)黑斑病病害的拮抗細(xì)菌菌株及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著人們對(duì)紅棗的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及藥用價(jià)值認(rèn)識(shí)得不斷深入，社會(huì)需求量的加大，有效地激發(fā)了新疆規(guī)?；l(fā)展、產(chǎn)業(yè)化經(jīng)營(yíng)棗樹(shù)的積極性，現(xiàn)已發(fā)展成為南疆林果業(yè)中的新型產(chǎn)業(yè)。隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整和退耕還林政策的實(shí)施，新疆紅棗產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，截至2009年底，新疆紅棗種植面積已達(dá)32.07萬(wàn)hm2，約占全國(guó)的21.38%，南疆已成為我國(guó)商品棗的生產(chǎn)基地。隨著紅棗直播建園技術(shù)的應(yīng)用，紅棗種植規(guī)模迅速擴(kuò)大，矮化密植栽培模式在全疆廣泛采用，但綜合管理水平相對(duì)滯后，導(dǎo)致黑斑病、縮果病、裂果病等病害在局部地區(qū)嚴(yán)重發(fā)生，尤其是棗黑斑病。
[0003]通常主要通過(guò)加強(qiáng)棗園綜合管理，增強(qiáng)樹(shù)勢(shì)來(lái)防治。如合理密植、合理施肥合理灌水、合理利用激素、化學(xué)防治等。由于生態(tài)果園的提出，化學(xué)防治對(duì)果園生態(tài)環(huán)境與人類(lèi)健康有影響。生物防治不僅具有有效控制害蟲(chóng)、不污染環(huán)境、改善農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)、而且利用生物防治或微生物活菌劑防治植物病害，資源豐富，選擇性強(qiáng)，對(duì)人、畜及植物安全，一旦被馴化而建立種群，對(duì)病蟲(chóng)害有較長(zhǎng)期的控制作用。從微生物種類(lèi)來(lái)看，多作為微生物農(nóng)藥使用，不論是病毒、細(xì)菌、和真菌等，研究的熱點(diǎn)都是-拮抗細(xì)菌。拮抗細(xì)菌是從土壤中篩選出的對(duì)植物病原物有抑制作用的細(xì)菌，主要是通過(guò)產(chǎn)生抑制物質(zhì)或改變菌種周?chē)男…h(huán)境來(lái)致使病菌菌絲畸形或菌絲不產(chǎn)孢，從而達(dá)到拮抗的作用的一類(lèi)細(xì)菌。拮抗菌株芽孢桿菌，是從土壤中分離獲得的對(duì)紅棗樹(shù)黑斑病具有較好拮抗作用的一株生物防治細(xì)菌菌株，對(duì)紅棗黑斑病病害的防治具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的 技術(shù)問(wèn)題是提供三株防治新疆紅棗樹(shù)黑斑病病害的生防細(xì)菌株。
[0005]本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為:通過(guò)對(duì)土壤中細(xì)菌進(jìn)行分離純化，篩選出對(duì)紅棗黑斑病病原菌拮抗活性好的拮抗細(xì)菌。其方法如下:
[0006]1、篩選細(xì)菌；
[0007]2、供試病原菌由10級(jí)研究生從紅棗病斑中分離得到；
[0008]3、配制培養(yǎng)基:1)菌株純化常用的培養(yǎng)基；2)細(xì)菌鑒定常用培養(yǎng)基
[0009]4、拮抗細(xì)菌拮抗作用的測(cè)定:1)拮抗細(xì)菌對(duì)病原菌的平板對(duì)峙拮抗試驗(yàn)；2)拮抗細(xì)菌發(fā)酵液對(duì)病原菌生長(zhǎng)影響的試驗(yàn)
【具體實(shí)施方式】
[0010]以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。[0011]實(shí)施例1
[0012]采用土壤稀釋法篩選分離細(xì)菌，很據(jù)形態(tài)、生理生化特征及16S rDNA序列分析鑒定確定其為小芽孢桿菌。菌株來(lái)源于土壤中，012菌體形狀為桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陰性菌，單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、不易乳化；045-1菌體的形狀為短桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陽(yáng)性菌，單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、易乳化；063-1菌體的形狀為短桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陽(yáng)性菌。單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、不易乳化。通過(guò)拮抗細(xì)菌的拮抗試驗(yàn)可以得出三株拮抗菌對(duì)紅棗黑斑病病菌的拮抗效果平 均達(dá)到了 85%，效果非?？捎^；通過(guò)抑制原理實(shí)驗(yàn)可以得出:三株拮抗細(xì)菌與紅棗黑斑病病菌發(fā)生拮抗試驗(yàn)時(shí)，拮抗細(xì)菌使紅棗黑斑病病原菌正常的菌絲隔膜發(fā)生了斷裂、解體或畸形。且本次試驗(yàn)鑒定出的三株芽孢桿菌，本次試驗(yàn)鑒定出的拮抗細(xì)菌，均為好氧型細(xì)菌，在厭氧情況下可以緩慢生長(zhǎng)，具有良好地適應(yīng)生長(zhǎng)能力，在溫度高達(dá)45°C時(shí)也能正常生長(zhǎng)。從而在生物藥劑開(kāi)發(fā)中，提高了培育拮抗細(xì)菌的存活率，為以后農(nóng)業(yè)提供廉價(jià)、高效的生物農(nóng)藥奠定了基礎(chǔ)。
【權(quán)利要求】
1.篩選細(xì)菌。
2.供試病原菌由10級(jí)研究生從紅棗病斑中分離得到。
3.配制培養(yǎng)基:1)菌株純化常用的培養(yǎng)基；2)細(xì)菌鑒定常用培養(yǎng)基。
4.拮抗細(xì)菌拮抗作用的測(cè)定:1)拮抗細(xì)菌對(duì)病原菌的平板對(duì)峙拮抗試驗(yàn)；2)拮抗細(xì)菌發(fā)酵液對(duì)病原菌生長(zhǎng)影響的試驗(yàn)。
【文檔編號(hào)】C12Q1/04GK103695527SQ201310727738
【公開(kāi)日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2013年12月26日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月26日
【發(fā)明者】馬榮, 田呈明, 朱銀飛, 梁英梅, 王曉煒, 王陽(yáng)陽(yáng), 胡建新 申請(qǐng)人:新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)