一種番茄晚疫病的防治方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種番茄晚疫病的防治方法其特征在于通過所番茄晚疫病病原菌污染純化方法實驗，取得番茄晚疫病菌菌絲耐最高溫度可達到43℃，在4℃情況下菌絲仍可以生長, 經8h番茄晚疫病孢子囊可全部將孢子釋放出來, 同時本試驗提出了番茄晚疫 病病原菌污染純化方法。對番茄晚疫病病原菌高溫致死實驗、低溫保存實驗、室溫下孢子囊釋放孢子時間及方式觀察，受雜菌污染純化方法研究，取得番茄晚疫病病菌的防治依據，使番茄晚疫病病原菌種植防治、藥劑防治取得良好的效果，通過實驗其有效率達到98.7%。
【專利說明】一種番茄晚疫病的防治方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及農作物病蟲害防治【技術領域】，具體涉及一種番茄晚疫病的防治方法。

【背景技術】
[0002]番茄晚疫病在世界很多國家都有嚴重發(fā)生，如美國、加拿大、墨西哥、法國、瑞士、澳大利亞等國家均有報道。而我國北京、山西、云南、貴州、山東、陜西、河南、河北、四川、湖北等省市也在不同時期報道番茄種植遭受到晚疫病不同程度的危害。番茄晚疫病保護地、露地均可發(fā)生，但主要危害保護地番茄。連續(xù)陰雨天氣多的年份危害嚴重。發(fā)病嚴重時造成莖部腐爛、植株萎蔫和果實變褐色，影響產量。番茄晚疫病癥狀幼苗、成株均可發(fā)病，為害葉、莖、果，但以成株期的葉片和青果受害較重。幼苗感病出現(xiàn)暗綠色水浸狀病斑，呈黑褐色，最終導致植株幼苗染病，由葉片向主莖發(fā)展，使葉柄和莖變細呈黑褐色而腐爛折倒，全株萎蔫，濕度大時病部產生白霉層。幼莖基部發(fā)病，形成水潰狀縊縮，幼苗萎蔫或倒伏。成株期葉片染病多從下部葉片發(fā)病，形成暗綠色水浸狀邊緣不明顯的病斑，擴大后呈褐色。濕度大時葉背病健交界處出現(xiàn)白霉，干燥時病部干枯，脆而易破。莖部病斑最初呈黑色凹陷，后變黑褐腐爛，易引起主莖病部以上枝葉萎蔫。青果染病，病斑呈油浸狀暗綠色，后變黑褐色，稍凹陷，病部較硬，邊緣呈明顯的云紋狀。濕度大時生長白霉，迅速腐爛。番茄晚疫病菌主要以菌絲體隨病殘體在土壤里越冬，亦可以菌絲體潛伏在馬鈴薯的薯塊上由春播植株上傳給番茄。病菌孢子囊通過氣流和雨水落到植株上后，在水中萌發(fā)，產生游動孢子，游動孢子再萌發(fā)，侵入到植物組織中去。當田間形成中心病株后，產生大量繁殖體，再經風雨向四周擴展，慢慢形成普遍發(fā)病。此病由致病疫霉真菌浸染引起。低溫潮濕是該病發(fā)生的主要條件。溫度在18?22°C、相對濕度在95%?100%時利于發(fā)生和流行。當葉片上有水滴存在時，孢子囊和游動孢子萌發(fā)。溫度在20?23°C時菌絲生長最快。是否發(fā)病與流行，決定水滴或水膜的存在。偏施氮肥、底肥不足、連陰雨、光照不足、通風不良、澆水過多、密度過大均易于該病發(fā)生。病菌經氣流、灌溉水進行傳播再侵染。該病為多次重復浸染的流行性病害。


【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明的目的在于通過實驗掌握番茄晚疫病菌菌絲耐最高溫度可達到43 °C，在4 °C情況下菌絲仍可以生長，經8 h番茄晚疫病孢子囊可全部將孢子釋放出來，提出了番茄晚疫病病原菌污染純化方法和種植防治方法。
[0004]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術方案具體如下:
[0005]—、番爺晚疫病病原菌污染純化方法
[0006]1、高溫致死實驗
[0007]病菌1 h處理結果表明，當溫度升高到彡45 °C時，菌絲和孢子失去了活力。溫度保持在<43 1:情況下，菌絲和孢子仍然具有活力。病菌在28、30 1:恒溫箱中1周，取出后接到新的黑麥培養(yǎng)基上，結果發(fā)現(xiàn)菌絲仍具有生活力。
[0008]2、低溫保存實驗
[0009]低溫保存試驗結果表明，在-20 °C情況下的菌絲I周后死亡，4 °C保存6個月仍然具有活力。
[0010]3、室溫下孢子囊釋放孢子時間及方式觀察
[0011]實驗結果表明，10 min后開始有游動孢子釋放，游動孢子大多聚集在孢子囊附近；3 h后游動孢子釋放309Γ50%(由血球計數板觀測)；8 h后觀察基本上所有的孢子釋放完畢(由血球計數板觀測)。
[0012]4、番茄晚疫病病菌受雜菌污染純化方法
[0013]污染的病菌菌絲經傷口處理后進行培養(yǎng)的結果表明，3 d后植株開始發(fā)病，將病組織取下，重新進行分離培養(yǎng)及純化，即可得到純的番茄晚疫病菌。
[0014]二、番爺晚疫病病原菌防治方法
[0015]1、番茄晚疫病病原菌種植防治
[0016]選用抗病品種，如中蔬4號、5號、強豐、佳粉、中雜4號等品種；與非茄科作物實行3年以上輪作；加強肥水管理，晴天澆水并防止大水漫灌，保護地澆灌后適時通風，施足底月巴，采用配方施肥；合理密植，及時整枝，改善通風透光條件；及時清除中心病株。
[0017]2、番茄晚疫病病原菌藥劑防治
[0018]①噴霧施藥.選用40%疫霉靈可濕性粉劑250倍液、58%甲霜靈錳鋅可濕性粉劑500倍液、64%殺毒礬可濕性粉劑500倍液、72%霜脲錳鋅(杜邦克露)可濕性粉劑800倍液、69%安克錳鋅可濕性粉劑1000倍液。
[0019]②粉塵施藥。選用5%霜脲錳鋅粉塵劑每畝每I公斤、5%百菌清粉塵劑每畝每次I公斤，于傍晚棚室封棚前施藥，過夜即可。7?8天一次，連續(xù)3?4次。
[0020]③煙霧施藥。選用45%百菌清煙劑250克/畝次，傍晚施藥，封閉棚室。
[0021]④灌根施藥。選用50%甲霜銅可濕性粉劑600倍液、60%琥.乙磷鋁可濕性粉劑400倍液，每株灌藥液300克左右即可。
[0022]本發(fā)明的有益效果在于通過對番茄晚疫病病原菌高溫致死實驗、低溫保存實驗、室溫下孢子囊釋放孢子時間及方式觀察，受雜菌污染純化方法研究，取得番茄晚疫病病菌的防治依據，使番茄晚疫病病原菌種植防治、藥劑防治取得良好的效果。

【具體實施方式】
[0023]結合甘肅某地番茄種植基地晚疫病病原菌種植防治做進一步說明。
[0024]實例一、一種番茄晚疫病的防治方法
[0025]1、番茄晚疫病病原菌實驗
[0026]1.1病原菌的分離與純化培養(yǎng)
[0027]病組織分離方法:將番茄組織病葉、莖或果實用0.1%的升汞溶液浸泡3?5 min,進行表面消毒，在葉片病斑與健康組織交界處用消毒的解剖刀切取I?2 mm的病組織小塊，投入4%次氯酸鈉溶液中進行再次消毒30 S，然后用無菌水沖洗3次，最后用消毒的鑷子將組織小塊轉移到黑麥培養(yǎng)基中，每個培養(yǎng)皿放2?3塊病樣組織塊，將培養(yǎng)皿放Λ 20 1:的溫箱中培養(yǎng)。
[0028]當病塊組織生長2?3 d時，便可以看到白色、稀疏的菌絲環(huán)繞在病樣組織周圍，第4天便可以在無菌操作間內、在無菌條件下用消毒的接種鉤挑取菌落邊緣的菌絲體，再次接種到新的黑麥培養(yǎng)基中央，進行多次的分離純化，直至菌落生長整齊一致沒有雜菌出現(xiàn)為止。如果有雜菌出現(xiàn)，只能再從病組織上重新分離，所以一旦污染極難純化。單孢分離法:用無菌水將分生孢子從所采集的番茄晚疫病葉片上沖洗下來，稀釋成一定濃度的孢子懸浮液，均勻地涂布于黑麥培養(yǎng)基表面，在顯微鏡下找到平板表面的單個分生孢子，用滅菌的細金屬針將單個孢子轉移到新的黑麥培養(yǎng)基表面，在20 °C的生物培養(yǎng)箱內培養(yǎng)。3?4 d后在單孢分離的平板培養(yǎng)基上長出白色的小菌落，從這些小菌落的邊緣挑取約1?2 mm左右的菌絲小塊再次接種到新的黑麥培養(yǎng)基中，在20 °C溫箱內培養(yǎng)，進行多次純化，直至得到完全純化的培養(yǎng)物。
[0029]1.2 方法
[0030]1.2.1高溫致死情況
[0031]將培養(yǎng)10 d左右的番茄晚疫病病菌培養(yǎng)皿直接放入28、30、33、35、37、39、41、43、45、47、49 °C等的恒溫培養(yǎng)箱中，待溫度恒定放入，溫度差在0.2 °C左右，每個處理3次重復，1 h后取出，在無菌操作情況下取菌落邊緣菌絲塊放入新的黑麥培養(yǎng)基中培養(yǎng)3^4 d,觀察菌落生長情況。
[0032]將培養(yǎng)10 d左右的番茄晚疫病病菌培養(yǎng)皿放入28、30 1:恒溫箱中1周，取出在無菌情況下取菌落邊緣菌絲塊放入新的黑麥培養(yǎng)基中培養(yǎng)3?4 d,觀察菌落生長情況。將培養(yǎng)10 d左右的番茄晚疫病病菌培養(yǎng)皿放入35 1:恒溫箱中1周，在無菌操作情況下取菌落邊緣菌絲塊放入新的黑麥培養(yǎng)基中培養(yǎng)3?4 d,觀察菌落生長情況。
[0033]1.2.2低溫保存情況
[0034]將培養(yǎng)10 d左右的番茄晚疫病病菌培養(yǎng)皿分別放入-20 V及4 °C冰箱中保存1周、2周、1個月、2個月、6個月后取出，在無菌操作情況下取菌落邊緣菌絲塊放入新的黑麥培養(yǎng)基中培養(yǎng)3?4d，觀察菌落生長情況。
[0035]1.2.3室溫下孢子囊釋放孢子時間及方式觀察
[0036]在供試的病菌菌落的邊緣用打孔器打下等菌齡的菌絲小塊，接種到黑麥培養(yǎng)基中央，20 °C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)12 d后照取出，將10 mL的無菌水注入培養(yǎng)皿內，沖洗下白色的菌落(分生孢子器)，用玻璃棒攪拌，放在室溫下觀察孢子囊釋放孢子情況。
[0037]1.2.4番茄晚疫病病菌受雜菌污染純化方法
[0038]番茄晚疫病病菌相對于其他的細菌及真菌生活力更弱，如果污染后很難進一步分離，針對這些做以下試驗:將4葉齡健壯植株在莖部用刀片縱向輕輕割開0.5 cm,不要傷及韌皮部，挑出污染的病菌菌絲，盡量將傷口敷滿，然后用濕棉條將傷口裹緊，放入要求24 h黑暗、濕度100%、溫度20 °〇的恒溫培養(yǎng)箱中，以后要求12 h黑暗、12 h光照、濕度80%以上、溫度20 °C的生物培養(yǎng)箱中，3 d后觀察發(fā)病情況。
[0039]2番茄晚疫病病菌實驗結果
[0040]2.1高溫致死實驗結果
[0041]病菌1 h處理結果表明，當溫度升高到彡45 °C時，菌絲和孢子失去了活力。溫度保持在<43 1:情況下，菌絲和孢子仍然具有活力。
[0042]病菌在28、30 1:恒溫箱中1周，取出后接到新的黑麥培養(yǎng)基上，結果發(fā)現(xiàn)菌絲仍具有生活力。
[0043]2.2低溫保存實驗結果
[0044]低溫保存試驗結果表明，在-20 °C情況下的菌絲I周后死亡，4 °C保存6個月仍然具有活力。
[0045]2.3室溫下孢子囊釋放孢子時間及方式觀察
[0046]結果表明，10 min后開始有游動孢子釋放，游動孢子大多聚集在孢子囊附近；3 h后游動孢子釋放309Γ50%(由血球計數板觀測)；8 h后觀察基本上所有的孢子釋放完畢(由血球計數板觀測)。
[0047]2.4番茄晚疫病病菌受雜菌污染純化方法
[0048]污染的病菌菌絲經傷口處理后進行培養(yǎng)的結果表明，3 d后植株開始發(fā)病，將病組織取下，重新進行分離培養(yǎng)及純化，即可得到純的番茄晚疫病菌。
[0049]本試驗經過反復驗證，番茄晚疫病病菌耐最高溫度可達(43 ± I) 0C ( I h)，在(45±1) 0C ( I h)情況下才會死亡，并且在28、30 °C兩種條件下保存達I周之久，在此培養(yǎng)仍具有生活力，并且30 °C培養(yǎng)I周仍具有一定的致病性。
[0050]本純化方法十分實用，同時其他生長較弱的菌污染也可采用此方法進行純化。番茄晚疫病菌菌絲耐最高溫度可達到43 °C，在4 °C情況下菌絲仍可以生長，經8 h番茄晚疫病孢子囊可全部將孢子釋放出來，同時本試驗提出了番茄晚疫病病原菌污染純化方法。
[0051]3、番茄晚疫病病原菌防治方法
[0052]3.1、番茄晚疫病病原菌種植防治
[0053]選用抗病品種，如中蔬4號、5號、強豐、佳粉、中雜4號等品種；與非茄科作物實行3年以上輪作；加強肥水管理，晴天澆水并防止大水漫灌，保護地澆灌后適時通風，施足底月巴，采用配方施肥；合理密植，及時整枝，改善通風透光條件；及時清除中心病株。
[0054]3.2、番茄晚疫病病原菌藥劑防治
[0055]①噴霧施藥.選用40%疫霉靈可濕性粉劑250倍液、58%甲霜靈錳鋅可濕性粉劑500倍液、64%殺毒礬可濕性粉劑500倍液、72%霜脲錳鋅(杜邦克露)可濕性粉劑800倍液、69%安克錳鋅可濕性粉劑1000倍液。
[0056]②粉塵施藥。選用5%霜脲錳鋅粉塵劑每畝每I公斤、5%百菌清粉塵劑每畝每次I公斤，于傍晚棚室封棚前施藥，過夜即可。7?8天一次，連續(xù)3?4次。
[0057]③煙霧施藥。選用45%百菌清煙劑250克/畝次，傍晚施藥，封閉棚室。
[0058]④灌根施藥。選用50%甲霜銅可濕性粉劑600倍液、60%琥.乙磷鋁可濕性粉劑400倍液，每株灌藥液300克左右即可。
[0059]本發(fā)明通過對番茄晚疫病病原菌高溫致死實驗、低溫保存實驗、室溫下孢子囊釋放孢子時間及方式觀察，受雜菌污染純化方法研究，取得番茄晚疫病病菌的防治依據，使番茄晚疫病病原菌種植防治、藥劑防治取得良好的效果。通過實驗其有效率達到98.7%。
【權利要求】
1.一種番爺晚疫病的防治方法所述的番爺晚疫病病原菌污染純化方法為: (1)高溫致死實驗病菌Ih處理結果表明，當溫度升高到彡45 °C時，菌絲和孢子失去了活力，溫度保持在<43 1:情況下，菌絲和孢子仍然具有活力，病菌在28、30 °〇恒溫箱中I周，取出后接到新的黑麥培養(yǎng)基上，結果發(fā)現(xiàn)菌絲仍具有生活力； (2)低溫保存實驗低溫保存試驗結果表明，在-20°C情況下的菌絲I周后死亡，4 °C保存6個月仍然具有活力； (3)室溫下孢子囊釋放孢子時間及方式觀察實驗結果表明，10min后開始有游動孢子釋放，游動孢子大多聚集在孢子囊附近；3 h后游動孢子釋放309Γ50%(由血球計數板觀測)；8 h后觀察基本上所有的孢子釋放完畢(由血球計數板觀測)； (4)番茄晚疫病病菌受雜菌污染純化方法污染的病菌菌絲經傷口處理后進行培養(yǎng)的結果表明，3d后植株開始發(fā)病，將病組織取下，重新進行分離培養(yǎng)及純化，即可得到純的番茄晚疫病菌。
2.如權利要求1所述一種番爺晚疫病的防治方法所述的番爺晚疫病病原菌污染純化方法，同時其他生長較弱的菌污染也可采用此方法進行純化。
3.一種番爺晚疫病的防治方法所述的番爺晚疫病病原菌防治方法在于: (1)、番茄晚疫病病原菌種植防治 選用抗病品種，如中蔬4號、5號、強豐、佳粉、中雜4號等品種；與非茄科作物實行3年以上輪作；加強肥水管理，晴天澆水并防止大水漫灌，保護地澆灌后適時通風，施足底肥，采用配方施肥；合理密植，及時整枝，改善通風透光條件；及時清除中心病株； (2)、番茄晚疫病病原菌藥劑防治 ①噴霧施藥.選用40%疫霉靈可濕性粉劑250倍液、58%甲霜靈錳鋅可濕性粉劑500倍液、64%殺毒礬可濕性粉劑500倍液、72%霜脲錳鋅(杜邦克露)可濕性粉劑800倍液、69%安克錳鋅可濕性粉劑1000倍液。； ②粉塵施藥。選用5%霜脲錳鋅粉塵劑每畝每I公斤、5%百菌清粉塵劑每畝每次I公斤，于傍晚棚室封棚前施藥，過夜即可。7?8天一次，連續(xù)3?4次； ③煙霧施藥。選用45%百菌清煙劑250克/畝次，傍晚施藥，封閉棚室； ④灌根施藥。選用50%甲霜銅可濕性粉劑600倍液、60%琥?乙磷鋁可濕性粉劑400倍液，每株灌藥液300克左右即可。
【文檔編號】C12R1/645GK104335845SQ201310311573
【公開日】2015年2月11日 申請日期:2013年7月23日 優(yōu)先權日:2013年7月23日
【發(fā)明者】周菊香 申請人:周菊香