專(zhuān)利名稱(chēng)：一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白及其編碼基因與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白及其編碼基因與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
水母屬刺胞動(dòng)物門(mén)，是一類(lèi)分布廣泛、生物總量非常龐大的海洋浮游生物。已有大量研究表明，水母體內(nèi)富含多種生物活性物質(zhì)，包括水母毒素蛋白和一些活性強(qiáng)烈、具有良好開(kāi)發(fā)前景的新功能蛋白。水母類(lèi)浮游于4-6米深的海水表層，長(zhǎng)期生活在強(qiáng)烈的光輻射環(huán)境下。氧化損傷是紫外輻射造成機(jī)體損傷的重要機(jī)制之一，已有研究表明，浮游生物為避免或減少紫外輻射造成的損害，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期適應(yīng)性選擇，在其機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生了種類(lèi)繁多、結(jié)構(gòu)特異、活性強(qiáng)烈的抗氧化活性物質(zhì)。發(fā)達(dá)的抗氧化體系在保護(hù)細(xì)胞和生物體免受光及感光色素等損傷中起重要作用， 能保護(hù)強(qiáng)光紫外對(duì)生物體的輻射，清除輻射反應(yīng)中產(chǎn)生的自由基。已有研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)形霞水母觸手提取物具有很強(qiáng)的體外抗氧化活性，對(duì)活性氧族的清除能力遠(yuǎn)比常用的抗氧化劑維生素C強(qiáng)。通過(guò)硫酸銨沉淀、凝膠過(guò)濾層析等方法也分別從水母Rhopilema esculentum、Stomolophus meleagris中分離出多種具有明顯清除自由基功能的蛋白。這些結(jié)果均表明，水母體內(nèi)含有活性強(qiáng)烈的抗氧化活性組分，是抗氧化、抗輻射活性物質(zhì)的重要來(lái)源。盡管如此，目前對(duì)水母體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的組成、重要抗氧化酶類(lèi)(蛋白)的序列信息、表達(dá)情況、抗氧化活性水平等尚未有系統(tǒng)的了解。硫氧還蛋白(Thioredoxin, Trx)是一類(lèi)廣泛存在于各種生物體內(nèi)作為氫載體的小分子氧化還原蛋白，分子量為10 12kDa，均含有一個(gè)高度保守的活性結(jié)構(gòu)位點(diǎn)WCGPC。硫氧還蛋白可以使蛋白的二硫鍵還原為雙巰基，從而對(duì)機(jī)體內(nèi)多種生物反應(yīng)過(guò)程進(jìn)行調(diào)節(jié)，包括調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子DNA結(jié)合活性、細(xì)胞抗氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡過(guò)程、抗脅迫作用、抗腫瘤、促進(jìn)免疫應(yīng)答等。硫氧還蛋白與硫氧還蛋白還原酶、NADPH共同構(gòu)成硫氧還蛋白系統(tǒng)，能夠?qū)C(jī)體內(nèi)被氧化損傷的蛋白質(zhì)進(jìn)行還原修復(fù)與重新折疊，調(diào)節(jié)體內(nèi)多種酶活力，通過(guò)可逆的雙硫鍵和硫醇變化在保護(hù)機(jī)體應(yīng)對(duì)氧化應(yīng)激、保持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定等方面發(fā)揮重要還原載體的作用。此外，在一些活性氧過(guò)量產(chǎn)生的情況下，硫氧還蛋白的表達(dá)量亦大量增加，作為生物體內(nèi)活性氧清除劑來(lái)減少或避免機(jī)體的氧化損傷。在機(jī)體因衰老引起活性氧增加導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的過(guò)程中，硫氧還蛋白還可以結(jié)合調(diào)控某些細(xì)胞因子，抑制細(xì)胞凋亡和機(jī)體衰老。目前，國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)對(duì)水母硫氧還蛋白的有關(guān)研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白及其編碼基因，本發(fā)明的另一目的在于提供該發(fā)形霞水母硫氧還蛋白在制備抗氧化藥物、抗輻射藥物、皮膚防護(hù)劑、食品防腐劑、抗衰老藥物等中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)構(gòu)建發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)，并對(duì)該文庫(kù)重組克隆的序列進(jìn)行測(cè)定和注釋分析，獲得了發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的編碼基因。該發(fā)形霞水母硫氧還蛋白是首次發(fā)現(xiàn)的具有明顯抗氧化活性的水母類(lèi)硫氧還蛋白，是水母體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的重要活性組分，該蛋白在抗氧化、抗輻射藥物研究中具有良好的應(yīng)用前景。本發(fā)明的主要技術(shù)方案是，通過(guò)構(gòu)建發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)，對(duì)其進(jìn)行測(cè)序和篩選，獲得發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的編碼基因，并對(duì)其抗氧化活性進(jìn)行研究。本發(fā)明的第一方面，提供了一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白，所述的一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白，具有如下(i)或(ii)的蛋白質(zhì):( i )具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(ii)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序經(jīng)取代、缺失和/或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸且同等功能的由(i )衍生的蛋白質(zhì)。所述的一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白，具有如SEQ ID NO: 2所不的氣基酸序列，該蛋白不含信號(hào)肽，為非分泌蛋白，定位于細(xì)胞質(zhì)，分子量為11.5kDa，等電點(diǎn)為5.1。本發(fā)明還提供了一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的編碼基因，為如下(i )或(ii )的DNA分子:( i )具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；(ii )與SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列同源性在80%以上的核苷酸序列。所述的一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的編碼基因，該核苷酸序列全長(zhǎng)479bp，包含一個(gè)315bp的開(kāi)放閱讀框，如SEQ ID NO:1所示。本發(fā)明的第二方面，提供了一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的制備方法，該方法包括如下步驟:(I)構(gòu)建發(fā)形霞水母觸手組`織cDNA文庫(kù)；(2)對(duì)上述發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)重組克隆的序列進(jìn)行測(cè)定和分析，獲得一個(gè)編碼硫氧還蛋白的核苷酸序列；(3)構(gòu)建發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的表達(dá)質(zhì)粒，重組工程菌；(4)發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的表達(dá)；(5)重組發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的純化。所述步驟(I)中的發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)通過(guò)如下方法構(gòu)建:I)抽提發(fā)形霞水母觸手組織總RNA ；2 )分離mRNA，合成發(fā)形霞水母觸手組織cDNA ；3)將上述cDNA插入pUC19質(zhì)粒載體，再轉(zhuǎn)化至大腸桿菌DH5a中，涂布于LB培養(yǎng)基平板進(jìn)行藍(lán)白斑篩選，即構(gòu)建成發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)。所述步驟(3 )中的構(gòu)建發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的表達(dá)質(zhì)粒，重組工程菌，具體步驟為:I)根據(jù)發(fā)形霞水母硫氧還蛋白基因序列以及原核表達(dá)載體pET24a的酶切位點(diǎn)，設(shè)計(jì)一對(duì)帶有特異性酶切位點(diǎn)Nde I和Xho I的PCR引物，如下所示:上游引物:5’ -GCGGGAATTCCATATGGTTAGAGA-3 ’下游引物:5’ -CCGCTCGAGTTTATGACTCTTAATC-3 ’PCR 反應(yīng)條件為:95°C保溫 5min ;95°C保溫 30sec，55.5°C保溫 30sec，68°C保溫lmin, 30 個(gè)循環(huán)；68°C保溫 5min ；2)酶切回收后的PCR產(chǎn)物及pET24a原核表達(dá)質(zhì)粒；
3)利用兩個(gè)酶切位點(diǎn)將編碼序列連接到pET24a載體上，構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒，然后轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21(DE3)獲得重組工程菌。所述步驟(4)中的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的表達(dá)條件為:25°C、lmM IPTG、150rpm/min下誘導(dǎo)8小時(shí)，在此誘導(dǎo)條件下重組蛋白主要以可溶形式表達(dá)，表達(dá)量占總蛋白量的50%以上。所述步驟(5)中的純化為采用鎳離子親和層析柱一步純化即得，洗脫條件為分別占總體積50%的結(jié)合緩沖液與50%的洗脫緩沖液；其中，結(jié)合緩沖液為NaH2P0420mM;NaC1500mM;咪唑 30mM ；pH7.4，洗脫緩沖液為 NaH2P0420mM; NaC1500mM;咪唑500mM ；pH7.4。本發(fā)明的第三方面，提供了發(fā)形霞水母硫氧還蛋白及其編碼基因在制備抗氧化藥物、抗輻射藥物、皮膚防護(hù)劑、食品防腐劑、抗衰老藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)構(gòu)建發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)，采用BLASTx分析法，獲得了一個(gè)編碼硫氧還蛋白的序列，即包含序列表SEQ ID N0.1所示的核苷酸序列。此核苷酸序列全長(zhǎng)479bp,包含一個(gè)315bp的開(kāi)放閱讀框,編碼一個(gè)含105個(gè)氨基酸殘基的蛋白質(zhì)，即序列表SEQ ID N0.2所示氨基酸序列。該蛋白不含信號(hào)肽，為非分泌蛋白，定位于細(xì)胞質(zhì)，具有典型的硫氧還蛋白功能結(jié)構(gòu)域。本發(fā)明通過(guò)構(gòu)建硫氧還蛋白基因的原核重組表達(dá)載體，將重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌宿主細(xì)胞，篩選得到表達(dá)發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的重組菌，誘導(dǎo)表達(dá)后利用親和層析法純化獲得重組蛋白，該制備方法簡(jiǎn)單，成本低廉。本發(fā)明獲得的重組發(fā)形霞水母硫氧還蛋白具有顯著的抗氧化活性。胰島素還原法實(shí)驗(yàn)中，在DTT存在的情況下，胰島素A、B鏈間的二硫鍵可以被上述硫氧還蛋白還原而斷裂，兩鏈解離，因B鏈的溶解度較低使反應(yīng)液變渾濁，在655nm處吸光值明顯升高，且重組發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的濃度越高，吸光值上升越快，說(shuō)明其具有明顯的二硫鍵還原能力。另夕卜，上述硫氧還蛋白還具有ABTS自由基清除能力，抗氧化能力為維生素C等價(jià)物Trolox的
6.5倍。因此，本發(fā)明中涉及的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白在開(kāi)發(fā)抗氧化藥物、抗衰老藥物、抗輻射藥物、皮膚防護(hù)劑、食品防腐劑方面將有很大的應(yīng)用價(jià)值。


圖1為發(fā)形霞水母硫氧還蛋白與其他物種硫氧還蛋白的序列多重比對(duì)；其中，黑色代表完全同源的區(qū)域，方框標(biāo)出了其高度保守的活性結(jié)構(gòu)位點(diǎn)WCGPC。 圖2為本發(fā)明中擴(kuò)增發(fā)形霞水母硫氧還蛋白開(kāi)放閱讀框編碼序列的PCR產(chǎn)物核酸電泳結(jié)果；其中，M:2kb的核酸分子量Marker ；1:PCR產(chǎn)物。圖3為本發(fā)明中重組發(fā)形霞水母硫氧還蛋白誘導(dǎo)表達(dá)的SDS-PAGE電泳結(jié)果；其中，M:蛋白分子量Marker ；1:未誘導(dǎo)的pET24a大腸桿菌；2:經(jīng)誘導(dǎo)的pET24a大腸桿菌；3:誘導(dǎo)前的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白重組大腸桿菌；4:誘導(dǎo)后的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白重組大腸桿菌；5:誘導(dǎo)后的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白重組大腸桿菌超聲裂解上清；6:誘導(dǎo)后的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白重組大腸桿菌超聲裂解沉淀；圖4為本發(fā)明中重組發(fā)形霞水母硫氧還蛋白分離純化的SDS-PAGE電泳結(jié)果；

其中，1:誘導(dǎo)前的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白重組大腸桿菌；2:誘導(dǎo)后的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白重組大腸桿菌超聲裂解上清；3:純化重組蛋白時(shí)穿透峰；4:純化重組蛋白時(shí)洗脫峰；圖5為檢測(cè)純化發(fā)形霞水母硫氧還蛋白抗氧化能力(ABTS+自由基清除法)時(shí)用維生素C等價(jià)物Trolox反應(yīng)而制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(y=_0.0005x+0.2979，R2=0.9976)。圖6為檢測(cè)純化發(fā)形霞水母硫氧還蛋白對(duì)胰島素A、B鏈間二硫鍵還原作用能力的曲線(xiàn)圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。但下列實(shí)施例不應(yīng)看作對(duì)本發(fā)明范圍的限制。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。用實(shí)施例1制得的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白進(jìn)行實(shí)施例2-3的實(shí)驗(yàn)。本發(fā)明選擇的發(fā)形霞水母(Cyanea Capillata)采集自浙江省三門(mén)灣海域,并經(jīng)集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院教授鑒定(L.Xiao et al, Toxicon, 2009，53:146 - 152)。實(shí)施例1:發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的篩選及制備。1.發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)的構(gòu)建和分析I)發(fā)形霞水母觸 手組織總RNA的抽提根據(jù)Invitrogen公司的Trizol試劑說(shuō)明進(jìn)行，氯仿去除蛋白質(zhì)，獲得約7 μ g總RNA ；2)mRNA 的分離按照 QIANGEN 公司的 Oligotex mRNA Spin-coIumn Kit 說(shuō)明進(jìn)行，cDNA 的合成則參照 Clontech 公司的 SMART cDNA Library Construction Kit 說(shuō)明進(jìn)行；3)將cDNA插入pUC19質(zhì)粒載體(購(gòu)自Takara公司),再轉(zhuǎn)化至大腸桿菌DH5 α (購(gòu)自北京博邁德公司)中，涂布于15CM培養(yǎng)皿進(jìn)行藍(lán)白斑篩選，即構(gòu)建成發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)。該文庫(kù)共有菌落1923個(gè)，其中藍(lán)斑35個(gè)，重組率98.18%，庫(kù)容量1.92*106，插入長(zhǎng)度彡400bp的有效序列1035條,采用100bp、90%的原則對(duì)這些序列進(jìn)行unigene歸并，得到unigene數(shù)為528條。同時(shí)對(duì)序列進(jìn)行全長(zhǎng)分析，在20條序列中有12條序列有相關(guān)同源信息，結(jié)果為其中12條全長(zhǎng)，完整性比率:12/12X100%= 100%，表明該cDNA文庫(kù)具有較好的質(zhì)量。對(duì)該cDNA文庫(kù)進(jìn)行隨機(jī)測(cè)序，所得序列經(jīng)去載體后進(jìn)行BLASTx分析(http://blast.ncb1.nlm.nig.gov)。2.發(fā)形霞水母硫氧還蛋白基因序列的分析發(fā)形霞水母硫氧還蛋白基因來(lái)自上述cDNA文庫(kù)中編號(hào)為2F09的克隆。序列全長(zhǎng)479bp，包含一個(gè)315bp的開(kāi)放閱讀框，編碼含105個(gè)氨基酸殘基的蛋白質(zhì)，分子量11.5kDa，等電點(diǎn)5.1。Blastx搜索結(jié)果顯示該蛋白與多個(gè)物種的硫氧還蛋白高度同源(如圖1),是水母來(lái)源硫氧還蛋白家族的新分子。對(duì)其進(jìn)一步的生物信息學(xué)分析顯示，該蛋白不含有信號(hào)肽，為非分泌蛋白，定位于細(xì)胞質(zhì)。3.發(fā)形霞水母硫氧還蛋白重組表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及工程菌重組I)根據(jù)發(fā)形霞水母硫氧還蛋白基因序列以及原核表達(dá)載體pET24a (購(gòu)自Novagen公司)的酶切位點(diǎn)，設(shè)計(jì)并合成一對(duì)引物，其中上游引物包含酶切位點(diǎn)Nde I (CATATG)，下游引物包含酶切位點(diǎn)Xho I (CTCGAG)，兩引物的序列具體如下:上游引物:5，-GCGGGAATTCCATATGGTTAGAGA-3’(SEQID NO:3)下游引物:5’-CCGCTCGAGTTTATGACTCTTAATC-3’ (SEQ ID N0:4)經(jīng)過(guò)梯度PCR實(shí)驗(yàn)后，選定55.5°C為最佳退火溫度，對(duì)目的基因進(jìn)行PCR大量擴(kuò)增，PCR反應(yīng)條件為:
權(quán)利要求
1.一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白，其特征在于，所述的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白具有如下(i )或(ii )的蛋白質(zhì): (i )具有SEQ ID NO:2所不的氣基酸序列組成的蛋白質(zhì)； (ii )SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列經(jīng)取代、缺失和/或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸且同等功能的由(i )衍生的蛋白質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白，其特征在于:所述的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白具有如SEQ ID N0:2所示的氨基酸序列，該蛋白不含信號(hào)肽，為非分泌蛋白，定位于細(xì)胞質(zhì)，分子量為11.5kDa，等電點(diǎn)為5.1。
3.—種如權(quán)利要求1所述的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的編碼基因，其特征在于，該編碼基因?yàn)槿缦?i )或(ii )的DNA分子: (i )具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列； (ii )與SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列同源性在80%以上的核苷酸序列。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的編碼基因，其特征在于:所述的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的編碼基因，該核苷酸序列全長(zhǎng)479bp，包含一個(gè)315bp的開(kāi)放閱讀框。
5.一種如權(quán)利要求2所述的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟: (A)構(gòu)建發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)； (B)對(duì)上述發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)重組克隆的序列進(jìn)行測(cè)定和分析，獲得一個(gè)編碼硫氧還蛋白的核苷酸序列； (C)構(gòu)建發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的表達(dá)質(zhì)粒，重組工程菌； (D)發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的表達(dá)； (E)重組發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的純化。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的制備方法，其特征在于:所述步驟(A)中的發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)通過(guò)如下方法構(gòu)建: a)抽提發(fā)形霞水母觸手組織總RNA； b)分離mRNA，合成發(fā)形霞水母觸手組織cDNA； c)將上述cDNA插入pUC19質(zhì)粒載體，再轉(zhuǎn)化至大腸桿菌DH5a中，涂布于LB培養(yǎng)基平板進(jìn)行藍(lán)白斑篩選，即構(gòu)建成發(fā)形霞水母觸手組織cDNA文庫(kù)。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的制備方法，其特征在于:所述步驟(C)中的構(gòu)建發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的表達(dá)質(zhì)粒，重組工程菌，具體步驟為: a)設(shè)計(jì)并合成PCR引物如下: 上游引物如SEQ ID NO:3所示， 下游引物如SEQ ID N0:4所示， PCR 反應(yīng)條件為:95°C保溫 5min ;95°C保溫 30sec，55.5°C保溫 30sec，68°C保溫 lmin，30個(gè)循環(huán)；68°C保溫5min ； b)酶切回收后的PCR產(chǎn)物及pET24a原核表達(dá)質(zhì)粒； c)利用兩個(gè)酶切位點(diǎn)將編碼序列連接到pET24a載體上，構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒，然后轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21獲得重組工程菌。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的制備方法，其特征在于:所述步驟(D)中的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的表達(dá)條件為:25°C、lmM IPTG、150rpm/min下誘導(dǎo)8小時(shí)。
9.一種如權(quán)利要求1或2所述的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白在制備抗氧化藥物、抗輻射藥物、皮膚防護(hù)劑、食品防腐劑或抗衰老藥物中的應(yīng)用。
10.一種如權(quán)利要求3所述的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的編碼基因在制備抗氧化藥物、抗輻射藥物、皮膚防護(hù)劑、·食品防腐劑或抗衰老藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，目前尚未見(jiàn)對(duì)水母硫氧還蛋白的有關(guān)研究報(bào)道。本發(fā)明提供了一種發(fā)形霞水母硫氧還蛋白，所述的發(fā)形霞水母硫氧還蛋白，具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)。本發(fā)明還提供了發(fā)形霞水母硫氧還蛋白的編碼基因，具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。同時(shí)，本發(fā)明還提供了發(fā)形霞水母硫氧還蛋白及其編碼基因在制備抗氧化藥物、抗輻射藥物、皮膚防護(hù)劑、食品防腐劑、抗衰老藥物等中的應(yīng)用。本發(fā)明具有較大的臨床應(yīng)用價(jià)值。
文檔編號(hào)C12N9/02GK103232979SQ20131018993
公開(kāi)日2013年8月7日 申請(qǐng)日期2013年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月21日
發(fā)明者阮增良, 柳國(guó)艷, 張黎明, 趙杰, 溫小娟, 尹慢慢, 陸佳, 劉丹 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)