專(zhuān)利名稱(chēng)：一種脂肪酶催化合成克林霉素脂肪酸酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種脂肪酶催化合成克林霉素脂肪酸酯的方法。
背景技術(shù)：
克林霉素脂肪酸酯是由克林霉素2號(hào)位羥基與脂肪酸或脂肪酸酯進(jìn)行酯化或轉(zhuǎn)酯化合成得到；而鹽酸克林霉素棕櫚酸酯是目前克林霉素脂肪酸酯中唯一經(jīng)FDA批準(zhǔn)的臨床常用的抗生素?？肆置顾刈貦八狨ナ强肆置顾氐那绑w藥物，在體外無(wú)抗菌活性，在體內(nèi)經(jīng)酯酶水解形成克林霉素而發(fā)揮抗菌活性，克林霉素的抗菌機(jī)理與大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素相似，通過(guò)與細(xì)菌核糖核蛋白體50s亞單位結(jié)合，抑制肽鏈的延長(zhǎng)和細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成；同時(shí)清除細(xì)菌表面A蛋白和絨毛狀外衣，使其易被吞噬和殺滅而達(dá)到抑制細(xì)菌作用。臨床上鹽酸克林霉素主要治療厭氧細(xì)菌的感染，亦可治療原生動(dòng)物疾病，如瘧疾。它是痤瘡的常用外用處方藥，并可有效治療抗藥性金黃色葡萄球菌。但克林霉素味道極苦，而克林霉素棕櫚酸酯作為前體藥物則苦味顯著降低適合口服?？肆置顾刈貦八狨セ瘜W(xué)名是6-(1-甲基-反-4-丙基-L-2-吡咯烷甲酰氨基)-1-硫代-7 (S)-氯-6, 7,8- 二脫氧-L-蘇式-a -D-半乳羊批喃糖苷2_掠櫚酸酯鹽酸鹽，分子式C34H63ClN2O6S,分子量699.87，結(jié)構(gòu)式如下:
權(quán)利要求
1.一種制備克林霉素脂肪酸酯的方法，包括下述步驟:在脂肪酶的催化作用下，使克林霉素與脂肪酸和/或脂肪酸酯進(jìn)行反應(yīng)，得到所述克林霉素脂肪酸酯。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述克林霉素與脂肪酸和/或脂肪酸酯的摩爾比為1: 0.1 1: 10，優(yōu)選1: 2 1: 5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于:所述脂肪酶的用量為克林霉素質(zhì)量的0.01 10倍，優(yōu)選I 5倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:所述反應(yīng)的反應(yīng)溫度為20 80°C，優(yōu)選40 60°C ;反應(yīng)時(shí)間為0.05 72小時(shí)，優(yōu)選24 48小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:所述反應(yīng)的反應(yīng)介質(zhì)為含水量不高于0.5%的有機(jī)溶劑；所述有機(jī)溶劑具體選自下述至少一種:乙腈、丙酮、石油醚、甲苯、正己烷、環(huán)己烷、庚烷、辛烷、壬烷和癸烷。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:所述克林霉素選自下述至少一種:鹽酸克林霉素、克林霉素游離堿、克林霉素醇化物和3，4_縮酮化克林霉素。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:所述脂肪酸和/或脂肪酸酯選自下述至少一種:棕櫚酸、棕櫚酸乙烯酯、棕櫚酸甲酯、棕櫚酸乙酯、癸酸、癸酸甲酯、癸酸乙酯、月桂酸、月桂酸甲酯、月桂酸乙酯、肉豆蘧酸、肉豆蘧酸甲酯、肉豆蘧酸乙酯、硬脂酸、硬脂酸甲酯、硬脂酸乙酯、油酸、油酸甲酯、油酸乙酯或以上混合物；優(yōu)選棕櫚酸、棕櫚酸乙烯酯、棕櫚酸甲酯、棕櫚酸乙酯或其混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:所述脂肪酶選自下述任意一種:南極假絲酵母脂肪酶，褶皺 假絲酵母脂肪酶，豬胰脂肪酶，南極假絲酵母脂肪酶B，米黑根毛霉脂肪酶和疏棉狀嗜熱絲孢菌脂肪酶。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:所述反應(yīng)在搖床中進(jìn)行，所述搖床的轉(zhuǎn)速為0-1000r/min。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:所述方法還包括對(duì)得到的克林霉素脂肪酸酯進(jìn)行純化的步驟。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種脂肪酶催化合成克林霉素脂肪酸酯的方法。該方法包括下述步驟在脂肪酶的催化作用下，使克林霉素與脂肪酸和/或脂肪酸酯在20～80℃的條件下，反應(yīng)0.05～72小時(shí)，反應(yīng)液經(jīng)過(guò)分離純化得到克林霉素脂肪酸酯。其中，克林霉素與脂肪酸和/或脂肪酸酯的摩爾比為1∶0.1～1∶10；脂肪酶的用量為克林霉素質(zhì)量的0.01～10倍。本發(fā)明首次實(shí)現(xiàn)了克林霉素脂肪酸酯的酶催化合成，避免了該產(chǎn)品在化學(xué)方法合成中對(duì)克林霉素中3，4位羥基的保護(hù)和脫保護(hù)過(guò)程，減少了工藝流程，具有催化效率高、選擇性好、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。
文檔編號(hào)C12P19/64GK103194511SQ20131007063
公開(kāi)日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年3月6日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月6日
發(fā)明者李致賢, 戈鈞, 林萌萌, 張一飛, 盧滇楠, 劉錚 申請(qǐng)人:清華大學(xué)