專利名稱：一種多雜質(zhì)的液體樣品中微量微生物的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種微生物的檢測方法，特別涉及一種多雜質(zhì)的液體樣品中微量微生物的檢測方法。
背景技術(shù)：
江河湖水、工業(yè)用水、海水等其他環(huán)境水體通常含有大量固體雜質(zhì)，少量微生物，在評價(jià)其潔凈程度或者需其他針對性檢測某種微生物時(shí)，往往難以很好分離其他雜質(zhì)，且操作繁瑣，容易產(chǎn)生誤差。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種多雜質(zhì)液體樣品中微量微生物的裝置和方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取下述技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)
一種多雜質(zhì)的液體樣品中微量微生物檢測方法，包括以下步驟
a.取一定量的待檢測液體樣品，放入膜分離裝置中，然后將膜分離裝置置于拍擊式均質(zhì)器中；
b.設(shè)置拍擊速度和均質(zhì)時(shí)間，分離待測樣品中的固體雜質(zhì)，并使得膜分離裝置中的液體樣品充分均勻；
c.對微生物膜過濾裝置的各部件，包括不銹鋼漏斗和漏斗連接件進(jìn)行滅菌，然后連接管路，關(guān)閉不銹鋼支架上各閥門，開啟真空泵，調(diào)節(jié)真空度，用消毒后的鑷子，將無菌濾膜放置在不銹鋼濾膜支撐墊上 ，吸取分離均質(zhì)后液體樣品，倒入不銹鋼漏斗中至相應(yīng)刻度線，打開相應(yīng)閥門進(jìn)行抽濾；
d.抽濾完成后，向一側(cè)輕推不銹鋼漏斗，然后向上取出不銹鋼漏斗，用消毒后的不銹鋼鑷子取下無菌濾膜，進(jìn)行相應(yīng)檢測；
e.將抽濾富集后的無菌濾膜置于已滅菌的含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，按檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)后再次進(jìn)行檢測。進(jìn)一步，對較少量的液體樣品，將定量樣品和稀釋液同時(shí)加入膜分離裝置中。優(yōu)選的，對微生物膜過濾裝置的各部件，包括不銹鋼漏斗和漏斗連接件進(jìn)行火焰滅菌?！N多雜質(zhì)的液體樣品中微量微生物的檢測裝置，包括膜分離裝置，拍擊式均質(zhì)器，微生物膜過濾裝置。其中，所述膜分離裝置包括兩側(cè)面組成的袋體，袋體四邊密封，上部為可撕除部分，下部為袋體主體，內(nèi)部設(shè)有濾膜，所述濾膜的底邊和上邊分別固定于袋體的底邊和上邊，兩側(cè)邊分別固定于袋體的兩側(cè)面上，濾膜的寬度小于袋體側(cè)面的寬度。優(yōu)選的，所述濾膜的兩側(cè)邊分別固定于袋體兩側(cè)面的中間位置。其中，所述微生物膜過濾裝置包括不銹鋼支架，至少一個(gè)不銹鋼濾器，不銹鋼真空表，真空抽濾瓶，真空泵，其中真空表和不銹鋼濾器通過連接件安裝于不銹鋼支架之上，不銹鋼支架和真空泵之間裝有真空抽濾瓶，不銹鋼支架和真空抽濾瓶通過連接管連接，所述不銹鋼濾器包括不銹鋼底座和安裝于不銹鋼底座之上的不銹鋼漏斗。優(yōu)選的，所述不銹鋼漏斗通過卡嵌的方式連接在不銹鋼底座上。優(yōu)選的，所述不銹鋼底座上設(shè)有不銹鋼濾膜支撐墊。本發(fā)明具有如下技術(shù)效果通過采用前述方法和裝置，分離出液體樣品中的固體及其他大尺寸雜質(zhì)，然后實(shí)現(xiàn)樣品的充分均勻，通過微生物膜過濾裝置進(jìn)行抽濾富集，最后再經(jīng)過培養(yǎng)進(jìn)行檢測，方便檢測含有多種固體及其他大顆粒雜質(zhì)，且含有少量微生物的大量液體樣品中的微生物檢測，檢測速度快，排除雜質(zhì)，準(zhǔn)確度好，效率高；
進(jìn)一步的，對較少量的液體樣品，將定量樣品和稀釋液同時(shí)加入膜分離裝置中，稀釋后，可方便后續(xù)的抽濾操作，同時(shí)由于進(jìn)行了均質(zhì)，無需擔(dān)心微生物分布不均一，導(dǎo)致結(jié)果誤差的問題；
進(jìn)一步的，在進(jìn)行抽濾之前，對微生物膜過濾裝置進(jìn)行火焰滅菌，快速高效，同時(shí)可冷卻快，可迅速投入再次使用，節(jié)約檢測時(shí)間，提高檢測效率。


圖1是本發(fā)明實(shí)施例中一種多雜質(zhì)的液體樣品中微量微生物的檢測方法的流程圖。

圖2是本發(fā)明實(shí)施例中微生物膜過濾裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是本發(fā)明實(shí)施例中膜分離裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。圖4是本發(fā)明實(shí)施例中膜分離裝置的展開示意圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)闡述。圖1是本發(fā)明實(shí)施例中一種多雜質(zhì)的液體樣品中微量微生物的檢測方法的流程圖。如圖1所示，該多雜質(zhì)的液體樣品中微量微生物檢測方法，包括以下步驟
a.吸取樣品11，取一定量的待檢測液體樣品，放入膜分離裝置中，然后將膜分離裝置置于拍擊式均質(zhì)器中。本實(shí)施例中，如待測液體樣品量較多，則可直接放入膜分離裝置中，若液體樣品量較少時(shí)，可將定量樣品和稀釋液同時(shí)加入膜分離裝置中，以達(dá)到稀釋樣品的目的。本發(fā)明可以選擇適用的多種膜分離裝置及均質(zhì)袋等。圖3是本發(fā)明較好實(shí)施例中采用的膜分離裝置的結(jié)構(gòu)示意圖，圖4是所述膜分離裝置的展開示意圖，結(jié)合圖3和圖4可以看出，所述膜分離裝置包括兩側(cè)面組成的袋體，袋體四邊密封，上部為可撕除部分31，下部為袋體主體32，內(nèi)部設(shè)有濾膜33，所述濾膜33的底邊和上邊分別固定于袋體的底邊和上邊，兩側(cè)邊分別固定于袋體的兩側(cè)面的中間位置上，濾膜33的寬度小于袋體側(cè)面的寬度。所述濾膜33將膜分離裝置分為兩個(gè)空間，加樣時(shí)，將待測樣品加入其中一個(gè)空間內(nèi)。b.均質(zhì)分離12，設(shè)置拍擊速度和均質(zhì)時(shí)間，分離待測樣品中的固體雜質(zhì)，并使得膜分離裝置中的液體樣品充分均勻。
根據(jù)樣品的差異，可以設(shè)置適宜的拍擊速度和時(shí)間，以及拍擊間距等。通過拍擊式均質(zhì)器的配合，膜分離裝置中的液體樣品中的固體雜質(zhì)及大尺寸顆粒被截留在濾膜一側(cè)最初加樣的空間內(nèi)，而濾膜另一側(cè)的空間內(nèi)的樣品基本除清固體雜質(zhì)，且樣品內(nèi)微生物分布均勻，可繼續(xù)進(jìn)行下一步操作。c.抽濾富集13，對微生物膜過濾裝置的各部件，包括不銹鋼漏斗和漏斗連接件進(jìn)行滅菌，然后連接管路，關(guān)閉不銹鋼支架上各閥門，開啟真空泵，調(diào)節(jié)真空度，用消毒后的鑷子，將無菌濾膜放置在不銹鋼濾膜支撐墊上，吸取分離均質(zhì)后液體樣品，倒入不銹鋼漏斗中至相應(yīng)刻度線，打開相應(yīng)閥門進(jìn)行抽濾。本實(shí)施例中，可以采用多種膜過濾裝置，只要能達(dá)到無菌富集微生物的作用即可。圖2是較好的實(shí)施例中采用微生物膜過濾裝置，包括不銹鋼支架21，至少一個(gè)不銹鋼濾器，不銹鋼真空表22，真空抽濾瓶23，真空泵24，其中真空表22和不銹鋼濾器23安裝于不銹鋼支架21之上，不銹鋼支架21和真空泵24之間裝有真空抽濾瓶25，不銹鋼支架21和真空抽濾瓶25通過連接管26連接，所述濾器22包括不銹鋼底座222和安裝于不銹鋼底座之上的不銹鋼漏斗221。前述微生物膜過濾裝置的過濾裝置采用全不銹鋼材質(zhì)，可選擇濕熱滅菌、干熱滅菌、火焰滅菌等多種滅菌方式，尤其是可以選擇火焰滅菌，快速高效，而且滅菌后冷卻速度快，可迅速投入再次使用。優(yōu)選的實(shí)施例中 ，所述不銹鋼漏斗通過卡嵌的方式連接在不銹鋼底座上，具體的結(jié)構(gòu)為不銹鋼底座設(shè)有至少三個(gè)不銹鋼凸起，不銹鋼漏斗壓下去時(shí)，凸起被壓進(jìn)后彈出，將漏斗卡牢，通過此種卡嵌的方式將不銹鋼漏斗固定在不銹鋼底座上，便于單手操作濾膜的取放。優(yōu)選的，不銹鋼底座上設(shè)有不銹鋼濾膜支撐墊，該不銹鋼濾膜支撐墊由不銹鋼顆粒壓制而成，支撐均勻，保證被截留的微生物在濾膜表面均勻分布，便于隨后的微生物培養(yǎng)、計(jì)數(shù)或顆粒分析等。d.檢測富集后的微生物14，抽濾完成后，向一側(cè)輕推不銹鋼漏斗，然后向上取出不銹鋼漏斗，用消毒后的不銹鋼鑷子取下無菌濾膜，進(jìn)行相應(yīng)檢測。微生物經(jīng)過抽濾富集可達(dá)到一定濃度，根據(jù)實(shí)際需要，選擇進(jìn)行計(jì)數(shù)、檢測分析等操作，也可繼續(xù)進(jìn)行后續(xù)微生物培養(yǎng)。e.后續(xù)培養(yǎng)檢測15，將抽濾富集后的無菌濾膜置于已滅菌的含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，按檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)后再次進(jìn)行檢測。本發(fā)明雖然已以較佳實(shí)施例公開如上，但其并不是用來限定本發(fā)明，任何本領(lǐng)域技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，都可以利用上述揭示的方法和技術(shù)內(nèi)容對本發(fā)明技術(shù)方案做出可能的變動和修改，因此，凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案的內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對以上實(shí)施例所做的任何簡單修改、等同變化及修飾，均屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)。
權(quán)利要求
1.一種多雜質(zhì)的液體樣品中微量微生物檢測方法，其特征在于，包括以下步驟取一定量的待檢測液體樣品，放入膜分離裝置中，然后將膜分離裝置置于拍擊式均質(zhì)器中；設(shè)置拍擊速度和均質(zhì)時(shí)間，分離待測樣品中的固體雜質(zhì)，并使得膜分離裝置中的液體樣品充分均勻；對微生物膜過濾裝置的各部件，包括不銹鋼漏斗和漏斗連接件進(jìn)行滅菌，然后連接管路，關(guān)閉不銹鋼支架上各閥門，開啟真空泵，調(diào)節(jié)真空度，用消毒后的鑷子，將無菌濾膜放置在不銹鋼濾膜支撐墊上，吸取分離均質(zhì)后液體樣品，倒入不銹鋼漏斗中至相應(yīng)刻度線，打開相應(yīng)閥門進(jìn)行抽濾；抽濾完成后，向一側(cè)輕推不銹鋼漏斗，然后向上取出不銹鋼漏斗，用消毒后的不銹鋼鑷子取下無菌濾膜，進(jìn)行相應(yīng)檢測；將抽濾富集后的無菌濾膜置于已滅菌的含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，按檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)后再次進(jìn)行檢測。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，對較少量的液體樣品，將定量樣品和稀釋液同時(shí)加入膜分離裝置中。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，對微生物膜過濾裝置的各部件，包括不銹鋼漏斗和漏斗連接件進(jìn)行火焰滅菌。
4.一種多雜質(zhì)的液體樣品中微量微生物的檢測裝置，包括膜分離裝置，拍擊式均質(zhì)器， 和微生物膜過濾裝置。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的裝置，其特征在于，所述膜分離裝置包括兩側(cè)面組成的袋體， 袋體四邊密封，上部為可撕除部分，下部為袋體主體，內(nèi)部設(shè)有濾膜，所述濾膜的底邊和上邊分別固定于袋體的底邊和上邊，兩側(cè)邊分別固定于袋體的兩側(cè)面上，濾膜的寬度小于袋體側(cè)面的寬度。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的裝置，其特征在于，所述濾膜的兩側(cè)邊分別固定于袋體兩側(cè)面的中間位置。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的裝置，其特征在于，所述微生物膜過濾裝置包括不銹鋼支架， 至少一個(gè)不銹鋼濾器，不銹鋼真空表，真空抽濾瓶，真空泵，其中真空表和不銹鋼濾器通過連接件安裝于不銹鋼支架之上，不銹鋼支架和真空泵之間裝有真空抽濾瓶，不銹鋼支架和真空抽濾瓶通過連接管連接，所述不銹鋼濾器包括不銹鋼底座和安裝于不銹鋼底座之上的不銹鋼漏斗。
8.根據(jù)權(quán)利要7所述的裝置，其特征在于，所述不銹鋼漏斗通過卡嵌的方式連接于不銹鋼底座之上。
9.根據(jù)權(quán)利要7所述的裝置，其特征在于，所述不銹鋼底座上設(shè)有不銹鋼濾膜支撐墊。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種多雜質(zhì)的液體樣品中微量微生物的檢測裝置和方法，所述方法步驟包括首先通過膜分離裝置與均質(zhì)器的配合分離雜質(zhì)并均質(zhì)液體，然后通過微生物膜過濾裝置進(jìn)行抽濾富集，最后再經(jīng)過培養(yǎng)進(jìn)行檢測。通過該裝置和方法，方便檢測含有多種固體及其他大顆粒雜質(zhì)，且含有少量微生物的大量液體樣品中的微生物檢測，檢測速度快，排除雜質(zhì)，準(zhǔn)確度好，效率高。
文檔編號C12M1/12GK103045713SQ20131001893
公開日2013年4月17日 申請日期2013年1月18日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月18日
發(fā)明者張帆, 張莉, 邱礽, 張廣樂, 常艷滋, 謝尚托, 張靜, 毛達(dá)敬 申請人:張帆