專利名稱：一種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及ー種試劑盒，具體涉及ー種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒。
背景技術(shù)：
原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交，從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精確定量定位的過(guò)程。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。目前，在進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要進(jìn)行試劑的配制和準(zhǔn)備，對(duì)于實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō)配制和準(zhǔn)備試劑増加了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的復(fù)雜性，并且因?yàn)橹谱鲗?shí)驗(yàn)試劑的過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)人員的熟練程度和認(rèn)知水平的不同，可能配制出的試劑也并不相同，從而不能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性。

實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型為解決進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)時(shí)，由于實(shí)驗(yàn)人員的熟練程度和認(rèn)知水平的不同，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性不能得到保證的問題，進(jìn)而提出一種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒。本實(shí)用新型為解決上述問題采取的技術(shù)方案是本實(shí)用新型包括去核糖核酸酶試劑瓶、4%多聚甲醛固定液試劑瓶、1% Trion-XlOO溶液試劑瓶、預(yù)雜交液試劑瓶、雜交液試劑瓶、第一甲酰胺溶液試劑瓶、第二甲酰胺溶液試劑瓶、第一緩沖液試劑瓶、第二緩沖液試劑瓶、封閉液試劑瓶、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶、堿性磷酸酶顯色液試劑瓶和盒體，盒體內(nèi)腔的底面設(shè)有十二個(gè)凹槽，十二個(gè)凹槽呈矩形矩陣狀設(shè)置，去核糖核酸酶試劑瓶、4%多聚甲醛固定液試劑瓶、1% Trion-XlOO溶液試劑瓶、預(yù)雜交液試劑瓶、雜交液試劑瓶、第一甲酰胺溶液試劑瓶、第二甲酰胺溶液試劑瓶、第一緩沖液試劑瓶、第二緩沖液試劑瓶、封閉液試劑瓶、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶、堿性磷酸酶顯色液試劑瓶的底部可分別各對(duì)應(yīng)插裝在一個(gè)凹槽內(nèi)。本實(shí)用新型的有益效果是本實(shí)用新型使原位雜交實(shí)驗(yàn)中的試劑能夠快捷、穩(wěn)定地進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)；使用本實(shí)用新型進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)效率高、實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定、操作簡(jiǎn)便快速；本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，制備成本低，適合實(shí)驗(yàn)室中使用，提高了原位雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)構(gòu)的可靠性和穩(wěn)定性。

圖I是本實(shí)用新型的整體結(jié)構(gòu)示意圖，圖2是盒體底部的俯視圖。
具體實(shí)施方式
具體實(shí)施方式
一結(jié)合圖I和圖2說(shuō)明本實(shí)施方式，本實(shí)施方式所述ー種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒包括去核糖核酸酶試劑瓶1、4%多聚甲醛固定液試劑瓶2、1%Trion-XlOO溶液試劑瓶3、預(yù)雜交液試劑瓶4、雜交液試劑瓶5、第一甲酰胺溶液試劑瓶6、第ニ甲酰胺溶液試劑瓶7、第一緩沖液試劑瓶8、第二緩沖液試劑瓶9、封閉液試劑瓶10、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶11、堿性磷酸酶顯色液試劑瓶12和盒體13，盒體13內(nèi)腔的底面設(shè)有十二個(gè)凹槽13-1，十二個(gè)凹槽13-1呈矩形矩陣狀設(shè)置，去核糖核酸酶試劑瓶1、4%多聚甲醛固定液試劑瓶2、I % Trion-XlOO溶液試劑瓶3、預(yù)雜交液試劑瓶4、雜交液試劑瓶5、第一甲酰胺溶液試劑瓶6、第二甲酰胺溶液試劑瓶7、第一緩沖液試劑瓶8、第二緩沖液試劑瓶9、封閉液試劑瓶10、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶11、堿性磷酸酶顯色液試劑瓶12的底部可分別各對(duì)應(yīng)插裝在一個(gè)凹槽13-1內(nèi)。
具體實(shí)施方式
ニ 結(jié)合圖I說(shuō)明本實(shí)施方式，本實(shí)施方式所述ー種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒的盒體13的長(zhǎng)度L為25cm，盒體13的寬度W為10cm，盒體13的高 度H為15cm。其它組成及連接關(guān)系與具體實(shí)施方式
一相同。工作原理利用本實(shí)用新型進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)的操作步驟如下步驟一、制作的組織切片在4%多聚甲醛固定液試劑瓶2中的溶液固定ー小時(shí)；步驟ニ、切片用核糖核酸酶清洗液試劑瓶I的溶液清洗兩次，毎次五分鐘；步驟三、切片用1% Trion-XlOO溶液試劑瓶3中的溶液處理二十分鐘；步驟四、切片用核糖核酸酶清洗液試劑瓶I中的溶液清洗三次，毎次五分鐘；步驟五、每張切片加預(yù)雜交液試劑瓶4中預(yù)雜交液200 μ 1，放在濕盒內(nèi)，室溫放置十五分鐘；步驟六、雜交探針85°C變性三分鐘后置冰水混合物中驟冷，按I : 100濃度與雜交液試劑瓶5中的雜交液混合，每張片子上加100 μ I混合好的雜交液，55°C雜交過(guò)夜；步驟七、雜交后，在55°C條件下，用第一甲酰胺溶液試劑瓶6中的溶液清洗十五分鐘，然后用第二甲酰胺溶液試劑瓶7中的溶液清洗兩次，毎次三十分鐘；步驟八、用第一緩沖液試劑瓶8中的溶液平衡五分鐘，25°C條件下用封閉液試劑瓶10中的封閉液封閉ー小時(shí)；步驟九、加堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶11中的抗體，4°C孵育過(guò)夜；步驟十、用第一緩沖液試劑瓶8中的緩沖液洗三次，毎次五分鐘，然后用第二緩沖液試劑瓶9中的緩沖液平衡5分鐘；步驟十一、用堿性磷酸酶顯色液試劑瓶12中的顯色液在4°C顯色；步驟十二、封片并觀察結(jié)果。
權(quán)利要求1.一種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒，其特征在于所述ー種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒包括去核糖核酸酶試劑瓶(I)、4%多聚甲醛固定液試劑瓶(2)、I % Trion-XlOO溶液試劑瓶(3)、預(yù)雜交液試劑瓶(4)、雜交液試劑瓶(5)、第一甲酰胺溶液試劑瓶￠)、第二甲酰胺溶液試劑瓶(7)、第一緩沖液試劑瓶(8)、第二緩沖液試劑瓶(9)、封閉液試劑瓶(10)、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶(11)、堿性磷酸酶顯色液試劑瓶(12)和盒體(13)，盒體(13)內(nèi)腔的底面設(shè)有十二個(gè)凹槽(13-1)，十二個(gè)凹槽(13-1)呈矩形矩陣狀設(shè)置，去核糖核酸酶試劑瓶⑴、4%多聚甲醛固定液試劑瓶(2)、I % Trion-XlOO溶液試劑瓶(3)、預(yù)雜交液試劑瓶(4)、雜交液試劑瓶(5)、第一甲酰胺溶液試劑瓶(6)、第二甲酰胺溶液試劑瓶(7)、第一緩沖液試劑瓶(8)、第二緩沖液試劑瓶(9)、封閉液試劑瓶(10)、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶(11)、堿性磷酸酶顯色液試劑瓶(12)的底部可分別各對(duì)應(yīng)插裝在ー個(gè)凹槽(13-1)內(nèi)。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述ー種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒，其特征在于盒體(13)的長(zhǎng)度(L)為25cm，盒體(13)的寬度(W)為10cm，盒體(13)的高度(H)為15cm。
專利摘要一種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒，本實(shí)用新型涉及一種試劑盒，具體涉及一種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒。本實(shí)用新型為了解決進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)時(shí)，由于實(shí)驗(yàn)人員的熟練程度和認(rèn)知水平的不同，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性不能得到保證的問題。本實(shí)用新型的盒體內(nèi)腔的底面設(shè)有十二個(gè)凹槽，十二個(gè)凹槽呈矩形矩陣狀設(shè)置，去核糖核酸酶試劑瓶、4％多聚甲醛固定液試劑瓶、1％Trion-X100溶液試劑瓶、預(yù)雜交液試劑瓶、雜交液試劑瓶、第一甲酰胺溶液試劑瓶、第二甲酰胺溶液試劑瓶、第一緩沖液試劑瓶、第二緩沖液試劑瓶、封閉液試劑瓶、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶、堿性磷酸酶顯色液試劑瓶的底部可對(duì)應(yīng)插裝在凹槽內(nèi)。本實(shí)用新型用于原位雜交實(shí)驗(yàn)。
文檔編號(hào)C12Q1/68GK202465715SQ201220106119

公開日2012年10月3日 申請(qǐng)日期2012年3月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月20日
發(fā)明者侯曉明, 倪華 申請(qǐng)人:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)