專(zhuān)利名稱：一種保護(hù)視力保健品的配方及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種由西紅花苷和花青素混合制得的保護(hù)視力保健品及其制備方法。
背景技術(shù)：
視力健康的下降是中國(guó)醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域當(dāng)前面臨的一個(gè)突出的健康問(wèn)題。近期，中國(guó)、美國(guó)和澳大利亞合作開(kāi)展的防治兒童近視研究項(xiàng)目調(diào)查顯示，中國(guó)近視眼人數(shù)已近4億，已達(dá)到世界平均水平22%的1. 5倍，而近視高發(fā)群體一青少年近視發(fā)病率則高達(dá)50%至60%。中國(guó)是世界上近視發(fā)病率最高的國(guó)家之一，近視眼人數(shù)世界第一。大量的醫(yī)學(xué)研究證實(shí)，隨著近視度數(shù)加深，各種眼病的發(fā)生率將顯著增加，比如黃斑變性、視網(wǎng)膜脫離等。目前，針對(duì)包括青少年在內(nèi)的各個(gè)人群近視預(yù)防和改善的手段非常有限。桅子(Gardenia jasminoides ELLIS)是衛(wèi)生部第一批既是食品又是藥品的植物，廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)中。西紅花苷是從菌草科植物桅子果實(shí)(gardenia fruits)中提取的一類(lèi)天然產(chǎn)物，是國(guó)內(nèi)外使用最廣泛、穩(wěn)定性能較好的食用天然黃色素之一，可用于保健食品、營(yíng)養(yǎng)食品、嬰兒食品、兒童食品、糖果、飲料、雪餅、方便面、餅干等食品的生產(chǎn)中，在亞洲各國(guó)廣泛用作食品色素，中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部2007年第4號(hào)公告擴(kuò)大桅子黃在食品中的使用量和使用范圍。西紅花苷具有多方面的藥理活性，最近十年的文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)了西紅花苷對(duì)眼部的獨(dú)特保護(hù)作用。一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，西紅花苷能明顯增加家兔視網(wǎng)膜和脈胳膜血液循環(huán)，同時(shí)還有利于視網(wǎng)膜功能的恢復(fù)(Xuan B. Effects of Crocin Analogs on OcularBlood Flow and Retinal Function. J. ocul. Pharmacol. Th. , 1999, 15: 143-152)。而另一個(gè)研究顯示，暴露在藍(lán)色光下，視網(wǎng)膜視桿細(xì)胞顯示出加速死亡的趨勢(shì)，而加入西紅花苷后，以上細(xì)胞的死亡受到明顯的抑制[Laabich A. Protective effect of crocinagainst blue light and white light-mediated photoreceptor cell death in bovineand primate retinal primary cell culture.1nvest. Ophthalmol. Vis. Sc1. , 2006,47: 3156-3163]。此外，另一個(gè)大鼠視網(wǎng)膜藥理實(shí)驗(yàn)顯示，西紅花苷可以明顯抑制大鼠遭受強(qiáng)光后引起的視網(wǎng)膜損傷，結(jié)果顯示西紅花苷具有保護(hù)哺乳動(dòng)物視網(wǎng)膜細(xì)胞的形態(tài)和功能的特性[Maccarone R.. Saffron supplement maintains morphology and function afterexposure to damaging light in mammalian retina.1nvest. Ophthalmol. Vis. Sc1.,2008，49: 1254-1261]。在我國(guó)，西紅花苷主要用作食用色素，也有開(kāi)發(fā)為治療心腦血管疾病的藥物，但至今未見(jiàn)開(kāi)發(fā)作為護(hù)眼保健的食品或藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種保護(hù)視力保健品的配方，它使用方便，能夠有效改善眼部血液循環(huán)，保護(hù)視網(wǎng)膜免受可見(jiàn)光紫外光的傷害，能有效地保護(hù)眼睛，預(yù)防和減少近視、遠(yuǎn)視、弱視的產(chǎn)生，廣泛適用于各類(lèi)人群。本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是本發(fā)明涉及一種保護(hù)視力保健品的配方，按重量比計(jì)，該配方由西紅花苷和花青素混合制成，所述西紅花苷和所述花青素的重量比為I 9:9 I。優(yōu)選地，按重量比計(jì)，該配方中所述西紅花苷和所述花青素的重量比為1:1。優(yōu)選地，按重量比計(jì)，該配方中所述西紅花苷和所述花青素的重量比為9:1。優(yōu)選地，按重量比計(jì)，該配方中所述西紅花苷和所述花青素的重量比為1:9。優(yōu)選地，根據(jù)實(shí)際需求將該配方制成膠囊、片劑、口服液或飲料。本發(fā)明還是提供了一種上述配方的制備方法，該方法包括以下步驟
(1)取桅子果實(shí)粉碎成粗粉，加入40%乙醇滲漉24小時(shí)，濾過(guò)，滲漉液濃縮至無(wú)醇味；
(2)取步驟(I)的濃縮液直接或用水稀釋后采用大孔吸附樹(shù)脂HPD-100分離及純化；
(3)取步驟(2)的產(chǎn)物與純水和10 30%乙醇洗脫劑濃縮，將40 80%乙醇洗脫劑合并，濃縮回收乙醇，并經(jīng)冷凍干燥后得到西紅花苷；
(4)將步驟(3)得到的西紅花苷與花青素混合，即制成保護(hù)視力保健品。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明由西紅花苷和花青素混合制成，而西紅花苷能明顯增加視網(wǎng)膜和脈胳膜血液循環(huán)，同時(shí)還有利于視網(wǎng)膜功能的恢復(fù)；花青素是一種抗氧化物質(zhì)它可以維持正常的細(xì)胞連結(jié)、血管的穩(wěn)定、增強(qiáng)微細(xì)血管循環(huán)、提高微血管和靜脈的流動(dòng)，對(duì)增強(qiáng)視力及消除眼睛疲勞有良好功效。因此，所制成的配方能夠有效改善眼部血液循環(huán)，保護(hù)視網(wǎng)膜免受可見(jiàn)光紫外光的傷害，能有效地保護(hù)眼睛，預(yù)防和減少近視、遠(yuǎn)視、弱視的產(chǎn)生，廣泛適用于各類(lèi)人群。 另外，本發(fā)明可以根據(jù)實(shí)際需求將該配方制成膠囊、片劑、口服液或飲料，使用方便。


圖1為本發(fā)明對(duì)光損傷視網(wǎng)膜細(xì)胞存活率的影響的柱狀 圖2為本發(fā)明對(duì)光損傷視網(wǎng)膜細(xì)胞分泌VEGF量的影響的柱狀圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例一
(1)取桅子果實(shí)粉碎成粗粉，加入10倍40%乙醇滲漉24小時(shí)，濾過(guò)，滲漉液濃縮至無(wú)醇
味；
(2)取步驟(I)的濃縮液直接或用水稀釋后采用大孔吸附樹(shù)脂HPD-100分離及純化；
(3)取步驟(2)的產(chǎn)物與10倍體積的純水和10%乙醇洗脫劑濃縮，將80%乙醇洗脫劑合并，濃縮回收乙醇，并經(jīng)冷凍干燥后得到西紅花苷；
(4)將步驟(3)得到的西紅花苷與花青素混合，即制成保護(hù)視力保健品，本實(shí)施例中，按重量比計(jì)，西紅花苷與花青素的重量比為1:1。視力保健品的用藥試驗(yàn)
培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞，調(diào)節(jié)光照度在2500 lx。待96孔板中的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞長(zhǎng)至80%融合狀態(tài)時(shí)，將其分成以下幾組。第I組，正常對(duì)照組(NC):不光照，不加西紅花苷；第2組，模型對(duì)照組(MC):光照24h，不加西紅花苷；第3、4、5組，藥物預(yù)防組，預(yù)先加西紅花苷，劑量依次為10、1、0.1 μ g/mL，光照前分別加入提取物預(yù)處理24h后，光照培養(yǎng)24h。光照時(shí)間到達(dá)后，按照各組的處理方式繼續(xù)培養(yǎng)24h，然后立即對(duì)每一組進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。(I)MTT分析法測(cè)定細(xì)胞存活率。棄上清液，加入MTT終質(zhì)量濃度為O. 5mg/mL的無(wú)血清培養(yǎng)液200 μ L，37°C繼續(xù)培養(yǎng)，4h后終止培養(yǎng)。小心吸棄孔內(nèi)的培養(yǎng)上清液，每孔加入150μ L 二甲基亞砜，振蕩5min使紫色結(jié)晶物充分溶解。用酶標(biāo)儀于490nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的吸光度。根據(jù)公式(I)計(jì)算出細(xì)胞存活率
細(xì)胞存活率/%= (A樣品490nm / A對(duì)照490nm) XlOO (I)
(1)式中A樣品490nm為樣品在490nm波長(zhǎng)處的吸光度；A對(duì)照490nm為正常對(duì)照組在490nm波長(zhǎng)處的吸光度。各組試驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。
圖1的結(jié)果顯示在光照的條件下，藥物預(yù)防組3、4、5的細(xì)胞存活率明細(xì)比模型對(duì)照組2的細(xì)胞存活率要高。(2)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)的檢測(cè)。
收集培養(yǎng)上清液于O.5mL的離心管中測(cè)定VEGF的含量，并裂解細(xì)胞測(cè)量細(xì)胞蛋白(BCA)。培養(yǎng)上清液于1500r/min離心lOmin，取上清液，按照人VEGF及BCA的測(cè)定試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。分別在酶標(biāo)儀450nm和560nm波長(zhǎng)處讀取吸光度值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別得出相應(yīng)VEGF的質(zhì)量濃度CVEGF和蛋白含量CpiO。根據(jù)公式(2)計(jì)算出Mvkf
Mvegf/(pg/mg pro) = CVEGF/Cpr。(2)
(2)式中Cvkf為由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出的Vkf質(zhì)量濃度/(pg/mL);Cpra為BCA試劑盒測(cè)得的細(xì)胞蛋白質(zhì)量濃度/(mg/mL)。
試驗(yàn)結(jié)果如圖2所示。
圖2的結(jié)果顯示藥物預(yù)防組3、4、5的視網(wǎng)膜細(xì)胞分泌VEGF量明顯比模型對(duì)照組2的視網(wǎng)膜細(xì)胞分泌VEGF量要低。綜合圖1和圖2的結(jié)果顯示，西紅花苷花青素配方對(duì)光損傷視網(wǎng)膜細(xì)胞有較強(qiáng)的保護(hù)作用，細(xì)胞的存活率與模型對(duì)照組(MC)有顯著的差異。實(shí)施例二
(1)取桅子果實(shí)粉碎成粗粉，加入10倍40%乙醇滲漉24小時(shí)，濾過(guò)，滲漉液濃縮至無(wú)醇
味；
(2)取步驟(I)的濃縮液直接或用水稀釋后采用大孔吸附樹(shù)脂HPD-100分離及純化；
(3)取步驟(2)的產(chǎn)物與10倍體積的純水和20%乙醇洗脫劑濃縮，將60%乙醇洗脫劑合并，濃縮回收乙醇，并經(jīng)冷凍干燥后得到西紅花苷；
(4)將步驟(3)得到的西紅花苷與花青素混合，即制成保護(hù)視力保健品，本實(shí)施例中，按重量比計(jì)，西紅花苷與花青素的重量比為9:1。實(shí)施例三
(1)取桅子果實(shí)粉碎成粗粉，加入10倍40%乙醇滲漉24小時(shí)，濾過(guò)，滲漉液濃縮至無(wú)醇
味；
(2)取步驟(I)的濃縮液直接或用水稀釋后采用大孔吸附樹(shù)脂HPD-100分離及純化；
(3)取步驟(2)的產(chǎn)物與10倍體積的純水和30%乙醇洗脫劑濃縮，將40%乙醇洗脫劑合并，濃縮回收乙醇，并經(jīng)冷凍干燥后得到西紅花苷； (4)將步驟(3)得到的西紅花苷與花青素混合，即制成保護(hù)視力保健品，本實(shí)施例中，按重量比計(jì)，西紅花苷與花青素的重量比為1:9。
權(quán)利要求
1.ー種保護(hù)視カ保健品的配方，其特征在于按重量比計(jì)，該配方由西紅花苷和花青素混合制成，所述西紅花苷和所述花青素的重量比為I 9:9 I。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的ー種保護(hù)視カ保健品的配方，其特征在于按重量比計(jì)，該配方中所述西紅花苷和所述花青素的重量比為1:1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的ー種保護(hù)視カ保健品的配方，其特征在于按重量比計(jì)，該配方中所述西紅花苷和所述花青素的重量比為9:1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的ー種保護(hù)視カ保健品的配方，其特征在于按重量比計(jì)，該配方中所述西紅花苷和所述花青素的重量比為1:9。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的ー種保護(hù)視カ保健品的配方，其特征在于根據(jù)實(shí)際需求將該配方制成膠囊、片劑、ロ服液或飲料。
6.一種如權(quán)利要求1所述的ー種保護(hù)視カ保健品的配方的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟 (1)取梔子果實(shí)粉碎成粗粉，加入40%こ醇滲漉24小吋，濾過(guò)，滲漉液濃縮至無(wú)醇味； (2)取步驟(I)的濃縮液直接或用水稀釋后采用大孔吸附樹(shù)脂HPD-100分離及純化； (3)取步驟(2)的產(chǎn)物與純水和10 30%こ醇洗脫劑濃縮，將40 80%こ醇洗脫劑合并，濃縮回收こ醇，并經(jīng)冷凍干燥后得到西紅花苷； (4)將步驟(3)得到的西紅花苷與花青素混合，即制成保護(hù)視カ保健品。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)并提供了一種保護(hù)視力保健品的配方，按重量比計(jì)，該配方由西紅花苷和花青素混合制成，所述西紅花苷和所述花青素的重量比為1～9:9～1，本發(fā)明還提供了該配方的制備方法，該方法采用大孔吸附樹(shù)脂以及醇類(lèi)在梔子中提取出西紅花苷，然后將西紅花苷與花青素混合制成藥品或保健品。本發(fā)明使用方便，能夠有效改善眼部血液循環(huán)，保護(hù)視網(wǎng)膜免受可見(jiàn)光紫外光的傷害，能有效地保護(hù)眼睛，預(yù)防和減少近視、遠(yuǎn)視、弱視的產(chǎn)生，廣泛適用于各類(lèi)人群。本發(fā)明應(yīng)用于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
文檔編號(hào)A23L1/29GK103039968SQ20121042682
公開(kāi)日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2012年10月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月31日
發(fā)明者陳陽(yáng), 蔡樂(lè), 張 浩, 夏嬙, 孫志勇, 李文娜, 蔡仕寧 申請(qǐng)人:陳陽(yáng)