多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)基因突變、其檢測方法及其用途
【專利摘要】本發(fā)明屬于分子病理學(xué)領(lǐng)域，特別涉及多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)基因突變，具體是多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)TH基因的2個突變型。
【專利說明】多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)基因突變、其檢測方法及其用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于分子病理學(xué)領(lǐng)域，特別涉及多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)基因突變。
【背景技術(shù)】
[0002]在1976年，多巴反應(yīng)性肌張力障礙(dopa responsive dystonia, DRD)首次被Segawa等報道，被稱為伴有明顯晝間波動的遺傳性進行性肌張力障礙(hereditaryprogressive dystonia with marked diurnalfluctuation, HPD) 或 Segawa 病(Segawa M, Hosaka A, Miyagawa F, et al.Hereditary progressive dystonia withmarked diurnal fluctuation.Adv Neuro, 1976,14:215-233.)。DRD 是一種少見的遺傳性運動障礙疾病，常發(fā)于兒童或青少年，以肌張力障礙或步態(tài)異常為首發(fā)癥狀，發(fā)病率約為每百萬人 0.5 — I 例(Segawa M, Nomura Y, Nishiyama N.Autosomal dominantguanosine triphosphatecyclohydroIase I deficiency(Segawa disease).Ann Neurol2003:54(Suppl6):S32 - 45.)。
[0003]大多數(shù)DRD呈常染色體顯性遺傳(autosomal dominan, AD),致病基因為三磷酸鳥苷環(huán)化水解酶I基因(guanosine triphosphatecyc lohydro Iase I, GCHl);少數(shù)呈常染色體隱性遺傳(autosomalrecessive, AR),致病基因為酪氨酸輕化酶(tyrosine hydroxylabe,TH)基因；個別可呈散發(fā)性。
[0004]隨著分子遺傳學(xué)研究的發(fā)展，已發(fā)現(xiàn)70多種位于GCHl基因編碼區(qū)或內(nèi)含子外顯子結(jié)合區(qū)的不同突變；其中約52%為錯義突變，17%為無義突變，11%為剪切點突變，20%為缺失或插入突變。目前，在AR-DRD家系中已報道的8種TH基因突變(3種純合子突變，5種復(fù)合雜合子突變)，主要位于外顯子內(nèi)，僅有I種突變位于內(nèi)含子內(nèi)。外顯子內(nèi)的突變中，除第14外顯子的1493A — G突變導(dǎo)致TH四聚體區(qū)的氨基酸改變外，其余突變均導(dǎo)致TH催化區(qū)內(nèi)不同位點的氨基酸改變，對TH的結(jié)構(gòu)與功能產(chǎn)生不同程度的影響，第11內(nèi)含子的分支點序列內(nèi)24T — A突變可引起其他分支點序列的啟動，導(dǎo)致TH的Pre-mRNA剪接錯誤，產(chǎn)生錯誤的mRNA，從而導(dǎo)致了整個遺傳信息的改變。
[0005]多巴反應(yīng)性肌張力障礙(DRD)常染色體隱性遺傳家系TH基因的新突變發(fā)現(xiàn)，有利于完善DRD患者的分子診斷，也可為研究DRD的發(fā)病機理提供重要線索。
[0006]因此，本領(lǐng)域仍然需要發(fā)現(xiàn)DRD相關(guān)的TH基因突變，以及檢測DRD相關(guān)疾病的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明人經(jīng)過不懈的努力，發(fā)現(xiàn)了多巴反應(yīng)性肌張力障礙(DRD)常染色體隱性遺傳家系TH基因的新突變，并由此提供了下述發(fā)明:
[0008]本發(fā)明涉及多巴反應(yīng)性肌張力障礙(DRD)常染色體隱性遺傳家系TH基因新的復(fù)合雜合錯義突變，具體為:c.10040T (p.A335V)和 c.1451G>A (p.R484H)。[0009]在第一方面，本發(fā)明涉及DRD的生物標(biāo)記物，即突變的TH基因或TH蛋白，所述生物標(biāo)記物是具有選自如下的突變的TH基因或TH蛋白:
[0010]錯義突變(c.10040T, P.A335V)；
[0011]錯義突變(c.1451G>A，p.R484H)。
[0012]在一個實施方案中，本發(fā)明的突變TH基因為具有以下突變的SEQID N0:1:
[0013]錯義突變c.10040T ;和/或
[0014]錯義突變c.1451G>A。
[0015]在一個實施方案中， 本發(fā)明的突變的TH蛋白為具有以下突變的SEQID NO:2:
[0016]錯義突變P.A335V ;和/或
[0017]錯義突變P.R484H。
[0018]在第二方面，本發(fā)明涉及一種檢測DRD的方法，所述方法包括檢測受試者的TH基因或TH蛋白中是否存在突變位點，如果有突變位點，則所述受試者被鑒定為患有DRD或易患DRD,或者其后代會患有DRD或易患DRD,所述突變位點選自如下任一種或其組合:
[0019]錯義突變(c.10040T, P.A335V);和
[0020]錯義突變(c.1451G>A, p.R484H)。
[0021]在一個實施方案中，TH蛋白為SEQ ID N0:2的序列表示。
[0022]在一個實施方案中，TH基因為SEQ ID NO:1的序列表示。
[0023]在一個實施方案中，本發(fā)明的檢測DRD的方法包括如下至少一組引物擴增的步驟:
[0024]SEQ ID NO:3 和 SEQ ID NO:4 ；
[0025]SEQ ID NO:5 和 SEQ ID NO:6。
[0026]在一個實施方案中，本發(fā)明的檢測DRD的方法中檢測突變位點通過選自如下的技術(shù)進行:測序、電泳、核酸雜交、原位雜交、PCR、逆轉(zhuǎn)錄酶鏈反應(yīng)和變性高效液相色譜。
[0027]在本發(fā)明第二方面的方法中，優(yōu)選檢測純合的突變TH基因。
[0028]在第三方面，本發(fā)明涉及一種檢測突變TH基因或TH蛋白的方法，所述方法包括檢測受試者的TH基因或TH蛋白中是否存在突變位點，所述突變位點選自如下任一種或其組合:
[0029]錯義突變(c.1004C>T, p.A335V);和
[0030]錯義突變(c.1451G>A, p.R484H)。
[0031]在一個實施方案中，TH蛋白為SEQ ID N0:2的序列表示。
[0032]在一個實施方案中，TH基因為SEQ ID NO:1的序列表示。
[0033]在一個實施方案中，本發(fā)明的檢測突變TH基因或TH蛋白的方法包括如下至少一組引物擴增的步驟:
[0034]SEQ ID NO:3 和 SEQ ID NO:4 ；
[0035]SEQ ID NO:5 和 SEQ ID NO:6。
[0036]在一個實施方案中，本發(fā)明的檢測突變TH基因或TH蛋白的方法中檢測突變位點通過選自如下的技術(shù)進行:測序、電泳、核酸雜交、原位雜交、PCR、逆轉(zhuǎn)錄酶鏈反應(yīng)和變性高效液相色譜。
[0037]在第四方面，本發(fā)明涉及通過PCR檢測突變TH基因或TH蛋白中使用的引物對，所述突變是選自如下任一種或其組合:
[0038]錯義突變(c.1004C>T, p.A335V);和 / 或
[0039]錯義突變(c.1451G>A, p.R484H),
[0040]其中所述引物對分別基于選自如下的位置在基因組序列或cDNA序列上前后設(shè)計，使得擴增該位置:cDNA序列第1004位和第1451位。
[0041]在第五方面，本發(fā)明涉及與突變TH基因互補的核酸探針，所述突變是選自如下任一種或其組合:
[0042]錯義突變c.10040T ;和/或
[0043]錯義突變c.1451G>A，
[0044]所述探針與突變 TH基因的互補區(qū)包括選自如下的基因組序列或cDNA序列上的位置:cDNA序列第1004位和第1451位。
[0045]在第六方面，本發(fā)明涉及檢測突變TH基因或TH蛋白的試劑盒，包含一組或多組引物對，其中所述突變是選自如下任一種或其組合:
[0046]錯義突變(c.1004C>T, p.A335V);和
[0047]錯義突變(c.1451G>A, p.R484H),
[0048]其中所述引物對分別基于選自如下的位置在基因組序列或cDNA序列上設(shè)計，使得其擴增產(chǎn)物涵蓋該位置:cDNA序列第1004位和第1451位。
[0049]在一個實施方案中，所述檢測突變TH基因或TH蛋白的試劑盒包含選自如下的至少一組引物:
[0050]SEQ ID NO:3 和 SEQ ID NO:4 ；
[0051]SEQ ID NO:5 和 SEQ ID NO:6。
[0052]在第七方面，本發(fā)明涉及檢測突變TH基因的試劑盒，包含一個或多個核酸探針，所述突變是選自如下任一種或其組合:
[0053]錯義突變c.10040T ;和
[0054]錯義突變c.1451G>A，
[0055]所述探針與突變TH基因上包含選自如下位置的基因組序列或cDNA序列上的區(qū)域互補:cDNA序列第1004位和第1451位。
[0056]在第八方面，本發(fā)明涉及TH基因的突變外顯子9和/或突變外顯子14。
[0057]在本發(fā)明中，引物對SEQ ID NO: 3和SEQ ID NO: 4用于擴增TH基因的野生型或突變外顯子9;引物對SEQ ID N0:5和SEQ ID N0:6用于擴增TH基因的野生型或突變外顯子14。
[0058]本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)基因的2個新的突變位點，對該基因位點的檢測可能用于DRD患者的輔助診斷，并且可能有利于明確DRD患者的分子診斷。因此，本發(fā)明的檢測突變TH基因或TH蛋白的方法可以用于診斷DRD的目的，例如產(chǎn)前診斷、植入前遺傳學(xué)診斷(PGD)、患者篩查。然而，本發(fā)明的方法并不僅限于用于診斷疾病的目的。
[0059]另外，本發(fā)明的檢測突變TH基因或TH蛋白的方法也可以用于非診斷疾病的目的。所述的非檢測疾病的目的包括但不限于研究SNP分布和多態(tài)性，用于家族演化研究。本發(fā)明可以對DRD的發(fā)病機理提供重要線索，對DRD的診斷治療具有十分重要的意義。這樣的應(yīng)用也是本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的。[0060]例如，根據(jù)本文的描述可以看出，有些個體攜帶本發(fā)明所述的突變TH基因但不患DRD，例如僅一條染色體攜帶突變的雜合基因型。對這部分人群的檢測可以任何不涉及診斷疾病的目的，因為這些個體并不患病。但對于他們進行檢測的結(jié)果可以作為例如有用信息使用，例如作為育前檢查的重要指標(biāo)，指導(dǎo)生育，或者用于突變攜帶者篩查，或者作為SNP分布和多態(tài)性研究的工具或者追蹤基因突變或家族演化。
[0061]野生型TH基因序列和TH蛋白序列說明
[0062]人TH基因的序列(SEQ ID NO:1) (下劃線標(biāo)明突變位置):
[0063]ATGCCCACCCCCGACGCCACCACGCCACAGGCCAAGGGCTTCCGCAGGGCCGTGTCTGAGCTGGACGCCAAGCAGGCAGAGGCCATCATGGTAAGAGGGCAGGGCGCCCCGGGGCCCAGCCTCACAGGCTCTCCGTGGCCTGGAACTGCAGCCCCAGCTGCATCCTACACCCCCACCCCAAGGTCCCCGCGGTTCATTGGGCGCAGGCAGAGCCTCATCGAGGACGCCCGCAAGGAGCGGGAGGCGGCGGTGGCAGCAGCGGCCGCTGCAGTCCCCTCGGAGCCCGGGGACCCCCTGGAGGCTGTGGCCTTTGAGGAGAAGGAGGGGAAGGCCGTGCTAAACCTGCTCTTCTCCCCGAGGGCCACCAAGCCCTCGGCGCTGTCCCGAGCTGTGAAGGTGTTTGAGACGTTTGAAGCCAAAATCCACCATCTAGAGACCCGGCCCGCCCAGAGGCCGCGAGCTGGGGGCCCCCACCTGGAGTACTTCGTGCGCCTCGAGGTGCGCCGAGGGGACCTGGCCGCCCTGCTCAGTGGTGTGCGCCAGGTGTCAGAGGACGTGCGCAGCCCCGCGGGGCCCAAGGTCCCCTGGTTCCCAAGAAAAGTGTCAGAGCTGGACAAGTGTCATCACCTGGTCACCAAGTTCGACCCTGACCTGGACTTGGACCACCCGGGCTTCTCGGACCAGGTGTACCGCCAGCGCAGGAAGCTGATTGCTGAGATCGCCTTCCAGTACAGGCACGGCGACCCGATTCCCCGTGTGGAGTACACCGCCGAGGAGATTGCCACCTGGAAGGAGGTCTACACCACGCTGAAGGGCCTCTACGCCACGCACGCCTGCGGGGAGCACCTGGAGGCCTTTGCTTTGCTGGAGCGCTTCAGCGGCTACCGGGAAGACAATATCCCCCAGCTGGAGGACGTCTCCCGCTTCCTGAAGGAGCGCACGGGCTTCCAGCTGCGGCCTGTGGCCGGCCTGCTGTCCGCCCGGGACTTCCTGGCCAGCCTGGCCTTCCGCGTGTTCCAGTGCACCCAGTATATCCGCCACGCGTCCTCGCCCATGCACTCCCCTGAGCCGGACTGCTGCCACGAGCTGCTGGGGCACGTGCCCATGCTGGCCGACCGCACCTTCGCGCAGTTCTCGCAGGACATTGGCCTGGCGTCCCTGGGGGCCTCGGATGAGGAAATTGAGAAGCTGTCCACGCTGTACTGGTTCACGGTGGAGTTCGGGCTGTGTAAGCAGAACGGGGAGGTGAAGGCCTATGGTGCCGGGCTGCTGTCCTCCTACGGGGAGCTCCTGCACTGCCTGTCTGAGGAGCCTGAGATTCGGGCCTTCGACCCTGAGGCTGCGGCCGTGCAGCCCTACCAAGACCAGACGTACCAGTCAGTCTACTTCGTGTCTGAGAGCTTCAGTGACGCCAAGGACAAGCTCAGGAGCTATGCCTCACGCATCCAGCGCCCCTTCTCCGTGAAGTTCGACCCGTACACGCTGGCCATCGACGTGCTGGACAGCCCCCAGGCCGTGCGGCGCTCCCTGGAGGGTGTCCAGGATGAGCTGGACACCCTTGCCCATGCGCTGAGTGCCATTGGCTAG
[0064]人TH蛋白的序列(SEQ ID N0:2)(下劃線標(biāo)明突變位置):
[0065]MPTPDATTPQAKGFRRAVSELDAKQAEAIMVRGQGAPGPSLTGSPWPGTAAPAASYTPTPRSPRFIGRRQSLIEDARKEREAAVAAAAAAVPSEPGDPLEAVAFEEKEGKAVLNLLFSPRATKPSALSRAVKVFETFEAKIHHLETRPAQRPRAGGPHLEYFVRLEVRRGDLAALLSGVRQVSEDVRSPAGPKVPWFPRKVSELDKCHHLVTKFDPDLDLDHPGFSDQVYRQRRKLIAEIAFQYRHGDPIPRVEYTAEEIATWKEVYTTLKGLYATHACGEHLEAFALLERFSGYREDNIPQLEDVSRFLKERTGFQLRPVAGLLSARDFLASLAFRVFQCTQYIRHASSPMHSPEPDCCHELLGHVPMLADRTFAQFSQDIGLASLGASDEEIEKLSTLYWFTVEFGLCKQNGEVKAYGAGLLSSYGELLHCLSEEPEIRAFDPEAAAVQPYQDQTYQSVYFVSESFSDAKDKLRSYASRIQRPFSVKFDPYTLAIDVLDSPQAVRRSLEGVQDELDTLAHALSAIG
【專利附圖】

【附圖說明】
[0066]圖1示出常染色體隱性DRD家系的兩名患者(II1、II2)及其父母(11、12)的關(guān)系圖。
[0067]圖2示出對圖1中親代Hl和H2的測序結(jié)果，(A) Il的TH基因8號外顯子的測序結(jié)果；(B) 12的TH基因8號外顯子的測序結(jié)果；(C) Il的TH基因12號外顯子的測序結(jié)果；(D) 12的TH基因12號外顯子的測序結(jié)果。
【具體實施方式】
[0068]突變型多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)TH基因與野生型多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)TH基因在序列上的區(qū)別是c.10040T和c.1451G>A，其中c.10040T表示野生型TH基因第1004位的堿基為C， 突變型DRD相關(guān)基因的第1004位堿基突變?yōu)門 ;c.1451G>A表示野生型TH基因第1451位的堿基為G，突變型DRD相關(guān)基因的第1451位堿基突變?yōu)锳。
[0069]在本發(fā)明中，采用本領(lǐng)域通用表示法表示突變。c.10040T表示cDNA第1004位核苷酸由C變成T ；p.A335V表示蛋白質(zhì)水平第335位密碼子由A變成V ；c.1451G>A表示cDNA第1451位核苷酸由G變成A ；p.R484H表示蛋白質(zhì)水平第484位密碼子由變成H。
[0070]野生型人TH基因的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示。
[0071]野生型人TH蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO: 2所示。
[0072]對于本發(fā)明說明書和權(quán)利要求書中，提及基因序列，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，實際包括互補雙鏈的任意一條，或者兩條。為了方便，在本說明書和權(quán)利要求書中，雖然多數(shù)情況下只給出了一條鏈，但實際上也公開了與之互補的另一條鏈。例如提及TH基因的cDNA序列，實際上包括該序列以及其互補序列。例如，提及SEQ ID NO: 1，實際包括其互補序列。本領(lǐng)域技術(shù)人員還可以理解，利用一條鏈可以檢測另一條鏈，反之亦然。
[0073]在本發(fā)明中，復(fù)合雜合突變是指患者兩條同源染色體上的TH基因各有一個不同的雜合突變，在本發(fā)明中一個雜合突變遺傳自父親，一個雜合突變遺傳自母親。
[0074]本申請中的基因序列包括DNA形式或RNA形式，公開其中一種，意味著另一種也被公開。例如提及TH基因的cDNA序列，實際也包括相應(yīng)的RNA序列。
[0075]下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細(xì)描述。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下面的實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻所描述的技術(shù)或條件(例如參考J.薩姆布魯克等著，黃培堂等譯的《分子克隆實驗指南》，第三版，科學(xué)出版社)或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0076]實施例:
[0077]發(fā)明人采集到一個二代遺傳的常染色體隱性DRD家系，家系內(nèi)2名患者(男性I名，女性I名)表現(xiàn)為步態(tài)異常和肌張力障礙，對小劑量多巴制劑有顯著而持續(xù)的療效。如圖1所示，兩名患者分別是(II1、112)，他們是兄妹關(guān)系。他們的父母(I1、12)表型正常，Il和12各攜帶一個突變(如圖2所示)，Il攜帶c.10040T, 12攜帶c.1451G>A，而遺傳給II1、112后，II1、112都攜帶兩個突變，從而出現(xiàn)臨床表型。IIl是先證者。
[0078]分別對該常染色體隱性DRD家系內(nèi)2名DRD患者(II1、112)及其父母(I1、12)，200名健康對照者的基因組中多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)TH基因進行檢測，通過PCR擴增，產(chǎn)物純化，測序的方法獲得多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)基因9號外顯子及14號外顯子的序列，結(jié)合序列測定比對結(jié)果，發(fā)現(xiàn)多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)TH基因的2個新的突變位點。[0079]1.多巴反應(yīng)性肌張力障礙相關(guān)基因的2個新的突變位點的發(fā)現(xiàn)具體步驟如下:
[0080]I) DNA 提取
[0081]分別采取上述的2名DRD患者及其父母的外周靜脈血，每人5mL，經(jīng)枸櫞酸鈉抗凝，常規(guī)酚/氯仿法提取基因組DNA，分光光度計測DNA含量，并稀釋至20ng/ μ L ；
[0082]2) PCR 擴增
[0083]根據(jù)多巴反應(yīng)性肌張力障礙TH基因:
[0084]9外顯子的核苷酸序列設(shè)計如下的引物:
[0085]正向引物:5’ GAGGACGTCTCCCGCTTC3’(SEQ ID NO:3)
[0086]反向引物:5，AGCAGGCAGCACACTTCAC3’(SEQ ID NO:4)
[0087]14外顯子的核苷酸序列設(shè)計如下的引物:
[0088]正向引物:5，CTGGAAGAGGCCTCAGTGTC3’ (SEQ ID NO:5)
[0089]反向引物:5，AGGACAGGACCTCACCACAG3’ (SEQ ID NO:6)
[0090]PCR 反應(yīng)體系:10 μ L
[0091]
【權(quán)利要求】
1.一種具有選自如下的突變的TH基因或TH蛋白: 錯義突變(c.1004C>T, p.A335V);和 錯義突變(c.1451G>A,p.R484H)。
2.權(quán)利要求1的TH基因，為SEQID NO:1的序列中具有以下突變: 錯義突變(c.1004C>T, p.A335V);和 / 或 錯義突變(c.1451G>A,p.R484H)。
3.權(quán)利要求1的TH蛋白，為SEQID NO:2的序列中具有以下突變:
錯義突變(c.1004C>T, p.A335V);和 / 或 錯義突變(c.1451G>A,p.R484H)。
4.一種檢測受試者的TH基因或TH蛋白中是否存在突變位點的方法，所述突變位點選自如下任一種或其組合: 錯義突變(c.1004C>T, p.A335V);和 錯義突變(c.1451G>A,p.R484H)。
5.權(quán)利要求4的方法，包括如下至少一組引物擴增的步驟:
SEQ ID NO:3 和 SEQ ID NO:4 ；
SEQ ID NO:5 和 SEQ ID NO:6。
6.檢測突變TH基因或TH蛋白中使用的引物對，所述突變是選自如下任一種或其組合: 錯義突變(c.1004C>T, p.A335V);和 / 或 錯義突變(c.1451G>A,p.R484H)， 其中所述引物對分別基于選自如下的位置在基因組序列或cDNA序列上前后設(shè)計，使得擴增該位置:cDNA序列第1004位和第1451位。
7.與突變TH基因互補的核酸探針，所述突變是選自如下任一種或其組合: 錯義突變c.10040T ;和/或 錯義突變c.1451G>A， 所述探針與突變TH基因的互補區(qū)包括選自如下的基因組序列或cDNA序列上的位置:cDNA序列第1004位和第1451位。
8.檢測突變TH基因或TH蛋白的試劑盒，包含一組或多組引物對，其中所述突變是選自如下任一種或其組合: 錯義突變(c.1004C>T, p.A335V);和 錯義突變(c.1451G>A,p.R484H)， 其中所述引物對分別基于選自如下的位置在基因組序列或cDNA序列上設(shè)計，使得其擴增產(chǎn)物涵蓋該位置:cDNA序列第1004位和第1451位。
9.權(quán)利要求8的試劑盒，包含選自如下的至少一組引物:
SEQ ID NO:3 和 SEQ ID NO:4 ；
SEQ ID NO:5 和 SEQ ID NO:6。
10.檢測突變TH基因的試劑盒，包含一個或多個核酸探針，所述突變是選自如下任一種或其組合: 錯義突變c.10040T ;和錯義突變C.1451G>A， 所述探針與突變TH基因上包含選自如下位置的基因組序列或cDNA序列上的區(qū)域互補:cDNA序列第1004位和第1451位。
【文檔編號】C12N15/12GK103725687SQ201210392321
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2012年10月16日 優(yōu)先權(quán)日:2012年10月16日
【發(fā)明者】郭紀(jì)鋒, 唐北沙, 嚴(yán)新翔, 張峪涵, 肖晶晶, 劉軒竹, 王俊, 汪建, 楊煥明 申請人:中南大學(xué)湘雅醫(yī)院, 深圳華大基因科技有限公司