專利名稱：一種利用米渣生產(chǎn)抗氧化多肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食品加工技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種利用米渣生產(chǎn)抗氧化多肽的方法。
背景技術(shù)：
多肽是α -氨基酸以肽鏈連接在一起而形成的化合物，它也是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物，通常由10-100氨基酸分子脫水縮合而成。多肽化合物易被人體消化吸收，并具有防病、治病、調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能的作用，特別是其具有較強(qiáng)的抗氧化性，因而，被稱為抗氧化多肽，是極具潛力的一種功能性食品基料，已逐漸成為21世紀(jì)的健康食品。目前，多肽的生產(chǎn)方法主要有酸解法、堿解法和酶法，且大多采用大豆或其副產(chǎn)品作為生產(chǎn)原料。如日本采用豆柏作為原料，用酸解法生產(chǎn)的“大豆多肽”，用作“食品添加劑”，主要用于生產(chǎn)老人和兒童食品，其目的是增強(qiáng)這兩種人群對(duì)食品營(yíng)養(yǎng)的吸收；由于生產(chǎn)時(shí)，所用的酸性化學(xué)物質(zhì)難以除盡，而且有苦味，需用活性炭吸附、脫苦，而活性炭免不了會(huì)侵入肽體。酶法生產(chǎn)多肽，是國(guó)內(nèi)生產(chǎn)多肽的主流方法；酶法生產(chǎn)是用人體所需要的食品級(jí)植物蛋白酶，將人體平常所食的食物蛋白質(zhì)酶解成小分子活性多肽；如武漢九生堂生產(chǎn)的“大豆多肽”，所用原料是含量在90%以上的大豆分離蛋白，水解方法是酶法，所用的酶屬食品級(jí)植物蛋白酶；所生產(chǎn)的“大豆多肽”無(wú)苦味，且風(fēng)味芳香宜人，對(duì)人體無(wú)任何毒副作用。米渣是以早秈米、碎米、陳化米等低值米為原料，經(jīng)有機(jī)酸、抗生素發(fā)酵和淀粉糖生產(chǎn)所得副產(chǎn)物，價(jià)格低廉，產(chǎn)量巨大，淀粉糖生產(chǎn)每消耗7噸大米就要產(chǎn)生I噸的米渣。在淀粉糖生產(chǎn)過(guò)程中，大米經(jīng)高溫淀粉酶液化水解，板框過(guò)濾后所剩的殘?jiān)涞鞍踪|(zhì)含量在40%以上，并含有大量的糊精和多聚糖。同時(shí)，在大米生產(chǎn)淀粉糖的過(guò)程中，蛋白質(zhì)經(jīng)高溫處理后變性嚴(yán)重，水溶性、起泡性、乳化性等蛋白特性基本喪失，限制了其在食品中的應(yīng)用。一直以來(lái)，米渣僅被用作動(dòng)物飼料，這是對(duì)蛋白質(zhì)資源的極大浪費(fèi)。中國(guó)專利(專利申請(qǐng)?zhí)枮?00810163917. 8) “一種利用米渣蛋白制取米蛋白多肽粉方法”，是以淀粉糖廠的副產(chǎn)品米渣蛋白為原料，經(jīng)過(guò)洗滌、水解、脫鹽、干燥等一系列工序制得食品級(jí)的米蛋白多肽粉；所制得的米蛋白多肽粉中蛋白含量> 77%，其中分子量在1000左右的小肽占蛋白總量的67% ;米蛋白多肽粉不但保持了米蛋白本身低過(guò)敏性，高生物價(jià)等優(yōu)勢(shì)，而且由于其中含有了大量的小肽，在消化吸收和保健功能方面有顯著的功能。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種工藝簡(jiǎn)單、投入少、產(chǎn)品無(wú)潛在安全隱患、且能利用非水溶性米渣蛋白生產(chǎn)食品級(jí)抗氧化多肽的方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的解決方案是發(fā)明一種利用米渣生產(chǎn)抗氧化多肽的方法，其工藝過(guò)程如下Α、種曲制備將米渣蒸煮后調(diào)制成含水量為45-65%的種曲發(fā)酵料，再加入食品級(jí)發(fā)酵菌種米曲霉，其孢子接種量為2-8Χ IO6個(gè)/克，拌均后置于濕度80-95 %、溫度25-32°C條件下，發(fā)酵培養(yǎng)3-5天，成為種曲料，備用；
B、前發(fā)酵另取米渣蒸煮后調(diào)制成含水量為45-65%的發(fā)酵預(yù)料，再加入占發(fā)酵預(yù)料重量1-10%的種曲料，拌勻，置于濕度80-95%、溫度25-32°C條件下，發(fā)酵培養(yǎng)3_5天，成為前發(fā)酵料，備用；C、后發(fā)酵將備用的前發(fā)酵料投入無(wú)菌水中，其水的用量按照每IOg前發(fā)酵料加水60-100ml計(jì)算；然后，在40-42°C條件下，進(jìn)行后發(fā)酵5_7天，成為后發(fā)酵料，備用；D、透析將備用的后發(fā)酵料置于20KD截留透析袋中，在3-10°C條件下透析12_24小時(shí)，取袋外透析液，備用；E、袋外透析液冷凍干燥將備用的袋外透析液進(jìn)行冷凍干燥，條件為-30--45°C，真空度O. 4-200Pa,得凍干粉，備用；
F、層析將備用的凍干粉配成10-30mg/ml的溶液,過(guò)Sephadex G-25葡聚糖凝膠，得自動(dòng)部分收集器收集的層析液，備用；G、層析液冷凍干燥將備用的層析液進(jìn)行冷凍干燥，條件為-30-45°C，真空度O. 4_200Pa，所得粉末即為抗氧化多肽。本發(fā)明的利用米渣生產(chǎn)抗氧化多肽的方法，并采用種曲制備、前發(fā)酵和后發(fā)酵三步工序，即可將米渣蛋白水解成抗氧化多肽，因而，其工藝比較簡(jiǎn)單，生產(chǎn)條件容易控制，無(wú)需任何特殊設(shè)備，故投入也比較少；同時(shí)，所選用的發(fā)酵菌種一米曲霉為傳統(tǒng)釀造食品所用的菌株，且在發(fā)酵過(guò)程中，既不添加酸堿，也沒(méi)有添加其它任何養(yǎng)分，僅利用米渣中富含的糊精和多聚糖，為微生物的生長(zhǎng)代謝提供碳源和氮源，系生物水解，環(huán)保低碳；也不需要后續(xù)的脫酸脫堿，因而，其產(chǎn)品無(wú)潛在的安全隱患。據(jù)檢測(cè)，根據(jù)本發(fā)明方法生產(chǎn)的抗氧化多肽，其中蛋白質(zhì)含量> 88%，分子量在200Da-2000Da之間，分子量低于IOOODa的比率達(dá)70 %，DPPH自由基清除力為79. 1% -83. 2%。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。下面的說(shuō)明是采用例舉的方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不應(yīng)局限于此。本發(fā)明的利用米渣生產(chǎn)抗氧化多肽的方法，主要有以下工藝步驟A、種曲制備制成種曲料；B、前發(fā)酵制成前發(fā)酵料；C、后發(fā)酵制成后發(fā)酵料；D、透析制得袋外透析液；E、袋外透析液冷凍干燥制得凍干粉；F、層析制得層析液；G、層析液冷凍干燥制成抗氧化多肽。實(shí)施例一A、種曲制備取米渣(經(jīng)有機(jī)酸、抗生素發(fā)酵和淀粉糖生產(chǎn)所得副產(chǎn)物，下同)，蒸煮后調(diào)制成含水量為55%的種曲發(fā)酵料O. 25kg，再加入食品級(jí)發(fā)酵菌種米曲霉，孢子接種量按4X IO6個(gè)/克計(jì)算，為I X IO9個(gè)孢子，拌均后置于濕度85%、溫度28°C條件下，發(fā)酵培養(yǎng)4天,得O. 25kg種曲料,備用；
B、前發(fā)酵另取米渣蒸煮后調(diào)制成含水量為55%的發(fā)酵預(yù)料5kg，再加入O. 25kg的種曲料，拌勻，置于濕度85%、溫度28°C條件下，發(fā)酵培養(yǎng)4天，得5. 25kg前發(fā)酵料，備用；C、后發(fā)酵將備用的5. 25kg前發(fā)酵料投入42L水中，拌均；然后，在41°C條件下，進(jìn)行后發(fā)酵6天，得47. 25kg后發(fā)酵料，備用；D、透析將備用的47. 25kg后發(fā)酵料置于20KD截留透析袋中，在TC條件下透析18小時(shí)，得150L袋外透析液，備用；E、袋外透析液冷凍干燥將備用的袋外透析液在_35°C，真空度IOOPa條件下，冷凍干燥，得凍干粉2. 82kg,備用。 F、層析將備用的凍干粉溶解成20mg/ml的溶液,過(guò)Sephadex G-25葡聚糖凝膠，得自動(dòng)部分收集器收集的層析液30L，備用；此過(guò)程中，可以脫除所含的鹽分(下同)；G、層析液冷凍干燥將備用的層析液在_35°C、真空度IOOPa條件下進(jìn)行冷凍干燥，得2. 6kg冷凍干燥粉末，即為抗氧化多肽。實(shí)施例二 A、種曲制備取米渣(經(jīng)有機(jī)酸、抗生素發(fā)酵和淀粉糖生產(chǎn)所得副產(chǎn)物，下同)，蒸煮后調(diào)制成含水量為45%的種曲發(fā)酵料O. 25kg，再加入食品級(jí)發(fā)酵菌種米曲霉，孢子接種量按2X IO6個(gè)/克計(jì)算，為5X IO8個(gè)孢子，拌均，置于濕度85%、溫度28°C條件下，發(fā)酵培養(yǎng)4天,得O. 25kg種曲料,備用；B、前發(fā)酵另取米渣蒸煮后調(diào)制成含水量為45%的發(fā)酵預(yù)料5kg，再加入O. 25kg的種曲料，拌勻，置于濕度85%、溫度28°C條件下，發(fā)酵培養(yǎng)4天，得5. 25kg前發(fā)酵料，備用；C、后發(fā)酵將備用的5. 25kg前發(fā)酵料投入31. 5L水中，拌均；然后，在41 °C條件下，進(jìn)行后發(fā)酵6天，得36. 75kg后發(fā)酵料，備用；D、透析將備用的36. 75kg后發(fā)酵料置于20KD截留透析袋中，在TC條件下透析18小時(shí)，得100L袋外透析液，備用；E、袋外透析液冷凍干燥將備用的袋外透析液在_30°C，真空度O. 4Pa條件下，冷凍干燥，得凍干粉2. 56kg,備用；F、層析將備用的凍干粉溶解成10mg/ml的溶液,過(guò)Sephadex G-25葡聚糖凝膠，得自動(dòng)部分收集器收集的層析液20L，備用；G、層析液冷凍干燥將備用的層析液在_30°C、真空度O. 4Pa條件下進(jìn)行冷凍干燥，得2. 4kg冷凍干燥粉末，即為抗氧化多肽。實(shí)施例三A、種曲制備取米渣(經(jīng)有機(jī)酸、抗生素發(fā)酵和淀粉糖生產(chǎn)所得副產(chǎn)物，下同)，蒸煮后調(diào)制成含水量為65%的種曲發(fā)酵料O. 25kg，再加入食品級(jí)發(fā)酵菌種米曲霉，孢子接種量按8X IO6個(gè)/克計(jì)算，為2X IO9個(gè)孢子，拌均，置于濕度85%、溫度28°C條件下，發(fā)酵培養(yǎng)4天,得O. 25kg種曲料,備用；B、前發(fā)酵另取米渣蒸煮后調(diào)制成含水量為65%的發(fā)酵預(yù)料5kg，再加入O. 25kg的種曲料，拌勻，置于濕度85%、溫度28°C條件下，發(fā)酵培養(yǎng)4天，得5. 25kg前發(fā)酵料，備用；
C、后發(fā)酵將備用的5. 25kg前發(fā)酵料投入52. 5L水中，拌均；然后，在41 °C條件下，進(jìn)行后發(fā)酵6天，得57. 75kg后發(fā)酵料，備用；D、透析將備用的57. 75kg后發(fā)酵料置于20KD截留透析袋中，在TC條件下透析18小時(shí)，得160L袋外透析液，備用；
E、袋外透析液冷凍干燥將備用的袋外透析液在_45°C，真空度200Pa條件下，冷凍干燥，得凍干粉2. 66kg,備用；F、層析將備用的凍干粉溶解成30mg/ml的溶液,過(guò)Sephadex G-25葡聚糖凝膠，得自動(dòng)部分收集器收集的層析液35L，備用；G、層析液冷凍干燥將備用的層析液在_45°C、真空度200Pa條件下進(jìn)行冷凍干燥，得2. 5kg冷凍干燥粉末，即為抗氧化多肽。下表是三個(gè)實(shí)施例生產(chǎn)時(shí)的指標(biāo)值和抗氧化多肽的主要檢測(cè)指標(biāo)
權(quán)利要求
1.ー種利用米渣生產(chǎn)抗氧化多肽的方法，其特征在于エ藝過(guò)程如下 A、種曲制備將米渣蒸煮后調(diào)制成含水量為45-65%的種曲發(fā)酵料，再加入食品級(jí)發(fā)酵菌種米曲霉，其孢子接種量為2-8X106個(gè)/克，拌均后置于濕度80-95%、溫度25_32°C條件下，發(fā)酵培養(yǎng)3-5天，成為種曲料，備用； B、前發(fā)酵另取米渣蒸煮后調(diào)制成含水量為45-65%的發(fā)酵預(yù)料，再加入占發(fā)酵預(yù)料重量1-10%的種曲料，拌勻，置于濕度80-95%、溫度25-32°C條件下，發(fā)酵培養(yǎng)3_5天，成為前發(fā)酵料，備用； C、后發(fā)酵將備用的前發(fā)酵料投入無(wú)菌水中，其水的用量按照每IOg前發(fā)酵料加水60-100ml計(jì)算；然后，在40-42°C條件下，進(jìn)行后發(fā)酵5_7天，成為后發(fā)酵料，備用； D、透析將備用的后發(fā)酵料置于20KD截留透析袋中，在3-10°C條件下透析12-24小時(shí)，取袋外透析液，備用； E、袋外透析液冷凍干燥將備用的袋外透析液進(jìn)行冷凍干燥，條件為-30--45°C，真空度O. 4-200Pa,得凍干粉，備用； F、層析將備用的凍干粉配成10-30mg/ml的溶液,過(guò)SephadexG-25葡聚糖凝膠,得自動(dòng)部分收集器收集的層析液，備用； G、層析液冷凍干燥將備用的層析液進(jìn)行冷凍干燥，條件為-30-45で，真空度O.4-200Pa，所得粉末即為抗氧化多肽。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)的一種利用米渣生產(chǎn)抗氧化多肽的方法，涉及食品加工技術(shù)領(lǐng)域，利用經(jīng)有機(jī)酸、抗生素發(fā)酵和淀粉糖生產(chǎn)所得副產(chǎn)物米渣作為原料，其主要工藝步驟包括A、種曲制備；B、前發(fā)酵；C、后發(fā)酵；D、透析；E、袋外透析液冷凍干燥；F、層析；G、層析液冷凍干燥。具有工藝簡(jiǎn)單、投入少、產(chǎn)品無(wú)潛在安全隱患、且能利用非水溶性米渣蛋白生產(chǎn)等特點(diǎn)，既可適用米渣作原料，也可適用其它的非水溶性蛋白作原料，進(jìn)行抗氧化多肽生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C12P21/06GK102864199SQ20121033648
公開(kāi)日2013年1月9日 申請(qǐng)日期2012年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月8日
發(fā)明者楊秀華, 隆前進(jìn), 周江, 李珍 申請(qǐng)人:長(zhǎng)沙幫得生物科技有限公司