專利名稱：大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種大豆勝肽的制備方法，特別是，涉及一種大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法。
背景技術：
大豆的食用有悠久的歷史，大豆的營養(yǎng)價值高，富含蛋白質、纖維，而且存在許多功能性成份維護身體健康，包括植物固醇可以降低膽固醇，異黃酮舒緩婦女更年期癥狀，維生素E和皂素提供抗氧化功能。對于素食者更是獲取營養(yǎng)很好的食物選擇。近年來，西方社會也大力提倡大豆產品，大豆的健康形象與日俱增。在華人日常生活中豆?jié){是非常普遍的食品，但是與牛奶相比較，豆?jié){的鈣含量明顯偏低，根據(jù)美國農業(yè)部資料，一般牛奶的鈣含量為113毫克/100公克，豆?jié){鈣含量僅39毫克/100公克(USDA，2008)。如果在傳統(tǒng)市場或早餐店面的家庭式自制豆?jié){可能摻水疑慮增加，鈣含量會更低，所獲得鈣更有限。所以，對于經常食用豆?jié){產品的族群來說，攝取鈣量需求特別大。鈣在人體生理、生化機能中扮演許多重要角色，包括組成骨骼的主要元素、血液凝結、肌肉收縮、酸堿平衡、維護細胞膜的通透性、血壓調控、參與許多酶反應等，是一不可缺少的營養(yǎng)素。人體生長發(fā)育持續(xù)著吸取鈣質，儲存”骨本”，一直到35至45歲達到最高峰，然后隨著年齡增長骨鈣漸漸流失，女性更年期后流失速度更快(Bronner. et al.，1999)。因此，人終其一生必須時時注意鈣質的攝取，因為鈣質必須從日常膳食中獲取，無法自行制造。根據(jù)居民營養(yǎng)調查顯示，臺灣地區(qū)男性平均攝取量為520mg，女性平均為542mg，若以美國RDA(1200mg)或RDI(1300mg)的標準來衡量，是嚴重攝取不足?；趪蒜}質普遍缺乏，衛(wèi)生署在2002年修訂的「國人膳食營養(yǎng)素參考攝取量」，就大幅修正鈣質的攝取量，從原本的成人每天600毫克,提高到800 1000毫克(http://www. doh. gov. tw)。而且,近年來老年人骨折的頻率增高，與鈣質的攝取量不足，導致骨骼疏松有相當大的關聯(lián)。據(jù)衛(wèi)生署調查發(fā)現(xiàn)，臺灣地區(qū)六十五歲以上的人口，每九人即有一人罹患骨質疏松癥，其中女性更高達每四人就有一人(http://www. doh. gov. tw)。所以改善骨骼健康,首要任務即是攝取足夠的隹丐質。一般較熟悉的鈣來源是由乳制品提供，但許多人有乳醣不耐癥，此外，在臺灣地區(qū)，乳制品的人均消費量較西方國家少很多，此也是降低鈣攝取總量的原因。研究發(fā)現(xiàn)，乳制品中的酪蛋白(casein)在經過胃及腸的蛋白分解酶分解后會產生抑制鈣離子在堿性環(huán)境下沉淀的勝肽成分，稱之為酪蛋白磷酸肽(Caseinophosphopeptide, CPP)。I丐離子在小腸的吸收，除了在少部份(15-20 %重量百分比)在前端的十二指腸部分是需要維生素D的主動運輸，大多數(shù)鈣離子進入人體循環(huán)系統(tǒng)，靠的是空腸和回腸段的被動運輸(60-65%重量百分比)(Bronner，F(xiàn). 1998. CalciumAbsorption-A Paradigm for Mineral Absorption J. Nutr. 128 917-920 ；Bronner,F. and Pansu，D. 1999.Nutritional Aspects of Calcium Absorption. J. Nutr. 129 9-12)。由于小腸后段的pH值為弱堿性，因此在含有SerP-SerP-SerP-Glu-Glu序列的CPP勝肽片段存在時，就可維持鈣離子的溶解狀態(tài)并進行穿透腸細胞間隙的被動運輸(Ferraretto,A. . Signorile,A Gravaghi,C. Fiorilli,A. and Tettamanti,G. 2001. CaseinPhosphopeptides Influence Calcium Uptake by Cultured Human Intestinal HT—29Tumor Cells J. Nutr. 131 :1655-1661)。為了避免缺乏鈣導致骨質疏松等疾病的發(fā)生，除了增加鈣的攝取外，增加鈣的吸收率也是一好方法，然而，乳醣不耐癥患者不適合利用乳制品中的酪蛋白來促進鈣吸收。因此，對豆?jié){產品補充鈣源成為產品開發(fā)的重要商機。在技術層面上，強化鈣豆?jié){在制造時，添加鈣存在加工障礙，因為豆?jié){中大豆蛋白會因添加的鈣離子引起疏水性聚集現(xiàn)象，進而使大豆蛋白沉淀。解決此種加工問題，添加螯合劑與鈣離子形成穩(wěn)定結構，降低大豆蛋白沉淀是常用的方法。例如六偏磷酸鈉、檸檬酸鈉、磷酸氫鈉等皆是常用豆?jié){化學添加物，提高產品穩(wěn)定性(Pathomrungsiyounggul, et al. , 2010) 0在健康意識的提高下，食品加工領域中添加物的使用需格外留意，不必要的化學物添加物應避免，取而代之的天然配料或添加物則是較安心的考量。過去，已有學者提出以化學合成的方式產生單一種促鈣吸收勝肽，然而其成本相當高，較難實際運用·(Galzigna, L.，Domergue, N.，Previero, A. 1998. A syntheticcalcium-chelating L-glutamyl-L-serine phosphate(Glu-Ser. P)enhances calciumabsorption in the rat. J Pept Res. 52 (I) :15_18)。另外，尚有學者提出以化學添加物做為螯合劑或穩(wěn)定劑達成豆衆(zhòng)強化I丐的目的(Pathomrungsiyounggul, P. , Lewis, M. J. andGrandison, A. S. 2010. Effects of calcium-chelating agents and pasteurizationon certain properties of calcium-fortified soy milk. Food Chem. 118 808-814 ；Luhadiya, A. P. C. , Yang, D. K. , Heisey, Μ. T. 2006. Calcium fortified beverages.US Patent 6994877 B2)，然而化學添加物仍有安全上的考量，不比天然螯合劑，且其中Luhadiya et al.的產品最后的酸堿值為堿性8. 25，較難實際飲用。此外，也有學者提出以化學添加物檸檬酸鈉做為螯合劑來制作加鈣豆?jié){(目野和荒木，2005)。大陸專利CN 101161114 B中揭露了利用商業(yè)蛋白分解酶水解大豆蛋白產生大豆勝肽來制造大豆勝肽-鈣混合物,但其成本較高。綜上所述，人們亟需一種低制造成本，并可以讓乳醣不耐癥患者食用的增加鈣的吸收率，符合實用性且無安全疑慮的豆?jié){飲品。

發(fā)明內容
本發(fā)明提供一種大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其步驟包括將一含有大豆蛋白的原料與水混合，以形成一含水量約45% -65%重量百分比的混合物；將一曲菌菌群接種于上述混合物得到一培養(yǎng)物，其中，上述曲菌菌群包括米曲霉(Aspergillus oryzae)、醬油曲霉(Aspergillus sojae)或它們混合物,且上述曲菌菌群的接種量占上述大豆蛋白原料重量的約O. 006% -O. 05%;將上述培養(yǎng)物進行固態(tài)發(fā)酵得到一發(fā)酵產物，其中，上述固態(tài)發(fā)酵的條件包括相對濕度約85% -95%和發(fā)酵溫度介于約攝氏23 35度；將上述發(fā)酵產物進行水解反應得到一大豆水解液；將上述大豆水解液依次進行澄清化處理和固液分離后得到一大豆澄清水解液；以及于上述大豆澄清水解液直接加入鈣離子混合，其中，大豆勝肽和鈣離子的摩爾數(shù)比為2 I O. 5 1，并調整含水量至60 65%重量百分比，及pH值介于6. 5 7，獲得一含有大豆勝肽-鈣螯合物的液體。本發(fā)明另提供一種大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其步驟包括將一含有大豆蛋白的原料與水混合，以形成一含水量約45% -65%重量百分比的混合物；將一曲菌菌群接種于上述混合物得到一培養(yǎng)物，其中，上述曲菌菌群包括米曲霉(Aspergillusoryzae)、醬油曲霉(Aspergillus sojae)或它們的混合物,且上述曲菌菌群的接種量占上述大豆蛋白原料重量的約O. 006% -O. 05% ;將上述培養(yǎng)物進行固態(tài)發(fā)酵得到一發(fā)酵產物，其中，上述固態(tài)發(fā)酵的條件包括相對濕度約85% -95%和發(fā)酵溫度介于約攝氏23 35度；將上述發(fā)酵產物進行水解反應得到一大豆水解液；將上述大豆水解液依次進行澄清化處理和固液分離后得到一大豆澄清水解液；將上述大豆澄清水解液與大豆油和卵磷脂均勻混合，其中，大豆油的濃度為大豆水解液固形物的2 8%重量百分比，卵磷脂的濃度為大豆油的O. 01 O. 05%重量百分比，得到一混合物；將上述混合物進行干燥得到一大豆勝肽粉末；將該大豆勝肽粉末和鈣離子溶于水中，其中，該大豆勝肽粉末中的大豆勝肽和鈣離子的摩爾數(shù)比例為2 I O. 5 1，并調整含水量至60 65%重量百分比，及pH值介于6. 5 7，獲得一含有大豆勝肽-鈣螯合物的液體。本發(fā)明還提供一種鈣強化豆?jié){的制備方法，其是將前述大豆勝肽-鈣螯合物添加于豆?jié){中。本發(fā)明還提供一種鈣強化豆?jié){，由前述鈣強化豆?jié){的制備方法制造而得，其中，上述鈣強化豆?jié){的鈣含量大于40mg/100mL。


圖1為比較大豆蛋白水解液與酪蛋白磷酸肽抑制碳酸鈣結晶的效果。圖2為不同蛋白源物質抑制碳酸鈣結晶的效果。圖3顯示喂食促鈣吸收勝肽與大豆蛋白飼料的老鼠的鈣吸收率，平均值±95%信任區(qū)間，兩者間具有顯著差異(P < O. 05)。
具體實施例方式為了使本發(fā)明的上述和其它目的、特征、和優(yōu)點能更明顯易懂，下文特舉優(yōu)選實施例，作詳細說明如下。本發(fā)明提供一種大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法。在一實施例中，將大豆粉以曲菌進行固態(tài)發(fā)酵分解后，再進行水解反應，然后進行澄清步驟，得到澄清的水解液，之后于上述大豆澄清水解液直接加入氯化鈣加以混合，并調整含水量及PH值，獲得一含有大豆勝肽-鈣螯合物的液體。在另一實施例中，可將上述大豆澄清水解液進行一制粉步驟，再將上述大豆勝肽粉和鈣離子加水混合攪拌溶解，調整酸堿值，制成一含有大豆勝肽-鈣螯合物的勝肽產物。本發(fā)明是利用大豆來制造大豆勝肽，其原理是利用米曲霉(Aspergillusoryzae)、醬油曲霉(Aspergillus sojae)或混合上述菌種而成的曲菌菌群來處理含有大豆蛋白的原料，以進行固態(tài)發(fā)酵，其中，上述大豆蛋白的來源包括但不限于大豆粉、脫脂大豆粉、脫脂大豆片、大豆分離蛋白、大豆柏、豆餅、或它們的組合。在一實施例中，上述曲菌接種量占原料總重量的約O. 006% -O. 05%，優(yōu)選為約O. 008 % O. 02%，更優(yōu)選為約0.013%。在上述固態(tài)發(fā)酵中，可使用各種緩沖液，例如檸檬酸-檸檬酸鈉、乙酸-乙酸鈉、K2HP04-KH2P04、Na2HPO4-NaH2PO4、硼酸-氫氧化鈉、三羥甲基甲氨基丙磺酸、N，N-雙(2-羥乙基)甘氨酸、三羥甲基氨基甲烷、N-三-(羥甲基)甲基氨基乙酸、4-(2_羥乙基)-1_哌嗪乙烷磺酸半鈉鹽、N-三(羥甲基)甲基-2-氨基乙磺酸、3-(N-嗎非啉)乙磺酸哌嗪-N，N' -二(2-乙磺酸)、二甲基胂酸檸檬酸鈉、2-嗎啉乙磺酸等，調節(jié)固態(tài)發(fā)酵所需的水分，其所需的水分占原料與水混合物總重的約45% -65%，優(yōu)選為約50% 60%，更優(yōu)選為約55%。在一實施例中，上述固態(tài)發(fā)酵可在pH值約5 7 ;相對濕度約85% -95%;發(fā)酵溫度介于約攝氏23 35度；發(fā)酵的時間約2 5天的條件下進行。接著，將上述發(fā)酵產物進行水解反應，以得到大豆水解液。在一實施例中，上述水解反應的進行步驟包括將上述發(fā)酵產物與水以重量比約1:1 1: 3的比例混合，優(yōu)選為約1: 2;水解的時間為約3-24小時，優(yōu)選為約6小時；水解溫度介于約攝氏30-65度，優(yōu)選為約攝氏45度。之后，再提高反應溫度至約攝氏90-95度以抑制酶活性。之后，再將上述大豆水解液進行固液分離等澄清化處理。例如，可先使用壓榨機，以油壓方式使之固液分離。然后液體加熱90°C、10分鐘后產生的沉淀，再以高速離心機去除沉淀，最后使用板框式壓濾機或是使用微過濾膜過濾水解液，并收集含有上述含有促進鈣吸收的勝肽的水解液。接著，將所得水解液與鈣離子進行螯合，也可將所得水解液經過一制粉步驟再與鈣離子進行螯合，制備成各種形式的大豆勝肽-鈣螯合物的勝肽產物。應了解的是，本領域技術人員也可使用任何其它適當?shù)墓桃悍蛛x方式，以及其它適當?shù)倪^濾手段。在一實施例中，上述水解液與鈣離子進行螯合的步驟，可包括于上述大豆澄清水解液直接加入鈣離子混合，上述鈣離子的來源可選自但不限于由下列所組成的群組無機鈣(例如氯化鈣、碳酸鈣、磷酸鈣)、有機鈣(例如乳酸鈣、檸檬酸鈣、葡萄糖酸鈣)以及它們的組合，其中，大豆勝肽和鈣離子混合的摩爾數(shù)比為2 I O. 5 1、優(yōu)選為1: 1，并調整含水量至60 65%、優(yōu)選為65%，及pH值介于6. 5 7、優(yōu)選為6. 7，獲得一含有大豆勝肽-鈣螯合物的液體。在另一實施例中，上述水解液與鈣離子進行螯合的步驟，可包括將上述澄清大豆水解液使用真空減壓濃縮機處理以取得高濃度大豆水解液(固形物40-60%重量百分比)，添加大豆油為2-8%，最優(yōu)選為約5 %重量百分比(以大豆水解液固形物為100 %重量百分比)和卵磷脂為O. 01%-O. 05%，最優(yōu)選為約O. 02%重量百分比(以大豆油重為100%重量百分比)，使用超高速均質機充分混合，接著以噴霧干燥機進行干燥，條件為入口溫度145-160°C，優(yōu)選為 150-155°C ；出 口溫度 85_110°C，優(yōu)選為 90_105°C;轉速 35_40Hz，優(yōu)選為40Hz，得到一大豆勝肽粉，接著將上述大豆勝肽粉和鈣離子加水于溫度25-50°C、優(yōu)選室溫下混合攪拌溶解，上述鈣離子的來源可選自由下列所組成的群組，但不限于無機鈣(例如氯化鈣、碳酸鈣、磷酸鈣)、有機鈣(例如乳酸鈣、檸檬酸鈣、葡萄糖酸鈣)以及它們的組合，其中，勝肽螯合鈣的大豆勝肽和鈣離子的摩爾數(shù)比例為2 I 0.5 1、優(yōu)選為1: 1，并調整含水量至60 65%、優(yōu)選為65%，及調整酸堿值pH 6. 5 7、優(yōu)選為pH 6. 7，制成大豆勝肽-鈣螯合物的勝肽產物。在一實施例中，本發(fā)明鈣強化豆?jié){的制備可包括取不同量的由上述制造方法所得到的大豆勝肽-鈣螯合物添加至市售豆?jié){混合攪拌。采用本發(fā)明的制備方法所得的隹丐強化豆衆(zhòng)的韓含量可大于約40mg/100ml,優(yōu)選介于約40 90mg/100ml。在一韓含量40mg/100ml的市售豆衆(zhòng)的實施例中，當添加I丐含量達60mg/100ml豆衆(zhòng)時,豆衆(zhòng)容易變稠，大豆蛋白因鈣離子產生凝聚現(xiàn)象，濃度愈高凝聚現(xiàn)象愈顯著，且易有蛋白沉淀分層產生。優(yōu)選可使添加鈣含量50mg/100ml豆?jié){以下，其外觀、口感皆佳，且此時所得鈣強化豆?jié){產品最高I丐含量約可達90mg/100ml,接近牛奶的韓含量(約113mg/100ml)。本發(fā)明所提供的鈣強化豆?jié){的制備方法采用的大豆蛋白原料取得容易且成本低廉，并具有可以讓乳醣不耐癥患者食用的增加鈣吸收率的優(yōu)點，是符合實用性且無安全疑慮的豆?jié){飲品，可提供消費者高于一般豆?jié){，甚至接近于牛奶所含的鈣含量。實施例實施例1.促進鈣吸收大豆勝肽的制造以脫脂大豆粉為原料，接種醬油曲霉(Aspergillus sojae)，其中曲菌接種量為大豆原料總重量的O. 013%，以重量百分濃度O. 25%的CH3C00Na/0. 25% HNaSO3、pH = 5. 8的緩沖液調節(jié)水分至55%，在25 30°C、相對濕度95%以上的環(huán)境培養(yǎng)2天。接著進行水解反應，將大豆曲加水混合，其中，大豆曲與水的比例為1: 2，水解時間為6小時，水解溫度45° C，再提高溫度至90-95°C，維持10分鐘，以抑制酶活性。接著，進行水解液的澄清化處理，先使用壓榨機，將大豆水解物置于濾袋中，平鋪于壓榨槽，以油壓方式使之固液分離。然后液體加熱90°C、10分鐘后產生的沉淀，再以離心高速離心機(轉速16000rpm,臺中,泉泰公司制造)去除沉淀,最后使用板框式壓濾機過濾(Seitz Orion，德國制造)或是使用微過濾膜(O. 3 μ m)過濾水解液，得到澄清的大豆水解液。實施例2.大豆水解液抑制碳酸鈣沉淀的效果根據(jù)Jin等人(J. Agnc. Food Chem. 2000)碳酸I丐結晶實驗略加修改,將ImL樣品與ImL濃度40mM的氯化鈣和1. 2mL蒸餾水混合，然后加入0. 8mL濃度40mM碳酸氫鈉后反應I小時，并使用0.1N氫氧化鈉滴定維持pH = 8. 5。將結束反應的混合液進行離心(離心力為2000g)，取上清液并使用測鈣試劑組(臺灣默克公司產物)測量鈣濃度，此為可溶鈣含量。抑制碳酸鈣結晶實驗中，由實施例1所得的大豆蛋白水解液對于碳酸鈣結晶有抑制效果，此效果的評估是在堿性條件(pH = 8. 5)下，完全抑制碳酸鈣結晶的最低樣品濃度，如果發(fā)生碳酸鈣沉淀，上清液的鈣含量則降低；反之，上清液的鈣含量則不變。圖1為比較大豆蛋白水解液與酪蛋白磷酸肽抑制碳酸鈣結晶的效果，其結果顯示有助于鈣吸收的酪蛋白憐酸妝蛋白(CPP)最低抑制濃度為1. 76X 10 4%,而本發(fā)明的大 蛋白水解液的蛋白最低抑制濃度為2. 16Χ10_3%。實施例3.大豆水解液抑制的效果在本實施例中，選擇不同蛋白來源物質做比較，將ImL樣品與ImL濃度40mM的氯化鈣和1. 2mL蒸餾水混合，然后加入0. 8mL濃度40mM碳酸氫鈉后反應I小時，并使用0.1N氫氧化鈉滴定維持PH = 8. 5。將結束反應的混合液進行離心(離心力為2000g)，取上清液并使用測鈣試劑組(臺灣默克公司產物)測量鈣濃度，并在堿性條件(pH = 8. 5)下，完全抑制碳酸鈣結晶的最低樣品濃度作為可溶鈣含量的評估標準。
圖2為不同蛋白源物質抑制碳酸鈣結晶的效果。其中，游離氨基酸如谷氨酸鈉鹽(monosodium glutamate, MSG)、甘氨酸(glycine)的抑制效果較差；接著是蛋白質如大豆分離蛋白(isolated soy protein, ISP)、酪蛋白(casein),雞精(essence of chicken,市售產物，為雞肉蛋白抽取物)，其抑制碳酸鈣沉淀的效果優(yōu)于前兩類；而本發(fā)明的大豆蛋白水解液(soy hydrolysate)最佳。可見單一的游離氨基酸或者是完整蛋白質與鈣離子螯合的情形不如蛋白質水解物，蛋白質經過程度不同的水解后，它們具有較好的抑制鈣沉淀效果。因此，以勝肽型式的蛋白食材例如雞精，還有本發(fā)明利用曲菌酶分解大豆蛋白水解液皆是不錯的抑鈣沉淀輔劑。實施例4.促鈣吸收勝肽對動物鈣吸收的效果實驗方式類似賴愛姬的論文(臺灣營養(yǎng)學會雜志，第21卷2期，1996)，但略做修改，采用成年雌性鼠(Bltw SD ;購自樂斯科生物科技股份有限公司)飼養(yǎng)于各自獨立的代謝籠中，室溫維持在23±2°C，光照12小時，禁食一天待體內食物排除后，分別提供添加大豆分離蛋白作為對照組和提供促鈣吸收勝肽作為實驗組，每組樣本數(shù)各為10只，令動物任意攝食，每日收取糞便，6天后取走飼料，秤其所吃的總量，再等待一天排除吃的飼料后，收集及分析其排出糞便中的鈣含量。鈣的分析法為以硝酸做硝化反應后，以原子吸光儀測定。鈣的總攝取量以吃的飼料量乘飼料中鈣的含量推估。鈣的吸收率為(總攝取量-糞便中的鈣含量)/總攝取量。圖3顯示喂食促鈣吸收勝肽與大豆蛋白飼料的老鼠的鈣吸收率。比較大豆蛋白和促鈣吸收勝肽的吸收率發(fā)現(xiàn)，促鈣吸收勝肽的吸收率明顯高于大豆蛋白，平均值±95%信任區(qū)間，兩者間具有顯著差異(P < 0. 05)。表1、大豆分離蛋白(對照組)及促鈣吸收勝肽(實驗組)的飼料配方(每2000克飼料中各成分的量，單位 為克)。
實驗組對照組
蛋白質(Protein)
促進鈣吸收的勝肽產物 500O
大豆分離蛋白(ISP)O334
酪蛋白(Casein)108108
大豆油(Soy oil)200200
鹿糖(Sucrose)11081108
羧甲基纖維素(CMC)O166
礦物質(Mineral)6060
維生素(Vitamin)2020
權利要求
1.一種大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其步驟包括 將一含有大豆蛋白的原料與水混合，以形成一含水量45% 65%重量百分比的混合物； 將一曲菌菌群接種于該混合物得到一培養(yǎng)物，其中，該曲菌菌群包括米曲霉、醬油曲霉或它們的混合物，且該曲菌菌群的接種量占該大豆蛋白原料重量的約O. 006% O. 05% ； 將該培養(yǎng)物進行固態(tài)發(fā)酵得到一發(fā)酵產物，其中，該固態(tài)發(fā)酵的條件為相對濕度約85% 95%和發(fā)酵溫度介于約攝氏23 35度； 將該發(fā)酵產物進行水解反應得到一大豆水解液； 將該大豆水解液依次進行澄清化處理和固液分離后得到一大豆澄清水解液；以及 于該大豆澄清水解液直接加入鈣離子加以混合，其中，大豆勝肽和鈣離子的摩爾數(shù)比為2 I O. 5 I，并調整含水量至60 65%重量百分比和pH值介于6. 5 7，獲得一含有大豆勝肽-鈣螯合物的液體。
2.一種大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其步驟包括 將一含有大豆蛋白的原料與水混合，以形成一含水量約45% 65%重量百分比的混合物； 將一曲菌菌群接種于該混合物得到一培養(yǎng)物，其中，該曲菌菌群包括米曲霉、醬油曲霉或它們的混合物，且該曲菌菌群的接種量占該大豆蛋白原料重量的約O. 006% O. 05% ； 將該培養(yǎng)物進行固態(tài)發(fā)酵得到一發(fā)酵產物，其中，該固態(tài)發(fā)酵的條件為相對濕度約85% 95%和發(fā)酵溫度介于約攝氏23 35度； 將該發(fā)酵產物進行水解反應得到一大豆水解液； 將該大豆水解液依次進行澄清化處理和固液分離后得到一大豆澄清水解液； 將該大豆澄清水解液與大豆油和卵磷脂均勻混合，其中，大豆油的濃度為大豆水解液固形物的2 8%重量百分比，卵磷脂的濃度為大豆油的O. 01 O. 05%重量百分比，得到一混合物； 將該混合物進行干燥得到一大豆勝肽粉末；以及 將該大豆勝肽粉末和鈣離子溶于水中，其中，該大豆勝肽粉末中的大豆勝肽和鈣離子的摩爾數(shù)比例為2 I O. 5 1，并調整含水量至60 65%重量百分比和pH值介于6. 5 7，獲得一含有大豆勝肽-鈣螯合物的液體。
3.如權利要求1或2所述的大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其中，該鈣離子的來源為選自有機鈣、無機鈣和它們的組合中， 所述無機鈣選自由氯化鈣、碳酸鈣、磷酸鈣和它們的組合所組成的組中， 所述有機鈣選自由乳酸鈣、檸檬酸鈣、葡萄糖酸鈣和它們的組合所組成的組中。
4.如權利要求1或2所述的大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其中，該含有大豆蛋白的原料包括大豆粉、脫脂大豆粉、脫脂大豆片、大豆分離蛋白、大豆柏、豆餅或它們的組合。
5.如權利要求1或2所述的大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其中，該固態(tài)發(fā)酵是在pH值約5 7下進行。
6.如權利要求1或2所述的大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其中，該固態(tài)發(fā)酵的時間為約2 5天。
7.如權利要求1或2所述的大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其中，在該水解反應中，該發(fā)酵產物與水的混合重量比為約1:1 1: 3。
8.如權利要求1或2所述的大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其中，該水解反應的水解時間為約3 24小時。
9.如權利要求1或2所述的大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其中，該水解反應的水解溫度介于約攝氏30 65度。
10.權利要求1或2所述的大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其中，在該水解反應完成后，還包括提高反應溫度至約攝氏90 95度以抑制酶活性。
11.一種鈣強化豆?jié){的制備方法，其是將權利要求1或2所述的大豆勝肽-鈣螯合物添加于豆?jié){中。
12.—種鈣強化豆?jié){，由權利要求11所述的鈣強化豆?jié){的制備方法制造而得，其中，該鈣強化豆?jié){的鈣含量大于40mg/100ml。
13.如權利要求12所述的鈣強化豆?jié){，其中，該鈣強化豆?jié){的鈣含量介于40 90mg/100ml。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種大豆勝肽-鈣螯合物的制備方法，其步驟包括將一含有大豆蛋白的原料與水混合，以形成一含水量約45％-65％重量百分比的混合物；再將米曲霉、醬油曲霉或混合它們的曲菌菌群接種于上述混合物得到一培養(yǎng)物，其中，曲菌菌群的接種量占大豆蛋白原料重量的約0.006％-0.05％；接著，將上述培養(yǎng)物進行固態(tài)發(fā)酵得到一發(fā)酵產物；之后，將發(fā)酵產物進行水解反應得到一大豆水解液；再將大豆水解液進行澄清化處理；最后于上述大豆澄清水解液加入鈣離子混合，其中，大豆勝肽和鈣離子的摩爾數(shù)比為2∶1～0.5∶1，并調整含水量及pH值，獲得一含有大豆勝肽-鈣螯合物的液體。
文檔編號A23L1/304GK103040000SQ20111038765
公開日2013年4月17日 申請日期2011年11月24日 優(yōu)先權日2011年10月11日
發(fā)明者張建棣, 洪銘育, 劉毓蕙, 莊少鈞, 賴祥玲, 錢阜甯, 劉素娥, 陳怡宏, 程竹青 申請人:財團法人食品工業(yè)發(fā)展研究所