專利名稱：一種定量測量細(xì)胞鋪展速率的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，是用于測量貼壁細(xì)胞的鋪展速率以及各種藥物對(duì)細(xì)胞鋪展速率的影響的方法。
背景技術(shù)：
細(xì)胞鋪展是貼壁細(xì)胞的重要生理活動(dòng)或功能之一，許多人體生理活動(dòng)或疾病與細(xì)胞的鋪展有關(guān)。例如，血管內(nèi)皮細(xì)胞通過細(xì)胞的鋪展來構(gòu)建血管內(nèi)壁或者修補(bǔ)破損的血管內(nèi)皮層，因此，內(nèi)皮細(xì)胞鋪展的改變往往與心血管疾病的產(chǎn)生、發(fā)展和腫瘤轉(zhuǎn)移等有關(guān)，而藥物對(duì)細(xì)胞鋪展的影響也必然是評(píng)估藥物療效的體外細(xì)胞試驗(yàn)中的重要指標(biāo)之一。遺憾的是，目前對(duì)細(xì)胞鋪展機(jī)制，特別是藥物對(duì)細(xì)胞鋪展的影響的研究，還不是很清楚，其中細(xì)胞鋪展速率的精確、定量測量方法的缺乏就是主要原因之一。目前，文獻(xiàn)報(bào)道的定量測量細(xì)胞鋪展的方法只有一個(gè)將細(xì)胞鋪展的狀態(tài)(只是根據(jù)細(xì)胞的形態(tài))劃分為不鋪展、半鋪展和完全鋪展三種，再計(jì)算出處于這三種狀態(tài)的細(xì)胞的數(shù)量或數(shù)量百分比。然而，這種定量測定細(xì)胞鋪展的方法非常粗糙首先，確定不鋪展、半鋪展和完全鋪展三種狀態(tài)具有非常大的主觀性，沒有一個(gè)可定量的標(biāo)準(zhǔn)，畢竟每種細(xì)胞甚至每個(gè)單獨(dú)的細(xì)胞，它們完全鋪展時(shí)的形態(tài)或貼壁面積都可能不一樣，要判斷一個(gè)細(xì)胞是否完全鋪展是很困難的，即由此會(huì)產(chǎn)生一定的偏差。其次，半鋪展?fàn)顟B(tài)其實(shí)包含了很多個(gè)中間階段的狀態(tài)，因而，只將細(xì)胞鋪展劃分為三種狀態(tài)無法定量比較細(xì)胞鋪展隨著時(shí)間的變化。 此外，通過計(jì)算細(xì)胞數(shù)量或數(shù)量百分比來定量細(xì)胞鋪展是間接的方法，而沒有定量測量鋪展速率來得直接。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種簡單、快速、準(zhǔn)確、定量地測定細(xì)胞鋪展速率的方法，以取代已有的傳統(tǒng)定量測量方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。將處于懸浮狀態(tài)的貼壁細(xì)胞種植在培養(yǎng)孔或板上，在細(xì)胞貼壁和鋪展過程中，使用成像設(shè)備，捕獲大量細(xì)胞在不同時(shí)間點(diǎn)(Tn)的形貌圖，測量出每個(gè)細(xì)胞的貼壁面積(A)， 并計(jì)算出所有細(xì)胞在每個(gè)時(shí)間段的面積變化速率，此即被定義為細(xì)胞鋪展速率。細(xì)胞鋪展速率計(jì)算公式如下
權(quán)利要求
1. 一種定量測量細(xì)胞鋪展速率的方法，其特征是將處于懸浮狀態(tài)的貼壁細(xì)胞種植在培養(yǎng)孔或板上，在細(xì)胞貼壁和鋪展過程中，使用成像設(shè)備，捕獲細(xì)胞在不同時(shí)間點(diǎn)的形貌圖， 測量出每個(gè)細(xì)胞的貼壁面積，并按下式計(jì)算出細(xì)胞鋪展速率
全文摘要
一種定量測量細(xì)胞鋪展速率的方法，其特征是將處于懸浮狀態(tài)的貼壁細(xì)胞種植在培養(yǎng)孔或板上，在細(xì)胞貼壁和鋪展過程中，使用成像設(shè)備，捕獲細(xì)胞在不同時(shí)間點(diǎn)的形貌圖，測量出每個(gè)細(xì)胞的貼壁面積，并按Rs=(An+1-An)/(Tn+1-Tn)計(jì)算出細(xì)胞鋪展速率。本發(fā)明以細(xì)胞的貼壁面積為標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)細(xì)胞鋪展所用時(shí)間和貼壁面積的變化而計(jì)算出來的鋪展速率，解決了傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，比傳統(tǒng)的細(xì)胞鋪展測量方法要更加精確，且需測量設(shè)備簡單，計(jì)算方法同樣簡單、可行，也易于整合到測量設(shè)備中去。
文檔編號(hào)C12Q1/02GK102253191SQ20111017581
公開日2011年11月23日 申請(qǐng)日期2011年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月28日
發(fā)明者曾芳發(fā), 邵文祥, 陳勇, 黃潔 申請(qǐng)人:南昌大學(xué)