專利名稱：綠茶發(fā)花散茶制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及農(nóng)產(chǎn)品加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及對(duì)傳統(tǒng)綠茶進(jìn)行后發(fā)酵加工而制成綠 茶發(fā)花散茶的制備工藝。所述的花即冠突散囊菌，俗稱金花。
背景技術(shù)：
綠茶，又稱不發(fā)酵茶，是以適宜茶樹新梢為原料，經(jīng)殺青、揉捻、干燥等典型工藝過 程制成的茶葉。其干茶色澤和沖泡后的茶湯、葉底以綠色為主調(diào)，故名。綠茶的特性，較多 的保留了鮮葉內(nèi)的天然物質(zhì)。其中茶多酚咖啡堿保留鮮葉的85%以上，葉綠素保留50%左 右，維生素?fù)p失也較少，從而形成了綠茶“清湯綠葉，滋味收斂性強(qiáng)”的特點(diǎn)。中國(guó)綠茶中， 名品最多，不但香高味長(zhǎng)，品質(zhì)優(yōu)異，且造型獨(dú)特，具有較高的藝術(shù)欣賞價(jià)值，綠茶按其干燥 和殺青方法的不同，一般分為炒青、烘青、曬青和蒸青綠茶，但文獻(xiàn)檢索表明對(duì)傳統(tǒng)綠茶進(jìn) 行后發(fā)酵提高其內(nèi)在品質(zhì)研究還是空白，對(duì)傳統(tǒng)綠茶賦予其茯磚茶的風(fēng)味特點(diǎn)，不但能增 加綠茶的附加值，而且提升了綠茶、黑茶的內(nèi)在品質(zhì)。茶在古時(shí)即被稱為“萬病之藥”。尤其是到了當(dāng)代，脂肪過剩、輻射、環(huán)境污染及壓 力倍增等因素導(dǎo)致許多現(xiàn)代病如高血壓、高血脂、冠心病、糖尿病、高膽固醇血癥、癌癥及心 理障礙等，茯磚茶對(duì)此都有一定療效和預(yù)防作用?，F(xiàn)代科學(xué)研究表明，茯磚茶對(duì)人體的藥理 功能主要是因?yàn)椴枞~含有多種化學(xué)成分和目前已發(fā)現(xiàn)的有數(shù)以百計(jì)微量元素和微生物。特 別是，茯磚茶里獨(dú)有的冠突散囊菌，人們飲茶之后，這些有效成分也隨之被人體所吸收，從 而給人們身體帶來很多益處。通過動(dòng)物試驗(yàn)，人體臨床試驗(yàn)確證茯磚茶在試驗(yàn)動(dòng)物和人體 中同樣具有顯著的降脂減肥和降糖功效，嚴(yán)格的毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)表明，長(zhǎng)期高劑量飲用 茯茶是安全的。中國(guó)西部新疆、內(nèi)蒙、青海等茯磚茶重點(diǎn)消費(fèi)區(qū)進(jìn)行的流行病學(xué)調(diào)查表明， 長(zhǎng)期飲用茯茶對(duì)人體的血脂、血糖、血壓具有良好的調(diào)節(jié)作用，對(duì)體重、體形具有良好的調(diào) 控作用，并可顯著增強(qiáng)人體體質(zhì)、延緩衰老。以前茯磚茶是邊疆少數(shù)民族不可缺少的重要 飲料，現(xiàn)在內(nèi)地也開始流行喝茯磚茶，但由于其原料——黑毛茶較為粗老，特別是含氟量較 高，加上觀感上的特點(diǎn)，內(nèi)地接受程度遠(yuǎn)未普及。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，而提供一種綠茶 發(fā)花散茶制備工藝，在短期內(nèi)用茯磚茶中的金花菌接種實(shí)現(xiàn)綠茶發(fā)花，而且金花普遍茂盛、 色澤鮮艷金黃、顆粒肥大，既繼承了傳統(tǒng)綠茶的觀感特點(diǎn)，又能賦予其茯磚茶特點(diǎn)，提升其 內(nèi)在的品質(zhì)和附加值。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是這種綠茶發(fā)花散茶制備工藝其步驟為1)冠突散囊菌的純化分離；2)冠突散囊菌孢子懸液制備與濃度確定；幻綠茶樣品的處理；4)添加冠突散囊菌懸液；
5)烘茶；6)控制濕度和溫度發(fā)花；7)綠茶發(fā)花散茶的陳化、干燥；8)綠茶發(fā)花散茶的保存。上述技術(shù)方案中，所述的冠突散囊菌的純化分離是用添加10%茶汁的PDA瓊脂 固體培養(yǎng)基培養(yǎng)純化分離；冠突散囊菌孢子懸液制備用添加10%茶汁、20%蔗糖、10% NaCl的PDA液體培養(yǎng) 基制備；孢子懸液濃度確定在IO7-IO8個(gè)/mL ；綠茶樣品的處理控制濕度為左右；金花懸液添加量為0. 5mL/100g ；烘茶條件為密閉65_68°C、1小時(shí)；控制濕度和溫度發(fā)花條件為前兩天濕度80%，溫度^°C，然后濕度70%，溫度 直至金花生長(zhǎng)普遍茂盛，色澤鮮艷金黃，顆粒肥大，菌花香濃郁為止；然后濕度逐漸下
降至60%、溫度逐漸升高至36°C，綠茶陳化7天；散茶40-50°C干燥1天后常溫室內(nèi)保存。PDA指Potato Dextrose Agar的簡(jiǎn)稱中文含義為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。PDA瓊脂固體培養(yǎng)基指將馬鈴薯洗凈去皮，稱取200g，切成小塊放入燒杯中，加適 量蒸餾水，煮沸1小時(shí)，稍冷后用雙層紗布過濾，在濾液中加入15g瓊脂，加熱熔化，最后加 入蔗糖20g，混勻，用量筒定容至IOOOmL,趁熱分裝在三角瓶中，在1. lkg/cm2(12rC )中保 持20分鐘滅菌。PDA液體培養(yǎng)基指按上述培養(yǎng)基配制過程操作，但不添加瓊脂。PDA平板指上述PDA瓊脂固體培養(yǎng)基滅菌結(jié)束后冷卻至50°C左右，在超凈工作臺(tái) 上將培養(yǎng)基倒入事先已經(jīng)滅菌并干燥的培養(yǎng)皿中，待冷卻即為制得的PDA瓊脂固體培養(yǎng)基 平板。改良PDA固體培養(yǎng)基指將馬鈴薯洗凈去皮，稱取200g，切成小塊放入燒杯中，加適 量蒸餾水，煮沸1小時(shí)，稍冷后用雙層紗布過濾，在濾液中加IOOmL制備好的茶汁，然后加入 15g瓊脂，加熱熔化，最后加入蔗糖20g，混勻，用量筒定容至IOOOmL,趁熱分裝在三角瓶中， 在1. lkg/cm2(121°C)中保持20分鐘滅菌。滅菌結(jié)束后冷卻至50°C左右，在超凈工作臺(tái)上 將10%茶汁的PDA瓊脂固體培養(yǎng)基倒入事先已經(jīng)滅菌并干燥的培養(yǎng)皿中，待冷卻即為制得 的10%茶汁的PDA瓊脂固體培養(yǎng)基平板。改良PDA液體培養(yǎng)基是指按上述培養(yǎng)基配制過程操作，但不添加瓊脂。平板梯度稀釋法為將成品茯磚茶樣本用植物微型粉碎機(jī)將樣品粉碎，200目過 篩、65°C干燥2小時(shí)后稱取Ig樣品，定容10mL，即配成1 X W1gZmL的茯磚樣本溶液，從上 述溶液中取ImL定容IOmL配成1 X 10_2g/mL的茯磚樣本溶液，依此配制成濃度1X10_3、 1 X 1(Γ4、1 X l(T5g/mL 的茯磚樣本溶液各 IOmL 備用。取 1 X 1(T3、1 X 1(Γ4、1 X l(T5g/mL 的茯磚 樣本溶液各0. 5mL，用涂布器涂布到冠狀散囊菌快速分離培養(yǎng)基平板上，超凈臺(tái)上吹干15 分鐘左右，倒置平皿，培養(yǎng)，3-4天后挑取優(yōu)勢(shì)菌——金花同樣條件培養(yǎng)直至純化。畫線接種指用滅菌的接種針在超凈臺(tái)中將已經(jīng)生長(zhǎng)好的菌落挑取，在新的固體培 養(yǎng)基平皿畫線分離相應(yīng)微生物。金花菌落指金花菌在10% PDA培養(yǎng)基平板上生長(zhǎng)到一定時(shí)候形成的一個(gè)菌落集 合體，落是指聚集在一起的微生物團(tuán)。
茶汁的制備方法為按照Ig茯磚茶樣本比30mL蒸餾水的比例稱取20g茯磚茶，加 入600mL蒸餾水，100°C水浴2小時(shí)，待稍冷卻后用量筒定容至600mL即為制備好的茶汁。配成川人⑴人川-3、10_4、10_5是指濃度，單位為g/mL。孢子懸夜?jié)舛菼O7-IO8個(gè)/m 1中的“個(gè)”是指單個(gè)的金花菌的子囊孢子。計(jì)數(shù)方 法為用梯度稀釋法涂布在添加10%茶汁的PDA瓊脂固體培養(yǎng)基平板上生長(zhǎng)計(jì)數(shù)或用722型 分光光度計(jì)測(cè)量其OD值，控制在0. 6-0. 8左右，使金花孢子懸液濃度控制在每毫升IO7-IO8 個(gè)金花孢子，上述OD值即吸光值。本發(fā)明能在短期內(nèi)(3-4天)用茯磚茶中的金花菌接種實(shí)現(xiàn)綠茶發(fā)花，而且金花普 遍茂盛，色澤鮮艷金黃，顆粒肥大，既繼承了傳統(tǒng)綠茶的觀感特點(diǎn)，又能賦予其茯磚茶特點(diǎn)、 提升了內(nèi)在品質(zhì)和附加值。為傳統(tǒng)綠茶進(jìn)行后發(fā)酵加工、制成綠茶發(fā)花散茶提供了一種新 的工藝新技術(shù)。


圖1為本發(fā)明分離純化7天后的冠突散囊菌落照片；圖2為本發(fā)明冠突散囊菌孢子懸液培養(yǎng)7天結(jié)果照片；圖3為品牌1綠茶發(fā)花散茶結(jié)果照片；圖4為品牌2綠茶發(fā)花散茶結(jié)果照片。
具體實(shí)施例方式1、金花的分離、純化冠突散囊菌(即金花)從益陽茶廠成品湘益牌茯磚樣本中分離。具體分離和純 化過程為將成品湘益牌茯磚樣本粉碎，用平板梯度稀釋法在添加10%茶汁的PDA平板上
培養(yǎng)直至純化。2、金花的孢子懸液制備與濃度確定挑取純化的金花菌落，接種至添加改良PDA液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)6-7天，使孢 子懸液濃度控制在IO7-IO8個(gè)/mL。3、綠茶樣品的處理用高溫蒸汽蒸10分鐘軟化綠茶，同時(shí)控制濕度為觀％。4、添加金花孢子懸液按照每IOOg茶添加0. 5mL金花孢子懸液的比例，以噴霧的形式添加，充分混勻。5、烘茶添加金花孢子懸液并混勻后的茶在密閉條件下65_68°C、烘1小時(shí)。6、控制濕度和溫度發(fā)花控制濕度和溫度發(fā)花條件為前兩天濕度80%、溫度^°C，然后濕度70%、溫度 直至金花生長(zhǎng)普遍茂盛、色澤鮮艷金黃、顆粒肥大，菌花香濃郁為止。7、綠茶發(fā)花散茶的陳化濕度逐漸下降至60%、溫度逐漸升高至36°C，綠茶陳化7天。8散茶干燥和保存散茶40-50 V干燥1天后，常溫室內(nèi)保存。實(shí)施例1 金花的分離、純化
將成品湘益牌茯磚茶樣本用植物微型粉碎機(jī)粉碎，200目過篩、65°C干燥2小時(shí)后 稱取 Ig 樣品，定容 IOml，配成濃度 10-1、10_2、10_3、10_4、10_5 各 IOmL,取 10_3、10_4、10_5 三個(gè)梯 度各0. 0. 5mL涂布于添加10%茶汁的PDA平板，超凈臺(tái)上吹干，倒置培養(yǎng)3天，挑取金 黃色優(yōu)勢(shì)菌落，畫線至添加10%茶汁的PDA平板上，同樣條件繼續(xù)培養(yǎng)直至純化。分離純化的金花菌落見附圖1。實(shí)施例2 金花的孢子懸液制備挑取純化的金花菌落，接種至添加10%茶汁、20%蔗糖、10% NaCl的PDA液體培養(yǎng) 基中，28°C靜置培養(yǎng)2天，然后升高溫度至30-32°C培養(yǎng)7_10天，，然后^Orpm振蕩培養(yǎng)分 散分生孢子，用雙層紗布過濾，用722型分光光度計(jì)測(cè)得OD值為0. 6-0. 8，即為可用的金花 孢子懸液。金花的孢子懸液培養(yǎng)結(jié)果見附圖2。實(shí)施例3 綠茶散茶發(fā)花的驗(yàn)證分別取市售不同品牌兩種綠茶各lKg，按照具體實(shí)施方式
中2-8步進(jìn)行散茶發(fā)酵。綠茶散茶發(fā)花結(jié)果見附圖3、圖4。
權(quán)利要求
1.一種綠茶發(fā)花散茶制備工藝，其特征在于步驟為1)冠突散囊菌的純化分離；2)冠突散囊菌孢子懸液制備與濃度確定；3)綠茶樣品的處理；4)添加冠突散囊菌懸液；5)烘茶；6)控制濕度和溫度發(fā)花；7)綠茶發(fā)花散茶的陳化、干燥；8)綠茶發(fā)花散茶的保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的綠茶發(fā)花散茶制備工藝，其特征在于所述的冠突散囊菌的 純化分離是用添加10%茶汁的PDA瓊脂固體培養(yǎng)基培養(yǎng)純化分離；
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的綠茶發(fā)花散茶制備工藝，其特征在于冠突散囊菌孢子懸液 制備用添加10%茶汁、20%蔗糖、10% NaCl的PDA液體培養(yǎng)基制備；孢子懸液濃度確定在 IO7-IO8 個(gè) /mL ；
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的綠茶發(fā)花散茶制備工藝，其特征在于綠茶樣品的處理控制 濕度為左右；
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的綠茶發(fā)花散茶制備工藝，其特征在于金花懸液添加量為 0. 5mL/100g ；烘茶條件為密閉65-68°C、l小時(shí)；
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的綠茶發(fā)花散茶制備工藝，其特征在于控制濕度和溫度發(fā)花 條件為前兩天濕度80%，溫度^°C，然后濕度70%，溫度直至金花生長(zhǎng)普遍茂盛， 色澤鮮艷金黃，顆粒肥大，菌花香濃郁為止；然后濕度逐漸下降至60%、溫度逐漸升高至 36°C，綠茶陳化7天；散茶40-50°C干燥1天后常溫室內(nèi)保存。
全文摘要
一種綠茶發(fā)花散茶制備工藝，其步驟為1)冠突散囊菌的純化分離；2)冠突散囊菌孢子懸液制備與濃度確定；3)綠茶樣品的處理；4)添加冠突散囊菌懸液；5)烘茶；6)控制濕度和溫度發(fā)花；7)綠茶發(fā)花散茶的陳化、干燥；8)綠茶發(fā)花散茶的保存。本發(fā)明能在短期內(nèi)用茯磚茶中的金花菌接種實(shí)現(xiàn)綠茶發(fā)花，而且金花普遍茂盛、色澤鮮艷金黃、顆粒肥大，既繼承了傳統(tǒng)綠茶的觀感特點(diǎn)，又能賦予其茯磚茶特點(diǎn)，提升了綠茶的內(nèi)在品質(zhì)和附加值。
文檔編號(hào)A23F3/08GK102084903SQ20101059819
公開日2011年6月8日 申請(qǐng)日期2010年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月21日
發(fā)明者劉石泉, 趙運(yùn)林 申請(qǐng)人:湖南城市學(xué)院